автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.04, диссертация на тему:Разработка технологии кормовых рыбных автолизатов с использованием ферментного комплекса внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна

10-6 26^

На правах рукописи

Костюрина Кристина Валерьевна

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ КОРМОВЫХ РЫБНЫХ АВТОЛИЗАТОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ФЕРМЕНТНОГО КОМПЛЕКСА ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ ПРОМЫСЛОВЫХ РЫБ ВОЛГО-КАСПИЙСКОГО БАССЕЙНА

05.18.04 - Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Москва-2010

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Астраханский государственный технический университет» (ФГОУ ВПО «АГТУ»)

Научный руководитель: кандидат технических наук, доцент

Цибизова Мария Евгеньевна

Официальные оппоненты: доктор технических наук, доцент

Боева Нэля Петровна

кандидат технических наук, доцент Лысова Альбина Сергеевна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Кубанский государственный

технологический университет»

Защита диссертации состоится <сЛ5» ноября 2010 г. в 10:00 на заседании диссертационного совета Д 307.004.03 при ФГУП «Всероссийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии» (ФГУП «ВНИ-РО») по адресу: 107140, г. Москва, ул. Верхняя Красносельская, дом 17.

Факс: (499) 264-91-87; e-mail: fishinu@vniro.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУП «Всероссийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии» (ФГУП ВНИРО)

Автореферат разослан октября 2010 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 307.004.03,

кандидат технических наук

Татарников В.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Концепция развития рыбного хозяйства Российской Федерации на период до 2020 г., одобренная распоряжением Правительства Российской Федерации, предусматривает достижение устойчивого функционирования рыбохозяйственного комплекса страны на основе сохранения, воспроизводства и рационального использования водных биологических ресурсов, развития аква и марикультуры.

В приоритетных направлениях научно-технического развития рыбной отрасли в области рационального природопользования отражена разработка комплексных ресурсосберегающих технологий переработки гидробионтов промыслового значения с утилизацией отходов от их разделки, максимального использования нетрадиционных объектов, в том числе малорентабельного рыбного сырья, переработка которого на пищевые цели в свете особенностей технологических характеристик не является экономически выгодной (Абрамова JI.C., Андрусенко П.И., Кузнецов Ю.А., Мамонтов Ю.П.).

Рыбный белок является неотъемлемой частью кормовых композиций, значимость которого обусловлена высокой биологической и физиологической ценностью (Боева Н.П., Девяткин А.И., Егоров И., Исаев В.А., Ковров Г.В., Лемешева М.М., Мосолов Н.Д., Мухин В.А., Петреченко Л.К., Рубан Б.В., Свеженцов А.И.).

Практические аспекты производства рыбной муки, связанные с проблемами ее получения на рыбопромысловых судах и береговых предприятиях из-за повышенных экономических затрат на топливо, наличия рыбомучных установок большой производительности, антропогенного воздействия данного производства на окружающую среду, требуют поиска новых технологических решений переработки нерентабельного сырья и отходов рыбоперерабатывающей промышленности (Аббакумов В.Г., Боева Н.П., Исаев В. А.).

Вопросами исследования и применения ферментативных технологий в переработке водных биологических ресурсов занимались многие ученые: Антипова Л.В., Боева Н.П, Борисочкина Л.И., Долганова Н.В., Касьянов Г.И., Кизеветгер И.В., Константинова Л.И., Куцакова Е.А., Лысова A.C., Мезенова О.Я., Мукатова

М.Д., Мухин В. А., Пивненко Т.Н., Поверин А.Д., Некрасова Г.Т., Новикова М.В., Разумовская Р.Г., Рехина Н.И., Слуцкая Т.Н., Черногорцев А.П., Шендерюк В.И., Adams, Adler-Nissen, Cohen, Cruston, Hassan, Rutman, Ushida и многие другие. В работах этих ученых показано, что наиболее мягким и естественным способом деструкции рыбного белка является ферментативный гидролиз, совершенствование технологии которого развивается не только по пути максимального сохранения в гидролизатах нативных свойств белковых, липидных и других биологически активных компонентов, но и повышение их доступности за счет обоснования необходимой степени деструкции белка.

Принимая во внимание необходимость комплексного использования маломерного рыбного сырья, а также отходов от переработки промысловых объектов актуальным представляется разработка ресурсосберегающей технологии кормовых автолизатов повышенной биологической и физиологической ценности, и обладающих максимальной доступностью для желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных и птиц.

Цель работы заключалась в разработке технологии кормовых автолизатов из маломерного рыбного сырья и использовании в качестве оптимизирующего фактора жидкого комплекса протеолитических ферментов с определенной протеоли-тической активностью, полученного из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задами:

1. Установить влияние сезона вылова и замораживания на протеолитиче-скую активность, химический состав маломерного рыбного сырья и внутренних органов, и на степень гистологических изменений мышечной ткани рыбы;

2. Разработать и обосновать рациональные режимы и параметры получения жидкого комплекса протеолитических ферментов (ЖКПФ) из внутренних органов промысловых рыб и изучить протеолитическую активность полученного ЖКПФ;

3. Обосновать рациональные параметры получения рыбных автолизатов из маломерного сырья Волго-Каспийского бассейна на основе автопротеолиза с использованием ЖКПФ;

4. Разработать математическую модель и оптимизировать процесс автолиза маломерного рыбного сырья ферментным комплексом из внутренних органов рыб с определенной протеолитической активностью;

5. Изучить зависимость молекулярно-массового распределения азотсодержащих фракций рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ от степени расщепления белка и обосновать направления его использования;

6. Наработать опытные партии жидкого комплекса протеолитических ферментов и рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ, исследовать их энергетическую, биологическую ценность и токсикологическую безопасность;

7. Провести биологические испытания полученных продуктов в составе полнорационных кормов для сельскохозяйственных птиц яичного и мясного направления;

8. Рассчитать экономическую эффективность от внедрения разработанной технологии получения рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья с использованием ЖКПФ;

9. Разработать нормативную документацию на сухой белковый автолизат из рыбного сырья (РГ-ОПТИМА) и комплекс протеолитических ферментов из внутренних органов рыбного сырья, сухой (СКПФ).

Научная новизна работы.

- Выявлена зависимость изменения протеолитической активности сырья от сезона вылова и влияние замораживания на степень гистологических изменений мышечной ткани и протеолитическую активность маломерного рыбного сырья и внутренних органов промысловых рыб.

- Установлено влияние ЖКПФ с определенной протеолитической активностью на интенсивность процесса автопротеолиза маломерного рыбного сырья, позволившее оптимизировать технологические параметры получения рыбного авто-лизата.

- Установлена зависимость молекулярно-массового распределения азотсодержащих фракций рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ от степени де-

загрегации рыбного белка в них, регламентирующая направления его использования.

Практическая значимость работы. Разработана технология кормовых рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья с использованием ЖКПФ, полученного из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна.

Разработаны и утверждены нормативные документы на опытные партии сухого белкового автолизата из рыбного сырья (РГ-ОПТИМА) и комплекс протео-литических ферментов из внутренних органов рыбного сырья, сухой (СКПФ).

Новизна технологических решений подтверждена патентом РФ № 2343710 на «Способ получения автолизата из рыбного сырья». На заявку № 2009125406/035316 «Полнорационный корм для птицеводства» получен приоритет от 7.08.09.

Полученные автолизаты апробированы в производственных условиях в ООО «Агрокомплекс» (г. Камызяк Астраханской области), ГП АО «Сельхозпредприятие «Птицефабрика «Бэровская» (с Икряное, Астраханской области).

Основные положения, выносимые на защиту:

• обоснование технологических параметров получения жидкого комплекса протеолитических ферментов из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна;

• разработанные технологические режимы получения рыбного автолизата с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов;

• изучение биологической ценности рыбного автолизата с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов;

• применение полученных рыбных автолизатов в составе кормовых смесей для птиц яичного и мясного направлений.

Апробация работы. Основные результаты исследований представлялись на Международных, Всероссийских симпозиумах и конференциях, в том числе: IV МНМК студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (Москва 2005), ВНК «Инновационные технологии в управлении, образовании, промышленности» (Астрахань, 2007), Международного симпо-

6

зиума «Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата» (Астрахань, 2007), МНПК «Состояние, охрана, воспроизводство и устойчивое использование биологических ресурсов внутренних водоемов» (Волгоград, 2007), МНПК «Перспективные нано- и биотехнологии в производстве продуктов функционального назначения» (Краснодар, 2007), МНПС семинара молодых ученых и студентов «Природные ресурсы Каспийского моря и устойчивое развитие прибрежных территорий» (Астрахань, 2007), Конференции молодых ученых «Каспийский инновационный форум» (Астрахань, 2009), МНПК ФГОУ ВПО «АГТУ» (Астрахань, 2006- 2009 гг.), заседаниях кафедры «Пищевая биотехнология и технология продуктов питания» (2006-2010).

Материалы работы отражены в инновационном проекте, представленном для участия в МНТК «ИнноКаспий - 2009», аккредитованной по программе «УМНИК», где был получен диплом победителя с финансированием проекта (договор № 7066 Р/96-12).

Публикации. Основное содержание диссертационной работы опубликовано в 13 работах, в том числе 1 патенте РФ на изобретение, и в 4 изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов, списка литературы, включающего 267 источников отечественных и зарубежных авторов, в том числе 42 зарубежных авторов. Работа изложена на 164 страницах основного текста, содержит 50 таблиц, 11 рисунков. В приложениях представлены нормативная документация, акты производственных испытаний, акты выработки опытных партий рыбного автолизата с использованием ЖКПФ.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность темы диссертационной работы, сформулированы научная новизна, положения, выносимые на защиту.

В первой главе «Анализ литературных и патентных источников по способам получения гидролизатов» проведен критический анализ научной, технической и патентной литературы в области получения гвдролизатов. Отражена роль ферментов в технологии переработки гидробионтов и аспекты использова-

7

ния рыбных гидролизатов в кормопроизводстве. Сформулированы цель и задачи исследования.

Во второй главе «Объекты и методы исследования» представлена программно-целевая схема проведения исследований (рис.1), приведена характеристика объектов и методов исследования, описана постановка экспериментов.

В качестве объектов исследования использованы маломерное рыбное сырье Волго-Каспийского бассейна: густера (Blicca bjoerkna (linne)), синец (Abramis bal-lerus (Linne), чехонь (Pelecus cultralus), тарань (Rulilus heckelii) осеннего и весеннего вылова, отходы от разделки промысловых рыб - внутренние органы карася, сазана, щуки, сома, судака осеннего и весеннего вылова, жидкий комплекс проте-олитических ферментов и рыбные автолизаты, полученные с использованием ЖКПФ, кормовые смеси, содержащие автолизаты.

В работе использовали стандартные и общепринятые в рыбной отрасли химические, физико-химические, органолептические, микробиологические и токсикологические методы. Определение ФТА осуществляли в модификации Черно-горцева (Черногорцев, 1973); ПА определяли модифицированным методом Ансо-на (Черногорцев, 1973; Полыгалина, 2003).

Молекулярно-массовое распределение азотсодержащих фракций рыбных автоли-затов определяли методом молекулярных сит на гель-хроматографе с применением колонок с сефадексом G-25,75 (Досон, 1991). Статистическую обработку данных проводили при помощи программного обеспечения Windows Microsoft Office 2007, программного пакета Statistica 6.0.

В третьей главе «Результаты исследования и их обсуждение» в разделе «Изучение общего химического состава и протеолитической активности сырья Волго-Каспийского бассейна» на основании собственных результатов и литературных данных проведена оценка технологического потенциала маломерного рыбного сырья, которое по содержанию белка и жира с учетом БВК можно отнести к белковому сред нежирному, что позволяет использовать его для производства пищевой продукции, но малые размеры и невысокий выход съедобной части, нестабильная активность ферментативной системы сырья, особенности

8

Рис. 1 - Программно-целевая схема проведения исследований

морфологической структуры рекомендуют использовать данное сырье на производство кормового продукции (Сафронова, 2004).

Проведенное нами изучение влияния замораживания на гистологические изменения мышечной ткани маломерного сырья и на протеолитическую активность объектов исследования показало, что продолжительное холодильное хранение (до 6 месяцев) оказывает влияние не только на гистологическую структуру мышечной

9

ткани, приводя к разрушению ее структуры, но и активизирует деятельность мышечных ферментов и ферментов желудочно-кишечного тракта рыбы после размораживания (табл. 1).

Таблица 1

Влияние замораживания на активность ферментных систем рыбного сырья

Виды сырья Показатели, характеризующие активность ферментной системы сырья

Весеннего вылова Осеннего вылова

Ж/Б Протеолитическая активность, ед/г Ж/Б _ Протеолитическая активность, ед/г

Рыба-сырец После размораживания Рыба-сырец После размораживания

Маломерное сырье

Синец 0,12 1,11±0,04 1,18±0,06 0,22 0,96±0,04 1,15±0,06

Чехонь 0,12 1,25±0,03 1,56±0,05 0,21 0,23 1,18±0,04 1,Т±0,05 1,27±0,06 Г,25±0,06 .......

Густера 0,14 1,19±0,05 1,56±0,06

Тарань 0,16 1,27±0,06 1,65±0,07 0,26 1,19±0,06 1,37±0,07

Внутренние органы промыслового сырья

Сазан 0,32 1,76±0,1 2,16±0,1 0,47 1,62±0,2 2,07±0,08

Щука 0,7 1,14±0,09 1,19±0,09 0,57 1,1 ±0,08 1,18±0,03

Сом 0,32 1,95±0,07 2,28±0,6 0,33 1,73±0,2 2,15±0,08

Карась 0,15 1,37±0,08 1,65±0.2 0,22 1,28±0,1 1,57±0,08

Судак 0,32 1ДЗ±0,09 1,21±0,09 0,86 1,2±0,08 1,19±0,3

Согласно полученным данным (табл. 1) максимальная активность нейтрального комплекса протеаз маломерного сырья и внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна как до, так и после холодильного консервирования, характерна для сырья в весенний период и превосходит осенний в среднем на 14-20%. Таким образом, варьирование химического состава и протеолитиче-ской активности маломерного сырья и внутренних органов промысловых рыб в зависимости от сезона вылова необходимо учитывать при разработке рациональных режимов получения ЖКПФ и рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ.

В разделе Разработка рациональных технологических параметров получения жидкого комплекса протеолитических ферментов из внутренних органов рыбного сырья» показано, при получении ЖКПФ из внутренних органов промысловых рыб, прошедших холодильное консервирование, варьирование температуры составляло от 30 до 60°С (рис.2, 3) и гидромодуля «внутренние органы:вода»

от 1:0,5 до 1: 2 (табл. 2), при естественном значении рН внутренних органов 6,2 ±0,3. Оценка степени дезагрегации рыбного белка внутренних органов промысловых рыб по изменению отношения тирозина к общему азоту смеси (Т/ОА, %) в течение 10 часов при созданных асептических условиях.

продолжительность автолиза, час

—*— ЗОоС —Ш-40оС —4— 50оС —— бОоС

Рис. 2 Изменения степени дезагрегации белка (Т/ОА, %) в гидролизуемой смеси из внутренних органов промысловых рыб весеннего вылова при варьировании температуры автолиза

Рис. 3 Изменения степени дезагрегации белка (Т/ОА, %) в гидролизуемой смеси из внутренних органов промысловых рыб осеннего вылова при варьировании температуры автолиза

Оценка степени дезагрегации белка в гидролизуемой смеси из внутренних органов промысловых рыб при варьировании температуры автолиза (рис. 2,3) подтверждают зависимость гидролитических процессов от температуры и сезона вылова. Максимальная степень дезагрегации белка внутренних органов достигается в гидролизуемой смеси из сырья весеннего вылова при температуре 40°С, из сырья осеннего вылова - 50°С и составляет 11,83 и 12,46 % соответственно.

Изучение динамики изменения степени дезагрегации белка в гидролизуемой смеси из внутренних органов промысловых рыб, протекающей при установленных рациональных температурных режимах (табл.2) показывает, что увеличение гидромодуля процесса автолиза внутренних органов промысловых рыб весеннего и осеннего вылова до 1:1 повышает количество гидролизованного белка в 1,9 и 1,8 раза соответственно. Дальнейшее увеличение гидромодуля до 1:2 снижает скорость расщепления белка внутренних органов рыб, что Связано с замедлением

скорости образования фермент-субстратного комплекса в гидролизуемой смеси.

И

Таблица 2

Изменение степени дезагрегации белка (Т/ОА,%) в гидролизуемой смеси из внутренних органов при оптимальном гидромодуле_

Продолжительность автолиза, час Внутренние органы промысловых рыб

Весеннего вылова (при 40°С) Осеннего вылова (при 50°С)

1:0,5 1:1 1:1,5 1:2 1:0,5 1:1 1:1,5 1:2

0 3,53 3,53 3,53 3,53 2,11 2,11 2,11 2,11

1 4,88 5,25 4,65 4,41 2,90 4,54 3,11 3,02

2 6,42 7,51 5,26 4,70 3,55 6,16 5,48 3,89

3 7,11 10,18 7,53 6,38 3,45 7,17 6,78 4,58

4 7,11 10,16 7,65 6,51 4,00 8,23 7,79 4,66

5 7,22 10,19 7,69 6,53 3,98 8,24 7,83 4,73

6 7,23 10,20 7,72 6,55 4,13 8,29 7,83 4,75

Установлено, что наиболее интенсивно автопротеолиз белка гидролизуемой смеси из внутренних органов промысловых рыб (табл.2) осуществляется в течение первых 3 часов и достигает 10,18% и 7,17 % (весенний и осенний вылов), в дальнейшем интенсивность процесса дезагрегирования белка стабилизируется, что приводит к незначительному увеличению степени расщепления белка гидролизуемой смеси. Рекомендуемая нами рациональная продолжительность процесса получения ЖКПФ из внутренних органов промысловых рыб осеннего и весеннего вылова составляет 3,9±0,1 часа при рациональных температурах проведения процесса 40°С и 50°С для внутренних органов сырья весеннего и осеннего вылова соответственно и гидромодуле 1:1.

Также определено, что устойчивый консервирующий эффект наблюдается-при внесении 0,4% сорбиновой кислоты к массе гидролизуемой смеси в течение 4 часов автолиза (отношение АЛО/ФТА не превышает 4,8-5,5%).

Изучение показателей качества ЖКПФ, полученных из внутренних органов промысловых рыб весеннего и осеннего вылова (табл. 3) показало, что они имеют сходные органолептические показатели, химический состав, обладают близкой протеолитической активностью, но выход жидкого комплекса протеолитических ферментов из внутренних органов рыб весеннего вылова выше на 6%, чем выход ЖКПФ из рыб осеннего вылова.

Таблица 3

Показатели качества, химический состав и протеолигическая активность ЖКПФ из внутренних органов промысловых рыб весеннего и осеннего вылова

Наименование показате- ЖКПФ из внутренних органов

лей Весеннего вылова Осеннего вылова

Внешний вид Жидкость однородная Жидкость однородная

Естественный свойственный Естественный свойственный

Запах рыбному сырью без порочащих ; рыбному сырью без порочащих

признаков признаков

Цвет Буро-серый Буро-серый

Выход ФП, % 61,8 ±2,8 56,0 ±2,1

ПА. ед/г 3,8 ±1,2 3,1 ±0,9

Содержание, %

Воды 91,3±0,4 89,8±0,5

Белка 6,9±0,3 7,2±0,5

Жира 1,0±0,2 1,8±0,5

Минеральных веществ г 0,8±0,2 0,8±0,5

Таким образом, установлены рациональные режимы автолиза внутренних органов промысловых рыб: температура 40°С (сырье весеннего вылова), 50°С (сырье осеннего вылова), рН 6,2 ±0,3, продолжительность процесса 3,9±0,1 часа при гидромодуле 1:1), режимы центрифугирования и сепарирования ЖКПФ (при частоте вращения ротора центрифуги и сепаратора 3500 об/мин в течение 25 мин) дают возможность получить ЖКПФ из внутренних органов промысловых рыб с близким химическим составом независимо от сезона вылова сырья.

В разделе «Обоснование технологических режимов получения рыбных авто-лизатов с использованием ЖКПФ» показано, что разработка рациональных режимов получения рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья осуществлялось при естественном значении рН сырья равном 6,3±0,2. Т

Так как маломерное сырье осеннего и весеннего вылова обладает близкой протеолитической активностью, химическим составом (данные получены при статистической обработке разных соотношений рыб различного видового состава), но более низкой активностью, чем протеолитическая активность ферментных систем внутренних органов рыб (табл. 1), то для интенсификации активности ферментной системы маломерного рыбного сырья при установлении рационального гидромодуля процесс автолиза маломерного рыбного сырья был проведен при температуре 50°С.

Таблица 4

Изменение степени дезагрегации рыбного белка (НБА/ОА, %)* в различной реакционной среде при получении рыбных автолизатов из маломерного рыбного

Продолжительность автолиза, час Реакционная среда - вода Реакционная среда - ЖКПФ

1:0,5 1:1 1:1.5 1:2 1:0,5 1:1 1:1,5 1:2

0 8,7 8,7 8,7 8.7 8,7 8.7 8,7 8,7

4 14,2 17,6 14.5 13,6 24,9 21,4 19,9 19,6 1

8 18,5 22,1 19,0 17.1 34,9 27,9 25.4 22,0

12 22,1 25,4 22,4 18,9 38,9 35,0 27,6 26,0

16 22,5 26,0 23,1 20,3 413 35.3 29,9 27,1

20 23,3 263 23,8 20.7 41,4 36,2 31,0 28,7

24 23,5 26,8 24,3 21.7 41,8 36,5 31.7 28,9

*в числителе небелковый азот, в знаменателе общий азот

Изучение влияния реакционной среды (воды и ЖКПФ) на процессы дезагрегации рыбного белка маломерного сырья при различном гидромодуле от 0,5 до 2,0 при температуре 50°С и продолжительности процесса 24 часа осуществлялось по динамике накоплению НБА и отношению НБА/ОА сырья, выраженному в процентах (табл. 4) показало интенсификацию процесса дезагрегации рыбного белка в 1,5 раза при соотношении «гидролизуемая смесь:ЖКПФ» равном 1:0,5, что позволяет сократить на продолжительность процесса автолиза маломерного сырья при получении рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ на 12 часов.

Скорость процесса дезагрегации рыбного белка маломерного сырья в присутствии ЖКПФ также не оставалась постоянной в течение всей продолжительности процесса автолиза (рис.4), и находится в положительной динамике увеличения при повышении температуры от 30°С до 50°С, достигая максимального значения при температурах 50-55°С (0,04 с"1), но постепенно снижаясь при дальнейшем температуры (до

0,04

0,03

а 0,02

СП 0,01

И 0

0,01 с'1)

Рис. 4 - Изменение начальной скорости ав-топротеолиза маломерного сырья (Ктир, с"1) при различной температуре и рН

рН среды также оказывает влияние на скорость автопротеолиза, которая достигает наибольшего значения при рН 8 (0,04 с"1). Снижение рН до естественного значения (рН 6,3±0,2) уменьшает скорость процесса только на 12% и составляет 0,03 с'1, что позволяет проводить автопротеолиз маломерного сырья при естественном значении рН 6,3±0,2.

Таблица 5

Динамика накопления азотсодержащих веществ в автолизате из маломерного рыбного сырья в присутствии ЖКПФ при рациональной температуре (50°С) и

гидромодулепроцесса (1:0,5)

Про- Весенний вылов Осенний вылов

должи- £ У. Содержание азотсодержащих £ А К Содержание азотсодержащих Р о

тель- веществ в автолизате X веществ в автолизате

ность у' НБА ФТА Й " о НБА ФТА я £

автолиза I ^ о И о ( к ^ о ш 5

внутренних органов, час * «г о. о и о 5 I и 2 2 и О 5 & г/100 гр < О X 5? г/100 гр < О » 5? о ^ ^ в § Й 3 Я Ш с; я в Я н о. и и и " 3 гЧ и и а О 5 & | г/100 гр % к ОА е- | < О ы § й а § во *

2 4,5 8,7 542,4 62,1 196,6 17,2 33,1 5,3 7,9 545.3 64,6 135,2 18.2 31,9

1 4 6,8 •А8 69% J 71,6 307,9 31,6 34,5 7,2 9.3 642,9 64.7 248^7 25,0 39,6

^ 6 8,9 16,7 726,9 56,5 361,2 49,7 44,4 8,5 16,9 662,2 51,0 366,5 28,2 48,1

8 9,2 17, 9 729,3 56.6 362,8 49,7 48,9 9,6 18,2 707,7 54,4 370,9 28,5 50,3

10 9,4 18,1 751,2 58,4 366,4 28,3 49,4 , 9,9 18,9 721,5 54.9 372,1 28,4 50,4

12 9,8 18,2 792,6 60.8 [369,6 28,3 49,7 10,4 19,1 722,4 54,2 376,3 28,2 50,5

При рассмотрении процентного выхода НБА/ОА и ФТА/ОА в гидролизуемой смеси из маломерного рыбного сырья с использованием ЖКПФ (табл. 5) различного периода вылова нами установлено, что интенсивность накопления продуктов распада белка в автолизате непостоянна и зависит от продолжительности процесса.

Наиболее интенсивно изменяется отношение НБА/ОА и ФТА/ОА в течение 6 часов автолиза и достигает соответственно 56,5% и 49,7% в автолизате из маломерного рыбного сырья весеннего вылова, и 51,0% и 28,2% в автолизате из маломерного рыбного сырья осеннего вылова, постепенно уменьшаясь и достигает 60,8% и 28,3% в автолизате из маломерного рыбного сырья весеннего вылова, и 54,2% и 28,2% в автолизате из маломерного рыбного сырья осеннего вылова. Поэтому продолжительность автолиза неразделанного маломерного сырья в присутствии ЖКПФ составляет 6 часов.

Таким образом, разработанные нами технологические решения получения автолизатов из маломерного сырья в присутствии ЖКПФ позволяют получать автолиз аты с близкими показателями независимо от периода вылова маломерного сырья.

Определение дозы вносимого консерванта в гидролизуемую смесь также проводилось по изучению изменения АЛО/ФТА, выраженному в %, которое показало, что при внесении 0,4% сорбиновой кислоты к массе гидролизуемой смеси наблюдается устойчивый консервирующий эффект (отношение АЛО/ФТА не превышает 5,9-6,7%) в течение 6 часов автопротеолиза, что позволяет рекомендовать данное количество сорбиновой кислоты для консервирования.

В разделе «Моделирование и оптимизация процесса автолиза маломерного рыбного сырья» получена математическая модель и установлены оптимальные параметры процесса автолиза маломерного сырья в присутствии ЖКПФ. Параметром оптимизации математической модели была выбрана совокупная безразмерная характеристика Л, объединяющая два частных отклика - протеолитическая активность ЖКПФ и глубина гидролиза (табл. 6).

Таблица 6

План эксперимента и результаты его реализации по моделированию и оптимизации технологии получения рыбного автолизата с использованием ЖКПФ

№ эксперимента План экспе римента Частные отклики Обобщенный параметр оптимизации, .Г

Продолжительность ферментации (х), ч Количество вносимого ЖКПФ (0 % ПА ЖКПФ, ед/г Степень расщепления белка (ГГ), %

1 3,0 50,0 1,89 21,48 0,383

2 5,0 50,0 100,0 2,05 33,51 0,400

3 3.0 2,18 22,85 0,361

4 5,0 100,0 2,02 2,28 31,45 0,374

5 3,0 150,0 25,25 Г 0,405

6 5,0 150,0 2,34 38,12 0,410

7 4,0 50,0 2,10 32,98 0,398

8 4.0 100,0 1,98 30,98 0,345

9 4.0 150,0 2,31 36,78 0,419

Примечание: «идеалы» частных безразмерных откликов, принятые по результатам испытаний: ПА ЖКПФ = 2,5 ед/г; степень расщепления белка = 35%

Реализация плана эксперимента и обработка полученных данных позволила рассчитать уравнение (1), адекватно описывающее обобщенный параметр опти-

мизации с изменяемыми факторами, которое позволяет получить автолизат с определенной степенью дезагрегации белка:

у = 7,8928*т+9,5395*^5,908^-0,22924*^1,125*^+24,6205,% (1)

Графическая интерпретация полученной модели процесса автопротеолиза из неразделенного маломерного сырья с использованием ЖКПФ представлена на рис.5.

Рис. 5- Графическая интерпретация полученной модели процесса автолиза рыбного сырья с использованием ЖКПФ

Оптимальные значения факторов, установленные методом математического

дифференцирования, представлены в виде координат точек экстремума: продолжительность процесса автолиза 4,25 ч; количество вносимого ЖКПФ (ПА=2,0±0,1ед/гр.)50%к массе смеси.

Анализ результатов исследований, полученных при постановке многократных экспериментов при данных оптимальных технологических решениях, позволил уточнить варьирование рациональных значений процесса: продолжительность автолиза с использованием ЖКПФ - от 3,5 до 4 часов при поддержании в системе соотношения «гидролизуемая смесь:ЖКПФ» равное 1:0,5.

В разделе «Молекулярно-массовое распределение азотсодержащих фракций рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ» установлено, что рыбные автоли-заты из маломерного рыбного сырья, полученные с использованием ЖКПФ, глу-

бина дезагрегации белка которых составляет 9,6±1,2%, содержат низкомолекулярные белковые фракции с М.м 25-35 кДа от 48,3 до 38,8%; олигопегггидов (М.м. 4,5-6,5 кДаУ от 9,8 10,5 %; пептидов (М.м. 1,8-3,7 кДа) - от 2,3 до 5,2 %, и способны оказать положительное влияние на физиологическое состояние сельскохозяйственных ттгиц, т.к. имеют низкую степень расщепления белка и незначительное содержание белка М.м. от 1,0 до 5,0 кДа, обуславливающую горечь гидроли-затов.

В соответствии с полученным молекулярно-массовым распределением азотсодержащих фракций рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ продолжительность автолиза маломерного сырья в присутствии ЖКПФ может быть сокращена до 2,2±0,2 часа.

Для обезжиривания автолизатов рекомендуется их сепарирование на сепараторе марки ОС-6М при частоте вращения ротора 3500 об/мин и продолжительности процесса 25 мин. Для высушивания рыбного автолизата применялась вакуумная сушка в тонком слое пены с ИК-подводом при температуре воздуха не выше 50сС до остаточного содержания влаги 11,5±0,5 % (Буйнов, 1990; Алексанян, 1997; Бигжи, 2001; Пат РФ № 2112184).

В главе 4 «Изучение показателей качества кормовых автолизатов, полученных с использованием ЖКПФ» представлена характеристика показателей качества рыбных автолизатов РГ-40-0; РГ-50-0; РГ-40-Н; РГ-50-Н.

Выход сухих рыбных автолизатов варьировали от 28,5±1,4% (РГ-40-0, РГ-40-Н, РГ-50-Н) до 24,5±1,3% (РГ-50-0) и обусловлен, на наш взгляд, химическим составом используемых для получения ЖКПФ внутренних органов промысловых рыб, маломерного рыбного сырья (табл.1) и температурными параметрами проведения процесса автолиза, при реализации которых наблюдалось максимальное извлечение жира из гидролизуемой смеси при сепарировании автолизатов.

Результаты исследования химического состава рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ (табл. 7) показали, что они отличаются повышенным содержанием белка, варьирующим от 67,6 до 69,3%. Невысокое содержание жира в продуктах автопротеолиза, варьирующее от 6,0 до 7,3%, позволяет не использовать антиокислители при хранении автолизатов.

Таблица 7

Химический состав рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья, по_______лученных с использовавшем ЖКПФ_______

Наименование автолизатов Содержание, % Критериальные показатели качества белковых продуктов

Воды Сырого протеина Мин. в-в Сырого жира БВК, % БЭВ,% ВЭ, ккал

РГ-40-Н 12,1± 0,2 68,2±0,7 14,3±0,1 6,0±0,05 5,57 27,5±0,02 562,95±2,5

РГ-40-0 11,0±0,1 69,3±0,6 12,7±0,3 7,3±0,06 5,77 24,1±0,01 565,58±3,2

РГ-50-Н 12,2±0,3 67,6±0,7 13,9±0,2 'б,1±0,07 5,67 28,0±0.03 557,45±1,9

РГ-50-0 10,9±0,2 69,3±0,5 12,2±0,1 7,2±0,05 5,83 23,4±0,02 567,39±3,0

Для оценки качества гидролизованного белка был определен количественный

состав аминокислот в РГ-50-0, РГ-50-Н, РГ-40-0, РГ-40-Н (табл. 8), который показал, что они включают в себя полный набор незаменимых аминокислот. В дальнейших исследованиях нами был использован рыбный автолизат с максимальным содержанием незаменимых аминокислот РГ-50-0 (РГ-ОПТИМА), составляющим 79,9 г/100г белка.

Таблица 8

Аминокислотный состав рыбных автолизатов, г/100 гр белка

Наименование аминокислоты РГ-50-0 РГ-50-Н РГ-40-0 РГ-40-Н

Аргинин 4,624 | 4,136 4,430 4,333

Лизин (н) 7,952 7,177 6,158 6,169

Тирозин 4,055 ' 4,427 4,309 4,869

Фенилаланин (н) 1,996 1,962 1,947 1,994

Гистидин Лейцин (н) 5,197 4,656 5,087 4,007 5,399 ~ 3,431 5,493 "" 3,387

Метионин (н) 2,626 _ 2,926 3,430 2,193

Валин (н) 7,091 7,065 6,752 6,566

Пролин 5,490 6,832 2.895 5,213 4,908 5,069 6,369 2.267

Треонин (н) Триптофан (н) 6,598 .....2,768 " 6,628 2,234 "

Серии Алании Глицин 1,497 1,458 6,737 ! 6,656 4,350 ! 4,869 1,407 6,685 4,667 1,492 6,918 4,628

Глютамин Аспаргиновая кислота Цистин Изолсйцин (н) Сумма НАК Сумма заменимых аминокислот Сумма 2,495 1 2,535 7,673 ! 6,357 2,614 2,550 1.120 ] 1,087 35,168 | 33,59 44,732 ! 44,375 79,9 [ 77,965 2,674 6.764 2,373 0,985 31,565 43,616 75,181 2,764 6,297 2,549 0*967 29,912 44,412 74,324

Изучение жирно-кислотного состава РГ-ОПТИМА показало, что в нем превалирует содержание мононенасыщенных жирных кислот - 42,49%, практически в 1,4 раза ниже содержание насыщенные жирные кислоты и полиненасыщенных жирных кислот, составляющих соответственно 29,24% и 28,27%. Сумма эссенци-альных жирных кислот составляет 9,54%, что подтверждает биологическую ценность полученных автолизатов из маломерного сырья с использованием ЖКПФ.

Безопасность потребления полученных автолизатов в составе кормовых смесей подтверждена проведенными микробиологическими исследованиями, которые показали, что отклонений микробиологического пейзажа ЖКПФ и рыбных автолизатов, полученных с использованием ЖКПФ, от допустимых норм не наблюдалось (ОМЧ автолизатов не превышало 1*105 КОЕ/гр, ЖКПФ - 1*104 КОЕ/гр.), патогенные микроорганизмы не обнаружены, что позволяет использовать их в составе кормовых смесей.

Исследования токсикологической безопасности рыбных автолизатов методом биотестирования с использованием культуры одноклеточных микроорганизмов Tetrahymena pyrinoformis (Игнатьев, 1978) и определение общей интегральной токсичности на белых мышах (Метод, рек., 2001) подтвердили возможность применения их в качестве белковой составляющей кормов для сельскохозяйственных животных и птиц.

При разработке условий хранения рыбных автолизатов нами рассматривались изменения качественных показателей жира автолизатов , которые показали, что через 12 месяцев хранения при температуре 20°С±2,0, относительной влажности 70±5% кислотное и перекисное числа составляли 20 мг КОН/г и 0,18% J2 соответственно, что рекомендует хранить полученные автолизаты при данных условиях.

В пятой главе «Практическое применение автолизатов в кормопроизводстве» проведено моделирование рецептурного состава кормов для сельскохозяйственной птицы. Установлено, что использование полнорационного корма серии ПК -1-1 «Веселая несушка» для молодняка кур-несушек кросса «Хайсекс Коричневый» (Haisex Brown), полнорационных кормов серии «Сытый бройлер» ПК-5-1,

20

ПК-5-2, ПК-6-1 для бройлеров кросса «Иэа» (Isa) способствует увеличению живой массы птицы на 18%, яйценоскости - на 8%.

В шестой главе «Экономическая эффективность технологии кормовых рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ» представлена технологическая схема получения рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов (рис. 6) и ее описание.

Рис. 6 - Технологическая схема получения рыбного автолизата из маломерного рыбного сырья с использованием ЖКПФ

Прибыль от внедрения технологии кормового рыбного автолизата с использованием ЖКПФ при объеме выпуска 111,8 т/год составляет более 600 тыс.руб/год при себестоимости единицы продукции 40,6 руб/кг, рентабельность продукции 18% и срок окупаемости производства в 2,5 года.

Выводы

1. Разработана безотходная и ресурсосберегающая технология рыбных ав-толизатов из маломерного рыбного сырья с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна, позволяющая получить кормовой продукт повышенной биологической ценности и биодоступности для кормления птиц и сельскохозяйственных животных.

2. Установлено влияние сезона вылова на протеолитическую активность, химический состав маломерного рыбного сырья и внутренних органов промысловых рыб, а также влияние замораживания на степень гистологических изменений мышечной ткани и на протеолитическую активность рыбного сырья, которая повышается после размораживания рыбного сырья.

3. Научно и экспериментально обоснованы рациональные параметры получения жидкого комплекса протеолитических ферментов (ЖКПФ) из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна, гидролиз которых осуществлялся под действием собственных ферментов в течение 3,2±0,2 часа при естественном рН равном 6,2 ±0,2, гидромодуле 1:1 и температуре 50°С (для сырья осеннего вылова), 40°С (для сырья весеннего вылова) в присутствии сорбиновой кислоты, вносимой в количестве 0,4% к массе гидролизуемой смеси.

4. Разработаны и обоснованы рациональные параметры получения рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья осеннего и весеннего вылова на основе автопротеолиза с использованием ЖКПФ: продолжительность процесса 6 часов при естественном рН равном 6,3 ±0,2, соотношении «гидролизуемая смесь:ЖКПФ» равном 1:0,5 и температуре 50°С, доза вносимого консерванта -0,4% к массе смеси.

5. Оптимизированы методом математического дифференцирования параметры основного технологического процесса - автолиза маломерного рыбного сырья ферментным комплексом из внутренних органов рыб с определенной про-теолитической активностью, рациональные значения параметров которого составили: продолжительность автолиза 4,25 ч; количество вносимого ЖКПФ (ПА=2,0±0,1 ед/гр.) - 50% к массе смеси.

22

6. Изучена зависимость молекулярно-массового (М м) распределения азотсодержащих фракций автолизатов с использованием ЖКПФ от степени дезагрегации рыбного белка и обосновано использование кормовых автолизатов с глубиной гидролиза 9,6±1,2% на кормовые цели.

7. Наработаны партии жидкого комплекса протеолитических ферментов и рыбных автолизатов, выход которых составил для ЖКПФ 94,0-94,2 % и сухих рыбных автолизатов - от 28,5±1,4% (РГ-40-0, РГ-40-Н, РГ-50-Н) до 24,5±1,3% (РГ-50-0) к массе сырья и установлена их энергетическая, биологическая ценность, подтвержденная высоким содержанием полноценного белка (до 67,6%) с количеством незаменимых аминокислот 35,2 г/100 гр.белка, низким содержанием липидов (до 7,3%) с количеством ПНЖК 28,27%, от суммы кислот, в том числе эссенциальных жирных кислот - 9,54% от суммы кислот и токсикологическая безопасность.

8. Установлена целесообразность применения рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ в составе рецептурных композиций кормовых смесей для птицеводства, применение которых способствует увеличению живой массы птицы на 18%, яйценоскости - на 8%.

9. Экономическая эффективность от внедрения разработанной технологии получения рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ подтверждена рентабельностью продукции (18%) и сроком окупаемости производства автолизатов 2,5 года при себестоимости единицы продукции 40,6 руб/кг.

10. Разработана нормативная документация на опытные партии полученных продуктов: сухой белковый автолизат из рыбного сырья (ТУ 9283-001-0047170409, ТИ 9283-002-00471704-09) и комплекс протеолитических ферментов из внутренних органов промыслового рыбного сырья, сухой (СКПФ) (ТУ 9291-00300471704-09 и ТИ 9291-004-00471704-09).

Список публикаций по теме диссертации

1 .Костюрина К.В., М.Е. Цибизова Изучение ферментативной кинетики протеинсодер-жащего сырья как основополагающего биотехнологичсского процесса при получении новых продуктов //Вестник АГТУ.-2007-№3 (38).- С.125-129.

2. Цибизова М.Е., Костюрина К,В. Рыбные гидролизаты как один из компонентов полнорационных кормов для птицеводства //Вестник АГТУ-2006-№3 (32).- С.243-249.

23

3.Цибизова М.Е.. Мижуева С.А., Костюрина КВ. Критерии оптимизации биотехнологических процессов получения гидролизатов из гидробионтов //Известия вузов. Пищевая технология - 2009 - № 4 (310) - С.74-77

4. Цибизова М.Е., Костюрина К.В., Аверьянова Н.Д. Ферментативная обработка рыбного сырья как один из способов увеличения выхода белковых продуктов //Известия вузов. Пищевая технология- 2010-№ 1 (313)- С.17-20

5 Костюрина ¡СВ. Цибизова М.Е. Изучение молекулярно-массового состава гидролизата как один из способов получения биологически безопасных продуктов питания /Материалы IV МНМК «Живые системы и биологическая безопасность населения» ст-тов и молодых ученых -М.: МГУПБ, 2005. - С.26-28

(¡.Костюрина КВ., Цибизова М.Е. Ресурсосберегающие технологии переработки вторичного сырья как основной этап создания кормовой базы для АПК Астраханской области //Материалы ВНК «Инновационные технологии в управлении, образовании, промышленности»-Астрахань, 2007 - С.228-231

7 Костюрина К.В., Цибизова М.Е. Некоторые аспекты совершенствования биотехнологии получения гидролизатов из сырья Волго-Каспийского бассейна //Международный симпозиум «Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата», Астрахань, 2007 - С. 186-189

8.Костюрина КВ., Никитин Э.В., Цибизова М.Е. Возможные пути рационального использования нетрадиционных объектов промысла (густеры и синца) в зависимости от их технологических свойств /'Материалы МНПК «Состояние, охрана, воспроизводство и устойчивое использование биологических ресурсов внутренних водоемов» - Волгоград, 2007 - С. 162-163

9.Костюрина КВ., Цибизова М.Е. Гидролиз - биотехнологический способ переработки маломерного и малоценного рыбного сырья /Материалы МНПК «Перспективные нано- и биотехнологии в производстве продуктов функционального назначения» - Краснодар, 2007 - С. 152-154

10 Костюрина КВ., Цибизова М.Е. Инновационные разработки ресурсосберегающих технологий поликомпонентных кормовых продуктов повышенной биодоступности на основе сырья Волго-Каспийского бассейна /Конференция молодых ученых и инноваторов - Астрахань, Издательский дом ((Астраханский университет, 2009 - С. 130-131

11. Костюрина КВ., Цибизова М.Е. Исследование возможности использование рыбных гидролизатов в составе полнорационных кормов повышенной биологической доступности для птицеводства//Вестник АГТУ. Серия «Рыбное хозяйство» -2009-№1- С.32-37. ЮБЫ 1812-9498

12. Цибизова М.Е., Костюрина КВ. Субстратная специфичность протсол ментов нетрадиционных объектов промысла Волго-Каспийского бассейна //Вес рия «Рыбное хозяйство».-2009-№ 2- С.121-126. ЮБЫ 2073-5529

13. Патент № 2343710. МПК7А 23 Ь 1/31, 3/00, А 23 В 4/00. Способ полу* £ из рыбного сырья /КВ Костюрина, М.Е. Цибизова, Опубликовано 20.01.2009 I

О (0

__о

---В)

Подписано в печать 14.10.10г. Тираж 100 экз. Заказ № 878 Э

Типография ФГОУ ВПО «АГТУ», тел. 61 -45-23 Э

г. Астрахань, Татищева 16ж. "

2009063267

Введение.

ГЛАВА 1. Анализ литературных и патентных источников по способам получения гидролизатов.

1.1 Состояние и технохимическая характеристика сырьевой базы Волго-Каспийского бассейна.

1.2 Практическое использование рыбного сырья в Астраханском регионе.

1.3 Теоретические и практические аспекты гидролиза протеинсодержащего сырья.

1А Субстратная специфичность ферментных систем рыбного сырья.

1.5 Технологические свойства гидролизатов.

1.6 Практические аспекты использования гидролизатов.

Концепция развития рыбного хозяйства Российской Федерации на период до 2020 г., одобренная распоряжением Правительства Российской Федерации, предусматривает достижение устойчивого функционирования рыбо-хозяйственного комплекса страны на основе сохранения, воспроизводства и рационального использования водных биологических ресурсов, развития ак-ва и марикультуры.

Поэтому одним из приоритетных направлений научно-технического развития рыбной отрасли в области рационального природопользования является разработка комплексных ресурсосберегающих технологий переработки гидробионтов промыслового значения с утилизацией отходов от их разделки, максимального использования нетрадиционных объектов, в том числе малорентабельного рыбного сырья, переработка которого на пищевые цели в свете особенностей технологических характеристик не является экономически выгодным (Андрусенко, 1988; Кузнецов, 2001; Абрамова, 2004; Мамонтов, 2006).

Существующий белковый дефицит распространяется не только на продукты питания для жителей большинства стран мира, но и на сельское хозяйство (Богданов, 1981; Архипов, 1984; К.оЬегйчис1, 2002). Проблемы производства рыбной муки, связанные с ограниченностью получения ее на рыбопромысловых судах и береговых предприятиях из-за повышенных экономических затрат на топливо, наличие рыбомучных установок большой производительности, антропогенное воздействие данного производства на окружающую среду требуют поиска новых технологических решений переработки нерентабельного сырья и отходов рыбоперерабатывающей промышленности (Исаев, 1985; Аббакумов, 2003; Боева, 2000, 2004, 2008).

При переработке отходов рыбоперерабатывающей промышленности, как правило, получают белковые продукты кормового назначения, содержащие значительное количество протеина, являющегося незаменимой и наиболее дорогостоящей частью рациона сельскохозяйственных животных и птиц 6

Петриченко; 1979; Исаев, 1985; Девяткин, 1990; Мосолов; 1990;, Ковров, 1996; Егоров; 2002; Рубан, 2002; Лемешева, 2003'.Мухин; 2003; Антипова, 2004; Свеженцов; 2006;;Боева; 2008).

Одним из: наиболее: быстрых; путей решения;проблемы.утилизации рыбных отходов^ и сокращения дефицита кормового белка является разработка способов, повышающих эффективность использования, белков в организме сельскохозяйственных животных, в том числе и птицы, путем повышения эффективности протеинового питания.

Применение процессов ферментации в полном объеме распространяется на рыбные объекты промысла; в том числе и на отходы от переработки промысловых, актуальность максимального использования которых обусловлена изменением сырьевой базы и появлением маломерного и малоценного рыбного сырья, ранее являющегося нетрадиционным для переработки. Использование ферментативных технологий позволяет получать не только пищевые продукты высокого качества, обладающие повышенной биологической ценностью; но и кормовые продукты максимальной биологической«доступности: (Лысова; 1971; Черногорцев, 1973; Разумовская, 1980; Долганова, 1997; Бое-ва, 2000, 2005; Телишевская, 2000; Константинова, 2001; Новикова, 2003; Мухин, 2003; Mackie, 1974; Adams, 1985; Hassan, 1986).

Принимая во внимание необходимость комплексного использования нетрадиционного-рыбного сырья, а также отходов от переработки промысловых объектов;актуальным-представляется^разработка технологии'получения кормовых гидролизатов; полноценных по аминокислотному составу; содержащих ряд; биологически ценных компонентов: макро- и микроэлементов; жирных кислот, в том числе полиненасыщенных жирных кислот. (ПНЖК), и обладающих максимальной, доступностью» для. желудочно-кишечного тракта; сельскохозяйственых животных.и птиц.

Научная новизна работы.

- Выявлена зависимость изменения протеолитической активности сырья от сезона вылова и влияние замораживания на степень гистологических изменений мышечной ткани и протеолитическую активность маломерного рыбного сырья и внутренних органов промысловых рыб.

- Установлено влияние ЖКПФ с определенной протеолитической активностью на интенсивность процесса автопротеолиза маломерного рыбного сырья, позволившее оптимизировать технологические параметры получения рыбного автолизата.

- Установлена зависимость молекулярно-массового распределения азотсодержащих фракций рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ от степени дезагрегации рыбного белка в них, регламентирующая направления его использования.

Основные положения, выносимые на защиту:

•обоснование технологических параметров получения жидкого комплекса протеолитических ферментов из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна;

• разработанные технологические режимы получения рыбного автолизата с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов;

• изучение биологической ценности рыбного автолизата с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов;

• применение полученных рыбных автолизатов в составе кормовых смесей для птиц яичного и мясного направлений.

Выводы

1. Разработана безотходная и ресурсосберегающая технология рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья с использованием жидкого комплекса протеолитических ферментов из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна, позволяющая получить кормовой продукт повышенной биологической ценности и биодоступности для кормления птиц и сельскохозяйственных животных.

2. Установлено влияние сезона вылова на протеолитическую активность, химический состав маломерного рыбного сырья и внутренних органов промысловых рыб, а также влияние замораживания на степень гистологических изменений мышечной ткани и на протеолитическую активность рыбного сырья, которая повышается после размораживания рыбного сырья.

3. Научно и экспериментально обоснованы рациональные параметры получения жидкого комплекса протеолитических ферментов (ЖКПФ) из внутренних органов промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна, гидролиз которых осуществлялся под действием собственных ферментов в течение 3,2±0,2 часа при естественном рН равном 6,2 ±0,2, гидромодуле 1:1 и температуре 50°С (для сырья осеннего вылова), 40°С (для сырья весеннего вылова) в присутствии сорбиновой кислоты, вносимой в количестве 0,4% к массе гидролизуемой смеси.

4. Разработаны и обоснованы рациональные параметры получения рыбных автолизатов из маломерного рыбного сырья осеннего и весеннего вылова на основе автопротеолиза с использованием ЖКПФ: продолжительность процесса 6 часов при естественном рН равном 6,3 ±0,2, соотношении «гидролизуемая смесь:ЖКПФ» равном 1:0,5 и температуре 50°С, доза вносимого консерванта -0,4% к массе смеси.

5. Оптимизированы методом математического дифференцирования параметры основного технологического процесса - автолиза маломерного рыбного сырья ферментным комплексом из внутренних органов рыб с определенной протеолитической активностью, рациональные значения параметров

133 которого составили: продолжительность автолиза 4,25 ч; количество вносимого ЖКПФ (ПА=2,0±0,1 ед/гр.) - 50% к массе смеси.

6. Изучена зависимость молекулярно-массового (М.м) распределения азотсодержащих фракций автолизатов с использованием ЖКПФ от степени дезагрегации рыбного белка и обосновано использование кормовых автолизатов с глубиной гидролиза 9,6±1,2% на кормовые цели.

7. Наработаны партии жидкого комплекса протеолитических ферментов и рыбных автолизатов, выход которых составил для ЖКПФ 94,0-94,2 % и сухих рыбных автолизатов - от 28,5±1,4% (РГ-40-0, РГ-40-Н, РГ-50-Н) до 24,5±1,3% (РГ-50-0) к массе сырья и установлена их энергетическая, биологическая ценность, подтвержденная высоким содержанием полноценного белка (до 67,6%) с количеством незаменимых аминокислот 35,2 г/100 гр.белка, низким содержанием липидов (до 7,3%) с количеством ПНЖК 28,27%, от суммы кислот, в том числе эссенциальных жирных кислот - 9,54% от суммы кислот и токсикологическая безопасность.

8. Установлена целесообразность применения рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ в составе рецептурных композиций кормовых смесей для птицеводства, применение которых способствует увеличению живой массы птицы на 18%, яйценоскости - на 8%.

9. Экономическая эффективность от внедрения разработанной технологии получения рыбных автолизатов с использованием ЖКПФ подтверждена рентабельностью продукции (18%) и сроком окупаемости производства автолизатов 2,5 года при себестоимости единицы продукции 40,6 руб/кг.

10. Разработана нормативная документация на опытные партии полученных продуктов: сухой белковый автолизат из рыбного сырья (ТУ 9283001-00471704-09, ТИ 9283-002-00471704-09) и комплекс протеолитических ферментов из внутренних органов промыслового рыбного сырья, сухой (СКПФ) (ТУ 9291 -003-00471704-09 и ТИ 9291-004-00471704-09).

1. Абрамова Л.С. Пути рационального использования сырьевых ресурсов рыбного хозяйства страны /Л.С. Абрамова //Пищевая промышленность.-2004.-№3-С.6-10.

2. Адлер Ю.П. Планирование эксперимента при поиске оптимальных условий.ЯО.П.Адлер, Е.В. Маркова, Ю.В.Грановский. М.: Наука, 1976.-279с.

3. Алтуфьев Ю.В. Возможности оценки степени миопатии русского осетра /Ю.В. Алтуфьев //Экологические проблемы реки Урал и пути их решения. Гурьев, 1989.-С.З-4.

4. Ананичев A.B. Пищеварительные ферменты рыб //Биохимия. 1969. -Т. 32, вып. 6. С. 1033-1040.

5. Андрусенко П.И. Малоотходная и безотходная технология при переработке рыб /П.И. Андрусенко. -М.: Агропромиздат, 1988.-112с.

6. Антипова Л.В. Белковая добавка из кератина пера /Л.В. Антипова, Ч. Шамханов, О. Осмин //Комбикорма.-2004. -№ 2. С. 55-56;

7. Антонов В.К. Химия протеолиза /В.К. Антонов — М:: Наука, 1991.-504с.- ISBN 5-02-004111-4

8. Артюхова С.А. Технология продуктов из гидробионтов /С.А. Артюхова, В.Д. Богданов-М.: Колос, 2001.- 190с.

9. Архипов А. Научные основы кормления мясных кур /А. Архипов, В. Александров //Птицеводство.-1986.-№2-С. 18-21.

10. Архипов A.B. Протеиновое и аминокислотное питание птицы /A.B. Архипов, JI.B. Топорова.-М.: Колос, 1984.- 175с.

11. Багурская Л.Д. Пищевые концентраты /Л.Д. Багурская, В.Н. Гуляев. -М.: Пищевая промышленность, 1976.-335с.

12. Белоусова C.B. Совершенствование технологии получения белковых гидролизатов и их использование в производстве рыборастительных продуктов: Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук. 05.18.01; 05.18.04-Краснодар, 2009 24 с.

13. Бердутина A.B. Разработка технологии белковых гидролизатов из вторичного сырья мясной промышленности //Автореф. дис. канд. техн. наук. -Владивосток, 2000.-24с.

14. Березин И.В. Исследования в области ферментативного катализа и инженерной энзимологии. М.: Наука, 1990. - 382 с.

15. Березин И.В. Ферменты химические катализаторы? /И.В. Березин, A.A. Клесов.-М.: Знание, 1971.- 48с.

16. Бернгард К.Е. Мелкие речные рыбы сырье для гидролизатов / К.Е. Бернгард, Г.К. Винокурова //Рыбное хозяйство.-1988.-№6-С.88-90.

17. Биотехнология морепродуктов: учебники и учеб. пособия для студ. высш.учеб.завед /Л.С. Байдалининова, A.C. Лысова. О.Я. Мезенова, Н.Т. Сергеева, Т.Н. Слуцкая, Г.Е. Степанцова М.: Мир, 2006.- 560с.

18. Богданов Г.А Кормление сельскохозяйственных животных /Г.А. Богданов. М.: Колос, 1981.- 432с.

19. Боева Н.П. Рыбная мука повышенной кормовой эффективности136

20. Н.П.Боева, B.A. Терентьев, Е.Н.Коншцева, Н.В.Федорова //Марикультура Северо-Запада России: Тез.докл.науч-практ.koiк})., 25-27 окт.2000 г. -Мурманск: Изд-во ПИНРО, 2000. С.18.

21. Боева Н:П. Состояние и перспективы развития производства кормовой муки из гидробйонтов //Рыбная промышленность, 2004 № 3 - С. 14-15

22. Боева Н.П. Технология рыбы и рыбных продуктов. Кормовые продукты из водных биологических ресурсов: учебное пособие /H.H. Боева, О.В. Бредихина, А.И. Бочкарев.- М.: Изд-во ВНИРО, 2008.- 118с.- 978-585382-033-3

23. Боева Н.П; Ферментативная рыбная кормовая мука: выбор оптимального фермента /Н.П. Боева, Е.В. Сергиенко //Рыбное хозяйство.-2005 .-№1-С. 18-20.

24. Борисочкина Л.И. Рыбный белковый концентрат /Л.И. Борисочкина, Н.Е. Николаева-М: Изд-во ЦНИИТЭИРХ, 1970-50 с.

25. Борисочкина Л.И. Технология продуктов из океанического сырья /Л.И. Борисочкина, Т.А. Дубровская.-М.: Агропромиздат, 1988.- 208с.

26. Борисочкина Л.И., Николаева Н.Е. Рыбный белковый концентрат. -Изд. ЦНИИТЭИРХ, 1970. 50 с.

27. Боровиков В.П; StatisticadD-Статистический анализ и обработка данных в среде Windows® /В:П. Боровиков, И.П. Боровиков: 2-е изд., стереотипное— М:: Информационно-издательский дом «Филинъ», 1998.-608с. .

28. Буйнов A.A., Алексанян И.Ю. Оценка эффективности вакуумной сушки рыбных гидролизатов во вспененном состоянии./Краткие результаты научной деятельности института //Тематический^ сб. научных трудов /АТИРПиХ.--Астрахань, 1990, С.216-218.

29. Быков В.П. Изменения мяса рыбы при холодильной обработке /В.П. Быков-М.: Агропромиздат, 1987.-221с.

30. Ветеринарные правила и нормы по безопасности кормов, кормовых добавок и сырья для производства кормов. ВетПин 13-5-01/0101- М.: Изд-во стандартов, 2001».

31. Волкова Н. Птицеводческий подкомплекс как составная часты АПК /Н. Волкова, Ю. Логвинов //Птицеводство.-2005.-№3-С.8-9.

32. Волкова О.В. Основы гистологии с гистологической техникой /О.В.Волкова, Ю.К. Еленицкий. 2-е изд.- М.: Медицина, 1982.-304с.

33. Воропаев В.М. Аминокислотный и белковый состав экспериментальных рыбных кормов и их компонентов из объектов водного сырья /В.М. Воропаев, Ю.Г. Блинов, A.M. Павловский //Хранение и переработка сельхозсырья.-2002.-№4-С.47-50.

34. Вронски Анджей Исследование по технологии ферментативных гидролизатов из мелкого анчоуса: Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук : 05.18.04. /Вронски Анджей,- Москва, 1977.-27с.

35. Гадиев Р. Перспективы использования биотрина в птицеводстве /Р. Гадиев, Р. Авзалов, Д. Хазиев //Птицеводство.-2004.-№5-С. 12-13.

36. Голубев В.Н. Справочник технолога по переработке рыбы и морепродуктов /В.Н. Голубев, О.И. Кутина. -С-Пб.: Гиорд, 2003.-408с.

37. Гомолицкий В.Н. Процессы разделения — основной метод перехода от лабораторных к промышленным масштабам в биотехнологии /В.Н.Гомолицкий и др. //Экспресс-информация-М., 1987.-Вып.14 с: 7.

38. Горская H.A. Адсорбционная хроматография» на активированных углях при получении белковых гидролизатов //Лечебные препараты из крови и тканей-Л., 1974-С. 171-173.

39. ГОСТ 10444.15-94 Продукты пищевые. Методы определения коли138чества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганиз-мов.Технические условия. — Введ. 1996—01—Olí — М.: Изд-востандартов, 2001.

40. ГОСТ 1368-2003 Рыба. Длина и масса; Технические условия. Введ. 2004-01—27. - М.: Госстандарт России; 2004:;— 15 с.

41. ГОСТ 18221-01 Комбикорма полнорационные? для сельскохозяйственной птицы. Технические условия. Ш'.: Изд-во*стандартов, 2000.-7 с.

42. ГОСТ 26929-94 Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения содержания токсичных элементов Введ. 1996-01-01 - М:: Госстандарт России, 2002- 14 с.

43. ГОСТ 26933-86 Сырье и продукты пищевые: Методы определения кадмия -Введ. 1986-08-01 М.: Изд-во стандартов, 1986- 8 с.

44. ГОСТ 26932-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения^ свинца Введ. 1986-12-01 - М.: Изд-во стандартов, 1986- 11 с.

45. ГОСТ 26930-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения мышьяка -Введ. 1986-08-01 М : Изд-во стандартов, 1986- 8 с.

46. ГОСТ 26927-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения ртути -Введ. 1986-08-01 М.: Изд-во стандартов, 1986- 15 с.

47. ГОСТ 28825-90 Мясо птицы. Приемка Введ. 1993-01-01 - М.: Изд-во стандартов, 1993 - 3 с.

48. ГОСТ 2116-2000 Мука кормовая из рыбы, морских млекпитающих, ракооборазных и беспозвоночных. Технические условия, Введ. 2001-01-09 — Мп Госстандарт России; 2000- 16:с;

49. ГОСТ 21784-76- Мясо птицьь (тушки кур; уток, гусей, индеек, цесарок). Технические условия.- Введ. 1977—01—01. М.: Изд-во стандартов, 1977-15 с.

50. ГОСТ 25391-82 Мысо цыплят-бройлеров. Технические: условия. -Введ. 1983-01-01 .М:г: Изд-во стандартов, 1983 15 с.

51. ГОСТ 26570-95 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения кальция. Технические условия Введ. 1997-01-01. - М.: Изд-во стандартов, 1997 - 9 с.

52. ГОСТ 26657-97 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания фосфора. Технические условия Введ. 1999-01-01. - М.: Изд-во стандартов, 1999 — 12 с.

53. ГОСТ 27583-88 Яйца куриные пищевые. Технические условия.-Введ. 1988-01-01. -М.: Изд-во стандартов, 1988 10 с.

54. ГОСТ 31339-2006 Рыба, нерыбные объекты и продукция из них. Правила приемки и методы отбора проб. Введ. 2008-07-01. - М.: Стандарт-информ, 2007- 16 с. (взамен ГОСТ 7631-85 в части правил приемки и методов отбора проб).

55. ГОСТ 7636-85 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа.Технические условия-Введ. 1986-01-01. -М.: Изд-во стандартов, 1985.

56. ГОСТ Р 51417-99 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение массовой доли азота и вычисление массовой доли сырого протеина. Метод Къельдаля. Технические условия Введ. 2001-01-01. - М.: Изд-во стандартов, 2001 - 18 с.

57. Градусов Ю.Н. Усвояемость аминокислот /Ю.Н. Градусов. -М.: Колос, 1979.-400с.

58. Грачев Ю.П. Математические методы планирования экспериментов • /Ю.П. Грачев, Ю.М. Плаксин. -М.: ДеЛи принт, 2005.-296 с.

59. Грачева И.М., Кривова А.Ю. Технология ферментных препаратов:учебник для студентов вузов /И.М.Грачева, А.Ю. Кривова. -3-е изд., перераб.140и доп. М.: Элевар, 2000. -512с.:ил.-(Учебники и учеб. пособия для студентов вузов)

60. Григорьев Н.Г. Аминокислотное питание- сельскохозяйственной птицы /H:F. Григорьев. -М.: Колос, 1972.- 177с.

61. Григорьева Е.В. Обоснование переработки гаммаруса Балтийского моря (Gammarus lacustris): Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук: 05.18.04.-М.: ВНИРО, 2008.-28с.

62. Девяткин А.И. Рациональное использование кормов /А.И.Девяткин. -М.: Росагропроиздат, 1990:- 256с.

63. Долганова Н.В. Разработка экологически чистых технологий белковых кормовых продуктов на основе вторичных ресурсов: Автореф. дис. на соиск.докт.техн.наук: 05.18.18 Москва, 1997. - 54 с.

64. Долганова Н.В. Технология рыбных гидролизатов и продуктов на их основе: учеб. пособие /Н.В. Долганова, Р.Г. Разумовская, М.Е. Цибизова; Астрахан.гос. техн. ун-т.-Астрахань: Изд-во АГТУ, 2008.-188с.

65. Досон Р. Справочник биохимика /Р. Досон, Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс. -М.: Изд-во «Мир», 1991.- 347 с.

66. Дроздова Л.И. Возможности получения продукта-на основе сои и гидролизата молок лососевых /Л'.И. Дроздова, Т.Н; Пивненко, Е.В. Якуш, JI.M. Эпштейн //Рыбное хозяйство.-1998.-№1-С.50-51.

67. Егоров И. Витаминные корма и подкормка для птицы /И. Егоров, В. Крюков,- Т. Околелова //Птицеводство,-19791-№7-С.42-44.

68. Егоров И. Комбикорма с пониженным уровнем животного белка /И. Егоров, А. Мысачев //Птицеводство.-2002.-№6-С. 17-20.

69. Егоров И. Консерванты кормов органические кислоты /И. Егоров //Птицеводство.-2004.-№6-С.5-8.

70. Егоров И. Перспективы использования морских продуктов /И. Егоров, Ю. Бойков /Я1тицеводство.-2000.-№1-С.20-22.

71. Ермолаев Е.Д. Применение ультрафильтрации для выделения и очистки ферментов /Тез.докл. Всесоюзного симпозиума по методам получения высокоочищенных ферментов, Вильнюс - 1978. - с.14-15.

72. Журавская- Н.К. Исследование и контроль качества мяса и мясопродуктов /Н.К. Журавская, JI.T. Алехин, JIM. Отряшенкова. М.: Агропромиздат, 1985.- 296с.

73. Иванов A.C. Химический состав некоторых основных промысловых рыб Волго-Каспийского бассейна //Сб. научн. трудов КаспНИРХа М., 1961.-с.49-55.

74. Игнатьев А.Д. Использование инфузорий Тетрахимена Пириформис как тест-объекта при биологических исследованиях в сельском хозяйстве /А.Д. Игнатьев, В.Я. Шаблий М.: ВАСХНИЛ, 1978 - 52 с.

75. Имангулов Ш. Нормирование незаменимых аминокислот экономия протеина /Ш. Имангулов //Птицеводство.-2004.-№8-С.34-35.

76. Инструкция по санитарно-микробиологическому контролю производства пищевой продукции из рыбы и морских беспозвоночных /МЗ СССР N5319-91 от 22.02.91.

77. Исаев В.А. Кормовая рыбная мука /В.А. Исаев. М.: Агропромиздат, 1985.- 189с.

78. Казанчиев E.H. Рыбы Каспийского моря (определитель) /E.H. Казанчиев.- М.: Легкая и пищевая пром-сть, 1981.-168с.

79. Каравашенко В.Ф. Кормление сельскохозяйственной птицы /В.Ф. Каравашенко. К.: Урожай, 1986.- 304с.

80. Касьянов,Г.И. Нанобиотехнология переработка рыбного сырья /Г.И. Касьянова, О.В. Сарапкина, С.В. Белоусова. Краснодар: КубГТУ, КрасНИИРХ, 2006.- 151с.

81. Кизеветтер И.В. Биохимия сырья водного происхождения /И.В. Кизеветтер. -М.: Пищевая промышленность, 1973.- 425с.

82. Кизеветтер И.В. Изучение кислотного гидролиза белков мяса кашалота /И.В. Кизеветтер, А.Н.Ярочкин //Исследования по технологии рыбных продуктов. Труды ТИНРО-центр Владивосток, 1973, вып. 4 - С. 1416.

83. Кизеветтер И.В. Технология обработки водного сырья: учеб. для студ. высш. завед. /И.В. Кизеветтер, Т.И. Макарова, В.П. Зайцев, Л.П. Миндер, В.Н. Подсевалов, Л.Л. Лагунов М.: Пищевая промышленность, 1976.- 696с.

84. Киричко H.A. Разработка технологии кормовых продуктов на основе вторичных сырьевых ресурсов: Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук : 05.18.04.-М.: ВНИРО, 2005.-28с.

85. Кислухина О.В. Ферменты в производстве пищи и кормов /О.В. Кислухина. -М.: ДеЛи принт, 2002.- 336с.- ISBN 5-94343-021-0

86. Клейманов И.Я. Пищевая ценность рыбы. М.:Пищевая промышленность, 1971. - 151 с.

87. Кнорре Д.Г. Биологическая химия: учеб. для хим., биол. и мед. спец. вузов /Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина. -3-е изд., испр. М.: Высш. шк., 2002.-479с. ISBN 5-06-003720-7

88. Ковров Г.В., Боева Н.П. Сухой гидролизат как альтернатива рыбной муке //Хранение и переработка сельхозсырья.- 1996- № 1-С.40-41.

89. Коновалов В.И. Потребность кур мясных линий в протеине в зависимости от уровня аминокислот и обменной энергии в рационах: Автореф. дис. на соиск.канд.сел-хоз.наук : 06.553-Харьков, 1971.-15с.

90. Костюрина К.В. Изучение ферментативной кинетики протеинсо-держащего сырья как основополагающего биотехнологического процесса при получении новых продуктов /К.В. Костюрина, М.Е.Цибизова //Вестник143

91. АГТУ.-2007-№3 (38).- С. 125-129.

92. Костюрина КВ., Никитин Э.В., Цибизова М.Е. Возможные путирационального использования нетрадиционных объектов промысла (густерыи синца) в зависимости от их технологических свойств /Материалы МНПК

93. Состояние, охрана, воспроизводство и устойчивое использование144биологических ресурсов внутренних водоемов» — Волгоград, 2007 С. 162163

94. Котенев Б.Н. Состояние и перспективы развития аквакультуры в Российской Федерации /Б.Н. Котенев, Ж.Т. Дерагалева, И.В. Яхонтова, А.К. Богерук //Рыбное хозяйство.-2006.-№5-С.25-29.

95. Крылова H.H. Физико-химические методы исследования продуктов животного происхождения /H.H. Крылова, Ю.Н. Лясковская. — М.: Пищевая промышленность, 1965 .-316с.

96. Куцакова В.Е. Кинетика гидролиза белоксодержащих отходов гидробионтов /В.Е. Куцакова, А.Л. Ишевский, В.В. Леваков, К.Ю. Поляков, A.B. Белова //Хранение и переработка сельхозсырья.-2002.-№12-С.31-33.

97. Кьосев Д. Изменение жиров при получении рыбного гидролизата из толстолобика /Д. Кьосев, С. Драгоев, Ю. Кофова // Известие ВУЗов. Пищевая промышленность.-2002.-№ 1 -С.32-33.

98. Лазаревский A.A. Техно-химический контроль в рыбообрабатывающей промышленности М.: Пищепромиздат, 1955 - 512 с.

99. Ларюшкина Е.Ю. Использование белковых кислотных гидролизатов при производстве пищевых концентратов и консервов: Обзор /Е.Ю. Ларюшкина, П.В. Кундин, E.H. Волков. М.:Пищевая промышленность, 1972.- 58 с.

100. Лемешева^ М.М. Кормление сельскохозяйственной птицы /М!.М. Лемешева. — Сумы :Слобожанщина; 2003.- 152с.

101. Лобанов В.Г. Перспективны, развития технологии продуктов на рыбной основе /В.Г. Лобанов, Г.И. Касьянова, О.В. A.C. Шубко. Краснодар: КубГТУ, 2008.- 224с.

102. Логвинов М.В. Биохимическое обоснование технологии производства гидролизата из рапаны в связи с использованием его в технологии рыбных продуктов: Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук : 05.18.04. Краснодар: КубГТУ,2002.-24с.

103. Лысова A.C. Исследование процесса ферментации каспийской кильки с целью получения белкового концентрата : Автореферат на соискание ученой степени к.т.н. Калининград, 1971. - 32 с.

104. Люк Э. Консерванты в пищевой промышленности. Свойства и. применение /Э.Люк, М. Ягер. -СПб.: Гиорд, 2000.-25бс.

105. Мамонтов Ю.П. О мерах по развитию аквакультуры в Российской Федерации /Ю.П. Мамонтов //Рыбное хозяйство.-2006.-№7-С. 16-19.

106. Маслиева О.И. Анализ качества кормов и продуктов птицеводства /О.И. Маслиева. -М.: Колос, 1970,- 176с.

107. Мелехин Г.П. Физиология сельскохозяйственной птицы: учеб. пособия для высш. с.-х. учеб. заведений /Г.П Мелехин, Н.Я. Гридин. -М.: Колос, 1977.- 288с.

108. Методические рекомендации и определению интегральной токсичности фуражного зерна, продуктов его-переработки, комбикормов и входящих в-их состав, ингредиентов методами биотестирования.- СПб.:Изд-во стандартов, 2001.

109. Методические указания по расчету рецептов комбикормовой продукции-М.:Изд-во стандартов, 1998.

110. Мижуева, С.А. Структурно-механические характеристики гидро-бионтов. Учебное пособие /С.А. Мижуева. Астрахань:* Изд-во АТИРПиХ, 1995.- 143с.

111. Модянов A.B. Ферментные препараты в кормлении животных / A.B. Модянов.-М.: Колос, 1973.- 160с.

112. Молоскин С. Кормление кур-несушек поиск компромисса / С. Молоскин /Я1тицеводство.-2001 .-№4-С.28-29.

113. Мосолов Н.Д. Кормление сельскохозяйственных животных: учебное пособие /Н.Д. Мосолов, JI.A. Билый. К.: Выща шк., 1990.- 359с,-ISBN 5-11-002111-2

114. Мукатова М.Д. Рыборастительная добавка /М. Мукатова, Н. Киричко, Р. Мусякаев, А. Снатков //Птицеводство.-2004.-№12-С. 12-13.

115. Мухин В. Белковые гидролизаты из отходов переработки морепродуктов / В. Мухин, В. Новиков //Птицеводство.-2002.-№1-С.21-23.

116. Мухин В.А. Разработка технологии получения ферментативных белковых гидролизатов из тканей морских гидробионтов : Автореф. дис. на соиск.док.биол.наук : 03.00.23, 03.00.04. Москва,2003 - 54 с.

117. Мухин В.А. Ферментный препарат из гепатопанкреаса краба в качестве стимулятора созревания гидробионтов при посоле /В.А. Мухин, В.Ю. Новиков, Л.Л. Константинова, А.Н. Иванкин, A.B. Бердутина //Хранение и переработка сельхозсырья.-2002.-№8-С.41-44.

118. Научные основы полноценного кормления сельскохозяйственных животных /Ред. коллегия А.П. Калашников и др. Всесоюз. Акад. с.-х. наук им. В.И. Ленина. -М.: Агропроиздат, 1986.- 317с.

119. Неклюдов А.Ф. Получение из очистки белковых гидролизатов (обзор) /А.Ф Неклюдову .А.Н. Иванкин, А.В, Бёрдутина //Прикладная биохимия, и микробиология: -2000-Т.36-№4-С. 371-379.

120. Некрасова Г.Т. Технология ферментного препарата «Океан» и его модификации /Г.Т.Некрасова, В.В. Голенкова. //Прогрессивная технология производства пресервов, соленой и копченой продукции. Калининград: Ат-лантНИРО, 1988.-С. 67-70.

121. Немцев C.B. Ферментативная обработка панцирьсодержащих отходов криля //Рыбная промышленность. 2005 - №2 - С.37-41.

122. Нехамкин Б.Л. Влияние температуры и рН на активность трипсино-подобных ферментов некоторых рыб тропической зоны // Тр. АтлантНИРО. -1976. Вып. 66. - С. 27 - 30.

123. Нечаев А.П. Пищевая химия /А.П. Нечаев, С.Е. Траубенберг, А.А. Кочеткова и др.: Под ред. А.П. Нечаева. -Спб.: ГИОРД, 2001.- 592с.

124. Новикова М.В. Пищевая биологически активная добавка из мидий /М.ВНовикова, Н.И.Рехина и др.//Вопросы питания. 1998. - № 1 - с. 10-13.

125. Новикова М.В. Разработка технологии получения бологически активных добавок из гидробионтов и отходов от их разделки: Автореф. дис. на соиск. .докт.тех.наук: 05.18.07.-Москва, 2003.-49с.

126. Околелова Т. Эффективность ферментного препарата «Белфид» /Т. Околелова, JI. Криворучко, Е. Андрианова, В. Новиков //Птицеводство.-2004.-№3'-С.8-9:

127. Орлова- Т.А. Пищевой белковый концентрат из рыбного сырья, / Т.А. Орлова, H.H. Неличик, К.А. Флейдер //Рыбное хозяйство.-1979.-№ 10-С.59-62.

128. Otto М. Современные методы аналитической химии. В 2 т. Т.2./М. Отто: Пер. с нем. Под ред. A.B. Гармаша. -М.: Техносфера, 2004.-288с.- ISBN 5-94836-017-2 (т.2), ISBN 5-94836-014-8 (рус), ISBN 3-527-29840-1 (нем)

129. Пат. 2312516 Российская федерация, МПК7 А 23 К 1/00, А 23 К 1/10. Кормовое средство для кур-несушек /Рахимов A.A., Андросова Л.Ф., Ткаченко О.В. № 2005 128752/13,; заявл. 16.09.05; опубл. 20.12.07

130. Пат. № 2006104108 Российская федерация, МПК6 А 61 К 35/60. Гидролизат рыбного белка /Берге Рольф (NO); заявитель и патентообладатель Берге Биомед АС (NO). -№ 2006104108/15; заявл. 02.07.04; опубл. 13.01.05

131. Пат. № 2112184 Российская Федерация, МПК6 А 2313/02/ Вакуумная пеносушилка /Алексанян И.Ю. и др. БИ №15; опубл. 27.05.98.

132. Паукова Л.М. О возможности выделения ферментов из рыбного сырья /Л.М. Паукова, Л.С. Байдалинова// Разработка технологии белковых продуктов: Сборник трудов.- Калининград, 1989.-С.194-205.

133. Петриченко Л.К. Разработка технологии консервированных рыбных отходов и исследование, их кормового достоинства: Автореф. дис. на соиск. .канд.сел-хоз.наук: 06.02.02- Краснодар, 1979.-25с.

134. Петрухин И.В. Применение химических и биологических веществ в кормлении птицы /И.В. Петрухин. —М-.: Россельхозиздат, 1972.- 239с.

135. Пивненко Т.Н. Исследование■ свойств протеолитических ферментов, выделенных из пилорических придатков рыб /Т.Н:Пивненко; Б;Н. Аюшин, Л.М.Эпштейн //Тез. докл. 5-го всесоюз. Биохим. Съезда: Киев, 1986. - С.151171 -172.

136. Пивненко Т.Н. Некоторые особенности панкреатических протеаз тихоокеанских лососей. Сравнительная характеристика трипсинподобной протеазы //Технология гидробионтов. Владивосток: ТИНРО, 1987. - С. 5464.

137. Пивненко Т.Н. Содержание протеаз во внутренностях дальневосточных лососевых /Т.Н.Пивненко, Л.М.Эпштейн, С.А. Кудинов, М.В. Колодзейская //Тез. докл. 4-ой Всесоюз. конференции «методы получения и анализа биохимреактивов», Рига, 1984. С. 102.

138. Пивненко Т.Н. Субстратная специфичность панкреатических сери-новых протеиназ различного происхождения //Изв. ТИНРО. 1997. - Т. 120.-С. 14-22.

139. Поверин А.Д. Производство сухого ферментативного аминосодержащего гидролизата рыбы «СФАГ-2» //Пищевая промьппленность.-2006.-№1-С.64-68. (1)

140. Поверин А.Д. Протеолитические ферменты в производстве белкового препарата «СФАГ-2» / А.Д. Поверин// Рыбная промышленность.-2006.-№ 1 -С.23-25. (3)

141. Поверин А.Д. Технология получения белкового препарата «СФАГ-2» /А.Д. Поверин //Рыбная промышленность.-2006.-№1-С.20-22. (2)

142. Покровская Л. Рационально использовать биологически активные вещества//Птицеводство.-2000.-№4-С.26-30.

143. Полыгалина Г.В. Определение активности ферментов. Справочник /Г.В. Полыгалина, B.C. Чередниченко, Л.В. Римарева. -М.: ДеЛи принт, 2003.-375с.

144. Попов Н.И. Исследование ферментативного гидролиза мяса кашалота и разработка получения пищевой смеси аминокислот: Автореф. дис. насоиск.канд.техн.наук : 05.18.04-Москва, 1979.-27с.

145. Потребность птицы в питательных веществах /Пер. с англ. И.В. Щенниковой, О.В. Лищенко. -М.: Колос, 1997.- 255с.

146. Пригода A.C. Современное состояние и перспективы получения и использования питательных сред: Производство и применение продуктов микробиологических производств /A.C. Пригода, B.C. Муратов //Обзорная информация -М.: ВНИИСЭНТИ, 1989 . Вып.8.- 56 с.

147. Прушинский Е.В. Водорастворимый рыбный белковый концентрат /Е.В. Прушинский, К.А. Мрочков //Рыбное хозяйство.-1989.-№5-С.83-85.

148. Разумовская Р.Г. Биотехнологические процессы в создании продуктов различного происхождения из водного сырья: моногр. /Р.Г. Разумовская, М.Е. Цибизова; Астрахан.гос. техн. ун-т.-Астрахань: Изд-во АГТУ, 2008.-132с.

149. Разумовская Р.Г. Исследование и разработка технологии получения гидролизатов, белковой массы и концентратов из мелкой рыбы и криля /Автореф. дисс. на соиск. уч. степени к.т.н. -М.: ВНИРО, 1983. 24 с.

150. Разумовская Р.Г. Исследование по технологии белковой массы, гидролизатов и концентратов из криля //Экспресс-информ. /ЦНИИТЭИРХ. Сер. Обработка рыбы и морепродуктов 1979. - Вып. 1.

151. Разумовская Р.Г. Комплексная технологическая схема получения белковой массы, гидролизатов и белковых концентратов//Научные основы пищ. использ. морепрод: Тез.докл. Всесоюз. конф. — Калиниград, 1980. с.56-57.

152. Разумовская Р.Г. Получение гидролизатов, белковой массы и концентратов из мелкой рыбы //Рыбное хозяйство № 6 - 1973. - с.66-69.

153. Разумовская Р.Г. Получение гидролизатов, белковой массы и концентратов из мелкой рыбы //Рыбное хозяйство 1980. - №10 - с.66-69.

154. Разумовская Р.Г. Технология получения новых белковых продуктов: учеб. пособие.-Мурманск, 1990.-97 с.

155. Разумовская Р.Г. Ферментативный гидролиз мелкой рыбы при повышенной температуре и технология производства пищевых гидролизатов и РБК //Изв.вузов СССР. Сер. Пищ. технология № 6 - 1969. - с.58-59.

156. Расулов Э.М. Рыбные гидролизаты /Э.М. Расулов, Д.С. Джаруллаев, Г.И. Касьянова. Краснодар: КрасНИИРХ, 2006.- 120с.

157. Рехина Н.И. и др. К вопросу термоустойчивости белков некоторых видов рыб //Рыбное хозяйство, № 5, 1979. с.53-56.

158. Рехина Н.И. и др. Пищевой продукт из мидий для лечебно-профилактического применения //Рыбное хозяйство. 1995.- № 4 -с. 53-56.

159. Рехина Н.И. и др. Получение рыбных белковых препаратов и изучение условий их хранения //Рыбное хозяйство.- 1978.-№8-С.70-73.

160. Решетников М.Т. Планирование эксперимента и статистическая обработка данных: учебное пособие —Томск: Томск, гос. ун-т систем управления и радиоэлектроники, 2000.- 231с.- ISBN 5-86889-068-Х

161. Ржавская Ф.М. Жиры рыб и морских млекопитающих. М.: Пищевая промышленность, 1976. - 470 с.

162. Рогов И.А. Химия пищи /И.А. Рогов, JI.B. Антипова, Н.И. Дунченко.-М.: КолосС, 2007.-853с.

163. Рубан Б.В. Птицы и птицеводство: учебное пособие /Б.В. Рубан. -Харьков: Эспада, 2002.- 520с.

164. Румянцева Г.Н. Влияние ферментных препаратов протеолитического действия на белоксодержащие сырье //Хранение и переработка сельхозсырья.-2005.- Ж7-С.31-32.

165. СанПин 2'. 1.4.1074-2001 Питьевая вода, гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества.

166. Сарапкина О.В: Совершенствование технологии* производства рыбоовощных пресервов из рыб внутренних водоемов Краснодарского края: Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук : 05.18.01, 05:18.04. Краснодар, 2007.-24 с.

167. Сафронова Т.М. Сырье и материалы рыбной промышленности / Т.М. Сафронова, В.М. Дацун.- М.: Мир, 2004.- 272с.- ISBN 5-03-003720-9

168. Свеженцов А.И. Корма и кормление сельскохозяйственной птицы /А.И. Свеженцов, P.M. Удрзик, И.А. Егоров. Днепропетровск: АРТ-ПРЕСС, 2006.- 152 с.

169. Свеженцов А.И. Нетрадиционные кормовые добавки для животных и птиц //Монография /А.И. Свеженцов, В.Н. Коробко. Днепропетровск: АРТ-ПРЕСС, 2004.- 296с.

170. Семенов С.М. Пептоны, используемые в микробиологии //Обзорная информация. М.: ВНИИСЭНТИ Минмедбиопрома СССР, - 1988. - вып. 4.-с.1-30.

171. Сергиенко Е.В. Разработка технологии ферментированной рыбной муки для стартовых кормов рыб: Автореф. дис. на соиск.уч.ст.канд.техн.наук : 05.18.04.- Москва, 2006.-24с.

172. Слуцкая Т.Н. Биохимические аспекты регулирования протеолиза /Т.Н: Слуцкая.- Владивосток: Изд-во ТИНРО-центра; 1997.-1486.

173. Сметнев С.И. Птицеводство: учебное пособие для высш. с.-х. учеб. заведений /С.И. Сметнев— 5-е изд. перераб. и допол.-М.: Медицина, 1970.-416с.

174. Справочник по химическому составу и технологическим свойствам рыб внутренних водоемов /Под ред. В.П. Быкова.- М.: ВНИРО, 1997.-207с.

175. Телишевская Л.Я. Белковые гидролизаты. Получение, состав, применение- М.: Аграрная наука, 2000.- 295с.

176. Трухачев В.И. Повышение продуктивности птицы и качества продуктов птицеводства /В.И. Трухачев, В.Х. Темиров, В.Р. Каиров //Хранение и переработка сельхозсырья.-2005.-№4-С.44-46.

177. Тряпицына Л.Н. Экология красноперки и густеры дельты Волги в условиях зарегулированного стока /Л.Н. Тряпицына. М.: Наука, 1975.-180с.

178. Фелтвелл Р. Практическое кормление птицы /Р. Фелтвелл, С.Фокс: Пер. с англ. Г.Н. Мирошниченко. -М.: Колос, 1983.- 271с.

179. Филин В. БВМК для кур-несушек /В. Филин //Птицеводство.-2000.-№2-С. 19-21.

180. Фисинин В. Многокомпонентные ферментные препараты /В. Фисинин, Т. Ленкова, Э. Удалов, Г. Бравова //Птицеводство.-2004.-№4-С.24-27.

181. Фисинин В.И. Кормление сельскохозяйственной птицы /В.И. Фисинин, И.А. Егоров, Т.М. Околелова, Ш.А. Имангулов Сергиев Посад: ВНИИТП, 2003.-375с.

182. Хайлова Л.Ф. Изучение кормовых свойств муки- из криля и мексиканского рака при выращивании- цыплят на мясо: Автореф. дис. на соиск.канд.сел-хоз.наук : 06.02.02 — Москва, 1974.-19с.

183. Хо Ван Хоань Исследование по технологии ферментативных гидролизатов из каспийской кильки и получению рыборастительного концентрата (риса, обогащенного гидролизатом): Автореф. дис. на соиск.канд.техн.наук г05.18.04-Москва,1973.-40с.

184. Царенко П. Актуальные вопросы, рационального кормления / П. Царенко //Птицеводство. -1986.-№2-С .21 -24.

185. Цибизова М.Е. Разработка технологии получения белковых продуктов из отходов рыбообрабатывающих предприятий. Автореферат дисс. на соиск. уч.ст.канд.техн.наук 05.18.04 — Астрахань, 2001 — 24 с.

186. Цибизова М.Е. Рыбные гидролизаты как один из компонентов полнорационных кормов для птицеводства /М.Е. Цибизова, К.В. Костюрина //Вестник АГТУ.-2006-№3 (32).- С.243-249.

187. Цибизова М.Е. Критерии оптимизации биотехнологических процессов получения гидролизатов из гидробионтов /М.Е. Цибизова. С.А. Мижуева, К.В. Костюрина //Известия вузов. Пищевая технология 2009 - № 4 (310) - С.74-77

188. Цибизова М.Е., Костюрина КВ., Аверьянова Н.Д. Ферментативная обработка рыбного сырья как один из способов увеличения выхода белковых продуктов //Известия вузов. Пищевая технология 2010 - №*1 (313) — С.17-20

189. Черногорцев А.П. Переработка мелкой рыбы на основе ферментирования сырья-М.: Пищевая промышленность, 1973.- 153 с.

190. Шаршунов В:А. Комбикорма и кормовые добавки: Справочное пособие /В.А. Шаршунов, H.A. Попков, Ю.А. Пономаренко и др.-Мн.: Экоперспектива, 2002.- 440с.

191. Шендерюк В.И: Исследование по ферментативной обработке каспийской кильки.:.Автореферат на соиск. уч. ст. к.т.н. Калининград, 1965. -28 с.

192. Штрауб Ф.Б. Биохимия: Будапешт: Изд-во ATI Венгрия. 1965 -С.364-416224; Эртель JI.Я. Сравнительная оценка рыбного белкового концентрата, полученного двумя способами /К.Е. Бернгард, Г.К. Винокурова //Рыбное хозяйство.-1979.-№7-С.70.

193. Ярочкин А.П. Биотехнологическая утилизация белоксодержащих отходов рыбопереработки. /А.П.Ярочкин и др.//Изв. ТИНРО-центра.- 1997.-Т. 120.-С. 44-48.

194. Adams M.R. е.а. Fermented fish products of South Eest Asia // Trop.Sci, 1985, V 25, № 1, p.61-73.

195. Adams M.R., Cooke R.D., Twiddy D.R. Fermentation parameters involved in the production of lactic acid preserved fish glucose substrates //Inten. J. Food Sci. Fechnol, 1987, V 22, - p.105-114.

196. Adler-Nissen J. Control of the proteolysic reaction and of the level of bitterness in protein hydrolysis processes //J. Chem. Technol and Biotechnol, 1984, V.B. 34, № 3, p.215-222

197. Bhumiratana S., Hill E.B., Amudsin C.H. Enzymatic solubilization of fish protein concentrate in membrame reactor //J;Food'Sci, 1977, № 42, p.1016-1021. ■■ ■

198. Croston C.B. Endopeptidases of saltón caeca:chromatographic separation and some properties //Arch. Biochem. Biophys. 1965. - Vol. 112, N 2. - P. 218-223:

199. Croston C.B. Trypsin enzymes of Chinook saimón //Arch. Biochem. Biophys. 1961. - Vol. .89; N 2. - P. 202 -226.

200. Dannvig B., Berg T. Temperature adaptation of lysosomal enzymes in fi-shis //Comp. Biochem. Physiol. 1978; - Vol.6 I B, N 1. - P; 115 - 118.

201. Enzyme Handbook //Eds. D. Schomburg, M. Salzmann, D.Stephan. Springer-Verlag: Berlin, Heidelberg, New York, London, Paris, Tokyo, Hong Kohg, Barcelona. 1990 1995. Vol. 1-10.

202. Enzyme preparations in food production //Brit. food. 1982. - № 11. -P. 167-169.

203. Hardy R. Fish oil. A state of the art review //World; Fish. 1986. - V.35.-N3. -P. 53-55.; , ,

204. Hassan T.E., Heath J.T. Biological fermentation of fish waste for potential use in animal and poultry//Agrie. Wastes, 1986, v.15, N 1, p. 1-15.

205. Kalac. J. Studies of Herring (Clupea harengus) and-Calepin (Mallotus villosus) pyloric caeca proteases. I; Partialv purification^; separatibm and identification of proteases//Biologia (Bratislava). 1978a. -N33.-P. 485 - 495.

206. Karmas E., Lauber E: Novel products from underutilized fish-using'combined processing technology//J. Food Sci.-1987.-V.52-№ 1-p.7-9.

207. Kim H.R., Meyers S.P., Goldberg J.S. Anionic trypsins from crayfish ge-patopancreas: effect on proteins degradation of tail meat //J. Food Science. -1996. -Vol. 61, N 1.-P. 78-96.(103)

208. Klagsbrun M., Furano A. Methylated amino acids in the proteins of bacterial and mammalia cells. "Archives of biochemistry and biophysics", 1975, 169, №2, p. 529.

209. Klimova D.A., Borukhov S.J., Solovjeva N.I., Balaevskaja T.O., Stron-gin A.Y. The isolation and properties of collagenolytic proteases from crab hepa-topancreas //Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1990. Vol. 166, N3. - P. 1411-1420.

210. Klimova O.A., Borukhov S.I., Solovyeva N.I. et al. The isolation and properties of collagenolytic proteases from crab hepatopancreas //Biochem. Biophys. Res. Com. 1990. - Vol. 166, N 3. - P. 1411 - 1420.

211. Konrad G., Lieske B. Herstellung und verwendung von protein hydroly-saten ein Uberblik. //Leben smittel industrie.- 1979.- № 10-P. 445-449

212. Lindgren S., Plege M. Silage fermentation of fish waste products with lactic acid bacteria //J.Sci Food Agric 1983. - v. 34. - N 10. p. 1054-1068.

213. Mackie J.M. Potential production of powderd and liquid fish products for hyman consumption and animal feed //Fishery Product FAO.- 1974- p. 136-146.

214. Milner J.A. Functional foods and health: a US perspective //British J. Nutrition. 2002. - V. 88. - Suppl. 2. - P. 151-158.

215. Milsson A., Tangle R. Digestive proteases on holocephalian fish Chi-maera monstrosa //Comp. Biochem. Physiol. 1962. - Vol. 31, N 1. - P. 147 -165.

216. Morihara K., Oka T., Tsuzuki H. Multiple proteolytic enzymes of strep-tomyces fradiae production, isolation and preliminary characterization^ Biochem. Biophys. Acta, 1967,139, 2, 382-397.

217. Ney K.H., Retzlaff G. A computer program predicting the bitterness of peptides , esp. In protein hydrolysates, based on aminoacid composition and chainlength ( computer J .) //Shell life foods and beverages. Pros. 4 Inter. Flavor Conf.160

218. Rhodes, 23-26 Jule, 1985 Amsterdam.- 1986.-p.543-550.

219. Ooshiro Z. Studies of proteinase in pyloric caeca of fish. II. Some properties of proteinase purified from pyloric caeca of markerel //Bull. Jap. Soc. Sci. Fish. 1971. - Vol. 37, N 2. - P. 145 - 148.

220. Orban E., Quaglia G.B. Use of various enzymes in the controlled proteolysis of sardina for protein recovery //Res Food Sci . and Nutr. Proc. 6th In-tern.Congr.Food Sci. And Technol, 1983 , v.2. p.181-182.

221. Patent of USA № 4759933 Method for production of protein food products or protein materials in paste state and method for the production of food products from these materials /Uchida Y.

222. Penke B., Ferenczi R., Kovacs K.A. A new acid hydrolysis method for determination of tryptophan in peptides and proteins //Analytical Biochem. 1974. - V. 60. - P. 45-50.

223. Ritkers T.M. Artificial repening of maatyes cured herring with the aid of proteolytic enzyme preparations //Fish. bull. - 1971. — Vol. 69, № 3. - P. 647654.

224. Roberfroid M. B. Global view on functional foods: European perspectives //British J. Nutrition. 2002. - V. 88. - Suppl. 2. - P. 133-138.

225. Rutman M, Heimlich W. The fish protein hydrolysate (F.P.H.) process a targen design approach //The economics, marketing and technology of fish protein concentrate. The MJJ press. 1974, - 159 p.

226. Ushida N. Chomatographic of proteolytic enzymes in Chum Salmon pyloric caeca in sefadex gel chromatodraphy //Bull. Fac. Fish. Hoc. Univ. 1971. —1. Vol.21,N4.-P.3105-3144.

227. Ushida N., Anzai Y., Nishide E. Properties of cationic trypsin from the pyloric caeca of Chum salmon //Bull . Jap. Sos. Sci. Fish. 1986. Vol. 52, N 4. -P. 732 - 735.

228. Ushida N., Tsukayama K., Nichidi E. Properties of two major anionic trypsins from the salmom pyloric caeca //Bull . Jap. Sos. Sci. Fish. 1984. Vol. 50, N 2. — P. 313 — 314.

229. Ushiyama H. Studies of proteolytic enzymes of the Salmon pyloric caeca. II. Purification and some properties of trypsin-like enzymes //Bull. Fac. Fish. Hoc. Univ.-1968.-Vol. 19, N4.-P. 147- 155.

230. Villez E.J. Isolation of the Proteolytic Digestive Enzymes from the Gastric Juise of the Crayfish Orconectes virilis (Hagen) //Comp. Biochem and Physiol. 1965. Vol. 14, N 4. - P. 577-586.

231. Weststrate J. A., G. van Poppel, P. M. Verschuren /Functional Foods,trends and future // British J. Nutrition. 2002. - V. 88. - Suppl. 2. - P. 233-235.

232. Zwilling R., Tomashec V. Amino acid composition of crayfish trypsin //Natyre. -1970 . vol. 228, N 5266. - P. 57 - 58.