автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.04, диссертация на тему:Разработка способов выделения и использования ламинарана

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Литературный обзор

1.1. Общие сведения о бурых водорослях

1.2. Химический состав бурых водорослей . II

1.2.1. Минеральные вещества бурых водорослей

1.2.2. Азотистые вещества бурых водорослей

1.2.3. Липиды бурых водорослей

1.2.4. Полисахариды бурых водорослей

1.3. Продукты, получаемые из бурых водорослей

1.3.1. Получение альгината натрия

1.3.2. Производство маннита

1.3.2.1. Способ спиртовой экстракции при получении маннита

1.4. Общие сведения о ферментах-глюканазах

1.4.1. В - глюканазы

1.4.2. Процесс ферментативного гидролиза ламинарана

1.5. Целж и задачи исследования

ГЛАВА П. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Объекты и методы исследования

2.1.1. Объекты исследования

2.1.2. Методы исследования

3) 2.2. Использование кислых экстрактов для получения ферментативных гидролизатов

О 2.3. Методика обработки экспериментальных данных

2.4. Исследование процесса экстракции ламинарана из ламинарии гл.1.

2.4.2.

2.4.3.

2.5.1.

2.5.2.

2.5.2.Х.

2.5.2.2.

2.5.2.3.

2.5.2.4.

2.5.3. 2.5.4.

2.6.1.

Исследование химического состава водоросли

Содержание ламинарана в технологических пробах,отобранных на различных стадиях производства альгината натрия

Определение оптимальных условий экстракции ламинарана кислотой

Исследование ферментативного гидролиза ламинарана

Сравнительная характеристика различных фермнтных препаратов, пригодных для гидролиза ламинарана

Определение оптимальных условий для действия фермента

Определение оптимального значения рН

Определение оптимальной температуры

Определение оптимальной концентрации : ферментного препарата

Определение оптимальной продальжительнос-ти гидролиза •.•••••••.

Концентрирование кислого экстракта

Характеристика ферментативного гидроли-зата

Использование ферментативных гидролиза-тов из ламинарии

Выращивание кормовых дрожжей на фер-:: ментативных гидролизатах

2.6.2. Сбраживание гидролизатов и получение этилового спирта

2.6.3. Очистка гидролизата

Г.Ч ВЫВОДЫ

Несмотря на значительные масштабы, достигнутые мировой водорослевой промышленностью, и на её,в отдельных случаях, стремительный рост (по данным ФАО (131) в 197$ г* общая стоимость проработанных водорослей во всём мире составляла примерно 765 млн. долларов),данная отрасль в целом в настоящее время остаётся одной из менее изученных, а её экономические и коммерческие возможности в отдельности не отражены достаточно научными трудами.С этой точки зрения большой ин®-терес представляет комплексная переработка бурых водорослей и получение, из них различных веществ., которые в силу своих специфических свойств,, пользуются широким спросом в народном хозяйстве Советского Союза и других стран. Такими веществами являются альгиновая кислота и её различные соли,маннит,ламинаран и др.

Водные растворы альгината натрия используются в качестве загустителей, стабилизаторов, эмульгаторов (3,40,50,149). Мировое производство альгиновой кислоты и альгинатов состав« ляет 17 тыс. т. в год (39).Альгинат натрия используется в текстильной промышленности при окраске тканей, применяется при производстве натурального каучука, высококачественной бумаги, инсектицидов,его вводят в состав обмазки сварочных электродов (16,98,118,149). ч/

В::цищевой промышленной альгинат натрия применяют при осветлении вин и соков, изготовлении мороженого, кремов, сыров, для создания однородной структуры изделий и повышения их устойчивости при хранении (56,57,22,113,143).Альги

- б новые покрытия предохраняют продукт от окисления и обезвоживания при хранении замороженной рыбы, филе, мяса креветок (53, б, 79, 83).

В парфюмерном производстве альгинаты применяют при изготовлении зубных паст, кремов, помад, лосьонов и т.д. (Г., 43, 97, 130).

В медицине алъгинат натрия используется для приготовления мазей от ожогов, кровоостанавливающих порошков, растворимых нитей, как связующее вещество при изготовлении таблеток и пилюль, в качестве заменителя плазмы крови ( б, 58,110, 11$) альгинат натрия способствует снижению в 8 раз отложений радиоактивного стронция в организме человека и животных, без изменения усвоения кальция. Альгиновая кислота в 1,5 - 2 раза снижает всасывание и отложение кобальта-бО, цинка-65 (62,109,148„0.

Потребность мировой промышленности в альгинате натрия быстро возрастает. Запасы бурых водорослей в мире довольно значительны и только в СССР они позволяют вырабатывать до 7000 т альгината в год (П-£»3$).Большой интерес представляет данный вопрос для таких развивающихся стран как Перу, Аргентина, Чили, где имеются значительные запасы бурых водорослей (131). Организация производства альгината натрия (в Перу), увеличение его выпуска и технологическое совершенствование (в Чили, Аргентине) безусловно являются перспективным направлением в экономическом развитии этих стран.

Данный вопрос приобретает особое значение, если учесть и тот фактор, что в большинстве случаев альгинат натрия является незаменимым веществом в силу своих уникальных свойств (146);, что обеспечивает ему наличие постоянного расширяющегося мирового рынка сбыта. В 1973 г. названные выше страны вместе переработали 8000 т водорослей (сырой вес), что составляет незначительную часть имеющихся запасов бурых водорослей (!&)•

В Советском Союзе некоторое количество технического альгината натрия вырабатывает Архангельский водорослевой комбинат из ламинарии сахаристой и дигитата.

В дальневосточных морях основным промысловым видом бурых водорослей является ламинария японская, заросли которой сконцентрированы у побережья Приморья, Сахалина и южных Курильских островов (67). В Приморье потенциальным источником сырья для альгинатного производства является так же ламинария японская искусственного разведения и сопутствующие ей "сорные водоросли" - костария ребристая, ламинария цикоре-видная и др. ( 80, 81, 82). Кроме того в настоящее время бурые водоросли в промышленном масштабе используются и для производства маннита.

В то же время большое внимание заслуживает и другой компонент бурых водорослей - полисахарид ламинаран, содержание которого в них может достигать, по сведению разных авторов ^76*100» 132^,до 40 процентов от сухой массы водорослей. Хотя химическая структура и физические свойства ламинарана в известной мере изучены, а также выявлена возможность его использования в медицине и фармацевтической промышленности (131), как отдельный продукт ламинаран не нашел еще широкого применения или не выпускается.

Учитывая практическую важность вопроса, данная работа посвящена, в рамках комплексной переработки бурых водорослей, установлению возможности использования ламинарана, содержащегося в кислом экстракте - отхода производства манни-та и альгината натрия.

Предлагаемый настоящим исследованием метод обработки кислого экстракта не предполагает каких-либо изменений технологической схемы получения основных продуктов переработки бурых водорослей - маннита и альгината натрия, но способст- 1. ! вует полокительноъ'урешению вопроса загрязнения окружающей сре-Г ды промышленными отходами. í

Целью настоящей работы явились исследования, направленные на разработку технологии ферментативной обработки кислого экстракта - отхода производства альгината натрия и маннита и использование полученного ззидролизата в качестве питательной среды при выращивании кормовых дрожжей для получения спирта. Диссертация включает: введение, обзор литературы, экспериментальную часть, выводы, список литературы и приложения.

ВЫВОДЫ

I. Разработан способ выделения и использования ла-минарана из ламинарии сахаристой, основанный на ферментативном гидролизе полисахарида. Представлена соответствующая ; документация по оформлению авторского свидетельства.

2. Показано, что подавляющая часть ламинарана, содер-дащегося в сухой ламинарии, экстрагируется в процессе кислотной экстракции раствором серной кислоты-б ходе маннитного а альги.натного-производства -:. Во всех остальных фракциях найдено незначительное количество ламинарана.

Тем самым, установлена необходимость проведения кислотной экстракции ламинарии для отделения водоросли от ламинарана, загрязняющего получаемый из нее альгинат натрия и снижающего его качество.

3. Определены оптимальные условия экстракции ламинарии в процессе производства альгината натрия, обеспечивающие наибольший переход ламинарана в кислый экстракт: температура-50°С, продолжительность! часи; применение серной кислоты 1$ной концентрации при размере кусков водоросли 5 мм. Экстракция должна проводится при постоянном перемешивании.

4. Изучена возможность получения глюкозы из ламинарана путем его ферментативного гидролиза. Исследованы различные ферментные препараты, способные гидролизовать лами-наран до глюкозы. В результате найден фермент концевого действия - экзо - 1-ЗтВ-глюканаза (целлшандин Г-Юх), как наиболее эффективный, и определены для него оптимальные условия: температура-Ч6°С, рН среды-4,0; концентрация добавляемого фермента - 0,2 мг на I мл экстракта, содержащего до 20 мг ламинарана (до 2$).

5. Изучено- влияние степени концентрации ламинарана в кислых экстрактах на продолжительность и глубину его ферментативного гидролиза. Показана возможность концентрирования экстракта до содержания в нем ламинарана не более 2%, Соответственно^ определена продолжительность гидролиза :

9-10 час, при общем содержании ламинарана в экстракте 0,5-1% 2Й-24- час. при содержании ламинарана до 2,0

6. Получен ферментативнй гидролизат с высоким содержанием глюкозы и использован в качестве питательной среды для выращивания кормовых дрожжей рода "Кандида".

Выход абсолютно сухих дрожжей составил 9,4 кг 1ъг кислого экстракта - отхода альгинатного производства. Показана так же возможность использования гидролизата для сбраживания и получения этилового спирта.

7. Разработана инструкция по получению ферментативного гидролизата из ламинарии сахаристой для его использования в качестве питательной среды при выращивании кормовых дрожжей, получении этилового спирта, \

1. Антонова М.А., Дядицына А.ц. "Рекомендации по совершенствованию технологии получения маннита из ламинарий", инв. № 0282702I077I5.Отчет СевПинро,1984.

2. Андреев A.A., Брызгалов Л.И. Производство кормовых дрожжей. М.: Лесная пром-ь, 1970, сД2.

3. A.C. Ш 53 III4I5 (Япония). Гранулированный пищевой продукт. Авт. изобрет. Юфуми И. Опубл. 19.03.80.

4. A.C. № 829089 (СССР). Способ производства зефирного крема. Авт. изобрет. Баранов B.C., Сафонова Л.В., Михайлов B.C. Опубл. в.Б.И., 1981, №18.

5. A.C. № 70308 (СССР). Способ производства заварного белкого крема. Авт. изобрет. Баранов B.C., Сафонова Л.В., Василенко З.В., Слабко О.И. Опубл. в Б.И., 1979, № 46.

6. A.C. № 659130 (СССР). Способ производства сбивных кондитерских масс. Авт. изобрет. Чумак Ж.Ч., Мухин М.А., Толстогузов В.Б. Опубл. в Б.И. 1979, ¡12 16.

7. A.C. й 598933 (СССР). Способ получения ферментного препарата, содержащего ¡В 1,3 и ;в - 1,6 глюка-назы. Авт. изобрет. Тиунова H.A., Зайкина И.В., Коб-зева Н.Я. Опубл. в Б.И., ¡£ Ц, 25.03. 1978.

8. A.C. №482494 (СССР).Способ получение целлюлозы.ч

9. Авт. изобрет. Лозякова Л.С., Фениксова Р. В., Коже микина О.П. и др. Опублик. в Б.И., 1975,1» 32.

10. Бабьева И.П.,Голубеев В.И.Методы выделения и иденти -фикации дрожжей«120 сЛищ. пром-сть.

11. Барашков Г.К.Сравнительная биохимии водорослей. Москва.Пищ. пром-сть,1972,с. 98.

12. Барашков Г.К. К сравнительной биохимии водорослей. (Лаб. биологии морских водорослей.Зав. Г.К.Барашков). Труды ."Мурманского морского биологического института. 1962, вып. 4, с. 47-58.

13. Биохимические методы анализа растений.Под ред.А.И. Бояркина и др. М.:Изд-во иностр. лит,1960,с. 205.

14. Блинова Е.И. Ресурсы морских водорослей и трав в океане .В сб.: Биологические ресурсы мирового океана. М.: Наука,1979,с. 179-192.

15. Блэк В.А.Методы химии углеводов.Перевод с анг. под ред. Кочеткова Н.К.,"Мир", Москва,1967,с. 371.

16. Ведринский А,И.Труды Архангельского водорослевого института.Т.I, 1938,с.4.

17. Возжинская В.Б., Блинова Е.И. и др.Промысловые водоросли СССР.Справочник.Москва,Пищ. пром-сть,1971,с.270.

18. Головина И.Г.,Гужова Э.П.»Богданова Т.И.,Логинова Л.Г. О литических ферментах, образуемых тер мотолерантным актиномицетом

19. Микробиология,1973,Т.42,№4,с.620-626.

20. Грачёва И.М. Технология ферментных препаратов. Пищ. пром-сть,1968,164 с.

21. Диксон М., Уэбб Э*. Перевод с анг. Гинодмана Л.М. и Левянт М.И.Ферменты.Мир,1966,130 с.

22. Дудкин М.С., Медведева Е.И. В рощувания кормовых др дж в на г дрол затах очерету, м кроб о . Журнал А.Н. УССР, 1961, т. 23, fö 35.

23. Инструкция № 178-77 "Технология производства альви-ната натрия технического из бурых водорослей.

24. Кизеветтер И.В., Суховеева М.В., Шмелькова Л.П. Промышленные морские водоросли и травы дальневосточных морей. М.: Легкая и пищ. пром-есть, 1981, 113 с.

25. Коновалов C.I., Воротило С.И. Исследование литическых ферментов и перспективы их использования. Прикладная биохимия и микробиология, 1977, т. 13, № 6, с. 819-829.

26. А.Н. Илялетдинов и др. Алма-Ата. Наука, Каз. ССР, 1974.

27. Лукьянчук А.Ф. Продукты моря.Владивосток,Дальиздат, 1969, 12бо.

28. Маринченко В.А., Метюшев Б.Д.,Швец В.Н.Технология а спирта из мелассы. Из-во объединения "Вища школа". Киев,1975,283с.

29. Нейланд Д.Ж., Штумп Ф.П. Очерки по химии ферментов. Перевод с анг. Ж.Г. Шмерлинг и С.Э. Шноля, под ред. проф. С.Я. Капланского.Москва,Иностр. лит-ры,1958, с. 86-124.

30. Общая технология пищевых производств.Под ред.

31. Н.И. Назарова.Москва,Легкая и пищевая пром-сть,198Б, е. 189.54. Ост 1574-74.Альгинат натрия технический,СССР. Группа Л. 27. Введён 01.01.75.

32. Подкорытова А.В. Влияние предварительной обработки морской капусты на выход и качество аль гината натрия. ТИНРО.Рыбное хозяйство,II,1985,с. 73-75.

33. Пат. й 1480967 (Великобритания).Альгиновый препарат. Опубл. 27.07.77.

34. Пат. fö I49I997 (Великобритания). Состав загустителя для пищевых продуктов. Опубл. 16.II.77.

35. Пат. № 2350097 (Франция). Новый порошкообразный состав кз альгината кальция. Опубл. 6.01.78.

36. Производство кормовых дрожжей, выращиваемых на мелас-сной барде. Регламент? Государственный плановый комитет Совета Министров УССР. Украинский НИИ Научно-технической информации и технико-экономических исследований. Киев, 1968, с.

37. Производство кормовых дрожжей "Кандида"" на Барском спирто-дрожжевом комбинате Подольского Совнархоза. Материалы республиканской-межзаводской школы. Киев, 1964, 36 с.

38. Под ред. Г.Г. Пашкарпова. Киев, Наукова думка, 1972, с. 85-94.

39. Родионова Г.С., Родина Н.И. Влияние pH на накопление биомассы дрожжей на гидролизных средах. "Гидролизная и лесохимическая пром-сть". 1971, ?й 7. стр.67.

40. Рафалес Ламарк Э.З., Николаев В.Г. Некоторые методы планирования и математического анализа биологических экспериментов. Киев: Наукова думка, 1971, ИЗ с.5» Рекомендации по увеличению выработки маннита из ла1. Отчетминарии. ПИНРО. Архангельск, 1983.

41. Ф.л Тищин В.Е. Технология производства и использования агара, фурцелларана и альгината за рубежом. М.: ЦНИИТЭИРХ. 1971. Обзорн. инф., сер. 3, вып, 4, с. 36.

42. Трегубов H.H., Трегубова М.М. Технохимический контроль крахмало-паточного производства. М.: Пищ. пром-сть, 1974, с.64,

43. Тиунова H.A., Кобзева Н.Я., Зайкина И.В., Елекова Л.А., Назарова Н.И. 1,3 В - глюканазы актиномицетов, 1983, Микробиология, т. 52, ¡¡2 4, с. 586-590.

44. Тиунова H.A., Родионова H.A., Мартиновнч Л.И.1. Ферментная система ,гндролизующая целлюлозу. Прикладная биохимия и микробиология, 1980, т. 16, I, с. 40-45.

45. Ферментация и технология ферментов. Под ред. К.А. Калу-нянца. М.: Легкая пром-сть, 1983, 336 с.

46. Ферменты. Из серии "Основы молекулярной биологии". Под ред. акад. А.Е. Браунштейна. Гл. Ш: Ферментативная кинетика." В.А. Яковлев. М.: Наука, 1964, с. 61, 75.

47. Цзи Мин-хоу, Чжан Чнь-ся. "Хайян" юй хучжао", 1962«, 4, 161, РЖБ, 1964, 22 В 35.79» Чепмен В. Морские водросли и их использование. Изд-во иностр. лит-ры, 1953, 246 с.

48. Ященко Г.К. Научн. докл. высш. школы. Биологические науки, й I, 1963, с. 149«86,87.88,89.

49. Barry V.C. (University College,Galway).The preparation, propierties,and mode of ocurrence of laminarin. The scientific proceedings of the Royal Dublin Society.1938, vol.21,p.615-622,

50. Barry ¥.0. (University College,Galway}«The constitution of laminarin«Isolation of 2i4:6-Trimethylglucopyrano-se.The scientific proceedings of the Royal Dublin Society. 1939, vol. 22, p. 59-67.

51. Bidwell R.G.S. ,Krotkoia G. ,Reed G.B.Paper choromato-grsphy of sugars in plants.Canadian journalof Botany, 1952,vol.30,U03,P*291-305.

52. Bird G.M«,Haas P«0n the nature of the cell wall cons-tituentsr>6f Laminaria sp. mannuoronic acid.Biochem. journal.1931,vol.7,H°25,p.403.Von A -und d-d-mannuron saure.Biochemical journal.1935,vol. 100,p.397.

53. Black W.A.P.The sesonal variation in the combined L-fucose content of the common British Laminaria-dae and fucaceae.Journal of the sci. food and agricultu-ry. 19 54, vol .5, №9, p. 44 5.

54. Black W.A.P#,Cornhill W.J. ,Dewar E.T.,Woodward F.N. Manufacture of algal chemicals«III.laboratory scale isolation of laminarin from brovm marine algae.Journal of applied chemistry.London.1951,vol.1,part 211, p.505-517.

55. BullA.T.,Chesters C.I.C.The biochemistry of laminarin and the nature of laminarinas.Advances to enzymology. 1966,vol.28,p.325-361.

56. Colin: H.,Ricard P.P.,C.S. Acad. Sci.I930,vol.199,p.1514.

57. Colin H.,Ricard P.P.,Comt. Rend.1929,Vol.188,p.1449.

58. Dewar E#T.The-ocurrence of d-xylose and ¿-galactose in brown seaweeds.Chemistry and Industry.1954, U°27,p.705.

59. Elyakova L.A.»Zvyagintseva J.H.A study of the lamifnarins of some fareastern brown seaweeds.Carbohydrate research.Amst erdam.1974,vol.34,p.241-248.

60. Ericson L.E.»Wwidoff E. and Banidi Z.G.(Divisin of food chemistry,Royal Institute of technology,Stockholm, Sweden). Acta chemica scandinava.I953,vol.7, U°6,p.974-979.

61. Fisher E.G.»Dorfel Helmut.(Aus dem Chemischen Institute der Universität WpxzburgKDie Polyuronsauren der Braunlangen,(Kohlenhydrate der Algen I).I955, bd.302,helft 4-6,p.186-203.

62. Fleming M.,Hirst E.»Mariners D.J.The constitution of laminarin.Proceedings of the Fifth International Seaweed Symposium,I965.(Galifaks,Canada).Pergamon Press, 1966.

63. Folch et.al.A simple method for isolation and purification of total lipids from animal tissues. Journal of biological chemistry.1957,vol.226,p.497.

64. Frei Eva,Preston R.D.(Botany Departement»University of Leeds).Variants in the structural polysaccharides of algal cell walls.Nature.1961,vol.192,№4806, p.939-943.

65. Friedlaender M.H.G.»Cook W.H. »Martin W. (Division of-Applied Biology,National Research Laboratories,Ottawa, Canada). Molecular weight and hydrodynamic properties of laminarin.Biochimica et biophysica acta. 1954, vol. 14,1T°I, p. 136-144.

66. Haas P.,Hill T.Annals of botany.1933,vol.47,H°4, P.579.

67. Heilbron J.H.»Carter P.W.»Lythgoe B.The lipochromes and sterols of the algal classes.Journal of the chemical Society.1936,p.1572.

68. Hesp R.»Ramsbotton B.Effect of sodium alginate in inhibition uptake of radioostrontium by human body. Nature,196 5,vol.208,p.5017.

69. Hirst B.L.Polisaccharides of the marine algae.Pre-sential adress.Proceedings of chemical society.1958, july,p.177.

70. Imeson A.P.»Mitchell J.R.»Ledward D.A.RheologicaS properties of spinning oopes and spun fibres produ-cedffrom plasta-alginate mixtures.Journal of food technology.1980 »vol.15,W°3,p,319-327.

71. Leigh A.M.Alginates in mode in food production. Gordian. 1977, vol. 77, №2, p. 39-42.1.i. Lindberg B.Low-molecular carbohydrates in algae.

72. Investigation of Fucus vesiculosus.(Organisk kekemiska Institutione,Kungl. Ttekniska Hogskolan, Stockholm,Sweden).Acta chemica scandinava.1953,№7, p.1119-1122.

73. Lindberg B.Low-molecular carbohydrates in algae.

74. X2.Investigation of Porphyra umbilicalis.Acta cheir&ca scandinava.1955,№9,p.1097-1099.

75. Lindberg B.,Mc Pherson J.Low-molecular carbohydrates in algae.V.Investigation of Laminaria cloustoni. Acta chemica scandinavica.1954,vol.8,n09,p.1547-1550.

76. Lindberg B.,Mc. Pherson J.Low-molecular carbohydrates in algae.VI.Lamnitol,a new C-mrthyl inositol from Laminaria cloustoná-.Acta chemica scandinavica.1954, vol.8, №10,p. 1875-1876.

77. Lunde G.,Heen E.Untersuchungen uber alginsaure. Kolloid-Zeitschrmft.Dresden.1938,bd.83,heft 83, p.202.

78. Lunde G.Angewandte chemie.Berlin.1937,heft 50,p.731.

79. Manners D.J.,Wilson I.Studies on^jB-glucanases.Some propierties of a bacterial endo^B(l-3)-glucanase system.Biochemical journal. 1973,vol. 135.,№1 ,p. 11-18.

80. Mautner H.G.The chemistry of brown algae.Economist. 1954,vol.8,p.178.

81. Moore A.E.,Stone B.A.A^-1,3-glucan hydrolase from nicotiana glutinosa.II.Specificity action pattern and inhibition studies.Biochimica et biophysica acta. 1972,vol.258,H°1,p.248-264.

82. Mori T.Seaweed polysaccharides .Advances in carbo-hidrochemistry.1953,vol,8,p.315.

83. Munda I.Rapp. et proc. verb. Rreun. Cmmiss. internat. Explorat. Sci. Mer mediterr.I96l,vol.l6, №2,p.509.

84. Naylor J.Producción,comercio y utilización de algas y productos derivados.Documentos técnicos de la PAO sobre la pesca, №159.Organización de las Naciones Unidas para la agricultura y la alimentacion.Roma, 1976,73p.

85. NelsonT.E.,Lewis V/.A.Separation and characterization of the soluble and insoluble laminaran.Carbohydrate research.Amsterdam.1974,vol.33,p.63-74.

86. Nizizawa K.,Eanda L.Structural investigation of a laminaran isolated from Eisenia bieyelis.Nature, I96l,vol.192,№4807,p.1078-1080.

87. Percival E.G.V.,Ross A.G.The cellulose of marine algae, Nature.1948,vol.162,№4127,p.895-896.

88. Percival E.G.V.,Ross A.G.The constitution of laminarin. Part II.The soluble laminarin of Laminaria digit at a. Journal of the Chemical Socisrty, London 19 51, p.720-726.

89. Peat Stanley,Vßielar W.J. ,Lawley,„H.G.The structure of laminarin.Part I.The Main polymeric linkage.Journal of the Chemical Society.1958,p.724-728

90. Peat Stanley,Whelan W.J.,Lawley H.G.The structure of laminarin.Part II.The minor structural features. Journal of the Chemical Society.1958,p.729-737.

91. Ricard M.P.Bulletin of the chemical biology society. I93I,vol.13,P.417.

92. Ricard M.P.Institute oceanographique Paris.Paris. 1930,vol.8,p.101.

93. Schmiedeberg J.E.O.Gesellschaft deutscher naturforscher und arzte»Leipzig,Tageblatt der Versammlung, 1885. №53, p. 427.

94. Shroff P.'Chemicals from seaweed.Pood manufacture. 1962,vol.37,№7, p.328-330.143» Semling FfHarold V.Pood industry faces impact of new truching legislation,regulatory actions.Pood process, 1978, vol.39, №4,p. 17-20.

95. Somogyi Michael.Laboratory of the Jewish Hospital of St. Louis»Missouri.Determination of redaccing sugar.Journal of Biological chemistry.1952,vol.195, №1,p. 19-23.

96. Sizer I.W.Effects of temperature on enzyme kinetics. Advances in Enzzymology and related sublets of biochemistry. 1943,vol.3»P•3 5-6 2.

97. Silverthorne W.,Sorensen P.E.Marine algae as an economic resouree.Prepr. mar. techn.I97I,Soc. annu. meet.,U°17,p.523-533.

98. Discovery of cholesterol in some red algae«Science •

99. Webber E.R.Algnmates from seaweed.Pood manufacture. 1962,vol.37,p.328-330.1. ПРИЛ01ЕНИЯ1. ПРОЕКТ

100. ЖВХНОДОГИЧЕСКАЯ ИНСТРУКЦИЯпо получению ферментативного гидролизата из ламинарии

101. Сырьё и вспомогательные материалы

102. Технологический процесс получения ферментативного гидролизата состоит из следующих операций:- фильтрация- концентрирование- нейтрализация«- ферментативный гидролиз- хранение

103. Описание технологического процесса31. Фильтрация экстракта

104. Экстракт очистить от водоросли,песка и других механических примесей на роторном фильтре, и раствор собрать в специальные сборники.

105. Концентрирование кислого экстракта

106. Нейтрализация кислого экстракта

107. Нейтрализацию кислого экстракта производить в ферментёрах.

108. К кислому экстракту ( рН 2,6-3,0) добавить раствор едкого натра ОДН-ной концентрации, рН раствора в конце процесса нейтрализации должна быть 4,0-4,5.

109. Ферментативная обработка экстракта

110. Содержание ламинарана в экстрактах опредилить в заводской лаборатории (по методу Шамодьи-Нельсона в соответствии с методическим руководством по контролю производств^у35. Хранение гидролизата

111. Полученный ферментативный гидролизат перекачивают в чаны для выращивания дрожжей или брожения. . Срок хранения гидролизата до 20ч,

112. УТБЕК1ДАЮ замдиректора по науке ШШ продуктов брссения доктор "^ёзкнаук профессор1ГУ Г/-I * •»л/1.- " ¡'С<' х с ■ »•'. т. ! .л! у .(

113. Г, Москва 22 февраля 1985 г, АКТ

114. Зав. сектором селекции и биохптлии дролзей БШШ продуктов брспения доктор1. А.С.Тихшлф&а .

115. Ст.каучн.сого., канд.техн.наук1. Л.И.Зоронова

116. Ст.научн.созр. Института биохимии игл.А.Н.Баха А11 СССР, ка^ибиоя.наук ^¡с ф£-(С\ Н.А.Тиунованаучн.со^р.1. Н.Я.Кобзева