автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Разработка технологии синбиотического кисломолочного продукта для профилактики дисбиотических состояний

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ СИНБИОТИЧЕСКОГО КИСЛОМОЛОЧНОГО ПРОДУКТА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ДИСБИОТИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ

Специальность 05.18.07-Биотехнология пищевых продуктов

и биологических активных веществ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

1 0 у.т 2910

Москва 2010

004603628

Работа выполнена на кафедре «Технология продуктов детского и функционального и спортивного питания» ГОУ ВПО «Московского государственного университета прикладной биотехнологии» (МГУПБ)

Научный руководитель:

Лауреат Государственных премий СССР и РФ,

Доктор технических наук, профессор Э.С. Токаев

Официальные оппоненты: Доктор технических наук,

профессор В.И. Ганина

Доктор биологических наук Н.С Тройская

Ведущая организация: ГНУВНИМИ

Защита диссертации состоится «16» Июня 2010 г. в 16.00 часов на заседании Диссертационного совета Д 212.149.01 при Московском государственном университете прикладной биотехнологии по адресу: 109316, г. Москва, ул. Талалихина, 33, конференц-зал.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государственного университета прикладной биотехнологии по адресу: 109316, г. Москва, ул. Талалихина, 33.

Автореферат разослан

мая 2010 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета, кандидат технических наук, профессор

-А.Г. Забашта

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы.

Полноценное и здоровое питание является одним из наиболее важных и необходимых условий для сохранения жизни и здоровья человека. Развитие рынка продуктов функционального питания главным образом обусловлено фиксируемой тенденцией ухудшения здоровья населения. Особенно велика роль продуктов функционального питания в поддержании микробной экологии человека, прежде всего микрофлоры желудочно - кишечного тракта.

При микроэкологических нарушениях наблюдается уменьшение абсолютного числа бифидобактерий и увеличение общего количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и продуктов их метаболизма, что приводит к возникновению и обострению хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Известно также, что при дисбиотических состояниях снижается иммунитет организма, который тесным образом связан с функцией нормальной микрофлоры, рассматриваемой в настоящее время в качестве своеобразного органа иммунной системы. Именно поэтому так важно поддержание микроэкологического равновесия в желудочно-кишечном тракте. Применение синбиотиков (комплекс пробиотиков и пребиотиков) является наиболее эффективным путём нормализации дисбаланса кишечной микрофлоры, так как при этом, не только имплантируются вводимые микроорганизмы, но и избирательно стимулируются рост и активация метаболизма индигенных лакто-и бифидобактерий.

Теоретические и практические основы в области создания функциональных продуктов питания заложены в трудах Гончаровой Г.С., Шендерова Б.А., В.Ф. Семенихиной, Гавриловой Н.Б., Ганиной В.И., Евдокимова И.А., Забодаловой JI.A., Королевой Н.С., Рогова И.А., Рябцевой С.А., Титова Е.И., Тихомировой H.A., Токаева Э.С., Бобреневой И.В., Хорольского В.В., Храмцова А.Г., Degeest В., Fuller R., Lee К., Shah N.P., Sanders М.Е., Fuller R., Tannock G.W., Gibson G.R., Shin H.S., Arai S., Morinaga Y и др.

Значение продуктов функциональной направленности весьма велико для России, так как, согласно исследованиям, в последние годы отмечаются ухудшение экологической обстановки, увеличение стрессовых факторов и нарушения в структуре питания населения, что приводит к дисбалансу нормальной кишечной микрофлоры - дисбактериозу.

Таким образом, разработка технологии производства и расширение ассортимента синбиотических продуктов отечественного производства, которые могут быть рекомендованы для профилактики дисбиотических состояний, является обоснованной и актуальной.

Цель диссертационной работы - разработка технологии новых видов высокоэффективных комплексных синбиотических продуктов, содержащих

высокий титр бифидобактерий и способствующих нормализации деятельности ЖКТ.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- обосновать состав синбиотических продуктов на основе литературных данных и проведенных исследований;

- исследовать взаимодействие штаммов разных видов бифидобактерий и создать консорциум на их основе;

- исследовать влияние растворимых и нерастворимых пищевых волокон, дрожжевого экстракта, на развитие и активность бифидобактерий в молоке и отработать состав и технологию получения синбиотических кисломолочных продуктов;

- разработать состав и технологию получения синбиотических кисломолочных продуктов учитывающих возрастную категорию потребителя;

- изучить характеристики синбиотических кисломолочных продуктов в процессе хранения и обосновать их сроки годности;

- разработать проект технической документации на новые виды синбиотических продуктов.

Научная новизна

Предложен состав комплексного синбиотического продукта, обоснованы входящие в него компоненты и определены количественные их соотношения, обеспечивающие максимальный пробиотический эффект и технологические свойства.

Показано, что наиболее рациональному сочетанию компонентов отвечает следующее:

- экасия - 2,22% (или гуммиарабик 2%),

- дрожжевой экстракт - 0,6%,

- COMO -14%,

- лимоннокислый натрий - 0,06%.

Дана количественная оценка комплекса свойств нового консорциума бифидобактерий по технологическим и микробиологическим показателям, в том числе: время ферментации молока (сократилось в 1,4 раза), количество клеток в образующемся сгустке (увеличилось в 3,6 раз), возросла устойчивость микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

Выявлено, что концентрация дрожжевого экстракта на уровне 0,6 % обеспечивает достижение наилучших значений времени образования сгустка (процесс ферментации молока ускорился в 1,3 раза) и количества клеток бифидобактерий (увеличилось в 4,3 раза). Вкл ючение в синбиотический продукт 2% гуммиарабика с одновременным увеличением концентрации COMO до 14% позволяет снизить синерезис продукта на 10% и получить более высокий титр бифидобактерий в продукте (в 6,3 раза).

Предложена аналитическая зависимость, позволяющая дать численную оценку роста бифидобактерий на этапе образования сгустка и хранения.

Практическая значимость работы

Создан консорциум из штаммов бифидобактерий, обеспечивающий синерггтический эффект, который позволяет сформировать комплекс технологических параметров - плотность сгустка и время его образования, кислотность, а также концентрацию микроорганизмов, превосходящие в совокупности данные параметры для каждой из исходных культур в отдельности.

Разработан состав синбиотического кисломолочного продукта и технология его получения, предназначенного для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника и повышения общей резистентности организма для взрослых людей различных возрастных групп.

На состав синбиотического продукта и способ его получения подана заявка на патент№ 2009141377.

На новые виды синбиотических продуктов разработан проект технической документации.

Результаты работы внедрены в учебный процесс и используются при выполнении лабораторных и курсовых работ.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на Всероссийской выставке «Научно-технического творчества молодежи» (Москва, 2008), Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (Москва, 2008), Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2008), Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Экологически безопасные ресурсосберегающие технологии и средства переработки сельскохозяйственного сырья и производства продуктов питания» (Москва 2009).

Работа награждена дипломом открытого конкурса «На лучшую научную работу» по разделу «Пищевая промышленность» (Краснодар, 2006) и дипломом Всероссийской выставки научно-технического творчества молодёжи (Москва, 2008).

Публикации. По результатам проведенных исследований опубликовано 8 печатных работ и подана одна заявка на патент № 2009141377.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 3 глав экспериментальной части, выводов, списка литературы, содержащего 203 источника.

Работа изложена на 146 страницах машинописного текста, содержит 24 таблицы, 16 рисунков, 4 приложения.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность диссертационной работы.

Глава 1. Аналитический обзор

В аналитическом обзоре рассмотрены аспекты состояния здоровья населения России, освещены современные сведения о роли и составе нормального микробиоценоза человека. Приведена характеристика рынка продуктов лечебно-профилактической направленности. Рассмотрено значение про-, пре- и синбиотических продуктов в лечении и профилактике дисбиотических состояний. Проанализированы вопросы, связанные с их производством и способами повышения эффективности их действия на организм человека.

На основании анализа и обобщения информации обоснованы и сформулированы цель и задачи диссертационной работы.

Глава 2. Объекты и методы исследования

Настоящая работа выполнялась на кафедре «Технологии продуктов детского, функционального и спортивного питания» и в ПНИЛЭФМОПП Московского государственного университета прикладной биотехнологии.

Структурная схема проведения исследований приведена на рисунке 1.

2.1. Объекты исследования

Объектом исследований являлись лиофилизированные культуры бифидобактерий: В. adolescentis МС-42, В. bifidum 791, В. longum 379 М, полученные из коллекции микроорганизмов Государственного научного центра Российской Федерации ФГУП Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов; штамм Streptococcus thermophilus (сухой бактериальный концентрат ТУ 9220-20100419785-00); гуммиарабик торговой марки Fibregum В; композиция гуммиарабика и нерастворимых пшеничных волокон под торговой маркой EQUACIA™ (экасия); сухой обезжиренный молочный остаток и дрожжевой экстракт Bio Springer 0207/0-MG-L.

При изучении устойчивости штаммов и консорциума к антибиотикам использовались 26 различных антибактериальных препарата.

2.2. Методы исследования

Для оценки эффективности использования дрожжевого экстракта, экасии, гуммиарабика при разработке синбиотического продукта, исследовали способность данных добавок ускорять процесс сгусткообразования, увеличивать количественное соотношение и жизнестойкость исследуемых штаммов.

Определение титруемой кислотности проводили по ГОСТ 3624-92. Определение активной кислотности проводили потенциометрическим методом в соответствии с ГОСТ 3224-84. Синеретическую способность продуктов устанавливали методом центрифугирования.

Рис.1 Схема проведения исследований

Показатели: 1 - количество клеток бифидобактерий; 2 - время ферментации молочной основы; 3 - устойчивость к антибактериальным препаратам; 4 - активная кислотность; 5 - титруемая кислотность; 6 -органолептические показатели; 7 - синеретическая способность; 8 - количество клеток мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов; бактерии группы кишечных палочек, патогенных микроорганизмов, в т.ч. сальмонелл; Staphylococcus aureus; дрожжи и плесени.

Сочетаемость штаммов бифидобактерий определяли по продолжительности ферментации молока консорциумом в сравнении с продолжительностью ферментации молока каждым штаммом, входящим в его состав. Органолептические показатели оценивали после выдерживания проб при 4°С в течение 20 ч.

Устойчивость к антибактериальным препаратам определяли диско-диффузионным методом по МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».

Определение количества бифидобактерий проводили в соответствии с МУК 4.2.999-00, определение бифидобактерий в смешанных с молочнокислыми бактериями культурах - в соответствии с МУК 4.2.577-96. Определение молочнокислых бактерий проводили в соответствии с ГОСТ 10444.11 и ГОСТ 51331-99.

Результаты исследований по данным 3-5 кратных повторностей обрабатывали с помощью методов статистического анализа с определением среднего арифметического значения изучаемого признака и средней квадратичной ошибки. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием компьютерных программ "Biostat", "Excel" и Statistica 6.0. Все данные в окончательном варианте представляли как медиану и персентили - Me (25;75)% и для статистического анализа результатов исследования использовали непараметрические методы вариационной статистики.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Глава 3. Разработка пробиотической составляющей синбиотичес-кого продукта. Промышленный выпуск стартовых культур бифидобактерий и их применение в производственных процессах стали возможными в результате большой работы по селекции бифидобактерий и изучению их биохимических и культуральных свойств, так как одним из важных направлений при создании продуктов с пробиотическими культурами, является поиск микроорганизмов со стабильным заданным комплексом свойств. Основываясь на имеющихся данных о видовом составе микрофлоры ЖКТ человека, а также опыте использования чистых культур в производстве продуктов специального назначения, для создания синбиотических систем были выбраны штаммы В. adolescentis МС-42, В. bifidum 791, В. longum 379 М.

Следует отметить, что физиолого-биохимические и антагонистические свойства данных штаммов обосновывают их применение в качестве пробиотиков в производстве синбиотических продуктов, хотя их технологические показатели, явно, не удовлетворительны для производственных целей.

Известно, что между штаммами возможен синергизм. В связи с этим, на первом этапе эксперимента исследовались взаимоотношения данных штаммов в консорциуме. Были составлены консорциумы с различным соотношением выбранных штаммов.

На основании проведенных исследований выявлено, что исследуемые штаммы при совместном применении стимулируют рост друг друга, в сравнении с их отдельным использованием (табл. 1). Они не обладали антагонистической активностью по отношению друг к другу, а напротив, проявляли симбиотические взаимодействия, то есть способствовали стимуляции роста количества клеток. По результатам исследования был выбран консорциум, в котором эти взаимодействия были наиболее сильными. Консорциум обладал наилучшими пробиотическими и технологическими свойствами, а штаммы бифидобактерий В. аёоквсеши МС-42, В. ЬШ(1ит 791, В. Ьгщит 379 М находятся в отношении 4:3:3 соответственно.

Исследования также показали, что образуемый консорциум микроорганизмов по свойствам превосходит исходные свойства культур. Если сгустки у отдельных культур образовывались через 37-55ч, у данной комбинации штаммов время образования сгустка сократилось до 27-35ч, а количество клеток увеличилось в среднем 4 раза (Табл. 1). Органолептические показатели образующегося при ферментации молочного сгустка не изменялись.

Таблица 1. Технологические показатели штаммов бифидобактерий В. ас1о1е5сеп^ МС-42, В. ЫПёит 791, В. 1о^ит 379 М.

№ штамма Активность фермен-тации, час Активная кислот-ность, рн Титруемая кислот-ность, оу Кол-во Жизнеспособных клеток в сгустке, КОЕ/см3

В. асЫезсепЙБ МС-42 50±5 4,7±0,2 64±5 7,9±0,2

В. ЫАс1ит 791 49±6 4,8±0,2 63±5 8,1±0,2

В. 1ог^ит 379 М 48±5 4,8±0,2 61±5 7,8±0,1

Консорциум (В. асМезсепйз МС-42+ В. ЬШит 791+ В. 1оп£ит 379 М) ЗШ 4,7±0,2 66±5 8,6±0,2

Немаловажное значение при подборе культур микроорганизмов для про-и синбиотических продуктов и препаратов придается такому свойству, как устойчивость к антибиотикам. Из литературы известно, что совместное применение антибиотиков и антибиотикоустойчивых штаммов микроорганизмов способствует эффективному восстановлению нормальной микрофлоры кишечника уже в процессе антибиотикотерапии.

Именно поэтому при разработке консорциума для синбиотического продукта являлось важным изучение таких его свойств как антибиотикоустойчивость или другими словами чувствительность пробиотических микроорганизмов к антибактериальным препаратам (АБП).

Для решения данной задачи наиболее оптимальным и удобным методом определения антибиотикоустойчивости являлся диско-диффузионный метод, который основан на диффузии АБП из носителя (бумажного диска) в плотную питательную среду и подавлении роста исследуемой культуры в той зоне (см. рис.2), где концентрация АБП превосходит МПК. В определенных пределах величина диаметра зоны подавления роста обратно пропорциональна МПК.

Рис. 2 Зоны подавления роста бифидобактерий дисками с АБП Результаты проведённого исследования представлены в Таблице 2.

Таблица 2. Сравнение устойчивости к антибиотикам

ш Диаметр зоны ингибирования роста, мм

Название антибиотика Содержание антибиотика диске, мкг B.longum В.ЫШёит В.аёокБсеп^в Консорциум

1 2 3 4 5 6

Азитромицин 15 23 22 7 6

Азлоциллин 30 30 30 16 12

Амикацин 30 9 9 7 6

1 2 3 4 5 6

Амоксициллин 10 23 24 18 19

Амоксициллин 25 26 31 20 19

Амоксициллин/ Клавулановая кислота 30 27 27 22 19

Ампициллин 25 27 28 19 20

Ампициллин/ сульбактам 20 18 20 19 19

Гентамицин 10 12 11 - -

Гентамицин 120 20 21 12 12

Далфопристин/ Квинупристин 15 28 22 15 16

Доксициклин 30 19 17 20 16

Кларитромицин 15 35 34 11 11

Миноциклин 30 20 20 23 17

Неомицин 30 - - - -

Норфлоксацин 10 12 - 10 8

Оксациллин 1 - - - -

Офлоксацин 5 12 14 11 9

Рокитамицин 30 35 30 17 17

Тетрациклин 30 17 15 20 14

Хлорамфеникол 30 34 30 18 19

Цефазолин 30 19 16 10 8

Цефтриаксон 30 14 14 7 6

Ципрофлоксацин 5 13 11 10 10

Эритромицин 15 30 31 12 12

Эртапенем 10 14 13 11 11

В таблице 2 показаны диаметры зон подавления роста каждого штамма входящего в консорциум и самого консорциума различными антибиотиками. В эксперименте использовались 26 препаратов антимикробного действия. Из представленных данных видно, что при использовании одного и того же антибиотика зоны ингибирования у консорциума почти всегда меньше или равны зонам ингибирования любого из штаммов входящих в консорциум. По результатам проведенного исследования можно говорить о синергическом взаимодействии этих штаммов и усилении их антибиотикоустойчивости при совместном использовании.

Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что изученные штаммы бифидобактерий сочетаются между собой и по своей эффективности дополняют друг друга, а созданный консорциум целесообразно использовать при получении синбиотических продуктов.

Глава 4. Разработка технологии синбиотических продуктов.

Поскольку бифидобактерии плохо растут на коровьем молоке, д ля их роста требуется внесение различных стимуляторов с целью создания кисломолочных продуктов, содержащих высокий титр бифидобактерий. В этой связи представлялось целесообразным в условиях «in vitro» изучить бифидогенные свойства пищевых волокон гуммиарабика, композиции гуммиарабика и нерастворимых пшеничных волокон, а также дрожжевого экстракта.

На основании анализа литературы и учитывая вышеизложенное, было предложено исследовать три концентрации композиции гуммиарабика, марки Fibregum В и нерастворимых пшеничных волокон, а также сравнить влияние композиции гуммиарабика и нерастворимых пшеничных волокон и гуммиарабика. В обезжиренное молоко с концентрацией сухих веществ 10% добавляли 0,5%, 1%, 1,5% гуммиарабика и 0,66%, 1,11%, 1,66% экасии соответственно, перемешивали и стерилизовали. Концентрации экасии были выбраны так, чтобы концентрация гуммиарабика в них составляла 0,5%, 1% и 1,5% соответственно. Контролем являлось стерилизованное обезжиренное молоко. Кислотность молока увеличивалась при добавлении Fibregum и Equacia, что привело к заметному уменьшению величины рН молока и дестабилизации системы. Для поддержания рН на оптимальном уровне повышали буферную емкость молока с гуммиарабиком и экасией путем добавления соли-стабилизатора - лимоннокислого трехзамещенного натрия.

В разработанные составы, содержащие 0,5%, 1%, 1,5% Fibregum и 0,66%, 1,11%, 1,66% экасии соответственно, а также соль-стабилизатор, вносили 5% инокулята, после чего инкубировали при температуре (37±1)°С до появления сгустка. Результаты исследования влияния разных концентраций Fibregum В и Equacia (экасия) на рост консорциума бифидобактерий приведены на рис. 3.

1 ..................................................

Е 9 - [

-

i 0,0 S3 8 - 7,5 8ш" 7 6 9 6,5 Is 1 5-5 Ш

—

I

—j

i 1 о< / / </ / </ / Jt Jf Jt / ■f / J J- Ж A' A' .J ^ </ ^ J A° A° fi N K?

Рис. 3. Влияние гуммиарабика и экааш на количество клеток бифидобактерий (консорциум) в молочном сгустке

Анализ полученных результатов показал, что гуммиарабик и экасия активизировали развитие бифидобактерий в процессе ферментации, доводя количество клеток до уровня 10® КОЕ/см3 за 19-22 часа. Более того, количество клеток бифидобактерий в присутствии 1,5% гуммиарабика и 1,66% экасии превышало их количество в сравнении с контрольным образцом. Анализ полученных данных также показал, что нерастворимые пшеничные волокна, входящие в состав экасии помимо гуммиарабика, существенного влияния на рост и развитие бифидобактерий не оказали. Однако включение экасии в состав синбиотического продукта оправдано тем, что повышаются функциональные свойства продукта за счет обогащения его нерастворимыми пищевыми волокнами.

Как видно из рис. 3, при повышении концентрации гуммиарабика происходит значительный рост числа бифидобактерий в образующемся молочном сгустке, это и послужило основанием для проведения дальнейших исследований по увеличению концентрации гуммиарабика. Известно, что Fibregum снижает активную кислотность молока, а казеинат-кальций-фосфатный комплекс (ККФК) образует буферную систему, сдерживая нарастание кислотности при росте биомассы. Также существенно стимулируют рост бифидобактерий входящие в состав сухого обезжиренного молочного остатка (COMO) серосодержащие аминокислоты. Именно поэтому представлялось целесообразным повысить концентрацию сухих молочных веществ в разработанных составах. Известны работы, в которых исследовалось и было доказано влияние COMO на рост бифидобактерий, необходимо было определить рациональную концентрацию сухого обезжиренного молочного остатка для разрабатываемого продукта, а также исследовать влияние этой концентрации совместно с гуммиарабиком на рост и активность консорциума в молочной среде.

Концентрация COMO в приготовленных средах составляла 10% и была увеличена на 10%, 20%, 30%, 40% и 50% (путём внесения сухого обезжиренного молока), тем самым составила 11, 12, 13, 14 и 15%

соответственно.

Для определения рациональной концентрации сухого обезжиренного молочного остатка, в обезжиренное молоко и в питательную среду на его основе, но с увеличенным содержанием COMO, вносили биомассу бифидобактерий и культивировали при температуре (37±1)°С до образования сгустка. Определяли время образования сгустка и динамику количества клеток бифидобактерий в процессе ферментации в питательной среде с разными концентрациями COMO. Результаты проведенного эксперимента представлены на рис. 4.

В образце с концентрацией COMO 15% , не было получено сгустка со сплошной структурой, образовывались лишь хлопья. Остальные образцы с увеличенным содержанием СО МО образовали сгусток раньше, чем контроль. Сгусток плотный, без отделения сыворотки.

I О 6 9 18 сгусток

g Время, ч

□ контроль о молоко с COMO 11% □ молоко с COMO 12%

■ молоко с COMO 13% в молоко с COMO 14%

Рис.4 Динамика количества клеток бифидобактерий (консорциум) в процессе ферментации в молочной среде с разными концентрациями COMO

Исследования показали, что концентрация COMO в 14% наиболее максимально стимулирует развитие изучаемого консорциума бифидобактерий. Установлено также, что при этом повышается титр бифидобактерий в образующемся сгустке, сам сгусток получается более плотный без отделения сыворотки, с чистым вкусом без посторонних привкусов и запахов, уменьшается время ферментации (время образования сгустка).

Следующим этапом было исследование влияния увеличенной концентрации COMO совместно с гуммиарабиком на рост и активность консорциума бифидобактерий в молочной среде. При повышении буфера системы за счет дополнительного введения сухих молочных веществ, представлялось целесообразным исследовать концентрацию гуммиарабика в 2 %.

Результаты проведенного эксперимента представлены в табл. 3 и на рис. 5. По результатам проведенного исследования рациональной концентрацией для разрабатываемого синбиотического продукта была выбрана концентрация COMO 14 %.

На следующем этапе проведены исследования по определению рациональной концентрации дополнительных факторов роста, стимулирующих развитие бифидобактерий и сокращающих время образования сгустка. Было предложено исследовать три разные концентрации (0,2%, 0,4% и 0,6%) дрожжевого экстракта, совместно с установленными ранее концентрациями Fibregum - 2% и COMO - 14%. Для оценки эффективности использования дрожжевого экстракта, исследовали его способность ускорять процесс образования сгустка, увеличивать количественное соотношение и жизнестойкость исследуемых штаммов.

Таблица 3. Изменение активной и титруемой кислотности в процессе ферментации синбиотических продуктов с 2% гуммиарабика и концентрацией COMO 14%.

Время фермен -тации Показатели

Титруемая кислотность, 1}Т Активная кислотность, рН

Контроль Синбиотик с 2% гуммиарабика и 14% COMO. Контроль Синбиотик с 2% гуммиарабика и 14% COMO.

Оч 20±3 19±3 6,4±0,2 6,4±0,2

6ч 21±3 20+3 6,2±0,1 6,4±0,2

12ч 37±3 33±3 5,6±0,2 5,7±0,2

18ч 68±3 64±3 4,8±0,2 4,9±0,1

Рис.5 Динамика количества клеток бифидобактерий (консорциум) в процессе ферментации в молочной среде с 2% гуммиарабика и концентрацией СОМО 14%.

В обезжиренное молоко и в питательные среды на его основе с добавлением одного из исследуемых компонентов, вносили биомассу бифидобактерий и культивировали до образования сгустка с фиксацией степени вязкости. Определяли время ферментации и количество клеток микроорганизмов после внесения бактерий (исходное) и на момент образования сгустка. Результаты проведенного эксперимента представлены и на рис. 6.

Рис.6 Влияние дрожжевого экстракта на количество бифидобактерий в сгустке.

Исследования показали, что добавление дрожжевого экстракта в питательные среды на молочной основе стимулирует развитие изучаемых штаммов бифидобактерий.

В результате проведенного исследования была найдена рациональная концентрация дрожжевого экстракта, которая составила 0,6%. Также из рис. 6 видно, что при добавлении дрожжевого экстракта в разработанную ранее синбиотическую композицию происходит значительное увеличение числа бифидобактерий в сгустке.

Таким образом, по результатам серии экспериментов был предложен состав молочной основы для получения синбиотических продуктов, состоящий из обезжиренного молока с концентрацией COMO 14%, 2% гуммиарабика (или 2,22% экасии), 0,6% дрожжевого экстракта и 0,06% соли-стабилизатора. Наибольшее количество клеток бифидобактерии достигали именно на этой среде, а главные физико-химические показатели, влияющие на их жизнеспособность, не являлись лимитирующими.

На следующем этапе изучали показатели синбиотической системы: определяли количество клеток микроорганизмов, синеретическую способность, активную и титруемую кислотность после внесения бактерий (0 ч), через 6, 12 часов культивирования и на момент образования сгустка (17 - 18ч),

Динамика роста титра бифидобактерий пробиотического консорциума в присутствии гуммиарабика и экасии представлена на рис. 6. Несмотря на то, что скорость развития и, следовательно, время образования сгустка консорциума бифидобактерий В. adolescentis, В. bifidum, В. longum для всех образцов одинаково, количество клеток в синбиотиках с гуммиарабиком и экасией было в среднем в 13 и 13,5 раз больше, чем в контроле. В качестве

контроля использовалась молочная основа с консорциумом, без добавления гуммиарабика и экасии.

Время, ч

Рис. 7. Динамика роста титра бифидобактерий консорциума в присутствии гуммиарабика и экасии.

Титруемая кислотность в синбиотиках с гуммиарабиком, экасией и в контрольном образце увеличивалась с одинаковой скоростью. В сгустае синбиотиков значение титруемой кислотности в среднем составляло (64-65) °Т, что на 4-5 °Т ниже, чем в контроле. В целом, по физико - химическим параметрам синбиотики и контрольный образец не различались (Таблица 4).

Таблица 4. Динамика активной и титруемой кислотности в процессе ферментации синбиотических продуктов с консорциумом штаммов В. айо1езсепи$, В. Ы1"и1ит, В. кн^ит

Время Показатели

Титруемая кислотность, °Т Активная кислотность, рН

фермен Син- Син- Син- Син-

-тации Контроль биотик биотик Контроль биотик биотик

с Р1Ьгейиш с ЕциаЫа с ПЬгеяшп с Еяиааа

Оч 20±3 19±3 20±3 6,4±0,2 6,4±0,2 6,4±0,2

6ч 22±3 20±2 22±3 6,1±0,1 б,3±0,2 6,2±0,2

12 ч 37±3 33±3 34±3 5,5±0,2 5,6±0,2 5,6±0,2

18 ч 69±2 64±3 65±2 4,8±0,2 4,8±0,2 4,8±0,1

Несмотря на то, что РШге^т и Еяиаша способствовал быстрому снижению активной кислотности (рН), в сгустке величина рН'составляла 4,8. Нужно отметить, что для бифидобактерий составляющих большую часть

микрофлоры кишечника здорового человека, отмечено значительное увеличение адгезивности на слизистых оболочках именно при рН 4,0-5,0.

Как установлено, синеретическая способность синбиотиков с

гуммиарабиком и экасией снизилась в среднем на 13% по сравнению с

контролем, а в образце с концентрацией COMO 14% синеретическая

способность синбиотиков снизилась в среднем на 21%. Результаты представлены в таблице 5.

Таблица 5. Синеретическая способность синбиотических продуктов

Образцы с консорциумом бифидобактерий В. adolescentis, В. bifidum, В. longum

контроль Синбиотик с Fibregum Синбиотик с Equacia Синбиотик с Fibregum и концентрацией COMO 14% Синбиотик с Equacia и концентрацией COMO 14%

Синерезис

см1 % см1 % см3 % см5 % см3 %

5,4±0,2 54±0,2% 4,8±0,2 48±0,2% 4,9±0,2 49±0,2% 4,3±0,2 43±0,2% 4,4±0,2 44±0,2%

Сопоставляя результаты экспериментов по изучению характеристик синбиотических продуктов с бифидогенными волокнами, следует отметить, что включение в состав синбиотических продуктов гуммиарабика и экасии улучшали технологические характеристики этих продуктов, такие как время образования сгустка, синеретическая способность, а также микробиологические показатели (количество клеток).

В лабораторных условиях проводили совместное культивирование бифидобактерий В. adolescentis МС-42, В. bifidum 791, В. longum 379 М и термофильных молочнокислых стрептококков при соотношении штаммов 2:1 соответственно (для улучшения органолептических свойств продукта). Результаты эксперимента представлены в таблице 6.

Установлено, что потребительские свойства синбиотических продуктов, при использовании совместно с термофильным стрептококком, заметно улучшились. Полученный сгусток синбиотического продукта плотный, консистенция - однородная, нежная, в меру вязкая, вкус чистый кисломолочный, приятный, без наличия посторонних привкусов и запахов.

Технологический процесс производства разработанного синбиотического продукта включает приемку и подготовку сырья и материалов, восстановление сухого обезжиренного молока (концентрация COMO составляет 14%), внесение 2% гуммиарабика (или 2,22% экасии), 0,6% дрожжевого экстракта, 0,06% соли-стабилизатора, перемешивание не менее 20 мин., стерилизация, охлаждение до температуры заквашивания (37-39) °С, заквашивание, ферментация при температуре (38±1)°С, охлаждение до (20-25)°С, розлив, упаковка, маркировка

и хранение. Асептически расфасованные продукты охлаждают с температуры (20-25) °С до 6°С в течение 8-10 часов в холодильной камере.

Таблица 6. Микробиологические и физико-химические показатели синбиотического продукта с термофильным стрептококком

Показатель Образец

Бифидо-бактерии + термофильный стрептококк Бифидо-бактерии + термофильный стрептококк + Equacia Бифндо-бактерии + термофильный стрептококк + Fibregum

Титруемая кислотность, "Т 72 76 75

Активная кислотность, ед. рН 4,84 4,87 4,85

Количество клеток бифидобактерий, ¡ё КОЕ/см3 8,5 9,05 9,1

Количество клеток термофильного стрептококка, ^ КОЕ/см3 9,04 8,97 8,93

Синерезис, см'' 4,6 4,12 4,07

Активность сквашивания, ч 8,1 8,2 8,4

Известно, что в течение жизни количественный и качественный состав бифидофлоры кишечника здорового человека претерпевает определенные изменения. Согласно среднестатистическим данным, в возрасте 18-25 лет соотношение видов бифидобактерий находится в пределах - В. bifidum - от 30% до 35% , В. longum - от 30% до 40%, B.adolescentis,т- от 25% до 40%. В возрасте 25-35 лет доля В. bifidum в общем количестве бифидобактерий составляет - от 20% до 30%, В. longum - от 25% до 30%, B.adolescentis - от 40% до 55% соответственно. Соотношение видов бифидобактерий в возрасте 35-50 лет - В. bifidum - от 15% до 20%, В. longum - от 20% до 30%, B.adolescentis - от 55% до 65%. У людей старшего возраста (50-70 лет) доля B.adolescentis становится все более преобладающей и составляет от 65% до 75%, В. bifidum -от 10% до 15%, а В. longum от 15% до 25%.

Учитывая приведенные данные, была поставлена задача получить синбиотический продукт, в котором соотношение биомасс бифидобактерий соответствуют видовому среднестатистическому соотношению их в кишечнике здорового взрослого человека определенного возраста.

Необходимое соотношение при получении кисломолочного продукта достигается за счет того, что культивирование каждого вида бифидобактерий (В. adolescentis МС-42, В. bifidum 791, В. longum 379 М) происходит раздельно до получения биомасс с титром не менее 109 КОЕ/мл. Затем перед фасовкой происходит объединение полученных биомасс в соотношении, соответствующем видовому составу нормофлоры кишечника здорового взрослого человека в зависимости от возраста (см. табл. 7).

Разработаны составы синбнотического продукта, которые могут быть рекомендованы для коррекции нарушений микробиоценоза кишечника и повышения общей резистентности организма людей определенных возрастных групп. Способ получения прод укта включает приготовление закваски путем культивирования бифидобактерий в питательной среде, с последующим внесением в разработанную композицию посевной дозы полученной закваски в количестве не более 5% от объема питательной среды и повторное культивирование указанных видов бифидобактерий при температуре (38±1)°С до получения сгустка, охлаждение продукта до 6-7°С и его фасовку.

Разработанный синбиотический кисломолочный продукт позволяет повысить профилактические свойства кисломолочных функциональных продуктов, учитывая возраст пациентов, а также повысить совместимость синбиотика с кишечной нормофлорой человека.

Глава 5. Изучение влияния хранения на показатели качества синбиотических продуктов. Пробиотические микроорганизмы не способны влиять микробиоценоз кишечника, если их популяция не достигает определенного минимального уровня - 107 КОЕ/см3, т.е. клетки бифидобактерий должны оставаться живыми во время хранения, чтобы обеспечить потребителю адекватное количество клеток. Для подтверждения вышеуказанного по отношению изученных штаммов бифидобактерий, исследовались основные показатели качества в процессе хранения. Полученные синбиотические продукты хранили при температуре (4±2)°С в течение 30 дней. В процессе хранения синбиотические продукты контролировали согласно МУК 2.32.721-98 «Определение безопасности и эффективности БАД к пище» (так как исследуемые синбиотические композиции можно использовать также в качестве закваски, БАД к пище) по таким показателям как количество клеток микроорганизмов, активная и титруемая кислотность питательной среды, органолептические показатели и микробиологические показатели безопасности. Значения количества жизнеспособных клеток бифидобактерий, титруемой и активной кислотности, а также синеретическую способность синбиотических продуктов с консорциумом определяли на момент образования сгустка и через 10, 20 и 30 дней. Полученные результаты представлены в таблице 8.

Fibregum и повышенное содержание COMO снижали синеретическую способность сгустков продуктов, а, следовательно, создавали предпосылки к увеличению продолжительности хранения полученной продукции без снижения качества.

Таблица 8. Физико-химические показатели синбиотического продукта в процессе хранения

Срок Показатель

хране- Активная Титруемая Синерезис,

ния про- кислотность, ед. кислотность, см3

дукта, Образцы рн Оу

сут.

0 Контроль 4,8±0,2 64±5 5,2±0,2

Синбиотик 4,8+0,1 61±5 4,8±0,2

10 Контроль 4,9±0,2 73±5 5,3±0,2

Синбиотик 4,9+0,2 75±5 5,0±0,1

20 Контроль 4,8±0,1 83±5 5,4+0,2

Синбиотик 4,7±0,2 85±5 5,2±0,2

30 Контроль 4,6±0,1 85±5 5,7±0,1

Синбиотик 4,6±0,2 86±5 5,3±0,1

Анализ полученных результатов для синбиотических продуктов с консорциумом бифидобактерий показал, что в процессе 20 дневного хранения при температуре (4±2)°С, популяция бифидобактерий в 1 см3 не менее 1х108 КОЕ и в среднем в 15-30 раз превышала их количество по сравнению с контрольными образцами. Результаты изменения количества клеток бифидобактерий в синбиотическом продукте представлены на рисунке 8.

Рис. 8. Изменение количества клеток бифидобактерий в процессе хранения синбиотического продукта с бифидогенными волокнами

В течение 15 суток органолептические показатели продуктов не ухудшались. Определение срока годности консервированных продуктов проводится по времени последней контрольной точки, в которой была подтверждена стабильность всех показателей, уменьшенному с учетом коэффициента резерва в Кр раз. Согласно МУК 4.2.1847-04, коэффициент резерва для продуктов профилактического питания Кр= 2, следовательно, срок годности синбиотического кисломолочного продукта - 7 суток.

Все исследованные синбиотические продукты сохраняли основные свои показатели и отвечали требованиям МУК и разработанной технической документации. По показателям безопасности, выработанные синбиотические продукты отвечали требованиям ФЗ №88.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Проведены комплексные исследования изменения свойств пробиотических микроорганизмов в условиях их различных количественных сочетаний. Дана оценка влияния пребиотических добавок на изменения свойств консорциума бифидобактерий. Осуществлены исследования технологических свойств конечного продукта.

2. Разработан состав продукта для профилактики дисбиотических состояний, состав которого базируется на использовании синергетического эффекта штаммов бифидобактерий: В. adolescentis МС-42, В. bifîdum 791, В. longum 379 M, а также гуммиарабика, дрожжевого экстракта и экасии.

3. Выбраны количественные сочетания основных компонентов:

- экасии - 2,22% (или гуммиарабика 2%),

- дрожжевой экстракта - 0,6%,

- COMO -14%,

- лимоннокислого натрия - 0,06%, которые обеспечивают достижение наилучших технологических и пробиотических свойств применительно к рассматриваемым условиям.

4. Рецептура, разработанного в рамках данной работы синбиотического кисломолочного продукта отличается от известных аналогов тем, что соотношение видов бифидобактерий в синбиотике отвечает изменяющемуся составу бифидофлоры в организме человека с изменением возраста.

5. По результатам проведенных исследований разработан проект технической документации. Техническая новизна предложенных решений отражена в заявке на патент № 2009141377 от 15.07.2009 «Синбиотический продукт и способ его получения».

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Токаев Э.С. Разработка синбиотического продукта с использованием бифидогенного волокна / Э.С.Токаев, А.А.Максимов // «Биотехнология: состояние и перспективы развития»: материалы V Московского международного конгресса. - Москва 2008. - С. 106-107.

2. Максимов A.A. Разработка и создание нового синбиотического продукта / А.А.Максимов // «Живые системы и биологическая безопасность населения»: материалы VII Международной научной конференции студентов и молодых ученых. - Москва 2008. - С. 60-61.

3. Токаев Э.С. Разработка нового синбиотического пищевого продукта с высоким содержанием бифидобактерий / Э.С.Токаев, А.А.Максимов // Вопросы питания. - 2009. - №.2. - С. 39-41.

4. Токаев Э.С. Разработка синбиотического продукта для лечения и профилактики дисбактериозов в желудочно-кишечном тракте / Э.С.Токаев, А.А.Максимов // «Пищевые технологии и биотехнологии»: материалы X Международной конференции молодых ученых. - Казань 2009. - С. 403.

5. Максимов A.A. Разработка состава синбиотического продукта / А.А.Максимов // «Молодежная наука - пищевой промышленности России»: материалы I Всероссийской студенческой научной конференции. - Ставрополь 2009.-С. 18.

6. Максимов A.A. Разработка кисломолочного синбиотического продукта для профилактики дисбактериозов / А.А.Максимов //«Олимпиада 2014: технологические и экологические аспекты производства продуктов здорового питания»: материалы Международной научно-практической конференции. - Краснодар 2009. - С. 206-207.

7. Токаев Э.С. Разработка технологии синбиотического кисломолочного продукта для лечения и профилактики дисбактериозов / Э.С.Токаев, А.А.Максимов // «Экологически безопасные ресурсосберегающие технологии и средства переработки сельскохозяйственного сырья и производства продуктов питания»: материалы Международной научной конференции студентов и молодых ученых. - Москва 2009. - С. 82-83.

8. Максимов A.A. Разработка кисломолочного синбиотического продукта / А.А.Максимов // «Инновационные технологии и оборудование для пищевой промышленности»: материалы Международной научно-технической конференции. - Воронеж 2009. - С. 456-457.

Подписано в печать 14.05.2010 Усл. пя. л. 1,5. Заказ 11/26. Тираж 100 экз. МГУПБ109316, Москва, ул. Талалихина, 33

ООО «Полисувенир». 109316, Москва, ул. Талалихина, 33. Тел.677-03-86.

ВВЕДЕНИЕ.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Микрофлора кишечника.

1.1.1 Состав нормальной микрофлоры кишечника.

1.1.2 Функция микрофлоры.

1.1.3 Дисбактериоз.Ю

1.2. Функциональное питание как наиболее перспективное направление в профилактике дисбиотических состояний.

1.3 Критерии выбора пробиотических культур для создания кисломолочных синбиотических продуктов.

1.3.1. Требования к пробиотическим культурам.

1.3.2. Пробиотические и технологические свойства штаммов молочнокислых бактерий и бифидобактерий.

1.3.3. Устойчивость штаммов к антибактериальным препаратам.

1.4 Пребиотическая составляющая синбиотических продуктов.

1.4.1 Бифидогенное действие растворимых и нерастворимых пищевых волокон и актуальность их использования в функциональном питании.

1.4.2 Дрожжевой экстракт как стимулятор роста бифидобактерий и компонент в функциональных продуктах питания.

1.5 Перспективность разработки синбиотических продуктов.

Полноценное и здоровое питание является одним из наиболее важных и необходимых условий для сохранения жизни и здоровья человека. Развитие рынка продуктов функционального питания главным образом обусловлено фиксируемой тенденцией ухудшения здоровья населения. Особенно велика роль продуктов функционального питания в поддержании микробной экологии человека, прежде всего микрофлоры желудочно-кишечного тракта.

При микроэкологических нарушениях наблюдается уменьшение абсолютного числа бифидобактерий и увеличение общего количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и продуктов их метаболизма, что приводит к возникновению и обострению хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Известно также, что при дисбиотических состояниях снижается иммунитет организма, который тесным образом связан с функцией нормальной микрофлоры, рассматриваемой в настоящее время в качестве своеобразного органа иммунной системы. Именно поэтому так важно поддержание микроэкологического равновесия в желудочно-кишечном тракте. Применение синбиотиков (комплекс пробиотиков и пребиотиков) является наиболее эффективным путём нормализации дисбаланса кишечной микрофлоры, так как при этом не только имплантируются вводимые микроорганизмы, но и избирательно стимулируются рост и активация метаболизма индигенных лакто- и бифидобактерий.

Теоретические и практические основы в области создания функциональных продуктов питания заложены в трудах Гончаровой Г.С., Шендерова Б.А., Семенихиной В.Ф., Гавриловой Н.Б., Ганиной В.И., Евдокимова И.А., Забодаловой JI.A., Королевой Н.С., Рогова И.А., Рябцевой С.А., Титова Е.И., Тихомировой H.A., Токаева Э.С., Бобреневой И.В., Хорольского В.В., Храмцова А.Г., Degeest В., Fuller R., Lee К., Shah N.P.,

Sanders M.E., Fuller R., Tannock G.W., Gibson G.R., Shin H.S., Arai S., Morinaga Y и др.

Значение продуктов функциональной направленности весьма велико для России, так как, согласно исследованиям, в последние годы отмечаются ухудшение экологической обстановки, увеличение стрессовых факторов и нарушения в структуре питания населения, что приводит к дисбалансу нормальной кишечной микрофлоры - дисбактериозу.

Таким образом, разработка технологии производства и расширение ассортимента синбиотических продуктов отечественного производства, которые могут быть рекомендованы для профилактики дисбиотических состояний, является обоснованной и актуальной.

Цель диссертационной работы - разработка технологии новых видов высокоэффективных комплексных синбиотических продуктов, содержащих высокий титр бифидобактерий и способствующих нормализации деятельности ЖКТ.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Проведены комплексные исследования изменения свойств пробиотических микроорганизмов в условиях их различных количественных сочетаний. Дана оценка влияния пребиотических добавок на изменения свойств консорциума бифидобактерий. Осуществлены исследования технологических свойств конечного продукта.

2. Разработан состав продукта для профилактики дисбиотических состояний, который базируется на использовании синергетического эффекта штаммов бифидобактерий: В. adolescentis МС-42, В. bifidum 791, В. longum 379 М, а также гуммиарабика, дрожжевого экстракта и экасии.

3. Выбраны количественные сочетания основных компонентов:

- экасии - 2,22 % (или гуммиарабика 2 %);

- дрожжевой экстракта - 0,6 %;

- COMO - 14 %;

- лимоннокислого натрия - 0,06 %, которые обеспечивают достижение наилучших технологических и пробиотических свойств применительно к рассматриваемым условиям.

4. Рецептура разработанного в рамках датой работы синбиотического кисломолочного продукта отличается от известных аналогов тем, что соотношение видов бифидобактерий в синбиотике отвечает изменяющемуся составу бифидофлоры в организме человека с изменением его возраста.

5. По результатам проведенных исследований разработан проект технической документации. Техническая новизна предложенных решений отражена в заявке на патент № 2009141377 от 15.07.2009 «Синбиотический продукт и способ его получения».

1. Аймухомедова Г.Б. Свойства и применение пектиновых сорбентов / Г.Б. Аймухомедова, Д.Э. Алиева, Н.П. Шелухина. Фрунзе: Илим, 1984. - С. 131.

2. Алехина Г.Г. Пробиотики новый подход к старым проблемам / Г.Г. Алехина, А.Н. Суворов // Научный журнал "Успехи современного естествознания. - №6. — 2007. - С. 21-24.

3. Амерханова A.M. Научно-производственная разработка новых препаратов-синбиотиков и клинико-лабораторная оценка их эффективности: автореф. . д-ра биол. наук. -М., 2009.

4. Андросова Н.Л. Разработка новых видов кисломолочных продуктов для детского питания / Н.Л. Андросова, Н.К. Никонова, Е.П. Барышенкова // Питание детей XXI век: материалы 1-го Всероссийского конгресса. М., 2000. - С. 143.

5. Бабьева И.П. Биология дрожжей / И.П. Бабьева, И.Ю. Чернов. -М.: Товарищество научных изданий КМК, 2004. С. 12-19.

6. Багдасарян A.C. Биотехнология синбиотических продуктов на молочной основе с использованием растительных бифидогенных волокон: дисс. . канд. техн. наук. -М., 2007.

7. Бакулина О.Н. Функциональные ингредиенты для воплощения Концепции здорового питания / О.Н. Бакулина, О.В. Бзюк // Пищевые ингредиенты сырье и добавки. 2005. -№5. - С. 30-32.

8. Банникова Л.А. Микробиологические основы молочного производства / Л.А. Банникова, Н.С. Королева, В.Ф. Семенихина // М.: Агропромиздат, 1987. - 400с.

9. Беюл Е.А. Дисбактериозы кишечника и их клиническое значение / Е.А. Беюл, И.Б. Куваева // Клин. мед. 1986. - №11. - С. 37-44.

10. Биотехнология микробного синтеза / под ред. М.Е. Беккера. Рига: Зинатне, 1980. - 350 с.

11. Бифидофлора человека, ее нормализующие и защитные функции / Г.И. Гончарова, Л.П. Семенова, A.M. Ляная, Э.П. Козлова // Антибиотики и медицинская биотехнология. 1987. - Т. 32. -№ 3. - С. 179-184.

12. Бобринева И.В. Научное обоснование и разработка технологий функциональных продуктов питания с применением добавок биологического происхождения: дисс. . д-ра техн. наук. -М., 2005.

13. Бондаренко В.М. Дисбактериоз. Причины возникновения / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева, Т.В. Мацулевич // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. и колопроктол. 2003. - № 4 (приложение № 20). - С. 66-70.

14. Бондаренко В.М. Дисбактериозы кишечника у взрослых / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева, Т.В. Мацулевич. М., 2003. - 206 с.

15. Бондаренко В.М. Общий анализ представлений о патогенных и условно-патогенных бактериях / В.М. Бондаренко // Микробиология. 1997. - №4. - С. 20-25.

16. Булатов М.А. Гуммиарабик — источник здорового питания / IVLA. Булатов, Л.Ф. Копылова // Пищевые ингредиенты, сырье и добавки. 2005. — №1. - С. 15-17.

17. Винаров А.Ю. Использование консорциума бактериальных культур для их выращивания на молочной сыворотке / А.Ю. Винаров, Т.Е. Сидоренко // Хранение и переработка сельхозсырья. 1999. - №1. - С. 16-17.

18. Воробьев A.A. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодержащими пробиотиками / A.A. Воробьев В.М. Бондаренко, Е.А. Лыкова и др. // Вестник РАМН. 2004. -№2.-С. 13-17.

19. Воробьев A.A. Дисбактериозы у детей: учеб. пособие для врачей и студентов / A.A. Воробьев; под ред. С.Г. Пак. М., 1998. - 64 с.

20. Воскобойников В.А. О классификации пищевых волокон / В.А. Воскобойников, И. А. Типисева // Пищевые ингредиенты, сырье и добавки. — 2004.-№1.-С. 18-21.

21. Ганина В.И. Пробиотики. Назначение, свойства и основы биотехнологии: монография / В.И. Ганина. -М.: МГУПБ, 2001. 169с.

22. Ганина В.И. Действие пробиотических продуктов на возбудителей кишечных инфекций / В.И. Ганина, Е.В. Большакова // Молочная промышленность. 2001. - №11. - С. 47-48.

23. Петров А.Н. Геродиетические продукты функционального питания / А.Н. Петров, Ю.Г. Григоров, С.Г. Козловская, В.И. Ганина. М.: Колос-Пресс, 2001.-96с.

24. Гизатов А .Я. Разработка бифидосодержащих консорциумов микроорганизмов для получения мясопродуктов из низкосортного сырья: автореф. дисс. . канд. техн. наук. Воронеж, 2005. - 23 с.

25. Глушанова H.A. О биологической и антагонистической активности «сухого» и «жидкого» пробиотика «Narine» / H.A. Глушанова // Бюллетень Восточно-Сибирского НЦ СО РАМН. 2005. - №1.

26. Гончарова Г.И. Микробная экология в норме и при патологии / Г.И. Гончарова, В.Г. Дорофейчук, A.B. Смоленская, И.Я. Соколова // Антибиотики и химиотерапия. 1989. -Т. 34. - № 6. - С. 462-466.

27. Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов / К.К. Горбатова. СПб.: ГИОРД, 2004. - 320 с.

28. ГОСТ Р 52349-05. Продукты пищевые. Продукты пищевые функциональные. Термины и определения. — Введ. 01.07.06. М.: Стандартинформ, 2005. - 4с. - (Национальный стандарт Российской Федерации).

29. Грачева Н.М. Дисбактериозы кишечника, причины возникновения, диагностика, применение бактерийных биологических препаратов / Н.М. Грачева, Н.Д. Ющук, Р.П. Чупринина // Пособие для врачей и студентов. -М., 1999. 44 с.

30. Грибакин С.Г. Пребиотики против пробиотиков? / С.Г. Грибакин // Вопросы детской диетологии. 2003. - Т. 1. - №1. - С. 71-74.

31. Григорьев П.А. Диагностика и лечение хронических болезни органов пищеварения / П.А. Григорьев, Э.П. Яковленко. М., 1990. - 160с.

32. Гриневич В.Б. Принципы коррекции дисбиозов кишечника / В.Б. Гриневич, С.М. Захаренко, Г.А. Осипов // Лечащий Врач. № 6. - 2008. - С. 42-45

33. Гуринович Г.В. Пробиотики и пробиотические продукты / Г.В. Гуринович, Л.С. Кудряшов, И.С. Патракова. М.: ВНИИМП, 2002. - 86 с.

34. Гуммиарабик: функциональные свойства и области применения / И.Г. Плащина, М.Д. Булатов, М.Ю. Игнатов, Д.М. Хаддад // Пищевая промышленность. 2002. - №6. - С. 54-56.

35. Донская Г.А. Пищевые волокна стимуляторы роста полезной микрофлоры человека / Г.А. Донская, М.В. Ишмаметьева // Пищевые ингредиенты, сырье и добавки. - 2004. - №1. - С. 21.

36. Донская Г.А. Продукты с пищевыми волокнами / Г.А. Донская, М.В. Ишмаметьева, Е.А. Денисова // Молочная промышленность. 2003. - № 10.-С. 49-48.

37. Доронин А.Ф. Функциональное питание / А.Ф. Доронин, Б.А. Шендеров. М.: Грантъ, 2002. - 296с.

38. Дудкин М.С. Об использовании термина «пищевые волокна» и их классификация / М.С. Дудкин, Л.Ф. Щелкунов // Вопросы питания. 1997. -№3. - С. 42-43.

39. Евдокимов И.А. Синбиотические молочные продукты / И.А. Евдокимов // Молочная промышленность. 2004. - №4. - С. 41-42.

40. Евстифеева О.В. Глюкокортикоидная регуляция иммунитета и ее роль в лечении перитонита: автореф. дисс. . канд. техн. наук. -М., 1996.

41. Ерюхин И.А. Псевдомембранозный колит и "кишечный сепсис" — следствие дисбактериоза, вызванного антибиотиками / И.А. Ерюхин, С.А. Шляпников, В.Ф. Лебедев, Г.А. Иванов // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. -1997.-156 (2).-С. 108-11.

42. Ефимов В.А. Дисбактериозы кишечника и их коррекция кисломолочными продуктами, приготовленными использованием индигенных микроорганизмов: дисс. канд. техн. наук. М., 1993. -128 с.

43. Жабанос Н.К. Кисломолочный продукт «Бифидобакт» / Н.К. Жабанос, О.В. Ласковнева // Молочная промышленность. 2004. -№5. - С. 32-33.

44. Закарая И.П. Микрофлора толстого кишечника: дисс. канд. техн. наук. М., 1985.-131с.

45. ЗАО «Коллоид Натюрель Восток». Fibregum пищевое растворимое диетическое волокно, идеально подходящее для применения в разнообразных продуктах питания / ЗАО «Коллоид Натюрель Восток» // Пищевая промышленность. - 2004. - №11. - С. 80.

46. Зобкова З.С. Витамины, поливитаминные премиксы, биологически активные добавки в молочных продуктах / З.С. Зобкова, А.Д. Гаврилина // Молочная промышленность. 1999. -№2. - С. 10-12.

47. Иванова Е.В. Разработка технологии пищевой добавки с пробиотическими свойствами: дисс. . канд. техн. наук. -М.: МГУ üb, 2003.- 169с.

48. Иванова Т.Н. Микробиологические особенности дисбиоза кишечника у жителей крайнего севера: автореф. дисс. . канд. мед. наук. -Пермь, 2007.

49. Ильина P.M. Использование бифидосодержащих лечебно-диетических продуктов питания для профилактики дисбактериозов / P.M. Ильина, A.B. Молокеев, Л.Г. Никулин и др. // Гигиена и санитария. 2000.- №6. С. 35-38.

50. Ипатова Л.Г. Пищевые волокна и жиры: теория и практика / Л.Г. Ипатова, A.A. Кочеткова // Технологии и продукты здорового питания: материалы международной конференции. М., 2005. - С. 65-76.

51. Биотехнология. 1999. - №2. - С. 15-21.

52. Капрельянц Л.В. Нетрадиционные ферментированые продукты с пробиотическими свойствами / Л.В. Капрельянц, С.Д. Невмываный // Хранение и переработка сельхозсырья. 2001. - №10. - С. 54-55.

53. Ким В.В. Зарубежный опыт использования пребиотиков / В.В. Ким, Д.В. Харитонов, Э.Г. Щербакова // Молочная промышленность. 2001. - №2.-С. 31-33.

54. Донская Г .А. Кисломолочный напиток, обогащенный пищевыми волокнами / Г.А. Донская, М.В. Ишмаметьева, В.Н. Матушевская, С.А. Шевелева // Молочная промышленность. 2004. - №6. - С. 50-51.

55. Конев Ю.В. Дисбиозы и их коррекция // Consilium medicum.-2005. — Т. 7. № 6. - С. 432-437.

56. Корниенко Е.А. Современные принципы выбора пробиотиков //

57. Детские инфекции. 2007. - № 3. - С. 64-69.

58. Корхонен X. Технологии для функциональных продуктов / Корхонен; пер. А.В. Бережной // Молочная промышленность. 2003. - №-С. 25-28.

59. Коршунов В.М. Дисбакгериозы кишечника и коррекции микрофлоры антибиотикоустойчивыми бифидобактериями: автореф. дисс. . ^д-ра мед. наук. М., 1983. - 42 с.

60. Коршунов В.М. Характеристика биологических препаратов ^пищевых добавок для функционального питания- и коррекции микрофлор^ кишечника / В.М. Коршунов, Б.А. Ефимов, А.П. Пикина // Журн. микробиолх. 2000.-№3.-С. 86-91.

61. Кочеткова А.А. Функциональные пищевые продукты: некоторые технологические подробности в общем вопросе / А.А. Кочеткова, В.И. Тужилкин // Пищевая промышленность. 2003. - №5. - С. 7-10.

62. Крусь Г.Н. Методы исследования молока и молочных продуктов. Учеб. пособие / Г.Н. Крусь, А.М. Шалыгина, З.В. Волокитина. М.: Колос,2000. 368с.

63. Куваева И.Б. Обмен веществ и микрофлора кишечника. М.:1. Медицина, 1976. 248 с.

64. Куваева И.Б. Антагонистическая активность микробных популяций защитной флоры и ее связи с характеристикой микробиоиеноза и факторов питания / И.Б. Куваева, Г.Д. Кузнецова // Вопросы питания. 1993. - №3.1. С. 46 50.

65. Куваева И.Б. Микробиологические и иммунологические нарушения у детей: диетическая коррекция / И.Б. Куваева, К.С. Ладодо. М., 1991. -240с.

66. Литусов Н.В. Микрофлора окружающей среды и тела человека: учеб. пособие / Н.В. Литусов, А.Г. Сергеев, Ю.В. Григорьева, В.Г. Ишутинова. Екатеринбург, 2008. - 28 с.

67. Методические указания МУК 4.2.999-00 «Определение количества бифидобакгерий в кисломолочных продуктах». Утв. 08-11-00 года; введ. -08-02-01. -16с.

68. Микельсаар М.Э. Микроэкологические аспекты изучения воздействия антибактериальных препаратов на микрофлору кишечника /

69. М.Э. Микельсаар, У.Х. Сийгур, А.О. Таам // Антибиотики и химиотерапия. — 1989. Т. 34. - № 6. - С. 420-425.

70. Молибога Е.А. Разработка технологии плавленого сыра для функционального питания: автореф. дисс. . канд. техн. наук. Улан-Удэ, 2008.

71. Неклюдов А.Д. Дрожжи как источник получения аминокислотных препаратов / А.Д. Неклюдов // Антибиотики и химиотерапия. №9. - 1988. — С.14-17.

72. Нилов Д.Ю. Современное состояние и тенденции развития рынка функциональных продуктов питания и пищевых добавок / Д.Ю. Нилов, Т.Э. Некрасов // Пищевые ингредиенты сырье и добавки. 2005. - №5. - С. 28-29.

73. Нилова Л.Ю. Характеристика условно-патогенных микроорганизмов, выделенных при диагностике дисбактериоза толстого кишечника: автореф. дисс. . канд. мед. наук. СПб, 2009.

74. Новик Г.И. Сохранение жизнеспособности и антагонистической активности бифидобактерий при субкультивировании / Г.И. Новик, Н.И. Астапович, Н.Е. Рябая // Микробиология. 1998. - Т.67. - №5. - С. 631-636.

75. Основные направления развития российского рынка продуктов для здорового питания / по данным компании Euromonitor International // Пищевая промышленность. 2005. -№4. - С. 10-11.

76. Останова Ж.М. Состояние микробиоценоза кишечника в процессе антибактериальной терапии и его коррекция // Республиканский научный журнал «Вестник» Южно-Казахстанской медицинской академии. — Шымкент. 2007. - № 3 (36). - С. 41-44

77. Охрименко О.В. Лабораторный практикум по химии и физике молока / О.В. Охрименко, К.К. Горбатова, А.В. Охрименко. СПб.: ГИОРД, 2005.-250 с.

78. Парфенов А.И. Дисбактериоз кишечника / А.И. Парфенов, Ю.К. Калоев, С.А. Сафонова и др. // Московский мед. журнал. 1998. - № 1. -С. 7- 12.

79. Петровская В.Г. Микрофлора человека в норме и патологии / В.Г. Петровская, О.П. Марко. М., 1976. - 232 с.

80. Нечаев А.П. Пищевая химия: учеб. пособие / А.П. Нечаев, С.Е. Трауенберг, А.А. Кочеткова, В.В. Колпакова, И.С. Витол, И.Б. Кобелева; под ред. А.П. Нечаева. СПб.: ГИОРД, 2004. - 640с.

81. Новик Г.И. Получение лечебно-профилактического препарата «Энтеробифидин» на основе В1ШоЬас1егшт асЫезсепЙБ МС-42 / Г.И. Новик, Н.И Астапович, Ж.Н. Богдановская, Н.Е. Рябая // Прикладная биохимия и микробиология.-2000. -Т. 36. -№1.-С. 104-110.

82. Пробиотики и пробиотические продукты в профилактики и лечении наиболее распространенных заболеваний человека // Материалы Всероссийской конференции с международным участием. -М., 1999. 214с.

83. Промышленная микробиология / под общ. ред. проф. Н.С. Егорова.- М.: Высшая школа, 1989. С. 414-438.

84. Промышленная микробиология и успехи генетической инженерии: сборник / пер. с англ. под ред. Г.К. Скрябина. М.: Мир, 1984. - 172 с.

85. Работнова И.Л. Физиология микроорганизмов и управляемое культивирование / И.Л. Работнова // Успехи микробиологии. 1990. - Т. 24.- С. 88-99.

86. Рогов И.А. Пищевая биотехнология. Основы пищевой биотехнологии. Кн. 1 / И.А. Рогов, Л.В. Антипова, Г.П. Шуваева. - М.: КолосС, 2004.-440с.

87. Рокутова A.B. Изучение особенностей дисбактериоза кишечника человека, методов его экспресс-диагностики и коррекции с помощью эубиотиков: автореф. дисс. . канд. мед. наук. -М., 2000. -25с.

88. Рябцева С.А. О классификации бифидогенных факторов / С.А. Рябцева // Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы: международная конференция. М., 2004. - С. 38-39.

89. Самойлов В.А. Продукты лечебного и профилактического назначения, БАД и лекарственные препараты на основе компонентов молока / В.А. Самойлов // Молочная промышленность. 2003. - № 13. - С. 71-72.

90. Сафонов Д.А. Биоактивное растворимое волокно из акации / Д.А. Сафонов // Технологии и продукты здорового питания: материалы международной конференции. -М., 2005. С. 196-201.

91. Семенихина В.Ф. Кисломолочные продукты нового поколения / В.Ф. Семенихина, И.В. Рожкова, М.Б Сундукова // Молочная промышленность. 1999. - №1. - С. 29-30.

92. Семёнов A.B. Характеристика антагонистической активности бактерий при межмикробных взаимодействиях: автореф. дисс. . канд. биол. наук. Оренбург, 2009.

93. Серикбаева А.Д. Биотехнологические основы конструирования продуктов функционального питания на основе верблюжьего молока: автореф. дисс. . д-ра биол. наук. Республика Казахстан, Астана, 2009.

94. Симонова Е.В. Роль нормальной микрофлоры в поддержании здоровья человека / Е.В. Симонова, O.A. Пономарева // Сибирский медицинский журнал. 2008. — № 8. - С. 20-25.

95. Рогов И.А. Синбиотики в технологии продуктов питания: монография / И.А. Рогов, Е.И. Титов, В.И. Ганина, Н.В. Нефёдова, Г.В. Семёнов, С.И. Рогов. -М.: МГУПБ, 2006. -218с.

96. Степаненко П.П. Микробиология молока и молочных продуктов: учебник для студентов вузов / П.П. Степаненко. М., 2003. - 407с.

97. Степаненко П.П. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии молока и молочных продуктов // П.П. Степаненко. М., 2005.-653с.

98. Субботина М.Е. Разработка методики генотипирования бифидобактерий на основе двухлокусного секвенирования с целью видовой идентификации штаммов: дисс. . канд. биол. наук. -М., 2009.

99. Сундукова М.Б. Разработка закваски бифидобактерий для производства кисломолочных продуктов: автореф. дисс. . канд. техн. наук. -М.,1988. С. 22

100. Тихомирова Н.А. Нанотехнология и биотехнология продуктов функционального питания на молочной основе / Н.А. Тихомирова // Молочная промышленность. 2005. - № 5. - С. 74-75.

101. Тихомирова Н.А. Технология продуктов функционального питания / Н.А. Тихомирова. М.: ООО «Франтэра», 2002. - 213с.

102. Точилина А.Г. Биохимическая и молекулярно-генетическая идентификация бактерий рода Lactobacillus: автореф. дисс. . канд. биол. наук. Нижний Новгород, 2009.

103. Туликова T.B. Дрожжевые экстракты безопасные источники витаминов, минеральных веществ и аминокислот / Т.В. Туликова, A.B. Пасхин, В.Ю. Седов // Пищевая промышленность. - № 6. - 2004. - №3. - С. 29-32.

104. Федеральный закон Российской Федерации от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ "Технический регламент на молоко и молочную продукцию".

105. Платова Л.Г. Физиологические и технологические аспекты применения пищевых волокон / Л.Г. Платова, A.A. Кочепсова, О.Г. Шубина, Т.А. Духу, М.А. Левачева // Пищевые ингредиенты, сырье и добавки. — 2004. -№1. -С 14-17.

106. Хамагаева И.С. Комбинированная закваска для кисломолочных продуктов / И.С. Хамагаева, Н.В. Митыпова // Молочная промышленность. -2006.-№9.-С. 35-36.

107. Харитонов В.Д. Лактулоза, функциональное питание и перспектива пищевого рынка России / В.Д. Харитонов, А.Г. Храмцов, И.А. Евдокимов // Пищевая промышленность. 2002. - №8. - С. 66-67.

108. Харитонов В.Д. Продукты лечебного и профилактического назначения: основные направления научного обеспечения / В.Д. Харитонов, О.Б. Федотова // Молочная промышленность. 2003. - № 12. - С. 71-72.

109. Ходаева Н.В. Новое поколение биопродуктов, или что такое синбиотики / Н.В. Ходаева // Молочная промышленность. 2002. - №12. - С. 30.

110. Химический состав пищевых продуктов: справочные таблицы / под ред. М.Ф. Нестерина и И.М. Скурихина. М.: Пищевая пром-сть, 1979. -228 с.

111. Чехава О.В. Микробиологические и иммунологические основы гнотобиологии / О.В. Чехава, Е.М. Горская, С.З. Рубан. М.: Медицина, 1982. -160 с.

112. Шатнюк JT.H. Обогащение молочных продуктов микронутриен-тами / JI.H. Шатнюк // Пищевая промышленность. 2001. - №9. - С.49-50.

113. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса / С.А. Шевелева // Вопросы питания. 1999. - № 2. - С. 32-40.

114. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Социально-экологические и клинические последствия дисбаланса микробной экологии человека и животных. — В 3 т. — Т. 2 / Б.А. Шендеров. М.: Грантъ, 1998. - 416с.

115. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Пробиотики и функциональное питание. В 3 т. — Т. 3 / Б.А. Шендеров. - М.: Грантъ, 2001. - 288с.

116. Шендеров Б.А. Современное состояние и перспективы развития концепции «Функциональное питание» / Б.А. Шендеров, // Пищевая промышленность. 2003. - №5. - С. 4-7.

117. Шендеров Б.А. Продукты функционального питания: Современное состояние и перспективы их использования ввосстановительной медицине / Б.А. Шендеров, А.И. Труханов // Вестник восстановительной медицины. 2002. — №1. — С. 38-42.

118. Шендеров Б.А. Пробиотики, пребиотики и синбиотики. Общие и избранные разделы проблемы / Б.А. Шендеров // Пищевые ингредиенты сырье и добавки. 2005. — №2. - С. 23-26.

119. Шендеров Б.А. Функциональное питание как важнейший компонент программ профилактики и реабилитации при сердечнососудистых заболеваниях атеросклеротической природы. Ч. 2 // Вестник восстановительной медицины. - №1(15). -2006. - С. 57-62.

120. Шопаева Г.А. Клинико-микробиологические варианты хронического диарейного синдрома: дисс. . канд. мед. наук. Алматы, 1995. -167 с.

121. Щербаков П.Л. Микроэкология кишечника у детей и её нарушения / П.Л. Щербаков, А.А. Нижевич, В.В. Логиновская, М.Ю. Щербакова, Л.В. Кудрявцева, С.Д. Митрохин, Н.М. Нуртдинова, Р.А. Очилова // Фарматека. 2007. - № 14. - С. 28-34.

122. Яркина Я.А. Бакконцентрат бифидобактерий и бактерий Lactobacillus casei / Я.А. Яркина // Молочная промышленность. 2005. - №2. -С. 34-35.

123. Aminoacids content of foods and biological data on protein., FAO, Romme. 1972. - P. 159-165.

124. Armuzzi A. Effect of Lactobacillus GG supplementation on antibiotic-associated gastrointestinal side effects during Helicobacter Pylori eradication therapy: a pilot study./ A. Armuzzi, F. Cremonini, V. Ojetti //Digestion. 2001. -Vol. 63(1). - P.l-7.

125. Barnett J.A. A guide to identifying and classifying yeasts. / J.A. Barnett, R.W. Payne, D. Yarrow //Cambridge: Cambridge Univ. Press, 1991 -P.16-19.

126. Basic biotechnology Ed. by John Bu'Lock and Bjera Kristiansen.-Acad. Press, London, Orlando San Diego, New York, Austin, Boston, Sydney Tokio, Toronto, 1987. - P.561

127. Chaitow L. Probiotics. Thorsons, London / L. Chaitow, N. Trenev // -1990.

128. Chen S.L., Bioopphis acta, -1959. Vol.32,- P. 470-484.

129. Cherbut C. Acacia gum is a bifidogenic dietary fibre with high digestive tolerance in healthy humans / C. Cherbut, C. Michel, V. Raison, T. Kravtchenko, M. Severine // Microbial Ecology in Health and Disease. 2003. -V. 15.-P. 43-50.

130. Chick H. Growth and acid production by lactic acid bacteria and bifidobacteria grown in skim milk containing honey / H. Chick, H.S. Shin, Z. Ustunol //J. of Food Science. -2001. Vol. 66. -№3. - P. 478 -481.

131. Chou L.S. Relationship of arginine and lactose utilization by Lactococcus lactis ssp. lactis ML3 / L.S. Chou, B.C. Weimer, R. Cutler // Int. Dairy Journal. 2001. -№11. - P. 253-258.

132. Characterization of two acacia gums and their fraction using a langmuir film balans / M. Fauconnier, Ch. Blecker, J. Croyne, H. Razafindralambo, E. Vanzeveren, M. Marlier, M. Paquot // J. Agric. and Food Chem. -2000. 48. - P. 2709-2712.

133. Collins M.D. Probiotics, prebiotics, and synbiotics: approaches for modulating the microbial ecology of the gut./ M.D. Collins, G.R. Gibson // Am.J.Cliti.Nutr. 1999. - Vol. 69(5). - P.1052-1057.

134. Cummings J.H. Prebiotics digestion and fermentation. / J.H. Cummings, G.T. Macfarlane, H.N. Englyst //AmJ.Clin.Nutr. 2001, -Vol.73(suppl.). - P. 415-420.

135. Dave R.I. Ingredient supplementation effects on viability of probiotic bacteria in yoghurt / R.I. Dave, N.P. Shah // Journal of Dairy Science. 1998. -81a.-P. 2804-2816.

136. Edlund C, Nord CE. Effect on the human normal microflora of oral antibiotics for treatment of urinary tract infection. J Antimicrob Chemoter 2000; 46 (Suppl. SI): P. 41.

137. Farrell R.J. Microbial factors in inflammatory bowel disease./ R.J. Farrell, J.T. LaMont // Gastroenterol.Clin.North.Am. 2002. - Vol.31(1). - P. 4162.

138. Fibregum. A bioactive natural soluble fibre from acacia. Colloid Natural International. - Bulletin S30/D,R&D. - October 1998. - P. 1-24.

139. Floch M.H. Probiotics and functional foods in gastrointestinal disorders. / M.H. Floch, J. Hong-Curtiss //Curr Gastroenterol Rep. 2001. -Vol.3(4). - P. 343-350.

140. Flourie B. The influence of dietary fibre on carbohydrate digestion and absorption. In «Dietary fibre A component of food» / B. Flourie // T. F. Schweizer & CA. Edwards eds, Springer. - Verlag. London. 1992. - P. 181-196.

141. Fuller R. Probiotics in man and animals/ R. Fuller // J. of Applied Bacteriology. -1989. -V. 66. P. 315-378.

142. Growth and viability of commercial bifidobacterium spp, in skim milk containing oligosaccharides and inulin / H.S. Shin, J.H. Lee, J.J. Pestka, Z. Ustunol // J. of Food Science. 2000. - Vol. 65. №5. - P. 884-887.

143. Hatakka K. Effect of long term consumption of probiotic milk on infections in children attending day care centers: double blind, randomized trial / K. Hatakka, E. Savilahti//B. M. J. - 2001. - Vol. 322. - P. 113-127.

144. Havenaar R. Selection of strains for probiotic use: in Probiotics / R. Havenaar B.T. Brink, J.H.J. Huis in't Veld; R. Fuller, ed. Chapman & Hall. London. 1992. P. 209-224.

145. Hentges D.J. / Health and Disease. Academic Press, New York, -1983.-P. 3-4.

146. Holder G.M. Food processing industry. 4,- N 55, 1997. - P.38

147. Hunter J.O. A review of the role of the gut microflora in irritable bowel syndrome and the effects of probiotics. / J.O. Hunter, J.A. Madden // Br.J.Nutr. 2002. -Vol. 88(suppl.l) - P. 67-72.

148. Improved survival of Lactobacillus paracasei FNBC 338 in spray-dried powders containing gum acacia / C. Desmond, R.P. Ross, E. O'Callaghan, G. Fitzgerald, C. Stanton // Journal of Applied Microbiology. 2002. -93. - P. 10031011.

149. In vitro prebiotic effects of acacia gums onto human intestinal microbiota depends on both botanical origin and environmental pH / C. Michel, T. Kravtchenko, A. David, S. Gueneau, F. Kozlovski, C. Cherbut // Anaerobe. -1998.-4.-P. 257-266.

150. Ishibashi N.,Ymazaki S. Probiotics and safety / N. Ishibashi, S. Ymazaki I I Am J.Clin.Nutr. 2001. - Vol. 73(suppl) - P. 465-470.

151. Klaver F.A. Growth and Survival of bifidobacteria in milk I F.A. Klaver, K. M. Kingma, A.H. Weerkanp // Netherlands milk and Dairy journal. — 1993.-47.-P. 151-164.

152. Knorr D. Technology aspects related to microorganisms in functional foods / D. Knorr // Trends in Food Science and Technology. 1998. - 9. - P. 295306.

153. Laroia S. Bifidobacteria as Possible Dietary Adjuncts in Cultured Dairy Products A Review / S. Laroia, J.H. Martin // Cultured Dairy Products Journal.-1990.-P. 18-22.

154. Lebenthal E. Probiotics An important therapeutic concept awaiting validation. / E. Lebenthal, Y. Lebenthal // IMAJ. - 2002 .- Vol.4. - P. 374-375.

155. Lee K. Survival of Bifidobacterium longum Immobilized in Calcium Alginate Beads in Simulated Gastric Juices and Bile Salt Solution / K. Lee, T. Heo // Applied and Environmental Microbiology. 2000. - P. 869 - 873.

156. Lian W.C. Survival of bifidobacteria after spray-draying / W.C. Lian, H.C. Hsiao C.C. Chou // Int. J. of Food Microbiology. 2002. - №74. - P. 79-86.

157. Market potential for Probiotics / C. Stanton, G. Gardiner, H. Meehan, K. Collins, G. Fitzgeralg, P.B. Lynch, R.P. Ross // The American Journal of Clinical Nutrition. 2001. - 73. - P. 476-483.

158. McFarland LV. Risk factor for antibiotic-associated diarrhea. Ann Med Mem (Paris) 1998; 149 (5): 261-6.

159. Mecy I.M., Probst J. The biology of gastrointestinal bacteroides. // Ann. Rev. Microbiol., 1979. - Vol. 33. -P. 561-594

160. Mitsuoka T., //Asian. Med. J. 1988. - №31. - P.400-409.

161. Mizota T. Functional and nutritional food containing bifidogenie factors / T. Mizota // Bull. Int. Dairy Fed. 1996. - 313. - P. 31-35.

162. Moreira M. Technologycal properties of milks fermented with thermophilic lactic acid bacteria at suboptimal temperature / M. Moreira, A. Abraham, G. De Antoni // Journal of Dairy Science. 2000. - 83. - P. 395-400.

163. Phaff H.J., Miller M.W., Mrak E.M. The life of yeasts. 2-rd edition. Cambridge: Harvard Univ. Press, 1978. P. 55-64.

164. Phillips G.O. Acacia gum (gum Arabic): a nutritional fibre; metabolism and calorific value / G.O. Phillips // Food Additives and Contaminants: in press. 1998. -15. -3. - P. 251-264.

165. Pochapin M. The effect ofprobiotics on Clostridium difficile diarrhea // Am. J. Gastroenterol. 2000. - V. 95. - S. 1. -P. 11—13.

166. Probiotics in prevention of antibiotic associated diarrhoea: metaanalysis / A. L. D'Souza, C Rajkumar, J. Cooke, C J. Bulbitt // Brit. Med. J. -2002. V. 8. - S. 324 (7350). - P. 1361.

167. Probiotics: A critical review Chapter Abstracts / Tannock G.W.(ed). Norfolk, England: Horizon Scientific Press. - 1998. - P. 1-3.

168. Roberfroid M.B. The bifidogenic nature of chicory inulin and its hydrolysis products / M.B. Roberfroid, J.A.E. Van Loo, G.R. Gibson // J. Nutr. -1998.- 128.-P. 11-19.

169. Roberfroid M.B. Prebiotics: preferential substrates for specific germs? /M.B. Roberfroid// Am.J.Clin.Nutr.- 2001. -Vol. 73(suppl). P. 406-409.

170. Salminen S. Gut flora in normal and disordered states. / Salminen S, Isolauri E, Onnela T. // Chemotherapy. 1995. - Vol. 41 (suppl.l). - P. 5-15.

171. Sanders M.E. Probiotics / M.E. Sanders // Food Technology. -1999. -Vol. 53.-P. 67-77.

172. Selection and Characterisation of Lactobacillus and Bifidobacterium Strains for Use as Probiotics / J. Prasad, H. Gil, J. Smart, P.K. Gopal // Int. Dairy Journal 1998. - 8. - P. 993-1002.

173. Shah N.P. SYMPOSIUM: PROBIOTIC BACTERIA. Probiotic Bacteria: Selective Enumeration and Survival in Dairy Foods / Shah, N.P. // J. of Dairy Sci. 2000. 83. - P. 894-907.

174. Sukhotnik I. Oral arginine reduces gut mucosal injury caused by lipopolisaccharide endotoxemia in rat /1. Sukhotnik, J. Mogilner, M.M. Krausz, M. Lurie, M. Hirsh M., A.G. Coran, E. Shiloni // J. Surg Res. 2004. - Vol. 122. -2. -P. 256-262.

175. Sullivan A, Edlund C, Nord CE. Effect of antimicrobial agents on the ecological balance of human microflora. Lancet Infect Dis 2001; 1 (2): 101-14.

176. Tannock G.W. Probiotics. A Critical Review. Horizon Sci.Press,Norfolk, England .- 1999 P. 15.

177. The expanding realm of yeast-like fungi. Eds. G.S. de Hoog, M.Th.Smith, A.C.M.Weijman. Amsterdam: Elsevier Science Publ., 1987. - P. 510.

178. Yarns E.E. et al Ind. Engng. Chem, 1989,- P.42-56

179. Wyatt G.M. A change in human fecal flora in response to inclusion of gum arabic in the diet / G.M. Wyatt, C.E. Bayliss, J.D. Holcroft // Br. J. Nutr. -1986.-55.-P. 261-266.