автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Получение, фракционирование и идентификация пищевых растительных фосфолипидов

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Источники, фракционный состав и свойства фосфолипидов.

1.2. Получение фосфолипидов: выделение, идентификация, фракционирование и очистка.

1.3. Опыт и перспективы практического применения фосфолипидов в отраслях народного хозяйства.

2. Экспериментальная часть. Постановка экспериментов, объекты и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Порядок проведения экспериментальных исследований.

2.3. Общие методы исследования:.

- сухие вещества;

- пеновзбиваемость;

- устойчивость пены;

- кислотность;

- жир;

- органолептические показатели.

2.4. Специальные методы исследования:.

- подготовка растворителей;

- извлечение свободных липйдов;

- извлечение связанных липидов;

- очистка фосфолипидов от углеводов;

- очистка фосфолипидных фракций;

разделение фосфолипидов методом высоковольтного электрофореза, тонкослойной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии;

- регистрация ИК - спектров;

- подготовка неионогенного сорбента и разделение компонентов фосфолипидного концентрата. 2.5. Математическая обработка результатов.

3. Модифицированное получение комплексов. Физико-химические свойства индивидуальных фосфолипидов.

3.1. Обоснование и разработка модифицированных технологических схем получения фосфолипидов из семян сои, подсолнечника.

3.2. Физико-химическая характеристика индивидуальных фосфолипидов из растений.

4. Разработка рациональных методов фракционирования, и идентификации фосфолипидов.

4.1. Идентификация фосфолипидов на основе высоковольтного электрофореза.

4.2. Хроматографическое разделение в тонком слое.

4.3. Разделение фосфолипидов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

4.4. Обоснование выбора сорбента и препаративное разделение фосфолипидов методом колоночной хроматографии.

5. Разработка практических рекомендаций по получению, анализу и применению фосфолипидов в питании человека.

5.1. Характеристика и рекомендации по получению и анализу фосфолипидов.

5.2. Исследование условий и оценка возможности применения фосфолипидов в производстве молочных продуктов.

6. Выводы.

7. Литература.

Актуальность работы. Уникальное строение природных фосфолипидов, в молекулах которых одновременно находятся гидрофобные и полярные фрагменты, предопределяет их незаменимую роль во многих важнейших биологических процессах. Так, в качестве компонентов клеточных мембран фосфолипиды распространены во всех типах живых организмов, они широко применяются в медицине, пищевой промышленности, в производстве современных косметических средств.

Учитывая современные тенденции пищевой технологии, трудно переоценить их значение в получении биологически активных добавок для производства функциональных продуктов питания, что, как известно, имеет огромное социальное значение. Ж

В разработке технологий получения препаратов важное значение имеет рациональное использование ресурсов и их совместимость с технологиями пищевых продуктов. Информационные данные и опыт работы отечественной и зарубежной промышленности указывают на очевидные преимущества семян различных масличных культур и продуктов их переработки как источников функциональных фосфолипидов.

Однако, несмотря на высокую массовую долю суммарных фосфолипидов в растительных объектах, следует отметить их химическое разнообразие, тесно связанное с особенностями физико-химических, а следовательно, функционально-технологических свойств.

Имеющиеся данные об опыте производства и применения фосфолипидов из семян сои и подсолнечника указывают на экономическую целесообразность производства, в месте с тем задачи, связанные с разработкой препаратов заданной чистоты и функциональности требуют дальнейшей разработки как в направлении технологии разделения фракций, так и получения препаратов заданного качества и свойств. Принципиально новое научно практическое значение имеет исследование возможностей 5 максимального использования вторичных продуктов и отходов переработки семян в качестве источников фосфолипидов и разработка технологий соответствующих препаратов питания и производства пищевых продуктов.

Цель-диссертации. Состоит в обосновании и разработке препаратов растительных фосфолипидов для питания в качестве биологически активной добавки и производстве пищевых продуктов.

Для достижения поставленной цели в работе решались следующие задачи: фракционирование и идентификация фосфолипидов семян сои (Glycine L), подсолнечника (Htlianthuc L.) и отходов маслоэкстракционных производств; исследование ионных форм и физико-химических свойств фосфолипидов; разработка усовершенствованной технологической схемы получения препаратов фосфолипидов;

- определение основных классов фосфолипидов и их количественного содержания в концентратах методом тонкослойной хроматографии в комплексе со сканирующим устройством; разработка способа препаративного разделения фосфолипидного концентрата на фракции методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на нормально-фазовом сорбенте; применение спектральных методов анализа для идентификации функциональных групп фосфолипидов; обоснование и разработка рекомендаций по применению препаратов фосфолипидов для питания человека, в производстве пищевых продуктов.

Научная новизна диссертационной работы заключается в следующем:

1. Расширены теоретические сведения о физико-химических свойствах растительных фосфолипидов. 6

2. Впервые разработан и запатентован способ разделения фосфолипидов на неионогенном сорбенте из сверхсшитого полистирола.

3. Методом ИК - спектроскопии впервые установлено, что решающее влияние на гидратированные фосфолипиды оказывает не только природа полярных групп, но и их ионное состояние. Полученные данные служат теоретической основой в реализации миграционных способов разделения фосфолипидов, а также интерпретации биохимического поведения фосфолипидов в биотехнологических процессах с их участием.

4. Установлено наличие и исследованы ионные формы фосфолипидов, обоснована возможность разделения методом высоковольтного электрофореза, тонкослойной, высокоэффективной жидкостной хроматрафии и препаративного разделения на неионогенном сорбенте МХДЭ - 100.

Практическая значимость: Разработаны методики анализа и микромасштабного выделения индивидуальных фосфолипидов с использованием электрофоретического и хроматографических методов.

Опытные образцы концентратов и информационный справочный материал демонстрировался в г. Красноярске на выставке, в рамках конференции «Агроэкология и устойчивое развитие регионов». Методики выделения и разделения фосфолипидов внедрены в учебный процесс на химическом факультете ВГУ.

Предложены усовершенствованные схемы выделения фосфолипидов, из которых исключено применение высокотоксичных растворителей. Новизна технических решений доказана патентованием разработок.

Показана возможность применения фосфолипидов в качестве биологически активной добавки в питании и производстве пищевых продуктов. Разработан ИК - спектроскопический способ контроля качества фосфолипидов как биологически активной добавки в молочных продуктах.

1. Обзор литературы.

ВЫВОДЫ

1. В развитие практики отечественного производства биологически активных веществ, предложены модифицированные технологии получения фосфолипидов из семян подсолнечника, бобов сои и отходов маслоэкстракционных производств. Выход фосфолипидного концентрата по модифицированной технологической схеме из бобов сои составляет 75 -77%, из семян подсолнечника 65 - 70%, фосфолипидного концентрата отходов масложирового производства - 55 - 61%. Показана целесообразность использования не только семен растений, но и отходов маслоэкстракционных производств.

2. Установлено, что фосфолипидный состав концентратов включает от 4 до 5 основных фракций в зависимости от используемого сырья, фракционный состав фосфолипидов бобов сои, семян подсолнечника и отходов масложирового производства не идентичен по набору индивидуальных фосфолипидов.

3. Доказано и научно обосновано, что фосфолипиды имеют несколько (от 2 до 4) ионных форм в водных растворах в интервале рН = 2 - 14, которые обладают разными термодинамическими и физико-химическими характеристиками.

4. Разработан, научно обоснован и запатентован способ препаративного выделения отдельных фракций и индивидуальных компонентов методом

123 колоночной жидкостной хроматографии из фосфолипидного концентрата на неионогенном сорбенте из сверхсшитого полистирола (патент №2169734).

5. Теоретически обоснован и экспериментально оптимизирован метод разделения фосфолипидного концентрата на индивидуальные компоненты с помощью высоковольтного электрофореза.

6. Выделенные фосфолипидные концентраты успешно апробированы в качестве биологически активных добавок в молочных продуктах.

124

Если при исследовании семян сои было установлено, что по мере созревания последних гидрофильные свойства извлекаемых фосфолипидов значительно повышаются, то такие же опыты, проведенные другими авторами с семенами подсолнечника, не подтвердили эти выводы. Полученные результаты, позволили сделать заключение, что независимо от степени зрелости семян содержание негидратируемых фосфолипидов в маслах составляет 40-60% [33, 58].

Таким образом, степень зрелости существенно не влияет на содержание негидратируемых фосфолипидов в маслах, извлеченных в мягких условиях.

В общей массе сырья, поступающего на переработку, возможно присутствие семян различной степени дефектности. В связи с этим необходимо знать, как влияет порча семян на формирование гидрофильных свойств фосфолипидов [54].

В табл. 4 приведены данные по влиянию неблагоприятных условий хранения семян подсолнечника на формирование гидрофильных свойств фосфолипидов.

1. Технология переработки жиров /Н. С. Арутюнян, Е. П. Корнена, А. И, Янова и др.; под ред. проф. Н. С. Арутюняна.-2-е изд., перераб. и доп. -М.: Пищепромиздат, 1998. - 452с.

2. Арутюнян Н. С., Корнена Е. П. Фосфолипиды растительных масел. -М.: Агропромиздат, 1986.- 256 с.

3. Щербаков В. Г. Научная школа технической биохимии растительного масличного сырья // Пищевая промышленность. 1998. - № с. 28.

4. Щербаков В. Г. Технология получения растительных масел. з-е изд., перераб. и доп. - М.: Колос, 1992. - 207 с.

5. Беликов И. Ф., Ключкин В. В., Моисейченко Л М. Технологическая оценка семян сои в зависимости от степени их зрелости. //Масло-жировая промышленность, 1968 г., №8, с. 7-10.

6. Арутюнян Н. С., Копейковский В. М., Аришева Е. А. И др. Влияние степени дефектности семян подсолнечника на гидратируемость фосфатидов. // Масло-жировая промышленность., 1973 г., №9, с. 3 6.

7. Арутюнян Н. С., Копейковский В. М., Аришева Е. А. И др. Влияние степени лузжистости ядра на качественные показатели подсолнечного масла. //Масло-жировая промышленность., 1973 г., №5, с. 15 20.

8. Сибирцев А. И., Моисейченко Л. М., Мацук Ю. П. Влияние степени зрелости семян сои на качество масла. /Труды ВНИИЖ., 1967 г., вып. 26, с. 28-31.

9. Туманов А. Н. Утилизация отходов масложирового производства // Пищевая промышленность. 1992. - №5, с. 13 - 14.

10. Руководство по технологии получения и переработки растительных масел и жиров. /Под ред. А. Г. Сергеева.- Л.: ВНИИЖ, 1973 г., т. 2, с. 13- 48.

11. Руководство по методам исследования, технохимическому контролю и учету производства в масложировой промышленности. /Под ред. А. Г. Сергеева.- Л.: ВНИИЖ, 1974 г., т. 6, с. 48.125

12. Мачигин В. С., Щербакова JI. Н. Очистка сточных вод предприятий масложировой промышленности// Масложировая промышленность. 1988. Вып.7. - С. 1-28.

13. Тимофеенко Т. И., Воскобойникова Г. В., Арутюнян Н. С., Белохвостиков И. И. Резервы повышения эффективности использования вторичных сырьевых ресурсов// Масложировая промышленность. 1988. Вып.4.-с. 1-24.

14. Мороз 3. М. Использование отходов подсолнечника на корм скоту. -Л.: Колос, 1979 г.-79 с.

15. Щербаков В. Г. Технология получения растительных масел. М.: Пищевая промышленность, 1977. - 168 с.

16. Столяров Б. В., Савинов И. М., Витенберг А. Г., и др. Практическая газовая и жидкостная хроматография: Учебное пособие. СПб.: Изд - во С -Петербургского ун - та. 1998. с. 612.

17. Ленинджер А. Биохимия. М.: Мир, 1976.с. 957.

18. Алиев А. А. Липидный обмен. М.: Колос, 1980. - 381 с.

19. Верещагин А. Г. Биохимия триглицеридов.-М.: Наука, 1972.-308 с.

20. Щербаков В. Г. Биохимия и товароведение масличного сырья. М.: Колос, 1991.-210 с.

21. Арутюнян Н. С. Некоторые особенности системы глицериды -фосфатиды и факторы, определяющие нарушение ее устойчивости. /Труды ВНИИЖ, 1980 г., с. 3 12.

22. Белобородов В. В. Основные процессы производства растительных масел. М.: Пищевая промышленность., 1966 г. - 478 с.

23. Каршиев X., Шустанова Л. А., Акрамов С. Т. Фосфолипиды. -Химия природных соединений., 1976 г. №4, с. 535 536.

24. Gunstone F., Fatty Acid andXipid Chemistry. Blackie Academic and Professional, London, England, 1996, 252 pp.

25. Кучеренко H. E., Васильев A. H. Липиды. К.: Вища школа, 1985.247 с.126

26. Knapp D. R., John Wiley & Sons Inc., Handbook of Analytical Derivatization Reactions, New York, 1979, 741pp.

27. Корнена E. П., Шведов И. В., Литвинова Е. Д., Арутюнян Н. С. Состав и некоторые свойства фосфолипидов, выделенных из нейтрализованного подсолнечного масла. //Масложировая промышленность, 1976, №11, с. 16-19.

28. Мгебрешвили Т. В., Коваленко Е. С., Артюшков В. Н. И др. Рафинация растительных масел с применением термокоагуляции. //Масложировая промышленность, 1980, №9, с. 13 18.

29. Попова В. Н., Ахундажнов А. И., Тучкова Л. М., и др. Рафинация хлопкового масла эмульсионным методом. //Масложировая промышленность, 1980, №3, с. 22 25.

30. Сергеев А. Г., Стерлинг Б. Я., Тросько У. И. И др. Рафинация хлопкового масла. //Масложировая промышленность, 1980, №1, с. 30 32.

31. Меламуд Н. Л., Чеботарева Г. В., Данилова Т. А. И др. Гидрирование фосфатидов подсолнечного масла на суспендированных катализаторах. /Труды ВНИИЖ, 1980, вып 26, с. 295 303.

32. Чеботарева Г. В., Меламуд Н. Л., Майоров Э. М. Каталитические реакции в жидкой фазе. Алма-Ата: Наука, 1970, с. 58 - 62.

33. Литвинова Е. Д., Арутюнян Н. С., Аришева Е. А. Гидратируемость фосфолипидов подсолнечных семян. Масложировая промышленность, 1983, №8, с. 23-30.

34. Винюкова Н. П., Корнена Е. П., Арутюнян Н. С. и др. Гидратация растительных масел растворами поляризующих соединений. //Масложировая промышленность, 1984, №2, с. 12 -15.

35. Дехтерман Б. А., Арутюнян Н. С., Корнена Е. П. И др. Гидратация фосфолипидов из подсолнечных масел методом термической и химической активации. //Масложировая промышленность, 1986, №2, с. 12-14.127

36. Корнена Е. П., Винюкова Н. П., Арутюнян Н. С. и др. Гидратация растительных масел растворами поляризующих соединений. //Масложировая промышленность, 1984, №3, с. 15 -17.

37. Корнена Е. П., Арутюнян Н. С., Тарабиричева JI. А. И др. Гидратация фосфолипидов из растительных масел с применением растворов поверхностно активных веществ. /Пищевая технология, 1986, №4, с. 128.

38. Мгебришвили Т. В., Мартовщук В. И., Корнена Е. П. и др. Гидратация фосфолипидов из растительных масел методом механохимической активации. /Пищевая технология, 1985, №5, с. 128.

39. Корнена Е. П., Арутюнян Н. С. Исследование структуры негидратируемых фосфолипидов подсолнечных масел. Труды ВНИИЖ, 1980,- 170 с.

40. Мгебришвили Т. В., Мартовщук В. И., Артюшков В. Н. и др. Влияние гидратируемых и негидратируемых фосфорсодержащих веществ на электропроводимость подсолнечного масла. //Масложировая промышленность, 1976, №2, с. 13 15.

41. Корнена Е. П., Литвинова Е. Д., Арутюнян Н. С. Сложные соединения фосфолипидов подсолнечного масла с металлами. //Масложировая промышленность, 1978, №5, с. 16-19.

42. Корнена Е. П., Арутюнян Н. С. О составе углеводов негидратируемых фосфолипидов подсолнечных масел. /Ппищевая технология, 1979, №3, с. 32 36.

43. Мосян А. К., Аришева Е. А., свечник А. Н. Влияние растворителя на степень гидратируемости фосфатидов в масле. //Масложировая промышленность, 1971, №9, с. 15 18.

44. Косачев В. С., Корнена Е. П., Янова Л. И., Арутюнян Н. С. Модель межфазного слоя трех компонентов: жирные кислоты, гидратируемые и негидратируемые фосфолипиды в системе масло вода. //Масложировая промышленность, 1986, №3, с. 18 - 21.128

45. Носачева В. В., Корнена Е. П., Бутина Е. А. Создание функциональных пищевых продуктов. //Химия и биотехнология биологически активных веществ, пищевых продуктов и добавок. Экологически безопасные технологии. Тезисы докладов. Москва. 2001 г. с. 76-77.

46. Казаджан 3. М., Ключкин В. В., Зуев Э. И. И др. Состав и выход экстрагируемых липидов и фосфолипидов семян сои, подвергнутых влаготепловой обработке. /Труды ВНИИЖ. 1974 г. Вып. 32, с. 112-116.

47. Пономарева Н. А., Корнена Е. П., Арутюнян Н. С., Хаджийски Ц. Т. Состав и свойства фосфолпидов соевых масел. //Пищевая технология., 1981 г. №5, с. 34 36.

48. Пономарева Н. А. Некоторые характеристика и состав фосфолипидов соевых масел. / Труды ВНИИЖ. 1980 г. С. 32 36.

49. Руководство по технологии получения и переработки растительных масел и жиров /Под ред. А. Г. Сергеева. Д.: ВНИИЖ, 1975. Т. 1. Кн. 1. с. 8126; Т. 3, с. 26-38.

50. Голдовский А. М. Теоретические основы, производства растительных масел. М.: Пищепромиздат, 1978. - 448 с.129

51. Корнена Е. П., Арутюнян Н. С. Исследования в области количественного выделения фосфорсодержащих веществ. /Труды ВНИИЖ, 1980 г. с. 57-63.

52. Корнена Е. П., Арутюнян Н. С. Современное представление О структуре фосфолипидов растительных масел. //Масложировая промышленность. 1985 г. №8, с.14 18.

53. Ксандопуло С. Ю., Копейковский В. М., Ключкин В. В. И др. Изучение неоднородности семян подсолнечника. //Масложировая промышленность. 1982 г. №8, с. 4 7.

54. Мхитарьянц JI. А., Копейковский В. М., Арутюнян Н. С. И др. Влияние сушки и последующего хранения семян подсолнечника на разных сроках уборки на качество масла. //Масложировая промышленность. 1973 г. № 10, с. 5-8.

55. Костенко Ю. В., Корнена Е. П., Конестковский В. М. и др. Влияние режимов тепловой обработки семян подсолнечника на технологические свойства масел. //Масложировая промышленность. 1986, Вып.7,8-10.

56. Арутюнян Н. С. Состав и свойства фосфолипидов подсолнечного масла. //Масложировая промышленность. 1974 г. №3, с. 11-15.

57. Ксандопуло С. Ю., Конестковский В. М. Исследование динамики перехода фосфатидов в масло из семян подсолнечника различных классов. /Труды ВНИИЖ, 1980 г. с. 50 55.

58. Ключкин В. В., Казаджан 3. М. Влияние влаго-тепловойобработки на степень и состав извлекаемых липидов. /Труды ВНИИЖ, 1972 г. вып. 29, с. 33-36.

59. Савельева В. JL, Ключкин В. В. Состав и фосфолипидов и кинетика их экстрагирования совместно с соевым маслом. //Масложировая промышленность. 1979 г. №10 с. 17-19.

60. Ключкин В. В., Заводцова JI. М., Савельева В. JI. и др. Содержание фосфолипидов в семенах сои новых селекционных сортов. /Труды ВНИИЖ, 1977 г. вып. 32,с. 72-77.130

61. Арутюнян Н. С., Корнена Е. П., Пономарева Н. А. и др. Ассоциация фосфолипидов соевых масел в четыреххлористом углероде. /Пищевая технология. 1984 г. №6, с. 58 60.

62. Корнена Е. П., Пономарева Н. А., Арутюнян Н. С. и др. Ассоциация фосфолипидов в неполярных растворителях. //Масложировая промышленность. 1984 г. №6, с. 15 16.

63. Baltes W., Lebensmittelchemie. 4 Autl. 1995. 17, 474 pp. 156.

64. Шустанова JI. А., Умаров А. У., Структурные исследования фосфолипидов подсолнечника. Химия природных соединений, 1971, №7 с. 518-519.

65. Яничек Г., Покорния Я. Окислительные изменения липидов в пещевых продуктах. Химия природных соединений, 1971 №1, с. 37.

66. Rifai N., Warnick G. R. Laboratory Measurement of Lipids, Lipoproteins and Apolipoproteins. AACC Press, Washington, D.C., 1994, 357 pp.

67. Folch I., Lees M., Stanley G. H. S. A simple method for the isoltion and purification of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem., 1957, v. 226, pp. 497-509.

68. Zoller H., Handbook of Enzyme Inhibitors, 2nd Edition., VCH Publishers, Inc., New York, 1993, 1065 pp.

69. Стыскин Е.Л., Ициксон Л.Б., Брауде E.B. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография. М.: Химия, 1986. 172 с.

70. Сакодынский К. И., Бражников В. В., Волков С. А. И др. Аналитическая хроматография. М.: Химия, 1993. 464 с.

71. Айвазов Б. В., Практическое руководство по хроматографии. М.: Наука, 1968.

72. Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам. Под ред. О. Микеша (в 2-х томах) М.: Мир, 1982 г., 528 с.

73. Бидлиннгмейер Б., Фрайд Б., Хенгнауер Г. и др. Препаративная жидкостная хроматография. Пер. С агл. М.: Мир, 1990 г. - 360 с.

74. Кейтс М. Техника липидологии. -М.: Мир, 1975. 322 с.131

75. Жидкостная колоночная хроматография. /Под ред. 3. Дейла и др. (в 3-х томах). М.: мир, 1990. 360 с.

76. Feinstein К. Guide to Spectroscopic Identification of organic Compounds., CRC Press Inc., Boca Raton, FL, 1995,120pp.

77. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии /Под ред. А. Хеншен и др. М.: Мир. 1988. 688 с.

78. Хроматография. Основные понятия. Терминология. М.: Сборники научно-нормативной терминологии. 1997. вып. 114. 48 с.

79. Хайс И. М., Мацек К. Хроматография на бумаге. М., 1962. с. 851.

80. Высокоэффективная тонкослойная хроматография. /Под ред. А. Златкиса и др., М.: Мир, 1979 г., 68 с.

81. Кихнер Ю. Тонкослойная хроматография.-М.: Мир, 1981. т. 1, 615 с.

82. Покровский Е. А., Каргополов Д. В. Модификация метода ТСХ фосфолипидов. Лабораторное дело, 1972, № 6, с. 337 - 341.

83. Christie W. W., Lipid Analysis, Isolation Separation, Identification and Structural Analysis of Lipids. Pergamon Press, Oxford,p. 338, 1973.

84. Fried В., Sherma J., Thin Layer Chromatograhy Techniques andApplications. Marcel Dekker, Inc., New York, p. 308,1982.

85. Стопский В. С., Аскинази А. И., Калашева Н. А. Влияние рН среды на гидратацию и гидролиз оксифосфатов триглицеридов. /Труды ВНИИЖ, 1980, с. 20-25.

86. Ледерер М. Введение в электрофорез на бумаге. М.: Изд-во иностранной литературы. 1956г, 98 с.

87. Snyder L. R., Kirkland J. J. Introduction to modern liguid chromatography. 2nd ed. New York: Wiley-Intersci., 1979. 863 p.

88. Chang D. C., Chassy В. M., Saunders J. A. and A. E. Guide to Electroporation and Electrofusion. Sowers, Eds., Academic Press Inc., San Diego, CA, 1992.

89. Manchenko G.P. Detection of Enzymes on electrophoretic Gels: A Handbook, CRC Press, Inc., Boca Raton, FL, 1994, 341 p.132

90. Гааль Э., Медьеши Г., Верецки К. Электрофорез в разделении биологических макромолекул /Под ред. В. И. Розеграта. М.: Мир, 1982. с. 446.

91. Capillary Electrophoresis Guidebook: Principles, Operation and Applications K.D. Altria, Ed., Humana Press, Totowa, N.J., 1996. 349 P.

92. Capillary Electrophoresis in analytical biotechnology, P.G. Righetti, Ed., CRC Press, Boca Raton, FL, 1996, 551 p.

93. Baker D.R. Capillary Electrophoresis, John Wiley & Sons,Inc., New York, NY, 1995, 240 pp.

94. Kuhn R., Hoffstetter-Kuhn S. Capillary Electrophoresis: Principles and Practice, Springer-Verlag Inc., NY, 1993, 300 p.

95. S.F.Y. Li Capillary Electrophoresis: Principles, Practice and Applications, Elsevier Science Publishers, Amsterdam, The Netherlands, 1992, 586 p.

96. Bunton C. A., Lewellyn D. R, Oldman K. G., Vernon C. A. The reactions of organic phosphates. J. Chem. Soc., 1988, pp. 3 574 3594.

97. Hach M. H., Ferrans V. J. Papirchromatographische Analyse von Plasmalogenen/ Z/ Physion. Chem., 1989, bd. 315, №2, s. 157 162.

98. Beiss V. Zur pepierchromatographischen Auftrennung von Pflanzenlipiden. J. Chromatogr., 1984. pp. 104 110.

99. Handbook of Capillary Electrophoresis, Landers J.P. Ed. 2nd ed. CRC Press, Boca Raton FL, 1997, 894 p.

100. Бергельсон JI. Д., Дятловицкая Э. В., Молотковский Ю. Г. Препаративная биохимия липидов. М.: Наука, 1981. - 256 с.

101. Беллами Л. Новые данные по ИК спектрам сложных молекул. -М.: Мир, 1970. -268 с.

102. Кесслер И. Методы ИК спектроскопии в химическом анализе. -М.: Мир, 1964.-149 с.

103. Казицина Л. А., Куплетская М. Б. Применение УФ-, ИК-, ЯМР- и масс спектроскопии в органической химии. - М.: Изд-во МГУ, 1979. -238 с.133

104. Корнена Е. П., Пономарева Н. А., Арутюнян Н. С. Изучение структуры фосфолипидов соевых масел методом ИК спектроскопии. /Пищевая технология. 1984. №3, с. 19-21.

105. Smith В. С. Fundamentals of Fourier Transform Infrared Sprktroscopy., CRC Press, Inc., Boca Raton, FL, 1996, 202 pp.

106. Нечаев А. П., Зайцев A. H. Пищевые добавки. M.: Московский государственный университет пищевых производств, 1997 г.,- 235 с.

107. Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений. М.: Мир, 1965. - 235 с.

108. XI1 Международный симпозиум по липидам растений //Биохимия. 1997. №7, 120 с.

109. Заверюхин В. И., Левандовский И. Л. Производство и использование сои. К.: Урожай, 1998. - 112 с.

110. Средство для смазки хлебопекарных форм. Ильинова С. А., Артеменко И. П., Бутина е. А., и др. Патент на изобретение № 2108727.

111. Герасименко Е. О., Бутина Е. А., Кривенко В. Ф., Бондаренко И.

112. Василенко А. И., Краснопольский Ю. М. Проблемы и перспективы производства фосфолипидов. //Химический фармацевтический журнал. 1998., №5, с15 -18.

113. Полянский К. К., Глаголева Л. Э., Железной С. А., Рудаков О. Б. Добавка «Витол» в молочных продуктах //Молочная промышленность., №5, 2001 г, с. 39-41.

114. Горбатова К. К. Биохимия молока и молочных продуктов.-М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984 г., 146 с.

115. Абрамзон А. А. Поверхностно-активные вещества, свойства и применение. Л.: Химия, 1975. - 246 с.

116. Шинода К., Накагава Т., Тамомуси Б., Иесимура Т. Коллоидные поверхностно-активные вещества, физико-химические свойства. М.: Мир, 1986, 250 с.

117. Ребиндер П. А. Взаимосвязь поверхностных и объемных свойств растворов поверхностно-активных веществ. В сб.: Успехи коллоидной химии. М., 1983.-98 с.135

118. Пучкова Л. И., Корячкина С. Ф., Леонова О. Я. Влияние ПАВ на структурно-механические свойства теста и качество хлеба./Пищевая технология, 1985, №2, с. 35 37.

119. Пучкова Л. И., Сидорова О. Г. Эффективность применения поверхностно-активных веществ в хлебопечении. Реферативный сборник. Хлебопекарная и макаронная промышленность. М.: ЦНИИЕЭИпищепром, 1980.-33 с.

120. Антипова Ю. В., Клещко Г. М., Корнена Е. П. Исследования влияния подсолнечных фосфатидных концентратов на свойства шоколадных масс. //Пищевая технология ,1986, №4, с. 127 128.

121. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник.-М.: АстраФармСервис, 1998 г., с. 1600.

122. Аскинази А. И., Махсон Р. С., Губман И. И., и др. Влияние состава и качества масел на величину отходов и потерь в процессе сепарационной рафинации. ЦНИИТЭИпищепром, 1981, № 1, с. 2 5.

123. Горячева А. Ф., Кузьминский Р. В. Сохранение свежести хлеба. -М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. 240 с.

124. Прокопенко А. Д., Фойтер И. М. Влияние фосфатидных концентратов на свойства эмульсий для сахарного печенья. /Пищевая технология, 1980, №8, с. 41 43.

125. Новое в технике и технологии кондитерского производства. /Под ред. М. М. Истоминой. -М.: Пищевая промышленность, 1982. 190 с.

126. Козин Н. И. Применение эмульсий в пищевой промышленности. -М.: Пищевая промышленность, 1976, 135 с.136

127. Беленький Б. Г., Мальцев В. Г.// В кн.: Прикладная хроматография. М.:, Наука, 1984, с. 54-64.

128. Владимирский М. А., Ладыгина Г. А., Петюшенко Р. М. И др., Липосомы, применение в биологии и медецине. М.: Наука, 1985 г., с.77-82.

129. Стефанов А. В., Крейнес В. М., Дмитреева А. В., Лишко В.К. Укр. Биохим. Ж., 157(5), 1984 г., с. 569-572

130. Швец В. И., Краснопольский Ю. М. Вестн. АМН СССР, №6, 1990г., с. 19-28.

131. Juliano R. L. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1987. p. 507-364.

132. Alving C. R. Pharmacol. Ther., 22(3), 1983 p. 407-424.

133. R.-G. Chen, S.-A. Weng, D.-S. Zhang, ct al., Acta Biohim.Biophys. Sinica, 20(3), 1988. p. 343-370.

134. Gregorifdis G. Ann. N. Y. Acad. Sci., 308(3) 1978. p. 343-370.

135. Дехтерман Б. А., Кушнир А. Э., Демец К. С. и др. Получение фосфатидного концентрата высокого качества. //Масложировая промышленность, 1977, №7, с. 24 26.

136. G. Loper-Serestein, Antimicrob. Agents Chemother., 31(5), 1987. p. 675-678.

137. Berrige M. J. Ann. Rev. Biochem., 56, 1987. p. 159-196.

138. Швец В. И., Стопанов А. Е., Крылова В. Е., Гулак П. В. Миоинозит и фосфоинозитиды. М.: Наука, 1987 г., 208 с.

139. Michell R. Н. Trends Biochem. Sci., 17,1992. p. 274-276.137

140. Toffano G. and Bruni A, Pharmacol. Res. Commun., 12(9), 1980. p.829-845.

141. Липосомы в биологических системах. Под ред. Грегодиадис Г., Аллисон П. М.: Медицина, 1988 г., 216 с.

142. Иванова Н. Н., Краснопольский Ю. М., Сенников Г. А., Швец В. И. Вопр. мед. химии, 30(2), 1984. с. 71-74.

143. Сливкин А. Н. Фармокопейный анализ.- Изд-во ВГУ, 1997г. 305 с.

144. Ситников А. И. Дис. . канд. техн. наук. Москва: 2000. 135с.

145. Гордон А., Форд Р. Спутник химика. -М.: Мир, 1976 г., 541 с.

146. Гидрирование фосфатидов в растворах. В кн.: Каталитические реакции в жидкой фазе./ Г. В. Чеботарева, Н. Л. Меламуд, Э. М. Майоров. -Алма-Ата: Наука, 1967. с. 58-62.

147. Лурье А. А. Хроматографические материалы (справочник). М.: Химия, 1978. 440 с.

148. Айвазов б. В., Практическое руководство по хроматографиию М.: Наука, 1968 г., 253 с.

149. Количественная хроматография на бумаге и втонком слое. Пер. с англ. /Под ред. Э. Шелларда. М.: Мир, 1971 г., 196 с.

150. Цюрупа М. П. Сверхсшитый полистирол новый вид полимерных сеток. Автореф. дис. д-ра. хим. наук. - М., 1985. - 48с.

151. Железной С. А., Селеменев В. Ф., Орос Г. Ю. и др. Выделение и разделение фосфолипидов из сточных вод экстракционными методами. Агроэкология и устойчивое развитие регионов. Красноярск: КрасГАУ., 1998 г., с. 81-82.

152. Селеменев В. Ф. Дис. . докт. хим. наук. Воронеж: ВГУ, 1993г.138

153. Селеменев В. Ф., Рудаков О. Б., Болотов В. М., Железной С. А., Коновалов В. В., Сафонова Е. Ф. Физико-химические основы фракционирования подсолнечника. //Хранение и переработка сельхозсырья. 2000. №12 с. 35-38.

154. Селеменев В. Ф., Орос Г. Ю., Железной С, А. и др. Энергетические и спектральные характеристики Н-связей в фосфолипидах. //Физическая химия. 2001 г., №4, с 735 741.

155. Пиментелл Д., Мак-Клеллан О. Водородная связь /Под ред. В. М. Чулановского. М.: Мир, 1964. с. 462.

156. Железной С. А., Коновалов В. В., Железная Т. А. Высоковольтный электрофорез фосфолипидного концентрата сои. Тезисы докладов., ВГТА., Воронеж, 1999 г., с. 20.

157. Железной С. А., Болотов В. М., Рудаков О. Б. и др. Количественный ТСХ- анализ фосфолипидов в отходах маслоэкстракционных заводов. //Вестник Тамбовского университета. 1999, том 4, вып. 2. с. 264.

158. Железной С. А., Болотов В. М., Рудаков О. Б. Выделение пигментов и фосфолипидов из отходов маслоэкстракционных производств. Тезисы докладов. ВГТА., Воронеж. 1999 г., с. 118.

159. Железной С. А., Железная Т. А. Количественный анализ фосфолипидов семян подсолнечника методом тонкослойной хроматографии с использованием сканера «Schimadzu-9000». //Химия. Теория и технология. Выпуск 1, Воронеж: ВГУ, 1999 г., с. 28 30.

160. Углянская В. А., Чикин Г. А., Селеменев В. Ф., и др. Инфракрасная спектроскопия ионообменных материалов. Воронеж.: Изд-во ВГУ, 1989. -с. 43-44.

161. Изучение сорбции окрашенных продуктов лизинокислого производства на сверхсшитых сорбентах /Цюрупа М. П., Даванков В. А., Селеменев В. Ф. и др. // Прикладная биохимия и микробиология. 1985. т 21 №1 с. 7225-7277.

162. Способ разделения фосфолипидов. Селеменев В. Ф., Железной С. А., Орос Г. Ю. и др. Патент на изобретение №2169734.