автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.04, диссертация на тему:Изучение закономерностей синтеза и разработка технологии концентрата наночастиц нульвалентного селена для новых профилактических продуктов

На правах рукописи

005049962

Мирошниченко Михаил Владимирович

ИЗУЧЕНИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТЕЙ СИНТЕЗА И РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ КОНЦЕНТРАТА НАНОЧАСТИЦ НУЛЬВАЛЕНТНОГО СЕЛЕНА ДЛЯ НОВЫХ ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ ПРОДУКТОВ

Специальность 05Л8.04 - «Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств»

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

14 ФЕВ 2013

Ставрополь — 2013

005049962

Работа выполнена на кафедре прикладной биотехнологии ФГАОУ ВПО «Северо-Кавказский федеральный университет»

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

доктор технических наук, профессор, академик Россельхозакадемии Храмцов Андрей Георгиевич

Молочников Валерии Викторович

доктор биологических наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Ставропольский

государственный аграрный университет», кафедра технологии производства и переработки с/х продукции, профессор

Полянский Константин Константинович

доктор технических наук, профессор, Московский государственный торгово-экономический университет (Воронежский филиал), кафедра коммерции и товароведения, профессор

ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет», г. Краснодар

Защита состоится «28» февраля 2013 г. в 13-00 на заседании диссертационного Совета Д 212.245.05 при Северо-Кавказском федеральном университете по адресу: 355009, г. Ставрополь, ул. Пушкина, 1, корп. 3, ауд. 506.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ФГАОУ ВПО «Северо-Кавказский федеральный университет».

С авторефератом диссертации можно ознакомиться на сайтах СКФУ wvvw.ncfu.ru и ВАК РФ министерства образования и науки РФ www.vak.ed. цоу.ru/ru/dissertation/

Автореферат разослан «28» января 2013 г.

Ученый секретарь .

диссертационного совета Д 212.245.05 фр^^

доктор технических наук, профессор 0 Шипулин Валентин

Иванович

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Мониторинг состояния здоровья населения России, проведенный по инициативе НИИ Питания РАМН, выявил массовые распространения полигиповитаминозов, сочетающихся с дефицитом ряда минеральных веществ (кальция, железа, йода, селена и др.). В частности, в Ставропольском крае отмечается дефицит таких эссенциальных микроэлементов, как марганец, цинк, селен, хром и железо, что, вероятно, является отражением местных эколого-гигиенических и социальных особенностей. Особого внимания при этом заслуживает эссенциальный микроэлемент селен.

Адекватное потребление селена имеет важное значение в поддержании баланса экспрессии многочисленных Бё-зависимых микросомальных ферментов, обеспечивающих биотрансформацию различных ксенобиотиков. В целом селен называют важнейшим генопротектором, который блокирует повреждения ДНК продуктами перекисного окисления липидов, металлами и регулирует процессы их системной элиминации в организме.

Значительный вклад в развитие комплексных научных исследований о биологических функциях, метаболизме и механизмах действия эссенциальных микроэлементов, в частности селена, внесли Богатырев А. Н., Тутельян В. А., Скальный А. В., Горлов И. Ф., Мазо В. К., Гмошинский В. К., Голубкина Н. А., Ииуе }. и другие.

Наиболее эффективным и экологически доступным способом улучшения обеспеченности населения эссенциальным микроэлементом -селеном - является дополнительное обогащение им продуктов профилактического питания до уровней, соответствующих физиологическому потреблению.

В России до недавнего времени наиболее часто используемой неорганической формой селена являлся селенит (8е+4). Однако невысокий биологический эффект и возможность токсикозов животных и птиц при передозировках предопределили поиски других производных селена и в

первую очередь природных. При этом наиболее перспективным является применение ' нульвалентного селена с размером наночастиц 20-70нм. Основное его преимущество, по сравнению с другими формами селена, заключается в «размерном эффекте», проявляющемся в том, что наночастицы являются биологически более активными и лучше накапливаются в тканях. Широкое использование наночастиц нульвалентного селена сдерживается слабой изученностью закрномерностей поведения наночастиц селена при использовании в качестве пищевой или кормовой добавки, а также отсутствием на рынке товарных форм.

В связи с этим разработка научно-обоснованной технологии концентрата наночастиц нульваленного селена (КННС), изучение закономерностей его сорбции основными компонентами молочного сырья и обогащение им молочной и мясной продукции профилактического назначения является актуальной и востребованной.

Цель и задачи исследований

Целью диссертационной работы является' исследование закономерностей синтеза наночастиц (кластеров) нульвалентного селена с разработкой инновационной технологии концентрата для использования в кормовых добавках и продуктах питания профилактического назначения.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- установить закономерности и оптимизировать процесс синтеза наночастиц (кластеров) нульвалентного селена с использованием метода математического планирования эксперимента;

- исследовать попарное влияние значимых параметров дисперсионной среды на размер наночастиц нульвалентного селена;

- определить состав, физико-химические, токсикологические свойства и структуру КННС;

- разработать принципиальную технологическую схему производства КННС;

- оценить влияние КННС на продуктивность и биохимические показатели цыплят-бройлеров;

- изучить закономерности сорбции наночастиц нульвалентного селена основными компонентами молочного сырья и провести компьютерное

моделирование процесса взаимодействия наночастицы селена с казеином

■ ■ I

молока; ,

- разработать научно-технические основы новых продуктов на примере «Молочного напитка профилактического, обогащенного селеном»;

- провести анализ экологической безопасности и экономической эффективности разработанных технологий.

Научная новизна

| - теоретически обоснована и экспериментально : доказана целесообразность обогащения продуктов питания эссенциагтьным микроэлементом селеном в виде его концентрата нульвалентных наночастиц;

, - изучены закономерности процесса синтеза КННС и исследованы его физико-химические, токсикологические и биохимические свойства;

- методом компьютерного молекулярного докинга в среде программы А^оБоск доказан эффект взаимодействия молекулы казеина с наночастицей селена и обогащение селеном молочной продукции;

- установлено положительное влияние разработанного концентрата на продуктивность и биохимические показателе цыплят-бройлеров, а также яйценоскость кур-несушек. 1

Новизна технического решения подтверждена патентом РФ на изобретение № 2392944 «Препарат для лечения и профилактики нарушения обмена селена для сельскохозяйственных животных».

Практическая значимость. Разработана технология концентрата наночастиц нульвалентного селена «Экстраселен», подготовлен и утвержден стандарт организации (СТО 02067965-006-2011). Произведена опытно-промышленная выработка «Экстраселена» в условиях ООО НПФ «Виктория+».

Подготовлен и утвержден стандарт организации на напиток молочный профилактический, обогащенный селеном (СТО 02067965-007-2011). Произведены опытно-промышленные выработки напитка молочного профилактического, обогащенного селеном, в условиях ООО «Провинция».

Инновационные приоритеты работы:

— исследование закономерностей синтеза й разработка способа получения концентрата наночастиц (кластеров) нульвалентного селена;

— разработка инновационных технологий . новых профилактических продуктов, обогащенных эссенциалъным микроэлементом селеном.

Апробация работы. Основные положения, изложенные в работе, докладывались и обсуждались на XII региональной научн.-техн. конф. «Вузовская наука - Северо-Кавказскому региону» 2008 год, XIII науч.-техн.

I

конф. «Вузовская наука - Северо-Кавказскому региону» и XXXIX научн.'-техн. конф. по итогам работы профессорско-преподавательского состава СевКавГТУ за 2009 год, Междунар. науч.-практ. конф. «Инновационные технологии и оборудование в молочной промышленности» г. Воронеж, 2010 г., XIV региональной научн.-техн. конф. «Вузовская наука - СевероКавказскому региону» 2010 г., Междунар. науч.-практ. конф. «Инновационные технологии продуктов здорового питания, их качество и безопасность» г. Алматы, 2010 г. ,

Публикации. По материалам научных исследований опубликовано 12 печатных работ, в том числе 3 в рецензируемых ВАК РФ журналах. |

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, 5 глав, выводов, списка литературы, содержащего 119 наименований источников, и 8 приложений. Работа изложена на 138 страницах машинописного текста, содержит 28 таблиц и 30 рисунков.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность выбранного направления исследования, показана его научная новизна и практическая значимость; сформулирована цель работы и основные положения, выносимые на защиту.

В первой главе «Анализ состояния вопроса и задачи исследований»

представлен аналитический обзор патентной и научно-технической литературы по вопросам обогащения пищевых1 продуктов, в частности молочных и мясных, эсенциальными микроэлементами и в первую очередь селеном. Показаны медико-биологические свойства селена. Критически проанализированы неорганические и органические селенсодержащие препараты, а также наноселен в нульвалентном состоянии. Рассмотрены способы получения и анализа концентратов, содержащих агрегативно-устойчивые наночастицы нульвалентного селена. По результатам анализа литературных данных сформулированы задачи научной работы.

Во второй главе «Организация, объекты и методы проведения исследований» представлена схема проведения исследований (рис. 1), дана характеристика объектов исследования и условий проведения опытов, приведены методы исследований и обработки экспериментальных данных.

В качестве объектов исследования использовались: питьевое молоко с массовой долей жира 3,2 %, натуральная молочная сыворотка (подсырная и творожная), селенистая кислота (H2Se03) ч.д.а. по ГОСТ 11081-75;

аскорбиновая кислота (C6Hs06) по ФСП 42-3268-08; поливинилпирролидон

1

низкомолекулярный медицинский 8000±2000 по ФСП 42-0345-4368-03.

При проведении исследований использованы следующие методы анализа: размеры частиц - методом фотонно-корреляционной спектроскопии; морфология наночастиц селена - методом просвечивающей электронной микроскопии; массовая доля селена методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой; раман-спектры (спектры KP) образцов наноселена были получены на спектрометре комбинационного рассеивания; определение массовой доли сухих веществ, жира и белка проводилось стандартными методами. Полученные результаты исследований обработаны с помощью пакета прикладных программ Neural Networks v.4.0e, а также методами математической статистики Statistica 6.0.

Рисунок 1 - Схема проведения исследований

В третьей главе «Теоретическое обоснование синтеза концентрата наночастиц нульвалентного селена для обогащения продуктов профилактического назначения» показано, что необходимость обогащения новых продуктов питания витаминами, а также эссенциальными макро- и микроэлементами продиктована объективными экологическими факторами, Связанными с изменением состава и пищевой, ценности используемых продуктов питания, а также с трансформацией образа жизни современного человека. Пищевые продукты функционального питания, обогащенные физиологически полезными пищевыми ингредиентами, к которым, наряду с витаминами, живыми молочнокислыми бактериями, биофлаваноидами и пищевыми волокнами, относятся эссенциальные микроэлементы и в первую очередь селен.

В соответствии с рекомендациям ГУ НИИ питания РАМН по уровню адекватного потребления селена (70 мкг/сутки) и с учетом сравнительно низкого содержание селена в коровьем молоке (-30 мкг/л) в диссертационной работе проведены предварительные расчеты, показывающие целесообразность проведения мероприятий по обогащению профилактической молочной продукции эссенциальным микроэлементом селеном до 125 мкг/л готовой продукции, без учета фонового содержания селена в молоке.

Особый интерес представляет использование селена в кормовых добавках для бройлеров или кур яичного направления с целью обогащения этим эссенциальным микроэлементом профилактической мясной продукции и яиц.

Теоретически для обогащения диетической молочной и мясной продукции следует использовать биодоступные и малотоксичные производные селена, которые позволят при минимальном обогащении продукции достичь уровня, соответствующего физиологическому потреблению. '

Сравнительный анализ химических форм селена, используемых для обогащения ■ продуктов питания, показывает, что неорганические производные селена характеризуются высокой токсичностью и низкой биоусвояемостью, а органические производные селена, как правило, являются водонерастворимыми и дорогими. Следовательно, необходимы другие формы селена, проявляющие высокую биоусвояемость и низкую токсичность. Такой формой является селен, находящийся в нулевой степени окисления (нульвалентный) ri имеющий размеры 20 - 70 нм, т. е. нано-размеры. Агрегативная устойчивость наночастиц нульвалентного селена обеспечивается за счет оболочки, представляющей собой высокомолекулярное соединение, в качестве которого может быть использован либо сывороточный альбумин, либо поливинилпирролидон (ПВП). В диссертационной работе в качестве стабилизатора НЧНС был использован ПВП, обладающий гидрофильными свойствами. С целью прогнозирования закономерностей распределения селена в молочном сырье в работе было проведено компьютерное моделирование процесса взаимодействия (молекулярный докинг) наночастиц селена с основными компонентами молочного сырья. Учитывая гидрофобные свойства молочного жира, а также размер молекул лактозы и ионов солевой системы молока, эти ингредиенты были исключены из рассмотрения. В итоге молекулярный докинг был проведен с компонентами молочного сырья, имеющими гидрофильные свойства и сходные размеры. Этим условиям полностью удовлетворяли мицеллы казеина и жировые шарики.

Теоретически можно предположить, что взаимодействие, наночастиц селена с казеином будет сводиться непосредственно к реакции к-казеина с макромолекулой поливинилпирролидона, который является стабилизатором наночастиц селена. Информация о структуре каппа-казеина была загружена с сайта http://www.arserrc.gov/CaseinModels/ в виде текстового файла, который в дальнейшем был преобразован в pdb-формат и открыт с помощью программ HyperChem, ChemBio3D Ultra 12.0 и AutoDock.

На рис. 2 показана трехмерная модель молекулы к-казеина в разных ракурсах и программах (HyperChem, ChemBio3D Ultra 12.0 и AutoDock).

Рисунок 2 - Визуализация молекулы каппа-казеина в среде программ: a) HyperChem 8.0.6; б) ChemBio3D Ultra 12.0; в) AutoDock

На следующем этапе было проведено компьютерное моделирование фрагмента поливинилпирролидона в пакете прикладных программ НурегСЬеш 8.0.6 и АШоОоск. Результаты приведены на рис. 3.

^ а) б) в)

Рисунок 3 — Фрагмент макромолекулы поливинилпирролидона (п=9) после

геометрической оптимизации и расчета электростатического потенциала в среде программ: а), б) НурегОтет 8.0.6; в) АШоОоск

Хорошо видно, что атомы кислорода пирролидонового кольца локализованы на поверхности макромолекулы поливинилпирролидона в виде спирали и формируют область повышенной электронной плотности. При взаимодействии с казеином именно здесь велика вероятность образования связей с гидрофильным сайтом каппа-казеина и концентрирование селена в белковом концентрате. Для уточнения природы образовавшегося комплекса Каппа-казеин-поливинилпирролидон было проведено молекулярное моделирование этого процесса, т. е. молекулярный докинг, который проводился методом поиска локального минимума энергии взаимодействия между белком и лигандом, в качестве которого был выбран фрагмент макро молекулярной цепи поливинилпирролидона.

Результаты молекулярного докинга представлены на рисунке 4.

Рисунок 4 - Визуализация результатов процесса молекулярного докинга

Анализ результатов докинга показывает, что фрагмент макромолекулы поливинилпирролидона внедряется в полость каппа-казеина и фиксируется там за счет вандерваальсовых сил и сил электростатического взаимодействия. Этот процесс является термодинамически выгодным, т. к. общая энергия системы каппа-казеин-поливинилпирролидон в процессе взаимодействия уменьшается на 10,58 ккал/моль. Таким образом, теоретически показана принципиальная возможность обогащения селеном молочного сырья за счет концентрирования наночастиц селена казеином.

В четвертой главе «Исследование закономерностей синтеза, разработка технологии, изучение состава и свойств концентрата наночастиц нульвалентного селена» представлены результаты изучения влияния основных технологических параметров на процесс синтеза агрегативно-устойчивых наночастиц селена и проведена оптимизация вышеуказанного технологического процесса.

В соответствии с методологией априорного ранжирования, учитывая литературные данные и результаты предварительных экспериментов, осуществлен отбор основных переменных параметров, оказывающий значимое влияние на выход, размеры и агрегативную устойчивость наночастиц селена, а также определены интервалы их варьирования. В качестве входных параметров были выбраны следующие факторы: молярное соотношение п(С6Н8Об)/п(Н28еОз); молярное соотношение п(Н28е03)/п(ПВП); активная кислотность, ед. рН; температура, °С; время ультразвуковой обработки, мин.

' Функциями отклика (выходными параметрами) были выбраны:

- степень превращения селенистой кислоты в наночастицы селена:

' Я- = С о, --100 % >

с„„

где Сиа,юселет - содержание селена в виде наноселена в растворе после восстановления, %; Сселе,тт_1ЮШ - содержание селенит-иона в растворе до восстановления, %;

- гранулометрический состав конечной системы (средний размер наночастиц в нм);

- агрегативная устойчивость наночастиц селена, которая оценивалась по доле биологически активной фракции наночастиц селена (<60 нм) через 7, 14 и 21 день хранения при комнатной температуре (+25 °С).

Для исследования пяти вышеуказанных факторов при их изменении на четырех уровнях был применен ортогональный план (таблица 1) из 16 опытов в 3-х кратной повтйрности (метод греко-латинских квадратов).

Таблица 1 - Параметры ортогонального плана

1 Параметр Уровни варьирования переменных

Мольное отношение пСбН8Ой / пН28е03 1 2 3 4

Мольное отношение лНгБеОз / пПВП 2 4 6 8

Температура, °С 1 15 30 45 60

Активная кислотность, рН 2 4 6 8

Время УЗИ обработки, мин 5 10 20 40

На начальном этапе анализа экспериментальных данных была создана архитектура нейронной сети, т. е. многослойный персептрон с пятью входными параметрами и одним выходным параметром - размером наночастиц селена (рис. 5).

С помощью обучающих алгоритмов нейронную сеть приводили в соответствие с экспериментальными данными. Определение условий адаптации вели с использованием генетического алгоритма путем создания массива данных с учетом всех возможных вариантов хода технологического процесса получения агрегативно-устойчивых наночастиц селена.

Рисунок 5 - Архитектура многослойного персептрона для выявления воздействия условий дисперсионной среды на размеры агрегативно-устойчивых наночастиц селена

На следующем этапе осуществлялась обработка массива нейронной сетью и полученные результаты оптимизировались.

При выборе оптимальных режимов проведения процесса синтеза наночастиц селена проводилось тестирование сети на отдельном наблюдений при прочих оптимальных. При этом принимались во внимание не только размеры наночастиц, но и их устойчивость. Выходя за рамки интервалов варьирования переменных в ручном режиме, были определены условия получения агрегативно-устойчивых наночастиц нульвалентного селена: молярное соотношение п(Н28е03)/п(ПВП) - 7 ± 1; температура - 25 ± 5 °С; рН раствора- 1,5 - 2,0; время УЗИ обработки системы - 10 ± 5 минут. Радиус агрегативно-устойчивых наночастиц селена - 23,0 - 25,0 нм (рис. 6).

^кадета?

1 ! 1 1 1 1 1 1 1 1 00000000 0 - ■ 1

Э 4 S <5' -7 © ЭХО ZO эо 40 SO6O7C0OO3O го Hass Diatrlb <

Resolvifcio г-, I PeokNum Area I Ivleaj 1 I Position I STD 1

11 I 1 ООО 1 2-4.2- 1 23.0 A 1 4.655 I

Рисунок 6 - Гистограмма нормированного распределения массы наночастиц селена по гидродинамическим радиусам (Photocor Complex)

Апробация оптимальных параметров, проведенная в опытно-промышленных условиях, показала практически полную адекватность расчетным данным, воспроизводимость результатов, а также возможность получения концентрата агрегативно-устойчивых наночастиц селена с 99-процентной степенью превращения селенистой кислоты в агрегативно-устойчивые наночастицы селена.

На следующем этапе исследований было проведено изучение попарного влияния значимых параметров среды (при прочих оптимальных) на размеры агрегативно-устойчивых наночастиц селена.

На рис. 7 представлена поверхность отклика выходного параметра г, (размеры агрегативно-устойчивых наночастиц селена) в зависимости от рН и продолжительности УЗИ обработки системы.

Рисунок 7 - Поверхность отклика выходного параметра (п - радиус наночастиц селена) в зависимости от рН и продолжительности УЗИ обработки системы

Анализ представленной на рисунке ^ графической зависимости показывает, что й соответствии с теорией гомогенного фазообразования Гиббса-Фольмера критический размер зародышей определяется степенью пересыщения системы, т. е. чем больше степень пересыщения, тем меньше размер образующиеся нанокластеров и выше скорость их образования. Для окислительно-восстановительных процессов степень пересыщения пропорциональна разности окислительно-восстановительных потенциалов

окислителя и восстановителя. На величину реального окислительно-восстановительного потенциала селенистой кислоты существенное влияние оказывает концентрация ионов водорода в растворе:

е03 + 4Н+ - 5е + 3Н20.

Из уравнения данной полуреакции следует, что выражение потенциала пары зависит от [й-4]*, Таким образом, уменьшение рН раствора

способствует увеличению потенциала окислителя и, соответственно, уменьшению размера образующихся наночастиц.

Аналогичным образом в диссертационной работе изучено влияние значимых факторов на агрегативную устойчивость наночастиц селена.

Электронно-микроскопические исследования полученного концентрата наночастиц нульвалентного селена свидетельствуют о том, что наночастицы имеют сферическую форму (рис. 8). Морфология частиц свидетельствует об отсутствии выраженного кристаллического ядра. Косвенно на это указывает и массовая доля селена в сухом веществе (7,65 % по данным МС-ИСП). Остальная масса - это поливинилпирролидон и связанная вода.

Рисунок 8 - Электронно-микроскопические изображения отдельной наночастицы селена (а) и агрегатов из наночастиц (б), полученных после сублимации

Можно предположить, что наночастицы селена представляют собой супрамолекулярные комплексы (соединения типа рецептор - субстрат), состоящие из молекул гидратированного поливинилпирролидона (рецептор), полимерные цепи которого плотно «уложены» посредством множественных центров связывания через молекулы элементарного селена (субстрат).

Вероятно, метастабильное состояние элементарного селена, диспергированного до уровня молекул и/или молекулярных нанокластеров, обеспечивает высокую биологическую активность разработанному концентрату наночастиц (кластеров) нульвалентного селена.

Результаты исследований использованы при разработке технологии концентрата наночастиц нульвалентного селена, которая включает следующие операции:

- приемка и подготовка сырья;

- приготовление растворов ПВП, селенистой и аскорбиновой кислот;

- смешение полученных растворов и ультразвуковая обработка системы;

- фасовка концентрата наночастиц нульвалентного селена в соответствующую тару;

- упаковка, маркировка и хранение.

Разработаны модульная, модульно-операторная и аппаратурно-процессовая схемы процесса синтеза КННС

На основе разработанной технологии проведены опытные выработки концентрата наночастиц нульвалентного селена в условиях ООО НПФ «ВИКТОРИЯ+». Показатели качества опытных образцов приведены в таблице 2.

Таблица 2 - Показатели качества КННС

Наименование показателя Характеристика

Внешний вид и консистенция однородный раствор

Цвет красно-оранжевый

Содержание селена, мг/мл, не более 1,25

Показатель активности водородных ионов, рН раствора, не выше 5,0

При оценке острой токсичности концентрата наночастиц нульвалентного селена установлено, что его ЬО50 составляет 258,03 мг/кг, т. е. по своим токсикологическим характеристикам концентрат наночастиц нульвалентного селена является малоопасным веществом для теплокровных животных и в соответствии с ГОСТ 121.007-76 его можно отнести к III классу опасности.

В пятой главе «Оценка эффективности получения и использования КННС» приведены данные по разработке системы безопасности ХАССП с целью предотвращения потенциальных рисков при производстве концентрата наночастиц нульвалентного селена. Разработана система предупреждающих действий, «дерево целей» и уровень критических контрольных точек по всей технологической цепочке получения КННС.

В соответствии со своими физико-химическими, токсикологическими и биологическими свойствами концентрат наночастиц нульвалентного селена может быть использован в качестве основы кормовых и пищевых добавок. Для проверки этого предположения был. поставлен опыт на цыплятах-бройлерах, которым выпаивали разработанный концентрат нульвалентного селена с питьевой водой (125 мкг Бе/л питьевой воды).

Результаты проведенных исследований (табл. 3) свидетельствуют о повышении эффективности выращивания и нормализации антиоксидантного статуса бройлеров опытных групп по сравнению с контролем.

Таблица 3 - Эффективность выращивания (ЕРЕР) бройлеров, активность каталазы и концентрация малоновового диальдегида (МДА) в сыворотке крови цыплят-бройлеров (л = 9)

Группа бройлеров Катал аза, мккат/л МДА, ммоль/л ЕРЕР'

Контроль 0,82 ± 0,09 2,32 ± 0,256 324,8±0,8

Опыт 1,12 ± 0,04 0,78 ± 0,37 518,9±0,9

ЕРЕР*- Европейский индекс эффективности выращивания бройлеров

рассчитывали по формуле:

_пгтгч сохранность хживая масса(кг 1ПЛ

ЕРЕР ----—-- ДУУ-

срок выращивания х коэффициент конверсии

Стратегическая цель использования кормовых или пишевых добавок с эссенциальными микроэлементами - это обогащение профилактической пищевой продукции целевыми микроэлементами, находящимися в биодоступной и высокоусвояемой форме. Применение концентрата наночастиц нульвалентного селена в виде кормовой добавки способствовало не только повышению эффективности производства, но и привело к увеличению содержания селена в мясе цыплят-бройлеров до 290 ± 34 мкг/кг,

что практически в 2 раза выше, чем в мясе контрольной группы цыплят (160 ± 32 мкг/кг), при этом селен, по нашему мнению, находится в наиболее биоусвояемой форме (предположительно в виде селенометионина). Апробация КННС на курах-несушках показала повышение (~3 %) яичной продуктивности птицы и увеличение (~2 раза) содержания селена в товарной продукции.

С учетом свойств КННС представляется целесообразным использование его в качестве пищевой добавки для обогащения молочных продуктов диетического (лечебного и профилактического) питания. С этой целью были проведены экспериментальные исследования закономерностей сорбции нульвалентного селена основными компонентами молочного сырья. Результаты экспериментов приведены в таблице 4.

Таблица 4 - Массовая доля селена в продуктах фракционирования молока

Наименование образца Массовая доля

сухих веществ, % селена, мкг/кг белка, % жира, %

Молоко, 3,2 % 11,9±0,2 1,34±0,03 3,1±0,2 3,2

Обезжиренное молоко 9,7±0,2 1,21±0,02 3,1±0,2 0,02

Сливки 66,8±0,2 6,67±0,04 1,7±0,1 64,0

Ультрафильтрат 5,2±0,2 0,26±0,02 0,7±0,1 -

Белковый УФ концентрат 18,9±0,2 4,33±0,03 16,2±0,4 0,1

Молочная сыворотка 6,4±0,2 0,24±0,02 0,78±0,1 0,02

Казеин 38,0±0,2 8,36±0,04 36±0,5 -

Анализ полученных данных свидетельствует о том, что селен в составе наночастиц, стабилизированных поливинилпирролидоном, селективно связывается белковой фракцией молока, причем основная часть селена связывается с белком жировых шариков и казеином. Так, до 72% селена сорбируется казеином, 12 % - сывороткой и 16% - сливками, что практически полностью подтверждает теоретическое обоснование, проведенное в третьей главе.

В соответствии со схемой проведения исследований было изучено влияния режимов тепловой обработки на агрегативную устойчивость наночастиц селена. Для этого аликвоты водных растворов наноселена

подвергались тепловому воздействию при стандартных режимах пастеризации. После охлаждения проводилось измерение размеров наночастиц на спектрометре Photocor Complex методом фотонной корреляционной спектроскопии (табл. 5).

Таблица 5 - Влияние режимов пастеризации на размер наночастиц селена

Режимы пастеризаций Размер наночастиц селена, нм

Исходный образец наноселена 46 ± 2

60 °С 30 минут 83 ± 3

75 °С 20 секунд 52 ±2

90 °С без выдержки 88 ± 4

Исследования подтвердили, что при длительном или высокотемпературном режимах пастеризации происходит укрупнение наночастиц селена, что может привести к снижению его биологичнской активности и усвояемости, а при кратковременной пастеризации наночастицы селена практически не изменяют своих размеров.

Следовательно, при обогащении молочной продукции наноселеном целесообразно проведение термообработки молока в режиме кратковременной пастеризации.

На основании экспериментальных исследований разработана технология напитка молочного профилактического, обогащенного селеном, (СТО), принципиальная технологическая схема которого приведена на рис. 9.

В соответствии с этой схемой внесение концентрата нульвалентного селена производится при проведении процесса нормализации молока перед процессом пастеризации.

Экспертная оценка разработанной технологии в производственных

условиях показала, что напиток молочный профилактический, обогащенный

і

селеном, может производиться на том же технологическом оборудовании, что и традиционные молочные продукты.

Рисунок 9 - Технологичесая схема производства напитка молочного профилактического, обогащенного селеном

Экологический мониторинг разработанной технологии подтвердил ее безопасность. Определены риски и критические контрольные точки (ККТ) производства напитка молочного профилактического, обогащенного селеном с использованием принципов ХАССП, которые приведены в таблице 6.

Таблица 6 - Перечень критических контрольных точек для

производства напитка молочного профилактического, обогащенного селеном

■ ККТ Наименование операции технологического процесса Наименование контрольных параметров

ККТ 1 Приемка молока КМАФАнМ, БГКП, S. aureus, патогенные, в том числе сальмонеллы

ККТ 2 Пастеризация БГКП

кктз Контроль качества готового продукта БГКП, S. aureus, патогенные, в том числе сальмонеллы

Анализ критических точек технологических процессов и предупредительные меры при проведении процедур мониторинга показали,

что критериями, гарантирующими эффективность контроля в критических контрольных точках, являются установленные характеристики или пределы с соблюдением требований мойки и дезинфекции оборудования, санитарии и гигиены.

Определена себестоимость концентрата наночастиц нульвалентного селена, производимого в соответствии с разработанной технологией. В целом, оценка экономической эффективности разработанной технологии подтвердила ее высокую рентабельность и конкурентоспособность на внутреннем и внешнем рынках.

Выводы

1. Теоретически обоснованы и экспериментально установлены закономерности, оптимизирован процесс синтеза концентрата наночастиц (кластеров) нульвалентного селена (КННС). Исследовано попарное влияние значимых параметров дисперсионной среды (рН, температура, мольные соотношения ингредиентов и время ультразвуковой обработки) на размеры наночастиц нульвалентного селена. Оптимальными режимами процесса синтеза концентрата агрегативно-устойчивых наночастиц нульвалентного селена диаметром 48,0 ± 4,0 нм являются следующие: п(Н25е03)/п(ПВП) -7± 1; Т-25 ±5 °С;рН- 1,5 -2,0; время УЗИ обработки - 10 ± 5 минут.

2. Предложена структура наночастицы селена в виде супрамолекулярного комплекса (кластера), состоящего из молекул гидратированного поливинилпирролидона, полимерные цепи которого плотно «уложены» посредством множественных центров связывания через

I

шестичленные циклы элементарного селена.

3. Изучены состав (массовая доля селена в сухом концентрате 7,65 %), физико-химические (фотокорреляционная и рамановская спектроскопия, трансмиссионная электронная микроскопия) и токсикологические свойства (III класс опасности) концентрата наночастиц нульвалентного селена.

4. По результатам исследований и опытно-промышленных выработок разработана инновационная технология и утверждена техническая

документация «СТО 02067965-006-2011» на «Концентрат наночастиц нульвалентного селена «Экстраселен».

5. Доказано повышение (~ на 200 ед. Европейского индекса эффективности выращивания бройлеров) продуктивности цыплят-бройлеров и нормализация их антиоксидантного статуса (снижение концентрации малонового диальдегида в 3 раза) при использовании концентрата наночастиц селена в качестве кормовой добавки.

і 6. После введения концентрата наночастиц нульвалентного селена в рацион кур-несушек яичная продуктивность достоверно повысилась, в частности, интенсивность яйцекладки увеличилась на 1,27 %, а средняя масса яйца-на 3,19 %.

7. Изучены закономерности сорбции селена основными компонентами молочного сырья. Проведено компьютерное моделирование процесса взаимодействия наночастицы селена с казеином молока. Показано, что до 72 % селена связывается с казеином.

8. Разработана технология и техническая документация (СТО 02067965-007-2011) на напиток молочный профилактический, обогащенный селеном.

9. Экологический мониторинг и оценка экономической эффективности технологии концентрата наночастиц нульвалентного селена и напитка молочного профилактического, обогащенного селеном, с определением критических точек по системе ХАССП, подтверждают ее востребованность и конкурентноспособность.

По материалам дисертации опубликованы следующие работы:

1. Серов А. В., Храмцов А. Г., Мирошниченко М. В. Обогащение молочной продукции эссенциальным микроэлементом селеном // Вузовская наука - Северо-Кавказскому региону / Тезисы докладов XII региональной научно-технической конференции. 22 - 24 декабря 2008 года. - Ставрополь, 2008. С. 212 -213.

2. Влияние режимов тепловой обработки на агрегативную устойчивость наночастиц селена / А. В. Серов, А. Г. Храмцов, М. В. Мирошниченко, 3. Абдукадирова // Вузовская наука - Северо-

Кавказскому региону / Материалы XIII научно-технической конференции. Том 1. - Ставрополь: СевКавГТУ, 2009. - 217 с. С. 12-13.

3. Спектральное исследование наночастиц элементарного селена / В. П. Тимченко, А. В. Серов, М. В. Мирошниченко, А. Г. Храмцов // XXXIX научно-техническая конференция по итогам работы профессорско-преподавательского состава СевКавГТУ за 2009 год. 25 -26 марта 2010 г. -Ставрополь, 2010. С. 10 - 12.

4. Мирошниченко М. В., Тимченко В. П., Серов А. В. Эссенциальный микроэлемент селен в молочной продукции / Инновационные технологии и оборудование в молочной промышленности // Сб. материалов Международной научно-практической конференции. - Воронеж, 2010. -172 с. С. 160-161.

5. Тимченко В. П., Мирошниченко М. В., Серов А. В. Реакционная система для синтеза наночастиц селена / Химия твёрдого тела: наноматериалы, нанотехнологии .// Доклад на X юбилейной международной научной конференции. 18 - 22 октября 2010 г. - Ставрополь, 2010.

6. К вопросу использования эссенциального микроэлемента - селена /

B.Е.Жидков, С. В. Герасимова, М. В. Мирошниченко, И.А.Евдокимов, А.В.Серов // Вузовская наука — Северо-Кавказскому региону / XIV региональная научно-техническая конференция. 9-10 декабря 2010 г. -Ставрополь, 2010.

7. Перспективы использования антиоксиданта селена / В.Е.Жидков,

C. В. Горлачева, А. В. Серов, И. А. Евдокимов, М. В. Мирошниченко // Инновационные технологии продуктов здорового питания, их качество и безопасность / Материалы Международной научно-практической конференции, г. Алматы, ноябрь 2010 г. - Алматы: АТУ, 2010.-376 с.

8. Новый биологически активный препарат на основе наночастиц селена / А. Г. Храмцов, А. В. Серов, В. П. Тимченко, М. В. Мирошниченко // Вестник СевКавГТУ. 2010. № 4 (25). С. 122 - 125.

9. Патент № 2392944 Российская Федерация. Препарат для лечения и профилактики нарушения обмена селена для сельскохозяйственных животных / Оробец В. А., Серов А. В., Беляев В. А., Киреев И. В.,

Мирошниченко М. В.; заявитель и патентообладатель ФГОУВПО «Ставропольский аграрный университет». - № 2008137463; заявл. 18.09.2008; опубл. 27.06.10. Бюл. № 18.

10. Профилактические молочные продукты с эссе нциальным микроэлементом селеном / В. Е. Жидков, И. А. Евдокимов, А. В. Серов, М. В. Мирошниченко /У Феномен молочной сыворотки: синтез науки, практики и инноваций / Тезисы доклада на Научно-практическом семинаре. -Ставрополь, 21 июня 2011 г.

11. Изучение влияния условий дисперсионной среды на агрегативную устойчивость наночастиц селена // А. Г. Храмцов, В.П.Тимченко, А. В. Серов, М. В. Мирошниченко У/ Вестник СевКавГТУ. 2012. № 2 (31). С. 79-82

12. Храмцов А. Г., Серов А. В., Мирошниченко М. В. Нульвалентный селен в технологии молочных продуктов /У Молочная промышленность. 2012. №6. С. 65-66.

Формат 60х841/]б. Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,3. Тираж 100 экз. Заказ № 17. Отпечатано с готового оригинал-макета в типографии ИП Светличная 355035, г. Ставрополь, пр. Октябрьской Революции, 32, тел/факс 26-70-47; Е-таП:5Ы2001п5@уапс1ех.ги

Введение.

Глава 1. Анализ состояния вопроса и задачи исследований.

1.1. Обогащение пищевых продуктов эссенциальными микронутриентами.

1.2. Медико-биологические свойства селена.

1.3. Общая характеристика селенсодержащих БАДов.

1.4. Способы получения наночастиц нульвалентного селена.

1.5. Обоснование выбранного направления и задачи исследований.

Глава 2. Организация экспериментальных исследований.

2.1. Характеристика объектов исследования и организация проведения экспериментов.

2.2. Методы исследований.

2.3. Математическое планирование и обработка результатов экспериментов.

Глава 3. Теоретическое обоснование синтеза концентрата наночастиц нульвалентного селена для обогащения новых продуктов профилактического назначения

Глава 4. Исследование закономерностей синтеза, разработка технологии, изучение состава и свойств концентрата наночастиц нульвалентного селена. селена.

4.2.1. Изучение влияния мольного соотношения С6Н806 - Н28е03 и мольного соотношения Н28еОз - ПВП на размеры наночастиц селена.

4.2.2. Изучение влияния мольного отношения Н28еОз - ПВП и температуры на размеры наночастиц селена.

4.2.3. Изучение влияния мольного соотношения Н28еОз - ПВП и рН раствора на размеры наночастиц селена.

4.2.4. Изучение влияния температуры и продолжительности УЗИ обработки на размеры наночастиц селена.

4.2.5. Изучение влияния рН раствора и продолжительности УЗИ обработки на размеры наночастиц селена.

4.3. Разработка технологии концентрата наночастиц нульвалентного селена

4.3.1. Принципы модульного алгоритма технологии получения концентрата наночастиц нульвалентного селена.

4.3.2. Разработка технологии и требований к аппаратурному оформлению процесса получения концентрата наночастиц нульвалентного селена.

4.4. Физико-химические и морфологические свойства концентрата наночастиц нульвалентного селена.

4.5. Токсикологические свойства концентрата наночастиц нульвалентного селена.

Глава 5. Оценка эффективности получения и использования концентрата наночастиц нульвалентного селена.

5.1. Предотвращение потенциальных рисков при производстве концентрата наночастиц нульвалентного селена на основе ХАССП.

5.2. Использование концентрата наночастиц нульвалентного селена в составе кормовой добавки.

5.2.1. Использование концентрата наночастиц нульвалентного селена в составе кормовой добавки цыплятам-бройлерам.

5.2.2. Результаты использования концентрата наночастиц нульвалентного селена на курах яичного направления продуктивности кросса «Шейвер браун».

5.3. Возможности использование концентрата наночастиц нульвалентного селена в качестве пищевой добавки для новых профилактических продуктов.

5.4. Экологический мониторинг технологии концентрата наночастиц нульвалентного селена

5.5. Расчет себестоимости и оценка экономической эффективности производства концентрата наночастиц нульвалентного селена

Выводы.

Результаты обследований состояния здоровья населения России, проведенные по инициативе НИИ Питания РАМН медицинскими учреждениями и органами Роспотребнадзора, выявили массовые распространения полигиповитаминозов, сочетающихся с дефицитом ряда минеральных веществ (кальция, железа, йода, селена и др). В частности в Ставропольском крае отмечается дефицит таких эссенциальных микроэлементов, как марганец, цинк, селен, хром и железо, что, вероятно, является отражением местных эколого-гигиенических и социальных особенностей. Особого внимания при этом, заслуживает эссенциальный микроэлемент селен.

Значительный вклад в развитие комплексных научных исследований о биологических функциях, метаболизме и механизмах действия эссенциальных микроэлементов и в частности селена внесли Богатырев А.Н., Тутельян В.А., Скальный A.B., Горлов И.Ф., Мазо В.К., Гмошинский В.К., Голубкина H.A., J.Nuve и другие.

Адекватное потребление селена имеет важное значение в поддержании баланса экспрессии многочисленных Se-зависимых и Se-независимых микросомальных ферментов, обеспечивающих биотрансформацию различных ксенобиотиков. В целом, селен называют важнейшим генопротектором, который блокирует повреждения ДНК продуктами перекисного окисления липидов, металлами и регулирует процессы их системной элиминации в организме.

Существует несколько способов коррекции уровня селена в продуктах питания: агрохимический метод, осуществляемый путем внесения селеносодержащих удобрений в почву; метод разведения скота и птиц с использованием селенообогащенной кормовой базы; добавление селена в питьевую воду, молочные продукты и хлебобулочные изделия.

Мировой опыт показывает, что наиболее эффективным и экологически доступным способом улучшения обеспеченности населения микроэлементами в государственном масштабе является дополнительное обогащение ими продуктов профилактического питания до уровней, соответствующих физиологическому потреблению. В частности, для обогащения молочной продукции профилактического назначения следует использовать биодоступные и малотоксичные производные селена, которые позволят при минимальном обогащении продукции достичь уровня, соответствующего физиологическому потреблению.

При выборе химической формы селена следует обращать внимание на эффективность и безопасность, а также учитывать тот факт, что биохимический маршрут органической и неорганических форм селена схожий. Однако, наиболее перспективным является применение наночастиц селена (размер 20-70 нм), основное преимущество которого, по сравнению с другими формами, заключается в его более низкой токсичности, что позволяет применять его в дозах значительно превышающих суточную потребность. Кроме этого, наноселен обладает так называемым размерным эффектом, проявляющимся тем, что частицы являются биологически более активными и лучше накапливаются в тканях.

В связи с этим разработка научно-обоснованной технологии обогащения продуктов профилактического назначения концентратом на основе наночастиц эссенциального микроэлемента селена в нульвалентном состоянии является актуальной и востребованной.

Целью диссертационной работы является исследование закономерностей синтеза наночастиц (кластеров) нульвалентного селена с разработкой инновационной технологии концентрата для использования в кормовых добавках и продуктах питания профилактического назначения.

На защиту выносятся следующие основные положения и результаты работы: научно-техническое обоснование выбора направления исследований и целесообразности обогащения новых продуктов профилактического назначения эссенциальным микроэлементом селеном; результаты экспериментальных исследований и анализ влияния условий дисперсионной среды на размеры и агрегативную устойчивость наночастиц нульвалентного селена; оптимизированные технологические параметры процесса синтеза концентрата агрегативно устойчивых частиц (кластеров) нульвалентного селена; результаты экспериментальных исследований физико-химических, морфологических и токсикологических свойств концентрата наночастиц нульвалентного селена; результаты компьютерного моделирования процесса взаимодействия молекулы каппа-казеина с наночастицей нульвалентного селена; разработка технологии напитка молочного профилактического, обогащенного селеном анализ экономической эффективности и экологической безопасности технологии напитка молочного, обогащенного селеном.

Выводы.

1. Теоретически обоснованы и экспериментально установлены закономерности, оптимизирован процесс синтеза концентрата наночастиц (кластеров) нульвалентного селена (КННС). Исследовано попарное влияния значимых параметров дисперсионной среды (рН, температура, мольные соотношения ингредиентов и время ультразвуковой обработки) на размеры наночастиц нульвалентного селена. Оптимальными режимами процесса синтеза концентрата агрегативно-устойчивых наночастиц нульвалентного селена диаметром 48,0 ± 4,0 нм являются следующие: п(Н28еОз)/п(ПВП) - 7 ± 1; Т - 25 ± 5 °С; рН - 1,5 - 2,0; время УЗИ обработки - 10 ± 5 минут.

2. Предложена структура наночастицы селена в виде супрамолекулярного комплекса (кластера), состоящего из молекул гидратированного поливинилпирролидона, полимерные цепи которого плотно «уложены» посредством множественных центров связывания через шестичленные циклы элементарного селена.

3. Изучены состав (массовая доля селена в сухом концентрате 7,65 %), физико-химические (фотокорреляционная и рамановская спектроскопия, трансмиссионная электронная микроскопия) и токсикологические свойства (III класс опасности) концентрата наночастиц нульвалентного селена.

4. По результатам исследований и опытно-промышленных выработок разработана инновационная технология и утверждена техническая документация «СТО 02067965-006-2011» на «Концентрат наночастиц нульвалентного селена «Экстраселен».

5. Доказано повышение (~ на 200 ед. Европейского индекса эффективности выращивания бройлеров) продуктивности цыплят-бройлеров и нормализация их антиоксидантного статуса (снижение концентрации малонового диальдегида в 3 раза) при использовании концентрата наночастиц нульвалентного селена в качестве кормовой добавки.

6. После введения концентрата наночастиц нульвалентного селена в рацион кур-несушек яичная продуктивность достоверно повысилась, в частности, интенсивность яйцекладки увеличилась на 1,27 %, а средняя масса яйца - на 3,19 %.

7. Изучены закономерности сорбции селена основными компонентами молочного сырья. Проведено компьютерное моделирование процесса взаимодействия наночастицы селена с казеином молока. Показано, что до 72 % селена связывается с казеином.

8. Разработана технология и техническая документация (СТО 02067965007-2011) на напиток молочный профилактический, обогащенный селеном.

9. Экологический мониторинг и оценка экономической эффективности технологии концентрата наночастиц нульвалентного селена и напитка молочного профилактического, обогащенного селеном, с определением критических точек по системе ХАССП, подтверждают ее востребованность и конкурентноспособность.

1. Антипов, В. А. Фармакотерапия болезней селеновой недостаточности / В.А. Антипов, А.А. Богосян, Т.Н. Родионова // Птицеводство. -2004.-с. 24-28.

2. Ахназарова, С. JI. Оптимизация эксперимента в химии и химической технологии / С. JI. Ахназарова, В. В. Кафаров. М. : Высшая школа, 1978.-с. 319.

3. Барабой, В.А. Биологические функции, метаболизм и механизмы действия селена / В.А. Барабой // Успехи современной биологии. 2004. Том 124.-с. 157-168.

4. Барыкинский, Г.М. Ультразвуковое диспергирование гидрозолей серебра и меди. Препринт №4 «Серебро в медицине и технике» / Институт клинической иммунологии СО РАМН. Отв. ред. Родионов П.П., Новосибирск, 1995.-с. 201.

5. Батрак, А.П. Планирование и организация эксперимента: Учебное пособие к изучению теоретического курса для студентов направления 220500. / А.П. Батрак. Красноярск : ИПЦ СФУ, 2010. - с. 60.

6. Боряев, Г.И. Биохимический и иммунологический статус молодняка с/х животных и птицы и его коррекция препаратами селена // Автореферат .д.б.н.-М. : 2000, с. 43.

7. Валуева, C.B., Копейкин, В.В. Киппер, А.И., Филиппов, А.П. Формирование наночастиц селена в водных растворах полиамфолита в присутствии различных редокс-систем. ВМС, Серия Б, 2005, том 47, № 5, с. 857-860.

8. Валуева, C.B., Боровикова, Л.Н., Матвеева, H.A. Влияние природы стабилизирующей полимерной матрицы на самоорганизацию нанокластеров селена // Журная прикладной химии. 2010, т. 84. Вып. 2, с. 270-275.

9. Гмошинский, И.В., Мазо, В.К. Селен в питании: краткий обзор // Medicina Altera. -1999. № 4, с. 18-22.

10. Гмошинский, И.В., Мазо, В.К. Селен в питании: краткий обзор http://ns.ion.ru/VMAZ04.htm.

11. Гмошинский, И.В., Мазо, В.К. Минеральные вещества в питании человека. Селен: всасывание и биодоступность. Вопросы питания. 2006 Т. 75, №5, с. 15-21.

12. Голубкина, H.A. Содержание Se в пшеничной и ржаной муке России, стран СНГ и Балтии // Вопр. питания. 1997. - №3. с. 17-20.

13. Голубкина, H.A., Хотимченко, С.А., Тутельян, В.А. К вопросу обогащения пищевых продуктов селеном. Микроэлементы в медицине, 4(4), -2003. с. 1-5.

14. Голубкина, H.A., Скальный, В.А. и др. Селен в медицине и экологии. -М.: Изд. КМК, 2006. с. 136.

15. Голубкина, H.A., Баранова. Содержание селена в молочных продуктах. Молочная промышленность. 2009. №7, с. 42-43.

16. Горбатова, К. К. Биохимия молока и молочных продуктов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984. с. 344.

17. Гореликова, Г.А., Маюрникова, Л.А. Современные подходы к разработке и товароведной оценке пищевых продуктов, обогащенных незаменимыми микронутриентами. Кемерово: КТИПП, 2005. с. 164.

18. Гореликова, Г.А., Маюрникова, Л.А., Позняковский, В.М. Нутрицевтик селен: недостаточность в питании, меры профилактики // Вопр. питания. 1997. №5. с. 18-21.

19. Горлов, И.Ф., Храмова, В.Н., Чамуралиева, Н. Селенорганические подкормки для коров // Молочное и мясное скотоводство. 2006. №2, с. 24-27.

20. Горлов, И.Ф., Храмова, В.Н. Повышение пищевой ценности молока за счет обогащения рациона коров органическим селеном. Хранение и переработка сельхозсырья. 2006. №4, с. 49-52.

21. Горлов, И.Ф., Кулик, Д.К., Сапожников, П.В., Струк, В.Н., Медянников, К.Н. Обогащение кормов селенорганическим препаратом -надежный путь повышения качества говядины. // Мясная индустрия. 2004. № 4, с. 54-55.

22. ГОСТ Р 51705.1-2001. Системы качества. Управление качеством пищевых продуктов на основе принципов ХАССП. // Общие требования

23. ГОСТ 121.007-76. Вредные вещества. Классификация и общие требования.

24. Грачев, Ю. П. Математические методы планирования экспериментов / Ю. П. Грачев. М.: Пищевая промышленность, 1997. с. 200.

25. Громова, O.A., Гоголева, И.В. Селен впечатляющие итоги и перспективы применения. // Трудный пациент. 2007. - № 14, т. 5, с. 25-30.

26. Девеча, И.А. Влияние добавки селена на обмен веществ и продуктивность мясных цыплят. // Автореферат .к.б.н. Боровск. 1984. с. 20.

27. Дубовой, P.M., Скальная, М.Г. Элементный статус жителей Ставропольского края. Изд. СтГМА, 2008. с. 192.

28. Дубовой, P.M., Бобровницкий, И.П., Скальный, A.B. Оценка элементного статуса жителей Ставропольского края. / Микроэлементы в медицине, 2004, 5(2), с. 29-32.

29. Дубравная, Г. А., Абакин, С. С. Влияние препарата «Селенолин» на организм свиноматок крупной белой породы. // Сборник научных трудов «Проблемы и перспективы современной науки» (вып. 1), под ред. проф., д.м.н. Ильинских H.H. Томск: 2008. с.6.

30. Ельчанинов, В.В. Современные представления о структуре казеиновой мицеллы. // Молочная промышленность. 2011. № 4, с. 76-78.

31. Ельчанинов, B.B. Современные представления о структуре казеиновой мицеллы. Молочная промышленность, 2011. № 3.

32. Жамсаранова, С.Д., Зонхоева, Э.Л., Мангутова, Е.В., Бубеев, И.Т., Санжанова, С.С. Использование кормовой добавки Цеохол-Se для обогащения продуктов питания селеном. // Мясная индустрия 2007, №4, с. 48-49.

33. Жамсаранова, С.Д. и др. Селенсодержащая кормовая добавка. // Молочная промышленность. 2008, № 7, с. 23.

34. Копейкин, В.В. и др. Синтез наночастиц селена в водных растворах поливинилпирролидона и морфологические характеристики образующихся нанокомпозитов. Высокомолекулярные соединения. 2003, Серия А, том 45, № 4, с. 615-622.

35. Кутепов, А. М., Бондарева, Т. И., Беренгартен, М. Г. Общая химическая технология. -М.: Высшая школа, 1985. с. 448.

36. Кухаренко, A.A., Богатырев, А.Н., Короткий, В.М., Дадашев, М.Н. Научные принципы обогащения пищевых продуктов микронутриентами // Пищевая промышленность, 2008. №5.

37. Маймулов, В.Г., Баскович, Г.А., Дадали, В.А. и др. Современные подходы к донозологической диагностике и метаболической коррекции преморбидных состояний у детей // Вестник СПб ГМА им. И.И.Мечникова, 2003, №4(4), с.46-53.

38. Медведев, В. С., Потемкин, В. Г. Нейронные сети. MATLAB 6 / Под общ. ред. к.т.н. В. Г. Потемкина. ДИАЛОГ, - МИФИ, 2002. С. 496.

39. Мишанин, Ю.Ф., Мишанин, М.Ю., Кочерга, A.B., Даниленко, Е.С., Касьянова, Т.Г. Влияние селена на здоровье и продуктивность кур. Мясная индустрия. 2007, -№1, с. 52-54.

40. Хёльтье, Х.Д., Зиппль, В., Роньяк, Д., Фолькерс, Г. Молекулярное моделирование: теория и практика / М. : БИНОМ. Лаборатория знаний, 2010. с. 318.

41. Назаров, А. В. и др. Нейросетевые алгоритмы прогнозирования и оптимизации систем. СПБ: «Наука и техника», 2003. с. 384.

42. Нейронные сети. STATISTICA Neural Networks: Пер. с англ. М.: Горячая линия-Телеком. 2001. с. 182.

43. Некрасов, Б.В. Основы общей химии. М.: Химия. 1973. - Т.1, с.351.

44. Нимацыренова, Л.Г., Жамсаранова, С.Д., Пишетшридер, М. Белки, содержащие связанную форму селена. // Молочная промышленность. 2011., -№ 7, с. 73-74.

45. Новинок, Л.В., Кудрявцева, Т.А. Обогащение молочных продуктов минеральными веществами. // Молочная промышленность. 2007, №10, с. 4950.

46. Нэв, Ж. Селен: Эссенциальный микронутриент с высоким биологическим потенциалом при дополнительном обогащении рациона. // Микроэлементы в медицине, 2005. 6 (2), с. 15-20.

47. Обогащение хлеба и хлебобулочных изделий селеном. Методические рекомендации. Минздрав Республики Беларусь, 2001. с. 20.

48. Папазян, Т. Обогащение продуктов животноводства селеном. // Животноводство России, 2002, №9, с.36.

49. Панфилов, В. А. Системный подход к проблеме развития машинных технологий в перерабатывающих отраслях // Изв. Вузов. Пищевая технология, 1995. № 1-2, с. 98 - 100.

50. Панфилов, В. А. Технологические линии пищевых производств. Учебник. М.: Колос, 1993. с. 285.

51. Пилипенко, Д.Н., Храмова, В.Н., Чернуха, И.М. Влияние селенсодержащих кормовых добавок на мясную продуктивность подсвинков. Мясная индустрия. 2005, №6, с. 46-47.

52. Плескунин, В.И., Воронина, Е.Д. Теоретические основы организации и анализа выборочных данных в эксперименте под ред. А. В. Башарина. Изд-воЛенингр. ун-та, 1979. с.232.

53. Рыжонков, Д.И., Левина, В.В., Дзидзигури, Э.Л. Ультрадисперсные системы: получение, свойства, применение. -М.: МИСиС, 2006. с. 182.

54. Садовникова, Н. Органические микроэлементы и здоровье молочного стада. Молочное и мясное скотоводство. 2006, №2, с.20-21.

55. Садовой, В. В. Совершенствование технологических процессов и оптимизация рецептурных композиций в пищевой промышленности: Монография. Ставрополь: СевКавГТУ, 2004. с. 174.

56. Самохин, В.Т. Профилактика нарушений обмена веществ у животных. -М.: Колос, 1987. с. 144.

57. Алексеева, Н.Ю., Аристова, В.П., Патратий, А. П. и др. Состав и свойства молока как сырья для молочной промышленности: Справочник под ред. канд. техн. наук Я. И. Костина. -М.:Агропромиздат, 1986. с. 239.

58. Камминс, Г., Пайк, Э. Спектроскопия оптического смешения и корреляция фотонов. -М.: Мир, 1978.

59. Ступников, A.A. Токсичность гербицидов и арборицидов и профилактикам отравлений животных. -М.: Колос, 1975. с. 240.

60. Тутельян, В.А., Княжев, В.А. и др. Селен в организме человека. -М.: Изд. РАМН, 2002. С. 224.

61. Храмцов, А.Г. Серов, A.B., Тимченко, В.П., Мирошниченко, М.В. Новый биологически активный препарат на основе наночастиц селена. // Вестник СевКавГТУ, 2010. -№4(25), с. 65-66.

62. Храмцов, А.Г., Тимченко, В.П., Мирошниченко, М.В. Изучение влияния условий дисперсионной среды на агрегативную устойчивость наночастиц селена. // Вестник СевКавГТУ, 2012. №2(31), с. 79-82.

63. Чернуха, И.М., Белякина, Н.Е., Хвыля, С.И., Устинова, A.B. Селенсодержащие препараты повышают иммунный статус детей. 2006. № 7,

64. Aaseth, J. Optimum selenium levels in animal products for human consumption //Norweg. J. Agr.Sei.-1993. Suppl.ll. P. 121-126.

65. Amberg, R., Mizutani, T., Wu, X.Q., Gross, H.J. Selenocysteine synthesis in mammalia: an identity switch from tRNA(Ser) to tRNA(Sec) // J.Mol.Biol.1996. V.263,N l.P.8-19.

66. Arthur, J.R., Beckett, G.R. Selenium in Biology and Medicine / Ed. By Wendell A. Berlin: Springer Verlag, 1989. P. 90.

67. Bamsal, M.P., Ip, C., Medina, D. Levels and 75Se-labelling of specific proteins as a consequence of dietary selenium concentration in mice and rats // Proc. Soc.Environ.Biol.Med.1991. V.196. P. 147-154.

68. Beena, Mishra et al. Formation of redox active nanoselenium on reactions of oxidizing free radicals with selenourea. BARC Newsletters, Issue no 273, October 2006, p. 262 -267.

69. Bedwal, R.S., Nair, N., Sharma, M.P., Mathur, R.S. Selenium its biological perspectives //Med.Hypotheses.1993. - V.41. P.150-159.

70. Beilstein, M.A., Whanger, P.D. Deposition of dietary organic and inorganic selenium in rat erythrocyte proteins //J.Nutr. 1986. V. 116, N 9. P. 17011710.

71. Brigelius-Flohe, R., Fridrichs, B., Maurer, S., Streicher, R. Determinants of PHGPx expression in a cultured endothelial cell line // Biomed.Environ.Sci.-1997. -V.10, N 2-3. P.163-167.

72. Buettner, C. et. al. // FASEB J. 1999. v. 13. Abstr. 11.662A875

73. Burk, R.F. Recent developments in trace element metabolism and function: noveil roles of selenium in nutrition // J.Nutr. 1989. V.119, N7. P.1051-1054.

74. Butler, J.A., Beilstein, M.A., Whanger, P.D. Influence of dietary methionine on the metabolism of selenomethionine in rats // J.Nutr. 1989. V.l 19,N 7. P.1001-1009.

75. Ciapellano, S., Testolin, G., Allegrini, M., Porrini M. Availability of selenium in dough and bisquits in comparison to wheat meal // Ann.Nutr. Metab.-1990. -V.34. P.343-349.

76. Clark, L.C., Combs, G.F., Turnbull, B.W. et. al. Effects of selenium supplementation for cancer prevention in patients with carcinoma of the skin. A randomized controlled trial. // JAMA, 1996. vol. 276. P. 1957-1963.

77. Combs, G.F. Clark, L.C., Turnbull, B.W. An analysis of cancer prevention by selenium. // BioFactors, 2001. vol. 14. p. 153-159.

78. Combs, G.F., Garbisu, C., Yee, B.C. et. al. Biol.Trace Elem. Res, 1996. vol. 52, N3. p. 209-225.

79. Daher, R., Van Lente, F. Characterization of selenocysteine lyase in human tissues and its relationship to tissue selenium concentration. // J.Trace.Elem.Electrolytes Health Dis, 1992. -V. 6, N 3. P. 189-194.

80. Esumi, K., Suzuki, A. Preparation of Gold Colloids with UV Irradiation Using Dendrimers as Stabilizer. Langmuir, 1998. V. 14. P. 3157-3159.

81. Gantner, H.E, Ip, C. //J.Nutr. 2001. v.131. p.301.

82. Golubkina, N.A., Alfthan, G.V. The Human Selenium Status in 27 regions of Russia // J.Trace elements med. Biol. 1999. -V. 13, P.15-20.

83. Guang-Wu Yang, Hulin, Li. Sonochemical synthesis of highly monodishersed and size controllable Ag nanoparticles in ethanol solution. // Materials Letters.Vol. 62/Issue 14. 2008, p. 2189-2191.

84. Huang, H.H., Ni, X.P. Photochemical Formation of Silver Nanoparticles in Poly(N-vinylpyrrolidone). Langmuir .1996. -V. 12. p 909-912.

85. Ip, C, Dong, Y.// J.Nutr. 2001,-vol. 131. p. 3127.

86. Janghorbani, M., Lynch, N.E., Mooers, C.S., Ting, B.T. Comparison of the magnitude of the selenite exchangeable pool and whole body selenium in adult rats // J.Nutr. 1990.-V.120, N 2. P. 190-199.

87. Janghorbani, M., Martin, R.F., Kasper, L.J., e.a. The selenite-exchangeable metabolic pool in humans: a new concept for the assessment of selenium status // Amer.J.Clin.Nutr. 1990.-V.51. P.670-677.

88. Janghorbani, M., Mooers, C.S., Smith, M.A.,e.a. Correlation between the size of the selenite-exchangeable metabolic pool and total body or liver selenium in rats//J.Nutr. 1991.-V.121. P. 345-354.

89. Jin-SongZhang, Xue-Yun Gao, Li-DeZhang and Yong-Ping Bao Biological effects of a nano red elemental selenium. 2001. BioFactors 15. P. 27-38.

90. Johnson, J.A., Saboungi, M-L., Thiyagarajan, P. Selenium Nanoparticles: A Small-Angle Neutron Scattering Study. // J. Phys. Chem. 1999, v. 103. P. 59-63.

91. Kohrle, J., Brigelius-Flohe, R., Bock, A. Selenium in Biology: facts and medical perspectives. //Biol. Chem. 2000. vol. 381. p. 849-864.

92. Kumosinski, T. F., E. M. Brown and H. M. Farrell JR. Three-Dimensional Molecular Modeling of Bovine Caseins: A Refined, Energy-Minimized k-Casein Structure.// J Dairy Sci. 1993. Vol. 76, No 9, p. 2507-2520.

93. Li, X., Hill, K.E., Burk, R.F. //FEBS Lett. 2001. v.508. p. 489.

94. Longnecker, M.P., Taylor, P.R., Levander, O.A., e.a. Selenium in diet, blood and toenails in relation to human health seleniferous area //Amer.J.Clin.Nutr.-1991.-V.53.P. 1288-1294.

95. Mayman, M. // Lancet. 2000. v. 356. P.233.

96. Olivieri, O., Girelli, D. et. al. // Clin.Sci. 1995. V. 89. P. 637.

97. Persson-Mosches, M., Huang, W., Srikumar, T. // Analyst. 1995. -v.120. p.833.

98. Sayato, Y., Nakamuro, K., Hasegawa, T. Selenium methylation and toxicity mechanism of selenocystine // Yakugaku Zasshi.l997.-V.l 17, N 10-11.-P.665-672.

99. Schrauzer, G.N. Anticarcinogenic effects of selenium // Cell. Mol. Life Sci. 2000. v. 57. p. 1864-1873.

100. Sunde, R. A. Molecular biology of selenoproteins // Annu. Rev. Nutr. -1990.-V. 10. p. 451-474.

101. Unyong, Jeong and Younan, Xia. Synthesis and crystallization of monodisperse spherical colloids of amorphous selenium. Advanced Materials, 2005. -vol. 17, No 1, p.102- 106.

102. Vanderpas, J.D., Contempre, B. // Amer. J. Clin.Nutr. 1990. v. 52. p.1087.

103. Van der Torre, H., Dokkum, W., Schaafsma, G., e.a. Effects of various levels of Se in wheat and meat on blood Se status indices and on Se balance in Dutch men //Brit.J.Nutr.l991.-V.65. P. 69-80.

104. Valueva, S., Kipper, A., Kopeikin, V. Influence of polymer molecular weight on properties of selenium containing nanoparticles. // Modern trends in organoelement and polymer chemistry. Int. Conf. Moscow, Rus. 2004.

105. Vinceti, M. et.al. The epidemiology of selenium and human cancer. // Tumori, 2000.-v. 86.N2. p. 105-118.

106. Waschulewski, I.H., Sunde, R.A. Effect of dietary methionine on tissue selenium and glutathione peroxidase activity in rats given selenomethionine // Brit.J.Nutr, 1988. -V.60, N 1. P.57-68.

107. Waschulewski, I.H., Sunde, R.A. Effect of dietary methionine on utilization of tissue selenium from dietary selenomethionine for glutathione peroxidase activity in the rat // J.Nutr, 1988.-V.118, N 3. P. 367-374.

108. Whanger, P.D. Selenocompounds in plants and animals and their biological significance // J. Am. Coll. Nutr, 2002. vol. 21. N. 3. p. 223-232.

109. Yonezawa, T., Kimizuka, N. Preparation of Highly Positively Charged Silver Nanoballs and Their Stability. Langmuir, 2000. v. 16(12), p 5218-5220.

110. Yoshizawa, K., Willet, W.C., Morris, St.J., Steven, J. // J.Nat.Cancer Inst. 1998.-v. 90. p. 219.

111. Zhang, J. et al. Elemental Selenium at Nano Size (Nano-Se) as a Potential Chemopreventive Agent with Reduced Risk of Selenium Toxicity: Comparison with Se-Methylselenocysteine in Mice. // Toxicological Sciences, 2008. -101(1), p. 22 -31.

112. АНО ЦЕНТР БИОТИЧЕСКОМ МЕДИЦИНЫ

113. СИСТЕМНАЯ ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ НАРУШЕНИЙ МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНА

114. ПО МЕТОДУ ДОКТОРА СКАЛЬНОГО®

115. Лицензии: МДКЗ »#097/9556;

116. Земляной Нал, Д46 1051164, Москва, России

117. Тел/Факс: (493) 917-7121,916-1548

118. E-mail: i.kalny@niicroelcmcnts.ru, lielpia microelement*.ru1ГПЬ' ГЛТГЛЫ1ЛЯЛАШГЛ1О|>(|Ла»ГМйТ0*ЛИА НА тПКЧССКУЮ КОМШ 1 t liTt! И"1 Ь auxtlh^КИЫМ АГГОТСГВПМ ISO UM№W |-И).И»,\>ЯЛНИ» И »tt 1ГОЛ01 »имвшигоии ГЛЦИИ U Ä'I.Utlfl«-,

119. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА №274441. Страница 9 m 10 ЗАКАЗЧИКжюраторный номер пробы:h0025031. Оботурова Н.П. (h)

120. Объекты анализа субстанция животного происхождения |

121. Маркировка зашчика Контроль: бердо цышенка бройлера \

122. Пробоотбор осуществляйся Заказчиком «

123. Методы анализа Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (MC-ПСИ), атомио-тиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой 1АЭС-ИСП) «

124. Аппаратура Квадруполытй масс-спектрометр Elan 9000 (Perkin Elmer. США) « Атомно-змиссионный спектрометр ОрЧта 2000 DV (Perkin Elmer. США) «1. Количество проб 1«

125. Результаты испытании (концентрация химических элементов в мкг/г)

126. Элемент Результат измерения (среднее ± погрешность, Р=0,95) Методsc 0.16^0,032 МС-ИСП

127. Начальник лаборатории, к.б.н. Главный химик-аналитик. к.б.н.

128. Частичная или полная перепечатав Шц коп20.0S.20 II

129. AHO ЦЕНТР БИОТИЧЕСКОМ МЕД НИИ

130. СИСТЕМНАЯ ДИАГ1ЮСТИКЛ И ЛЕЧЕНИЕ НАРУШЕНИЙ МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНА

131. ПО МЕТОДУ ДОКТОРА СКАЛЬНОГО®1. Лниеишш МДКЗ 18097/955<><

132. Земляной Вал. д-4<> 105064, Москва, Россия

133. Тсл/Факс: (495) 91?-?»21,916-1548

134. E-mail: sfcelny#micraelcments.rt>, hdp#microeleraeiits.ru1. Страница 10 ЗАКАЗЧИК

135. МШНИ« ЛАВЯМТЛГЮМЯШИТССАМ ИЛ ШШвЧКГКУ»ЬШПКТЯПЖКГП.ФДОГЛЯИЧГ-! Al i.'Min W»--00 ГГ.ХНИЧИТОМУ 11 I vJHfOllAimt'» И MOTO «II НИ {АТТЕСТАТ MU.-ЯДЮ >1 'W «■<•»•'.

136. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА №27444из 11 лабораторный номер пробы1. Оботурова Н.П. (h)1. M02S04

137. Объекты анализа субстанция животного происхождения |

138. Маркировка заказчика Опыт: бедро цыпленка бройлера |

139. Пробоотбор осуществлялся Заказчиком *

140. Методы анализа Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (МС-11СП/ атомно-этcatониая спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (АЭС-ИСП) « \

141. Аппаратура Квадрупачьный масс-спектрометр Elan 9000 (Perkin Elmer. США1 « Атомна-эмиссттый спектрометр Optima 2000 DC (Perkin Elmer, США) «1. Количество проб 1 «

142. Результаты испытании (концентрация химических элементов в мкг/г)

143. Элемент Результат намерения (среднее ± погрешность, Р=0.95) Метод1. Se i Ö.29±0.034 МС-ИСП

144. Начальник лаборатории, к.б.н. Демидов В.А. 20.05.2011

145. Главный химик-аналитик, к.б.н f/Si-lZ-. >■ „-Сеоебря некий Е.П.

146. Частичпая или полная перепечаткв'ти копирование протокола допускается только с разрешения лаборатории.1. И л . * , л. ji.млЗщчт . ' /0

147. AHO ЦЕНТР БИОТИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫtHt-n:Mii.\ii;uiAnt(HTHiw\ti.ii mi.iuii: 11ЛР>11п:нпи MUHi:p.vibH<>ioos.Mi;iL\ ПО МЕТОД}'ДОКТОРА СКАЛЬНОГО к Лицси.пш: МДК'Л tHogr/уллб:

148. Зеылшюй Вал. д.46 Тел/Факс: (493) 917 -121.91b-13481113064. Москва, Россия Iv-nmtl: skalin <<> microelement4.ru. help« niicnidmrnlD.ru

149. SIC ПЫТАТОЫШ .ХГОГАТ0Н1Я АШИПОНА!» НА ТЕОШЧЕСХУЮ ШиПЕИНТНСК :ъ ФЕДЕРАЛЬНЫМ ЛПЗПС Ш»1 ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ КГГЛПГОВЛИЯО П МЕТМЛОГПП АПК ТАГ АКШЛЗПШШ .VSOCC RI мт.пПЯт

150. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ><>28794

151. Страница I пз 2 лабораторный номер пробы: h0026l4

152. ЗАКАЗЧИК Мирошниченко M.B. (h>1. Объекты анализа Янно 1

153. Маркировка заказчика Яйцо курите (с-"

154. Пробоотбор on шсат.гякя Заказникам «

155. Метода анализа Масс-спектромтрия с индуктивно связанной платой lMC-ПСП), атомно- эмиссионная спектрометрия ■: индуктивно связанно!) плазмой (А ЭС-ИСП)

156. Аппаратура Xsadp) т.шый масс-спектрометр Elan 9000 (Perkin Elmer, СШл) -Атомно-эмпссионный спектрометр Optima 20OÜ i)V (Perkin Elmer, США)1. Количество проб 1 *

157. Результаты испытаний (концентрация химических элементов в мкг/г)

158. Элемент Результат измерения (среднее ± погрешность. Р=0,'>5) Метол1. Sc 0,59±0.071 МС-НСП

159. AHO ЦЕНТР БИОТИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ

160. СИСТКМНЛН ДИАГНОСТИКА 1!ЛКЧК1ШЕ НЛРУШГШШ МПИШ'ЛЛЫЮЮОБМГ.НА

161. ПО МЕТОДУ ДОКТОРА СКАЛЬНОГО к

162. Лицешии: МДКЗ i Ноу/О м(>:

163. Земляной Вал. Д.46 Тел/Факс: (495) 9»7~71*1. «)1<» 1548101064. М оси на. Россия 1 mail: skalwfmkrnelnmriitü.ru, hrl|i(« iiiHroi'leiiuMits.iii

164. ЖПЫТАТЕЛЬЕАЯ .XÜSöfATOFIM А-ОЮНТОаАНА Ei ТЕИШЧХШТО КОМПЕТЕНТНОСТЬ ФЕДЕРАЛЬНЫМ АГЕНТСТВОМ ПО ШШГ2СKOST" ПТУЛЮЖШШО ИМЕТТОЛОПШ АТТЕС TAT .«¡РЕДШАИШ MPOt С Rl .IWL >Я1Яа»

165. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОГО СОС ТАВА >s2S794

166. Страница 2 из 2 юбораторнш номер пробы: МЮ2615

167. ЗАКАЗЧИК Мирошниченко M.B. (h)1. Объемны анализа Лицо 1

168. Маркировка заказчика Яйцо куриное fH)

169. Пробоотбар оа щестелялся Заказчиком «

170. Методы анализа Масс-спектрометрия с индуктивно сшетсй плазмой (.MC-IICIJ), втомно-ъмжаюньая спектрометрия с тоуштно связанной плазмой (А ЭС-ИСП) .

171. Аппаратура Хеадруполькый масс-спектрометр Elan 90001Perkin Elmer. CILL-it« Атошо-э.'.тсстннып спектрометр Optima 2000 PVfPerkin Eimer, США i«1. Количество проб / «

172. Результаты испытаний (концентрация химических элементов в мкг/г!

173. Элемент Результат измерения i среднее ± погрешность. Р=<К'>51 Метол1. Sc 0.36+0.043 МС-ИСП

174. Федеральное гос\ uipci венное бюджетное обраюваjелыюе \ чреждеине lihiuiiiei о профессионально! о обра зования С'еверо-К'амкакким юсу ^решенный ¡ечннческип уииверсиiеi1. COI1. СевКа1. Декандаш i: л Ъ лфШф.i/^êmmr,