автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Разработка цветообразующих композиций на основе препарата гемоглобина

Московский государственный университет прикладной биотехнологии

На правах рукописи

Ведерникова Ирина Владимировна

РАЗРАБОТКА ЦВЕТООБРАЗУЮЩИХ КОМПОЗИЦИЙ НА ОСНОВЕ ПРЕПАРАТА ГЕМОГЛОБИНА

Специальность 05.18.07 - биотехнология пищевых продуктов (перерабатывающие отрасли АПК)

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата технических наук

Москва 2004

Работа выполнена на кафедре «Химия пищи и биотехнология» Московского

государственного университета прикладной биотехнологии (МГУПБ).

Научный руководитель: доктор технических наук А.И. Жаринов

Официальные оппоненты: доктор технических наук А.В. Устинова

кандидат технических наук Н.С. Данилова

Ведущее предприятие: Научно-производственное объединение молекулярной

биологии «Росбиотех - Моби»

Защита диссертации состоится и^р» 2004 Г. в ^^ часов на заседании

диссертационного совета при Московском государственном университете прикладной биотехнологии по адресу: 109316, Москва, ул. Талалихина, д. 33, Конференц-зал. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке МГУПБ.

Автореферат разослан «^ 2004 г.

Учёный секретарь диссертационного совета Д 212.149.01. к.т.н., проф.

А.Г. Забашта

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы: Массовое использование при производстве мясопродуктов сырья длительного низкотемпературного хранения, с высоким содержанием жировой и соединительной ткани, имеющего признаки PSE, RSE и DFD, а также пищевых гидроколлоидов приводит к «разбавлению» цвета готовой продукции, в связи с чем, мясоперерабатывающие предприятия России вынуждены применять разнообразные колоранты красно-розовой гаммы.

При этом следует отметить, что большая часть препаратов на основе натуральных пигментов не стабильна по составу и свойствам, в связи, с чем их спектральные характеристики претерпевают существенные изменения в процессе технологической обработки сырья и при последующем хранении готовой продукции; применение синтетических красителей ограничивается отсутствием абсолютной гарантии их безопасности для здоровья человека.

В этих условиях актуальным является поиск возможностей использования в этом качестве гемоглобина - основного пигмента крови, которая на протяжении многих десятилетий применяется в различных отраслях пищевой промышленности. Однако многократные попытки получить на ее базе краситель не привели к его распространению на продовольственном рынке, что было обусловлено либо сложностью производства и, как следствие, высокой стоимостью продукции, либо не достаточной устойчивостью к окислению. Анализ научно-технической литературы позволяет сделать вывод о том, что эффективное проявление окрашивающих свойств гемоглобина во многом зависит от валентности железа гем-группы.

Разработка состава комплексного красителя на основе препарата гемоглобина и его применение позволит не только придать готовому продукту необходимую окраску, но обогатить его натуральным белком животного происхождения и органическим железом, усвояемость которого достигает 25-90%, в то время как для неорганического железа ее значение не превышает 1-6% Помимо

этого, способность

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ^ I

БИБЛИОТЕКА 3 С. Петер! 09 Я»

рЩ

например, с денатурированным глобином или желатиной (явление трансгемирования) дает основание предполагать, что данное свойство можно использовать для получения комплексной пищевой добавки гем - соевый белковый препарат, содержащей как полноценный белок, так и органическое желез. Исходя из вышеизложенного, представлялось целесообразным использовать описанные выше особенности пигмента крови при определении путей применения отечественного препарата гемоглобина, созданного по оригинальной технологии НПО «Росбиотех-Моби».

Цели и задачи исследования. Целью диссертации являлась разработка цветообразующих композиций на основе гемоглобина крови убойных животных.

Для реализации поставленной цели решали следующие задачи:

1. изучить состав и свойства отечественного препарата гемоглобина;

2. разработать состав комплексных красителей на основе препарата гемоглобина для мясопродуктов с различным уровнем содержания мышечной ткани и определить их физико-химические свойства;

3. оценить токсикологическую безопасность новых красящих композиций;

4. установить целесообразность применения для оценки уровня токсикологической безопасности пищевых красителей экспресс - методов биотестирования с использованием инфузорий в качестве тест - объектов;

5. изучить возможности создания комплекса гем - соевый белковый препарат с использованием реакции трансгемирования и определить физико-химические характеристики полученных соединений;

6. провести апробацию новых пищевых колорантов в производственных условиях;

7. разработать проект нормативной документации по применению новых пищевых красителей на основе гемоглобина в мясоперерабатывающей промышленности.

Научная новизна работы состоит в том, что:

- разработан состав двух новых пищевых красителей на основе отечественного препарата гемоглобина, которые позволяют придать готовому продукту розово-красную окраску и обеспечивают стабильность спектральных характеристик в процессе хранения;;

- впервые обоснована и доказана принципиальная возможность применения экспресс - методов биотестирования для оценки уровня токсикологической безопасности пищевых красителей;

получены экспериментальные данные, характеризующие токсикологическую безопасность 16 видов пищевых колорантов розово -красной гаммы, и проведено их ранжирование по уровню токсичности;

- установлена возможность создания устойчивого окрашенного комплекса гем - соевый белковый препарат с использованием реакции трансгемирования.

Практическая ценность работы. Оптимизированы параметры и условия применения двух новых пищевых красителей на базе отечественного препарата гемоглобина крови убойных животных при производстве эмульгированных мясопродуктов, различающихся по содержанию сырья, включающего основной пигмент мяса - миоглобин. Подготовлен проект ТИ по применению новых пищевых красителей на основе гемоглобина - Гемо-кол и Гемо-фор - в мясоперерабатывающей промышленности.

Апробация работы. Результаты выполненного исследования были представлены на следующих конференциях: международный конгресс «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (2003г., Москва); международная научная конференция «Живые системы и биологическая безопасность населения» (2004г., Москва).

Публикации. По материалам работы опубликовано 10 работ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методов и объектов исследования, экспериментальной части, результатов и их обсуждения, выводов, списка источников литературы и приложений.

Работа изложена на //^страницах машинописного текста, содержит S' таблиц, 27 рисунков, библиография включает ¿¿¡^наименований работ отечественных и зарубежных авторов. Приложения к диссертации представлены на é страницах.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность темы диссертационной работы.

В первой главе приведена классификация пищевых красителей, сделан аналитический обзор научно-технической и патентной литературы в области пищевых красителей розово-красной гаммы, их состава и свойств.

Рассмотрены строение и свойства молекулы гемоглобина, специфика технологий получения индивидуальных и комплексных колорантов, в которых основным красящим веществом является гемоглобин крови убойных животных.

Освещена проблема безопасности пищевых колорантов и возможность ее контроля с помощью различных методов. На основании литературных данных проведена сравнительная оценка используемых в настоящее время тест-объектов.

В заключение первой главы сформулированы цель и задачи исследования.

Во второй главе «Объекты, методы и организация эксперимента» дана характеристика объектов исследования, описаны условия постановки эксперимента и методы определения изучаемых показателей.

Объектами исследования являлись препарат гемоглобина (НПО «Росбио-тех-Моби», Россия), колоранты на основе гемоглобина Апро Ред («BioFood», Австрия) и Vepro 70 Col P («Виади», Германия), пищевые красители: Понсо 4 R, Тартразин, Красный очаровательный, Солнечный закат, p-каротин, Маслосмо-лы паприки, Аннато (все 7 - «Frutaroma», Израиль), Кольвита («Регис», Авст-

рия), Рекорбин («Швед», Германия), Кармин («Sofral», Франция), Карамель («Тереза - Интер», Россия - Франция), Ферментированный рис («Арника», КНР).

Исследования проводили в соответствии со схемой выполнения эксперимента (рис.1), согласно которой планировалось изучить состав и свойства отечественного базового препарата гемоглобина (производства НПО «Росбиотех»). Основываясь на полученных данных, было предусмотрено осуществить аналити-ко-экспериментальное моделирование, направленное на разработку состава, выбор и оптимизацию соотношений препарата гемоглобина, восстановителей и нитрита натрия с целью разработки композиционного состава колорантов нового типа на базе пигмента крови. На следующих этапах проводилось изучение состава, основных физико-химических характеристик и токсикологической безопасности новых видов комплексных красителей и сравнение их с показателями качества зарубежных аналогов. На основании результатов промышленной апробации был разработан проект нормативной документации по использованию новых отечественных красителей на базе пигмента крови убойных животных при производстве мясопродуктов.

С целью расширения путей технологического использования гемоглобина в пищевой промышленности параллельно проводилось изучение возможности модификации соевых белковых препаратов путем трансгемирования для придания им цвета, характерного для мясопродуктов и тем самым избежать дополнительного введения пищевых красителей.

После обобщения и анализа данных, полученных в ходе исследовательской работы, на заключительном этапе были сформулированы научно-практические рекомендации по использованию препаратов гемоглобина в технологии мясопродуктов.

В ходе исследования величину рН определи потенциометрическим методом. Растворимость препаратов устанавливали путем высушивания осадка, полученного после центрифугирования их 1%-ых растворов, с последующим расчетом количества препарата переходящего в раствор. Оценку цветовых характеристик растворов препаратов и модельных систем проводили методом опреде-

Рисунок 1 - Схема выполнения эксперимента

ления координат цвета в цветовом пространстве, рекомендованным Международной комиссией освещения с использованием программно-технического комплекса на базе спектроколориметра "Спектротон". Спектры поглощения растворов оценивали на спектрофотометре Hitachi EPS 3T (Япония) в диапазоне длин волн 300 - 700 нм с шагом 2 нм в кювете с длиной поглощающего слоя 10 мм.

Определение «общего гемоглобина» осуществляли по спектрофотометри-ческому гемиглобинцианидному методу Д. Драбкина. Буферную емкость определяли путем титрования 1 %-ого раствора исследуемого препарата 5 % - ыми растворами гидроксида натрия и аскорбиновой кислоты.

Оценку уровня токсикологической безопасности красителей осуществляли с помощью двух экспресс - методов биотестирования:

1. ускоренная биологическая оценка кормов, продуктов животноводства и других объектов ветеринарно-санитарного и экологического контроля, разработанная в ВНИИВСГЭ.

2. метод биологической оценки с помощью прибора «БиоЛат»,- разработанного на кафедре «Биохимия» МГУПБ.

Выделение гемина из гемоглобина эритроцитарной массы бычьей крови проводили ацетоновым методом, модифицированным по Т. Asakura и М. Yona-gama и М.М. Рудашевской. Для установления концентрации белка использовали модифицированный микрометод Бредфорда. Электрофорез осуществляли на аппарате фирмы Hoefer Scientific Instruments для вертикального электрофореза в 15%-ном полиакриламидном геле (с использованием 5% концентрирующего геля).

Органолептическую оценку проводили в соответствии с ГОСТ 9959-91.

Повторность опытов трех- и пятикратная, обработку экспериментальных данных проводили методами математической статистики.

За помощь, оказанную в проведении исследования уровня токсикологической безопасности, автор выражает благодарность д.х.н., проф. Э.Г. Розанцеву и Е.Г. Черемных.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Изучение состава и свойств препарата гемоглобина На первом этапе в соответствии со схемой постановки эксперимента было проведено изучение состава и свойств базового препарата гемоглобина (НПО «Росбиотех»), используемого в дальнейших исследованиях, и осуществлена сравнительная оценка их с характеристиками имеющихся на российском продовольственном рынке зарубежных колорантов - аналогов. Полученные данные (табл. 1) свидетельствуют о высоком потенциале отечественного препарата гемоглобина при его возможном использовании в составе комплексных колоран-тов красно-розовой гаммы.

Таблица 1 Основные физико-химические характеристики препарата гемоглобина и

колорантов на основе пигмента крови

/ Колорант РН (т±0,05) Растворимость, % (пгЬЗД Массовая доля «общего гемоглобина», % (т±1,5)

Опыт

Препарат гемоглобина 6,20 86,0 81,0

Контроль

Апро Ред 5,84 45,0 81,0

Vepro 70 Col Р 6,00 75,0 76,0

Разработка состава колорантов для мясопродуктов с различным содержанием мышечной ткани Основываясь на результатах изучения состава и основных физико-химических характеристик препарата гемоглобина (НПО «Росбиотех»), было проведено моделирование, направленное на оптимизацию условий среды, позволяющих максимально реализовать окрашивающий эффект в спектре, отвечающем представлениям потребителя об окраске эмульгированных мясопродуктов.

В связи с этим, осуществляли аналитико-экспериментальные выбор и обоснование концентраций нитрита натрия и редуцирующих веществ в составе многокомпонентного колоранта. При оценке эффективности создаваемых композиций в качестве модельных систем использовали термообработанные гели и эмульсии на основе белковых препаратов как растительного (Unisol), так и жи-

вотного происхождения (Типро 800 и Типро 600), существенно различающихся по значениям коэффициентов светопоглощения и светопреломления.

В ходе исследования оценивали влияние на окрашивающий эффект гемоглобина различных концентраций нитрита натрия и восстановителей, а также присутствия хлорида натрия и нитритной соли.

При этом было выявлено, что использование совместно с нитритом натрия в качестве редуцирующих веществ эриторбиновой и лимонной кислот, эритор-бата натрия, декстрозы, мальтозы, глюкозы, фруктозы, ксилозы и манита не позволяет получить традиционного для мясопродуктов розово-красного окрашивания модельных систем.

В результате обсуждения полученных данных было сделано заключение о том, что, используя в качестве базового препарат гемоглобина (НПО «Росбио-тех»), имеется возможность получить композиции красителей, степень выраженности цветокорректирующих свойств которых можно регулировать не только введением нитрита натрия, аскорбиновой кислоты, нитритной соли, но и пигмента, выделенного из Phytolacca americana, кармина, свекольного сока и красного очаровательного (Е 129).

Анализ экспериментальных данных позволил оптимизировать составы двух композиционных колорантов на основе отечественного препарата гемоглобина: I-ый колорант - Гемо-кол - классические компоненты в оптимизированном соотношении - препарат гемоглобина, нитрит натрия и аскорбиновая кислота - 1 : 0,01 : 0,1 соответственно; II-ая композиция - Гемо-фор - модификация красителя Гемо-кол - препарат гемоглобина, нитрит натрия, аскорбиновая кислота (соотношение 1 : 0,01: 0,1 соответственно) и красный очаровательный (1% к общей массе).

Колорант Гемо-кол при его введении в количестве 0,5% к массе сырья позволяет сформировать устойчивый розово-красный цвет как у гелевых систем (на основе белковых препаратов растительного и животного происхождения), так и у белково-жировых эмульсий, содержащих до 45% жира Краситель Гемо-фор при количественном введении 0,3% к массе сырья придает белково-

жировым эмульсиям (соотношение белковый препарат: жир : вода - от 1: 5 : 5 до 1 : 10 : 10) стабильный розово-красный цвет. При этом полученные модельные системы в отличие от образцов, окрашенных с помощью зарубежных аналоговых колорантов - Апро Ред и Vepro 70 Col P, по спектральным характеристикам не уступают колбасе «Молочная-экстра» высшего сорта, использованной в качестве контроля (табл. 2). Результаты модельных исследований позволяют предполагать, что для практического использования в технологии мясопродуктов краситель Гемо-кол может быть рекомендован для корректировки цвета изделий, в рецептуры которых входит не более 40% сырья, в составе которого отсутствует пигмент мяса - миоглобин (жировая и соединительная ткань, белково-жировые эмульсии, пищевые гидроколлоиды и т.п.); колорант Гемо-фор может быть предназначен для формирования цвета колбас «эконом» - группы, содержащих свыше 50% безмиоглобинового сырья.

Таблица 2 Спектральные характеристики окрашенных белково-жировых эмульсий

J6 п/п Краситель Концентрация, У. Координаты цвета

L (светлота) а (краснота) Ь (желтизна)

контроль опыт

1 Колбаса «Молочная-экстра»* 61,89 15,18 12,88

2 Vepro 70 Col Р 0,3 67,93 5,20 16,00

3 Апро Ред 0,3 77,99 2,32 16,80

4 Гемо-кол 0,3 66,41 6,20 15,74

5 Vepro 70 ColP 0,6 61,45 5,41 16,14

6 Апро Ред 0,9 68,59 4,85 17,94

7 Гемо-кол 0,5 63,47 6,79 14,83

8 Гемо-фор 0,3 68,78 17,98 12,20

* колбаса «Молочная-экстра» высшего сорта-ТУ 9213-011-51-032326-00

Изучение Физико-химических свойств пищевых красителей «Гемо-кол» и «Гемо-фор» С целью изучения возможности использования новых красителей в мясной промышленности представлялось целесообразным провести оценку их основных физико-химических характеристик и сравнить их с показателями, свойственными иностранным аналогам.

Таблица 3 Физико-химические

характеристики пищевых

красителей на основе гемоглобина

Показатель Требования к качеству по нормативному документу2 Красители

Гемо-кол Гемо-фор Апро Ред Vepro 70 ColP

Массовая доля % белка (m± 1,2) не более 80 74,8 72,9 95' 80'

гемоглобина (т±1,5) - 72,5 71,5 80,6 75,5

влаги (т± 1,2) не более 5 4,8 5,0 - 6,0'

нитрита натрия (m±0,01) не более 0,01 0,009 0,009 -

аскорбиновой кислоты (т±0,1) не менее 0,1 0,12 0,12 - .

аскорбината натрия - - . - не более 10'

ацетата натрия - - - - не более 0,1'

золы (т±0,3) не более 5 3,7 З1

Свинец, мг/кг, (ю±0,01) не более 1,0 0,49 менее 0,01' -

Ртуть, мг/кг, (т±0,002) не более 1,0 0,018 менее 0,01'

Афлотоксин В1, мг/кг не допускается не обнаружено -

Количество мезофильных аэробных и факультативно -анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ), КОЕ/г (т±Ю) 5 • 104 165 - -

Бактерии группы кишечных палочек (колиформы) (БГКП), в 0,1 г не допускается не выделены - -

Сульфитрецуцирующие клосгридии, в 0,1 г - -

Патогенные, в т.ч. сальмонеллы, в 25 г не выделены1 .

Растворимость, % (т±3,5) - 82,5 90,5 41,4 71,6

рН (т±0,05) - 6,45 5,7 5,7 6,0

Буферная емкость (ir j ДрН =5-6 - 2,35 1Дб 1.6 2,9

i0,(b) I ДрН = 7-8 - 18,8 1,25 9,25 12,65

1 по данным производителей 5 ТУ 9358-004-55691592-02; СанПиН2 3.2.1078-01

Данные, представленные в табл. 3 свидетельствуют о том, что по общему химическому составу, а также по содержанию тяжелых металлов, патогенных микроорганизмов и плесеней разработанные композиционные колоранты соответствуют требованиям нормативных документов. Они уступают зарубежным препаратам по содержанию «общего гемоглобина», который является основным красящим веществом в составе этих препаратов. Однако, учитывая, что метге-моглобин обладает низкой растворимостью в воде, путем сравнения раствори-мостей колорантов можно прийти к выводу, что, хотя Апро Ред и содержит 80,6 (±1,5) % гемоглобина, в нем велика доля мет - формы, т.к. в воде в раствор переходит только 41,4 (±3,5) % препарата. Растворимость Vepro 70 Col P также невелика - 71,6 (±3,5) %, в то время как новые отечественные красители Гемо-кол и Гемо-фор при содержании 72,5 (±1,5) % и 71,5 (±1,5) % гемоглобина соответственно растворяются на 82,5 (±3,5) % и 90,5 (±3,5) % соответственно, что, по всей видимости, свидетельствует о полном переходе имеющегося в их составе пигмента крови в раствор, а значит и о малой доле мет - формы.

На основании изучения рН и буферной емкости можно сделать вывод, что, хотя препараты колорантов на основе гемоглобина не обладают значительной буферной емкостью в кислых условиях, они могут оказывать стабилизирующее влияние на рН системы при использовании сырья с заниженным уровнем рН (PSE).

Таким образом, можно полагать, что по совокупности химико-технологических и органолептических показателей препараты Гемо-кол и Гемо-фор могут быть использованы для корректировки цвета различных групп эмульгированных мясопродуктов.

Изучение токсикологической безопасности пищевых колорантов

Принимая во внимание жесткость современных медико-биологических требований, предъявляемых к пищевым добавкам, в работе было предусмотрено оценить уровень токсикологической безопасности колорантов Гемо-кол и Гемо-фор в сравнении с наиболее распространенными в мясной промышленности кра-

сителями. Одновременно предполагалось апробировать и обосновать возможность применения для контроля за качеством колорантов экспресс - методов биотестирования.

Для решения поставленных задач в работе параллельно применяли два метода исследования:

1. метод ускоренной биологической оценки кормов, продуктов животноводства и других объектов ветеринарно-санитарного и экологического контроля, разработанный в ВНИИВСГЭ с использованием в качестве тест-объекта Tetrahymem pyriformis;

2. метод биологической оценки с помощью прибора «БиоЛат» с использованием в качестве тест-объекта Paramecium caudatum и Stylonychia mytilus.

В качестве объектов исследования было выбрано 16 коммерческих колорантов, различающихся по классам и по происхождению: синтетические азокрасители (Понсо 4 R, Тартразин, Красный очаровательный и Солнечный закат), кароти-ноиды (|5-каротин, Маслосмолы паприки, Аннато, Кольвита), антоциановый краситель (Рекорбин), антрахиноновый (Кармин), углеводный (Карамель), микробиологический (Ферментированный рис), красители на основе препарата гемоглобина крови убойных животных (Vepro 70 Col Р, Апро Ред, Гемо-кол и Гемо-фор)

Сопоставительный анализ результатов эксперимента подтвердил предположение о целесообразности использования в качестве тест-объектов инфузорий типа Tetrahymena pyriformis (рис 2-4), Paramecium caudatum и Stylonychia mytilus и показал возможность получения с помощью экспресс - методов биотестирования данных, характеризующихся высокой степенью корреляции со значениями уровня токсикологической безопасности, установленными в испытаниях на высших животных (крысах) (табл. 4) Таким образом, метод ускоренной биологической оценки кормов, продуктов животноводства и других объектов ветеринарно-санитарного и экологического контроля, разработанный в ВНИИВСГЭ и метод биологической оценки с помощью прибора «БиоЛат» мо-

Рисунок 2 - Изменение численности ТейаИушепа ругИЪгшв в растворах синтетических красителей

Рисунок 3 - Изменение численности ТейаИушепа ругЦЪгшв в растворах натуральных красителей

Рисунок 4 - Изменение численности ТейаИушепа ругЦЪгшв в растворах красителей на основе гемоглобина

Таблица 4 Сравнительная оценка уровня токсичности пищевых колорантов

V Препа- \ Р»т Тест- \ объект \ Гемо-кол Vepro 70 Col Р Гемо-фор Ап- ро Ред Кармин Реко рбин Ан-иато Тарт-разин Солне чный закат Крас ный очаро ватель ный Понсо 4R Р- каротин Фермен тирован ный рис Коль-вита Масло смолы паприки Кара мель

Летальная концентрация раствора красителя, % J

Parame cium cauda-tum >16,30 >13,60 13,00 15,00 >10,00 8,00 7,00 5,00 5,00 5,00 5,00 4,00 3,30 1,00 1 1,00 0,5

Stylony chía mytilus >16,30 >13,60 >13,00 15,00 >10,00 8,00 8,00 5,00 3,00 2,00 3,00 4,00 0,33 1,00 0,25 0,05

Tetrahy mena pyrifor mis >16,30 >13,00 >13,00 15,00 >10,00 8,00 10,00 7,00 7,00 7,00 5,00 3,00 1,00 1,00 1,00 0,05

Ингибирующая доза красителя для к эыс, вызывающая гибель 50% тест-объектов, мг/кг 1

Расчет ная 31621 12589 19933 19953 "13803 1258 8912 5011 10519 10520 8914 1819 1259 770 770 776

ФАО/ ВОЗ _ _ 2850 _ >2000 >10000 >8000 >1000 > „ 1900

Уровень токсич ности 1 . 1

—

* литературные данные отсутствуют

гут быть рекомендованы для использования в контроле безопасности пищевых красителей.

Обсуждение и систематизация комплекса экспериментальных данных, полученных в опытах in vivo, позволили провести ранжирование 16 видов коло-рантов по уровню токсикологической безопасности:

в группу наиболее опасных красителей вошли Карамель, Маслосмо-лы паприки, Кольвита и Ферментированный рис, широко используемый в технологии мясопродуктов, который вызывает полную гибель тест-объектов при концентрации 0,33 - 1,00% (для различных микроорганизмов);

- умеренной токсичностью обладают Рекорбин, Аннато, Тартразин, Солнечный закат, Красный очаровательный, Понсо 4R и Р -каротин;

- наиболее безопасными являются красители, созданные на основе гемоглобина крови убойных животных - Гемо-кол, Гемо-фор, Апро Ред и Vepro 70 Col Р, при этом явные преимущества имеет отечественный колорант Гемо-кол.

Таким образом, новые отечественные колоранты Гемо-кол и Гемо-фор по уровню токсикологической безопасности превосходят традиционно применяемые в мясной промышленности красители.

Промышленная апробация колорантов

Принимая во внимание позитивные результаты комплексного изучения физико-химических и технологических показателей, а также безопасности красителей Гемо-кол и Гемо-фор, на заключительном этапе работы была проведена промышленная апробация разработанных композиций на заводе ОАО «Элмос», целью которой являлась корректировка норм и условий внесения колорантов при их использовании в технологии различных видов эмульгированных мясопродуктов.

Испытания проводили на вареных колбасах двух рецептур: в состав I-ой («Молочная») входило 42% сырья, не содержащего основной пигмент мяса -миоглобин; в состав II-ой («Сытинская») - 83%. В ходе эксперимента было выработано 20 партий колбас с применением красителей Гемо-кол и Гемо-фор; в качестве контроля использовали колбасные изделия, изготовленные по анало-

гичным рецептурам и технологиям, с применением наиболее распространенного в мясной промышленности препарата - ферментированного риса.

Оценку цвета готовых продуктов производили органолептически, а также путем определения спектральных характеристик (табл. 5), особое внимание уделяя индексам розовости, желтизны и яркости и влиянию на величину их численных значений вида и концентрации колоранта.

Таблица 5 Изменение спектральных характеристик готовой продукции в процессе хранения

Рецептура Колбаса 1 Колбаса 2

Содержание безмиоглобшювого сыры.% 42 83

Коло-рант Вид ФермекгарованяыЙ рис Гемо-кол Фериопярованный рис Гемо-фор

Норма внесения^ 0,040 0,018 0,050 0,19

Период хранения прв4±2*С,суг 1 8 I 8 I 8 1 8

Спектральные характеристики розовость 10,95-12,95 10,69-12,68 11,06 12ДЗ 12,16-16,66 12,47-18,86 15,11 15,82

Желтизна 11,13-11.90 10.77-11,57 11,23 12,57 13,27-13,37 13.19-14.30 12,73 11.50

светлость 66,25-67,85 66.48-6S.01 6767 67,22" 64,27-67,72 62.71-67.60 63,15 62Д8

яркость 35,64-35.77 35,94-36,07 37,53 37,05 33,13-37,58 31,23-37,43 32 ДЗ 31,15

насыщенность 15,61-17,58 15,20-17,17 15,76 16,12 18,07-21,29 18,48-23,67 19,75 19,28

Анализ данных, полученных в результате промышленной апробации красителей Гемо-кол и Гемо-фор, показал, что разработанные композиции пищевых колорантов на основе отечественного препарата гемоглобина обеспечивают существенную и эффективную корректировку розово-красной части спектра эмульгированных мясопродуктов с различным содержанием безмиоглобинового сырья. Установлено, что формирование традиционного цвета эмульгированных мясопродуктов, включающих до 42% безмиоглобинового сырья, может быть достигнуто при введении от 0,016 до 0,028% красителя Гемо-кол, в то время как при использовании ферментированного риса для создания аналогичных спектральных характеристик требуется значительно большая его концентрация (0,04%). Показано, что для окрашивания колбас «эконом» - класса (до 83% без-миоглобинового сырья) целесообразно использовать краситель Гемо-фор в количестве 0,18 - 0,2% к массе сырья. При этом остаточное количество нитрита

натрия в готовой продукции не превышает 1,5 - 2,2 мг%, т.е. вероятность образования нитрозаминов снижается.

С учетом специфики технологического процесса и свойств колорантов их рекомендовано вносить в мясные эмульсии в виде водных растворов на заключительной стадии куттерования перед добавлением аскорбиновой кислоты или аскорбината натрия. Изучение динамики спектральных характеристик готовой продукции в процессе хранения (t = 4 ± 2 °С; табл. 5) позволяют прийти к заключению, что использование красителей Гемо-кол и Гемо-фор обеспечивает сохранение стабильной интенсивности цвета в течение 7-8 суток, а в случае использования полиамидной оболочки - в течение 20 суток.

Модификация соевых белковых препаратов путем трансгемирования

С целью расширения научно-практических представлений о способах технологического использования гемоглобина в пищевой промышленности параллельно с разработкой комплексных красителей в работе проводилось изучение возможности модификации соевых белковых препаратов путем трансгемирова-ния для придания им цвета предпочтительного для использования в технологии мясопродуктов.

В качестве основных объектов исследования использовали соевые белковые изоляты Ех 32 (рекомендуемый к использованию в эмульгированных мясопродуктах) и Supro 595 (применяемый в составе многокомпонентных рассолов), которые характеризуются различными функциональными свойствами (степень дисперсности, растворимость, набухаемость, солеустойчивость, гелеобразующая и эмульсионнаяхпасобности).

При разработке метода в качестве прототипа использовали принципы реакции трансгемирования, с помощью которой Блюменфельдом Л.А. и Чарным A.M. были получены комплексы гема с различными белками, в том числе с желатиной (контроль). Модификацию осуществляли с учетом специфики состава и функционально-технологических свойств соевых белковых препаратов. Для повышения растворимости СБИ дисперсии подвергали предварительной термооб-

работке при 60°С в присутствии восстанавливающих агентов. В раствор вносили гемин (0,03 М) и восстановители в молярных соотношениях гемин : сульфит натрия : метабисульфит натрия - от 1 : 10 : 10 до 1 : 75 : 75 или гемин : дитионит натрия - от 1 : 20 до 1 : 100. Реакционную смесь инкубировали при температуре 45°С и рН 7,8, затем рН снижали до 6-7. Полученные растворы приобретали характерное окрашивание: коричневато-желтое в случае с СБИ и красноватое в случае с желатиной. При лиофилизации растворов были получены субстанции светло-коричневого (СБИ) и красновато-коричневого (желатина) цвета.

Наличие окрашенных белковых комплексов в составе препаратов оценивали несколькими методами. При ультрафильтрации разбавленных растворов через мембраны, задерживающие частицы с молекулярной массой 10 и 20 кДа (молекулярный вес гемина - 616 дальтон), наблюдалось практически полное задерживание мембранами окрашенных комплексов. Белковая фракция фильтрата (до 6,5% от исходного количества в случае с СБИ и до 1,3 % в случае с желатиной) не содержала пигмента, что подтверждалось отсутствием характерного окрашивания, а также наличием лишь следовых количеств ионов железа. Таким образом, можно сделать вывод, что гем-группа взаимодействует с относительно крупномолекулярными фракциями белков, не проникающими через использовавшиеся ультрафильтрационные мембраны.

Электрофорез образцов (рис 5) показал, что молекулы восстановленного гемина движутся на уровне красителя - индикатора фронта буфера, незначительно от него отставая, незначительная часть окрашенных молекул задерживалась на старте, что, по-видимому, связано с образованием нерастворимых соединений при разведении раствора буфером. Другая часть молекул под влиянием электрического поля двигалась в сторону анода вместе с белковой фракцией При этом не наблюдалось свободно движущихся молекул гема (на уровне фронта буфера) Различия в поведение молекул гема при электрофорезе могут быть объяснены лишь наличием взаимодействия между гем-группами и белковыми молекулами

Дорожки 1,4,8: образцы, содержащие комплексы гем-грушы с ¡келатинои.

Дорожки 2, 5,7: образцы, содержащие комплексы гем-группы с ИСБ (2 - с ЕХ 32,5 и 7 - с Бирго

595).

Дорожки 3 и 6: образцы, содержащие восстановленный гемин (без белка). I - нерастворимые пигментированные комплексы, задержавшиеся ва старте. П - окрашенные гем-белковые комплексы.

Ш - свободно движущиеся молекулы гена (на уровне фронта буфера). Рисунок 5 - Электрофореграмма образцов гем-белковых комплексов.

Образование гем-белковых комплексов сопровождалось характерными изменениями спектров поглощения молекул (рис. 6 - 8). Спектры поглощения гемина характеризуются наличием максимумов при 540 и 630 нм. Полоса Скоре находится в районе 400 - 405 нм. Образование комплексов гем-белок приводило к увеличению интенсивности поглощения спектра в областях 530 - 540 нм и 560 - 570 нм. Полоса Скоре сдвигалась в район 440 нм. Таким образом, результаты спектрофотометрических исследований указывают на то, что гемин при выбранных условиях восстанавливается до ферроформы и образует устойчивый комплекс с молекулами соевых белков.

Разработанный метод модификации изолированного соевого белка позволяет получить окрашенный комплекс гем - белок с заданными спектральными характеристиками, обеспечивающими имитацию цвета различных видов мясно-

Рисунок 5 - Спектр поглощения гемина 02,5

2

1,5

I

0,5 0

I - восстановленный комплекс, II - окисленный комплекс Рисунок 7 - Спектр поглощения комплекса гем-желатина

.-А*-1 • 7 \

/АV»

' / > \ \> ' / V \

300 340 380 420 460 500 540 580 620 660 70(

нм

I - восстановленный комплекс, II - окисленный комплекс Рисунок 8 - Спектр поглощения комплекса гем - соевый белковый препарат (8ирго 595)

го сырья, применение которого в мясной промышленности приведет к снижению потребности введения в продукт дополнительных красителей. Однако для того, чтобы рекомендовать подобные соединения к широкому использованию в пищевой промышленности, необходимо провести детальное исследование не только их физико-химических и функционально-технологических свойств, но и безопасности для здоровья человека, которое не входило в задачи данной работы.

Таким образом, была установлена возможность, а также разработан и предложен метод получения с помощью реакции трансгемирования устойчивого окрашенного комплекса гем - соевый белковый препарат.

ВЫВОДЫ И ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Проведено комплексное изучение состава и свойств отечественного препарата гемоглобина позволяющее расширить научно-практические представления о способах его технологического использования в пищевой промышленности как в качестве базового ингредиента комплексных красителей, так и при создании окрашенных комплексов гем - соевый белковый препарат.

1 В результате изучения состава и свойств препарата гемоглобина и аналити-ко-экспериментального моделирования разработаны и обоснованы составы двух видов композиций, предназначенных для корректировки цвета эмульгированных мясопродуктов с различным уровнем содержания мясного (ми-оглобинсодержащего) сырья:

- Гемо-кол (препарат гемоглобина, нитрит натрия и аскорбиновая кислота-соотношение 1 : 0,01:0,1 соответственно)

- Гемо-фор (препарат гемоглобина, нитрит натрия, аскорбиновая кислота (1 : 0,01 : 0,1 соответственно) и красный очаровательный (1% к общей массе),

2 Исследование состава и физико-химических свойств новых отечественных колорантов позволило установить, что по содержанию гемоглобина с низкой долей мет-формы, уровню растворимости, рН и цветокорректирующему

эффекту композиции Гемо-кол и Гемо-фор не уступают зарубежным аналогам.

3. Показана принципиальная возможность использования для определения уровня токсикологической безопасности пищевых красителей экспресс -методов биотестирования с применением в качестве тест - объектов инфузорий типа Tetrahymena pyriformis, Paramecium caudatum и Stylonychia mytilus и получения с их помощью данных, соответствующих результатам испытаний на высших животных.

4. На основании результатов биотестирования установлены уровни токсикологической безопасности 16 видов колорантов и проведено их ранжирование:

- К группе наиболее опасных красителей отнесены Карамель, Маслосмо-лы паприки, Кольвита и Ферментированный рис;

- Умеренной токсичностью обладают Рекорбин, Аннато, Тартразин, Солнечный закат, Красный очаровательный, Понсо 4R и р -каротин;

- Наиболее безопасными являются красители, созданные на основе гемоглобина крови убойных животных - Гемо-кол, Гемо-фор, Апро Ред и Vepro 70 Col P, при этом явные преимущества имеет отечественный ко-лорант Гемо-кол.

5. Разработан и предложен метод получения устойчивого окрашенного комплекса гема с изолированным соевым белком, использование которого обеспечивает снижение потребности введения в продукт дополнительных красителей. Применение этого способа модификации позволяет получать соевый белковый препарат с заданными спектральными характеристиками, имитирующими цвет различных видов мясного сырья.

6. В результат промышленной апробации новых пищевых красителей установлены и обоснованы нормы и условия их применения при производстве эмульгированных колбас: композиция Гемо-кол - от 0,016 до 0,028% к массе сырья и Гемо-фор - от 0,18 до 0,20%, обеспечивающие получение устойчивого розово-красного цвета

7. Разработан проект нормативной документации по применению новых пищевых красителей на основе гемоглобина в мясоперерабатывающей промышленности.

По материалам диссертации опубликованы следующие работы:

1. Жаринов А.И., Ведерникова И.В., Кунташов Е.В., Дубровин Д.А. Оценка функционально-технологических свойств новых видов препаратов животного происхождения // Материалы 4-ой международной научно-технической конференции "Пища. Экология Человек." - М. - 2001 - с 196-197

2. Жаринов А.И., Ведерникова ИВ., Богданов Р.Н. Химико-технологические оценки свойств новых белковых препаратов колорантов красной гаммы // Материалы 2-ой Всероссийской научно-технической конференции "Современные достижения биотехнологии". - Ставрополь - 2002 - с 23-25

3. Черемных Е.Г., Розанцев Э.Г., Жаринов А.И., Ведерникова И.В. Биотестирование пищевых колорантов // Материалы 2-ой Всероссийской научно-технической конференции "Современные достижения биотехнологии". - Ставрополь - 2002 - с 25-27

4. Жаринов А.И., Ведерникова КВ., Финкель А.П. Отечественные колоранты для мясных продуктов // Мясная индустрия, М. - №10 - 2002 - с 13-15

5. Жаринов А.К, Ведерникова И.В. Технология получения комплексных пищевых коло-рантов на базе гемоглобина // Материалы международной научно-практической конференции «Системные технологии продовольственного сырья и пищевых продуктов» // «Вестник.РАСХН» - М. - 2003 - с 26-27

6. Жаринов А.И., Ведерникова И.В. Экспериментальное определение буферной емкости пищевых колорантов на основе гемоглобина // Материалы международной научно-практической конференции «Системные технологии продовольственного сырья и пищевых продуктов» // «Вестник РАСХН» - М. - 2003 - с 27-28

7. Zharinov A.I., Rozancev E.G., Vedernikova I.V. Creation food colours on base hemoglobin // Congress proceedings of II Moscow International Congress "Biotechnology: state of the art and prospects of development". - M. - 2003 - p. 130-131

8. Ведерникова И.В., Назаров А.В. Технология получения новых видов препаратов соевых белков // Сборник докладов 7-ой Международной научной конференции памяти В М. Горбатова «Адаптация к условиям АПК РФ общей методологии отслеживания и интегрирования контроля качества и безопасности мясных продуктов» - М. - 2004 -С138-140

9. Жаринов АИ. Ведерникова КВ., Кузнецова О.А., Фаль А. А. Сравнительная оценка токсикологической безопасности пищевых красителей // Мясная индустрия, М. - №9 -2004-с 38-41

Ю.Ведерникова КВ., Жаринов А.И. К вопросу многофункционального использования отечественного препарата гемоглобина // Материалы 3-ей международной научной конференции «Живые системы и биологическая безопасность населения». - М. - 2004 -с 254-257

Подписано в печать 22.11.2004. Формат 60x84 1/16. Печать лазерная. Усл. печ. л. 1,75. Уч.-изд. л. 1,7. Заказ 11/36. Тираж 100 экз. МГУПБ 109316, Москва, ул. Талалихина. 33. ПБОЮЛ "Митрофанов Р.В."

»2561 1

Введение

1. Обзор научно-технической и патентной литературы

1.1. Пищевые колоранты для мясоперерабатывающей промышленности

1.1.1. Систематизация пищевых колорантов, используемых в пищевой промышленности

1.1.2. Пищевые колоранты красной гаммы растительного происхождения

1.1.3. Пищевые колоранты из сырья животного происхождения

1.1.4. Пищевые красители - продукты жизнедеятельности биосистем

1.1.5. Синтетические пищевые колоранты

1.2. Использование препаратов на основе гемоглобина в качестве пищевого красителя.

1.2.1. Структура и физико-химические свойства гемоглобина

1.2.2. Пищевые красители на основе гемоглобина

1.3. Токсикологическая оценка безопасности пищевых добавок 22 Заключение по главе 1, цели и задачи исследования.

2. Объекты, методы и организация эксперимента

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследований

2.3. Организация эксперимента.

3. Экспериментальная часть.

3.1. Изучение состава и свойств препарата гемоглобина

3.2. Разработка состава колорантов для мясопродуктов с различным уровнем содержания мышечной ткани

3.2.1. Краситель Гемо-кол

3.2.2. Краситель Гемо-фор

3.3. Изучение физико-химических свойств пищевых красителей «Гемо-кол» и «Гемо-фор».

3.4. Изучение токсикологической безопасности пищевых колорантов, используемых в технологии мясопродуктов

3.5. Промышленная апробация колорантов

3.6. Модификация соевых белковых препаратов путем трансгемирования.

В настоящее время на мясоперерабатывающих предприятиях России пищевые красители стали неотъемлемым ингредиентом рецептур практически всех видов мясных изделий.

Использование в колбасном производстве замороженного сырья после длительного хранения, мяса с повышенным содержанием жировой и соединительной ткани, с аномальным развитием автолитических процессов (имеющего признаки PSE, RSE и DFD), мяса после механической дообвалки не позволяет при традиционных способах нитритного посола получить устойчивый розовый цвет у готовых мясных изделий. В то же время в современных рецептурах мясных изделий широко применяются в качестве заменителей сырья и функционально-технологических добавок белковые препараты растительного и животного происхождения, а также пищевые гидроколлоиды типа каррагинанов, крахмалов и т.п., в составе которых отсутствует естественный пигмент мяса - миоглобин.

В связи с этим мясоперерабатывающие предприятия вынуждены осуществлять корректировку цвета продуктов путем введения различных пищевых колорантов.

Следует отметить, что, несмотря на наличие на продовольственном рынке значительного ассортимента красителей красно-розовой гаммы до настоящего времени отсутствуют систематизированные сведения об их поведении в гетерогенных мясных системах, о стабильности и о безопасности для здоровья человека некоторых препаратов. Кроме того, существенный интерес вызывает вопрос создания новых отечественных натуральных колорантов, обладающих необходимыми функционально-технологическими свойствами, которые бы в полной мере отвечали условиям современного технологического процесса, при # условии гарантированной безопасности для потребителя и экономической выгоды для производителя.

ВЫВОДЫ И ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Проведено комплексное изучение состава и свойств отечественного препарата гемоглобина позволяющее расширить научно-практические представления о способах его технологического использования в пищевой промышленности как в качестве базового ингредиента комплексных красителей, так и при создании окрашенных комплексов гем - соевый белковый препарат.

1. В результате изучения состава и свойств препарата гемоглобина и аналитико-экспериментального моделирования разработаны и обоснованы составы двух видов композиций, предназначенных для корректировки цвета эмульгированных мясопродуктов с различным уровнем содержания мясного (миоглобинсодержащего) сырья:

- Гемо-кол (препарат гемоглобина, нитрит натрия и аскорбиновая кислота - соотношение 1 : 0,01 : 0,1 соответственно)

- Гемо-фор (препарат гемоглобина, нитрит натрия, аскорбиновая кислота (1 : 0,01 : 0,1 соответственно) и красный очаровательный (1% к общей массе),

2. Исследование состава и физико-химических свойств новых отечественных колорантов позволило установить, что по содержанию гемоглобина с низкой долей мет-формы, уровню растворимости, рН и цветокорректирующему эффекту композиции Гемо-кол и Гемо-фор не уступают зарубежным аналогам.

3. Показана принципиальная возможность использования для определения уровня токсикологической безопасности пищевых красителей экспресс -методов биотестирования с применением в качестве тест - объектов инфузорий типа Tetrahymena pyriformis, Paramecium caudatum и Stylonychia mytilus и получения с их помощью данных, соответствующих результатам испытаний на высших животных.

4. На основании результатов биотестирования установлены уровни токсикологической безопасности 16 видов колорантов и проведено их ранжирование:

- К группе наиболее опасных красителей отнесены Карамель, Маслосмолы паприки, Кольвита и Ферментированный рис;

- Умеренной токсичностью обладают Рекорбин, Аннато, Тартразин, Солнечный закат, Красный очаровательный, Понсо 4R и р -каротин;

- Наиболее безопасными являются красители, созданные на основе гемоглобина крови убойных животных - Гемо-кол, Гемо-фор, Апро Ред и Vepro 70 Col Р, при этом явные преимущества имеет отечественный колорант Гемо-кол.

5. Разработан и предложен метод получения устойчивого окрашенного комплекса гема с изолированным соевым белком, использование которого обеспечивает снижение потребности введения в продукт дополнительных красителей. Применение этого способа модификации позволяет получать соевый белковый препарат с заданными спектральными характеристиками, имитирующими цвет различных видов мясного сырья.

6. В результате промышленной апробации новых пищевых красителей установлены и обоснованы нормы и условия их применения при производстве эмульгированных колбас: композиция Гемо-кол - от 0,016 до 0,028% к массе сырья и Гемо-фор - от 0,18 до 0,20%, обеспечивающие получение устойчивого розово-красного цвета

7. Разработан проект нормативной документации по применению новых пищевых красителей на основе гемоглобина в мясоперерабатывающей промышленности.

1. Айвазов J1 .Е., Старцева А.И., Цвылев О.П. Метод биотестирования водных сред с использованием одноклеточных водорослей. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 -с 18-21

2. Алексеев В.Н. Количественный анализ. Под ред. д-ра хим. Наук П.К. Агасяна. Издание 4-е перераб. М., "Химия", 1972 504 с

3. Аминов М.С., Даудова Т.Н., Абдуллатипова Д.М., Ахмедов И.Э., Мурадов М.С. Пищевой краситель из плодов боярышника. // 5 международный симпозиум «Экология человека: пищевые технологии и продукты на пороге 21 века»: Тез. докл. Пятигорск, 1997 - с. 31-33

4. Андрианов М.М. Канцерогенные свойства красных пищевых красителей амаранта, пунцового SX пунцового 4R. // Вопросы питания. 1970. - №5 -с 15-17

5. Артемова Е.Н., Иванникова Т.В. Теоретические основы технологии продуктов питания. М.: Колос, 2002 - 420 с

6. Архипова А.Н. Натуральные пищевые красители для мясной и молочной индустрии. // Пищевые ингридиенты. Сырье и добавки. 2001. № 1. - с. 12-13

7. Асатиани B.C. Химия крови М.: «Знание», 1961 -48 с

8. Афанасьева B.C. Красящие вещества столовой свеклы и возможность их практического использования. Автореф.канд. техн. наук. М., 1975 -26 с

9. Афанасьева B.C., Кузнецова Е.Н., Клименко С.В. Стойкий пищевой краситель из столовой свеклы. // Достижения науки и техники. 1993. -№1. - с. 42

10. Афонский С.М. Биохимия животных. М.: «Высшая школа», 1970 -612с

11. Бакулина О. Натуральные красители. // Пищевая промышленность. -1999. №8.-С. 46-47

12. Балаян А.Э., Стом Д.И. Метод биотестирования по обездвиживанию клеток водорослей дюналиеллы. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 -с 21-23

13. Березин Б.Д., Ениколопян Н.С. Металлопорфирины М.: «Наука», 1988 - 159 с

14. Билай В.И. Методы экспериментальной экологии. Киев: Наукова думка, 1982-550 с

15. Патент РФ №2125071, С 09 В 61/00. Штамм Flavobacterium aquatile ВКПН В 7429 - продуцент малинового пищевого пигмента / В.В. Бирюков, М.Б. Битеева и др.

16. Блюменфельд JI.A. Гемоглобин и обратимое присоединение кислорода -М.: «Сов. наука», 1957 139 с

17. Бокучава М.А. и др. Получение богатых витамином Р пищевых красителей / М.А. Бокучава, Г.Н. Пруидзе, В.С Грюнер., Г.Д. Селезнева, Н.И. Подройкина- М.: ЦИНТИпищепром, 1966 50 с

18. Болотов В.М., Комарова Е.В. Основные физико-химические свойства и применение гидрофилизированных каротиноидных красителей растительного сырья России. // Известия ВУЗов. Пищевая промышленность. 1999. -№4 - С. 26-28

19. Болотов В.М., Нечаев Л.П. Пищевые красители. // Пищевые ингредиенты. Сырье и добавки. 2001. - №1. - С. 4-11

20. Болотов В.М., Черепнин В.С, Полухин Н.А., Чернышова С.Н. Модифицированные природные пищевые красители из растительного сырья. // Международная конференция «Научно-технический прогресс в перерабатывающих отраслях АПК»: Тез. докл. М.: МГАПП, 1995 - С. 43

21. Болотов В.М., Черноусова Н.Н. Способ стабилизации окраски пищевого антоцианового красителя плодов черноплодной рябины. // Международная конференция «Прогрессивные технологии и оборудование для пищевой промышленности»: Тез. докл. Воронеж, 1997-С. 19-20

22. Брагинский Л.П., Методологические аспекты токсикологического биотестирования на Daphnia magna Str. и других ветвистоусых ракообразных. // Гидробиологический журнал Т. 36, 2000 г.

23. Бриттон Г. Биохимия природных пигментов: Пер. с англ. М.: Мир, 1986 - 422 с

24. Булгаков В.П., Ходаковская М.В., Козыренко М.М., Лабецкая Н.В., Журавлев Ю.Н. Синтез вторичных метаболитов в устойчивых к цефазолину культурах клеток воробейника и женьшеня. // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т. 32. - №4. - С. 457

25. Булдаков А.С. Пищевые добавки. СПб.: «Ut», 1996. - 240 с.

26. Быховский В.Я. и др. Микробиологический синтез порфиринов / В.Я. Быховский, Н.И. Зайцев, О.В. Полулях. Обзор, информ. М.: ВНИИСЭНТИ, 1985. - 52 с

27. Васильев И.Р., Маторин Д.Н., Венедиктов К.С. Метод биотестирования природных вод по замедленной флуоресценции микроводорослей. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 - с 23-26

28. Веселовский В.А., Веселова Т.В., Дмитриева А.Г. Метод биотестирования по определению флуоресценции водорослей с помощью портативного флуориметра. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 - с 26-29

29. Ветчинкин А.Р. Естественные органические красящие вещества -Саратов: Приволжское книжное издательство, 1966 250с

30. Вредные вещества в промышленности: справочник для химиков, инженеров и врачей. / Ж.И. Абрамов, А.Я. Бройтман, И.Д. Гадаскина и др. под ред. Н.В. Лазарева и Э.Н. Левиной. 7-е изд., перераб. и доп. -Л.: Химия, 1976-Т 1-3

31. Высоцкий В.Г., Тутельян А.В. Методические проблемы исследования качества новых источников пищевых белков. // Гигиена: Обзорная информация. 1987. - Вып. 1.-е 15-17

32. Гагарина А.Б., Евтеева Н.М. Основные направления термоокислительных превращений p-каротина. // Международная конференция «Пряно-ароматические и лекарственные растения: перспективы интродукции и использования»: Тез. докл. Минск, 1999 -с 21-22

33. Гадимова Н.С.К. Технология комплексного красителя и колбас с его применением. Автореф. канд. техн. наук. М., 1993. - 24с

34. Газин М.Ю. Свекольный сок сублимационной сушки в качестве натурального пищевого красителя. // Пищевая промышленность. 1998. - №6. - с. 24

35. Гапочка Л.Д., Белая Т.И., Веселаго И.Н. и др. Закономерности токсического действия загрязняющих веществ на популяции одноклеточных организмов (водорослей и простейших). // Тез. докл. V Всесоюзн. конф. по водной токсикологии. Одесса, 1988 - с23

36. Гауровиц Ф. Химия и функции белков. Пер. с англ. М.: Мир, 1965. -530с

37. Голубев В.Н. О необходимости создания системы, классифицирующей биологически активные пищевые добавки по видам биологической активности. // «Пищевая промышленность». 1998. - № 11 - с 14-16

38. Голубкова Э.Г. Paramecium caudatum как токсикологический тест-объект. // Гидробиологический журнал. 1978 - т 14 - №2 - с 95-99

39. Гродзинский A.M., Гродзинский Д.М. Краткий справочник по физиологии растений Киев: Знание, 1973 - 486с

40. Гроздова А.И., Соколова С.А. Простейшие как тест-объект в прикладных токсикологических исследованиях. //Биотестирование природных и сточных вод. М., 1981 - с 30-36

41. Гурова Н.В.Физико-химические принципы технологий жидких белоксодержащих эмульсионных продуктов для специализированного питания. Автореф. Дис. д-ра техн. наук М., 2003 - 51 с

42. Гыскэ А., Нистряну А, Бодруг М. Phytolacca americana L. в условиях Молдовы. // Международная конференция «Пряно-ароматические и лекарственные растения: перспективы интродукции и использования»: Тез. докл. - Минск, 1999 - с 33-39

43. Данилова Н.С., Янковский С.А. Задачи по органической химии: учеб.пособие М.: Колос, 2000 - 327 с

44. Дикорастущее плодово-ягодное сырье, его технологические свойства. // В.П. Петрова, Н.М. Антонюк, Б.Е. Шпилевой, Л.Г. Цымбапюк Киев: УкрНИИНТИ, 1989 - 52 с

45. Дмитриева А.Г. Метод биотестирования по определению живых и мертвых клеток водорослей с помощью люминесцентной микроскопии. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 -с 85-89

46. Дмитриева А.Г. Флуоресценция и токсикологический контроль. // Тез. докл. V Всесоюзн. конф. по водной токсикологии. Одесса, 1988 - с 3132

47. Долгов В.Л. Методические аспекты и практическое применение ускоренной биологической оценки кормов, продуктов животноводства и других объектов ветеринарно-санитарного и экологического контроля. Автореф. дис. д-ра вет. наук М, 1992 - 41 с

48. Дубодел Н.П., Справник Е.В., Сикорская H.JI. Получение натурального пищевого красителя из томатопродуктов. // Пищевая промышленность. -1995.-№1 С. 16

49. Евдокимов И.А., Василисин С.В., Алиева JI.P., Воротникова Т.С.О пищевых добавках. // Молочная промышленность. 2001. - №1 - С. 23

50. Еремин Ю.Н., Зырьянов В.В. Перспективные продукты питания с бета-каротином // Пищевая промышленность. 1996. -№6. - С. 26-27

51. Жуленко В. Н., Рабинович М.И., Таланов Г.А. Ветеринарная токсикология М.:Колос,2001

52. Журавская Н.К., Гутник Б.Е., Журавская Н.А. Технохимический контроль производства мяса и мясопродуктов. М.: Колос, 1999 - 176 с

53. Журбенко И.З., Крайнюкова А.Н. Метод биотестирования по газообмену и уровню замедленной флуоресценции одноклеточных водорослей. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 -с 30-33

54. Иванова P.M., Самылин А.Ф., Чуркина Л.А. Определение пороговой концентрации токсикантов в воде с помощью водорослей в аппарате Варбурга. // Проблемы водной токсикологии. Петрозаводск, 1989 с 3135

55. Игольникова Л.И. Пищевые добавки в продуктах питания отечественного и импортного производства (значение, применение, производство). Саранск: Саранский кооперативный институт МУПК, 1998-250 с

56. Иржак Л.И. Гемоглобины и их свойства М.: Наука, 1975. - 240 с

57. Кармас Э. Технология свежего мяса. Пер. с англ. М.: Пищевая промышленность, 1979 г-335с

58. Касумов М.А., Гасымов А.А. Полифенольные желтые пищевые красители. // Пищевая промышленность. 1994. - №6. - С. 12

59. Касьянов Г.И., Алешкевич Ю.С. Пути формирования цвета мясных продуктов. // Пищевая промышленность. 1999. -№4. - С. 41

60. Касьянов Г.И., Панюшкин В.Т., Алешкевич Ю.С. Теоретические основы формирования цветовых характеристик мясных паштетов. // Известия ВУЗов. Пищевая промышленность. 2000. - №4. - С. 24-28

61. Кацерикова Н.В., Ильина Н.Г. Природные пигменты в качестве пищевых добавок. II Пищевая промышленность. 1998. -№ 4. - С. 18

62. Кацерикова Н.В., Позняковский В.М. Природные пищевые красители: Обзорная информация Новосибирск: «ЭКОР», 1999. - 60 с

63. Климантова Е.В. Использование каротиноидов в качестве красителей. // Пищевая промышленность. 1996. - №6. - С. 28-29

64. Козлов А.А., Простакова Т.М., Берковский А.Л. Пособие для врачей-лаборантов по методу определения гемоглобина. М.: «Издательский дом «Русский врач», 2001 - 20 с

65. Козыренко М.М. Регуляция биосинтеза эфиров шиконина в клеточной культуре воробейника краснокорневого: Автореф. канд. биол. наук. -Владивосток, 1993 26 с

66. Кононенков И.Е., Ольшанская Н.З. Товароведение пищевых продуктов -М.: "Экономика", 1983-324 с

67. Коржуев П.А. Гемоглобин. Сравнительная физиология и биохимия. М.: Наука, 1964.-287 с

68. Крестович В.Л. Биохимия растений. М.: Высшая школа, 1980. - 356 с

69. Крылова Н.Н., Лясковская Ю.Н. Биохимия мяса. М.: Пищевая промышленность, 1968.-351с

70. Куликов Н.В., Чеботина М.Я. Радиоэкология пресноводных биосистем. -Свердловск, 1988 129 с

71. Курбацкая З.А. Биологические методы обнаружения микотоксинов в пищевых продуктах и кормах. // Оценка загрязненности пищевых продуктов микотоксинами. М., 1985 с 262-278

72. Лебедева И.С., Сытник К.М. Пигменты растительного мира. Киев: Наукова думка, 1986 - 351 с

73. Ленинджер А. Биохимия. Пер с англ. М.: Мир, 1974. - 957 с

74. Лерина И.В. Научное обоснование технологии мясных продуктов на базе электрофизических методов: Автореф. д-ра техн. наук Харьков, 1992. -30с

75. Луцкая Б.П., Славуцкая Н.И. Получение красителей из растительного сырья. М.: ЦНИИТЭИПП, 1977. - 55с

76. Майер Ф. Естественные органические красящие вещества. Пер с нем. -М.: государственное научно-техническое издательство химической литературы, 1940 520 с

77. Майоров B.C., Бегунов Р.Д. Использование отходов виноделия для производства естественных красителей. М.: ЦНТИПП, 1962. - 60 с

78. Максимов В.Н., Нагель X., Остроумов С.А. Экспериментальное изучение реакции проростков Fagopyrum esculentum на загрязнениеводной среды детергентами. // Проблемы экологического мониторинга и моделирования экосистем. 1986 - Т. 9 - с 87-97

79. Маурер Г. Диск-электрофорез. М.: Знание, 1971 - 280с

80. Методика определения общей токсичности кормовой муки, сырья и гранулированных комбикормов с использованием инфузорий стилонихий. М.: Мин. рыбного хозяйства СССР, 1989 - 10 с

81. Методические рекомендации для использования экспресс метода биологической оценки продуктов и кормов. - М.: ВАСХНИЛ, 1990 - 27 с

82. Методические рекомендации по биологической оценке продуктов питания. М.: ВАСХНИЛ, 1973 - 29 с

83. Методические рекомендации по использованию инфузорий Тетрахимена пириформис для биологической оценки продуктов и кормов. М.: ВАСХНИЛ, 1987-9 с

84. Методические рекомендации по использованию инфузорий Тетрахимена пириформис для токсико-биологической оценки сельскохозяйственных продуктов. Киев: ВАСХНИЛ, Южное отделение, 1983 - 8 с

85. Методы биологической оценки продуктов животного происхождения. -М.: ВАСХНИЛ, 1975- Юс

86. Митасева Л.Ф., Глазкова И.В., Нефедова Н.В. Перспективы использования натуральных красителей в производстве вареных колбас. // Мясная индустрия. 2001. - №6. - С. 19-22

87. Мокеева А.Н. Красители из природного сырья для улучшения цвета и качества продуктов питания. // Пищевые ингредиенты. Сырье и добавки. -2001.-№ 1.-С. 18-19

88. Нечаев А.П. и др. Пищевые добавки. / А.П. Нечаев, А.А. Кочетков, А.Н Зайцев. М.: Колос, 2001. - 250 с

89. Новиков A.M., Дмитриева А.Г., Рязанова А.В, Исследование токсичности СиСЬ для Scenedismus quaolricanda с использованием люминесцентных характеристик. // Гидробиологический журнал. 1989 - т 25 - №4 - с 75-79

90. Остроумов С.А., Борисов Е.В., Леонов Л.И. Воздействие сульфонола на культуру водорослей Dunaliella asymmetrica и на проростки Fagopyrum esculentum. // Гидробиологический журнал. 1990 - Т. 26 - №2. - с 96-98

91. Пат. 2102417 Россия, МКИ6 С09 В 61/00, Касьянов Г.И., Авагимов В.Б., Квасенков О.О.; Куб. гос. технол. Ун-т № 96104930/15.

92. Пат. 2169746 Россия, МПК7 С 09 В 61/00 Томилина Е.И., Овсянникова Н.А. №991079006/13

93. Перов С.С. Биохимия белковых веществ М.: «Советская наука», 1951 340 с

94. Петров В.Н. Физиология и патология обмена железа. М.: Знание, 1980 -250 с

95. Петрова В.П. Биохимия дикорастущих плодово-ягодных растений. К.: Вища шкл. Головное изд-во, 1986 - 285 с

96. Пилипенко Л.Н., Кожухарь В.В., Олейник Л.Б., Тюрикова И.С. Разработка пишентосодержащих лечебно-профилактических продуктов.

97. Тез. докл. международной научно-практической конференции

98. Энергоресурсосберегающие технологии переработкисельскохозяйственного сырья» Минск, 1996 - с39-40

99. ЮЗ.Писецкая Н.Ф., Старун Т.В., Журавлева Ю.Н. Культура ткани воробейника краснокорневого. // Тез. докл. международной конференции «Биология культивируемых клеток и биотехнология». -Новосибирск, 1988 с 11

100. Пищевая химия. / А.П. Нечаев, С.Е. Траубенберг, А.А. Кочетков и др.; под ред А.П. Нечаева. СПб.: ГИОРД, 2001 г. - 334 с.

101. Плеханов С.Е., Аль-Сальман И.М., Телитченко М.М. Биотестирование цинка, кадмия, кобальта по физиологическим реакциям клеток харовых водорослей. // Гидробиологический журнал. 1990 - т 26 - №5 - 42-46

102. Погосян B.C., Агаджанян Э.А., Никогосян М.И. и др. Оценка мутагенной активности атмосферного воздуха на основе выявления соматических мутаций у традесканции. // Гигиена и санитария 1986 - №6 - с 84-85

103. Пожариская JI.C., Либерман С.Г., Горбатов В.М. Кровь убойных животных и ее переработка. М.: «Пищевая промышленность», 1971 -424с

104. Попович Н.А., Катаев С.Е., Мельниченко Т.И. К оценке опасности применения синтетических пищевых красителей. // Современные проблемы токсикологии. 2002. - №2. - с 11-13

105. Потапова Н.А., Королевская Т.В. Биотестирование токсичных вод на основе ростовой реакции бактериальных культур. // Методы биоиндикации и биотестирования природных вод. Л., 1987 - с 103-109

106. Применение пищевых добавок. Технические рекомендации. СПб.: ГИОРД, 1999 г. - 80с

107. Проблема белка. / Е.М. Попов, П.Д. Решетов, В.М. Липкин и др.- М.: Наука, 1995-Т 1-3

108. Розанцев Э.Г., Черемных Е.Г., Кузнецова Л.С. Автоматизированный биотест для токсикантов пищевых продуктов. // Мясная индустрия. 2001

109. Розанцев Э.Г. и др. Совре*менные аспекты формирования цвета мясопродуктов. Обзор информации/М. ЦНИИПЭИ мясмолпром., 1985

110. Россивал Л., Энгст Р., Соколай А. Посторонние вещества и пищевые добавки в продуктах: Пер. с нем. М.: Легкая промышленность, 1982. -247 с

111. Рудашевская М.М. Лабораторное дело. М., 1970 - 589 с

112. Савинов Б.Г. Каротин (провитамин А) и получение его препаратов. Киев: АН УкрССР, 1948 210 с

113. Саксонов М.Н., Атавина Т.Г. Метод биотестирования по интенсивности флуоресценции хлорофилла клетки нителлы. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 - с 94-95

114. Саксонов М.И., Трипузов Г.В., Стом Д.И. метод биотестирования по выходу электронов из клеток элодеи. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 - с 96-97

115. СанПиН 2.3.2.1078-01 Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. М.: Минздрав России, 2002 -168 с

116. СанПиН 2.3.2.1293 03 Гигиенические требования по применению пищевых добавок. - М.: Минздрав России, 2003 - 416 с

117. Сапожникова Е.Н. Способы получения красного пищевого красителя с подкисляющими свойствами. // Тез. докл. международной конференции «Научно-технический прогресс в перерабатывающих отраслях АПК» -М.: МГАПП, 1995 с 143-144

118. Сарафанова JI.A. Пищевые добавки: энциклопедия. СПб: ГИОРД, 2003 -688 с

119. Сарафанова J1.A., Васекина И.В. Синтетические пищевые красители: многообразие товарных форм для удобства использования. // Пищевые ингредиенты. Сырье и добавки. 2001. - №1. - с 22-23

120. Серегина О.Б. Леонидов Н.Б. Простейшие как альтернативный биологический тест-объект в фармации. // Фармация. №4, 2003

121. Скорикова Ю.Г. Получение антоциановых красителей из отходов сокового производства. М.: АгроНИИТЭИПП, 1997 - 56 с

122. Смирнова Е.В., Викторова Г.К., Метелкина Н.М., Береснева Е.А. Пищевые ароматизаторы и красители. // Пищевая промышленность. -1998. -№6.-с 8-9

123. Смирнова С.Н. Разработка технологии микробиологического синтеза пигмента. Автореф. канд. техн. наук М., 2000 - 23 с

124. Современные аспекты формирования цвета мясопродуктов: Обзорная информация. // Э.Г. Розанцев, И.А. Рогов, Г.В. Гуринович, A.M. Белоус, А.Т. Иванов М.: ЦНИИТЭИмясомолпром, 1985 - 56 с

125. Соколов А.А. Физико-химические и биохимические основы технологии мясопродуктов.- М.: Пищевая промышленность, 1965 490 с

126. Справочное руководство по применению ионоселективных электродов. Пер с англ. М.: Мир, 1986 - 231 с

127. Стародуб Н.Ф., Назаренко В.И. Гетерогенная система гемоглобина: структура, свойства, синтез, биологическая роль. Киев: Наукова думка, 1987-200 с

128. Супонина Т.А, Кочнева С.В., Касымакунова A.M. Получение порошкообразного пищевого красителя из выжимок ягод черной смородины. // Известия ВУЗов. Пищевая промышленность. 1999. - №2-3.-с 47-48

129. Терешина В.М., Феофилова Е.П., Меморская А.С., Вакулова Л.А., Терентьев П.Б. Влияние азинов на образование ликопина мицелиальным грибом Blakeslea trispora. // Прикладная биохимия и микробиология. -1996.-т. 32-34-с 427-429

130. Трухалева Н.А. Шток-роза ленкоранская (Alcea lenroranica Ilin.) как источник получения биологически активных полисахаридов: Автореф. канд. техн. наук-Л., 1973. -25 с

131. Туричев В. Тартразин или бета-каротин? Выбор между опасным и полезным оставлен за предприятиями. // Пищевая промышленность. -2002.-№5.-с 58

132. Тутельян В.А., Высоцкий В.Г. Некоторые проблемы оценки и обеспечения безопасности новых источников пищевого белка. // Вопросы питания. 1989 - №3 - с 4-9

133. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман И. Основы биохимии: Пер. с англ. М.: «Мир», 1981 - Т. 1-3

134. Устинова А.В., Тимошенко Н.В. Продукты для детскогопитания на основе мясного сырья Учебное пособие - М.: ВНИИМП, 2003 - 438 с

135. Федорова Г.А. Естественные красители в плодово-ягодном сырье. М.: ЦИНТИпищепром, 1965 - 60 с

136. Филиппович Ю.Б. Биохимия белка и нуклеиновых кислот М.: Просвещение, 1978 - 192 с

137. Флеров Б.А. Эколого-физиологические аспекты токсикологии пресноводных животных. Л.: Наука, 1989 - 140 с.

138. Харламов О.А., Кафка Б.В. Натуральные пищевые красители. М.: Пищевая промышленность, 1979 - 178 с

139. Хиль Г.Н., Пархомчук М.А. Красители для пищевых производств. М.: АгроНИИТЭИПП, 1989 - 60 с

140. Химия биологически активных соединений. Под. ред. Преображенского Н.А., Евстигнеевой Р. М.: Химия, 1976. - 250 с

141. Цвылев О.П., Ткаченко В.Н. Использование одноклеточных водорослей для биологического анализа токсичности загрязняющих веществ. // Биотестирование природных и сточных вод. М., 1981 с 17-30

142. Чхеидзе З.К. Бузина как сырье для красного красителя: Техническая информация. / З.К.Чхеидзе, М.П. Каджая, О. Кабаладзе Тбилиси, 1972 -45 с

143. Шершнева Е.В., Рудаков О.Б., Болотов В.М. Влияние различных факторов на кинетику термоокисления каротиноидов из корнеплодов моркови // Известия ВУЗов. Пищевая Технология. 1998. - №4. - с 41-43

144. Шеховцева Т. Н. Бологические методы анализа. //Соросовский образовательный журнал №11, 2000

145. Штина Э.А. Водоросли как экологические индикаторы. // Гидробиологический журнал. -1990 т 26 - №5 - с 93-94

146. Шуляк В.В., Доброскок Л.П., Болухова М.Е. Технологические аспекты влияния различных добавок на сохранность красящих пигментов свеклы. // Известия ВУЗов. Пищевая технология. 2001. - №4 - с 26-31

147. Этнил С.Н., Лахонина Г.М., Ирлина И.С. Изучение связей между параметрами токсичности химических веществ для инфузорий Tetrahimena pyriformis и животных. // Гигиена и санитария. 1987 - №9 -с 80-82

148. Юрин В.М., Плакс А.В., Кудрашов А.П. Метод биотестирования по данным электрической реакции клеток харовых водорослей. // Методы биотестирования вод: Сб.ст. Черноголовка 1988 -с 33-37

149. Alvarez P., Blanco М.А. Reliability of the sensory analysis data of a panel of tasters // Journal of the Science of Food and Agriculture. 2000. - №8. - p 409-418

150. Angkak ist Zulassungsbedurfig: Fermentierter keis wird als. Farbstoft eingestuft / Bertling Lutz // Fleischwints chast. 2000. - №3 - p34

151. Asakura Т., YonagamaM.J. Biochem. (Tokyo). 1964, v. 55, p. 9.

152. A 32 L 1/27 / Color-stabilized carotenoid pigment compositions and foods colored therewith having increased resistance to oxidative color fading / Tood Paul H.; Halamazoo Holdings; Inc. -№525342; 16.05.90; 07.01.92

153. Bloukas J.G., Arvanitoyannis I.S., Siopi A.A. Effect of natural colourants and nitrites on colour attributes of frankfurters // Meat Science. 1999. - V. 52 -№3.-p. 257-266

154. Brogdon W.G., Dickinson C.M. Anal. Biochem. 1979. v. 96, p. 21-23.

155. Chu T.C. J. Biol. Chem. 1955, v. 212, p. 1.

156. Clarke J.T. Annals N. Y. Acad. Sci. 1964, 121,428. Цит. по Maypep Г. Диск-элекгрофорез. M. 1971.

157. Clifford M.N. Review: Anthocyanins nature, occurrence and dietary burden. // Journal of the Science of Food and Agriculture. - 2000. - №8 - p 1063-1072

158. Devlin J., David T.J. Tartrazine in atopic eczema. //Archives of Disease in Childhood. 1992. - № 6 - p. 709-711

159. Eskin N.A.M., Henderson H.M., Townsend R.J. Biochemistry of foods New York and London: Academic Press Inc., 1971 - 240c

160. Evaluation of certain food additives: 24-th report of the Joint FAO/WHO Expert Committee of Food Additives. —Geneva: WHO, 1980. —48 p

161. Evaluation of certain food additives: 27-th report of the Joint FAO/WHO Expert Committee of Food Additives. —Geneva: WHO, 1983

162. Fernandez-Lopez J., Perez-Alvarez J.A., Sayas-Barbera E., Lopez-Santavena F. Effect of paprika (Capsicum annum) on color of Spanish-type sausages during the resting stage. // Journal of Food Science. 2002. - V. 67 - №6 -p2410-2414

163. Giusti M. Monica, Rodriquez Saona Luis E., Baggett James R., Reed Gary L., Durst Robert W., Wrolstad Ronald E. Anthocyanin pigment composition of red radish cultivars as potential food colorants. // J. Food Sci. - 1998. - V. 63 - №2-p 219-224

164. Gross J. Pigments in fruits. London: Academic Press Inc., 1987 306 с

165. Heinrich H.C., Cable E.E., Kuglu G. // Europ. J. clin . Invest. 1979 - Vol. 1 -P. 321 -332

166. Maslowska J., Janiak J. Spectrophotometric and polarographic studies on Azorubine as a food dye. // Deutsche Lebensmittel Rundschau. - 2000. - V. 96 - №10 -p 369-372

167. Natural red sunflower anthocyanin colorant with naturally stabilized color qualities and the process of making. Пат. 6132791 США, МПК7 A 23 L 1/272 Barkley Seed, Inc., Fox Gregory J.

168. Neuman J., Elian R., Nanum H., Shaked P., Creter D. The danger of «jellow dyes» (tartrazine) to allergic subjects. // Clin. Allergy. 1987. - №1 - p 650654

169. Owen R. Fennema Food chemistry. New York - Basel - Hong-Kong: Marcel Dekker Inc., 1995 - p. 680

170. Ozmianski Jan, Lee Chang Inhibitory effect of phenolics in carotene bleaching in vegetables // J. Agr. and Food Chem V.38. - №3 - p. 688-690

171. Schairer L.A., Soutkulis R.C., Tempel N.R. // Environ. Mutagenes 1971 - V 3 - P 303-304

172. Sinha R.K., Gautam D., Zimmerman Т., McLeod T.G., Nielsen F.H. Studies on the effect on ponceau 4R on 59Fe retention in rats and on ponceau 4R-iron interaction //Journal Food Sci. and Technol. 1986. - №6 - p. 786 - 790

173. Subagio A., Morita N. Instability of carotenoids is a reason for promotion on lipid oxidation. //Food Research International. 2001. - №34. - p 183-188

174. Summary of evaluations performed by the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA) FAO and WHO, 1994

175. Toxicological evaluation of some food colours, emulsifiers, stabilizers, anti-caking agents and certain other substances. Eighteenth Report of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, Wld Hlth Org. techn. Rep. Ser., 1974, No. 557

176. Toxicological evaluation of some food colours, emulsifiers, stabilizers, anti-caking agents and certain other substances. Twenty-second Report of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, Geneva, 1978, WHO Technical Report Series No. 631

177. Weng X.C., Xiang G.Q., Jiang A.L. Antioxidant properties of components extracted from puccoon (Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc.) // Food Chemistry. 2000. - №69 - p 143-146

178. Wu Zhu-ging Jishou daxue xuebao. Ziran kexue ban J. Jishou Univ. Natur. Sci. Ed. - 2000. - V. 21 - № 1 - p. 82-83