автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Lactobacillus acidophilus и Streptococcus termophilus в изготовлении молочнокислых и рыбногидробионтных пищевых и кормовых добавок

На правах рукописи УДК 557.19: [547.472.3 + 574.52]

i

Коротченко Ольга Даниловна

*

LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS И STREPTOCOCCUS TERMOPHILUS В ИЗГОТОВЛЕНИИ МОЛОЧНОКИСЛЫХ И РЫБНО-ГИДРОБИОНТНЫХ ПИЩЕВЫХ И КОРМОВЫХ ДОБАВОК

Специальность 05.18.07 - Биотехнология пищевых продуктов

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Владивосток - 2004

Работа выполнена во Владивостокском государственном медицинском университете

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор, чл.-корр. РАЕН, заслуж. деят. науки РФ Мотавкина Нонна Степановна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Палагина Марина Всеволодовна

кандидат технических наук, доцент Максимова Светлана Николаевна

Ведущая организация:

Научно-исследовательский инсгитут эпидемиологии и микробиологии Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

Защита состоится 21 декабря 2004 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного Совета КМ 212.054.01 при Тихоокеанском государственном экономическом университете по адресу: 690950, г. Владивосток, Океанский проспект, 19.

Отзывы на автореферат в двух экземплярах, заверенных печатью, просим направлять Ученому секретарю диссертационного совета.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тихоокеанского государственного экономического университета.

Автореферат разослан 20 ноября 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат технических наук, доцент

Л.О. Коршенко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы Вопросы современной биотехнологии охватывают широкий круг проблем, одна из них - создание новых пищевых добавок с использованием молочнокислых бактерий. Пробиотические продукты, в состав которых входят микроорганизмы, оказывают благоприятное влияние на физиологические функции и биохимические реакции организма человека и животных. Их употребление способствует улучшению и нормализации различных функций и проявлению собственных защитных ресурсов организма (Дунченко Н.И., 2003). k В последние годы интенсивное развитие производства пробиотических

продуктов обусловлено снижением адаптационной активности у населения различных возрастных групп. Неблагоприятная экологическая обстановка, I недостаток естественного сырья в народном хозяйстве для питания человека и

животных, замена натуральных продуктов па искусственные и синтетические оказывают отрицательное влияние на здоровье. В этой связи наука, медицина и экономика все чаще обращаются к природным ресурсам и полезным микроорганизмам. Популярными среди них являются сравнительно легко воспроизводимые рыбные богатства и молочнокислые бактерии. Следует отметить, что морское сырье в качестве основы пробиотических продуктов практически не используется. Так, известно использование молочнокислых бактерий в приготовлении заменителей цельного молока из рыбных отходов для вскармливания сельскохозяйственных животных в Эстонии (Аси, 1984). Однако этот способ имеет ряд недостатков - сложность технологического процесса, его длительность, необходимость обеспечения громоздким технологическим оборудованием, использование дефицитных дорогостоящих химических реактивов.

Молочнокислые продукты широко представлены в целебном пищевом ассортименте как в виде бактериальных препаратов (Акопян и др., 1988, Варганов и др., 1998), так и пищевых добавок (Казаков и др., 1993, 1995). В настоящее время известно несколько рецептов использования бактериального молочнокислого брожения для приготовления лечебно-профилактических продуктов с добавками из морских гидробионтов - кукумарии японской и I ганглиев кальмара (Загородняя, 1999).

Вместе с тем, перечисленное не исчерпывает всех возможностей биотехнологического использования продуктов моря и молочнокислых бактерий в народном хозяйстве. В связи с чем, особую актуальность в настоящее время приобретают исследования, направленные на разработку пробиотических продуктов питания.

Цель и задачи исследования. Целью исследования явилась разработка новых технологий изготовления пищевых и кормовых добавок из некондиционного сырья рыбоперерабатывающей промышленности и молока с использованием новых штаммов молочных бактерий Lactobacillus acidophilus и

Для достижения поставленной цели в ходе диссертационного исследования последовательно решались следующие задачи:

1. Разработать оптимальный способ получения кормовой добавки (КД) на основе молочнокислого брожения с целью повышения эффективности ее качественных показателей.

2. Обосновать технологию приготовления молочнокислых пищевых добавок (ПД) в сублимированном виде.

3. На основе сублимированных ПД разработать технологические параметры и рекомендации по изготовлению молочнокислых напитков.

4. Определить оптимальный режим хранения продуктовых штаммов ' молочнокислых бактерий.

5. Провести медико-биологические, микробиологические, иммунобиологические, биохимические исследования пробиотических продуктов питания, >1 содержащих молочнокислые ПД.

6. Разработать нормативную документацию и технологию производства молочнокислых пищевых и кормовых добавок, как основу для производства продуктов питания.

Научная новизна. Впервые:

- обоснована возможность производства ПД и КД на основе штаммов L acidophilus и S thermophilics и их комбинаций;

- теоретически обоснована и экспериментально доказана эффективность технологии получения молочнокислых ПД и пищевой продукции на его основе;

- установлены технологические параметры, условия их сохранения и репродукции в активном состоянии;

- обоснована технология получения молочнокислых КД.

Практическая значимость работы. По результатам проведенных

исследований;

- разработана и обоснована технология производства кормовой добавки" «Способ производства кормовой добавки» (А.с. № 1750605,1992);

получено 2 патента: «Способ выращивания ацидофильных молочнокислых микроорганизмов» (Патент № 2103886, 1998), «Способ производства молочнокислого напитка» (Патент № 2127061, 1999);

- разработана и утверждена нормативная документация (7 технических 4 условий): ТУ № 9280-001-10236945-93 «Добавка рыбная пищевая», ТУ № 9289002-10226165-96 «Добавка кормовая лечебно-профилактическая», ТУ № 9222001-10226165-97 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Солнышко», ТУ № 9222-001-10242054-98 «Напйток ацидофильный кисломолочный «Мечников»,

ТУ № 9289-003-80371744-99 «Добавка кормовая «Лактокормовит», ТУ № 9222-001-80371744-99 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Светлый», ТУ № 9158-002-80371744-2000 «Крем косметический «Светлый»;

- технологий производства молочнокислой КД внедрена и выпускается с 1988 г. на рыбокомбинате им. 60-летия Великого Октября ПО "Примор-рыбпром" (г. Владивосток). Кормовая добавка используется' в племенных хозяйствах и совхозах Приморского края (пос. «Октябрьский», «Лучковская

птицефабрика», «Лучегорская ГРЭС»);

- напитки «Солнышко», «Мечников» и «Светлый» используются в качестве лечебно-профилактических средств в онкологии, терапии, педиатрии, проктологии, гинекологии, крем «Светлый» - в дерматологии и косметологии;

- одним из главных практических достижений работы является создание безотходного производства КД и ПД в рыбной и молочной промышленности Приморского края.

Основные положепия, выносимые па защиту:

- результаты научного обоснования рецептур и технологии изготовления ПД и КД из отходов рыбоперерабатывающей промышленности и молока с использованием новых штаммов молочнокислых бактерий L acidophilus и S. thermophilics;

- новые биотехнологические решения, обусловливающие оптимальный способ получения КД на основе молочнокислого брожения с целью повышения эффективности ее качественных показателей;

- результаты лечебно-профилактической апробации пробиотических продуктов питания, содержащих молочнокислые ПД.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на VIII Всероссийской Тихоокеанской конференции с международным участием "Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины" (Владивосток, 1999), VIII Всероссийском съезде микробиологов, эпидемиологов, паразитологов (Москва, 2002), I Международной конференции "Пробиотические' микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования" (Москва, 2002), Международном симпозиуме "Фундаментальные и прикладные проблемы микробиологии на Дальнем Востоке" (Владивосток, 2003).

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 10 работ.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов и методов исследования (глава 2), результатов исследования и их обсуждения (главы 3-7), выводов, списка использованных источников, включающего 223 наименования, и приложений. Работа изложена на 188 страницах машинописного текста и содержит 62 таблицы и 10 рисунков.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении отражено современное состояние проблемы, определены цели и задачи исследования, обоснована актуальность выполненных в работе исследований.

Глава 1. Обзор литературы. Посвящена систематическим исследованиям в области биотехнологии и пищевой микробиологии, направленным на создание новых видов пищевых продуктов общего и специального назначения с использованием молочнокислых бактерий. Особое внимание уделяется

использованию ресурсов рыбоперерабатывающей и молочной промышленности, источников биологически активных веществ. Значительное место среди них уделено роли молочнокислых бактерий в становлении здоровья биообъектов. Рассмотрены особенности производства комбинированных молочнокислых пищевых и кормовых добавок и напитков. Представлены теоретические и практические аспекты комплексной переработки сырья рыбоперерабатывающей и молочной промышленности с использованием молочнокислых бактерий.

Глава 2. Материалы и методы исследования. Основные направления исследований и перечень биотехнологических продуктов представлены на рис. 1.

(--- -\

Кормовая добавка

молочнокислая -

«Лактокормовит»

ч _✓

КД (для поросят) КД (для телят) "►КД (для кур, цыплят) -*■ КД (для норок) -♦•КД (для кроликов) -►•КД (л[я лабораторных

животных крыс, мышей) ^КД (для молоди рыб)

Пищевая добавка молочнокислая

Кисломолочный продукт «Мечников» ~> Кисломолочный продукт

«Солнышко» -*■ Кисломолочный напиток «Светлый» Заправки для салата -*■ Крем кисломолочный «Светлый» Мазь лечебно-профилактическая

Рис. 1. Основные направления исследований и перечень биотехнологических продуктов

Для производства молочнокислых пищевых КД и ПД использовали стандартные сухие закваски L acidophilus и S thermophilus, выпускаемые Всесоюзным государственным научно-исследовательским институтом контроля, стандартизации и сертификации ветпрепаратов (ВГНКИ), морепродукты (кальмар, креветки, кукумарии, мидии и др.), рыбу (навага, камбала, лососевые породы) - согласно ГОСТ 17660-97, ОСТ 15-407-2000 и их отходы, а также сухое молоко. ^

Приготовление лабораторной и производственной закваски осуществляли в соответствии с инструкцией по приготовлению и применению заквасок для молочнокислых продуктов (ВНИИМП, 1983). Подсчет количества клеток лактобактерий проводили методом предельных десятикратных разведений (Банникова, 1987). Химический состав КД и ПД и молочнокислых напитков определяли стандартными методами, аминокислотный состав - методом ионообменной хроматографии на аминокислотном анализаторе ЬКВ-"Альфа-плюс" 4151 (Япония), минеральный состав - атомно-абсорбционным методом на спектрофотометре 180-50 фирмы "Хитачи" (Япония). Органолептические, физико-химические и микробиологические показатели качества готовых КД, ПД, напитков и крема определяли по общепринятым методикам согласно утвержденным нормативным документам СанПиН 2.3.2.1078-01. Статистическую обработку полученных экспериментальных данных проводили по методу Воропаева (2001).

Глава 3. Особенности биотехнологии молочнокислых кормовых добавок. Биотехнологический процесс получения кормовых добавок представлен на рис. 2.

Раздробленные рыбно-гидробионтные отходы с дробилки насосом подаются в пастеризационные ванны, затем тем же насосом в них подается водопроводная вода.

В ванне рыбная суспензия пастеризуется при Т 90 °С в течение 1 часа при постоянном автоматическом перемешивании субстрата. Далее ведется охлаждение до Т 45 - 48 °С.

Из ванны пастеризованная рыбная суспензия поступает в резервуар, где выращиваются микроорганизмы. Режим в ней: Т 45 - 48 °С, время - 7 час., постоянное автоматическое перемешивание. После этого в ванны подается последовательно мука и вода Т 58 - 60 °С, которую поддерживают 1 час., затем вновь проводят охлаждение до Т 45 - 48 °С.

Через 7 часов в резервуар подае1ся из ванны гидролизованная мука Т 45 -48 °С, время выращивания микроорганизмов - 7 часов.

Далее в ванны с дробилки насосом подаются раздробленные рыбные отходы и вода. Рыбная суспензия в ваннах пастеризуется при Т 90 °С в течение 1 часа при постоянном автоматическом перемешивании. Вслед за этим проводят охлаждение до Т 45°С.

Готовая кормовая добавка из резервуара подается насосом на вакуумно-сублимационную сушку или в жидком виде - в молочные танки. (Патент № 2103886 от 10.02.98, Россия).

Рис. 2. БиоIсхнологический процесс получения кормовых добавок

Отличительные особенности КД, приготовленных по данной технологии включают:

- производственные штаммы на основе L. acidophilus и S thermophilus;

- разные типы вторичного сырья морского промысла и обработки рыбы (камбала, навага, лосось, минтай), морских гидробионтов (кальмар, краб, мидия, трепанг, т.е. от 2 до 7 видов) и выварочных вод из них;

- возможность исключения дорогостоящих компонентов - молока и ряда реактивов;

^ - новые оптимальные параметры в сторону увеличения температурного

режима, что не только активизирует молочнокислые бактерии и обеспечивает частичную или полную стерилизацию КД, но и ускоряет технологические процессы. При сравнении двух образцов кормовых добавок, общая 1 питательность 1 кг КД АР-1 производства колхоза им. С.М. Кирова ЭССР

составляет 2,17 кормовых единиц, сухого вещества 9-13 %, протеина - 5,7 %, жира - 2,50-3,28%;

- высокое качество и экологическая чистота КД (низкая концентрация ртути - 0,03 mi/кг, отсутствие свинца, кадмия, стронция, нитратов, нитритов и пестицидов).

Исследование острой и хронической токсичности кормовых добавок дало отрицательные результаты. Бактериальная обсемененность готового продукта характеризовалась в основном обилием производственных штаммов лакто-бактерий и отсутствием патогенных и условно-патогенных видов

Результаты исследования химического, витаминного и минерального состава кормовых добавок представлены в табл. 1-2.

Таблица 1

Химический состав кормовой добавки

Содержание, % на 100 г продукта Калорийность,

Вода Белки Жиры Зола Углеводы ккал / кДЖ

85,0 5,2 3,2 2,3 1,6 50,0/210

Таблица 2

Витаминный и минеральный составы кормовой добавки, % на 100 г продукта

Витамины Макроэлементы Микроэлементы

А в, В2 рр Na К Са Mg С1 Fe Мп Ni Сг

0,006 0,02 0,06 1,0 0,003 0,036 0,236 0,053 0,8 5580 310 7,5 28

Сравнительный анализ готовых КД и прототипа КД АР-1 ЭССР показал явные преимущества нашей технологии: более высокую питательную ценность и усвояемость, больший уровень жира, клетчатки, аминокислот, жизненно необходимых микроэлементов, более высокое обеспечение энергетического обмена и стабильность за счет обеззараживающего действия и жизнедеятельности молочнокислых бактерий и поэтапной термической обработки.

По органолептическим, физико-химическим и микробиологическим показателям кормовая добавка должна соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл. 3.

Таблица 3

Качественные характеристики кормовой добавки

Наименование показателя Характеристика и норма Метод испытания

Внешний вид Жидкая неоднородная масса с осадком По ГОСТ 7631-85

Цвет От желто-серого до кремовато-розового По ГОСТ 7631-85

Запах Свойственный данному виду продукта без постороннего запаха ПоГОСТ 7631-85

РН жидкой кормовой добавки От 5,0 до 6,0 включ. По ГОСТ 28982-91

Массовая доля сухих веществ для жидкой добавки, %, не менее 15,0 По ГОСТ 7636-85

Массовая доля сухих веществ для порошка, %, не менее 12,0 По ГОСТ 7636-85

Массовая доля сырого протеина для жидкой добавки, %, не менее 4,0 По ГОСТ 7636-85

Массовая доля сырого протеина для порошка, %, не менее 48,0 По ГОСТ 7636-85

Общее количество лакто-бактерий ацидофильной палочки Сплошной рост По ГОСТ 9225-84

Бактерии группы кишечной палочки в 0,01 г продукта Не допускаются ПоГОСТ 29136-91

Патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы, в 25 г продукта Не допускаются По ГОСТ 25311-82

Стафилококкус ауреус в 1 г продукта Не допускаются По ГОСТ 25311-82

Глава 4. Эффективность примеиения кормовых добавок в питании различных биологических объектов (животные, птица, молодь рыб).

Кормовая добавка в нативном или сублимированном состоянии добавлялась к традиционному высокобелковому комбикорму и скармливалась подопытным биообъектам: теплокровным животным (телятам, поросятам, норкам, кроликам), птицам (куры-несушки, цыплята-бройлеры), холоднокровным биообъектам - молоди рыб (сима, товарный сазан, его гибрид с немецким карпом, сибирский осетр, лосось).

Все эксперименты, апробация проводились в естественных условиях непосредственно в хозяйствах Приморского края.

Питание с кормовой добавкой в сравнении с контрольным традиционным кормлением усиливает перевариваемость комбикорма, увеличивает привес массы биообъектов за счет усиления обменных процессов. Кроме этого, КД стимулирует защитные силы биообъектов, обуславливает лечебно-профилактический эффект, повышающий жизнестойкость организма и сокращает, а у некоторых - исключает их естественный отход. Вспомогательную роль в КД при этом играют производственные штаммы лактобактерий как поставщики пробиотиков, уничтожающие патогенные и условно-патогенные микроорганизмы и снижающие восприимчивость к инфекциям.

"ОПЫТ

-контроль

VI VIII IX

Время (месяцы)

Рис. 3 Помесячная динамика количества яиц на 1 куру-несушку в опытной и контрольной группах учетного года (в июле учета не было)

Следует отметить действие КД на репродуктивную систему кур-несушек рост яйценоскости и продолжительности кладки яиц (рис. 3). Яйценоскость -это доля кур-несушек в общем количестве кур.

Молочнокислую КД применяли и при кормлении мальков рыб, что также показало эффективность ее применения в рыбоводстве (рис. 4, 5).

Рис. 4. Динамика роста массы товарного сазана в садках рыбного хозяйства «Тепловодное» Артемовской ГРЭС при кормлении молоди с КД и без нее (Т 16-23°С)

500 -450 -400 -350 я 300 -250 -200 -150 -100 -50 -0 -

I II III ГУ

Время (месяцы)

Рис. 5. Динамика роста молоди гибридов товарного сазана с немецким карпом в садках рыбного хозяйства Артемовской ГРЭС (Т 19-23°С, при отключении Т 7-9°С)

Несомненным достижением применения КД явился большой экономический эффект, полученный в хозяйствах, проводивших эти испытания, а также возможность обогащения и санации с помощью молочнокислых бактерий кормов с длительным сроком хранения и приобретших негативные качесгва (окисление).

Глава 5. Биотехнология приготовления рыбно-гидробнонгной пищевой добавки и ее контрольные испытания. Молочнокислые пищевые добавки - Г1Д, изготовленные на высококачественной рыбно-гидробионт-иой и молочной основе. Биотехнологический процесс изготовления ПД представлен на рис. 6.

Рис. 6. Биотехнологический процесс получения пищевых добавок

ПД в многовариантном виде готовится на основе способа производства молочнокислого напитка: тепловая обработка молочного сырья —»охлаждение —> закваска в виде L acidophilus и S thermophilics в объеме 0,5-3 % от массы сырья, после активирующей гходгоювки ее при Т = 45-50 °С —» при Т- 38-50 °С в течение 7 час. (Патент № 2127061 от 10.03.99).

Последовательность биотехнологического процесса приготовления молочнокислого напитка «Светлый» представлена на рис. 7.

Рис. 7. Биотехнологический процесс получения молочнокислого напитка «Светлый»

По органолептическим показателям рыбная пищевая добавка соответствовала требованиям, указанным в табл. 4.

Таблица 4

Органолептические показатели рыбной пищевой добавки

Наименование показателя Характеристика

Внешний вид I. Жидкая неоднородная масса с осадком, не более 46% П. Сухое порошкообразное, тонко-измельченное вещество

Цвет От кремовато-желтого до кремовато-серого

Запах Свойственный данному виду продукта

Наличие посторонних примесей Не обнаружено

Активность ацидофильной палочки была не менее 155х103 м единиц. Ацидофильная закваска также наращивалась и обновлялась тем же способом, описанным в Патенте № 2103886 от 10.02.98.

По физико-химическим показателям рыбная пищевая добавка соответствовала требованиям, указанным в табл. 5.

Таблица 5

Физико-химические показатели рыбной пищевой добавки

Наименование показателя Норма Метод испытания

Массовая доля сухих веществ для жидкой добавки, % не менее 15,0 14,2 По ГОСТ 26808-86

Массовая доля влаги для сухой добавки, %, не более 11,0 9,8 ПоГОСТ 13496.3-98

Массовая доля сырого протеина, %, не менее: для жидкой добавки для сухой добавки 4,0 50,0 4,6 52,0 ГОСТ 7636-85

Массовая доля хлористого натрия, %, не более: для жидкой добавки для сухой добавки 1,0 5,0 1,0 5,0 По ГОСТ 7636-85

Активная кислотность (рН) От 5,0 до 6,0 включ. По ГОСТ 28972-91

Качественная характеристика рыбно-гидробионтной пищевой добавки отличалась оптимальным содержанием основных веществ, макроэлементов (табл. 6), микроэлементного и витаминного состава (табл. 7).

Результаты исследования содержания в пищевой добавке вредных веществ, от которых зависит безопасность продукта представлены в табл. 8-9.

Из данных, представленных в табл. 8 и 9, следует, что йоказЯтели, отражающие безопасность биотехнологических продуктов, находятся в соответствии с СанПиНом 2.3.2.1078 - 2001 «Гигиенические требования

безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов», что свидетельствует о высокой биологической ценности полученных продуктов.

Таблица 6

Химический состав рыбно-гидробионтной пищевой добавки и наличие макроэлементов

Содержание, % на 100 г продукта

Наимено- 3 3 Углеводы \ Макроэлементы

вание образца § со 5 из & * § ГО Ыа К Са м8 С1

Пищевая добавка 87,0 5,7 3,4 2,1 1,8 0,0027 0,0356 0,236 0,0533 0,8

Таблицы 7

Витаминная обеспеченность, микроэлементный состав и калорийность рыбно-гидробионтной пищевой добавки

Наименование образца Содержание, % на 100 г продукта Калорийность, ккал / кДЖ

Витамины Микроэлементы

А в, В2 РР Ре Мп N1 Сг

Пищевая добавка 0,007 0,02 0,02 1,38 5580 310 7,5 28 60,6/255

Таблица 8

Химические исследования рыбно-гидробионтной пищевой добавки на содержание тяжелых металлов

Наименование образца Содержание тяжелых металлов, мг на 1 кг продукта

вг нё РЬ Сё Ъ\ 1 Си

Пищевая добавка Отсут. 0,03 Отсут. Отсут. 8,2 1,2 1

Таблица 9

Химические исследования рыбно-гидробионтной пищевой добавки на содержание хлорорганических пестицидов

Наименование образца Содержание хлорорганических пестицидов, мг на 1 кг продукта Массовая доля бензойной кислоты

ДЦТ ДЦЕ ДВД Альфа ГХЦГ Гамма ГХЦГ

Пищевая добавка Отсут. Отсут. Отсут. Отсут. Отсуг. 0,05

Таким образом, на основании проведенных исследований и результатов работы был разработан ассортимент пищевых добавок, применяемых в пищевой и перерабатывающей промышленности:

1) первая пищевая добавка готовится подобно КД, но не из рыбно-гидробионтных отходов, а из товарного высококачественного сырья.

Известно, что аминокислотный состав продуктов отражает их биологическую и пищевую ценность. Аминокислотный состав пищевой добавки представлен на диаграмме на рис. 8.

1,5 2

Содержание, % на СВ

Рис. 8. Аминокислотный состав пищевой добавки

Из диаграммы, представленной на рис. 8, следует, что больше всего в добавке находится глутаминовой кислоты (3,24 % на СВ), аспарагиновой кислоты (1,67 % на СВ), лейцина (1,48 % на СВ) и лизина (1,36 % на СВ).

С применением рыбно-гидробионтной пищевой добавки был вырабоган ряд пищевых продуктов и представлен дегустационной комиссии АО «Дальрыба» (г. Владивосток), которая достаточно высоко оценила представленные образцы. Данные представлены в табл. 10.

2) вторая пищевая добавка - молочнокислый налиток «Светлый» -готовится в виде молочнокислых напитков на молочной основе разной жирности. Сбраживающими компонентами в них являются те же производственные штаммы L. acidophilus и S. thermophilus, действующие при том же термическом режиме, что обеспечивает скорость и интенсивность биохимических процессов, снабжение субстрата многочисленными БАВ (ферменты, витамины, аминокислоты, макро- и микроэлементы, эубиотики и

пр.), биостимуляторами. Особенностью их изготовления явилось соотношение бактериальной закваски и сырьевой основы.

Таблица 10

Перечень продукции, приготовленной с применением рыбно-гидробионтной пищевой добавки и представленной дегустационной комиссии АО «Дальрыба»

Вид продукции Наименование продукции с пищевой добавкой Оценка, баллы

Салат "Оливье" 4,3

Салат д/в из морской капусты 4,0

Салат "Мимоза" 5,0

Кулинария Салат из отварной рыбы Салат овощной 4,0 5,0

Паста бутербродная из печени минтая 5,0

Котлеты рыбные жареные под соусом 4,5

Рыба жареная под соусом 4,3

Минтай филе-ломтики в масле 5,0

Минтай филе-ломтики в масле (контрольный образец) 5,0

Пресервы Минтай филе-ломтики в укропном масле 4,5

Минтай филе-ломтиков в укропном масле (контрольный образец) 4,5

Кондитерские изделия Торт бисквитный с масляным кремом Вафли с какао-жировой начинкой 5,0 4,9

Молочнокислый напиток «Светлый» использовался как самостоятельный продукт, так и в кулинарных целях для улучшения внешнего вида и вкусовых качеств кондитерских изделий и пресервов, что получило высокую оценку специального дегустационного Совета Приморского края при АО «Дальрыба» и медицинских учреждений г. Владивостока (Краевая клиническая больница, медико-санитарная часть больницы Рыбаков, Краевой клинический Центр охраны материнства и детства).

Кисломолочный напиток «Светлый» является экологически чистым продуктом и имеет согласно экологического сертификата № РОСС.ССК 025/0053 соответствующие требованиям и нормам физико-химические и микробиологические показатели. Данные представлены в табл. 11.

Таблица 11

Показатели качества кисломолочного напитка «Светлый»

Наименование показателя Уровень продукта Норма

Массовая доля жира, %, не менее 1,0; 2,5; 3,2 1,0-3,2

Массовая доля сыворотки на поверхности напитка, %, не более 5,0 5,0

Кислотность, °Т 75-120 75-120

Фосфатаза, % - отсутствует

Температура при выпуске с предприятия, °С, не выше 8,0 8,0

Бактерии группы кишечной палочки в 0,01 см3 напитка - Не допускаются

S.aureus в 1 см3 напитка - Не допускаются

Патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы, в 25 см3 напитка - Не допускаются

Глава 6. Обоснование примеиения молочнокислых микроорганизмов в пищевой промышленности. Молочнокислые продукты и пищевые добавки, изготовленные с помощью L. acidophilus и S. Thermophilus.

Отличительными признаками молочнокислых продуктов явились их экологическая чистота, безопасность, отсутствие солей тяжелых металлов, пестицидов, патогенных микробов. При введении ПД в эксперименте на мышах не проявлялась ни острая, ни хроническая токсичность. В то же время высокая питательная ценность, хорошая усвояемость, превосходные вкусовые качества позволили провести испытания ПД как на здоровых, так и на больных разного возраста. В эксперименте принимали участие 7 медицинских учреждений, в 9 отделениях лечились 710 больных, из них 353 человека - взрослые и 357 - дети. Контрольную группу здоровых людей составили 120 человек.

Исследования, проведенные в онкологической, гематологической, педиатрической, прокюлогической, гинекологической, терапевтической клиниках и центрах, показали высокий лечебно-профилактический эффект (Детский краевой онко-гематологаческий центр, поликлиники № 7 и № 12 г. Владивостока).

Глава 7. Особенности изготовления лечебпо-профилактической мази и косметического крема на основе биотехнологического продукта -молочнокислого напитка «Светлый». Пищевая добавка - молочнокислый напиток «Светлый» - была использована и как основа для создания лечебно-профилактической мази и косметического крема. ,,

Схема биотехнологического процесса приготовления косметического крема представлена на рис. 9.

Рис. 9. Биотехнологический процесс приготовления косметического крема

Для придания крему вязко-плотной консистенции к напитку добавляли ланолин, вазелин и растительное масло. Технологический процесс проводили при Т 20-24 °С в течение 6 часов.

На группе волонтеров в количестве 15 человек нами совместно с сотрудниками Проктологического центра Краевой клинической больницы и поликлиник № 9 и № 12 г. Владивостока показано, что крем хорошо разглаживает морщины, убирает угревую сыпь, залечивает раны. Крем обладает противоаллергическим действием при аллергических дерматитах (атопических, лекарственных, пищевых), а также сокращает их продолжительность и предупреждает рецидивы; помогает снятию острых патологических явлений у больных псориазом. Мазь оказалась полезной и в послеоперационный период больным с проктологической патологией, при лечении воспаления геморроидальных узлов, тромбоза, эрозии шейки матки, способствуя ускоренной эпителизации и рубцеванию изъязвленных участков.

ВЫВОДЫ

1. Определены режимы выращивания производственных' штаммов Lactobacillus acidophilus и Streptococcus thermophilics. Биотехнологя'Ческий процесс осуществляется на среде, состоящей из смеси гомогенизированных отходов рыбного промысла и переработки и отвара одного или нескольких гидробионтов в соотношении (1:2-7) при Т 45-48 °С.

2. Установлено, что кормовая добавка готовится по многовариантной схеме с инициальной основой, которая проходит стадии: на первой -приготовление рыбной суспензии из отходов рыбной переработки и OTBapd кальмара при Т 90 °С в течение 1 часа; на второй - в рыбную суспензию вносят лактобактерийную закваску (1 : 13), при Т 43-45 °С - 7 часов; на третьей проводят гидролиз муки при Т 58-60 °С - 1 час; на четвертой проводят внесение i идролизованной муки в соотношении с закваской (1: 2-3) с последующей микробиальной переработкой сырья при Т 45-48 °С - 7 часов; на пятой -внесение пастеризованной рыбной суспензии при Т 45-48 "С - 7 часов.

3. Установлено, что кормовая добавка высоко эффективна для теплокровных и холоднокровных животных и обладает' хорошей перевариваемостью, универсальными питательными, биостимулирующими и лечебно-профилактическими свойствами.

4. Определено, что пищевая, добавка в многовариантном виде готовится на основе биотехнологического способа производства кисломолочного напитка: тепловая обработка молочного сырья —> охлаждение —* закваска в виде L acidophilus и S. thermophilus в объеме 0,5-3,0% от массы сырья, после активизирующей подготовки ее при Т 45-50 "С —»сквашивание при Т 38-50°С в течение 7-10 ч. - ..

5. Показано, что пищевая добавка в сухой бульонной культуре L. acidophilus на рыбно-гидробионтной основе представляет собой полезный витаминный, макро- и микроэлементный комплекс.

6. Установлено, что напиток «Светлый» может быть использован как самостоятельная пищевая добавка, и как дополнение для обогащения других пищевых продуктов - кулинарных, пресервных, кондитерских, а также служит основой для изготовления косметического крема и лечебно-профилактической мази, которые можно использовать как в косметических, так и в лечебно-профилак-тических целях.

7. Разработаны и защищены 2 патентами и 1 авторским свидетельством биотехнологии: «Способ выращивания ацидофильных молочнокислых микроорганизмов» (Патент № 2103886, 1998), «Способ производства молочнокислого напитка» (Патент № 2127061, 1999), «Способ производства кормовой добавки» (А.с. № 1750605,1992).

■8. Разработана и утверждена нормативная документация на:

- кормовые добавки (ТУ № 9280-001-10236945-93 «Добавка рыбйая пищевая», ТУ № 9289-002-10226165-96 «Добавка кормовая лечебно-профилактическая», ТУ № 9289-003-80371744-99 «Добавка кормовая «Лактокормовит»);

- пищевые добавки ТУ № 9222-001-10226165-97 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Солнышко», ТУ № 9222-001-10242054-98 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Мечников», ТУ № 9222-001-80371744-99 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Светлый»);

- крем косметический (ТУ № 9158-002-80371744-2000 «Крем косметический «Светлый»),

Рекомендации для внедрения результатов исследований в биотехнологию пищевых продуктов:

- использовать патентные и авторские разработки для выращивания высоко активных штаммов в производственных лабораториях пищевых предприятий согласно описанию A.C. № 1750605,1992;

- осуществлять производство запатентованных кормовой и пищевой добавок (патент № 2103886, 1998) с помощью указанного в них сырья и производственных штаммов;

- внедрять и использовать кормовую добавку в жидком и (или) гранулированном виде в животноводческих, птицеводческих и рыборазводных предприятиях народного хозяйства.

- использовать многовариантные виды молочнокислых пищевых добавок для лечебно-профилактических целей как в медицинских учреждениях желудочно-кишечного, онкологического, гематологического, аллергического, проктологического, гинекологического, дерматологического и других профилей, так и в домашних условиях. Возраст пациентов - без ограничений.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации

1. A.c. 1750605 СССР, МКИ3. Способ производства кормовой добавки. / О.Д. Коротченко, C.B. Исай. - № 4835907; Заявлено 12.03.90; Опубл. 01.04.92, Бюл. № 28. - 1 с.

2. Коротченко О.Д., Столетний О.В., Буренков П.Т. Влияние кормовой лечебно-профилактической добавки на перевариваемость и использование питательных веществ рациона кур // Сб. научн. труд. ПСХИ. - 1992. - С. 36-38.

3. Коротченко О.Д., Столетний О.В., Буренков П.Т. Влияние кормовой лечебно-профилактической добавки на рост и оплату корма цыплят-бройлеров // Сб. научн. труд. ПСХИ. 1992. - С. 66-69.

4. Пат. 2103886 СССР, МКИ3. Способ выращивания ацидофильных молочнокислых микроорганизмов / О.Д. Коротченко, Н.Б. Коротченко. -Заявлено 23.05.96; Опубл. 10.02.98, Бюл. № 4, Приоритет 23.05.96, № 96110389. -1с.

5. Пат. 2127061 СССР, МКИ3. Способ производства молочнокис-лого напитка / О.Д. Коротченко, Н.Б. Коротченко. - Заявлено 08.01.97; Опубл. 10.03.99, Бюл. № 7, Приоритет 08.01.97, № 97100316. - 1 с.

6. Коротченко О.Д., Иванец Т.И. Целебное питание для детей на основе использования ацидофильных бактерий // В кн. "Воспитание в эпоху социальных перемен". - Владивосток, 1999. - С. 84-90.

7. Коротченко О.Д. Молочнокислые бактерии в пищевых добавках медицинского назначения // Материалы VIII Всерос. съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - Москва: РОСИНЭКС, 2002. - С. 188-189.

8. Коротченко О.Д. Крем лечебно-косметический "Светлый" на основе кисломолочного ацидофильного напитка // Материалы VIII Всерос. съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - Москва: РОСИНЭКС, 2002.

С. 189-190.

9. Коротченко О.Д. Целебное питание на основе использования ацидофильных и термофильных бактерий // Материалы международной научно-практической конференции "Пробиотические микроорганизмы -современное состояние вопроса и перспективы использования". - Москва, 2002. -С. 58.

10. Коротченко О.Д. Прикладные аспекты использования молочнокислых бактерий L. acidophilus и S termophilus для медицины // Микробиологический симпозиум "Фундаментальные и прикладные аспекты микробиологии на Дальнем Востоке". - Владивосток, 2003. - С. 126-129.

»•2 595 5

РНБ Русский фонд

2006-4 3672

Ольга Даниловна Корогченко

LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS И STREPTOCOCCUS TERMOPHILUS В ИЗГОТОВЛЕНИИ МОЛОЧНОКИСЛЫХ И РЫБНО-ГИДРОБИОНТНЫХ ПИЩЕВЫХ И КОРМОВЫХ ДОБАВОК

Автореферат диссертации

Отпечатано с оригинал-макета, подготовленного автором, минуя редподготовку Вне плана

!*

Лицензия ЛР № 020754 от 10.03.98 г. Подписано в печать 18.11.2004 г. Формат 60x84/16

Усл.-печ. л. 1,4. Уч. изд. л. 1,5 ^

Тираж 100 экз. Заказ № 291

Издательство Тихоокеанского государственного

экономического университета Участок оперативной полиграфии 690950, Владивосток, Океанский пр., 19

Введение.

Глава 1. Обзор литературы. Значение молочнокислых бактерий для здоровья и лечебно-профилактическое использование их в народном хозяйстве и медицине.

1.1. Роль молочнокислых бактерий в становлении здоровья биообъектов.

1.2. Использование молочнокислых бактерий в народном хозяйстве

1.3. Применение молочнокислых бактерий в технологии лечебно-профилактических продуктов.

1.4. Использование молочнокислых бактерий в народном хозяйстве.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Направления исследований.

2.2. Производственные объекты (базы).

2.3. Базы испытаний и внедрения биотехнологических разработок.

2.4. Материалы для исследований (молочнокислые бактерии Lactobacterium acidophilus и Streptococcus termophilus), сырье.

2.5. Культивирование производственных штаммов.

2.6. Оценка качества готовой продукции.

2.7. Оценка и апробация готовой продукции на биообъектах

2.8. Перечень патентов и технических условий для внедрения в производство.

Глава 3. Особенности биотехнологии молочнокислых кормовых добавок.

3.1. Сырье, приготовление бактериальной закваски, технологический процесс, оборудование.

3.2. Оценка качества КД: технические требования, качественная характеристика, наставления по применению.

3.3. Сопоставление качественной характеристики КД с ее прототипом АР-1 ЭССР.

3.4. Бактериологический контроль КД.

3.5. Токсикологический контроль КД.

Глава 4. Эффективность применения кормовых добавок в питании различных биологических объектов - живот* ные, птицы, молодь рыб.

4.1. Эффективность применения КД при кормлении животных телят, свиней, пушного зверя (норок, кроликов).

4.2.Эффективность испытаний КД на поросятах.

4.3. Эффективность применения КД при откармливании норок в пушном звероводстве.

4.4. Эффективность КД при вскармливании кроликов.

4.5. Эффективность использования КД при кормлении цыплят-бройлеров и кур.

4.6. Эффективность КД при выращивании разных сортов молоди рыб.

Глава 5. Биотехнология приготовления рыбно-гидробионтной пищевой добавки и ее контрольные испытания. Молочнокислые пищевые добавки — ПД, изготовленные на высококачественной рыбно-гидробионтной и молоч- ^ ной основе.

5.1. Рыбно-гидробионтная ПД: сырье, производственные штаммы, закваски, технология изготовления.

5.2. Качественная характеристика готовой продукции - биохимическая, бактериологическая, токсикологическая.

5.3. Эффективность применения рыбно-гидробионтной ПД в медицине у здорового и больного контингента (в гастроэнтерологии, онкологии, гематологии).

Глава 6. Обоснование применения молочнокислых микроорганизмов в пищевой промышленности. Молочнокислые продукты и пищевые добавки, изготовленные с помощью L.acidophilus и S.termophilus.

6Л . Технология приготовления молочнокислых пищевых добавок и продуктов на их основе.

6.2. Качественный контроль и характеристика готовой продукции ПД;.

6.3. Результаты лечебно-профилактического биотестирования молочнокислой ПД на здоровых и больных с разной патологией.

Глава 7. Особенности изготовления лечебно-профилактической мази и косметического крема на основе биотехнологического продукта - молочнокислого напитка

Светлый".

7.1. Технология изготовления лечебно-профилактической мази и 141 косметического крема.

7.2. Качественная характеристика и биотестирование мази и крема на безопасность, реактогенность.

7.3. Испытания лечебно-профилактических свойств молочнокислых мази и крема на здоровых людях и больных с разной патологией - аллергическими и атопическими дерматитами, в гинекологии, проктологии.

Актуальность проблемы. Вопросы современной биотехнологии охватывают широкий круг проблем, одна из них - создание новых пищевых добавок с использованием молочнокислых бактерий. Пробиотические: продукты, в состав которых входят микроорганизмы, оказывают благоприятное влияние на физиологические функции и биохимические реакции организма человека и животных. Их употребление способствует улучшению и нормализации различных функций и проявлению собственных защитных ресурсов организма (Дунченко Н.И:, 2003).

В последние годы интенсивное развитие производства пробиотических продуктов обусловлено снижением адаптационной активности у населения различных возрастных групп. Неблагоприятная экологическая обстановка, недостаток естественного сырья в народном хозяйстве для?питания человека и животных, замена натуральных продуктов на, искусственные и синтетические оказывают отрицательное влияние на здоровье. В этой связи наука, медицина и экономика все, чаще, обращаются к природным ресурсам и полезным микроорганизмам. Популярными среди них являются сравнительно легко воспроизводимые рыбные богатства и молочнокислые бактерии. Следует отметить, что морское сырье в качестве основы пробиотических продуктов практически не используется. Так, известно использование молочнокислых бактерий в приготовлении заменителей цельного молока из рыбных отходов для вскармливания сельскохозяйственных животных в Эстонии (Аси, 1984). Однако, этот способ имеет ряд недостатков - сложность технологического процесса, его длительность, необходимость обеспечения громоздким технологическим оборудованием, использование дефицитных дорогостоящих химических реактивов.

Молочнокислые продукты весьма широко были представлены также ранее в целебном пищевом ассортименте как в виде бактериальных препаратов (Акопян ЛЯ. с соавт., 1988; Антонов ЮА. с соавт., 1992, Варганов А.И.,

Опекунов К.А., Несчиляев В.А., Вдовина Р.И. с соавт., 1998), так и пищевых добавок. Однако, при этом морское сырье в качестве основы практически либо не использовалось, либо применялось в порядке исключения.

Вместе с тем, перечисленное, не исчерпывает всех возможностей биотехнологического использования продуктов моря и молочнокислых бактерий в народном хозяйстве и медицине (Степанова Б.Н., 2001; Липатов Н.Н.,-Андреенко JI.F., Антипова Т.А., 2002). Это и послужило основанием для разработки новых направлений в области их биотехнологии.

Цель и задачи исследования. Целью исследования явилась разработка новых технологий изготовления пищевых и кормовых добавок из некондиционного сырья рыбоперерабатывающей промышленности и молока; с использованием новых штаммов молочных бактерий Lactobacillus acidophilus и Streptococcus termophilus и их комбинаций.

Для достижения поставленной цели в ходе диссертационного исследования последовательно решались следующие задачи:

1. Разработать оптимальный способ получения кормовой добавки (КД) на основе молочнокислого брожения с целью повышения эффективности ее качественных показателей.

2. Обосновать технологию приготовления молочнокислых пищевых добавок (ПД) в сублимированном виде.

3. На основе сублимированных ПД разработать технологические параметры и рекомендации по изготовлению молочнокислых напитков.

4. Определить оптимальный режим хранения продуктовых штаммов молочнокислых бактерий.

5. Провести медико-биологические, микробиологические, иммунобиологические, биохимические исследования пробиотических продуктов питания, содержащих молочнокислые ПД.

6. Разработать нормативную документацию и технологию производства молочнокислых пищевых и кормовых добавок, как основу для производства продуктов питания.

И, Научная новизна. Впервые:

- обоснована возможность производства ПД и КД на основе штаммов L. acidophilus и S. termophilus и их комбинаций;

- теоретически обоснована и экспериментально доказана эффективность технологии получения молочнокислых ПД и пищевой продукции на его основе;

- установлены- технологические параметры, условия их сохранения и репродукции в активном состоянии;

- обоснована технология получения молочнокислых КД .

Практическая значимость работы. По результатам проведенных исследований:

- разработана и обоснована технология производства кормовой добавки: «Способ производства кормовой добавки» (А с. № 1750605, 1992);

- получено 2 патента: «Способ выращивания ацидофильных молочно-ф кислых микроорганизмов» (Патент № 2103886, 1998), «Способ производства молочнокислого напитка» (Патент № 2127061,1999);

- разработана и утверждена нормативная документация (7 технических условий): ТУ № 9280-001-10236945-93 «Добавка рыбная пищевая», ТУ № 9289-002-10226165-96 «Добавка кормовая лечебно-профилактическая», ТУ № 9222-001-10226165-97 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Солнышко», ТУ № 9222-001-10242054-98 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Мечников», ТУ № 9289-003-80371744-99 «Добавка кормовая «Лакто-кормовит», ТУ № 9222-001-80371744-99 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Светлый», ТУ № 9158-002-80371744-2000 «Крем косметический «Светлый»;

- технология производства молочнокислой КД внедрена и выпускается с 1988 г. на рыбокомбинате им. 60-летия Великого Октября ПО "Примор-рыбпром" (г. Владивосток). Кормовая добавка используется в племенных хозяйствах и совхозах Приморского края (пос. «Октябрьский», «Лучковская птицефабрика», «Лучегорская ГРЭС»);

- напитки «Солнышко», «Мечников» и «Светлый» используются в качестве лечебно-профилактических средств в онкологии, терапии, педиатрии, проктологии, гинекологии, крем «Светлый» - в дерматологии и косметологии;

- одним из главных практических достижений работы является создание безотходного производства КД и ПД в рыбной и молочной промышленности Приморского края.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты научного обоснования рецептур и технологии изготовления ПД и КД из отходов рыбоперерабатывающей промышленности и молока с использованием новых штаммов молочнокислых бактерий L. acidophilus и S. termophilus;

- новые биотехнологические решения, обусловливающие оптимальный способ получения КД на основе молочнокислого брожения с целью повышения эффективности ее качественных показателей;

- результаты лечебно-профилактической апробации пробиотических продуктов питания, содержащих молочнокислые ПД.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на VIII Всероссийской Тихоокеанской конференции с международным участием "Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины" (Владивосток, 1999), VIII Всероссийском съезде микробиологов, эпидемиологов, паразитологов (Москва, 2002), I Международной конференции "Пробиотические микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования" (Москва, 2002), Международном, симпозиуме "Фундаментальные и прикладные проблемы микробиологии на Дальнем Востоке" (Владивосток, 2003).

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 10 работ.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы (глава. 1), описания материалов и методов исследо

ВЫВОДЫ И ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Определены режимы выращивания производственных штаммов Lactobacillus acidophilus и Streptococcus termophilus. Биотехнологический процесс осуществляется на среде, состоящей; из смеси гомогенизированных отходов рыбного промысла и переработки и отвара одного или нескольких гидробионтов в соотношении (1:2-7) при Т '45-48-°С.

2. Установлено, что кормовая добавка готовится по многовариантной схеме:с инициальной основой; которая: проходит стадии: на первой - приготовление рыбной суспензии из отходов рыбной переработки и отвара кальмара при Т 90 °С в течение 1 часа; на второй — в рыбную суспензию вносят лактобактерийную закваску (1 : 13), при Т 43-45 °С — 7 часов; на третьей проводят гидролиз муки при Т 58-60 °С — 1: час; на четвертой проводят внесение гидролизованной; муки в соотношении с закваской (1: 2-3) с последующей микробиальной переработкой сырья при Т 45-48 °G — 7 часов; на пятой — внесение пастеризованной рыбной суспензии при Т 45-48 °С — 7 часов.

3. Установлено, что кормовая добавка высоко эффективна для теплокровных и холоднокровных животных и обладает хорошей перевариваемэ-стью, универсальными питательными, биостимулирующими и лечебно-профилактическими свойствами.

4. Определено, что пищевая добавка в многовариантном виде готовится на основе биотехнологического способа производства кисломолочного напитка: тепловая обработка молочного сырья —> охлаждение —> закваска в виде L. acidophilus и S. termophilus в объеме 0,5-3,0% от массы сырья, после активизирующей подготовки ее при Т 45-50 °С сквашивание при Т 38-50°С в течение 7-10 ч.

5. Показано, что пищевая добавка в сухой- бульонной культуре L. acidophilus на рыбно-гидробионтной основе представляет собой полезный витаминный, макро- и микроэлементный комплекс.

6. Установлено, что напиток «Светлый» может быть использован как самостоятельная пищевая добавка, и как дополнение для обогащения других пищевых продуктов — кулинарных, пресервных, кондитерских, а также служит основой для изготовления косметического крема и лечебно-профилактической мази, которые можно использовать как в косметических, так и в лечебно-профилак-тических целях.

7. Разработаны и защищены 2 патентами и 1 авторским свидетельством биотехнологии:: «Способ выращивания ацидофильных молочнокислых мж-ро-организмов» (Патент № 2103886, 1998), «Способ производства молочнокислого напитка» (Патент № 2127061,1999), «Способ производства кормовой добавки» (А.с. № 1750605; 1992).

8. Разработана и утверждена нормативная документация на:

- кормовые добавки (ТУ № 9280-001-10236945-93 «Добавка рыбная пищевая», ТУ № 9289-002-10226165-96 «Добавка кормовая лечебно-профилактическая», ТУ № 9289-003-80371744-99 «Добавка кормовая «Лак-то корм овит»);

- пищевые добавки ТУ № 9222-001-10226165-97 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Солнышко», ТУ № 9222-001-10242054-98 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Мечников», ТУ № 9222-001-80371744-99 «Напиток ацидофильный кисломолочный «Светлый»);

- крем косметический (ТУ № 9158-002-80371744-2000 «Крем косметический «Светлый»).

Рекомендации для внедрения результатов исследований в биотехнологию пищевых продуктов:

- использовать патентные и авторские разработки для выращивания высоко активных штаммов в производственных лабораториях пищевых предприятий согласно описанию А.С. № 1750605, 1992;

- осуществлять производство запатентованных кормовой и пищевой добавок (патент № 2103886, 1998) с помощью указанного в них сырья и производственных штаммов;

- внедрять и использовать кормовую добавку в жидком и (или) гранулированном виде в животноводческих, птицеводческих и рыборазводных предприятиях народного хозяйства.

- использовать многовариантные виды молочнокислых пищевых добавок для лечебно-профилактических целей как в медицинских учреждениях желудочно-кишечного, онкологического, гематологического, аллергического, проктологического, гинекологического, дерматологического и других профилей, так и в домашних условиях. Возраст пациентов - без ограничений.

1. Авербах М.М., Литвинов В.И. Иммунологические основы противотуберкулезной вакцинации. М:, 1970; - С. 14-19.

2. Акопян Л.Г., Чарян Л.М. Штамм бактерий Lactobacillus acidophilus, используемый для коррекции дисбактериоза при желудочно-кишечных заболеваниях и у больных раком толстой кишки. Патент № 2103353; -1998:

3. Анисимова Т.И., Аракелян Р.А., Штамм бактерий lactobacillus acidophilus N.V. ЕР 317/402 "Нарине", используемый при приготовлении и лечебно- профилактических продуктов для лечения дисбактериоза и его последствий: Пат. № 21464454. 2000.

4. Архипова А Н., Красникова Л.В., Веретнов Б.А. Свойства кисломолочных продуктов с растительными наполнителями // Молочная пром., 1995. -№3.- С. 9-10.5: Аси А.А., Вахтола Л.Х., Гидович А.В1 Малоотходное и бехотходное. производство. М., 1984. С. 1-3, 13.

5. Бавина Н.А., Королева Н.С., Хараш В.М., Соколова Т., Рехтман В.И., Потапов СЛ., Гребенник М:М. Консорции молочнокислых культур L.acidophilus, и способ получения кисломолочного продукта с его использованием: Пат. № 200157. 1993.

6. Баженов Л.Г., Бондаренко B.MJ, Лыкова Е.А., Огай Д.К. Изучение антагонистического действия лактобацилл на Helicobacter polori. - Журн; Микробиол., эпидемиол. и иммунобиол., 1997. - № 3 - С. 89-91.

7. Баракин Д А., Валиниеце М.Ю., Бауман В.К., Рейнер Н.А. Влияние кальция на течение стронциевого токсикоза // Вопросы питания, 1993. № 26.-С. 32-35.

8. Баранов В.Г., Дорофейчук В.Г. Лечебное питание при нарушениях защитных механизмов пищеварительного тракта у детей // Педиатрия, 1984.-№6.-С. 73-75.

9. Бардых И.Д., Кругликов В.Д., Мазрухо Б.И., Рыжко И.В., Москвитина Э.А., Цураева Р.И., Винокур М.И., Дроботковская Н.В. Экспериментальная оценка эффективности лактобацилл для профилактики и лечения холеры. ЖМЭИ. № 2. - 2001. - 68 с.

10. Безбородов J1.M. Биотехнология продуктов микробного синтеза. -М.: Агропромиздат, 1991. 238 с.

11. Белов; ВВ., Носков А.В. Производство? творожных изделий и-йогуртов с использованием стабилизационных систем //Пищ. пром., 1994. № 3. - С. 16-17.

12. Блохина И.Н., Жукова НП., Фаерман Н.Н. Опыт использования в лечебном питании детей препаратов, нормализующих микрофлору кишечника и перспективы их применения. //Педиатрия. № 7. - 1977. - G. 47-5 Г.

13. Богданова В.М. Микробиология молока и молочных продуктов "Колос", М., 1962. С. 120-130.

14. Бугрова О.В., Пырикова И.А. //Лечебное питание в терапии и профилактика гастроэнтерологических заболеваний у детей. Горький, 1988.-С. 150-156.

15. Волков А.И., Жданова Т.Ф., Карасева Г.Н., Самохвалова В.П. Антацидный бифилакт в профилактике язвенной болезни у детей //

16. Лечебное питание в терапии и профилактике гастроэнтерологических заболеваний у детей. Горький, 1988. С. 126-128.

17. Воропаев В.М. Статистика. Учебное пособие для вузов. М., 2001.-С. 191-192.

18. Высоцкий Г., Зилова И.С. Роль соевых белков в питании человека // Вопросы питания, 1995. № 5. - С. 20-27.

19. Долгушина В.Ф. Изучение иммунокорригирующих свойств бактериальных препаратов (лактобактерина, бифидумбактерина и бемитела) у беременных с урогенитальной инфекцией // Журн. Микробиол, эпидемиол. иммунолог., 1991. № 4. - С. 56-58.

20. Дунченко Н.И. Йогурт со сбалансированным химическим составом для школьного питания //Хранение и переработка сельхозсырья. -2001.-№2. -С. 46-48.

21. Дунченко Н.И. Разработка стабилизирующей пищевой добавки для производства термизированного йогуртного продукта // Молочная промышленность. 2002. - № 10. - С. 27-28.

22. Дымент Г.С., Янковский Д.С., Товкачевская Л.Д. Штамм бактерий L.acidophilus, используемый в составе бактериальных заквасок для кисломолочных продуктов: А С. 1839185. 1993.

23. Евелева В.В., Саенко А.Н., Гаджиева Э.А. Пищевая молочная кислота// Пищ. пром., 1994. № 11. - 29 с.

24. Евелева В.В., Саенко Н.„ Кремнева Н.П. Получение молочной кислоты // Пищ. пром., 1990. -№ Ю. С. 38-39.

25. Еркинбаева Р.К. Микробиологические способы повышения качества хлеба из муки тритикале // Конф. продукция микроорганизмов в окруж. среду. М., 1994. С. 120.

26. Загородняя Г.И. Микробиологическое обоснование технологии продуктов молочнокислого брожения с добавками из морских гидробионтов // Дисс. канд. биол: наук,- В , 1999. -. 135 с.

27. Зайцев В;П:, Ашгихин" И.С., Гандель В:Г. Комплексное использование морских организмов. М.: Пищ. пром., 1980. - С. 219:

28. Залашко М.В. Биотехнология переработки молочной сыворотки; М : Агропромиздат, 1990. С 10-12.

29. Затирка А.Ф., Кляшенко В;Е. Технология получения компонентов из молочного сырья // Пищ. пром., 1991. № 10. - С. 50-52.

30. Зобкова З.С. Плодово-ягодные наполнители для кисломолочных продуктов // Пищ. и перерабат. пром., 1987. № 9. - С. 30-31.

31. Зубрилин А.А., Мишустин Е.Н. Силосование кормов. М;: Изд. АНСССР, 1958.- 189 с.

32. Иванова Т.Н. Влияние кальцийсодержащего обогатителя на качество плодово-овощных пюре для; лечебного питания // Пищ. пром., 1995;-№8.-С. 42-43.

33. Инохов Г.С. Биохимия молока и молочных продуктов. М.: Пищ; ром;, 1970;

34. Калякина Л.П., Забодалова ЛюАю Влияние состава молочно-кедровой смечи на процесс структурообразования при сквашивании; // Молоч. пром., 1995: № 8. С. 18-19:

35. Кац Л.Н., Харатьян У.Ф. Мембранные структуры молочнокислых бактерий и их изменение в различных условиях культивирования. // Микробиология, 1969. 38: - Вып; 2. - С. 278-286.

36. Квасников Е.И. Антагонизм микробов и пути его профилактического использования: Ташкент: Изд. АН Уз СССР, 1949. -205 с.

37. Квасников Е.И. Биология молочнокислых бактерий. Ташкент: Изд. АН Уз СССР, 1960. - 161 с.

38. Квасников Е.И., Нестеренко O A. Молочнокислые бактерии и пути их исследования. М.: Наука, 1975. - 359.

39. Коваленко Л.В. Микробиология и иммунологическая оценка эффективности нетрадиционного применения эубиотикоа энтерола при кандидозном вагинозе у женщин. /Автореф., науч. дисс., Владивосток, 2000, 25 с.

40. Козьмина Н.П. Биохимия хлебопечения. М.: Пищ. пром., 1971. -176 с.

41. Колпаков А.И., Бондаренко В.М., Куприянова-Ашина Р.Г., Егоров С.Ю. Стимулирующее действие экзогенной рН казы на эубиотические штаммы лактобацилл, бифидобактерий и Esherichia colu. // Журн. Микробиол., эпидемиол и иммунол., 1996. № 4. - с. 14-18.

42. Конькова М.К., Кондратьева, Г.В., Чупринина Р.П. Изучение потребления аминокислот штаммом L.plantarum при культивировании на питательных средах разного состава // Матер, научн. практ. конф. Уфа, 1993.-С. 52-53:

43. Корнюшенкова И.Н. Влияние лактобактерина на состав микробиоценозов верхних дыхательных путей у лиц с нарушением микрофлоры // Авиакосм, и экол. мед., 1998. 32, - № 1. - С. 73-77.

44. Королева И.С., Рожкова И.В., Оленова И.В. Подбор заквасок детских ацидофильных смесей // Молочн. пром., 1980. № 5. - С. 31-32:

45. Коротченко О.Д., Иванец Т.Н. Целебное питание для детей на основе использования ацидофильных бактерий. Мир детства // Материалы педагог, семинара Воспитание в эпоху социальных перемен. Владивосток., 19-21 ноября 1999. - С. 84-80.

46. Коротченко О.Д., Коротченко Н.Б. Способ выращивания ацидофильных молочнокислых микроорганизмов //Пат. 2103886 СССР,-1998.

47. Коротченко О.Д., Коротченко Н.Б. Способ производства молочнокислого напитка//Пат. 2127061. СССР. 1999.

48. Костюк О.П., Чернышева Л.И., Волоха А.П. Физиологические и терапевтические свойства лактобактерий // Педиатрия, 1998 № 1. - С. 7176.

49. Крац Р., Колесников А.Ю. Пектины в производстве молочных изделий//Пищ. пром., 1993. -№6, С. 14-17.

50. Крашенинин П.Ф., Шацкая Н.Г. Диетические продукты для питания детей, страдающих пищевой аллергией. М., 1990. С. 16.

51. Кугенев П.В. Ацидофилин. Молоко и молочные продукты. М.: Россельхозиздат, 1981. С. 65-66.

52. Кудинова Т.Н., Чернышева Р.И.,Екисенина Н И. О взаимосвязи кишечного дисбактериоза и стеатореи у больных хроническим энтероколитом: М:: Сов. Мед., 1975. - 28 с.

53. Лекомцева Т.А., Постникова И.В., Янинович Е.А., Макарова И.Б. Вопросы-детской гастроэнтерологии; — Горький; 1981. II вып: - С. 122124:

54. Ленцнер А.А., Toot M.A., Микеньсаар М.Э. К методике выделения лактобацилл из испражнений. Журн. Микробиол., эпидемиол: и иммунолог., 1964. № 7. - С. 146-147.

55. Ленцнер Х.П., Лаханее С.Х., Бриниче В.Ю., Транина Т.А., Хаав А.А., Ленцнер А.А. Чувствительность различных стафилококков к антибиотикам и лактобациллу. Химиотерапия бактериальных инфекций // Тез. докл. Всесоюзн. конф. - Алма-Ата, 1979. - С. 23-24;

56. Ленцнер Х.П., Лаханее С.Х., Горчинин В.Ю., Лейфер Т.А., Ленцнер А.А. Чувствительность к антибиотикам лактобацилл микрофлоры человека // Сб. тезисов докл. III съезда Таллин, 1977. - С. 54-55.

57. Либец С.П:, Сергеева В.А. Новый кисломолочный продукт // Молоч. пром., 1995. № 8. - С. 9-10.

58. Лихачева А.Ю., Леванова Г.Ф., Бондаренко В.М., Блохина И.Н. Классификация и методы идентификации бифидобактерий и лактобацилл // Журн. Микробиол., эпидемиол. и иммуннобиол., 1997. № 5. - С. 114117.

59. Лихачева А.Ю., Соколова К.Я., Леванова Г.Ф. Совершенствование видовой идентификации лактобацил с использованием микрокалькуляторных тест-систем и данных о строении генома // Журн. Микробиол., эпидемиолог, и иммунобиол. 1995. № 5. - С. 45-48.

60. Лянная A.M., Интизаров М.М., Донских Е.Е. Биологические и экономические особенности бифидобактерий / Бифидобактерии и» ихиспользование в клинике медицинской промышленности и сельском хозяйстве // Сб. научн. трудов МНИИЭМ. М., 1986.

61. Макарова М.М. Микробиология силоса. Л.-М:: Сельхозиздат, 1962.- 176 с.

62. Маслов A.M., Чекина Е:И. Новый кисломолочный продукт лечебно-профилактического действия // Тез. докл. Междунар. семин. "Экология человека: проблемы и: состояние-лечебно-профил. питания": Академ.технол. наук России. Пятигорск, 1993. - С. 15.

63. Михайлов Н А. Аналитический расчет качества белков новых пищевых продуктов // Вопросы питания, 1991. № 3. - С. 49-52.

64. Мыльникова И.И., Попова JI.A., Лодгас НИ., Красик Е.А., Будина Л.С., Сафин В. А. Некоторые вопросы таблетирования колибактерина и лактобактерина. 11 съезд фармацеп. Рига, - С. 64-65.

65. Несчисляев В.А., Вдовина Т.П., Пучнина B.C., Чугунова Н:Н., Молохова Е.И., Рагузина С.В. // Журн. Микробиол., эпидемиол. и иммунобиол., 1999, -№ 2. С. 102-104.

66. Николаева К. Дисбактериоз. С.-П., 2000. С. 17-20.

67. Орещенко А.В:, Берестень Н.Ф. О пищевых добавках // Пищ. пром., 1996. -№ 6.-С. 4-5.

68. Пащенко Л.П., Петров С.М , Гореликова Е.Е. Новый продукт из молочной сыворотки // Пищ. пром., 1996. № 7. - С. 36-37.

69. Припутана А.С. Рациональное питание. Биологическая ценность и безвредные пищевые продукты. Определение безвредных пищевых продуктов и добавок.// Здоровье. Киев, - Вып. 18. - С. 39-41.

70. Припутана А.С. Рациональное питание. Гигиеническое изучение пищевых.добавок-в- Киевском НИИ гигиены питания // Здоровье Киев, 1983.-Вып. 17.-С. 19-22;

71. Римарчук Г.В., Лозовская Л.И., Спасская З.А., Прошагана B.C. Применение кисломолочного лактобактерина в комплексном лечении хронических заболеваний кишечника и поджелудочной железы. Г.: Лечебное питание в терапии, 1988. - С. 121-126.

72. Рогова И.А., Кроха Н.Г., Михайлов Н.А., Левачев М.М. Проектирование жирнокислотного состава новых продуктов в основе комплексного использования различных видов сырья // Вопросы питания, 1988.-№3 -С. 52-56.

73. Рудольф ВВ., Стасеев Л.П., Гузикова И.А., Рехина Н И., Воронова Ю.Г. Безалкогольные напитки с дарами моря // Пищ; пром., 1995.-№ 11.-С. 32-33.

74. Румянцев В.Г., Киркин Б.В., Корнеева Г.К., Давыдова Е.Н. НИИ Проктологии, МЗР РСФСР. Проблемы проктологии. Вып. 10 // Республ. сборн. научн. тр. - Москва, 1989. - С. 164-168.

75. Сажинов Г.Ю. Разработка технологии; гидролизатов молочных белков для продуктов лечебного питания // Дис. канд техн. наук. М., 1991.

76. Сафонов Г.А., Калинина Т.А., Романова В.П. Пробиотики как фактор, стабилизирующий здоровье животных // Ветеринария, 1992. № 7.- С. 3-4.

77. Семенихина В.Ф. Новые детские и диетические молочные продукты // Молоч. пром., 1994. № 1. - С. 9-11.

78. Сивохина М.К. Справочник по лечебному питанию. М.: Новая волна, 2000. - С. 27. .

79. Сиренко Л.А. Черноусова В.Н., Нестеренко O.A. Биологические аспекты разрушения массовых скоплений сине-зеленых водорослей и возможность рационального использования их биомассы // Гидробиология, 1966.-Вып. 5, 1.-С. 71-73.

80. Скурихин И М., Волгарев М.Н. Химический состав пищевых продуктов. М., 1987. - С. 20-22.

81. Слуцкая Т.Н. Особенности химического состава иглокожих // Рыб. хоз., 1973. № 7. - С. 50-52.

82. Смольский Г.М., Полянский К.К., Мордасов А.Г. Растительные добавки и пигменты в производстве кисломолочных продуктов // Тез. докл. 4-го междунар. симп. "Экология человека: пищевая технология и продукты. Видное, 1995. Ч. 2. - С. 310.

83. Солдатова В.В., Федулина Н.Н., Прокопьева В.И., Бараболя М.А., Тихомирова И. А. Влияние молочнокислых бактерий на микробиологические и биохимические процессы в силосе и его качество // РЖ 1992. - № 5. - Рефер. 531391.

84. Тюрин М.В., Лившиц В.А. Методы плазмидной ДНК в Lactobacillus buchreri: естественная компетентность, конъюгативная мобилизация и электротрансформация // Биол.мембраны, 1995. 12. - № 1.- С. 58-68.

85. Уйбу Я.А., Херне В:А., Татто Р.А. Нитрат восстанавливающие микроорганизмы в молочных продуктах и в грудном молоке // Вопросы питания, 1986, № 5 - С. 53-56.

86. Феклисова JI., Новокшонова В. Лечение кишечных инфекций у детей//Врач, 1997. -№2ю- С. 16-18.

87. Филимонова И.Н., Евелева В.В.,Кремнева Н.П. Лактат кальция из молочной сыворотки // Молоч; пром:, 1996. № 1ю - С. 14-15.

88. Флоринская Е.Э., Лазарев Е.Н. Микробиологическая оценка качества нового вида творога // Качество и сохраняемость продуктовых товаров. С.-П. Торгово-эконом. Ин. СПБ,-1992. - G. 46-51.

89. Фробишер М. Основы микробиологии. М.: Мир, 1995. - 395 с.

90. Хамагаева И.С., Вартанова А.И. Исследование процесса ферментации белковой массы бифидобактериями // Тез. докл. 4-го междунар. симп. "Экология человека: пищевая технология и продукты." -Видное, 1995. 4.2.-С. 345.

91. Ханаева Н.И., Карпенко Л.В:, Тополян М;Л., Лагерева. Т.М. О накоплении летучих кислот при культивирировании многокомпонентной закваски И Тез. докл. 4 междунар. симп. "Экология человека: пищевая технология и продукты". Видное, 1995. - 4. - С. 346-347.

92. Ханчаева И.С., Столярова А.С. Лиофилизированные закваски бифидобактерий // Молоч. пром., 1993. № 3. - С. 23-24.

93. Харькова И.С. Антибиотические свойства кисломолочного продукта "Бифимен" // Сб. научн. труд. "Получение, свойства и применение молочно-белковых концентратов". 1991. - С. 92-95.

94. Хочева А.И., Юшкевич С.Б. К дисбактериозу при инфекционном гепатите Боткина. М.: Сов. мед., 1971. - 70 с.

95. Черников М.П. Классификация пищевых белков и некоторые вопросы питания // Вопросы питания, 1987. № 5. - С. 35-38.

96. Черников М.П: О химических методах определения качества пищевых белков // Вопросы питания, 1986. № 1. - С. 42-44.

97. Чупринина Р.П., Горлова И.С., Конькова Н.К. Опыт непрерывного культивирования lactobacillus plantarum на питательныхсредах, содержащих гидролизат обезжиренного молока // Матер, науч.-практ. конф., Уфа, 1993. С. 118-120.

98. Шаманова Г.П., Кудрявцева Т.А., Шелкунова М.А., Кириенко И.П. Влияние защитных факторов на развитие лактобацилл и бифидобактерий // Молоч. пром., 1995. № 6. - С. 22-23;

99. Шаманова Г.П., Никонова Н:К. Сухие кисломолочные продукты пвышенной- биологической ценности для-питания детей раннего возраста. // Молоч. пром.- М.: Обзор информации. Агро НИИТЭИММ: 1987. - 56 с.

100. Шапошников А.А., Габрук Г.Г. Распределение токсичных веществ в молочных продуктах // Молоч. пром., 1994. № 6. - С. 32-36.

101. Шахназаров И.Л. Энифер.ия в звероводстве. ВДНХ, Павильон Ветеринария, М., 1992. - № 2. - С. 1-2.

102. Шацкая Н.Г. Разработка технологии молочного продукта диетического питания // Дис. канд. техн. наук. М., 1991.

103. Шендеров Б.А., Корнеева С.А Левченко Т.А. Головина Н.М. Питательная среда для наращивания биомассы бифидобактерий и лактобактерий. Пат. № 2061037. - 1996.

104. Аутофлора человека в норме и патологии и ее коррекция. Г., 1988. - С. 107-112.

105. Abo-Elanga I.G;, Kanoller О, Disbacterios // Z. Bl. bact II, Abt., 1965b. -P. 119, 117.

106. Abraham Т., Iawahar, Setty T.M. Rudra, Effect of sodium bensoate, on the fermentative, activity of Lactobaeillys Plantarum in fermented prawn piekce // Fish. Tecnol., 1994. 31. - № 1. - P. 48-51.

107. Adachi Sususmu, Tola Takahira, Mikai Takao, Watanabe Takashi, Yokoi Haruhiko, Sumitomo Heavy Ind. Lactobacillus sp. KPB-167 and method of manufacturing viscose poly saccharides empleying the same. Patent № 5204247.

108. Almeida I.S., Barreto M.T.O., Melo E.P., Carrondo M.I. A kinetic method for calculating the viability of laetic starter cultures // J. Ind, Microbiol., 1993.- 12.-35.-P. 348.

109. Andersen L. Bioprotective culture for fresh sausages // Fleischwirtschaft, 1997. - V. 77. - №:7. - P. 635-637.

110. Alsinr В.Из)Д1ение продуктов метаболизма и антагонистического действия комбинированных культур Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus // Turk. hij. deneysel. biol. derg: 1998. -55. N 1. - P. 17-23.

111. Berger O.I. Fordjupnin gsarbete. Probiotika till hund-Utopi eller verklighet // Sven. Veterinarian. 1998. - 50. - N 12. - P. 523-529.

112. Bessis D., Le Quellec A., Sotto A, Perez C., Ciurana A.J. Lactobacillus acidophilus endocarditis after an appendectonez //Clin/ Infec. Diseases. 1995. 20. - N 3. - P. 724-725.

113. Blanc В., Laloi P., Atlan D., Gilbert Ch. Portalier R., Two cell-wall associated aminopeptidales from Lactobacillus helveticus and the purification and characterization of АР II from strain ITGL1 // Gen. Microbiol., 1993. 139. -N7.-P. 1441-1448.

114. Boraam F., Faid M:, Laфent J.P., Breton A. Lactic acid, bacteria and yeast associates , with traditional marocean sour-dough bread fermentation // Sci alim., 1993. 13.N 3.-P. 501.

115. Bosi F., Rebecchi A., Cappa F., Bottazzi V., Battistotti В., Batteri Lattici per la produzione di formaggio grana. /W. diostribuzione e caratterizzazion di batteri latteici mesofili Sci. E. teen. Latt. Casearia, 1993. 44. - N 4. - P. 205-214.

116. Brankova R., Krastev A., Nestorov N., Dinera B. Microbial associations and their interactions in fermented meat products // Microbiol.

117. Assoc. and interactions Food 12-th int JVMS-JCFMH Symp. Budapest, 1984. -P. 313-320.

118. Brkic B. Suskovic J., Matosics;, Antibakterijska aktivnost zazlicihh sojeva bacterije Lactobacillus plantarum., Prehramb.-technol. I viotehnol.rev. 1993.-31.-N2-3.-P. 77-81.

119. Brown J.P., Edwards M R., Van Demark P.I. Respiration of Lactobacillus casec, // Canad J, Microbiol. 1968. 14. - P. 829-835.

120. Bruer В., Kadler T. Inducible resistance against, in Lactobacillus casei. Arch. // Microbiol. 1966. 165. - N 2. - P. 114-118.

121. Bururini A., Aloisi P., Tagliazzucchi R., Cantoni G. Ammine biogene prodotte da entorobatteri e batten hattici isolati da impasti disalame // Ind. alim. 1995.-34.-334 pp.

122. Byun Iae-Won, Park Seung-Chun, Benno Yoshimi, Oh Tae-Kwang. Probiotic effect of Lactobacillus sp. DS-12 in flounder (Paralichthys olivaceus), // J: Gen. and Appl. Microbiol. 1997. 43. - N 5. - P. 305-308.

123. Cagigas S. Instant yogurt composition and procecs. Patent N 5145698. 1992.

124. Castagnetti G.B., Turtura G.C. Osservazioni pleliminari sull'impiego di alcune colture starter nella transformazione del latte di capra a livella aziendale // Sci. E. teen. Latt. casearia, 1993. - 44. - N 6. - P. 389-404.

125. Combes Т., Salhi A., Donnecvs microbiologiques nouvelles aur la souche du Lactobacillus contenue dans la specialite Prophigie // Rev. Fr. Qunecol. Et obstet. 1997. 92. - N 3. - P. 183-187.

126. Coppola R., Giagnaeovo В., Lorizzo M., Grazia L., Characterization of Lactobacilli involvedion the ripening of soppressata molisana, typical southern Italy fermented sausage // Food Microbiol., 1998. 15. -N 3. - P. 347353.

127. Daviason P.M. Antimicrobial substances // Microb. Ecol. Health and Disease, 1992. 5. - N 6.- III-IV.

128. Dellaglio F., Torriani S., Sansidoni A., Golinell F., Termini D. Caratterizzarione dei butteri Lattici nelle prime fasi di stagaionatura del proseiutto di San Daniele // Ind. alim., 1984. 23. - N 9. - P. 676-682.

129. De Moss R.D. Cell complex Physion // Microbiol., 1953. -V. 41. P. 207-209.Dohzogosz W.J., Lindgren S.E., Biogaia A.B. Antibiotic reuterin. Pat. № 5423960. - 1995.

130. Donders G.C. Microbiology of- the bacretial flora on fresh vaginal smears // Infec. Diseases Obstet and Gynecol., 1999. 7. - N 3. - P. 126-127.

131. El-Soda M.A, Hantira A.A., Ezrat N.J., El-Shatei H.K. Accelerated ripening of Rac Chuse Using breere schj eked mutant strains of Lactobacterius casei., // Sood Chem., 1992. 44. - N 3. - P. 79-184.

132. Fichtl P. Einsatz von Milchsaure-bacterica als Starterkulturen zur aufwertung von Fish farce // Siss Dokt. Agrarwiss // Fak.Landwiii and Gartenbau Techn. Univ. Munchen. 11. - 115 p.

133. Ford Larry C., Micro-encapsulated Lactobacilli for medical applications, Pat. 5635203. 1997.

134. Fukushima Michihiro, Nakano Masuo. Effect of a mixture of organisms, Lactobacillus acidophilus of Streptococcus faecalis on cholestrol metabolism in rats fed on a fat and chlesterol - enriched diet // Brit. Nutr., 1966.-76.-6.-P. 857-867.

135. Ghuysen J.M. La resistance bacterenne aux antibiotiques un' modele exemplaira devolution moleculaire dirigee // Vern. Kon. acad. geneesk. 1998 -60.-N 4.-P. 287-294:

136. Gibson G.R. Dietary modulation of the human gut microflora using probiotics // Brit. J. Nutr., 1998. 80. - N 4. - P. 209-212.

137. Goisis//// J.D., Klaenhammer T.R. Factors involved involved in adherence of Lactobacilli to human CaCo-2 cells // Appl. And Environ Microbiol:, 1994: 60: N 12. - P. 4487-4494.

138. Hagnes D.B., Haoven D.G. Bifidobacteria their potential for use in American dairy prodacts // Food technol.,. 1991. 45. - N 4. - P. 74, 76, 78-80, 83.

139. Hammes W., Muller К. I Co. Zum Reifen von Rohwurst geeignete Mikroorganismen vom stamm Lactobacillus sake: Pat. N 0641857. 1993.

140. Hellen A., Jarstrand C., Pahlson C. Treatmen of bacterial vaginosis with Lactobacilli, Sex. Nrans. Dis. 1992, 19.146-148.

141. Heimburger D.C., Sockwell D.G., Geels W.J. Diarrhea with enteral feeding: Prospective reappraisal of putative causes //Nutrition, 1994. 10. - N 5. - 392-396.

142. Henriksson A., Andre L., Comway P.L. Distribution of Lactobacilli in the porcine gastrointestinal tract., FEMS // Microbiol. Ecol., 1995. 16. - N 1.

143. Herrmann C. In "European Brewery convention, Proceoling of the congress" Stockholm, 1965 //Elsener Publishing Company, 1966. Amsterdam-London New York.

144. Henriksson A., Andre L., Comway P.L. Distribution of Lactobacilli in the porcine gastrointestinal tract., FEMS //Microbiol. Ecol, 1995. 16. - N 1.

145. Hessle C., Hanson L.A., Wold A.E. Lactobacilli from human gastrointestinal mucosa are strong stimulators of IL-12 production // Clin, and Exp. Immunol. 1999. 116. - N 2. - P. 276-282.

146. Hugas M., Neumeyer В., Pages F., Garriga M., Hammes W.P. Die antimikrobielle Wirkung von Bateriozin bildenden Kulturen in Flieschwaren // Fleischwirtschal, 1966. 76. - 6. - P. 649-652.

147. Hurwitz J. The Treatment of urinary-tract infection // Biochim. Et biophys.acta., 1987. V. 28. - P. 59-61.

148. Jarmarova M., Hrabe J. Nove druhy jogurtovych vyrobku ve s.p. Lacrum Brno // Hrjm. potravin., 1990. 41.- N 10. - H. 532-534.

149. Jeppensen V.F. Biological preservation of seafood by lactic acid bacteria// Indofish intern. 1993. - N 5. - P. 29-34.

150. Kalantzopoulos G. Fermented products with probiotic qualities // Anaerobe. 1997. 3. - N 2-3. - P. 185-190.

151. Kato Takeo, Maeda Kumiko, Sasuya Haruko, Matsuda Tsukasa, Complete growth inhibition of Bacillus subtilis by nisin-producing Lactococci in fermented 80 ybeans // Biotechnol. and Biochem. 1999. - 63. - N 4. - P. 642647.

152. Kluyver A.I., Donker H.I.L. Can colonic bacterial metabolites predispose to chlesterol gass stones // Proc. Acad. Amsterdam. 1985. V. 28. -P. 605-607.

153. Kmet V., Lucchini F., Agregation-apromoting factor in human vaginal Lactobacillus strains, FEMS // Immunol, and Med. Microbiol. 1997. - 19. - N 2.-P. 111-114.

154. Kot E., Furmanov S., Kezkorovaines A. Accumulation of iron in Lactic acid bacteria and bifidobacteria, // Food Sci, 1995. 60. - N 3. - P. 547550.

155. Larsen R.F., Anon M.C. Effect of water activity of milk upon growth and acid production by mixed cultures of Streptococcus thermophilus Lactobacillus bulgaricus // J. Food Sci., 1990. 55. - N 3. - P. 708-710.

156. Liu Yinwu. Выделение и идентификация Lactobacillus spp., Weishengwuxue tongbao., Microbiology, 1993. 20. - N 4. - P. 203-206.

157. Lynn M.E., Mathers J.C., Parker D.S. Gunar-gum feeding reduced Lactobacillus fermentum adnerence to enterocytes Proc. Nutr. Soc., 1994: 53. -N3 -227 p.

158. Majnarich J.J., O'Brien T.J. Bioenergy Systems, N 08/872269. Strain of Lactobacillus plantarum. Pat. 5895758, USA. 1999.

159. Marklinder L., Lenner C. Fermented oatmealsoup-influence of additives on the properties of a nutrient solution for enteral feeding // Food Microbiol., 1994. 11. - N 6. - P. 505-513.

160. Martinussen J., Andersen P. S., Hammer K. Nucleotide metabolism in Lactococcus lactis: Salvage pathways of exogenous pyrimidines // J. Bacteriol, 1994.- 176.-N 5.-P. 1514-1516.

161. Matsumiya Y., Kato H., Watanabe K. Transmission of Lactobacilli from mother to newborn infant., Int. Symp. 2-nd Woriti Congr. "Anaerob. Bact. and Infec." Nice, Oct. 3-6, 1998 // Microb. Ecol: Health and Disease. 1998: 10: - N 3-4. -200 p.

162. Meurman J.H., Antila H., Salminen S. Recovery of Lactobacillus strain GG (ATCG 53103) from soliva of healty volunteers after consumption of yoghurt prepared with the bacterium // Microbiol. Ecol. Health and Disease, 1994. -7.-N 6.-P. 295-298.

163. McGroarty J.A. Cell surface appendages, of Lactobacili; FEMS Microbiol. Lett. 1994. - N 3.- P. 123.

164. Miyakawa Hiroshu, Anjitsu Katsue, Ishibashi Norio, Shimamura. Seiichi. Effects of pressure on enzyme activities of Lactobacillus helveticus LHE-511 // Biosci:, Biotechnol. and Biochem. 1994. 58. - N 3. - P. 606-607.

165. Nemcova R., Bomba* Gancarcikova S., Herich R. Lactobacillus para casei ond fructooligasaccharides on the faccat microflora in wealing piglefs. //

166. Berlin und munch. Tierarzte Wochenschr МФИШ. 1999. 12. - N 6. - 7. - P. 225-228.

167. Nemeth A., Gasparin-Reichardt J., Farkas J., Balogh J., Andrassy E. Identifizierung and characterisierung von Milchsaurebacterien gebildeten // Bacteriozinen, Fleschwirtschaft, 1996. 76. - N 9. - P. 911-916, 928.

168. Neumann E., Fortes Т., Celia L.L. Lactobacillus acidohilus as dietary adjuact: "In vivo", susceptibility to gastric juice,, bile- salts, Lysosyme and chemotherapeutie agents // Rev. microbiol., 1995. 26. - N 1. - P. 59-65.

169. Nikkija P. Johnsson Т., Rosenqvist H., Toivo N: H., Effect of pH of growth and fatty acid composition of Lactobacillus biichneri and L. fermentum, /App./// Biochem and Biotechnol. A. 1996. - 59. - N 3. - P. 245-257.

170. Oliveira M.M., Fonseca H.R., Brito M., Dulce D. Relacao Lactobacillus/ Micrococcus no choureco de carne // Rev. port. Cienc. Vet., 1987, 82. N 484. - P. 341-349.

171. Paul S.M. Bacteria and immunoglobulin-containing composition for human gastrointestinal health: Pat. N 553. 1988.

172. Paul S.M. Immunoglobulin and fibercontaining composition for human gastrointestinal health: Pat. N 553. 1989.

173. Pavlova S.L., Kilic A., Мои S.M., Tao L. Phage infection in vaginal Lactobacilli: An in vitro study., In fee. Diseases Obstet. and Gynecol:, 1997.- 5. N 1. - P. 36-44.

174. Rada V., Rychly J. The effect of Lactobacillus salvarins adminisration on coliforms and entero coeci in the crop and calla of chichen broilers // Vet. Med., 1995. 40. -N 10. - P. 311-315.

175. Ray L., Mukherjel G., Majumdar S.K. Production of lactic acid from ' potato fermentation // Indian J. Exp. Biol., 1991. 29. - N 7. - P. 681-685.

176. Rogosa M:, Franklin J.G., Perry K.D. Correlation of the Vitamin Requirements with Cultural and Biochemical Characters of Lactobacillus spp. // J. Gen. Microbiol. 1961. p. 473-482.

177. Sharpe M.E., Latham M.J., Garvie E.J., Two new Species of Lactobacillus Isolated from the Bovine Rumen, Lactobacillus ruminis sp. nov. And Lactobacillus vitulinus sp. nov., 1973. // J. Gen Microbiol. 77. - P. 37-49.

178. Stepancher J., Shenderov В., Kulga L., Perepanova Т., Konstantinova O., Role of gut Lactobacillus plantarum in controlling human urinary oxalate // Microbiol. Ecol. Health and Disease, 1999; 11. - N 2. - 107 pp.

179. Takahiro Toba, Kairo Arihara, Susmi Adachi. Distribution of microorganisms with particular reference to encapsulated bacteria in kefir grains // Int. J. Food microbiol., 1990. 10. - N 3-4. - P. 219-224.

180. Tao Lin, Pavlova S.J., Мои S.M., Ma Wen-Gen, Kilic A. Analysis of Lactobacillus products for phages and bactriocins that inhibit vaginae Lactobacilli // In fee. Diseases Obstet. and GynecoK 1997. -5. N 3. - P. 244251.

181. Vassu V., Sararman E., Csutak O., Stoica I., Ghergheata E. Lactic acid bacteria used as probiotics- isolation, preservation and biomass Obtaining Ann. Univ., Bucuresti Biol., 1997. - 46. - p. 87-91.

182. Velraeds M.artine M.C., Van der Mei Henny C., Reid G., Busscher H. Inhibition of initial adhesion of Uropathogenic Enterococcus faecalis by biosurfactants from Lactobacillus isolates // Appl. And Environ. Microbiol: 1996.-62.-N 6.-P. 1958-1963.

183. Vescko M., Torriani S. Dellaglio F., Bottazi V.,Basic characteristics ecology and application of Lactobacillus plantarum: A review // Ann. microbiol. ed. Enzimol., 1993. 43. - N 2. - P. 261-284.

184. Vogel R.F., Pohle B. S.,Tichaczek P.S., Hammes W.P. The competitive advantage of Lactobacillus curvatus LTH 1174 insausage fermentations is caused by formation of curvacin A. // Syst. and Appl. Microbiol., 1993. 16. - N 3. - P. 457-462.

185. Yagasaki Makoto, Ozaki Akio, Hashimoto Yukio. Enzymatic production of d-Glu from 1 Glu-by Lactobacillus brevis ATCC 8287 // Biosci., Biotechnol. and Biochem., 1993. 57. - N 9: - P. 1499-1502.

186. СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

187. ПРИ ГОСУДАРСТВЕН.!ОМ КОМИТЕТЕ СССР ПО НАУНЕ Н ТЕХНИКЕ (ГОСКОМИЗОБРЕТЕНИЙ)йШЖШ сишишю

188. На основании полномочий, предоставленных Правительством СССР, ГоскомизоСретений выдал настоящее авторское свидетельство на изобретение:

189. Способ производства кормовой добавки"

190. Автор (ачторы): Коротченко Ольга Даниловна a Meat' Светлана Викторовна1. Занвители;1. Заявка №

191. ТИХООКЕАНСКИЙ ИНСТИТУТ БЙООНГАШЧЕСКОхимии ДАЛЬНЕВОСТОЧНОГО ОТДЕЛЕНЫ АЯ СССР4835907 Приоритет изобретения 12 марта 1°?0г .

192. Зарегистрировано в Государственном реестре нвобретевнй СССР1.апреля 1992г.

193. ДеЛствне авторского свидетельства распространяется на всю террито^умегб^юза ССРkih к1. Начальник om(k.*a'■/1. РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

194. РОССИЙСКОЕ АГЕНТСТВО ПО ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (РОСПАТЕНТ)1. А ТЕ Н Т1. JSJo 2103886на ИЗОБРЕТЕНИЕ

195. Способ выращивания ацидофильных кисломолочныхмикроорганизмов"

196. Патентообладатель (ли): Коротченко Ольга Даниловна и Коротченко Наталья Борисовна

197. Автор (авторы): Коротчен к о Ольга Даниловна и Коротченко Наталья Борисовна

198. Приоритет изобретения 23 мая 1996г.

199. Дата поступления заявки в Роспатент 23 мая 1996г. Заявка.№ 96110389

200. Зарегистрирован в Государственном реестре изобретений10 Февраля 1998г.1. ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ДИРЕКТОРвщш: SIв