автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.06, диссертация на тему:Усовершенствование технологии и разработка новых видов рецептур зубных паст

На правах рукописи

Воронцова Наталия Николаевна

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ И РАЗРАБОТКА НОВЫХ ВИДОВ РЕЦЕПТУР ЗУБНЫХ ПАСТ

Специальность: 05.18.06 - Технология жиров, эфирных масел и парфюмерно-косметических продуктов.

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

*

Москва - 2008

003456303

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московский Государственный университет пищевых производств»

Научный руководитель

доктор технических наук, профессор Кривова Анна Юрьевна Официальные оппоненты:

доктор технических наук, профессор Скрябина Наталья Михайловна

доктор химических наук, профессор Варламов Валерий Петрович

Ведущая организация Всероссийский Научно-исследовательский институт биологических наук (РАСХ)

Защита состоится декабря 2008 г. в/^назаседании Совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.148 07 при ГОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств», 125080, Москва, Волоколамское шоссе, д. 11, ауд. корп.А.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО МГУПП.

Автореферат был разослан о?-/•/'

Ученый секретарь Совета

Богатырева Т.Г.

Общая характеристика работы.

Актуальность темы. Разработка новых технологий для конкурентоспособных косметических изделий с высокой потребительской, биологической ценностью и длительным сроком годности - это перспективное направление развития косметической промышленности. Наибольший интерес с этой точки зрения представляют изделия каждодневной гигиены полости рта. Для обеспечения статуса зубной пасте как изделия лечебно-профилактического, необходима актуализация биологического и лечебно-профилактического потенциалов состава данных изделий.

В настоящее время большое внимание уделяется поиску новых биологически активных компонентов. Поиск и сравнительное изучение свойств синтетических и природных веществ, а также их смесей для повышения лечебно-профилактических качеств зубной пасты является задачей актуальной. Наряду с вышесказанным, сохранение первоначального качества зубных паст на протяжении всего срока годности, заявленного производителем, а также повышение безопасности для здоровья зубных паст является важной проблемой и имеет практическое значение. Разработка и изготовление косметической продукции с определенными лечебно-профилактическими свойствами основана на подборе необходимого состава не только БАВ, но и компонентного состава рецептур. Такой подход к решению проблемы дает возможность получения инновационных, косметических продуктов с новыми свойствами.

В связи с этим углубленное изучение химического состава компонентных смесей, а также особенностей структуры и свойств, вводимых в изделия БАВ, совершенствование технологии производства и методологии разработки рецептур для создания конкурентоспособных изделий, в частности зубных паст является актуальным и своевременным.

Степень разработанности проблемы. Теоретические и научно-практические исследования диссертационной работы основаны на фундаментальных научных трудах известных отечественных и зарубежных ученых Н.М. Эмануэля, П.А.Ребиндера, Шталь Е., В.Х. Пароняна, А.Ю.Кривовой, С.А.Ливинской, Э.В.Фрончека, А.А.Куликова и является продолжением исследований, проводимых на кафедре «Технология жиров и биоорганического синтеза» МГУПП.

Цели и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось осуществление комплексного подхода к проблемам получения стабильных суспензий и эмульсий и разработка на их основе зубных паст, содержащих БАВ в виде добавки, придающей изделию функциональные и лечебно-профилактические свойства, а также усовершенствование технологий зубных паст. В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

-определение направления по расширению ассортимента зубных паст лечебно-профилактической направленности на основании маркетинговых исследований;

-разработка метода экстракции сверхкритических флюидных растительных экстрактов на основе изучения влияния технологических параметров на качественный и количественный состав;

- обоснование выбора БАВ, которые могут быть использованы в виде добавок в зубные пасты функционального назначения;

- разработка метода получения капсулированного ретинол пальмитата из альгинат-хитозанового комплекса;

- разработка научно обоснованных рецептур и технологий получения зубных паст с заданными функциональными свойствами;

- изучение теоретических и прикладных аспектов включения ингредиентов в рецептуры зубных паст, обеспечивающих улучшенные реологические свойства изделию;

- обоснование получения дисперсных систем оптимального количественного и качественного состава, обеспечивающих заданные физико-химические и органолептические характеристики разрабатываемых зубных паст,

- изучение кинетики окислительных процессов в разработанных зубных пастах с целью определения условий и сроков безопасного хранения;

- подтверждение функциональных свойств разработанной зубной пасты;

- усовершенствование технологии производства зубной пасты, апробирование новой технологии в промышленных условиях.

Научная новизна. В диссертационном исследовании автором получены следующие научные результаты:

- на основании экспериментальных данных научно обосновано применение сверхкритических флюидных экстрактов в качестве многофункциональных добавок в лечебно-профилактические зубные пасты на основании состава экстрактов и доказано лечебное действие зубных паст клинико-токсикологическими испытаниями, которое показывает кровоостанавливающий и регенерирующий эффекты;

- установлена зависимость химического состава сверхкритических флюидных экстрактов от температуры экстракции, показана температура экстракции 40°С;

установлена зависимость механических свойств микрокапсул с инактивированным ретинол пальмитатом от способа производства и свойств хитозана;

- научно-обоснованно введение ингредиентов в рецептуру зубной пасты с целью обеспечения потребительских свойств, в частности консистенции;

- определены сверхкритические СОг-экстракты, обеспечивающие наряду с высокими биологически активными свойствами, высокую антиоксидантную активность;

- обоснованы лечебно-профилактические свойства, косметические свойства зубной пасты, проявляющиеся в результате применения предлагаемых биологически активных веществ.

Практическая значимость работы. Разработана основа зубной пасты с вводом композиции абразивно-загущающих ингредиентов (диоксид кремния : натрий карбоксиметилцеллюлоза : глицерин) и обеспечивающая получение продуктов со стабильной однородной консистенцией, отвечающей требованиям нормативной документации. Предложено и обосновано использование С02-экстрактов, обладающие кровоостанавливающими, противовоспалительными и антиоксидантными свойствами. Разработаны условия экстракции для получения экстрактов с заданными свойствами. Разработаны условия капсулирования ретинол пальмитата с применением альгинат-хитозанового комплекса. Получены принципиально новые аспекты составления рецептур зубной пасты на основе использования загущающей композиции и СОг-экстрактов. Увеличен срок годности зубной пасты с 24 месяцев до 30 месяцев за счет введения предлагаемых природных антиоксидантов. Дана практическая оценка эффективности использования нового вида зубной пасты, как лечебно-профилактического средства. Усовершенствована технология промышленного производства зубной пасты, позволившая сократить время варки зубной пасты на 2,5 часа. По результатам работы получено 3 патента.

Апробация работы. Основные результаты работы были представлены на Международной научной конференции «Рациональные пути использования вторичных ресурсов АПК (Краснодар, сентябрь 2007), IV международной конференции-выставки «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации» (Москва, 2006), 2-ой Международной конференции «Рыночные исследования в масложировой и в смежных отраслях пищевой промышленности» (Санкт-Петербург, май 2006), I международной научно-практической конференции «Сверхкритические флюидные технологии» (Ростов-на-Дону).

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 8 печатных работ, в том числе в журнале, рекомендованном ВАК -2 и 3 патента. Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, в которой даны описания методов исследования, результаты исследования, главы обсуждения результатов, выводов, списка использованной литературы и приложений. Работа изложена на 157 странице (с приложениями), включает 14 таблиц и 25 рисунка, 3 приложения. Список литературы включает 171 источник, из них 82 зарубежных автора. Основное содержание работы

Во введении обоснована актуальность темы диссертационной работы, ее научно-практическое значение, сформулирована цель работы. 1. Обзор литературы. На основе отечественной и зарубежной литературы дан анализ и современное состояние проблемы: маркетинговыми исследованиями установлены приоритеты зубных паст - это самый потребляемый продукт косметической промышленности. Обобщена информация о производстве

зубных паст в России и за рубежом. Приведены основные положения коллоидной химии по загущению коллоидных и истинных растворов, которые образуются при создании зубной пасты. Рассмотрены основные аспекты получения за рубежом С02-экстрактов растительного сырья методом сверхкритической экстракции и методы разделения массы после экстрагирования. Показано, что нет исследований в данной области в России. И, как следствие, в технической литературе отсутствуют научно обоснованные требования к показателям качества экстрактов, используемых для производства зубных паст. Дана характеристика проблемы использования ретинол пальмитата в зубной пасте, рассмотрен метод инкапсулирования липофильных соединений в хитозан-алыинатные гранулы для сохранения витамина в агрессивном составе зубной пасты.

2. Экспериментальная часть. Исследования и промышленные испытания проводились на базе ОАО «Свобода» (г,Москва), на кафедре «Технология жиров и биоорганического синтеза» ГОУ ВПО МГУПП, НИЦ ЭР «ГОРО», МГУ им. Ломоносова, ЦНИИХМ, ИНЭОС им.Несмеянова. 2.1. Методы исследования. Раздел диссертации посвящен экспериментальной базе, состоящей из лабораторного и технологического оборудования, объектов и программ исследований, биохимических, физико-технологических, химических методик исследования, призванных оценить свойства полученных продуктов и полупродуктов. Оценка реологических свойств концентрированных суспензий и растворов полимеров проводили на ротационном вискозиметре типа «Полимер «РПЭ-1М»; определение антиокислительных свойств С02-экстрактов осуществляли согласно метилолеатной модели по методике, представленной в работе Шишкиной JI.H. (1992); критическую концентрацию мицеллообразования (ККМ) водных растворов ПАВ определяли по зависимости их поверхностного натяжения (о) от концентрации; внешний вид и консистенцию, цвет и запах определяли согласно ГОСТ 29188.0 раздел 3; определение водородного показателя рН по ГОСТ 29188.2 в водной суспензии массовой долей зубной пасты 25% проводили на рН-метре, калиброванном на 2-3 значения; Исследования качественного состава образца экстракта велись методом хромато-масс-спектрометрии; механическую прочность капсул оценивали на приборе Texture Analyzer; определение проницаемости капсул вводили на жидкостном хроматографе, снабженном колонками Shodex SG-G и SB-803 HQ. Достоверность экспериментальных данных подтверждена статистическими методами, в таблицах и на рисунках приведены результаты в виде средних значений с указанием доверительного интервала среднего арифметического значения параметра. Схема исследований представлена на рисунке 1.

Маркетинговые исследования-

Рис. 1. Схема исследования.

2.2. Результаты и обсуждения.

2.2.1. Получение и анализ сверхкритических флюидных экстрактов БАВ.

Статус лечебно-профилактического продукта, в частности зубных паст, во многом определяется не только основой продукта, но и наличием в нем активных ингредиентов со специфическими биологическими свойствами.

В настоящее время в косметической отрасли складывается тенденция производства натуральной, экологически чистой продукции с сохранением максимально полного набора компонентов исходного сырья. Растительные С02-экстракты наиболее полно отвечают этому требованию, являясь источником функциональных ингредиентов.

Анализ состояния и направлений развития технологий обработки растительного сырья показал, что наибольшими перспективами с этой точки зрения является технология получения по методу С02-экстракции в сверхкритическом состоянии.

В качестве биологически активных добавок в данном исследовании использовали С02-экстракты, полученные посредством сверхкритической углекислотной экстракции. Были отобраны экстракты, обладающие целевыми биологическими функциями, а именно кровоостанавливающим и противовоспалительным действием, и как следствие ранозаживляющим и регенерирующим свойствами: экстракты ромашки, шалфея, можжевельника.

Для выбора оптимальных условий экстракции необходимо было выяснить влияние технологических режимов процесса на состав экстрактов. С этой целью первоначально была проведена серия исследований зависимости количественного выхода экстрактов от давления. На основании экспериментальных данных признано оптимальным проведение сверхкритической флюидной экстракции при давлении 400 атм.

В ходе дальнейших исследований было изучено влияние температуры на состав сверхкритических флюидных экстрактов шалфея. Исследования осуществлялись в интервале температур 40 — 80°С. В результате проведенных исследований было установлено, что экстракты, полученные при температурах 40, 60 и 80°С, являются принципиально различными комплексами. Показатели качества и содержание основных БАВ данных экстракта шалфея представлены в таблице 1. Температура 40°С близка к нижней границе сверхкритической области и является минимальной температурой, при которой экстракция осуществляется сверхкритической двуокисью углерода. Проведение экстракции при температуре выше 80°С, как правило, приводит к термическому разложению природных соединений, а также это и экономически не целесообразно, что и было подтверждено нашими экспериментами. Из приведенных результатов видно, что содержание токоферолов в С02-экстракте шалфея при экстракции в изученном диапазоне температур довольно высокий, а содержание каротиноидов низкое.

Таблица 1.

Показатели и состав экстракта шалфея, полученного при различных ________температурах.______

Наименование показателей и состав Температура экстракции

экстрактов 40°С 60°С 80°С

Кислотное число, мг КОН/г 47,5-49,0 89,5-91,0 98,5-100.0

Показатель преломления при 20°С 1,473-1,476 1,464-1.469 1,474-1,478

Токоферолы (витамин Е), мг % 41,2-42,3 37,8-38,9 21,8-22,4

Каротиноиды (провитамин А), мг % 1,41-1,45 0,95-1,0 0,78-0,99

Жирные кислоты, % к сумме:

Пальмитиновая 5,9 18,3 26,3

Стеариновая 1,8 1,4 1,3

Олеиновая 40,6 33,4 31,5

Линолевая 3,0 27,3 31,7

Линоленовая 1.8 2,5 3,4

Интересен жирно-кислотный состав экстрактов. Р-витаминной активностью обладают линолевая и линоленовая кислота. Линоленовая кислота присутствует в относительно небольших количествах (от 1,8 до 3,4% к сумме). Массовая доля линолевой кислоты превышает 30% от суммы жирных кислот, за исключением условий экстракции при 40°С, поэтому можно отметить высокую Р-витаминную активность представленных СОг экстрактов, полученных при режимах 60, 80°С.

Наряду с вышесказанным необходимо отметить, что при сравнении качественных показателей экстрактов, полученных при различных температурных режимах, ведение экстракции при 80°С дают значительное увеличение кислотного числа, что в свою очередь ограничивает срок годности последнего. На основании анализа полученных данных (табл. 1.) для получения ССЬ-экстрактов методом СФЭ температурный параметр ведения процесса необходимо поддерживать на уровне 60°С. В таблице 2 представлены качественные показатели экстракта ромашки, полученные при ведении процесса экстракции с температурой 60°С. Корни и молодые побеги можжевельника используют для лечения заболеваний слизистой оболочки полости рта. Это свойство и делает СОг-экстракт молодых побегов можжевельника интересным для разработчиков косметических средств по уходу за полостью рта, а именно для зубных паст. В связи с тем, что данный экстракт планируется впервые вводить в рецептуру зубной пасты, необходимо детальное изучение С02-экстракта молодых побегов можжевельника, т.к. при производстве СОг-экстракции в сверхкритическом состоянии происходит концентрирование в экстракте не только позитивных биологически активных веществ, но и негативных органических соединений, в соотношении, которое определено природой растения. Исследование состава СОг-экстракта можжевельника показало высокую концентрацию биологических веществ.

Таблица 2.

Качественные показатели СОг-экстракта ромашки.__

Наименование показателей Значение показателей и массовая доля экстрактивных веществ

Кислотное число, мг КОН/г 45,5-47,0

Показатель преломления при 20°С 1,475- 1,479

Эфирное число, мг КОН/г 76,5 - 79,3

Токоферолы (витамин Е), мг % 98,5- 100,0

Каротиноиды (провитамин А), мг % 33,5-35,0

Эфирное масло, % 5,2 - 6,3

Состав эфирного масла: Массовая доля сесквитерпеновых соединений, в т.ч. азулена, % 43,55-44,26 0,001

Проведенный методами ГХ-МС анализ качественного состава СОг-экстракта можжевельника позволил выделить: а-фелландрен (1), циклофенхен (2), р-мирцен (3), р-феландрен (4), 3-карен (5), лимонен (6), бензен аллил (7), у-терпинен (8), терпинеол (9), р-елемен (10), у-елемен (11), кариофиллен (12), гермакрин О (13), а-кариофиллен (14), б и 1-кадинен (15, 16), муролол (17), а-кадинол (18), фарнесал (20), изопропилбициклононан (21), пальмитиновую (22) и линоленовую (23) кислоты в общем количестве до 15%. Аналитическими методами подтверждено присутствие витамина С и К. На представленной диаграмме (рис. 2.) показан качественный состав экстракта.

время удержания

Рис. 2. Масс-спектр С02-зкстракта молодых побегов можжевельника, полученного методом СФЭ при 400 атм., 37°С с 3-х фазным фракционированием.

При изучении физиологической активности экстракта можжевельника и индивидуальных составляющих было обращено внимание не только на положительные свойства, но и на побочные реакции при его испытании, а именно на влияние составляющих экстракта на мышечные волокна гладкой мускулатуры. В опытной партии наблюдалось негативное воздействие на периферический нервный импульс, выражающейся повышенным тонусом гладкой мускулатуры. Было показано, что побочные явления вызывают пигменты и смолы. Для избавления от балластных и вредных веществ был предложен метод фракционирования продукта при изготовлении экстракта. Фракционирование СОг-экстракта осуществляли в ходе технологического процесса по времени удержания его составляющих в растворителе (С02), так для смол и пигментов было характерно более длительное время удержания, что в свою очередь делало возможным отделение легколетучих фракций экстракта. В процессе фракционирования установлено, что основная часть активных веществ, в которых мы заинтересованы присутствовали во фракции с периодом удержания 1 минута. Клинические испытания подтвердили отсутствие аллергенное™, наличие противовоспалительных и ранозаживляющих свойств выделенной фракции, а также отсутствие повышения тонуса гладкой мускулатуры при их использовании. Исследования фракции были на 90% представлены таким

20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 т'г

Рнс.З. Идентификация кадинола. Таким образом, нами было показано, что при получении экстракта побегов можжевельника методом сверхкритической флюидной экстракции при условии фракционирования в ходе технологического процесса в нем концентрируются необходимые нам позитивные компоненты. Предлагаемая для дальнейшего использования композиция БАВ содержит в своем составе С02-экстракты ромашки, шалфея и фракционированный С02-экстракт можжевельника.

2.2.2. Микрокапсулирование БАВ в гелиевые хитозан-альгинатные оболочки.

На основании выше проведенных данных по исследованию БАВ ССЬ-экстрактов, было показано, что предлагаемая композиция обеднена каротиноидами (провитамин А). Известно, что ретинол (витамин А) в

растительных пищевых продуктах как таковой не встречается, наряду с этим данный витамин обладает способностью стимулировать реакции гуморального и клеточного иммунитета в ответ на действие антибактериальных антигенов, делает это вещество интересным и необходимым для создания продукта, в частности зубных паст, обладающих иммуномодулирующим действием. В лечебно-профилактической практике применяют препараты, содержащие витамин А, природного происхождения и синтетические препараты: ретинол ацетат и ретинола пальмитат. Важнейшими задачами являются разработка рационального способа сохранения активности БАВ на длительный срок в агрессивной внешней среде и разработка форм доставки БАВ по месту назначения. В связи с этим, проблемам микрокапсуляшш биологически активных веществ (БАВ) путем химической коацервации в оболочки из природных полиэлектролитов в последние годы уделяется повышенное внимание. Нами совместно с ФГУГГ «Центральный научно-исследовательский институт химии и механики» разработан способ микрокапсулирования ретинола-пальмитата в гелиевые хитозан-альгинатные оболочки. На основании оценки описанных в литературе многочисленных примеров хитозан-альгинатной коацервации был выбран метод одностадийного капельного образования микрокапсул из водных растворов альгината и хитозана в присутствии ионов кальция. Разработанный нами вариант включает на первой стадии приготовление эмульсии ретинол пальмитата в водном растворе альгината натрия. После введения модифицирующей добавки, эмульсию через стальные иглы диаметром 0,3 мм прибавляли к раствору хитозана, содержащему соли кальция. Образуется суспензия капель коацервата, в которую вводили рассчитанное количество второго модификатора для повышения прочности свойств оболочки. В качестве модифицирующего агента использовали фосфатные соединения натрия. Суспензию выдерживали при заданной температуре 40°С в течение времени, необходимого для завершения реакции образования полиэлектролитного комплекса и оптимального уплотнения гелиевой оболочки. Далее смесь фильтровали, капсулы промывали дистиллированной водой и помещали в водный раствор консерванта. В результате получили водную суспензию микрокапсул ретинолпальмитата, которая и являлась готовым продуктом. Разработанному методу было дано название капельная технология dew technology (сокращенно dewtech), которая реализована аппаратурно, на данный метод получен патент. По технологии dewtech получены гелиевые микрокапсулы ретинолмальмитата со средним диаметром 2,5 мм. Капсулы монодисперсны по размерам, имеют достаточно высокую прочность при одноосном сжатии (30-60 н). Концентрация водной суспензии готового продукта составляет 65%. В ядре каждой капсулы содержится примерно 3,5 мг ретинолмальмитата. Разработанный метод позволяет получать сферические гелевые частицы с альгинатной сердцевиной и хитозан-альгинатной оболочкой, как это видно на рис.4. Проведено исследование сохраняемости свойств водной суспензии микрокапсул ретинол пальмитата, полученного статистическим методом

ёел^есЬ, в условиях форсированного старения. Методами ВЭЖХ и ПМР-спектромегрии установлено, что стабильность ретинол пальмитата, заключенного в гелиевые хитозан-альгинатные оболочки, заметно выше стабильности не инкапсулированного препарата.

Рис. 4. Микроскопический снимок хитозан-альгинатных гелевых частицы.

Через 4 недели термостатирования образцов при температуре 45°С структурная изомеризация

инкапсулированного продукта прошла на 35%, в то время как изомеризация контрольного не инкапсулированного продукта составила 95%. Таким образом, в результате проведенной работы показана возможность создания новой формы ретинол пальмитата в виде микрокапсул с гелиевой оболочкой на основе альгинат-хитозановых полиэлектролитов комплексов. Микрокапсулированные препараты сохраняют свою активность в течение 24 месяцев при хранении в условиях холодильника.

2.2.3. Оптимизация состава комплекса БАВ.

Нами для дальнейшего исследования с целью разработки рецептуры зубной насты с иммуномодулирующим и лечебно-профилактическими свойствами были отобраны следующие БАВ: СОг-экстракты ромашки, шалфея, можжевельника и микрокапсулированный ретинол пальмитат. В качестве критерия оценки активности индивидуальных БАВ использовали антиоксидантную (АО) способность экстрактов.

Для определения АО активности оценивали способность ретинол мальмитата и С02-экстрактов тормозить реакции термического окисления метилового эфира олеиновой кислоты. Выбор концентраций ретинол пальмитата и С02-экстрактов осуществляли с учетом содержания каротиноидов, витамина А и токоферолов согласно дозам, применяемым в профилактических и лечебных целях. За величину периода индукции принимали время окисления метилолеата до накопления перекиси в количестве 0,03 моль/г (таблица 3). АО свойства оценивали как отношение разности периода индукции окисления растворов исследуемых соединений в МО к периоду индукции окисления самого МО (А 1/1о). Анализ полученных результатов показал, что все СОг-экстракты, ретинол пальмитат обладают общим для всех свойством - тормозить реакцию окисления. Согласно данным, полученным для С02-экстрактов наиболее сильными АО свойствами обладает экстракт ромашки аптекарской (А 1/1о=2,73±0,11) и ретинол пальмитат (А (Ло=2,26±0,11). Для решения технологических вопросов, связанных с внесением СОг-экстрактов и инкапсулированного ретинол пальмитата в основу целесообразно иметь одну композицию С02~

экстракта и витамина А, поэтому подобрана оптимальная концентрация композиции ССЬ-экстрактов изучаемых трав и ретинол пальмитата с использованием математических методов планирования эксперимента.

Таблица 3.

Антиоксидантные свойства ретинолпальмитата и С02-экстрактов.

Показатели С02-экстракт Ретинол пальмитат

Шалфей Ромашка можжевел ьник

Период индукции окисления, А 0,86 2,73 2,65 2,26

Доверительный интервал величины А 1Л0 при ч=0,05 0,08 0,11 0,11 0,11

Для определения АО свойств С02-экстрактов и ретинол пальмитата был поставлен план ДФЭ 24"1, параметры которого даны в таблице 4, получено уравнение регрессии, адекватно описывающее процесс. Реализация программы оптимизации позволила получить композицию БАВ (КБАВ), обладающую АО активностью в 3,2 раза выше, чем максимальная активность индивидуальных С02-экстрактов и ретинол пальмитата при следующем соотношении С02-экстрактов: шалфея : ромашки : можжевельника : ретинол пальмитата - 0,5 : 1,0 : 0,5 : 2,0.

У= 3,6 + 0,78 • XI + 1,2 • Х2 - 0,67Х3 + 0,23X4 + 0,33»Х,»Х2 + 0,18'Х3-Х4

Таблица 4.

Условия реализации ДФЭ 24"'.________

Показатели С02-экстракты Ретинол пальмит ат

шалфей ромашка можжевельн ик

Кодированные переменные X, х2 X, Х4

Со %, средний уровень 20,0 20,0 20,0 20,0

Интервал варьирования, Л| % 2,5 2,5 2,5 2,5

Критерий оптимизации Антиоксидантные свойства, А Мо

Для исследования АО активности комплекса БАВ использовали модельную систему с рафинированным растительным маслом, успешно апробированную в работах Ливинской С.А., Козловой В.А. Эксперимент проводился на опытно-лабораторной установке. Масло в соотношении 1 мг

КБАВ на 1 г масла помещалось в стеклянную ячейку, куда осуществлялась подача воздуха через стеклянный капилляр. Поток воздуха всегда поддерживался постоянным - 60 мл/мин. Окисление проходило при температуре 90°С. Параллельно проводился контрольный опыт (растительное масло без добавок) и опыт с широко применяемым в пищевой промышленности антиокислителем бутилгидрокситолуолом (Е321). Степень окисления оценивалась величиной перекисного числа. Полученные данные за первые пять часов окисления представлены графически на рис.5.

каждый час).

Анализ полученных данных показал, что при введении разработанного КБАВ снижение степени окисления масла составило приблизительно в 3,5 раза меньше по сравнению с антиокислителем Е321 и в 4,4 меньше раза по сравнению с контрольным образцом.

Таким образом, из полученных в ходе экспериментов на модели «масло» данных можно сделать вывод о том, что КБАВ является хорошим антиокислителем, а использование разработанной композиции БАВ в зубной пасте позволит решить поставленные задачи - защитить продукт не только от окисления, но и придать ему необходимые лечебно-профилактические свойства. 2.3. Разработка основы зубной пасты.

В последнее время производство зубных паст становится более разнообразным, использующим все большее количество компонентов. В изменяющейся обстановке продукты с силикой завоевывает лидирующие позиции во многих странах. Абразивы и увлажнители влияют на структурообразующие функции таким образом, что выбор

соответствующего структурообразователя становится поводом для исследований и составления особенной рецептуры из других компонентов. 2.3.1. Обоснование выбора абразивного компонента. В рецептурах зубных паст часто используют не одно абразивное вещество, а смесь двух и более компонентов. Выбор абразивного вещества или их смеси при создании зубной пасты обуславливается ее свойствами и назначением. Химически осажденный мел (СаС03) является классическим абразивным компонентом для косметических изделий, созданных для ухода за полостью рта. В настоящее время новый подход к зубным пастам, как лечебно-профилактическим изделиям определил использование в качестве абразивного компонента силикатные абразивы, которые сочетают в себе высокую очищающую способность наряду с низкими показателями ШЭА (единица измерения истирающей способности). Силикаты используются для контроля реологии составов зубных паст (загустительные силикаты) и для содействия удалению с поверхности зубов в процессе их очищения зубного налета остатков пищи (абразивные силикаты). Их аморфная структура, инертные поверхностные свойства, низкий индекс преломления как для целого, так и для его частей, способность к распределению на отдельные части - все это сделало соединения кремния идеальными для использования в зубных пастах. Они имеют высокую степень совместимости с другими компонентами паст, в особенности с их активными ингредиентами, и могут быть невидимы в прозрачных составах.

В таблице 5 даны основные физико-химические показатели использованных в исследовании абразивных составляющих зубных паст.

Таблица 5.

Физико-химические показатели диоксида кремния._

Показатели Химически осажденный мел, СаСОз Диоксид кремния, ею*

Размер частиц, мкм 1,0-5,0 1,0 ч 1,5

1ША (по данным НТД) 70 -100 70 -80

Показатель рефракционного индекса 1,46

Влага, не выше, % 1,0 1,0

Содержание примеси, % 0,5 0,0

Контролируемый показатель в основе зубной пасты

Содержание в рецептуре зубной пасты, % 22,0-23,0 20,0-21,0

Вязкость, Па.с 100-110 160 - 170

В процессе проведения исследований на модельных системах, в основу вводили 22,0 - 23,0% мела и 20,0 - 21,0 диоксида кремния и оценивали вязкость полученных суспензий.

Было установлено, что диоксид кремния обладает наряду с абразивностью загущающими способностями, введение его в модельную систему в меньших количествах по сравнению с мелом на 10%, вязкость основы зубной пасты увеличилась на 60 - 63%. Т.о. нами в качестве абразивной составляющей рецептуры разрабатываемой зубной пасты обоснован ввод диоксида кремния.

2.3.2.0босноваиие выбора загустителя зубной пасты. Выбор гидроколлоида определяется различными параметрами, закладываемыми в разрабатываемую зубную пасту. К ним относятся: совместимость с другими ингредиентами пасты; специфичность требований (направленность действия); стоимость пасты. В настоящее время стали использовать натрий карбоксиметилцеллюлозу, метиловый и этиловый эфиры целлюлозы, щдроксиэтилцеллюлозу, альгинат и каррагинат -продукты, получаемые из морских водорослей. Консистенция зубной пасты зависит от концентрации, химической природы и физико-химических свойств гидроколлоида. Для наших экспериментов априори была выбрана высокоочищенная карбоксиметилцеллюлоза (кмц) пищевого сорта. На наш рынок данный продукт поставляется многочисленными фирмами. Нами проведены сравнительные испытания данного продукта различных фирм в модельных основах зубных паст приводе от 0,5 до 1,5%, где в качестве абразивной составляющей использовался диоксид кремния в количестве 21,0%. В таблице 6 приведены реологические свойства индивидуальных растворов кмц и основ зубных паст с различной концентрацией этого компонента в основе.

Таблица 6.

Изучение реологических характеристик индивидуальных растворов кмц и _основ зубных паст с введением последнего._

№ п/ п Название загустителя (торговое названиеО Название по IN Kl Реологические свойства растворов

Кмц, зязкость раствора 2% при 25°С, мПа.с Основа зубной пасты, при 25°С, Па.с на 24 ч. Концентрация, %

0,5 1,0 1,5

1 Blanose 7MF Carboxymethyl cellulose sodium 400 240 340 420

2 Blanose 7M31F Carboxymethyl cellulose sodium 2300 300 500 700

3 Natrosol S Hydroxyethyl cellulose 400 260 300 480

4 Natrosol 250MR Hydroxyethyl cellulose 600 260 300 500

5 Natrosol R Hydroxyethyl cellulose 800 280 340 500

Продолжение табл. 6.

6 Walocel CRT Carboxymethyl cellulose sodium 600 260 360 480

7 Walocel НМ Hydroxypropylme thylprophyll cellulose 500 240 300 470

* доверительный интервал экспериментальных результатов составил ± 0,05%.

По результатам проведенного эксперимента на модельных системах была определена перспективная марка и концентрация введения в рецептуру загустителя. К дальнейшему исследованию были взяты опыт под № 2,5 и 6, где концентрация загустителя составила 1%, а критерием выбора было сравнительная оценка с эталоном, которым являлся основа зубной пасты «Пародонтол», выпускаемая ОАО «Свобода», вязкость которой на 24 ч. после производства составляет 340-380 Па.с, которая по реологическим свойствам отвечает ГОСТ 7983-99. Согласно ГОСТ 7983-99 зубная паста должна сохраняться в течение всего срока годности и отвечать п.3.1.4: «внешний вид - однородная масса, удерживающаяся на поверхности зубной щетки, не проникая внутрь щетины».

Рис.6. Изменение вязкости основ зубной пасты при хранении. Система зубной пасты является эмульсией-суспензией, которая в процессе хранения может избыточно загущаться или расслаиваться, поэтому для прогнозирования стабильности реологических свойств разрабатываемой пасты, нами проведены опыты по хранению основы зубной пасты при 25°С в течение 1,5 месяцев, результаты представлены на рис.6.

Как видно из рисунка 6, образцы 2 и 6 дали результаты выше, чем контроль, когда как образец 5 по вязкости не соответствует эталону. Таким образом, нами было установлено, что основа зубной пасты приобретает постоянные вязкостные показатели на 13 14 день с момента выпуска. Наряду с этим, образец 6 к концу срока хранения имел вязкость более 700 Па.с, что приводило к затрудненному выдавливанию зубной пасты из индивидуальной упаковки. Также анализ результатов показал перспективность использования в основе как Blanose 7M31F, так и Walocel CRT, однако учитывая экономические аспекты, для данных работ был выбран образец Blanose 7МЗ IF. 2.4. Разработка рецептуры зубной пасты.

Качество зубной пасты непосредственно связано с рецептурным составом основы. В качестве основных загущающих составляющих основы зубной пасты использовали диоксид кремния и карбоксиметилцеллюлозу. Третьей составляющей основы является глицерин. Для определения оптимального состава основы зубной пасты был реализован один из планов исследования зависимости свойств 3-х компонентной системы от соотношения компонентов. В качестве критерия оптимизации принята вязкость суспензии (Па.с). по полученному уравненшо построена треугольная диаграмма (рис.7), на которой представлены линии равной вязкости ij-const.

Глицерин

Рис.7. Диаграмма состав - основа - вязкость.

Исследование смеси при ограничениях по относительному содержанию компонентов смеси: хгдиоксид кремния от 0,2 до 0,8; х2-глицерина от 0,2 до 0,25; х3-кмц от 0,03 до 0,25. На диаграмме точка псевдоконцентрации Х;=1,0 соответствует х; тах. Принятая нами оптимальная точка М для получения вязкости 360 Па.с на 24 часа хранения при 1-25°С имеет координаты: Х1=0,25; х2=0,05; х3=0,2 (проверка Ех;опт=1), после пересчета на реальные концентрации параметры смеси соответствуют (%): диоксид кремния - 20, глицерин - 16,5; кмц - 0,75. Концентрация введения композиции БАВ (С02-экстракты шалфея : ромашки : можжевельника : ретинол пальмитата = 0,5:1,0:0,5:2,0) в основу пасты определена в количестве 1,6%, согласно дозам, применяемым для профилактических целей, т.о. рецептура зубной пасты представлена в табл.7.

Таблица 7.

Рецептура разработанной зубной пасты и физико-химические показатели.

Компоненты Кон цент ради я Физико-химические показатели

По ГОСТ 7983-99 норма Получен ные данные

Диоксид кремния 20,0 Внешний вид Однородная масса, удерживающаяся на поверхности зубной щетки яе проникая внутрь детины Соответс твует

Глицерин 16,5 Цвет Свойственный цвету пасты 1анного наименования Соответс твует

НМапове 7М31Р 0,75 Запах Свойственный цвету пасты данного наименования Соответс твует

№ лаурилсульфат (100%) 1,5 Вкус Свойственный цвету пасты данного наименования Соответс твует

Консервант 0,5 Водородный показатель РН) 5.5-10.5 6,8

Двуокись титана пигментная 0,2 Массовая доля сумы гяжелых металлов, %, не эолее 0.002 0,001

Комплекс БАВ 1,6 Массовая доля фторида (в заснете на молярную массу фтора), % 0.05-0.15 0,1

Отдушка 0,2 Масса фторида (в расчете на молярную массу фтора) в гдинице упаковки, мг, не 5олее 300 300

Микробиологические токазатели: -общее количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, КОЕ/г; дрожжи, дрожжеподобные, плесневые грибки, КОЕ/г; бактерии семейства ЗйегоЬайепасеае, г/см3' патогенные стафилококки, г/см3; -рзеиёотопазаепщщова 1х10"2 Огсутствие Отсутствие Отсутствие Отсутствие Соответс твует полность ю

2.5. Исследование технологии получения зубной пасты нового поколения с лечебно-профилактическими свойствами.

Для производства высококачественной, безопасной косметической продукции менеджмент качества является необходимым условием, воздействующим на всю технологическую систему производства продукции

нового поколения. Схема алгоритма получения таких продуктов представлена на рис.8.

Подготовка сырьевых компонентов

Соответствие

нормативным

показателям

качества

применяемого

сырья

Мониторинг критических кошрольных точек качества ингоедиентов оецепттоы

Управляющие воздействия

Технология получения

Реализация готовой продукции

Мониторинг критических контрольных точек качества технологии производства,

нет Управляющие

-и воздействия

Рис.8. Схема алгоритма менеджмента качества технологии получения зубной пасты нового поколения.

Для контроля состояния технологического процесса и предупреждения отклонений от заданных оптимальных параметров нами предлагается использовать карты контроля безопасности и качества на этапах подготовки ингредиентов рецептуры, технологии, хранения продукции (таблица 8).

Для определения безопасности использования полученных образцов зубной пасты по новой рецептуре и определения срока годности проведено исследование изменения показателей качества при хранении.

Для этого осуществляли хранение образца готового продукта при температуре -18°С, 20-25°С и 40-45°С в течение месяцев. В соответствии с методикой ускоренного старения косметических изделий сроки годности изделия определяли по результатам изменения нормативных показателей продукта в заданных условиях и по итогам контроля качества: 1 месяц соответствия показателям качества нормативной документации определяло 10 месяцев годности продукта, 2 месяца соответственно 20 месяцам годности, 3 месяца испытаний - 30 месяцам годности.

Таблица 8.

Контрольная карта производства зубной пасты нового поколения. Наименование этапа: приготовление основы зубной пасты. Объект контроля: полупродукт - основа зубной пасты._

Критические пределы контролируемых параметров

Внешни йвид Однородная масса, удерживающаяся на поверхности зубной щетки, не проникая внутрь щетины (за исключением случаев, когда неоднородность массы и иная консистенция обусловлены рецептурой или заявлены изготовителем) Водородный показатель (РН) 5.510.5 Контролиру ющиеи предупрежд ающие процедуры мониторинга

Цвет Свойственный цвету пасты данного наименования Массовая доля сумы тяжелых металлов, %, не более 0.002

Запах Свойственный цвету пасты данного наименования Массовая доля фторида (в расчете на молярную массу фтора), % 0.050.15

Вкус Свойственный цвету пасты данного наименования Масса фторида (в расчете на молярную массу фтора) в единице упаковки, мг, не более 300

Критические пределы факторов потенциальной опасности Лабораторны е и сенсорные анализы качества и сравнение их с нормативным и показателями

Микробиологические показатели: - общее количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, КОЕ/г - дрожжи, дрожжеподобные, плесневые грибки, КОЕ/г - бактерии семейства Еп1егоЬас1епасеае, г/см3 - патогенные стафилококки, г/см3 - рзеискяпопаваепщтоБа 1х10"2 Отсутств Отсутств Отсутств Отсутств

В течение 3 месяцев испытаний при постоянной температуре 20-25°с не отмечалось расслоение и изменение структуры приготовленных образцов зубной пасты. Изученные образцы обнаружили хорошую стабильность и однородность консистенции продукта при хранении зубной пасты при повышенной температуре 40-45°С. И как показатели наблюдения, на протяжении трех месяцев хранения все испытуемые продукты, подвергшиеся замораживанию при температуре -18°С, значительных изменений исходных оценочных показателей не претерпели.

Таким образом, стабильность качества зубной пасты, приготовленного по разработанной рецептуре, по результатам хранения позволило определить срок годности данного косметического продукта 30 месяцев, зубная паста, выработанная по традиционной рецептуре, имеет срок годности 24 месяца. Разработанная технология позволяет производить зубные пасты на действующем в настоящее время оборудовании на ОАО

«Свобода». Для производства зубной пасты использовалась усовершенствованная технология, позволяющая производить зубные пасты за меньший период времени. На рисунке 9 показана разработанная технологическая схема производства зубной пасты. Уменьшение времени варки зубной пасты связано с несколькими изменениями в ходе технологического процесса, а именно:

- с заменой сухого натрий лаурилсульфата, традиционно используемого в технологическом процессе, на раствор натрий лаурил сульфата. Экспериментально обусловлена концентрация раствора равная 28%.

- с дробным введением сухих добавок - первоначально натрий карбоксиметилцеллюлозу подаем в глицерин-сорбитольную смесь и только после перемешивания добавляем воду, что ведем к быстрейшему растворению загустителя.

- с изменением критерия оценки готовности зубной пасты в ходе технологического процесса. Традиционно готовность оценивали по оседанию зубной пасты во время вакуумирования. Предложен временной показатель по оценке гомогенности массы.

При проведении хронометрирования технологического процесса показано, что исключение стадии растворения натрий лаурилсульфата, дробного введения порошков и ввод временного показателя готовности пасты позволило сократить время варки с 5-6 часов до 2,5-3 часов.

Рис. 9. Технологическая схема производства зубной пасты. Проведены производственные испытания по варке зубной пасты, получена партия зубной пасты в промышленных условиях соответствующая по своим показателям требованиям ГОСТ 7983-99. На основу зубной пасты и собственно зубную пасту получено 3 патента. Экономическая эффективность выполненной работы складывается из возможности быстрого возврата средств затраченных на производство данного косметического продукта вследствие использования уже действующего

оборудования и технологии, не требующей существенной реорганизации производства, сокращения времени ведения варки зубных паст на фоне появления продукта быстрого реализуемого покупателю с улучшенными качественными и потребительскими свойствами.

2.6. Клинико-токсикологические испытания зубной пасты нового поколения.

Предлагаемая зубная паста была применена для профилактики и лечения гиперестезии зубов и заболеваний пародонта. Состав был предложен пациентам, у которых можно было проследить и оценить процессы минерализации эмали и состояния тканей пародонта в динамике в течение 36 месяцев. Наблюдения проводили, определяя индексы распространенности (ИРГЗ) и интенсивности (ИИГЗ) гиперестезии зубов, показатели индекса гигиены, РМА и пробы Шиллера-Писарева. Показатели заболеваний зубов и пародонта у исследуемого контингента приведены в динамике в таблице 9.

Таблица 9.

Показатели индекса гигиены и гиперестезии зубов в процессе наблюдения.

Используем Чис Индекс гигиены по

ый состав но Федорову- ИРГЗ, % ИИГЗ, баллы

боль Володкиной,

ных баллы

До После До После До После

примене примене примене примене примен примен

ния ния ния ния ения ения

Состав с 197 3,38±0,18 1,66±0,08 18,6±1,9 12,1±1,6 21,42± 1,25±

экстрактами 0,09 0,05

ромашки, Индекс гигиены по Индекс РМА, % Положительная

можжевель Грину-Вермилону проба Шиллера-

никашапфея Писарева, %

и ретинол До После До После До. После

пальмитато примене примене примене примене примен примен

м ния ния ния ния ения ения

2,47±0,08 1,55±0,07 35,2±1,5 18,2±1,0 89,4±8,2 22,6±6,3

Из данных приведенных в таблице 9 следует, что четко изменяются показатели индексов гигиены, распространенности и интенсивности гиперестезии зубов, свидетельствующее об улучшении минерализации зубов. Различие достоверно (Р<0,05). Наряду с этим у наблюдаемых людей отмечено существенное улучшение состояния пародонта по всем объективным показателям (индексу РМА и пробы Шиллера-Писарева (Р<0,01). Таким образом, применение предлагаемого состава позволило улучшить очистку и минерализацию зубов, устранить или уменьшить гиперестезию дентина, о чем свидетельствуют показатели индексов ИРГЗ, ИИЗГ, РМА, гигиены, а также устранить или существенно снизить воспаление в десне, в том числе кровоточивость, о которых свидетельствует динамика индексов гигиены, РМА и пробы Шиллера-Писарева. Индекс кровоточивости по Мюлемману также свидетельствует о значительном

уменьшении кровоточивости десен при применении состава: до лечения он составляет 2-3 степени при гингивите и 3-4 степени при пародонтите, а после лечения он составил 0 степень и 0-1 степени соответственно, различия статически достоверны (Р<0,01). Зубная паста хорошо переносится, не вызывает местных и аллергических реакций и дискомфорта. Применение зубной пасты улучшает трофику тканей и микроциркуляцию в тканях пародонта, снимает кровоточивость десен и воспалительные явления в полости рта, дезодорирует и уничтожает неприятный запах. 3. ВЫВОДЫ

1. Разработана методика получения экстрактов методом сверхкритической флюидной экстракции с уточненными технологическими параметрами: температурой 60°С, давлением 400 атм. Получены С02 экстракты шалфея, ромашки и можжевельника.

2. Методами хроматоспектрометрии (ГХ-МС) и газожидкостной хроматографии изучен качественный состав и количественное содержание в полученных экстрактах БАВ. Установлена необходимость фракционирования СФЭ можжевельника перед использованием в зубных пастах.

3. Разработана методика получения альгинат-хитозановых капсул с инкапсулированным ретинол пальмитатом в присутствии ионов кальция и фосфатов одностадийным методом.

4. Научно обоснована и разработана структурная модель рецептурной смеси основы лечебно-профилактической зубной пасты, описывающая зависимость показателей качества рецептуры от массового содержания ингредиентов и их функциональных свойств. Установлено соотношение структурообразующих компонентов в зубной пасте (%): диоксид кремния : Ыа-кмц: глицерин равное 20 : 0,15 :16,5.

5. Разработана новая зубная паста, расширяющая ассортимент данной группы косметических средств, за счет введения биологически-активных веществ в виде сверхкритических С02-экстрактов шалфея, ромашки, фракционированного экстракта можжевельника, инкапсулированного витамина А в соотношении 0,5 : 1,0 : 0,5 : 2,0 в суммарном соотношении 1,6%, обеспечивающих защиту десен от воспаления и раздражения, а также защиту эмали зубов и предотвращения кариеса.

6. Разработан алгоритм менеджмента и определены критерии качества технологии получения зубной пасты, составлена карта технологического контроля процесса производства зубной пасты.

7. Усовершенствована технология производства зубной пасты, обеспечивающая процесс варки зубной пасты в более короткие сроки (в 2 раза) по сравнению с регламентным, за счет введения Ыа-кмц в виде раствора 28% концентрации, отдельного ввода загустителя в глицерин-сорбитольную смесь в начале варки, введения временного критерия окончания процесса варки.

8. Проведены промышленные испытания и выпуск продукции.

зубной пасты, произведенной по новой рецептуре, с 24 месяцев до 30 месяцев хранения, за счет введения подобранных БАВ, обладающих антиоксидантными свойствами.

10. Клинико-токсикологическими исследованиями подтверждён лечебно-профилактический статус разработанной зубной пасты.

11. Результаты исследований диссертации используются в учебном процессе при чтении лекций и выполнении лабораторных работ, при выполнении научно-исследовательских работ на кафедре МГУПП

«Технология жиров и биоорганического синтеза». Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1.Воронцова, H.H. О перспективах на рынке косметических средств, включающих растительные компоненты [Текст] / С.А. Ливинская, А.Ю. Кривова, H.H. Каратаева // Докл. 2-ая международная конференция «Рыночные исследования в масложировой и в смежных отраслях пищевой промышленности». - Санкт-Петербург, 2006. - С.56-57.

2.Воронцова, H.H. Растительные стабилизаторы жиров и жиросодержащих продуктов [Текст] / H.H. Каратаева, Н.В. Илюхина // Международная научная конференция «Рациональные пути использования вторичных ресурсов АПК». - Краснодар, 2007. - С.79-80.

3. Воронцова, H.H. С2 2249467 RU 7 A61L15/16, A61F13/20. Медицинский материал и изделия на его основе [Текст] / Адамян A.A., Добыш С.В., Фрончек Э.В. (М.: ООО Научно-производств.предп. «Эрлон»).- № 2002131487/15; Заявл. 25.11.02 // патент,- 2002,- № 2249467.-С.45.

4.Воронцова, H.H. С1 2272662 RU 7 А61К7/16. Композиция по уходу за полостью рта [Текст] / K.M. Чигарина, С.И. Залевская, И.М. Алавердиев; (ОАО Свобода»), - № 2004126381; Заявл. 02.09.04 // патент.- 2004. -№2272662.-С.39.

5. Воронцова, H.H. С1 2205625 RU 7 А61К7/16. Лечебно-профилактическая композиция для обработки зубов [Текст] / Чигарина K.M., Залевская С.И. Алавердиев И.М. (ОАО «Свобода»).- № 2002118628/14; Заявл. 12.07.02 // патент.- 2003,- №2205625.-С.29.

6.Воронцова, H.H. Особенности использования СОг-экстракха молодых побегов можжевельника [Текст] / А.Ю. Кривова, С.В. Куликов // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2008.- №5.- С.48-52.

7.Воронцова, H.H. Микрокапсулирование биологически активных веществ в гелеевые хитозан-альгинатные оболочки [Текст] / Э.В. Фрончек, В.Г. Островский // Докл. 7-ая международная научная конференция «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».- С.Петербург, 2003,- С.273-274.

8.Воронцова, H.H. Оптимизация состава комплекса БАВ [Текст] // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2008,- №11.- С.47-49.

Подписано в печать 14.11.08. Формат 60x90 У^. Печ. л. 1,2. Тираж 120 экз. Заказ 220.

125080, Москва, Волоколамское ш., 11 Издательский комплекс МГУПП