автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Интенсификация процессов дрожжегенерирования и брожения в технологии спирта с использованием ультразвуковой обработки засевных дрожжей

На правах рукописи

БОДРОВА ОЛЕСЯ ЮРЬЕВНА

ИНТЕНСИФИКАЦИЯ ПРОЦЕССОВ ДРОЖЖЕГЕНЕРИРОВАНИЯ И БРОЖЕНИЯ В ТЕХНОЛОГИИ СПИРТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ ОБРАБОТКИ ЗАСЕВНЫХ ДРОЖЖЕЙ

Специальность 05.18.07 - «Биотехнология пищевых продуктов» (пн во безалкогольная, спиртовая и винодельческая промышленности)

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Москва - 2006 г.

Работа выполнена на кафедре «Процессы ферментации и промышленного биокатализа» Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московский государственный университет пищевых производств».

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ:

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ:

кандидат технических наук, доцент Кречетннкова Александра Николаевна

доктор технических наук, профессор Карпиленко Геннадий Петрович кандидат технических наук Скрябин Владимир Игоревич

Московский государственный университет технологий и управления

Защита состоится «28» декабря 2006 года в 12эо на заседании Диссертационного Совета Д 212.148.04 при ГОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств» по адресу: 125080, г. Москва, Волоколамское шоссе, 11, ауд. Ш-101

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО МГУПП.

Автореферат разослан «28» ноября 2006 г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета, Д.Т.Н., доц.

Крюкова Е.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы

Важным направлением развития спиртовой промышленности является интенсификация технологических процессов и повышение качества готовой продукции.

Наиболее продолжительными стадиями в технологии спирта являются приготовление засевных дрожжей и сбраживание сусла, зависящие от физиологического состояния дрожжей. Известны различные способы активации дрожжей, одним из которых является воздействие на них ультразвука, нашедшего в настоящее время широкое применение. Известно, что ультразвуковая обработка дрожжей приводит к стимуляции физиологического состояния клетки н ускорению массообмена между клеткой и средой, содержащей необходимые для нее питательные вещества.

В производстве спирта используется, в основном,

некондиционное зерно. Сусло, полученное из такого зерна, обеднено биологически активными веществами, необходимыми для обеспечения нормального роста и размножения дрожжей. При пониженном содержании аминокислот в сусле они в больших количествах синтезируются клетками дрожжей, в результате чего увеличивается образование летучих примесей спирта, в частности, компонентов сивушного масла.

Наибольшее распространение находит способ обогащения питательной среды для выращивания дрожжей с использованием различных подкормок. Одним из источников получения подкормок служат дрожжи, в состав которых входят аминокислоты, витамины, ферменты, микроэлементы и др. Для извлечения указанных соединений из клетки необходимо разрушить клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану дрожжей. Ультразвук обладает широким спектром действия на

3

микроорганизмы: от стимулирующего до дезинтегрирующего. Дезинтеграция клеток дрожжей ультразвуком способствует выходу в экстракт биологически активных веществ.

Исследования, направленные на изучение многофункциональности действия ультразвука на засевные дрожжи в производстве спирта, являются актуальными.

Цель и задачи исследований

Цель работы - разработка способа интенсификации

дрожжегенерирования и брожения с использованием засевных дрожжей, активированных ультразвуком.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

- исследовать влияние ультразвуковой обработки суспензии дрожжей на выживаемость дрожжевых клеток;

- изучить влияние ультразвука на морфологические признаки и физиологическое состояние дрожжей;

- исследовать возможность получения дрожжевого экстракта дезинтеграцией клеток дрожжей ультразвуком;

• подобрать дозу внесения дрожжевого экстракта для активации засевных дрожжей;

- разработать способ обработки спиртовых дрожжей на стадии дрожжегенерирования с использованием многофункциональности действия ультразвука;

- изучить показатели зрелой бражки, полученной при применении активированными ультразвуком и дрожжевым экстрактом дрожжей;

провести опытно-промышленную апробацию результатов исследований.

Научная новизна

Установлена зависимость биосинтетической способности спиртовых дрожжей в процессе дрожжегенерирования и бродильной активности при брожении от продолжительности ультразвуковой обработки суспензии дрожжей.

Обоснованна целесообразность дезинтегрирующего воздействия ультразвука на клетки дрожжей в экспоненциальной фазе роста.

Изучено влияние дрожжевого экстракта на метаболизм засевных дрожжей.

Впервые установлена эффективность активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом на интенсификацию процессов дрожжегенерирования, брожения и улучшения качества бражного дистиллята.

Практическая значимость

На основании многофункциональности действия ультразвука на засевные дрожжи разработан способ интенсификации процессов дрожжегенерирования и брожения в технологии спирта с использованием активированных ультразвуком и дрожжевым экстрактом засевных дрожжей.

Применение разработанного способа позволяет сократить процессы дрожжегенерирования на 8 часов, брожения на 12 часов, увеличить выход спирта из I тонны условного крахмала при переработке ржи на 0,2 дал, снизить содержание летучих примесей спирта в бражном дистилляте на 38,7%.

Разработанный способ интенсификации дрожжегенерирования и брожения в производстве спирта с использованием активированных ультразвуком и дрожжевым экстрактом засевных дрожжей апробирован в условиях УСВК «Золотой век» структурного подразделения ГУП «Баш спирт».

Экономический эффект от внедрения разработанного способа составил 11,576 тыс. рублей в год для завода производственной мощностью 2000 дал спирта в сутки.

Разработанный способ интенсификации дрожж сгенерирован и я и брожения защищен патентом «Способ активации спиртовых дрожжей» (Патент РФ № 228 82 62).

Апробация работы

Основные экспериментальные результаты были доложены на:

]. Международной научно-практической конференции

«(Инновации и перспективы сервиса» (Уфа, 23-34 ноября 2004 г);

2. Всероссийской научно-технической конференции «Высокоэффективные пищевые технологии, методы н средства для их реализации» (Москва, 2004 г.);

3. Международной научной конференции «Современные проблемы истории естествознания в области химии, химической технологии и нефтяного дела» (Уфа, 2005 г);

4. Первой всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в реализации национального проекта АПК» (Уфа,2006 г.).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 7 работ, в том числе I патент, в которых отражены основные положения диссертации.

Структура н объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, выводов, списка использованной литературы и приложений.

Основное содержание работы изложено на 130 страницах машинописного текста, содержит 34 рисунка н 20 таблиц.

КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследований, показана научная новизна и практическая значимость результатов исследований.

1. Обзор литературы В обзоре литературы рассмотрены основные технологические аспекты производства спирта. Представлены характеристики используемых рас дрожжей и способы сбраживания сырья. Обобщены материалы по способам активации дрожжей в бродильных производствах, способствующих улучшению качества дрожжей.

Рассмотрены перспективы использования ультразвука в пищевой промышленности. Обоснованы цель и задачи исследования.

¿.Экспериментальная часть 2.1. Объекты* материалы и методы исследований

Объектом исследования служили спиртовые дрожжи Saccharomyces cerevisiae расы XII, полученные из коллекции кафедры «Процессы ферментации и промышленного биокатализа» МГУПП.

Определение морфологических признаков и показателей физиологического состояния дрожжей проводили общепринятыми в микробиологии методами. Подсчет клеток дрожжей осуществляли с использованием счетчика дрожжей «SPARE PART LIST» Model 901 Yeast-2004.

Аминокислотный состав дрожжевых экстрактов определяли методом ионно-обненной хроматографии на автоматическом амнноанализаторе марки «BIOTRONIK» ноГОСТ 13496.21-87 и ГОСТ 13496.22-90.

Физико-химические показатели бражки контролировали с

использованием общепринятых в технологии спиртового производства методов. Определение содержания летучих примесей спирта в дистилляте бражки осуществляли на газовом хроматографе «HP 6S50 Agilent Series GC System» фирмы «Хьюллет-Паккард».

Для проведения эксперимента использовали лабораторную ультразвуковую установку, снабженную дисковым излучателем ультразвуковых волн и мешалкой. Основными параметрами работы установки являлись частота колебаний 22 кГц н интенсивность колебаний 1,0 Вт/скг.

Обработку результатов экспериментов проводили с применением стандартного пакета программ.

2.2 Результаты исследований и их обсуждение 2.2.1 Исследование действия ультразвуковой обработки на

выживаемость клеток спиртовых дрожжей Воздействие ультразвука на микроорганизмы проявляется в широком диапазоне: от активирующего до дезинтегрирующего. Основным фактором влияющим на эффект действия ультразвука, является продолжительность обработки.

Для изучения продолжительности действия ультразвука на выживаемость спиртовых дрожжей ультразвуковой обработке подвергали суспензию дрожжей в ржаном сусле. В процессе обработки контролировали изменение температуры и рН суспензии дрожжей.

С увеличением продолжительности ультразвуковой обработки количество жизнеспособных клеток дрожжей (рис.1) снижалось н через 35 минут достигало нулевого значения. В процессе обработки происходило нагревание суспензии дрожжей с 2Ъ°С до 50°С, рН снижался с 4,7 до 4,5.

Для выявления действия теплового эффекта ультразвуковой обработки на выживаемость дрожжей проводили отдельно нагревание

суспензии дрожжей в указанном температурном интервале. По сравнению с ультразвуковым, при тепловом воздействии в течение 35 минут количество мертвых клеток составило не 100%, а 36%, Следовательно, снижение количества жизнеспособных клеток дрожжей объясняется не только летальным действием нагревания в процессе ультразвуковой обработки.

1в к » а

Продолжительность обработки, минут

¡♦Опыт) ■ Опыт г А Опыт» |

Пргаечами: Овит 1 - впинкие продолжительности ультргздукомго «одейст»на на

выживаемость щеток дрожжей;

Опыт 2 • влияние продолжительности нагревши! дрожжевой суспензии на выживаемость клеток дрожжей;

Опыт 3 - изменение температуры дрожжевой суспензии в результате воздеВствн! ' ультразвука.

Рис Л. Влияние продолжительности обработки дрожжевой суспензии ультразвуком и теплом на выживаемость клеток спиртовых дрожжей

При ультразвуковой обработке, начиная с 7°* минуты, выживаемость дрожжей снижалась на значительную величину, составляющую 10% от исходного количества клеток.

2.2.2 Изучение влияния ультразвука на морфологические признаки и физиологическое состояние спиртовых дрожжей На основании результатов, полученных при исследовании влияния ультразвука на выживаемость дрожжей, суспензию дрожжей подвергали ультразвуковой обработке в течение 1-6 минут. В качестве контроля использовали дрожжевую суспензию, не обработанную ультразвуком.

4 > « к го г«

Продолкиниыюстъдрояомтаиариравниии, час.

■ контроль В1 минута В1 минуты О 3 минуты в 4 минуты ■ В минут В» нану«

Рис.2, Влияние продолжительности ультразвукового воздействия на прирост биомассы дрожжей в процессе дрожжегенерирования

г в

5 3

■ 12 11 20 Продотшиляытеть дрожж*г*и« рироиаиия, чае. В контроль □ 1 минута □ 2 минуты в 3 минуты в Л минуты В В минут и в минут

Рис.3. Влияние продолжительности ультразвукового воздействия на количество почкующихся клеток в процессе дрожжегенерирования

4 ( 11 1» М

Продолжительность дрщнютгнорироаанйя, час.

О контроль 01 минута минуты ИЗ минуты В4 минуты В9 минут минут

Рис.4. Влияние продолжительности ультразвукового воздействия на количество клеток с гликогеном в процессе дрожжегенерирования

Ультразвуковая обработка дрожжевой суспензии в течение 4 минут способствовала максимальному приросту биомассы на 35%, клеток с гликогеном на 21%, по сравнению с контролем (рис. 2-4). Количество почкующихся клеток достигало максимального количества на & час брожения и превышало контроль на 23%. Продолжительность процесса дрожжегенерирования сокращалась на 4 часа.

При сбраживании ржаного сусла бродильная активность увеличилась на 28% (рис. 5). Объемная доля спирта увеличилась на 0,30% по сравнению с контролем.

15

20 30 40 60 во

Продолжительность брожения, час

Рис. 5. Изменение бродильной активности дрожжей в процессе сбраживания сусла дрожжами, обработанными ультразвуком

Таблица 1

Состав летучих примесей спирта в бражном дистилляте

Примеси Содержание, мг/дм'

Контроль Опыт

ацетальдегид 136,187 108,656

метилацетат 220,402 170,329

метанол 455 378

этилацетат 136,182 112,872

1-пропанол 793,762 589,956

изобутанол 1716,819 987,905

1-бутанол 11,506. 10,898

изоамилол 3458,139 2987,984

Общее количество примесей 6927,997 5346,6

Кроме улучшения физико-химических показателей, снижалось содержание летучих примесей спирта в бражном дистилляте опытного образца на 23% по сравнению с контролем (табл. 1).

2.23 Получение дрожжевого экстракта дезинтеграцией клеток спиртовых дрожжей ультразвуком В препаратах, полученных из клеток дрожжей, содержатся биологичесхи активные вещества. Нами была исследована возможность получения дрожжевых экстрактов, дезинтегрированием ультразвуком клеток спиртовых дрожжей, находящихся преимущественно в лаг-фазе (ДЭО, в логарифмической (ДЭа) и стационарной (ДЭз) фазах роста.

Таблица 2

Влияние ультразвуковой обработки дрожжевой суспензии на

выживаемость клеток дрожжей в различных фазах роста

Продолжительность воздействия ультразвука, минут Изменение температуры, °С Количество выживших клеток, %

ДЭ| ДЭ2 ДЭэ

1 31,5 100 100 100

5 36,5 98 90 92

10 39 55 54 68

15 41 42 36 60

20 43 36 23 36

25 45 22 10 26

30 47 8 0 17

35 50 0 - 6

40 52 - - 0

Таблица 3

Аминокислотный состав дрожжевых экстрактов

Наименование аминокислоты Содержание аминокислот, мг/100 см"1

ДЭ, дэ2. ДЭ„

аланин 566,5 1118,9 788,6

аргинин 578,8 1012,8 913,1

аспаргиновая кислота 28,67 46,3 34,1

валин 167,8 319,9 278,5

гистиднн 87,89 120,4 99,8

ГЛИЦИН 182,2 400,4 278,5

лейцин 467,98 1012,8 567,8

нзолейцин 177,9 223,3 178,7

лизин 135,9 240,2 134,5

метионин 77,5 96,9 45,6

пролин 208,8 412,2 234,7

серии 157,9 200,9 176,7

тирозин 14,6 36,9 23,6

треонин 156,5 218,7 189,90

триптофан 8,7 19,1 5,6

фенилаланнн 154,3 306,6 178,7

глутаыиновая кислота 690,90 1963,3 768,7

цистин 32,4 66,6 45,7

Сумма всех аминокислот 3895,24 7816,2 4942,8

В дрожжевом экстракте ДЭз гибель клеток наступала на 30 минуте ультразвуковой обработки. В латентной н стационарной фазах роста

содержание мертвых клеток достигало 100% после 35 и 40 минут обработки соответственно (табл.2).

Аминокислоты необходимы дрожжам, как азотистый субстрат в процессе их размножения, а также для синтеза белка и ферментных систем. Установлено, что дрожжевые экстракты содержат 16 аминокислот (табл.3). В препарате ДЭг суммарное количество аминокислот превышало в 2,86 и 1,55 раз количество аминокислот в экстрактах ДЭьДЭз соответственно.

Для культивирования дрожжей в среде должны присутствовать факторы роста, большое значение в этом принадлежит витаминам. В полученном экстракте ДЭг содержатся: пиридоксин — 57 мг/кг, инозит — 12000 мг/кг, тиамин - 387 мг/кг, пантотенат - 197, биотин - 89 мкг/кг. Биотнн, пиридоксин и инозит входят в состав каталитических систем, участвующих в азотистом обмене и синтезе нуклеотидов.

2.2.4 Изучение зависимости активации засевных дрожжей от дозы внесения дрожжевого экстракта Полученный экстракт ДЭг использовали для обогащения дрожжевой суспензии аминокислотами и витаминами. Дозу внесения дрожжевого экстракта определяли путем оценки его влияния на морфологические признаки и физиологическое состояние дрожжей в процессе дрожжегенерирования. Процент внесения составлял: 0,5%, 1,5%, 2,5%, 3,5%, 4,5% от объема суспензии. В контрольном варианте засевные дрожжи получали без внесения экстракта.

При внесении ДЭ2 в количестве 0,5; 1,5% прирост биомассы, количество почкующихся клеток и клеток с гликогеном незначительно изменялись по сравнению с контролем. В опытном образце при внесении 2,5% экстракта ДЭг прирост биомассы превышал контроль на 30% (рнс.б).

О 4 8 12 16 20 24

Продолжительность Арожжвтвн«9иров»т«, Ч»с □ контроль И 0,50% £31,50% 02,50% В 3,50% 04,50%

Рис.6 Влияние дозы внесения ДЭг на прирост биомассы дрожжей процессе дрожжегенерирования

Еконтроль Ш0,50% €1,80% 02,50% 03,60% 04,50% Рис.7. Влияние дозы внесения ДЭ2 на количество почкующихся клеток процессе дрожжегенерирования

Продолжительносгьдрожжв генерирования, чисое

Ш контроль га 0,50% В 1,60% В 2,80% 03,50% И4,50%

Рис.8. Влияние дозы внесения ДЭ2 на количество клеток с гликогеном процессе дрожжегенерирования

При дальнейшем увеличении дозы дрожжевого экстракта ДЭг до 3,5% и 4,5% существенного изменения в приросте биомассы не наблюдалось, по сравнению с дозой внесения 2,5%. Количество клеток с гликогеном при внесении 2,5% ДЭг превышало контроль на 19% (рис.8). Количество почкующихся клеток в опытном образце достигало максимального количества на 8 час брожения и превышало контроль на 20% (рис.7).

Таким образом, оптимальная доза внесения ДЭг - 2,5% от общего объема суспензии.

Засевными дрожжами, активированными дрожжевым экстрактом ДЭг , сбраживали ржаное сусло. В контрольный образец добавляли такое же количество засевных дрожжей, полученных без внесения дрожжевого экстракта.

_ 14

Прсдолжмтальность брожения, час.

[♦Контроль Ж Опыт |

Рис. 9. Изменение бродильной активности дрожжей в процессе сбраживания сусла засевными дрожжами, активированными экстрактом

Бродильная активность в опытном образце увеличивалась на 22% по сравнению с контролем (рис.9). В опытном образце увеличивалось содержание спирта на 0,35% по сравнению с контролем, уменьшалась массовая концентрация несброженных углеводов на 0,08 г/100 см3, процесс брожения сокращался на б часов.

Результаты исследований показали, что дрожжевой экстракт ДЭх, полученный дезинтегрированием клеток спиртовых дрожжей в логарифмической фазе роста, улучшал физиологическое состояние засевных дрожжей и способствовал процессу интенсификации сбраживания ржаного сусла.

2.2.5 Разработка способа интенсификации дрожжегенерировяния и брожения с использованием многофункционального действия ультразвука на засевные дрожжи На следующем этапе исследований было изучено влияние активации засевных дрожжей ультразвуком в выбранном ранее режиме и дрожжевым экстрактом ДЭг на физиологическое состояние засевных дрожжей, интенсификацию процесса брожения н качество бражного дистиллята.

»о » ко £ ко I «о

[вконтроль Вопит |

■ ■ в--- НИ-

__ пш ни НИ

Х4

4 в 13 - 1« 10

Продолжительность дрожжогонориронния, час.

Рис.10. Влияние активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом на прирост биомассы в процессе дрожжегенерирования

в ю 1(

Проаолк нтф льностъ дрожж*

-■»--ОПЫТ ^^^ контроль 1 "М""ВИУТ 1 |

Рис.11. Влияние активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом на количество почкующихся клеток и клеток с гликогеном в процессе дрожже генерирования

При данном способе обработки засевных дрожжей увеличивался прирост биомассы в процессе дрожжегенерирования на 49,3%, по сравнению с контролем (рис. 10). Полученные засевные дрожжи по содержанию почкующихся клеток не превышали 10%, количество клеток с гликогеном составляло 70% (рис.11). Процесс дрожжегенерирования сокращался на 8 часов

Для оценки влияния ультразвука и дрожжевого экстракта на активность ферментов клетки определяли мальтазную и зимазную активности дрожжей.

Мальтазная и зимазная активности дрожжей, активированных ультразвуком и дрожжевым экстрактом, превышала контроль на 45% я 50% соответственно (рис.12).

контроль мальтазная зимазная

Рис. 12. Мальтазная и зимазная активности активированных дрожжей

В результате сбраживания ржаного сусла активированными засевнымн дрожжами увеличилась объемная доля спирта на 0,4% по сравнению с контролем, уменьшилась массовая концентрация несброженных углеводов на 0,17 г/100 см3 (табл.4). Продолжительность брожения сократилась на 12 часов по сравнению с контролем. Выход спирта в процессе сбраживания сусла засевнымн дрожжами,

18

активированными ультразвуком и дрожжевым экстрактом, в опытном образце составлял 64,3 дал/т.усл,крахм„ в контрольном - 64,1 дал/т.усл. крахм.

Количество клеток по окончании процесса брожения в опытном варианте был на уровне с контролем.

Таблица 4

Физико-химические показатели зрелой бражки

Показатели Контроль Опыт

Массовая доля углеводов %:

Общих 0,46 0,2 &

Растворимых 0,33 0,21

Массовая доля нсрастворенного крахмала, % 0,12 0,06

Массовая концентрация несброженных углеводов, г/100 см3 0,35 0,18

Активная кислотность, рН 4,70 4,75

Титруемая кислотность, град. 0,36 0,40

Объемная доля спирта, % 7,42 7,82

Выход спирта, дал/ 1 т. усл. крахмала 64,1 64,3

Для определения влияния активированных дрожжей на накопление летучих примесей спирта при брожении проводили анализ образцов бражного дистиллята методом газовой хроматографии.

По результатам анализа (табл.5) можно сделать следующие выводы: общее количество летучих примесей спирта снижалось при сбраживании сусла активированными дрожжами на 38,7% по сравнению с контролем. В большей степени уменьшалось содержание таких компонентов сивушного масла как изобутанол и изоамилол — на 42,5% и 39,4% соответственно по сравнению с контролем. Содержание характерной при сбраживании сусла расой XII примеси — ацетальдегида уменьшалось в опытном образце на 43%.

Таблица 5

Содержание летучих примесей спирта в бражном дистилляте

Примеси Содержание, мг/дм"1

Контроль Опыт

ацетальдегид 136,187 77,649

метнлацетат 220,402 142,679

метанол 455 414

2-пропанол 0 0

этнлацетат 136,182 78,906

1-пропанол 793,762 446,108

изобутанол 1716,819 986,681

1-бутанол 11,506 5,868

нзоамилол 3458,139 2094,971

Общее количество примесей 6927,997 4246,862

Таким образом, при сбраживании ржаного сусла, засев ны ми дрожжами, активированными ультразвуком и дрожжевым экстрактом, продолжительность процессов дрожжегенернровання и брожения сокращалась на 20 часов, снижалось количество летучих примесей спирта бражного дистиллята, повышался выход спирта.

Рнс.16. Аппаратурао-технологическая схема производства спирта: 1 - автопогрузчик; 2,4,14,15,17. - приемный бункер; 3,6,13 - нория; 5 - винтовой конвейер; 7,10,11 - весы; 8,9 -электромагнитный и воздушно-ситовой сепараторы; 12 - молотковая дробилка; 16 - просеивающая машина; 18 -промежуточный сборник; 19 - вальцовый станок; 16 - просеивающая машина; 20 - смеситель;

22,25,29,3739,42,45,51,56,57,58 - насос; 23,26,27,31 - контактная головка; 24 - аппарат ГФО; 28 - АФО; 30 - паросепаратор; 32 - трубчатый стерилизатор; 33 - испаритслъ-осахариеатель; 34 - сборник осахаривающих веществ; 35 - сборник формалина; 36 - конденсатор; 38 - барометрический сборник; 40 - испарительная камера; 41,43 - барометрический конденсатор к сборник; 44 - сборник охлажденного сусла; 47 — АЧК; 46 - дрожжегекераторы; 50 - возбраживатель; 52 -головной бродильный аппарат; 53 - поточный аппарат батареи; 55 - с пи рто ловушка; 54 - передаточная ёмкость

ВЫВОДЫ: В результате проведенных исследовании сделаны следующие выводы:

1. Разработан способ интенсификации дрожжегенерирования и брожения в технологии спирта с использованием засевных дрожжей, активированных с помощью многофункционального действия ультразвука.

2. Исследовано влияние продолжительности воздействия ультразвука на суспензию дрожжей. Установлено, что 100% количество мертвых клеток достигается после 35 минут воздействия ультразвука.

3. Изучен активирующий эффект ультразвука на морфологические признаки и физиологическое состояние дрожжей. Установлено, что обработка суспензии дрожжей в течение 4 минут способствует повышению синтеза биомассы на 35% в процессе дрожжегенерирования и увеличению бродильной активности на 28% в процессе брожения, по сравнению с контролем.

4. Исследована возможность получения дрожжевого экстракта дезинтеграцией клеток дрожжей ультразвуком в различных фазах роста. Установлено, что при обработке ультразвуком в течение 30 минут спиртовых дрожжей, в экспоненциальной фазе роста, по сравнению с латентной и стационарной фазами, способствует максимальному выходу аминокислот и витаминов из клетки.

5. Изучено влияние дрожжевого экстракта ДЭ2 на физиологическое состояние засевных дрожжей и процесс сбраживания ржаного сусла. Установлено, что наибольший прирост биомассы, превышающий контроль на 30% в процессе дрожжегенерирования, наблюдался при внесении 2,5% экстракта ДЭ2. Сбраживание сусла активированными засевными дрожжами способствовало повышению бродильной активности на 22% при этом продолжительность брожения сокращалась на К часов.

6. Разработан способ активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом, позволяющий интенсифицировать процесс

22

дрожж «генерирования н брожения и улучшить качество б раж н ого дистиллята. Показано, что при использовании активированных засевных дрожжей процесс дрожже генерирован и я сокращается на S часов, процесс брожения на 12 часов. Количество летучих примесей спирта в бражном дистилляте снижается по сравнению с контролем на 38,7%, Выход спирта увеличивается на 0,2 дая/т.усл,крах мала.

8. Экономический эффект от внедрения разработанного способа составил 11576 тыс. рублей в год для завода производственной мощностью 2000 дал спирта в сутки.

Список работ, опубликованных по результатам диссертации:

1. Бодрова О JO., Кречетникова А.Н. Влияние активированных ультразвуком дрожжей на содержание спирта в процессе брожения // Международная научно-практическая конференция «Инновации и перспективы сервиса», 23-34 ноября 2004 г. -С.228-230,

2. Бодрова О.Ю., Кречетникова А.Н. Исследование влияния ультразвуковой обработки на спиртовые дрожжи Sac charo ту ees cere vis iae // Всероссийская научно-техническая конференция-выставка «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации», Часть II, Москва 2004 г., -С. 158-160.

3. Бодрова О.Ю., Кречетникова А.Н. Исследование влияние количества вносимых засевных дрожжей, обработанных ультразвуком, на бродильную активность дрожжей // VI Международная научная конференция «Современные проблемы истории естествознания в области химии, химической технологии и нефтяного дела», -Уфа, 2005 г.

4. Бодрова О.Ю., Кречетникова А.Н. Активирующий и дезинтегрирующий эффекты ультразвуковой обработки микроорганизмов // История науки и техники. Уфа-2006. стр.51.

5. Бодрова О.Ю., Кречетникова А.Н. Компонентный состав экстракта спиртовых дрожжей, полученного с использованием ультразвука // Первая всероссийская научно-практическая конференция «Молодые ученые в реализации национального проекта «Развитие АПК»». -Уфа, 2006.

6. Бодрова О.Ю., Кречетникова А.Н., Ильяшенко Н.Г. Активирующий эффект воздействия дрожжевого экстракта на клетки БассЬаготусез сегеуЫае // Производство спирта и ликероводочных изделий, №3, 2006.

7. Патент РФ № 228 82 62 Способ активации спиртовых дрожжей / Авторы: Бодрова О.Ю., Кречетникова А.Н., Гернет М.В., Шабурова Л. Н., Ильяшенко Н.Г./ опубл. 28.08.06 г. - Бюл. № 33.

Подписано в печать 27.11.06. Формат 30x42 1/2. Бумага типографская № 1. Печать офсетная. Печ. л. 1,1. Тираж 100 экз. Заказ 328. 125080, Москва, Волоколамское ш., 11 ИК МГУПП 23

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1 Биология дрожжей.

1.1.2. Расы спиртовых дрожжей, применяемые в производстве спирта.

1.2 Активаторы роста дрожжей.

1.2.1 Химические активаторы роста дрожжей.

1.2.2 Биологические стимуляторы роста дрожжей.

1.2.2.1 Получение и применение препаратов из дрожжей.

1.2.3 Использование методов физического воздействия на дрожжи.

1.2.3.1 Ультразвук и его применение в пищевой промышленности.

1.2.3.2 Ультразвуковое воздействие на дрожжи.

2. Экспериментальная часть.

2.1 Объекты, материалы и методы исследований.

2.1.1 Объекты исследований.

2.1.2 Материалы исследований.

2.1.2.1 Характеристика сырья, используемого в проведение экспериментов.

2.1.3 Методы исследований.

2.1.3.1 Методика экспериментов по исследованию влияния ультразвукового воздействия на питательные среды и на морфологические и физиологические свойства дрожжей.

2.1.3.2 Методы исследования морфологического и физиологического состояния обработанных ультразвуком дрожжей при дрожжегенерировании и брожении.

2.1.3.3 Методы исследования основных физико-химических и биохимических показателей состава сырья, сусла и бражки.

2.1.3.4 Методика определения ОВП активированных дрожжей в процессе дрожжегенерирования и брожения.

2.1.3.5 Методика определения мальтазной и зимазной активности.

2.2 Результаты исследований.

2.2.1 Исследование действия ультразвуковой обработки на выживаемость клеток спиртовых дрожжей.

2.2.2 Изучение влияния ультразвука на морфологические признаки физиологическое состояние спиртовых дрожжей.

2.2.2.1 Исследование влияния ультразвука на физиологические свойства засевных дрожжей.

2.2.2.2 Влияние засевных дрожжей, обработанных ультразвуком, на процесс сбраживания ржаного сусла.

2.2.2.3 Влияние обработанного ультразвуком сусла на физиологические свойства засевных дрожжей.

2.2.2.4 Исследование влияния теплового эффекта, возникающего при воздействии ультразвука, на физиологические свойства дрожжей.

2.2.2.5 Исследование влияния количества засевных дрожжей, обработанных ультразвуком, на процесс брожения.

2.2.3 Получение дрожжевого экстракта дезинтеграцией клеток спиртовых дрожжей ультразвуком.

2.2.3.1 Воздействие ультразвука на дрожжи, находящиеся в различных фазах роста.

2.2.3.2 Изучение аминокислотного и витаминного состава полученных дрожжевых экстрактов.

2.2.4 Изучение зависимости активации засевных дрожжей от дозы внесения дрожжевого экстракта.

2.2.4.1 Изменение морфологических свойств засевных дрожжей в зависимости от количества вносимого экстракта.

2.2.4.2 Влияние засевных дрожжей, активированных дрожжевым экстрактом, на процесс сбраживания ржаного сусла.

2.2.5 Разработка способа интенсификации дрожжегенерирования и брожения с использованием многофункционального действия ультразвука на засевные дрожжи.

2.2.5.1 Исследование эффективности активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом.

2.2.5.2 Сбраживание ржаного сусла засевными дрожжами, активированными ультразвуком и дрожжевым экстрактом.

2.2.5.3 Изменение мальтазной и зимазной активности дрожжей при сбраживании сусла активированными засевными дрожжами.

2.2.5.4 Исследование активированных ультразвуком и дрожжевым экстрактом засевных дрожжей на осмофильность и термотолерантность.

2.2.6 Описание аппаратурно-технологической схемы производства спирта с использованием активированных засевных дрожжей.

2.2.7 Расчет продуктов при производстве спирта изо ржи.

2.2.8 Экономическая оценка способа производства спирта с использованием активированных дрожжей.

Выводы.

Список литера!уры.

Актуальность работы

Важным направлением развития спиртовой промышленности является интенсификация технологических процессов и повышение качества готовой продукции.

Наиболее продолжительными стадиями в технологии спирта являются приготовление засевных дрожжей и сбраживание сусла, зависящие от физиологического состояния дрожжей. Известны различные способы активации дрожжей, одним из которых является воздействие на них ультразвука, нашедшего в настоящее время широкое применение. Известно, что ультразвуковая обработка дрожжей приводит к стимуляции физиологического состояния клетки и ускорению массообмена между клеткой и средой, содержащей необходимые для нее питательные вещества.

В производстве спирта используется, в основном, некондиционное зерно. Сусло, полученное из такого зерна, обеднено биологически активными веществами, необходимыми для обеспечения нормального роста и размножения дрожжей. При пониженном содержании аминокислот в сусле они в больших количествах синтезируются клетками дрожжей, в результате чего увеличивается образование летучих примесей спирта, в частности, компонентов сивушного масла.

Наибольшее распространение находит способ обогащения питательной среды для выращивания дрожжей с использованием различных подкормок. Одним из источников получения подкормок служат дрожжи, в состав которых входят аминокислоты, витамины, ферменты, микроэлементы и др. Для извлечения указанных соединений из клетки необходимо разрушить клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану дрожжей. „Ультразвук обладает широким спектром действия на микроорганизмы: от стимулирующего до дезинтегрирующего.

Дезинтеграция клеток дрожжей ультразвуком способствует выходу в экстракт биологически активных веществ.

Исследования, направленные на изучение многофункциональности действия ультразвука на засевные дрожжи в производстве спирта, являются актуальными.

Цель и задачи исследований

Цель работы - разработка способа интенсификации дрожжегенерирования и брожения с использованием засевных дрожжей, активированных ультразвуком.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

- исследовать влияние ультразвуковой обработки суспензии дрожжей на выживаемость дрожжевых клеток;

- изучить влияние ультразвука на морфологические признаки и физиологическое состояние дрожжей;

- исследовать возможность получения дрожжевого экстракта дезинтеграцией клеток дрожжей ультразвуком;

- подобрать дозу внесения дрожжевого экстракта для активации засевных дрожжей;

- разработать способ обработки спиртовых дрожжей на стадии дрожжегенерирования с использованием многофункциональности действия ультразвука;

- изучить показатели зрелой бражки, полученной при применении активированными ультразвуком и дрожжевым экстрактом дрожжей; провести опытно-промышленную апробацию результатов исследований.

Научная новизна

Установлена зависимость биосинтетической способности спиртовых дрожжей в процессе дрожжегенерирования и бродильной активности при брожении от продолжительности ультразвуковой обработки суспензии дрожжей.

Обоснованна целесообразность дезинтегрирующего воздействия ультразвука на клетки дрожжей в экспоненциальной фазе роста.

Изучено влияние дрожжевого экстракта на метаболизм засевных дрожжей.

Впервые установлена эффективность активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом на интенсификацию процессов дрожжегенерирования, брожения и улучшения качества бражного дистиллята.

Практическая значимость

На основании многофункциональности действия ультразвука на засевные дрожжи разработан способ интенсификации процессов дрожжегенерирования и брожения в технологии спирта с использованием активированных ультразвуком и дрожжевым экстрактом засевных дрожжей.

Применение разработанного способа позволяет сократить процессы дрожжегенерирования на 8 часов, брожения на 12 часов, увеличить выход спирта из 1 тонны условного крахмала при переработке ржи на 0,2 дал, снизить содержание летучих примесей спирта в бражном дистилляте на 38,7%.

Разработанный способ интенсификации дрожжегенерирования и брожения в производстве спирта с использованием активированных ультразвуком и дрожжевым экстрактом засевных дрожжей апробирован в условиях УСВК «Золотой век» структурного подразделения ГУП «Башспирт».

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Плохое качество зернового сырья для приготовления сусла, используемой воды и вспомогательных материалов оказывают негативное влияние на процессы роста дрожжей, создавая экстремальные условия при накоплении биомассы (дрожжегенерировании) и существенно влияя на физиологическое состояние дрожжей, и брожения.

Именно физиологическое состояние засевных дрожжей в технологии спирта играет важную роль в процессе спиртового брожения, лежащего в основе технологии спирта. Плохое физиологическое состояние дрожжей замедляет процесс брожения, способствует снижению выхода основного продукта - этанола, повышает содержание побочных продуктов брожения и в конечном итоге оказывает негативное воздействие на качество пищевого спирта.

1.1 Классификация и особенности строения дрожжей

Для производства этилового спирта применяют специальные расы дрожжей-сахаромицетов, которые относятся к царству грибов Мусо1а, к отделу Еитусо1а, к классу Азсотус^еБ, семейству БассЬаготус^асеае, к роду БассЬагошусез, виду сегеу1з1ае и некоторым расам вида БсЫгозассИагошусез рошЬе (1).

Форма дрожжевых клеток чаще всего овальная, округлая или эллиптическая размером 5-12 мкм в длину и 2-6 мкм в поперечнике (2,5).

Дрожжевая клетка имеет сложное строение типичное для эукариотных организмов, отдельные структуры ее дифференцированы и специализированы для осуществления энергетических и биосинтетических процессов. В настоящее время описано более 12 клеточных структур -органоидов (1,2,3).

Клеточная стенка форму клетке, она содержит ферменты, при ее участии осуществляется вегетативный рост (почкование). Кроме того, клеточная стенка выполняет роль осмотического барьера, пропуская макромолекулы питательных веществ внутрь клетки. Толщина клеточной стенки дрожжей около 150 нм. От состава клеточной стенки зависят проникновение в клетку питательных веществ и выделение из клетки продуктов обмена. Состав клеточной стенки в ходе брожения существенно изменяются.

Клетки дрожжей имеют хорошо развитый мембранный аппарат -ЦПМ, эндоплазматическую сеть, аппарат Гольджи, лизосомы, митохондрии.

К внутренней поверхности клеточной стенки примыкает цитоплазматическая мембрана, по разным данным толщина которой составляет 8-10 нм. Функция ее заключается в регулировании обмена питательных веществ и метаболитов благодаря избирательной проницаемости(115). Цитоплазма в зависимости от состояния клетки имеет фибриллярное, ячеистое или гранулярное строение. В разные периоды жизни клетки цитоплазма имеет неодинаковое строение и состав.

Ядро диаметром 0,5-1,5 нм хорошо дифференцировано, окружено двойной пористой мембраной. Ядро регулирует и направляет химические процессы в клетке и образует с цитоплазмой единую взаимосвязанную систему.

В состав митохондрий входит большое число окислительно-восстановительных ферментов, поэтому в них сосредоточены энергетические процессы клетки и синтезируется АТФ. Имеются вакуоли и включения запасных питательных веществ: липиды, гликоген, метахроматин.

В настоящее время признано, что гликоген является важнейшим источником энергии для дрожжей особенно, когда сбраживаемых углеводов в среде недостаточно. Синтез гликогена в дрожжах идет параллельно активности брожения, его содержание колеблется от 0 до 30%.

Химический состав.

Клеточная стенка составляет примерно 6-15.27-30% от сухой массы дрожжей. В ее состав входят глюкан - 30-45%, маннан - 30-45%, белок -10-25%, липиды - 3-10%, зола - 3-10% от СВ клеточных стенок. Качественный состав и количественное соотношение белка, жира, золы, витаминов, воды и углеводов свидетельствует о том, что они являются богатым источником белка (115).

Белок дрожжей содержит 24 аминокислоты. В таблице 1 приведен аминокислотный состав дрожжей рода Saccharomyces (Матвеева И.В., Белявская И.Г., 2001).

Таблица 1

Аминокислотный состав дрожжей рода Saccharomyces

Аминокислота Количество, % кСВ

Аденин и тирозин 4,17-6,45

Валин и фенилаланин 5,15-8,58

Лейцин 5,38-8,56

Серин и гликокол 1,68-3,12

Треонин 2,12-3,88

Аспаргиновая кислота 8,87-13,2

Глютаминовая кислота 4,18-7,07

Лизин и гистидин 6,23-10,5

Аргинин 1,75-3,53

Метионин 0,63-1,52

Цистеин 0,075

Тирозин 0,156

Глютатион 0,025

Состав органических веществ дрожжей (в % на СВ): азот общий -6,0-8,0; белковые вещества - 37,0-50,0; жир - 1,5-2,5; безазотистые вещества - 35,0-45,0; зола - 6,0-10,0.

Химический состав дрожжей (по Дж. Уайту), представлен в таблице 2.

Таблица 2.

Химический состав СВ дрожжей рода ЗассИагошусез

Химический элемент Содержание химического элемента, % к СВ дрожжей Среднее количество химического элемента, % к СВ дрожжей углерод 45,0-49,0 47,0 водород 5,0-7,0 6,0 кислород 30,0-35,0 12,5 азот 7,1-10,8 8,5 зола 4,7-10,5 6,0 фосфор 1,9-5,5 2,6 калий 1,4-4,3 2,5 кальций 0,005-0,2 0,05 магний 0,1-0,6 0,4 алюминий 0,002-0,02 0,005 сера 0,01-0,05 0,03 хлор 0,004-0,1 0,02 железо 0,005-0,012 0,007 кремний 0,0 2-0,2 0,8

Спиртовые дрожжи являются факультативными анаэробами и способны существовать как при доступе кислорода воздуха, так и в его отсутствие. При аэробном выращивании дрожжей конечное окисление питательных веществ осуществляется через цикл трикарбоновых кислот (цикл Кребса) и дыхательную цепь, обеспечивающих полное превращение углеводов. В условиях анаэробиоза происходит резкая перестройка энергетического обмена дрожжевых клеток. В результате дрожжи получают энергию путем брожения. В этом случае превращение углеводов сусла идет по циклу Эмбдена-Мейергофа-Парнаса. На тип метаболизма оказывают влияние условия культивирования, источник углерода и его концентрация в питательной среде, содержание кислорода, температура.

Дрожжи растут в широких температурных пределах, но для обеспечения нормальной жизнедеятельности температура культивирования должна составлять 29-30°С. При очень высокой или низкой температуре рост дрожжей замедляется или прекращается совсем(З).

На жизнедеятельность дрожжей значительно влияет активная кислотность среды. От величины рН зависят скорость поступления питательных веществ в клетку, образование витаминов, активность ферментов. Дрожжи растут в пределах рН среды от 2 до 8, однако оптимальным является рН 4,8-5,0 (4).

Размножаются дрожжи рода БассИаготусез вегетативно почкованием, БсЫгозассИаготусеБ - делением. Кроме того дрожжи указанных родов способны размножаться половым путем - с помощью аскоспор.

выводы

В результате проведенных исследований сделаны следующие выводы:

1. Разработан способ интенсификации дрожжегенерирования и брожения в технологии спирта с использованием засевных дрожжей, активированных с помощью многофункционального действия ультразвука.

2. Исследовано влияние продолжительности воздействия ультразвука на суспензию дрожжей. Установлено, что 100% количество мертвых клеток достигается после 35 минут воздействия ультразвука.

3. Изучен активирующий эффект ультразвука на морфологические признаки и физиологическое состояние дрожжей. Установлено, что обработка суспензии дрожжей в течение 4 минут способствует повышению синтеза биомассы на 35% в процессе дрожжегенерирования и увеличению бродильной активности на 28% в процессе брожения, по сравнению с контролем.

4. Исследована возможность получения дрожжевого экстракта дезинтеграцией клеток дрожжей ультразвуком в различных фазах роста. Установлено, что при обработке ультразвуком в течение 30 минут спиртовых дрожжей, в экспоненциальной фазе роста, по сравнению с латентной и стационарной фазами, способствует максимальному выходу аминокислот и витаминов из клетки.

5. Изучено влияние дрожжевого экстракта ДЭ2 на физиологическое состояние засевных дрожжей и процесс сбраживания ржаного сусла. Установлено, что наибольший прирост биомассы, превышающий контроль на 30% в процессе дрожжегенерирования, наблюдался при внесении 2,5% экстракта ДЭ2. Сбраживание сусла активированными засевными дрожжами способствовало повышению бродильной активности на 22% при этом продолжительность брожения сокращалась на 8 часов.

6. Разработан способ активации засевных дрожжей ультразвуком и дрожжевым экстрактом, позволяющий интенсифицировать процесс дрожжегенерирования и брожения и улучшить качество бражного дистиллята. Показано, что при использовании активированных засевных дрожжей процесс дрожжегенерирования сокращается на 8 часов, процесс брожения на 12 часов. Количество летучих примесей спирта в бражном дистилляте снижается по сравнению с контролем на 38,7%, Выход спирта увеличивается на 0,2 дал/т.усл.крахмала.

8. Экономический эффект от внедрения разработанного способа составил 11576 тыс. рублей в год для завода производственной мощностью 2000 дал спирта в сутки.

1. Римарева Л.В. Новые расы дрожжей для повышения эффективности спиртового производства// Производство спирта и ликероводочных изделий 2000 -№1- с. 18-20.

2. Уайт Д. Технология дрожжей// М.: Пищевая промышленность, 1957-316с.

3. Смирнов В.А. Технология спирта// М. Легкая и пищевая промышленность, 1981-415 с.

4. Римарева Л.В., Оверченко М.Б., Игнатова Н.И., Кадиева А.Т. Рациональный выбор расы спиртовых дрожжей// Производство спирта и ликероводочных изделий, -2001- №2 -с. 19-21.

5. Жвирблянская А.Ю., Бакушинская О.А Микробиология в пищевой промышленности. Москва, Пищевая промышленность, 1975, стр.55

6. Абрамов Н.В., Изучение действия электрофизических факторов на биологические обьекты. Электронная обработка материалов 1976, №2, стр.57-59

7. Ю.Панкратов Техническая микробиология пищевых производств. Учебное пособие для вузов. М., 1968

8. П.Гунькина Н.И. Исследование амилаз гибридного штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae У-717 с целью интенсификации производства спирта. Автореферат диссерт. к.т.н., 1998г. Воронеж.

9. Plesset J., Palm С., Mclaughlin С. Induction of heat schok proteins and thermotolerance by ethanol in Saccharomyces cerevisiae // Biochem. Biaphu.Res Comm.-1982,108, №3, p. 1340-1345.

10. Н.Римарева Л.В., Оверченко М.Б., Гернет A.M. Скрининг активных рас дрожжей с термотолерантными и осмофильными свойствами // Тезисы докладов международного семинара «Спиртовая и ликероводочная промышленность-2000» -М., 2000, с.21.

11. Hovmann S., van Dijck.; N.V. Algist-Bruggeman.-№928701028; заявл. 09.07.92. Опубл. 12.01.94

12. Ковальская Л.П. Технология пищевых производств, -М.: Колос,

13. Калинина О.А. Разработка ресурсосберегающей технологии получения этанола из зерна ржи. Автореферат дисс. к.т.н,- М.: 2002, с. 26.

14. Бартенев Ю.С., Жуковская С.В. Интенсификация спиртового брожения за счет принудительной адаптации дрожжей к спирту.// Ликероводочное производство и виноделие., 2002, №10, с.67.

15. Margulis М.А. Application of low freguency acoustical waves in science and technology// Conf. Aplications of Power Ultrasound in phusical and Chemical Processing: Toulousse. -1997.- P.87

16. Margulis M.A Sonochemestry and Cavitation. Luxemburg; Gordon and breach Science Publishers, 1995. p.543.

17. Байер В., Дернер Э., 1958; Акатов В.А., париков В.А., 1970; Балицкий К.П., 1977; Гаврилов Л.Р., Цирулников, 1980; Хилл К., 1989

18. Wood R.W,Loonus A.L. Jhe phusikal and biological effects of higt freguence Sound naves of great intersity phil. Мод. 1927 Vol 7№7 p.417

19. Biological effects of ultrasound, 1983; Hahn et al., 1980

20. Эльпинер И.Е., 1973; Lawu et al., 1995; Miller, Tomas, 1996)

21. Кухаренко A.A. Исследование эффективности применения ультразвука в технологических процессах с иммобилизованными клетками

22. Фирсов В.К. Лабораторное устройство для ультразвуковой интеграции дрожжей. Патент 2118103 Россия, МПК6 A23L 3/30.

23. Kenneth S. Sublik. "Sonochemetri" Kirk-Othmer Eweyclodpedia of Chemikal Technologgy,Fourth Edition, vol. 26; John Willey Sons, Jnc: New Jork, 1998,pp.516-541

24. Wild J.J.a. Neal D. Use of high-freguency ultrasonic waves for detecting changes of texture in living tissues. Lances 26,6656,655 (1951)

25. Urick R.J., A sound velocity method for determining the compressibility of finely divided substances. J. Appl. Phus. 18,11,983 (1947)

26. Gersten J. W. a. Kawashima E., recent advances in fundamental aspects of ultrasound and muscle. Med. 18,106 (1955)

27. Ультразвук. Энциклопедия под ред. И.П.Галяминой, М. 1979.

28. Бергман Л.Я. Ультразвук и его применение в науке и технике. -М.: Издательство иностранная литература. 1957. 28-33 с.

29. Аксонов Н.Р. Микробиология. 3-е издание, перераб. и дополн. -М.: Колос, 1997.-c.115

30. Хмелев В.Н., Попова О.В. Многофункциональные звуковые аппараты и их применение в условиях малых производств, сельском и домашнем хозяйствах. Научная монолог. / Алт. Гос. Техн. Ун-т им. Ползунов. Барнаул: Изд-во Алт ГТУ, 1997. - 160 С.

31. Каданер Я.Д., Вадачкория В.З Перспективы применения электрофизических воздействий в технологии пива и безалкогольных напитков. Обзорная информация Серия 22. Пивоваренная и безалкогольная промышленность. М.: Агр НИИТЭИПП, 1992. - вып.З -28с.

32. Кислая Л., Мудрак П., Маляк Н., Погорелов В. Повышение активности дрожжей // Харчова и перерабатывающая промышленность, 1997. -№7.с.122.

33. Авторское свидетельство СССР №4044845, Мкл С12 N 13/00 В.А. Ермаченко, Ф.И. Братская, Т.В. Русанова, К.Е. Круглякова.

34. Шестаков С.Д., Волохова Т.П. Новая эффективная технология активации хлебопекарных дрожжей. Хлебопечение России 2000, №6, С. 33-34.

35. Кухаренко A.A. Исследование эффективности применения ультразвука в технологических процессах с иммобилизованными клетками // Аграрная наука, №1, с.23-27,2000г.

36. Акопян В.Б. Лечит ультразвук. М. Колос, 1983 г.43 .Burton Н. Sterile milk. -Journal of Society of Deiry Technology. 1958, vol.11,№4.-P.173

37. Godon В., Petit L. Action des ultrasouns sur les propriétés physicochhimigue de gluten. Ann. Technol. Agr., 1967. P.205-216.

38. Samec M. Einflusse von cammastrahlen und Ultraschall an die Starke. 1960. Bd.l2,№6K>-P.165-169

39. Anderson T.F/ Effect of ultrasonic radiation on growth und fermentation in the yeast Saccaromyces cerevisiae. Biochem. Et biophys. Acta. 1955,№11.-p. 122

40. E.A. Nappiras, D.E. Hughes высказывают мнение, что свободные радикалы, возникающие в жидкости, действуют на клетки и ослабляют их в местах наиболее легких разрывов.

41. Nappiras Е.А., Hughes D.E Some exsperimente on the disintegration of yeast by high Entesity Ultrasound Biotechnologu and Bioenginering, 1964.-P.247-270

42. Berns V.W. Effects of sonic irradiation on Jeast radiation, 1967, №7.1. P.21-36

43. Y. Hrasdira объясняет бактерицидное действие ультразвука степенью повреждения клетки.

44. Hrasdira J. Current opinions the biological effect of ultrasound scripta medica,1975, t.48

45. Хлебопечение России. №4,2001г.

46. Godon В.,Petit L. Action des ultrasons sur les propriétés phusicochimigue de gluten. Ann. Technol. Agr., 1967.16,3.- P.205-216

47. Шестаков С.Д., Волохова Т.П. Новая эффективная технология активации хлебопекарных дрожжей.// Хлебопечение России 2000, №6.- с. 33-34

48. Ермаченко В.А., Братнская Ф.И., Русанова Т.В., Круглякова К.Е. Авторское свидетельство №404845, Мкл С12 N13/00, 1974г.

49. Канцнельсон P.C., Хенох M.A. Влияние ультразвука на дрожжи. ДАН СССР, 1951.-76.-С 133.

50. Мейсель М.Н., Гальцева Р.Д. Влияние ультразвуковых волн на содержанеи стеринов в дрожжевых организмах // Общая биология. 1956, с. 17.

51. Семихатова Н.М., Малыгина М.В. и др. производство дрожжей. М.: Пищевая промышленность, 1970. 151с.

52. Anderson T.F. Effekt of ultrasonic radiation on growth und fermentation in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Biochem. Et. Acna. 1955, №Ию-з. 122.

53. Beckwith T.D., Olson D.R Ultrasonic Radiation and Jeast cells. Puk. Soc. Exp. Biol. Med., 1931. -№29ю- \рю21-36

54. Уварова И.И. Исследование влияния акустической обработки на качество жидких полуфабрикатов и хлеба из пшеничной муки. Дисс. К.т.н. М.-1979. с.201.

55. Ермаченко Е.А., Брагинская Ф.И., Русанова Т.В. Кинетические характеристики изменения дрожжевых клеток под действием ультразвуковых волн. М.: Изв. АН СССР, Сер.биол. - 1972.- №3, С.18.

56. Ермаченко Е.А., Брагинская Ф.И., Русанова Т.В.Интенсификация процесса брожения дрожжей в хлебопечение с помощью ультразвука. -Хлебопечение и кондитерская промышленность, 1974, №5. С.28.

57. Lepeschkin W, Goldman D. Cell Jeast. 1952 сотр. pusiol., 40.383p.

58. Медведева Г.А., Эльпинер И.Е. Действие ультразвуковых волн на дрожжевые клетки.// Общая биология.- 1955. -315с.

59. Мазур П.Я. Повышение активности хлебопекарных дрожжей// Хлебная и кондитерская промышленность. 1980, №1. С. 32-33.

60. Система измерения нелинейнейных диэлектрических свойств дрожжевых клеток // Hironobu Yjshitake, Masafumi Muraja, Wataru Tatebe //Denki Gakkai Rouburshi. A. Kiso Zairyo kyotsu = Trans. Jnst. Elec. Eng. Zap. A./1998. 118, №10. -C. 1124.

61. Активация дрожжевых клеток Saccharomyces cerevisiae // Успехи современных естествознаний, 2003, №3, с. 74-75.

62. Влияние электромагнитного поля на микробиологические и биохимические процессы при производстве виноматериалов. Шакун М.М. Изв. Вузов. Пищев.технол. 2005, № 2-3, с.16-19

63. Давидков Д.С., Данилов В.М., Пейкова С.П. Культивирование дрожжей в магнитном экране. // Труды объединенного института ядерных исследований.-Дубна. 1983. -С.8.

64. Губиева Ю.К., Марутян A.A., Ленная А.И., Узиков А.Н., Красников В.В. Способ активации дрожжей //Авторское свидетельство № 588234.1978. БЮЛ №2.- С. 77.

65. Кислая Л.В., Караченцева А.Д., Маринченко В.А. Авторское свидетельство СССР №1564189, Кл. С12 N 13/00,1990г.

66. Пасынский А.Г. Биофизическая химия.// -М.: Высшая школа, 1968. -432с.

67. Рогатых Н.П. Эффект малых доз излучения в популяции хлореллы// Авт. дис. к.б.н. М.1970 - 23 с.

68. Zeug Yunzhong, Wu Xuechaug, Tin Shau Zhu Xiaping, Cheu Shivi. Hangzhou daxue xuebao. Ziran kexue ban // Т. Hangzhou Univ. Natur. Sei. Ed. 1992. -19.-№Зю- С. 327-335

69. Linguist S.L.& Graid E.A. The heat shock proteins // Annual Review of Genetics, 1988, №22, pp 631-677;

70. Schlessinger M.J. Heat shock proteins // Journal of Biological Chemistry, 1990, №265, pp. 12111-1211

71. Жвирблянская А.Ю, Исаева B.C. Дрожжи в пивоварение. -М: Пищевая промышленность, 1979.

72. Менх Д., Крюгер Э., Шталь У. Обработка термошоком семенных дрожжей способ ускорения брожения - Brauwelt.-1996. №4 С.84-85.

73. Тимошкина Н.Е., Кречетникова А.Н., Ильяшенко Н.Г., Шаненко Е.Ф., Гернет М.В., Крадяшкин В.В. Способ обработки дрожжей. Патент №2104302, Россия, с. 12 № 1/16, опубл. 27.02.01, Бюл. №4.

74. Хранение и переработка сельскохозяйственного сырья. №1,2003г.

75. Абрамов Ш.А., Котенко С.Ц., Исламова Ф.И. Цитоморфологические и биотехнологические изменения дрожжей Saccharomyces cerevisiae в результате лазерного воздействия // Хранение и переработка сельхозсырья, 1999, №5.

76. Абрамова Ш.А., Котенко С.Ц., Исламова Ф.И. Цитоморфологические и биотехнологические изменения дрожжей Saccharomyces cerevisiae в результате лазерного воздействия // Хранение и переработка сельскохозяйственного сырья. 1999. - №5 - с. 28-30.

77. Карпенко В.И. Улучшение процесса размножения дрожжей методом электрохимической активации. -М, 2000, с. 15-24

78. Шабурова Г.В. Интенсификация производства пива путем фотостимуляции метаболизма дрожжей. Автореферат дис. К.т.н.- М, 1984г. -24С.

79. Старостина И.Н. Разработка способа активации дрожжей рода Saccharomyces cerevisiae с использованием электро-ионной технологии. -Автореферат дис. к.т.н.-М.: 1998.-25с.

80. Ильяшенко Н.Г., Гранкина Е.И. Исследование возможности активации дрожжей в спиртовом производстве.// Международная научно практическая конференция «Молодые ученые пищевой и перерабатывающей промышленности отраслей АРК; Москва, 1997, с. 1112.

81. Глущенко H.A. Назаров Н.И, Остапенков A.M. Влияние ионной обработки на активацию и сохранность дрожжей. // Пищевая технология 1976г., №6. С.82-84.

82. Бородина В.М, Федорова Л.И., Абидора И.Г., Зеленина А.В. Авторское свидетельство СССР № 1514777, Мкл С12 13/00, 1987г.

83. Гандзюк М.П. Влияние физического воздействия на процесс биосинтеза дрожжей. -М.: ЦНИИТЭПищепром, 1975,20с.

84. Влияние аэроионной обработки на репродуктивную способность хлебопекарных дрожжей. Ламисамов В.И., Леотчек П.Н.// Хранение и переработка сельхоз сырья. 1993, №1.-С.6-7.

85. Авторское свидетельство СССР №554280, Мкл C12N 13/00, 1977.

86. ЮО.Поландова Р.В., Шестаков С.Д., Волохова Т.П. Анализ методовактивации хлебопекарных дрожжей и альтернативный вариант.// Хранение и переработка сельскохозяйственного сырья. 2000. -№8 -с. 19-22.

87. Ю2.0рмоцадзе М.Л. Активация путем лазерного воздействия. GEN: Georg Eng. News. 2003, №2, с. 163-165.

88. ЮЗ.Гандзюк М.П. Влияние физического воздействия на процесс биосинтеза дрожжей. -М.; ЦНИИТЭПищепром, 1975г., 20с.

89. Ю4.Корячкина С.Я., Бобров А.В. Способ интенсификации процесса брожения. Патент 2226832, Россия, МПК7 А21 D 8/02, С12 N 1/16, 1/18., № 2001123496/13

90. Ю5.Фрайкин Г.Я. Механизмы УФ-индуцируемых деструктивных и фотодифицитных реакций оптического излучения. М.:Наука, 1988, С. 154164.

91. Tyrell R.M. Radiation sinirgism and antagonism.// Photochem. Photobiol. Reviews. (K.C. Smith, etc.) N.Y.: Plemem Press., 1978, v. 3, P. 3543

92. Franikin. G. Ya., Pospelov M.E., Rubin L.B. Enhancement of the far-UV lethality in jeast Candida gniliermondii by near-UV post-irradiation. Potobiol.1980. V.31. p.87-88.

93. Ю8.Мусил Я., Новакова О., Кунц К. Современная биохимия в схемах. // М.: Мир, 1981. - 214с.

94. Григорьева Н.П., Титухина И.А., Симонова. Активация дрожжей Saccharomyces cerevisiae дикарбоновыми кислотами // Материалы Всероссийской научно-технической конференции посвященной 50-ти летию высшего образования в г. Тольятти.

95. ПО.Зельдич Э.А., Есипов Ю.К. Способ активации дрожжей. Патент: 2102471 Россия МПК6, С12 N 1/18. Заявл. 21.07.95. Опубл. 20.01.98. Бюл. №2.

96. Куприянова-Амина Ф.Г., Катаков А.И., Луцкая и др. Влияние РНКазы Bacillus intermedins на рост культуры дрожжей Saccharomyces cerevisiae // Прикладная биохимия и микробиология, 1996, том 32, №2, с.254-259.

97. Ш.Ермолаева Г.А. Основные процессы пивоварения. Брожение пивного сусла. //Пиво и напитки, 2000, №6,с.12-14.

98. ПЗ.Щигаева М.Х., Ахмадуллина Н.Б., Джангалина Н.К., Мустафин К.Г. Стимуляция жизнедеятельности микроорганизмов и вирусов.// Алма-Ата: Наука. 1986. - 184 с.

99. Alvares R., Enriguez A. Nucleic acid reduction in yeast. Appl. Microbiol. Biotechnol., 1988, V.29, №2-3, p. 208-210.

100. Ш.Коновалов C.A. Биохимия дрожжей. M.: Пищевая промышленность, 1980. - С.З.

101. Пб.Кудряшева А. А. Натуральные биокорректоры и их использование в современных условиях// Международная научно практическая крнцеренция.- Волгоград, 1999. -С 357-374.

102. Smileu K.L. Continuous conversion of starch to glucose with immobilized glucoamilaze/Biotechnologu, 1971.-V13.-p 309-317.

103. Lee Y.Y., and Tsao G.T. Mass transter characteristics of immobilized enzymes/ J.Food Sci., 1974. V.39.- p.667-672

104. Патент 43834 Япония, С12 Derment Japanese patents reports. -1972.-1972.

105. Патент 2959318 Франция, C12 d. 1971121 .Патент 208532 Япония, Мки С12 а -1970

106. Alemohammad М.М., Knowles C.J. Osmotically induced volume and turbidity changes of E. coli due salts, sucrose and glycerol, with particular reference to the rapid permeation of glycerolin to the cell.- J. Gen. Microbiol., 1974. v.82, рю125-142

107. Reyes F., Lahoz R., val Morenj A.-J. Gen. Microbiol., 1980, v.26, p.1120

108. Holzer H., Heinrih P.C.- Ann. Rev. Biochem., 1980,v.49, №63

109. Rueellinge The nutritional reguirements of yeast.// Brewers Guardian, November, 1997.- P.34-38

110. Мелетьева A.E. Исследование автолизата пивных дрожжей и влияние добавки автолизата на созревание пива // Диссертация к.т.н. -Киев, 1969, с.5

111. Плахова Г.С., Яковлева Л.Г., Шишкова Ю.И., Терешина Э.В. Питательная добавка для пивных дрожжей, способ ее получения, способ производства пива. Патент №212959, Россия, С 5/02, 11/00, 12/00, опубл. 27.04.99. Бюл. №12

112. Новаковская С.С., Шишацкий Ю.И. Справочник по производству хлебопекарных дрожжей // М.: Пищевая промышленность 1980.-С. 63-69.

113. Ш.Патент 2104300 МПК С12 N1/16 способ получения белкового гидролизата дрожжевой биомассы. Римарева Л.В., Оверченко М.Б., Трифонова В.В. Заявлен 26.01.96., Опубл. 10.02.98,Бюл.№4.

114. Патент 2987531 МКИ С12 N 1/16, 1/18. Способ получения биологически активного продукта переработки дрожжей/ Латов В.К., Бабаян Г.Л., Кочан А.С., лужков Ю.М. и др. № 96109949, Заявл . 28.05.96., опубл. 20.08.97. Бюл.№23.

115. Sendra J.M., Tobov, Pinaga F., Izgvierdo L., Carbonell S.V. Evalution of the effects of yeast strain Fermentatoin condition on the volatile concentration protiles of pilot plan lager beers //monatsschr. Bravwiss 1994.-47,№10.- P.316-321.

116. Дерканосов Н.И., Чувашека K.K. Способ выращивания хлебопекарных дрожжей // Авторское свидетельство №553039. 1977. Бюл. №18. -С.63

117. Geneix С., Lafon Lafourcade S., Rilereau - Gayon P. Les causes la prevention et la tratemeut des arrest de la fermentation alcooligue. - Gannaiss Vigne vin., 1983,17,№ 3, p.p. 205-217.

118. Geneix C., Lafon Lafourcade S., Rilereau - Gayon P. Jnidition of alcoholic fermentation of grape must by fatty acids produced by yeast and their elimination by yests - ghosts. - Appl. Environ. Microbiol., 1984,47, p. 1245/

119. Geneix C., Lafon Lafourcade S., Rilereau - Gayon P.Larue F., Park M. Incidence de cerfains polysaccharides insolubles sur la fermentation alcooligue - Connaiss. Vigne. Vin., 1985,19, №1, p.p. 41-52.

120. Акопян В.Б., Вольфович Д.И., Вольфович Л. Д. Способ получения пищевого биологически активного продукта переработки дрожжей. Патент 2195846. Россия МПК A 23L1/30. № 2000119882/15.

121. НО.Гасанов А.О., Карпенко Д.В., Гернет М.В. Влияние препарата ОД-2 на развитие дрожжей.// пиво и напитки, 2000, №5, с. 32-33.

122. Дмитриев К.С., Фидулов А.М, Акопян A.A., Березин A.B. Способ приготовления дрожжей. Заявка 99104655/13. России, МПК7, С12 N 1/16, №99104655/13; Заявлен 01.03.99; Опубл. 10.01.01.

123. Голубев В.Н., Жиганов И.П. Пищевые биотехнологии, М., ДеЛи принт, 2001, с.72-73

124. Гернет М.В., Лаврова В.Л., Корнее А.Д., Лямин М.Я., Зайцев С.И. Способ активации дрожжей. Патент 2145351 Россия МПК6 С12 N 1/16-1/18; №99118028/13. Заявл. 24.08.99. Опубл. 10.02.00. Бюл. №4

125. Батяева С.Я., Гернет М.В. Влияние Спируллины платенсис на физиологическое состояние дрожжей // Производство спирта и ликероводочных изделий, 2003, №2, с.31-32.

126. Шабурова Л.Н., Ильяшенко Н.Г., Садова А.И., Гернет М.В., Хныкин A.M. Способ активации дрожжей. Патент: 2151794 Росссия МПК7 C12N1/16, С12 1:865, МГУПП №99101648/13. Заявлен 29.01.99. Опубл. 27.07.00. Бюл. №18.

127. Левицкий А.П., Вовчук С.В, Макаренко O.A., Соловьев В.П. Способ получения стимулятора роста дрожжей. Патент: 2050416 Россия МПК6 C12N1/16; Одесский биотехнологический институт № 5050739/13. Заявл. 30.06.92; Опубл. 20.12.95. Бюл №35

128. Лысянский В.М., Гребенюк С.М.Экстрагирование в пищевой промышленности. -М.: Агропроиздат, 1987-188с.

129. Дрожжевой экстракт. Вовнячко Е., Руда В., Янчевский В., Корзун, Сагло В.// Пищевая и перерабатывающая промышленности. -1993, №9. -С.6 Украина

130. Способ получения дрожжевых экстрактов. Патент 2007928 Россия, МКИ5 А23 J1/18. Безруков М.Г., Солошенко В.М., Ковалев А.П.; Мовсковский институт прикладной биотехнологии. №5005742/13; Заявл 09.07.91; Опубл. 28.02.94

131. Способ получения витаминоаминокислотного концентрата. Заявка 96113479/13 Россия. Московский В.Д., Коптелов М.М. и др.; ОАО « Дрожжевой завод». Опубл 10.01.98.

132. Способ получения пищевого биологически активного продукта переработки дрожжей. Патент 2087531 Россия. Латов В.К., Бабаян T.JI. № 96109949/13. Опубл. 20.08.97

133. Разработка технологии дрожжевых лизатов в поле ультразвуковых волн для интенсификации биотехнологическим процессов. Автореферат дис. К.т.н. 05.18.07/ РБ Киев/ Национальный университет харчовых технологий.- К, 200ю-18 с.

134. Rehacek J./ Dasek J. // Pat. 2 075 054 (Великобритания). 1981.

135. Головач И.Н., Жураковская Г.П., Комарова JI.H., Петин В.Г. // Акустический журнал.1998. Т. 44. №3. С. 354-357.

136. Жвирблянская А.Ю., Исаева B.C. Дрожжи в пивоварении. М.: Пищевая промышленность, 1979. 247с.

137. Берри Д. Биология дрожжей М.: Мир, 1985.-95с

138. Решетник O.A. Лабораторный практикум по курсу «Общая микробиология». 1984. -Казань: КГТУ, 1984.-67с.

139. Karamfilov V.K., Fileman T.W., Evans K.M. Determination of Dimethhoate and Fenitrothion in Eustuarine Samples by С-18 solid-Phase

140. Extraction and High-Resolution Gas-Chromatography With NitrogenPohsphorus Detection// Anal chim acta.-1996.-V.335,Iss.l-2.-P.51-61.

141. Schneider R.J. Evalution of Extractiuo method for Triazine Herbicides from Soils for Screening Purposes// Agribiol res.-1995.-V.48, Jss. 3-4.-P. 193-206.

142. Sawazumi M., Maruyama Y., Onishi K. Endoscopic Extraction of Lipomas Using an Ultrasonic Suction Scalpel// Ann plastic surg.-1996.-V.36, Js.2.-P.124-128.

143. Manoli E., Samara C. Polycyclic Aromatic-Hydrocarbons in Waster-Waters and Sewage-Sludge-Extractiun and Cleanup for HPLC Analysis With Fluorescence Detection//Chromatographia .-1996.-V.43, Iss.3-4.-P. 135-142.

144. Harrtmann R. Polycyclic-Hydrocarbons in Forest Soils -Critical-Evalution of a New Analytical Procedure// Int j environ anal chem./-1996.-V.62, Jss.2.-P.161-173.

145. Engels W.J. Development of Chesse Flavor from Peptides and AminoAcids by Cell-Free-Extracts of Lactococcus-Lactis Subsp Cremoris B78 in a Model System// Neth milk dairy.-1996. V.50, Iss.l.-P.3-17.

146. Korolev S., Samgo O. Eldarov M. Site -Specific Endonuclease Bcuai from Bacillius-Cereus-A// Bioorg khim.-1996. -V.22, Jss.7.-P.528-553.

147. Mierzwa J. Ultrasound Accelerated Solid-Liguid Extraction for the Determition of Selenium in Biological Samples by Electrothermal Atomization Atomic-Absorption Spectrometiy//Anal sci.-1997.-V.13, Jss.2.-P.189-193.

148. Горетова О.В. Интенсификация процессов производства пива путем активации засевных дрожжей. Автореферат. Дис. К.т.н. - М.: МТИПП, 1983. -22с.

149. Рухлядева А.П., Полыгалина Г.В. Методы определения активности гидролитических ферментов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983-228С.

150. Градова Н.Б., Бабусенко Е.С., Горюнова И.Б. Лабораторный практикум по общей микробиологии. М.: ДеЛи принт, 2001 - 132 с.

151. Полыгалина Г.В. Техно-химический контроль спиртового и ликеро-водочного производства. М.: Колос, 1999, - с. 150.

152. Слюсаренко Т.П. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых производств.- М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984.-203с.

153. Полыгалина Г.В., Чередниченко B.C., Римарева Л.В. Определение активности ферментов -М.: ДеЛи принт, 2003, с. 121.

154. Скард И., Лагановский С. Влияние ультразвука на микрофлору молока// Изв. АН Латв. ССР, 1959, №8, с. 123.

155. Эльпинер Л.И. Новые материалы по обеззараживанию воды ультразвуком // Гигиена и санитария, 1960, №11, с.8.

156. Bachmann J. А. // US Patent № 2086891,1937.

157. Cruz O.R., Perez-Gonzalez P.V. The use of cavitation for the sugarcane juices // cuba Azúcar, 1986, april/june, pp. 15-18.

158. Gaboriaud P.L. Method for continuous sterilization of liguids, particularly milk, by ultrasound // France , Demande de breved dinvention № 2576641, Int/ CI. A23L 3/30,1986.

159. Гершгол Д.А., Фридман B.M. Ультразвуковая аппаратура. -М.: Госэнергоиздат, 1961.

160. Chamberlain С J. Jpportunities for ultrasonics// Food Processing, 1983. v. 52, №10, pp.35-37.

161. Сарвазян А.П. Биологическое действие ультразвука. Тезисы докладов 3-й Всесоюзной конференции, Ташкент, 1980, с.14-20.

162. Боев В.Ф. Использование акустических колебаний для интенсификации процессов обработки воды в системах водоподготовки// «Ультразвуковые технологические процессы». М.: МАДИ.-1998.С.73-76.

163. Шавел Я. Факторы стресса для дрожжевых клеток// Пиво и напитки, 2001. №1. -С.24.

164. Акопян В.Б. Лечит ультразвук. М.: Колос, 1983. С.115.

165. Schultes Н. Angev. Chem., 49,420 (1947)

166. Szalay A. Phys, 35,293 (1934)

167. Hartmann J., Theismann H., Naturwies., 35,346, (1948)

168. Beckwith T.D., Olson A.R. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 29,362 (1931)

169. Beckwith T.D., Weaver C.E. Bacterial. 32,361 (1936)

170. Enler H.V. Skarzyrski B. Naturwies 31 (1943)

171. Funk Hekmann, Rucker Hinrich, Fink Walter Biochem. Zs, 324,1,36-40(1953)

172. Третьяков Л.И. Исследование воздействия низкочастотных звуковых колебаний на химический состав и синтетическую спосбность кормовых дрожжей. Диссер. на соиск. уч.степ. к.т.н., Алма- Ата, 1963

173. ГОСТ 30536-97 Водка и спирт этиловый. Газохроматографический метод определения содержания токсичных микропримесей.

174. ГОСТ 13586-85 Зерно. Метод определения влажности.

175. ГОСТ 10840-64 Зерно. Метод определения натуры.

176. ГОСТ 10847-74 Зерно. Метод определения зольности.