автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.04, диссертация на тему:Исследование и разработка технологии низколактозных молочных напитков

На правах рукописи

004Ы ы^

Киреева Ксения Евгеньевна

ИССЛЕДОВАНИЕ И РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ НИЗКОЛАКТОЗНЫХ МОЛОЧНЫХ НАПИТКОВ

Специальность 05.18.04 - технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

2 8 ОКТ 20Ю

Кемерово 2010

004611573

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшег профессионального образования «Кемеровский технологический институт пище вой промышленности» (ГОУ ВПО Кем ТИ1И1).

Научный руководитель: заслуженный деятель науки и техники РФ,

доктор технических наук, профессор Л.А. Остроумов

Официальные оппоненты: доктор технических наук, профессор

М.С. Уманский кандидат технических наук В.М. Сиваков

Ведущая организация: ООО «Экспериментальный сыродельный

завод», г. Барнаул

Защита диссертации состоится «12» ноября 2010 г. в 11-30 часов на заседании диссертационного совета Д 212.089.01 в ГОУ ВПО «Кемеровский технологический институт пищевой промышленности» по адресу: 650056, г. Кемерово, бульвар Строителей, 47, ауд. 4, тел./факс (3842) 39-68-81.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Кемеровский технологический институт пищевой промышленности».

Автореферат разослан «11» октября 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Н.Н. Потипаева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Цель государственной политики в области здорового питания заключается в сохранении и укреплении здоровья, а также в профилактике заболеваний, которые обусловлены отклонениями в питании. Важнейшее место в реализации этой программы отводится молочной промышленности. Одной из важных задач, актуальных для молочной промышленности России, является обеспечение населения продуктами функционального назначения. К таким продуктам относятся низколактозные молочные продукты, которые могут обеспечить полноценное питание людям с лакгазной недостаточностью. По оценки экспертов напереносимость молочного сахара наблюдается у некоторых детей и людей старшего поколения.

Лактоза это единственный низкомолекулярный углевод животного происхождения и один из основных компонентов молока. Она присутствует в молоке млекопитающих в свободном виде или в форме содержащих лактозу олигосаха-ридов, при этом ее концентрация может колебаться существенно. У детей непереносимость лактозы (интолерантность) - наследственная болезнь, проявляющаяся в первые недели жизни ребенка, также связана с нарушением синтеза р-галактозидазы.

Гидролиз лактозы позволяет улучшить технологические и потребительские свойства молочного сахара, обеспечивает возможность получения гидро-лизатов и создание на их основе продуктов питания нового поколения для решения проблем людей, страдающих интолерантностью к молочному сахару.

Все вышеизложенное указывает на актуальность изучения закономерностей гидролиза лактозы, как одного из перспективных биотехнологических способов переработки молочного сырья и разработки технологии низколактоз-ных напитков.

При выполнении работы автор основывался на трудах отечественных ученных: Г.Б. Гаврилова, Л.В. Голубевой, К.К. Полянского, И.С. Хамагаевой, А.Г. Храмцова и др.

Цель и задачи исследований. Целью диссертационной работы является исследование и разработка технологии низколактозных молочных напитков с использованием биопрепаратов, в т.ч. модифицированных по лактозной активности.

Для достижения поставленной цели предусмотрено решение следующих

задач:

- изучение состава и свойств лактазосодержащих препаратов;

- анализ влияния технологических факторов на закономерности гидролиза лактозы;

- изучение изменения физико-химических показателей молока, а также активности (3-галактозидазы при гидролизе лактозы;

- изучение взаимосвязи продуктов гидролиза с активностью микроорганизмов в молоке с гидролизованной лактозой;

- разработка технологии низколактозных напитков, исследование их состава и свойств;

- практическая реализация результатов исследований, связанная с апробацией и внедрением результатов в промышленности.

Научная новизна работы заключается в следующем:

- изучены состав и свойства препаратов р-галактозидаз микробной природы; показано, что минимальной активностью в отношении гидролиза лактозы на уровне (3,8+0,22) Е/мл характеризовался образец из дрожжей К. ЬасШ, у трансгенного образца Ьасгососсш Ьсйв БирЬ. 1асЙБ с геном дрожжей К. 1асйв аналогичный показатель составил 8,5 Е/мл, а у дрожжевого экстракта из К. 1ас-йб был на уровне (14,2+0,74) Е/мл;

- установлены закономерности гидролиза лактозы в молоке с использованием указанных биопрепаратов; определены рациональные параметры проведения гидролиза лактозы, показано, что в случае подбора рациональных условий технологического процесса максимальной степенью гидролиза лактозы характеризуются образцы, полученные с использованием экстракта из К. 1асйв;

- изучено накопление мононосахаров (глюкозы, галактозы), органических кислот (молочной, муравьиной, щавелевой, винной, яблочной, янтарной, уксусной) при ферментации молока, определено количественное содержание этих веществ в ферментированном молоке; в режиме реального времени проведено детектирование генетически модифицированных ингредиентов в низколактозных напитках.

Практическая ценность работы. На основании результатов исследования разработана технология низколактозных кисломолочных напитков с использованием пробиотической микрофлоры. На новые продукты разработана техническая документация (ТУ 9222-004-02068315-10).

Апробация работы. Основные положения и результаты работы были предметом докладов и обсуждений на международных и межрегиональных научно-технических конференциях, семинарах, конгрессах: «Продукты пита-

ния и рациональное использование сырьевых ресурсов» (Кемерово, 2008); VII международная научно-практическая конференция (Кемерово, 2008); Международный научно-технический форум (Омск, 2009); «Продукты питания и рациональное использование сырьевых ресурсов» (Кемерово, 2009); Всероссийская научно-практическая конференция (Москва, 2009); «Пищевая промышленность: состояние, проблемы, перспективы» (Оренбург, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано девять печатных работ, в том числе - две в отраслевом журнале, рекомендованном ВАК «Молочная промышленность».

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из следующих основных разделов: введение, обзор литературы, объекты и методы исследования, результаты исследования и их обсуждение, выводы, список использованных источников и приложения. Основное содержание работы изложено на 105 страницах машинописного текста, содержит 28 таблиц и 27 рисунков. Список литературы включает 185 наименования.

МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Теоретические и экспериментальные исследования выполнены в соответствии с поставленными задачами в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кемеровский технологический институт пищевой промышленности» (ГОУ ВПО КемТИПП). Общая схема исследований представлена на рис.1.

На первом этапе проводили изучение состава и свойств препаратов, обладающих р-галактозидазной активностью. Для этого оценивали их характеристики (массовую долю белковых веществ по соответствующим спектрам, моле-кулярно-массовое распределение белковых фракций на электрофорезе в поли-акриламидном геле, рассчитывали теоретические значения показателя гидролиза лактозы, анализировали органолептические характеристики). В случае использования микробных препаратов определяли интенсивность роста микробных клеток на субстрате через 5 и 10 ч культивирования в стерилизованном молоке с массовой долей лактозы 4,5%.

Второй этап диссертационного исследования связан с оценкой влияния технологических факторов на закономерности гидролиза лактозы. Варьируя температуру, активную кислотность, активность препарата и продолжительность ферментации исследовали закономерности гидролиза лактозы. Результа-

Рис. 1. Общая схема проведения исследований

ты экспериментов использовали для получения в соответствующих координатах констант ферментативной реакции.

Тритий этап работы связан с оценкой изменения физико-химических показателей молока при гидролизе лактозы. Изучали состав углеводов, образующихся при гидролизе, в т.ч. оценивали изменение массовой доли продуктов трансгликозилирования, анализировали накопление органических кислот (молочной, муравьиной, щавелевой, винной, янтарной, яблочной, уксусной), аминокислотный состав и активность ферментных систем микроорганизмов в молоке с гидролизованной лактозой.

С учетом установленных результатов критериальной оценки органолеп-тических показателей, а также варьирования значимых факторов проводили оптимизацию технологического процесса изготовления напитков. Данный этап в основном был связан с обоснованием основных технологических параметров их получения. Оптимизируя влияние технологических факторов, исследовали аспекты их участия в выходе целевых продуктов. На этом же этапе в режиме реального времени (Real-Time PCR) детектировали содержание трансгенных компонентов в напитках.

Заключительный этап связан с освоением и внедрением разработанных технологий на предприятиях отрасли, а также с оценкой эффективности разработанных технологий.

При выполнении диссертационной работы использовали стандартные, общепринятые и оригинальные методы исследований, биохимические, микробиологические, органолептические и другие.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение состава и свойств препаратов, обладающих ß-галактозидазной активностью

При фракционировании белковых веществ в биопрепаратах методом диск-электрофореза получены соответствующие образцы. Путем постановки специальных опытов из них в дальнейшем выделены ß-галактозидазы, состав которых, согласно обработки результатов, представлен в табл. 1.

Таблица 1

Молекулярно-массовое распределение фракций белков в препаратах

Образец Молекулярно-массовое распределение, %

120-130 110-120 100-110 90-100

Дрожжи К. Ьсйб 57,0 18,1 10,2 14,7

Экстракт из К. 1асйв 81,7 6,3 5Д 6,9

ЬасЮсоссш ксйэ эрЬ. ксйэ с геном дрожжей К. ксйв 64,8 17,3 10,8 7Д

Как следует из результатов, представленных в табл. 1, во всех исследуемых биопрепаратах фракция с размером 120-130 кДа является преобладающей. Тем не менее, количество примесей, содержащихся в образцах, варьирует в достаточно широких пределах (от 18,3 до 43,0%). Можно предположить, что наличие фракций является предпосылкой протекания побочных реакций при ферментации, не связанных со специфичным процессом гидролиза лактозы.

В результате ферментативной обработки происходят необратимые изменения не только с субстратом, но и с основным действующим агентом системы, а именно - ферментным препаратом, его активность значительно изменяется со временем, о чем свидетельствуют данные экспериментов, приведенные на рис. 2.

Р | I 4

75

50

25

т—Ч м N

\ н

1

0 4 8 12 16

Продолжительность гидролиза, ч

20

Рис. 2. Изменение активности в процессе ферментации: 1 дрожжи К. 1асйз; 2 - экстракт из К. ЬСИБ; 3 - ЬасШсоссиз 1асиз БрЬ. 1асйв с геном дрожжей К. 1асЙБ

Анализ данных представленных на рис. 2, свидетельствует о том, что Р-галактозидаза из дрожжей К. ксйэ после 16 ч ферментации теряет до 50% своей активности, ферментный препарат, выделенный из ЬасЮсоссив ксйв врЬ. 1асЙ5 с геном дрожжей К. 1асЙБ после аналогичной продолжительности ферментации име-

ет остаточную активность на уровне 75%, а экстракт из К. 1асЙ5 является наиболее устойчивым в течение всего периода ферментации.

Анализ влияния технологических факторов на закономерности

Учитывая, что как ферментные препараты, так и микроорганизмы весьма чувствительны к температуре, изучали ее влияние на ход процесса гидролиза лактозы (рис. 3).

Исследовали особенности изменения показателя степени гидролиза в зависимости от рН (рис. 4).

гидролиза лактозы

100

2 Рис. 3. Влияние температуры на степень

гидролиза лактозы: 1 - дрожжи К. кс^э; ^' 2 - экстракт из К. ¡асНэ; 3 - Ьайососсш

1асЙ8 эрЬ. 1аспз с геном дрожжей К. 1ас-

20 25 30 35 40 45

Температура, °С

Рис. 4. Влияние активной кислотности на степень гидролиза лактозы: 1 -дрожжи К. 1асиз; 2 - экстракт из К. 1ас-йэ; 3 - ЬасЮсоссиБ 1асйв эрЬ. ксШ с геном дрожжей К. 1аси&

4 4,5 5 5,5 6 6,5 Активная кислотность, рН

Анализ полученных результатов, представленных на рис. 4 показал, что приведенные кривые подчиняются тем же общим законам, что и данные, приведенные на рис. 3, а именно: существуют рациональные значения рН и температуры, при которой с максимальной степенью проходит процесс гидролиза лактозы.

Исследование изменения физико-химических показателей молока при гидролизе лактозы

В процессе ферментации происходят существенные изменения с составными частями молока. В связи с тем, что наибольшим изменениям подвергся молочный сахар, нами детально проанализирован состав углеводов, получаемых при гидролизе лактозы, проведена оценка их качественного и количественного состава. Опуская из текста диссертации хроматограммы, следует отметить, что в процессе ферментации отмечается накопление продуктов трансгли-козилирования (рис. 5).

0 2 4 6 8 Продолжительность процесса, ч

£ 75

I

X <]) 50

г

3

е

г <и 25

Н

0

тК-~ i 1

1 1

2 4 6 8 10 Продолжительность процесса, ч

, 1

Г"——1 ,_ э—- ----'

О 2 4 б 8 10 Продолжительность процесса, ч

Рис. 5. Темп изменения углеводов при гидролизе лактозы (а -дрожжи К. lactis; б - экстракт из

о з

К. lactis; в - Lac. lactis spb. lactis с 4 геном дрожжей К. lactis): 1 -лактоза; 2 - глюкоза; 3 -галактоза; 4 - продукты

Установлено, что темп изменения углеводов в молоке подчиняется общим законам независимо от использованного препарата, трансформирующего лактозу. Так, наибольшее падение массовой доли лактозы в молоке после двух часов ферментации отмечено в случае использования ЬасШсоссиБ 1асиз БрЬ. 1ас-йБ с геном дрожжей К. Ысйв - на 39%, затем на 25% в случае гидролиза дрожжами К. ксйэ и на 12% в образце, ферментированном экстрактом из К. 1асЙБ. В дальнейшем темп падения массовой доли лактозы замедлялся, и начиная с 8-ми часового интервала, переходил в зону, соответствующую показателю ошибки опыта (Я^0,15), стадия процесса являлась заключительной.

Наряду с накоплением продуктов гидролиза отмечено увеличение кислотности молока (табл. 2).

Таблица 2

Изменение массовой доли молочной кислоты в молоке при ферментации

Препарат Массовая доля органических кислот в пересчете на молочную кислоту, мг/100 г, после продолжительности ферментации, ч

4 8 12

Дрожжи К. ксЙБ 3±0,06 49±2,42 75±3,74

Экстракт из К. 1асйБ 5±0,15 8±0,04 14±0,67

ЬасЮсоссиз ксйэ БрЬ. 1асПз с геном дрожжей К. ¡ас^Б 8±0,43 69±3,43 108±7,44

На рис. 6 показаны хроматограммы присутствия органических кислот в молоке с гидролизованной лактозой после 10 ч ферментации.

Анализ результатов, представленных на рис. 6, свидетельствует о том, что из всех биопрепаратов наиболее активным продуцентом молочной кислоты является ЬасШсоссш 1асиБ БрЬ. Ьсйб с геном дрожжей К. 1асЙБ, пики других органических кислот не являются значительными, за исключением яблочной кислоты, которая является промежуточным продуктом при биотрансформации углеводов в молочную кислоту.

Дрожжевой препарат К. 1асйБ позволял получить более широкий спектр органических кислот, еще в большей степени отмечено расширение спектра органических кислот при ферментации экстрактом из К. 1асЙ5 (табл. 3).

Таблица 3

Количественный состав идентифицированных органических кислот в молоке с гидролизованной лактозой (Х+ш; ш<0,05)

Показатель Массовая доля, мг/100 г, после продолжительности ферментации, ч

дрожжи К. 1асйв экстракт из К. ксйэ Ьайососсш 1асйэ БрЬ. 1асйз с геном дрожжей К. 1асйз

4 8 12 4 8 12 4 8 12

Молочная кислота 2,12 35,7 67,2 3,55 4,93 10,36 6,20 50,31 79,30

Муравьиная кислота - 3,68 6,71 1,56 1,78 2,06 0,05 0,09 2,37

Щавелевая кислота 0,01 0,08 1,27 0,02 0,06 0,07 - - -

Винная кислота - - 0,03 - - 0,02 - - -

Янтарная кислота - 0,05 0,09 - - - - - -

Яблочная кислота 0,34 0,40 0,46 - 0,02 0,06 1,05 8,96 20,11

Уксусная кислота 0,03 0,07 1,02 0,01 0,04 0,05 - - -

Скачкообразное увеличение массовой доли органических кислот после восьми часов технологического процесса связаны с экспоненциальным размножением микроорганизмов, причем массовая доля молочной кислоты, как наиболее весомой, в относительном содержании всего профиля органических кислот, в 2,9; 1,4 и 1,2 раза превосходила аналогичный показатель для молока, ферментированного дрожжевыми клетками после 4, 8 и 12 ч биотехнологической обработки. Подобные изменения содержания органических кислот существенно влияли на формирование органолептических показателей молока с гидролизованной лактозой.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РЕАЛИЗАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

На основании результатов исследований разработана технологическая схема новых видов низколактозных молочных напитков (рис. 7).

Рецептуры на напитки в зависимости от видовых особенностей (массовой доли жира и используемых наполнителей) приведены в табл. 4 (приведены примеры с различной массовой долей жира).

Рис. 7. Технологическая схема по производству низколактозных молочных напитков

14.0 тАи

.10.0 тАи

I!

2,2 а 4 ,, 5Й5а 1 6 8

9 —1-у,,~./у'у......^

Л 9 тАТТ

В)

Рис. 6. Хроматографический профиль органических кислот в молоке с гидроли-зованной лактозой (а - дрожжи К. кс^э; б - экстракт из К. 1асйз; в - ЬасЬсоссиэ Ьсйэ БрЬ. ксйэ с геном дрожжей К. Ьсйэ) по вариантам: 1 - молочная кислота; 2 -муравьиная кислота; 2 а, 3, 9 - неидентифицированные пики; 4 - щавелевая кислота

Органолептические и физико-химические показатели низколактозных молочных напитков представлены в табл. 5 и 6.

Таблица 4

Рецептура (кг) на низколактозные напитки

Сырье «Шоко- «Ва- «Фруктовый» «Ароматизиро-

ладный» ниль- ванный»

ный»

Молоко обезжиренное с мас- 82,62 88,15 76,18 80,31 80,91 77,58

совой долей жира 0,05%

Сливки с массовой долей жира

15% 0,00 3,28 6,59 3,29 6,60 9,93

Препарат 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01

(3-галактозидазы

Стабилизатор 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50

Какао-порошок 3,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

Шоколадная глазурь 6,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,0 0

Сахароза 8,00 8,00 5,00 5,00 12,00 12,00

Ванилин 0,00 0,10 0,00 0,00 0,00 0,00

Р-каротин 0,00 0,10 0,00 0,00 0,00 0,00

Наполнитель 0,00 0,00 11,01 11,01 0,00 0,00

Ароматизатор 0,00 0,00 0,00 0,00 0,10 0,10

Итого сырья 100,13 100,13 100,14 100,14 100,12 100,12

Выход 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00

Таблица 5

Органолептические показатели низколактозных напитков_

Наименование показателя Характеристика

Консистенция Однородная, текучая, в меру вязкая, без крупинок и комочков белковых сгустков, возможно наличие плотных частиц растительного сырья

Вкус и запах Чистый, кисломолочный, с выраженным, но не приторным привкусом введенного наполнителя

Цвет Белый, с кремовым оттенком или обусловленный цветом введенного наполнителя

Таблица 6

Физико-химические показатели низколактозных напитков

Наименование мусса Наименование показателей и норма

кислотность, массовая доля, %, не менее

рН (для лактозы - не более)

жира лактозы сахарозы

«Шоколадный» 5,8+0,1 (0,5-4,0)+0,05 0,5+0,01 8,0+0,04

«Ванильный» 5,8+0,1 (0,5-4,0)+0,05 0,5+0,01 8,0+0,04

«Фруктовый» 4,5+0,1 (0,5-4,0)+0,05 0,5+0,01 5,0+0,04

«Ароматизированный» 4,4+0,1 (0,5-4,0)+0,05 0,5+0,01 12,0+0,04

ПРИМЕЧАНИЯ. Фосфатаза в продукте отсутствует, температура при выпуске с

предприятия составляет 4+2°С.

Разработаны, прошли промышленную апробацию и внедрены в производство технологии низколактозных напитков (ТУ 9222-004-02068315-10).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Исследовано влияние технологических факторов и процессов на закономерности гидролиза лактозы в молоке, разработана технология и регламент выработки низколактозных напитков, проведена оценка их качества и безопасности.

2. Изучены состав и свойства препаратов Р-галактозидаз микробной природы. Показано, что минимальной активностью в отношении гидролиза лактозы на уровне 3,8+0,22 Е/мл характеризовался образец из дрожжей К. ксйв, у трансгенного образца ЬайососсиБ ксйэ БрЬ. ксйэ с геном дрожжей К. ксйэ аналогичный показатель составил 8,5 Е/мл, а у дрожжевого экстракта из К. 1асйэ был на уровне 14,2+0,74 Е/мл.

3. Установлены закономерности гидролиза лактозы в молоке с использованием указанных биопрепаратов. Определены рациональные параметры проведения гидролиза лактозы. Показано, что в случае подбора рациональных условий технологического процесса максимальной степенью гидролиза лактозы характеризуются образцы, полученные с использованием экстракта из К. 1асЙБ.

4. Изучено накопление мононосахаров (глюкозы, галактозы), органических кислот (молочной, муравьиной, щавелевой, винной, яблочной, янтарной, уксусной) при ферментации молока, определено количественное содержание этих веществ в ферментированном молоке. В режиме реального времени

проведено детектирование генетически модифицированных ингредиентов в низколактозных напитках.

5. Разработана технология низколактозных кисломолочных напитков с использованием пробиотической микрофлоры Lactobacterium acidophilum, Lbm. delbrueckii subsp. bulgaricum, Lactococcus lactis, Bifidum longum B379M. На новые продукты разработана техническая документация, установлена продолжительность хранения. Результаты работы внедрены на ООО «Экспериментальный сыродельный завод».

По материалам диссертации опубликованы следующие работы:

1. Остроумов, JI.A. Использование генетически модифицированных источников в технологии молочных продуктов / JI.A. Остроумов, К.Е. Ки-реева // Продукты питания и рациональное использование сырьевых ресурсов: сборник научных работ.- 2008.- Выпуск 17.- С. 17-19.

2. Остроумов, JI.A. Развитие генно-инженерных технологий и контроль за выпуском генно-модифицированных продуктов / JI.A. Остроумов, К.Е. Киреева // Влияние приоритетного национального проекта государственной программы «Развитие АПК» на сельское хозяйство Сибири: сборник материалов VII международной научно-практической конференции,- Кемерово, 2008.- С. 296-298.

3. Киреева, К.Е.Контроль ГМИ в молочной продукции / К.Е. Киреева, И.С. Разумникова, Л.А. Остроумов, А.Ю. Просеков // Молочная промышленность.- 2009.- №2.- С. 41-42.

4. Киреева, К.Е. Использование генетически модифицированных микроорганизмов в технологии молочных продуктов // Реализация Государственной программы развития сельского хозяйства и регулирование рынков сельскохозяйственной продукции, сырья и продовольствия: инновации, проблемы, перспективы (26-27 февраля 2009 г): труды Международного научно-технического форума,- Омск: ОмГАУ.- С. 285-287.

5. Киреева, К.Е. Технология молочных продуктов повышенной пищевой ценности без генетически-модифицированных источников / К.Е. Киреева, A.B. Крупин // Продукты питания и рациональное использование сырьевых ресурсов: сборник научных работ,- Кемерово, 2009.- Выпуск 18 - С. 52-56.

6. Киреева, К.Е. Микроорганизмы с новыми свойствами для решения задач биотехнологии / К.Е. Киреева, A.B. Крупин // Продукты питания и рацио-

нальное использование сырьевых ресурсов: сборник научных работ.-Кемерово, 2009.- Выпуск 18 - С. 56-57

7. Крупин, A.B. Использование генетически модифицированных ингредиентов в технологии продуктов питания / A.B. Крупин, С.А. Равнюшкин, К.Е. Ки-реева // Молочная промышленность.- 2009.- №11,- С 74-76.

8. Крупин, A.B. Изучение основных параметров гидролиза лактозы в молочной сыворотке в связи с разработкой технологий функциональных продуктов / A.B. Крупин, К.Е. Киреева // Управление инновационным развитием современных социально-экономических систем: сборник статей Всероссийской научно-практической конференции.- Москва-Волгоград.- С. 219-223.

9. Остроумов, Л.А. Изменение физико-химических показателей при ферментации молочной сыворотки / Л.А. Остроумов, A.B. Крупин, К.Е. Киреева // Пищевая промышленность: состояние, проблемы, перспективы: материалы Международной научно-практической конференции.- Оренбург, 2009.- С. 220-223.

Подписано в печать 13.09.2010. Формат 60x86/16. Тираж 80 экз. Объем 1,1 п.л. Заказ №111. Кемеровский технологический институт пищевой промышленности. 650056, г. Кемерово, б-р Строителей, 47. Отпечатано в лаборатории множительной техники КемтТИППа. 650010, г. Кемерово, ул. Красноармейская, 52

Введение.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Теоретические принципы создания и использование генетически модифицированных источников в технологии молочных продуктов питания.

1.2. Современные аспекты применения и регулирования оборота пищевых продуктов из генетически модифицированных источников.

1.3. Характеристика методов диагностики генетически модифицированных источников.

1.3.1. Методы ДНК-гибридизации.

1.3.2. Применение ПНР для выявления, идентификации и определения количества бактериальных патогенов.2В

1.4. Биотехнологические свойства Р-галактозидазы ((З-О-галактозид-галактогидролаза, 3.2.1.23).

В последние годы все большее влияние на здоровье населения планеты оказывает качество и структура питания. В 1999 г. опубликованы данные о том, что ежегодно в мире от недоедания и белково-калорийной недостаточности погибает более 15 млн. человек.

Результаты широких эпидемиологических исследований и организованного в последние годы мониторинга состояния питания показывают, что структура питания населения характеризуется продолжающимся снижением потребления наиболее ценных в биологическом отношении пищевых продуктов. Как следствие сложившейся структуры питания, на первый план выходят следующие нарушения пищевого статуса: дефицит животных белков, достигающий 15-20% от рекомендуемых величин; выраженный дефицит витаминов, выявляющийся повсеместно у более половины населения; проблема недостаточности макро- и микроэлементов, таких как кальций, железо, фтор,' селен, цинк.

В международном научном сообществе существует четкое понимание того, что в связи с ростом народонаселения Земли, которое по прогнозам ученых должно достичь к 2050 году 9-11 млрд. человек, необходимо удвоение или даже утроение мирового производства сельскохозяйственной продукции, что невозможно без применения трансгенных растений, создание ко-' торых многократно ускоряет процесс селекции культурных растений, увели-, чивает урожайность, удешевляет продукты питания, а также позволяет полу-' I чить растения с такими свойствами; которые ;не 'могут быть получены тради-; ционными методами. |

Проблемы здоровья и безопасности пищи тесно связаны с индустри-| альным ведением сельского хозяйства (объединение мелких ферм в крупные! хозяйства, усиление использования антибиотиков в кормах, механизация). Они стали проявляться, начиная с 1960-х годов, когда« сельское хозяйство.-и . производство пищевых продуктов стало все более зависимо от применения пистицидов, гербицидов, инсектицидов-»химических удобрений.

Основные объекты генной инженерии в растительном мире: соя, кукуруза, картофель, хлопчатник, сахарная свекла. При этом вырабатывается повышенная резистентность к колорадскому жуку, к вирусам, защита от насекомых, обеспечивает отсутствие повышенных остаточных количеств пестицидов. Возможно улучшение коммерческих показателей: у томатов - увеличение сроков хранения, у картофеля - повышение крахмалистости, обогащение аминокислотами, витаминами. Путем генной инженерии возможно повышение урожайности на 40-50%. С 1996 по 2006 гг. земельные площади, используемые под трансгенные растения, возросли в 60 раз, превысив 100 млн. га.

Нужно отметить, что ни одна новая технология не была объектом такого пристального внимания ученых всего мира. Все это обусловлено тем, что мнения ученых о безопасности генетически модифицированных источников питания расходятся. Нет ни одного научного факта, либо требуется их конкретизация, против использования трансгенных продуктов. В то же время, некоторые специалисты считают, что. существует риск выпуска нестабильного вида растений, передача заданных свойств сорнякам, влияние на биоразнообразие планеты, и главное - потенциальная опасность для биологических объектов, для здоровья человека путем переноса встроенного гена в микрофлору кишечника или под воздействием нормальных ферментов, образование из модифицированных белков так называемых минорных компонентов, способных оказывать негативное влияние.

Однако, хотя некоторые продолжают настаивать на том, что на сегодняшний день мы не располагаем достаточным объемом опыта и научных знаний, ведущаяся полемика во многом .обусловлена не недостатком достоверной информации, а двусмысленными интерпретациями того, что признается приемлемыми с экологической точки зрения последствиями культиви рования ГМ растений. I

Учитывая то, что генная инженерия может привнести в продукты ранее 1 неизвестные опасные свойства, каждый ГМ-продукт должен быть подвергнут | обследованию, способному выявлять самый широкий спектр возможных опасностей. Но в настоящее время использование концепции эквивалентности позволяет обойти необходимость такого тестирования. Только клинические испытания способны выявить все возможные опасности и непредвиденные побочные эффекты, которые могут таиться в продуктах генно-инженерного процесса.

Проблемами биотехнологий занимаются несколько научно-исследовательских институтов. Проблемами развития генной инженерии и медико-биологической оценкой безопасности генно-инженерно-модифици-рованных организмов занимаются отечественные ученые В.А. Тутельян, И.А. Рогов, К.Г. Скрябин, Н.В. Тышко, О.Н. Чернышева, И.В. Ермакова и другие российские и зарубежные ученые.

ГМО организмы, также способны; улучшать (или видоизменять) состав . и свойства сырья и- готовой продукции!* Многие свойства молока зависят от присутствия в нем лактозы. С одной стороны, она является ценным субстратом для развития микроорганизмов при; производстве кисломолочных продуктов, с другой - при непереносимости лактозы способна ухудшать состояние здоровья человека. В этом случае ее. концентрацию снижают, используя различные факторы и технологические приемы.

За гидролиз лактозы в организме человека отвечает фермент ß-галактозидаза. При отсутствии или низкой активности фермента у человека возникают острые гастроэнтерологические расстройства, в результате которых человек вынужден сократить употребление или1 исключить из своего рациона молоко и молочные продукты, что не является приемлемой альтернативой. По оценкам специалистов А.Г. Храмцова, П.Г. Нестеренко, И.А. Евдокимова, A.A. Храмцова, С.А. Рябцевой, Ю.Я. Свириденко, Г.Б. Гаврилова доказано, что непереносимость лактозы чаще всего наблюдается у детей и пожилых людей. В настоящее время в результате ухудшения экологической обстановки, многочисленных стрессовых ситуаций человеческий организм становится менее защищенным, вследствие чего непереносимость лактозы I

• ! л, . 1,1мpcb IOIIÜC ii.iii иск.¡. • ■ ; стала встречаться не только у детей и пожилых людей, но и у представителей других возрастных групп.

Гидролиз лактозы позволяет улучшить технологические и потребительские свойства лактозы молочной сыворотки, обеспечивает возможность получения гидролизатов и создание на их основе низколактозных продуктов, которые являются эффективным решением проблемы людей, страдающих интолерантностью к лактозе.

Существуют обоснованные рекомендации, согласно которым для каждого молочного объекта разработаны специальные препараты ß-галактозидазы, наиболее эффективно гидролизующие лактозу. В качестве одного из основных критериев рекомендуют учитывать вид микроорганизмов, продуцирующих ферментный препарат. Так, в молоке хорошими свойствами обладают препараты из дрожжей Saccharomyces fragilis, Streptococcus-lactis, Candida pseudotropicalis, Torulopsis versatilis, а лактазы, синтезируемые микроскопическими грибами Pénicillium terlikowskii, Р. multicolor, P. canes-cens, Mucor pusillus, Alternaria tenuis, находят применение для гидролиза лактозы в молочной сыворотке.

В настоящих исследованиях предпринята попытка установить возможность использования генетически модифицированных организмов в технологии производства низколактозных молочных'продуктов.

Материалы диссертации опубликованы в научных статьях, в том числе в статье журнала «Молочная промышленность», рекомендованных ВАК, в-научных трудах и материалах различных конференций.

ВЫВОДЫ

1. Исследовано влияние технологических факторов и процессов на закономерности гидролиза лактозы в молоке, разработана технология и регламент выработки низколактозных напитков, проведена оценка их качества и безопасности.

2. Изучены состав и свойства препаратов р-галактозидаз микробной природы. Показано, что минимальной активностью в отношении гидролиза лактозы на уровне 3,8+0,22 Е/мл характеризовался образец из дрожжей К. Ысйэ, у трансгенного образца Ьа^ососсиБ 1асйз эрЬ. 1асйэ с геном дрожжей К. 1асйз аналогичный показатель составил 8,5 Е/мл, а у дрожжевого экстракта из К. ксйэ был на уровне 14,2+0,74 Е/мл.

3. Установлены закономерности гидролиза лактозы в молоке с использованием указанных биопрепаратов. Определены рациональные параметры проведения гидролиза лактозы. Показано, что в случае подбора рациональных условий технологического процесса максимальной степенью гидролиза лактозы характеризуются образцы, полученные с использованием экстракта из К. 1асйэ (на уровне 6065%); у образца ЬасШсоссиБ 1асЙБ эрЬ. ксЙБ с геном дрожжей К. 1асйв аналогичный показатель колебался на уровне 82-83% от максимально возможного.

4. Изучено накопление мононосахаров (глюкозы, галактозы), органических кислот (молочной, муравьиной, щавелевой, винной, яблочной, янтарной, уксусной) при ферментации молока, определено количественное содержание этих веществ в ферментированном молоке. В режиме реального времени проведено детектирование генетически модифицированных ингредиентов в низколактозных напитках.

5. Разработана технология низко лактозных кисломолочных напитков с использованием пробиотической микрофлоры ЬасШЬа^егшт ас1(1орЫ1ит, ЬЬт. с!е1Ьгиески зиЬБр. Ьи^апсит, ЬасШсоссиБ 1асЙ5, Bifidum 1оп§ит В379М. На новые продукты разработана техническая документация, установлена продолжительность хранения. Результаты работы внедрены на ООО «Экспериментальный сыродельный завод».

1. Алексеева, Н.Ю. Современная номенклатура белков молока / Н.Ю. Алексеева // Молочная промышленность.- 1983.- №4.- С. 27-31.

2. Антипова, JI.B. Методы исследования мяса и мясных продуктов / JI.B. Ан-типова, И.А. Глотова, А.И. Жаренов.- М.: Колос, 2001.- 376 с.

3. Антипова, Л.В. Прикладная биотехнология / Л.В. Антипова, И.А. Глотова, А.И. Жаренов.- Воронеж, 2000.- 332 с.

4. Арсеньева, Т.П. Основные вещества для обогащения продуктов питания / Т. П. Арсеньева, И.А.Баранова // Пищевая промышленность.- 2007.- №1.- С. 6-8.

5. Бархатова, Т.В. Бифидогенные олигосахариды / Т.В. Бархатова, И.А. Евдокимов.- Краснодар: ООО «Фирма Тамзи», 2003.- 90 с.

6. П.Бобылин, В.В. Теоретическое обоснование и исследование закономерностей формирования мягких кислотно-сычужных сыров: автореф. дис. д-ра техн. наук: 05.18.04: защищена 13.04.99 / Бобылин В.В. Кемерово, 1999.- 47с.

7. Борлауг, Н.Е. Зеленая революция вчера, сегодня и завтра / Н.Е. Борлауг // Экология и жизнь.- 2001.- №5.- С. 4.

8. Ботина, С.Г. Видовая идентификация и паспортизация молочнокислых бактерий методами молекулярно-генетического типирования / С.Г. Ботина // Молочная промышленность.- 2008.- №3.- С.52-54.

9. Варфоломеев, С.Д. Биокатализ: структура ферментов, механизмы реакций, элементарные акты катализа // В кн. «IV съезд Российского общества биохимиков и молекулярных биологов».- Новосибирск: Арта, 2008.- С. 17.

10. Вельков, В.В. Оценка риска при интродукции генетически модифицированных микроорганизмов в окружающую среду / В.В. Бельков // Агрохимия.-2000.- №8.- С. 76-86.

11. Вельков, В.В. Оценка риска при интродукции генетически модифицированных микроорганизмов в окружающую среду / В.В. Вельков // Коммерческая биотехнология.- 2003.- №9.- С. 15.

12. Власова, З.А. Справочник по биологии / З.А. Власова.- М., 1998.- 356 с.

13. Воробьев, А.И. Биотехнология и генная инженерия приоритетнейшие направления научно-технического прогресса / А.И. Воробьев // Вестник РАМН.-2004.-№10.- С. 8-11.

14. Гаврилова, Н.Б. Биотехнологические основы производства комбинированных кисломолочных продуктов: автореф. дис. д-ра техн. наук: 05.18.04: защищена 15.01.96 / Гаврилова Наталья Борисовна.- Кемерово, 1996.-39 с.

15. Гаврилова, H.H. Создание и производство новых пробиотиков на основе бактериальных культур: дис. д-ра биол. наук: 03.00.23 / Гаврилова Наталья Николаевна.- Алматы, 1993.- 320 с.

16. Генетически модифицированные источники пищи: оценка безопасности и контроль / под ред. В.А. Тутельяна:- М.: Издательство РАМН, 2007.- 444 с.

17. Глеба, Ю.Ю. Биотехнология растений / Ю.Ю. Глеба // Соросовский образовательный журнал.-1998.- №6.- С. 3-8.

18. Глик, Б.Р. Молекулярная биотехнология: принципы и применение / Б.Р. Глик, Д.Д. Пастернак.- М.: Мир, 2002.- 280 с.

19. Голубцова, Ю.В. Исследование и разработка технологии полуфабриката с пониженным содержанием фенилаланина: автореф. дис. канд. техн. наук: 05.18.04: защищена 20.11.2008 / Голубцова Юлия Владимировна.- Кемерово, 2008.- 17 с.

20. Горбатов, A.B. Реология мясных и молочных продуктов / A.B. Горбатов.-М.: Пищевая промышленность, 1991.- 344 с.

21. Горбатова, К.К. Биохимия молока и молочных продуктов К.К. Горбатова.-М.: ГИОРД, 2003.- 320 с.31 .Горбатова, К.К. Физико-химические и биохимические основы производства молочных продуктов / К.К. Горбатова.- М.: ГИОРД, 2003.- 352 с.

22. Градова, И.Б. Лабораторный практикум по общей микробиологии / И.Б. Градова.- М.: ДеЛи принт, 2001.- 130 с.

23. Гудков, A.B. Сыроделие: Технологические, биологические и физико-химические аспекты / A.B. Гудков.- М.: ДеЛи принт, 2003.- 800 с.

24. Гусева, М.В. Классификация и кодирование генетически модифицированных продуктов растительного происхождения // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология.- 2008.- №5-6.- С. 5-7.

25. Гусева, М.В. Сравнительная характеристика потребительских свойств генетически модифицированных продуктов растительного происхождения // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология.-2008.-№5-6.- С. 23-27.

26. Гусева, М.В. Товароведная характеристика генетически модифицированной пищевой продукции растительного происхождения: автореф. дис. канд. техн. наук: 05.18.15: защищена 25.11.2008 / Гусева Марина Валерьевна.- Москва, 2008.- 24 с.

27. Гуславский, А.И. Высокоэффективные аппараты для разделения, очистки и концентрирования жидких систем и новые биотехнологические процессы на их основе: автореф. дис. д-ра техн. наук: 03.00.23 / Гуславский Александр Игнатьевич. Щелково, 2007.- 55 с.

28. Данилов, М.Б. Теоретические и практические основы производства про-биотических продуктов с использованием ß-галактозидазы и эубиотиков / М.Б. Данилов.- Улан-Удэ, 2003.- 130 с.

29. Диксон, М. Ферменты / М. Диксон, Э.Уэбб.- М.: Мир, 1966.- 816 с.

30. Диланян, З.Х. Применение микроэлементов в производстве сыров / З.Х. Диланян, Р.В. Саакян.- М.: ЦНИИТЭММП, 1976.- 28 с.

31. Доронин, А.Ф. Функциональное питание / А.Ф. Доронин, Б.А. Шендеров.-М.: Грантъ, 2002.- 296 с.

32. Донченко, Л.В. Безопасность пищевой продукции / Л.В. Донченко, В.Д. Надыкта.- М.: ДеЛи Принт.- 2007.- 540 с.

33. Дунченко, Н.И. Структурированные молочные продукты: монография / Н.И. Дунченко. Москва - Барнаул: Изд-во Алт ГТУ, 2002.- 164 с.

34. Евдокимова, O.A. Внедрение функциональных пищевых продуктов на потребительский рынок // Пищевая промышленность.- 2009.- №4.- С. 40-41.

35. Евстигнеев, В.И. Проблемы обеспечения биологической безопасности России / В.И. Евстигнеев // Сборник докладов I Российского симпозиума по биологической безопасности (www.bio.su).

36. Егоров, Н.С. Биотехнология: Проблемы и перспективы / Н.С. Егоров, A.B. Олескин.- М.: Искра.- 2000.- 350 с.

37. Егоров, Н.С. Современные методы создания промышленных штаммов микроорганизмов / Н.С. Егоров, В.Д. Самуилов // Биотехнология.- Кн. 2.- М.: Высшая школа, 1998.- 208 с.

38. Ельчанинов, В.В. Номенклатура и биохимические свойства основных сывороточных белков. Бета-лактоглобулин // Сыроделие и маслоделие.- 2009.-№2.- С. 38-39.

39. Ермаков, А.И. Методы биохимического исследования растений / А.И. Ермаков, В.В. Арасимович, Н.Б. Ярош. Под общей редакций А.И. Ермакова.- 3-еизд., перераб. и доп.- JL: Агропромиздат, 1987.- 430 с.

40. Ефимочкина, Н.Р. Молекулярно-генетические методы в идентификации пищевых патогенных бактерий // Вопросы питания. 2007.- №2.- С. 4-15.

41. Жидков, В.Е. Разработка композиций пищевых продуктов профилактической направленности, оптимизированных по компонентному составу / В.Е. Жидков, В.В. Садовой, И.А. Трубина // Известия вузов. Пищевая технология.-№1.-2009.- С. 54-57.

42. Иванов, A.B. Трансгенные микроорганизмы и растения,- М.: Искра.- 2004.- 18с.

43. Инихов, Г.С. Методы анализа молока и молочных продуктов / Г.С.Инихов, Н.П. Брио.- М.: Пищевая промышленность, 1971.-424 с.

44. Козлова, О.В. Разработка технологии низколактозного напитка: автореф. дис. канд. техн. наук: 05.18.04: защищена 18.02.08 / Козлова Оксана Васильевна.- Кемерово, 2008.- 18 с.

45. Красовский, O.A. Генетически модифицированная пища: возможности и риски // Человек.- 2002.- №5.- С. 158-164.

46. Крусь, Г.Н. К вопросу строения мицелл и механизма сычужной коагуляции казеина / Г.Н. Крусь // Молочная промышленность,- 1992.- №4.- С. 23-28.

47. Крусь, Г.Н. Методы исследования молока и молочных продуктов / Г.Н. Крусь, A.M. Шалыгина, З.В. Волокитина; под общей редакцией А.М.Шалыгиной.- М.: Колос, 2000.- 368 с.

48. Кудряшова, A.A. Новые полифункциональные нанобиокорректоры / A.A. Кудряшова//Пищевая промышленность.- 2009.- №4.- С. 52-54.

49. Кузнецов, В.В. Генетически модифицированные риски и полученные из них продукты: реальные и потенциальные риски / В.В. Кузнецов, A.M. Куликов // Российский химический журнал.- 2005.- №69.- С. 70-83;

50. Кучкина, Е.В. Выделение компонентов молочной сыворотки модифицированными флокулянтами: автореф. дис. канд. техн. наук: 05.18.04: защищена 23.03.2009 / Кучкина Елена Валерьевна.- Кемерово, 2009.- 19 с.

51. Лавров, ИЕ. Генетически модифицированные продукты / И.Е. Лавров.- М.: ACT; СПб.: Сова.- 2007.- 156 с.

52. Лещинская, И.Б. Генетическая инженерия / И.Б. Лещинская // Соросовский образовательный журнал.- 1996.- №1.- С. 32-39.

53. Лутова, Л.А. Агробактериальная трансформация как способ изменения гормонального метаболизма у высших растений / Л.А. Лутова, З.Б. Павлова, М.М Иванова //Генетика.- 1998.-№2.- С. 165-182.

54. Лутова, Л.А. Генетическая инженерия растений: свершения и надежды / Л.А. Лутова// Соросовский образовательный журнал.- 2000.- №10.- С. 10-17.

55. Маккреди, Б.Д. Обнаружение и идентификация патогенных микроорганизмов молекулярными методами / Б.Д. Маккреди, Д.А. Чимера // Молекулярная клиническая диагностика. Методы.- М.: Мир, 1999.- С. 496-506.

56. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич и Дж. Сэмбрук.- М.: Мир.- 1984.- 220 с.

57. Манылов, C.B. Исследование влияния денатурированных сывороточных белков на свойства низкокалорийных молочно-белковых продуктов: автореф. дис. канд. техн. наук: 05.18.04: защищена 23.03.2009 / Манылов Сергей Владимирович.- Кемерово, 2009.- 19 с.

58. Мачихин, Ю.А. Инженерная реология пищевых материалов / Ю.А. Мачи-хин, С.А. Мачихин. М.: Легкая промышленность, 1981. - 207 с.

59. Методы количественного определения генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения в продуктах питания.- Методические указания.- МУК 4.2.1913-04.- М., 2004.

60. Мироненко, И.М. Особенности переработки сывороточных белков молока / И.М. Мироненко, Е.В. Чорей // Сыроделие и маслоделие.- 2009,- №9.- С. 40-41.

61. Монастырский, О.А ГМ-монстры рвутся на наши поля и оккупируют прилавки / О.А. Монастырский // Экое.- 2003.- № 3.- С. 42-47.

62. Национальный стандарт Российской Федерации «Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения». ГОСТ Р 52173-2003.- М., 2004.

63. Национальный стандарт Российской Федерации «Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения с применением биологического микрочипа».- ГОСТ Р 52174-2003. М., 2004.

64. Нестеренко, Л.Н. Сравнительная характеристика методов определения в пищевых продуктах компонентов генно-инженерно-модифицированных организмов растительного происхождения / Л.Н. Нестеренко // Вопросы питания.-2006.- №6.- С. 55-60.

65. Онищенко, Г.Г. Современные подходы к оценке безопасности генетически модифицированных источников пищи. Опыт изучения соевых бобов линии 40-3-2 / Г.Г. Онищенко, В.А. Тутельян, А.И. Петухов и др. // Вопросы питания.- 1999.-№5.- С. 3-7.

66. Онищенко, Г.Г. О гигиенических и нормативных аспектах регистрации, маркировки и этикетирования пищевых продуктов, полученных из генетически модифицированных источников / Г.Г. Онищенко // Вопросы питания.-2001.-№2.- С.3-7.

67. Онищенко, Г.Г. Генетически модифицированные источники пищи: медико-биологическая оценка / Г.Г. Онищенко, В.А. Тутельян, А.И. Петухов и др. // Врач.- 2000.- №3.- С. 35-37.

68. Определение генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения методом полимеразной цепной реакции. Методические указания. МУК 4.2.1902-94. М., 2004.

69. Остроумова, Т.Л. Анализ технологических свойств белковых концентратов / Т.Л. Остроумова, А.Г. Галстян, И.Ю. Трифонов, С.А. Равнюшкин, И.Г. Ку-линчик // Сыроделие и маслоделие 2007.- №2 — С. 53-55.

70. Падегимас, Л. Тестирование трансгенных растений при помощи полимеразной цепной реакции / Л. Падегимас, O.A. Шульга, К.Г. Скрябин / Л. Паде-гимас // Молекулярная биология.- 1993.- №4.- С. 947-951.

71. Покровский, В.И. Медицинские проблемы биобезопасности / В.И. Покровский // Вестник РАМН.- 2002.- №10.- С.6-9.

72. Порядок и организация контроля за пищевой продукцией, полученной из/или с использованием сырья растительного происхождения, имеющего генетически модифицированные аналоги. Методические указания.- Мук 2.3.21917-04. М., 2004.

73. Постановление Главного государственного санитарного врача «О проведении микробиологической и молекулярно-генетической экспертизы генетически модифицированных микроорганизмов, используемых в производстве пищевых продуктов» от 19.09.2003 г. №149.

74. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации «Об усилении надзора за производством и оборотом пищевых продуктов» от 29.08.2006 г №2.

75. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации «О надзоре за пищевыми продуктами, содержащими ГМО» от 08.12.2006 г. №32.

76. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации «Об усилении надзора за пищевыми продуктами, полученными из ГМО» от 31.12.2004 г. №13.

77. Постановление главного государственного санитарного врача РФ «О порядке гигиенической оценки и регистрации пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных источников» от 06.04.99 г. от №7.

78. Постановление Правительства Российской Федерации «О государственной регистрации генно-инженерно-модифицированных организмов» от 16 февраля 2001 г. №120.

79. Постановление Правительства Российской Федерации «О государственной регистрации новых пищевых продуктов, материалов и изделий» от 21 декабря 2000 г. №988.

80. Разумникова, И.С. Современные тенденции развития производства продуктов функционального питания / И.С. Разумникова, Ю.В. Голубцова, С.Ю. Глебова // Достижения науки и техники АПК.- 2008.- №4.- С. 46-47.

81. Рамонова, Э.В. Характеристика штаммов лактобактерий / Э.В. Рамонова, Р.Г. Кабисов, Б.Г. Цугиев // Молочная промышленность.- 2009.- №2.- С. 43.

82. Решетник, Е.И. Модернизация технологического оборудования для получения сухих комбинированных продуктов / Е.И. Решетник, A.B. Ермолаева // Пищевая промышленность.- 2008.- №3.- С.32-33.

83. Решетник, Е.И. Применение соево-молочного концентрата в производстве продуктов питания.- Благовещенск: Издательство ДальГАУ, 2007.- 190 с.

84. Решетник, Е.И. Теоретическое обоснование и практическая реализация технологии производства соево-молочных концентратов: автореф. дис. док. техн. наук: 05.18.04: защищена 21.11.2008 / Решетник Екатерина Ивановна.-Кемерово, 2008.- 42 с.

85. Рогачев, В. Генетическая революция, первые шаги // Эхо планеты.- 2000.-№28.- С. 6-9.

86. Рогов, И.А. Пищевая биотехнология: в 2 кн.- Кн. 1. / И.А. Рогов, JI.B. Ан-типова, Г.П. Шуваева.- М.: Колос.- 2004.- 334 с.

87. Романов, Г.А. Генетическая инженерия растений и пути решения проблемы биобезопасности / Г.А. Романов // Физиология растений.- 2000.- №3.- С. 343-353.

88. Руководство по оценке влияния генетически модифицированных организмов на окружающую среду и здоровье / пер. с англ. О. Колесниковой, И. Смирнова (В 2-х ч.- Ч. 1. Вводная информация, сопроводительные тексты к блок-схемам) М.: МСоЭС.- 2005. - 102 с.

89. Румянцева, Г.Н. Биокаталитические технологии пищевых белков и полисахаридов: монография / Г.Н. Румянцева.- М.: МГУПБ, 2007.- 233 с.

90. Румянцева, Г.Н. Научные и практические аспекты использования ферментного катализа в пищевой промышленности: монография / Г.Н. Румянцева, Н.И. Дунченко.- М.: МГУПБ, 2007.- 101 с.

91. Рыбчин, В.Н. Основы генетической инженерии: СПбГТУ.- 1999.- 290 с.

92. Самошина, Н.М. Гидролиз лактозы с помощью грибных иммобилизованных ß-галактозидаз / Н.М. Самошина // Биотехнология.- 1987.- №1.- С. 61-65.

93. Свердлов, Е.В. Что может генная инженерия / Е.В. Свердлов // Здоровье.-2002.-№ 1.- С. 51-54.

94. Свириденко, Ю.Я. Биотехнологические аспекты интенсификации сыродельного производства: дис. д-ра биол. наук в форме научного доклада: 03.00.23: защищена 20.01.99 / Свириденко Юрий Яковлевич.- Углич, 1999.- 55с.

95. Синельникова, Б.М. Лактоза и ее производные / Б.М. Синельников, А.Г. Храмцов, И.А. Евдокимов, С.А. Рябцева, A.B. Серов; науч. ред. акад. РАСХН А.Г. Храмцов.- СПб: Профессия, 2007.- 768 с.

96. Смирнова, И.А. Теоретическое обоснование и исследование закономерностей формирования сыров с термокислотной коагуляцией белков молока: дис. д-ра техн. наук: 05.18.04: защищена 10.06.03 / Смирнова Ирина Анатольевна.- Кемерово, 2003.- 322 с.

97. Сорокина, Е.Ю. Идентификация трансгенной ДНК в пищевых продуктах: результаты мониторинга / Е.Ю. Сорокина, О.Н. Чернышева, О.В. Анисимова // Хранение и переработка сельхозсырья.- 2003.- №5. С. 100.

98. Соя и продукты ее переработки в питании здорового и больного человека: уч. Пособие / под редакцией В.А. Тутельяна.- М.: «ГЭОТАР-Медиа».- 2006.- 192 с.

99. Строкач, Д.А. Исследование и разработка технологии молочных продуктов с регулируемым углеводным составом: автореф. дис. канд. техн. наук:0518.04: защищена 15.04.04 / Строкач Дмитрий Андреевич.- СПб, 2004.- 16 с.

100. Тамим, А.И. Йогурты и другие кисломолочные продукты. Научные основы технологии / А.И. Тамим, Р.К. Робинсон.- СПб.: Профессия.- 2003.- 664 с.

101. Татаркина, Н.И. Эффективность использования кормов при откорме молодняка крупного рогатого скота: монография. — Тюмень: ТГСХА. 2008. — 274 с.

102. Тепел, А. Химия и физика молока / А. Тепел.- М.: Пищевая промышленность, 1979.- 324 с.

103. Тихомирова, H.A. Хроматография сывороточных белков молока: методические указания для студентов ВУЗов к выполнению лабораторных и учебно-исследовательских работ / H.A. Тихомирова, Г.С. Комолова, O.E. Овчинникова.- М.: 2008.-46 с.

104. Тихонов, И.В. Биотехнология: учебник / И.В. Тихонов, Е.А. Рубан, Т.Н. Грязнева и др.; под ред. акад. РАСХН Е.С. Воронина.- СПб.: ГИОРД, 2005.792 с.

105. Тутельян, В.А.О нормах физиологических потребностей в энергии и пищевых веществах для различных групп населения Российской Федерации / В .А. Тутельян //Вопросы питания.- 2009.- Т. 78.- С. 4-15.

106. Тутельян, В.А. Пища и биобезопасность / В.А. Тутельян // Вестник РАМН.- 2002.- №10,- С.14-19.

107. Фаворова, О. О. Лечение генами фантастика или реальность? / О.О. Фа-ворова // Соросовский образовательный журнал.- 1997.- № 2.- С. 21-27.

108. Фармацевтическая микробиология / под ред. В.А. Галынкина, В.И. Кочеровца.- М.: Арнемия.- 2003.- 352 с.

109. Федеральный закон "О государственном регулировании в области генно-инженерной деятельности" от 05.07.1996 №86-ФЗ.

110. Федеральный закон «О качестве и безопасности пищевых продуктов» от 02.01.2000 №29-ФЗ.

111. Федеральный закон от 25.10.2007 г. № 234-Ф3 "О внесении изменений в Закон Российской Федерации "О защите прав потребителей" и часть вторую Гражданского кодекса Российской Федерации".

112. Федеральный Закон «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» от 30.03.1999 №52-ФЗ.

113. Ховаев, A.A. Вопросы безопасности и тенденции использования генно-инженерно-модифицированных микроорганизмов при производстве пищевых продуктов, пищевых ингредиентов и продовольственного сырья / A.A. Ховаев // Вопросы питания.- 2008.- №3.- С. 58-63.

114. Всероссийского конгресса по торговле и общественному питанию,- Кемерово, 2003.-е. 199-203.

115. Храмцов, A.A. Теоретическое и экспериментальное обоснование биомембранной технологии молочного полисахаридного концентрата: автореф. дис. д-ра техн. наук: 05.18.04 / Храмцов Андрей Андреевич.- М., 1999,- 44с.

116. Храмцов, А.Г. Молочная сыворотка / A.F. Храмцов.- М:: Агропромиздат, 1990,- 240 с.

117. Храмцов, A.F. Системный подход к технологии молочных продуктов / А.Г. Храмцов, П.В. Акинин, С.А. Рябцева // Вестник РАСХН, 1994,- №5.- С. 54-56.

118. Храмцов, А.Г. Биотехнология напитков из молочной сыворотки / А.Г. Храмцов, В.Е. Жидков, Г.И. Холодов.- Ставрополь, 1996.- 140 с.

119. Храмцов, A.F. Рациональная переработка и использование белково-углеводного молочного сырья / А.Г. Храмцов, П.Г. Нестеренко.- М.: Молочная промышленность, 1998.- 105 с.

120. Храмцов, A.F. Производство сгущенных концентратов молочной сыворотки: уч. пособие / А.Г. Храмцов, П.Г. Нестеренко, Е.А. Чеботарев,- Ставрополь, 1998.-80 с.

121. Храмцов, A.F. Использование методики нейронных сетей в пищевой биотехнологии/ А.Г. Храмцов, В.В. Садовой, В.А. Самылина // Известия вузов. Пищевая технология.- 2004.- №5-6:- С. 105-108.

122. Храмцов, А.Г. Доктрина инновационных технологий молочных продуктов -возможности реализации // Молочная промышленность.- 2008,- №4.- С. 64-67.

123. Чечилова; С.А. Трансгенная пища // Здоровье.- 2000.- № 6.- С. 20-23.

124. Шабарова, 3.А. Химические основы генетической инженерии / З.А. Ша-барова, A.A. Богданов, A.C. Золотухин.- М.: изд-во Московского университета, 1994.- 280 с.

125. Шевелева, С.А. Медико-биологические требования к пробиотическим продуктам и биологически активным добавкам к пище (БАД) / С.А. Шевелева // Инфекционные болезни.- 2004.- №3.- С. 86-91.

126. Шевелуха, B.C. Биотехнология и биобезопасность / B.C. Шевелуха // Сельскохозяйственная биология.- 2002.- №3.- С. 11-26.

127. Шестаков, С.В. Геномика патогенных бактерий / С.В. Шестаков // Вестник РАМН.- 2001.- №10.- С. 18-25.

128. Щелкунов, С.Н. Генетическая инженерия / С.Н. Щелкунов.- Новосибирск: Изд-во Новосибирского университета, 1994,- 435 с.

129. Coghlan, A. GM crop DNA found in human gut bugs. NewScientist.- 2002.- P. 345-349.

130. Ermakova, 1. Influence of genetically modified soya on the birth-weight and survival of rat pups / I. Ermakova // Epigenetics, Transgenic Plants and Risk Assessment: Proceedings.- 2006.- P.41-48.

131. Ewen, S.W. Effect of diets containing genetically modified potatoes expressing Galanthus nivalis lectin on rat small intestine / S.W. Ewen, A. Pusztai. // Lancet. -1999.- №354ю- V.9187.- 1999.- P. 243-249.

132. Fate of free DNA and transformation of oral bacterium Streptococcus gordonii DL1 plasmid DNA in human saliva / D;K. Mercer, K.P. Scott, W.A. Bruce

133. Johnson, L.A. Glover, HJ. Flint // Applied and Environmental Microbiology.-1999. V.65.- P.6-10.

134. Fine structural analyses of pancreatic acinar cell nuclei from mice fed on GM soybean / M. Malatesta, M. Biggiogera, E. Manuali, M.B.L. Rocchi, B. Baldelli, G. Gazzanelli // Eur. J. Histochem.- 2003. V. 47.- P. 385-388.

135. Kortepeter, M.G. Potential biological weapons threats / M.G. Kortepeter, G.W. Parker// Emerg. Infec. Diseases.- 1999.- V.5.- №4.- P. 523-527.

136. On the fate of orally ingested foreign DNA in mice: chromosomal association and placental transmission in the fetus / R. Schubbert, U. Hohlweg, D. Renz, W. Doerfler // Molecules, Genes and Genetics.- 1998. V. 259.- P. 569-576.

137. Pusztai, A. Report of Project Coordinator on data produced at the Rowett Research Institute / SOAEFD flexible Fund Project RO 818. 22.- October 1998.

138. Schubbert, R. Ingested foreign (phage M13) DNA survives transiently in the gastrointestinal tract and enters the blood stream of mice / R. Schubbert, C. Lett-rnann, W. Doerfler // Molecules, Genes and Genetics.- 1994.- V. 242.- P.495-504.

139. Seralini, G.E. New Analysis of a Rat Feeding Study with a Genetically Modified Maize Reveals Signs of Hepatorenal Toxicity / G.E. Seralini, D. Cellier, J.S. Vendomois // Arch. Environ. Contam. Toxicol,- 2007.- P. 1033-1042.

140. Sorokina, E.Y. Analytical Methods in Control for Food Received by Modern Biothchnology / E.Y. Sorokina, O.N. Chernyshova, O.V. Anisimova // New Aspects Bioi ítechnology and Medicine. Nova Science Publishers, New-York, 2007.- P. 103-106.

141. Tucker, J.B. Historical trends related to bioterrorism: an empirical analysis / J.B. Tucker // Emerg. Infec. Diseases.- 1999.- V.5.- №4.- P. 498-504.

142. World Scientists Statement. Supplementary Information of the Hazards of Genetic Engineering Biotechnology.- Third World Network.- 2000.

143. Vecchio, L. Ultra structural analysis of testes from mice fed on genetically modified soybean / L. Vecchio, B. Cisterna, M. Malatesta, T.E. Martin, B. Biggi-ogera // Eur. J. Histochem.- V.48.- 2003.- P. 449-453.