автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Разработка технологии получения пива с использованием сорго - национального сырья Республики Чад

2. Обзор литературы--------------------------------°--------------------——--------------

2.1. Использование сорго в пивоварении.

2.2. Харакгеристики зерна, и солода сорго - достоинства и недостагки при использовании в качестве сырья пивоваренных производств.—————

2.3. Параметры проращивания, повышающие качество солода сорго.———

2.4. Пуллуланаза - компонент комплекса амилолитических ферментов солода.——--------------------—---------------—-------•—------————------———

2.4.1. Изменение активности цуллуланазы при солодоращении.———-—

2.4.2. Изменение активности пуллулаиазы при сушке солода.—-----————

2.4.3. Проявление активности пуллудащайш З&Мрании,—■—————

2,5 Характер действия пуллуланазы---------~—

2,6. Получение и применение предельных декстриназ из различных

ИСТОЧНИКОВ—-------------------------------------------------------————

3. экспериментальная часть--—----—--———--————————————

3,1 Материалы и методы———————-—-----——————————-----—

3.1.1. Ускоренный 'метод определения спирта -——————

3.1.2. Определение содержания редуцирующих веществ.—----—-------—„

3.1.2.1. Колориметрический метод по Шомодьи-Пельсопа ——--—

3.1.2.2. Метод определения с использованием калия жслгаосинеродистого (гексацианоферриат калия) Кз[^е(СМ)б------------------------------

3.1.3. Метод определения влажности

3.1.4. Метод определения рН ——•—————————-----—— ————

3.1.5. Метод титруемой кислотности ——-——————— ———

3.1.6. Определение энергии и способности прораетаиия——•—•—• —

3.1.7. метод определения амилолитичсской активности——•------—— -——

3.1.8. Метод определения осахаривающей способности (ОС).

3.1.9. Метод определения протеолитической активности.

3.2.10. Определение концентрации белков.

3.1.11. Определение содержания сухих веществ в растворах

3.1.12. Определение экстр активности солода--------------------------------—

2.1.13. Метод приготовления вытяжки из зерна и солода

3.1.14. Метод проращивания зерна.

3.1.14.1. Метод проращивания зерна при комнатной температуре

3.1.14.2. Метод получения "аэробного" солода сорго

3.1.14.3. Метод получения "анаэробного" солода сорго.

3.1.15. Метод высушивания свежепроросшего солода.

3.1.15.1. Высушивание при постоянной температуре.

3.1.15.2. Высушивание при изменяющейся температуре

3.1.16. Метод определения пуллуланазной активности.

3.2. Результаты и обсуждение

3.2.1. Изучение возможности применения сорго (сорт sorghum rubra) при производстве пива.

3.2.1.1. Приготовление затора настойным способом при замене части—

3.2.1.2. Приготовление сусла одноотварочным способом при замене части ячменного солода зерном сорго.

3.2.1.3. Характеристики пива, полученного при использовании различных дозировок несоложёного сорго вместо ячменного солода.

3.2.2. Изучение возможности применения солода сорго (сорт Sorghum rubra) при производстве пива.

3.2.2.1. Характеристики сорго сорта Sorghum rubra.

3.2.2.2. Проращивание сорго в условиях приведенных в литературных источниках

3.2.2.3. Оптимизация условий замачивания сорго.

3.2.2.4. Влияние дозировки дезинфектанта (КМп04) результат проращивания зерна сорго.

3.2.2.5. Определение оптимальной продолжительности проращивания зерна сорго.

3.2.2.6. Получение солода сорго с использованием Алкилоксибензола ингибитора роста).

3.2.3. Получение "аэробного" и "анаэробного" солодов сорго и их применение при производстве пива.

3.2.3.1. Отработка режимов получения "анаэробного" солода сорго.

3.2.3.2. Технологические характеристики "аэробного" и "анаэробного" солодов сорго.

3.2.3.2.1. Определение амилолитической активности солодов сорго и ячменя.

3.2.3.2.2.0пределение осахаривающей активности (ОС) «аэробных» и анаэробных» солодов сорго и ячменя.

3.2.3.2.3. Определение протеолитической активности (ПС) «аэробных» и «анаэробных» солодов сорго и ячменя.

3.2.3.3. Пуллуланазная активность солодов сорго и других зерновых культур.

3.2.3.3.1. Определение пуллуланазной активности сорго и солода сорго.-75 3.2.3.3.2.0пределение пуллуланазной активности ячменя и ячменного солода.

3.2.3.3.2. Определение пуллуланазной активности "анаэробного" и "аэробного" солодов сорго и ячменя.

3.2.3.4. Факторы, влияющие на пуллуланазную активность « анаэробного» солода сорго.

3.2.3.4.1. Определение влияние температуры на пуллуланазную активность «анаэробного» солода сорго.

3.2.3.4.2. Определение рН оптимума пуллуланазы из "анаэробного" и "аэробного" солодов сорго

3.2.3.4.3. Определение активности пуллуланазы «анаэробного» солода сорго после инактивации а- амилазы.

3.2.3.5. Влияние различных параметров проращивания сорго и других зерновых культур на пуллуланазную активность

3.2.3.5.1. Определение изменения пуллуланазной активности "анаэробных" солодов сорго и ячменя при солодоращении

3.2.3.5.2. Определение влияния температуры сушки "анаэробного" солода сорго на пуллуланазную активность

3.2.3.6. Выделение пуллуланазы «анаэробного» солода сорго и изучение свойств фермента.

3.2.3.6.1. Определение температурного оптимума пуллуназы из солода сорго.

3.2.3.6.2. Определение влияния рН на активность пуллуланазы из «анаэробного» солода сорго

3.2.3.7. Сравнительная характеристика мальтазной активности различных зерновых культур.

3.2.3.7.1. Определение мальтазной активности «анаэробного» и «аэробного» солодов сорго и ячменя

3.2.3.8. Мальтазная активность солодов сорго.

3.2.3.8.1. Влияние сушки на мальтазную активность «аэробного» и «анаэробного» солодов сорго.

3.2.3.8.2. Определение изменения мальтазной активности «аэробных» и анаэробных» солодов сорго и ячменя при солодоращении.

3.2.4.Характеристики пива, полученного с использованием различных дозировок «аэробного» и «анаэробного» солода сорго.

4. Выводы

5. Технологическая часть

6. Экономическая часть

6.1 Введение.

6.2. Расчет годового экономического эффекта.

Актуальность проблемы. В современных экономических условиях производитель пива в любой стране поставлен перед необходимостью решать, среди прочих, задачи расширения ассортимента своей продукции и снижение её себестоимости, при этом обеспечивать сохранение качественных характеристик напитка на конкурентоспособном уровне. Добиться поставленных целей можно за счет целого ряда технологических приёмов, одним из которых является использование в процессе производства нетрадиционных видов сырья, в том числе и зернового.

Спектр применяемых в европейском и в российском пивоварения зерновых культур достаточно широк, однако до последних лет сорго не входило в их число. Интерес к сорго как сырью пивоваренного производства появился в первую очередь у африканских стран как по экономическим и законодательным причинам, так и из-за распространенности и доступности зерна сорго в этом регионе. Однако последние годы все большее количества исследований применимости сорго в пивоварении проводится и в развитых европейских странах. Актуальной эта проблема может оказаться и для Российской Федерации, в южных регионах которой сорго культивируется достаточно интенсивно, хотя используется, как правило, не в производстве пива. Тем не менее, наличие отлаженной технологии применения зерна или солода сорго, доказательств сохранения качества, особенно органолептических качеств и экономической эффективности оно может стать привлекательным для многих российских пивоваров.

Анализ литературных данных говорит об отсутствии в настоящее время устоявшихся взглядов на параметры проращивания сорго, обеспечивающие получение солода этой зерновой культуры, по основным пивоваренным характеристикам соответствующего ячменному.

В связи с этим, разработка технологии получения пива с использованием сорго - национального сырья Республики ЧАД является актуальной.

Цели и задачи исследования. Основными целями диссертации являлись: установление возможности использования зерна или солода сорго сорта Sorghum rubra с красными оболочками, широко культивируемого в респуплики Чад для замены части ячменного солода при производстве пива низового брожения и этилового спирта, а также изучение характеристик напитков брожения, полученных с применением зерна или солода сорго. Работа предусматривала решение следующих задач:

- изучение основных пивоваренных характеристик зерна и солода сорго сорта Sorghum rubra и возможность его применения в производстве пиве;

- определение свойств солодов сорго, в том числе, активностей ферментов, накопление которых в солоде сорго делает его применение экономически и технологически целесообрасным;

- разработка способов получения различных типов солода сорго, обеспечивающих его наилучшие качественные характеристики;

- установление допустимых количеств зерна и солода сорго, при применении которых не ухудшаются свойства напитков брожения.

Научная новизна работы. Установлена зависимость экстрактивность, диастическая сила зерна сорго сорта Sorghum rubra от режима проращивания.

Впервые установлено, что при проращивании солода сорго в «анаэробных» условиях происходит активный синтез фермента пуллуланазы.

Изучены динамика пуллуланазы в процессе выращивания и влияние режимов сушки свежепророщенного солода на сохранение ферментативной активности.

Изучено соотношение пуллуланазной и мальтазной активностей зерна и солода различных зерновых культур, применяемых в пивоварении : ячменя, пшеницы, ржи и сорго.

Проведено очистки пуллуланазы из сорго. 8

Изучено влияние на ферментативную активность факторов внешней среды, установлены значение рН и температурного оптимумов действия этого фермента.

Проведена оргалептическая оценка пива, произведенного при замене части ячменного солода солодом сорго в сравнении с контрольным вариантом, приготовленным из 100 % ячменного солода.

Практическая ценность. Показана возможность использования разновидности сорго с красными оболочками для замены не более 15 % ячменного солода без применения ферментных препаратов или других специальных технологических приёмов при сохранении органолептических характеристик на уровне контрольных.

Разработан способ получения из зерна сорго солода, по основным технологическим характеристикам пригодного для использования в пивоварении

Разработан способ получения солода сорго, обладающего высокой пуллулан-6-глюканогидролазной активностью, не требующей изменения набора технологического оборудования на предприятии.

Показано целесообразность и эффективность использования солода сорго, обогащенного предельной декстриназой, для замены части зернового сырья при производстве лагерного пива европейского типа.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ВЫВОДЫ

1. показано возможность использования зерна сорго (сорт Sorghum rubra, с красными оболочками) для замены до 15 % ячменного солода при производстве светлого пива низового брожения. Установлено, что дальнейшее увеличение дозировки какого зерна сорго (до 50 %) приводит к ухудшению некоторых аналитических и органолептических характеристик готового нефильтрованного пива.

2. Разработаны режимы проращивания зерна сорго сорта Sorghum rubra с целью получения солода сорго, по основным качественным показателям соответствующего требованиям пивоваренного производства.

3. Установлена возможность накопления в солоде сорго технологически значимых уровней активности амилопектин-6-глюканогидролазы КФ 3.2.1.41 (пуллуланазы) за счёт ведения солодоращения в в анаэробных условиях. Отработаны режимы анаэробного проращивания зерна сорго (сорт Sorghum rubra) с целью накопления максимального содержания активной предельной декстриназы КФ 3.2.1.41 (пуллуланазы).

4. Изучена целесообразность замены части ячменного солода солодом сорго при производстве пива низового брожения. Установлено, применение дозировок солода сорго до 30 % позволяет накапливать большее количество этилового спирта при сохранении органолептических характеристик на уровне контрольного.

5. Подобран режим сушки свежепророщенного «анаэробного» солода сорго, обеспечивающий 100 %-ное сохранение пуллуланазной активности в свежепророщенном солоде.

6. Проведено выделение пуллулан-6-глюканогидролазы КФ 3.2.1.41 (пуллуланазы) «анаэробного» солода сорго и определены значения термо- и рН-оптимумов этого фермента: 55°С и 5,1.

5. Технологическая часть

Перед поступлением в производство солода зерно проходит вторичную очистку. Она включает в себя отделение крупных, мелких и легких примесей; отделение зерна от ферро-примесей; выделение из семян короткие и шаровидные примеси (половинки зерен, куколь, семена других сорняков); а также разделение зерна по сортам. Очищенное зерно 1 и 2 сортов направляется на производство солода, а зерновые отходы поступают на реализацию.

Процессу замачивания предшествует мойка и дезинфекция сорго. Сухая очистка не позволяет удалить полностью все органические примеси. Мойка происходит теплой водой 1=20-25 °С. Для дезинфекции зерна используют различные, разрешенные ГОСТом, дезинфектанты. Основные цели замачивания - это насыщение зерна вегитационной влагой. Влажность зерна после замачивания должна находиться в пределах 44 - 47 %. При замачивании также удаляются органические примеси - сплав. При замачивании вымытое зерно загружают в аппарат, заливают водой 1=10-14 °С, выдерживают 3 часа под водой, затем воду сливают и 7,5 часов выдерживают зерно на воздухе. Затем заливают воду, выдерживают 3 часа, воду сливают и оставляют зерно на воздухе 7,5 часов, далее опять заливают воду и оставляют зерно на 3 часа.

Ращение солода ведут при температуре в слое зерна 28-30 °С. Высота слоя зерновой массы 0,7-0,8 метров. Продувают зерно кондиционированным воздухом (1=23-25 °С, 96-99 %). В первый день ращения идет аэрация по 30-40 минут через 3 часа, во второй день - по 30 минут через 3 часа. Первые 3 суток идет орошение зерна через каждые 24 часа. Ворошение зерна производят 2 раза в сутки. Последующие 3 суток зерно проращивают в анаэробных условиях, (без доступа кислорода воздуха). При этом зерно не продувают воздухом, не орошают, а только ворошат 2 раза в сутки.

По окончании проращивания, которое длится 6 суток, свежепроросший солод поступает в отделение сушки. Влажность солода в процессе сушки снижается с 44-45 % до 3-4 %. Солод сушат при 60 °С 24 часа.

Перед поступлением в производство солода зерно проходит вторичную очистку. Для этого зерно из силоса ленточным транспортером и норией подается в бункер , а оттуда через автовесы в воздушно - ситовой сепаратор и затем в триер , где из него выделяются короткие и шаровидные примеси, а также длинные зерна овса и овсюга. Очищенное зерно разделяют на сорта по величине зерна на сортирующих ситах. Зерно проходит автовесы и собирается в бункерах, откуда затем его направляют на производство солода, а зерновые отходы из бункера поступает на реализацию. Далее нория направляет зерно в моечный аппарат, где оно отмывается от загрязнений и в случае необходимости обрабатывается дезинфицирующими средствами. Легкие зерна (сплав) во время мойки всплывают на поверхность и попадают вместе с моечной водой в коробку для сплава через ловушку. Вымытое зерно поступает в замочные аппараты. По окончании замачивания зерно поступает в солодорастильный аппарат. Проросший солод с помощью ленточного транспортера и нории подается в сушилку. Горячий солод разгружается в бункер и через норию поднимается в бункер, откуда самотеком перемещается в росткоотбивную машину. Очищенный от ростков солод поступает в бункер, затем на автоматические весы и, наконец, в склад готового солода. Ростки накапливаются в бункере; затем их упаковывают в мешки, взвешивают на весах и отгружают для реализации.

РАСЧЕТ ПРОДУКТОВ ПРОИЗВОДСТВА

Продуктовый расчет:

1. Великая Е. И., Суходол В. Ф. Лабораторный практикум по курсу общей технологии бродильных производств. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. - 312 с.

2. Грачева И. М., Грачев Ю. П., Мосичев М. С и др. М.: легкая и пищевая промышленность, 1982. - 240 с.

3. Грачева И. М. Технология ферментных препаратов. М.: Агропромиздат, 1987. - 335 с.

4. Калунянц К. А и др. Технология солода, пива и безалкогольных напитков.- М.: Колос, 1992.-446 с.

5. Карпенко Д. В. Разработка способов получения иммобилизованной циклодекстрингликозилтрансферазы из bacillus macerans. Дис на соискание учёной степени кандидат технических наук, Москва, 1990 г.

6. Кретович В. Л. биохимия растения. -2-е изд., перераб. и доп. М.: Высшая школа, 1986.- 502 с.

7. Колчева Р. А и др. Химико- технологический контроль пиво-безалкогольного производства.- М.: Агропромиздат, 1988.- 272 с.

8. Мальцев П. М. Химико-технологический контроль производства солода и пива.

9. Под ред. Фогарти В. И. Микробные ферменты и биотехнология. -М.: Агропромиздат, 1986. 318 е.: ил.

10. Под ред. Крюковой Р.В. Методические указания по выполнению экономической части дипломного проекта по специальности «Технология бродильных производств». М.: МГУ1111, 1998 г. - 45 с.

11. Рухлява А. П., Полыгина Г. В. Инструкция по технохимическому микробиологическому контролю спиртового производства.- М.: Агопромиздат, 1986. 399 с.

12. Скобельская 3. Г., Кариенева Н. В., Туманова JI. Е. Методичесие указания к выполнению лабораторных работ по курсу «технология кондитерских изделии», «технология хлебопекарного, кондитерского производства». -М.: 1997, -53 с.

13. Яровенко В. Л., Пономарева А. Н. R-комплекс растений и щтуланазаАегоЬас1ег aerogenes. Труды ВНИИПрБ, 1970, вып. 19, стр. 110 -115.

14. Aarts R. J., Sjoholm К., Home S., Pietila К. Computer-planned mashing.- European Brewery Convention, Proc. of the 24 Congress, 1993, p.p. 655 662.

15. Abdullah M., French D. Substrate specificity of pullulanase. Archives of Biochemistry and Biophysics, 1970, vol. 137, № 2, p.p. 483 - 493.

16. Agu R. C., Ezeanolue J. C. Combined mashing of millet {Permiseturn Maiwa) malts prepared with potassium bromate and gibberellic acid (GA3) as additives. Process Biochemistry, 1993, vol. 28, 475 - 479.

17. Agu R. C., Obanu Z.A. Studies on beer production from nigérian millet.- J. Food Sci. Technol., 1991, vol. 28, №2, pp. 81 83.

18. Agu R. C., Okeke В. C. Studies on the effect of potassium bromate on some malting properties of nigérian millet {Pennisetum Maiwa). Process Biochemistry, 1991, vol. 26, pp. 89 - 92.

19. Agu R. C., Ugwu A. H., Okenchi M. U., Aneke I. В., Anyanwu T. U. Effect of low kilning temperatures on diastase and cellulase development ofnigérian malted sorghum {Sorghum bicolor). Process Biochemistry, 1996, vol. 31, pp. 63 -68.

20. Aisien A. O., Muts G. C. J. Micro-scale malting and brewery studies of some sorghum varieties. J. Inst. Brew., 1987, vol. 93, №4, pp. 328 - 331.

21. Aisien A. O., Palmer G. H., Stark J. R. The ultrastructure of germinating sorghum and millet grains. J. Inst. Brew., 1986, vol. 92, pp. 162 - 167.

22. Ajerio K. O., Booer C. D., Proudlove M. O. Aspects of the malting of sorghum. Ferment, 1993, vol. 6, №5, pp. 339 - 341.

23. Andrews J. M. H., Wilkinson N. R. Rapid Batch Lautering. Proc. of the European Brewery Convention Congress, Brussels, 1995, pp. 257 - 266.

24. Aniche G. N., Anih A. C. Malting properties of two sorghum cultivars and the effect of mashing schemes on their wort properties. Process Biochemistry, 1994, vol. 29, №5, pp. 369 371.

25. Aniche G. N., Uwakwe G. U. Potential use of Garcinia kola as hop substitute in lager beer. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 1990, vol. 6, №3, pp. 323-327.

26. Bajomo M. F., Young T. W. Fermentation of worts made from 100% raw sorghum and enzymes. J. Inst. Brew., 1994, vol. 100, №2, pp. 79 - 84.

27. Bajomo M. F., Young T. W. Development of a mashing profile for the use of microbial enzymes in brewing with raw sorghum (80%) and malted barley or sorghum malt (20%). J. Inst. Brew., 1992, vol. 98, №6, pp. 515 - 523.

28. Bajomo M. F., Young T. W. The properties, composition and fermentabilities of worts made from 100% raw sorghum and commercial enzymes. -1. Inst. Brew., 1993, vol. 99, №2, pp. 153 158.

29. Bawa Demuyakor, Yoshiyuki Ohta. Malt characteristics of Sorghum vulgare varieties from Ghana. Journal of the Science of Food and Agriculture, 1992, vol. 59, pp. 457 - 462.

30. Brefort H., Guinard J. X., Buhlert J. E., Lewis M.J. The contribution of dextrins of beer sensory properties. Part II. Aftertaste. J. Inst. Brew., 1989, vol. 96, № 6, p.p. 431 - 435.

31. Bryce J. HL, Kim N. J., Zammit R., McCafferty C. A., Pinheiro M. G. M., Kendall G. I. Branched dextrins in wort is their presence inevitable? -European Brewery Convention, Proc. of the 25 Congress, 1995, p.p. 285 - 294.

32. Byrne H., Donnelly M.F., Carrole M.B. A comparison of some properties of barley, wheat, triticale and sorghum malts. Proc. of the Institute of Brewing Central and Southern Africa Section Convention, Somerst West, 1993, №4. pp. 13-21.

33. Campbell I. Milling, mashing and wort clarification. Department of biological Sciences, Heriot-Watt University, Edinburgh, Scotland.

34. Chakrabarti A. C., Storey H. B. Co-immobilization of amyloglucosidase and pullulanase for enhanced starch hydrolysis. Appl. Microbiol. Biotechnol.,1990, vol. 33, № l, p.p. 48 50.

35. Chitsika J. M., Mukwepa G., Murinda L. Contract growing of sorghum for malting. Institute of Brewing, Proc. of the Central and South Africa Section Convention. 1991, vol. 3, pp. 55 - 56.

36. Chiu C. W. Enzymic preparation of partially debranched starches. Eur. Pat. Appl. EP 372,184 (CI. C12P19/16), 13 Jun 1990, US Appl 258,231, 14 Oct 1988; 17 pp.

37. Dale C. J., Young T. W., Makinde A. Extruded sorghum as a brewing raw material. J. Inst. Brew., 1989, vol. 95, №3, pp. 157-164.

38. Dewar J. A germination test for sorghum a preliminary investigation. -Institute of brewing, Proc. of the Central and Southern Africa Section Convention,1991, vol. 3, pp. 72 75.

39. Drummond C. S., Smith E. E., Han Tai. Mechanism of action of pullulanase. FEBS Letters, 1969, vol. 5, № l - 2, p.p. 85 - 88.

40. Dufour J. P., Melotte L., Srebrink S. Sorghum malts for the production of a lager beer. Journal of the American Society of Brewing Chemists, 1992, vol. 50, №3, pp. 110-119.

41. Enevoldsen B. S., Bathgate G. N. Structural Analysis of wort dextrins by means of p-amylase and the degrading enzyme, pullulanase. J. Inst. Brew., 1969, vol. 75, №5, p.p. 433-443.

42. Etok Apan O. U. Comparative studies of (3-D-glucan released into sorghum and barley worts. J. Inst. Brew., 1992, vol. 98, №4, pp. 301 - 304.

43. Etok Akpan O. U. Enzymic degradation and nature of the endosperm cell walls of germinating sorghum and barley. Journal of the Science of Food and Agriculture, 1993, vol. 61, pp. 389 - 393.

44. Glushchenko E. V., Kozlov D. G., Podkovyrov S. M., Mogutov M. A. Purification and characterization of thermostable pullulanase from Clostridium thermohydrosulfuricum produced by Escherichia coli. Mol. Biol., 1990, vol. 24, №3, p.p. 744-751.

45. Goto K. Preparation of straight-chain dextrin from starch by pullulanase. Jpn. Kokai Tokkyo Koho JP 02 49,594 90 49,594., (Cl. C12P19/16) 19 Feb 1990, Appl. 88/200,783, 10 Aug 1988. - 15 p.p.

46. Haroga T. Pseudomonas isoamylase as a tool for elucidating the structure of amylopectin and glycogen. Kobe Joshi Baigaku Keyo, 1989, vol. 22, № 2, p.p. 169 -174.

47. Higashihara M., Miyoshi S. Raw starch digestion with (3-amylase. III. Raw starch digestion with (3-amylases, effect of debranching enzymes. Kagaku to Kogyo (Osaka), 1989, vol. 63, № 9, p.p. 363 - 367.

48. Hug H., Stozyk F. Beer production using only raw grain. Brauwelt Rundschau, 1991, vol. 102, №3, pp. 25 - 30.

49. Ilori M. O., Adewusi S. R. A. Effect of ammonia on the malting losses of some improved nigérian sorghum varieties. J. Inst. Brew., 1991, vol. 97, №2, pp. 111-113.

50. Ilori M. O., Ogundiwin J. O., Adewusi S. R. A. Sorghum malt brewing with sorghum/maize adjuncts. Brewing and Distilling International, 1991, vol. 22, №3, pp. 10 -13.

51. Iwuoha C. I. Effects of steeping and germination time on growth rare and phenolics content of nigérian Sorghum bicolor and Sorghum vulgare seedlings. Journal of the Science of Food and Agriculture, 1992, vol. 59, pp. 81 -87.

52. Kabaktschitova J. G. Comparative analysis of enzyme preparations for the production of diabetic beer. Brew, and Beverage Ind. Int., 1998, № 1, p.p. 33 -36.

53. Kainuma K., French D. Action of pancreatic amylase on starch oligosaccharides containing single glucose side chains. FBS Letters, 1969, vol. 5, №4, p.p. 257-261.

54. Kavitha R., Chandrashekar A. Content and composition of nonstarchy polysaccharides in endosperms of sorghum varying in hardness. Cereal Chemistry, 1992, vol. 69, pp. 440 - 443.

55. Kim C. H., Kim D. S., Taniguchi H., Marujama Y. Purification of a amylase-pullulanase bifiinctional enzyme by high-performance size-exclusion and hydrophobic-interaction chromatography. J. Chromatogr., 1990, vol. 512, p.p. 131 -137.

56. Kimura T., Yoshida M., Oisni K., Ogata M., Nakakuki T. Immobilization of exo-maltotetraohydrolase and pullulanase. Agric. Biol. Chem., 1989, vol. 53, № 7, p.p. 1843 - 1948.

57. Klingeberg M., Vorlop K. D., Antranikian G. Immobilization of anaerobic thermophilic bacteria for the production of cell-free thermostable a-amylases and pullulanases. Appl. Microbiol. Biotechnol., 1990, vol. 33, № 5, p.p. 494 - 500.

58. Kobayashi S., IshidaN., Noguchi A. Manufacture of high-maltose syrups with (3-amylase and pullulanase. Jpn. Kokai Tokkyo Koho JP 01,222,792 89,222,792., (CI. C 12 P 19/16) 06 Sep 1989, Appl. 87/47,484, 02 Mar 1988. - 4 p.p.

59. Koch R., Antranikian G. Action of amylolytic and pullulanolytic enzymes from various Anaerobic thermophilic on linear and branched glucose polymers. Starch, 1990, vol. 42, 397 - 403.

60. Koch R., Zablowski P., Antranikian G. Highly active and thermostable amylases and pullulanases from various anaerobic thermophiles. Appl. Microbiol. Biotechnol., 1987, vol. 27, № 2, p.p. 192 - 198.

61. Koljonen T., Hamalainen J. J., Sjoholm K., Kettunen A., Pietila K. Simulation of the degradation of starch and |3-glucans during mashing. European Brewery Convention, Proc. of the 24 Congress, 1993, p.p. 525 - 532.

62. Kristensen M., Svensson B., Larsen J. Purification and characterization of barley limit dextrinase during malting. European Brewery Convention, Proc. of the 24 Congress, 1993, p.p. 37 - 43.

63. Kumari S. R, Chandrashekar A. Isolation and purification of three antifungal proteins from sorghum endosperm. Journal of Food and Agriculture, 1994, vol. 64, pp. 357 - 364.

64. Kusano S., Shiraishi T., Takahashi S., Fujimoto D., Sakano Y. Immobilization of Bacillus acidopullulyticus pullulanase and properties of theimmobilized pullulanases. J. Ferment. Bioeng., 1989, vol. 68, № 4, p.p. 233 -237.

65. Kusano S., Takahashi S., Fujimoto D., Sakano Y. Effects of reduced maltooligosaccharides on the thermal stability of pullulanase from Bacillus acidopullulaticus. Carbohydr. Res., 1990, vol. 199 № 1, p.p. 83 - 89.

66. Lamidi A. A., Burke S. Studies of the flavour stability of sorghum beer. -Ferment, 1995, vol. 8, №6, pp. 363 367.

67. Lisbjerg S., Nielsen H. Brewing with 80% or more unmalted cereal. -Proceedings of the Central and Southern Africa Section Convention, 1991, vol. 3, pp. 157 -161.

68. Little B. T. Alternative cereals for beer production. Ferment, 1994, vol. 7, №3, pp. 163- 168.

69. Longstaff A., Bryce J. H. Development of limit dextrinase in germinated barley (Hordeum vulgare L.). Evidence of proteolytic activation. Plant. Physiol, 1993, vol. 101,881 -889.

70. Longstaff M. A., Bryce J. H. Levels of limit dextrinase activity in malting barley. European Brewery Convention, Proc. of the 23 Congress, 1991, p.p. 593 - 600.

71. MacGregor A. W. Improvements of the amylolytic activity of malt. -Louvain Brewing Letters, 1991, vol. 4, p.p. 21-25.

72. MacGregor A.W. Starch degrading enzymes. Ferment, 1991, vol. 4, p.p. 178-182.

73. MacGregor A. W., Macri L. J., Bazin S. L., Sadler G. W. Limit dextrinase inhibitor in barley and malt and its possible role in malting and brewing. European Brewery Convention, Proc. of the 25 Congress, 1995, p.p. 185-191.

74. MacGregor A. W., Macri L. J., Schroeder S.W, Bazin S. L. Purification and characterisation of limit dextrinase inhibitor from barley. J. Cer. Sci., 1994, vol. 20, p.p. 33-41.

75. MacGregor A. W., Macri L. J., Schroeder S.W, Bazin S. L. Detection of limit dextrinase inhibitor in barley. J. Cer. Sci., 1993, vol. 18, p.p. 103 - 106.

76. Malleshi N. G., Desikachar H. S. R. Studies on comparative malting characteristics of some tropical cereals and millets. J. Inst. Brew., 1986, vol. 92, №2, pp. 174 - 176.

77. Manners D. Y., Rowe-Karen L., Studies on carbohydrate-metabolizing enzymes. Part XXV. The debranching enzyme system in germinated barley. J. Inst. Brew., 1971, vol. 77, № 4, 358 - 365.

78. Markosyan L. S., Balayan A. M. Extracellular pullulanase of a thermophilic strain of Bacillus sp. Prikl. Biokhim. Mikrobiol., 1990, vol. 26, № 3, p.p. 313-320.

79. Muts G. C. J. The use of sorghum in the brewing of lager beer. Institute of Brewing, Proc. of the Central and Southern Africa Section Convention, 1991, vol. 3, pp. 51 - 54.

80. Nakajima M., Inasaki K., Nabetani H., Watanabe A. Continuous hydrolysis of soluble starch by free (3-amylase and pullulanase using an ultrafiltration membrane reactor. Agric. Biol. Chem., 1990, vol. 54, № 11, p.p. 2793-2799.

81. Nduka Okafor. Traditional alcoholic beverages of tropical Africa: strategies for scale-up. Process Biochemistry International, 1990, pp. 213 - 220.

82. Nelson N. A photometric adaptation of the somogyi method for the determination of glucose. J.Biol, chem., 1994, V.153,375-380.

83. Nesterenko M. V., Kuzovlev V. A., Mosolov V. V. Isolation of different forms of a-amylase from wheat. Prikl. Biokhim. Mikrobiol., 1990, vol 26, № 5, p.p. 598-601.

84. Odibo F. J. C., Obi S. K. C. Optimum culture conditions for the production of the extracellular pullulanase of Thermoactinomyces thalpophilus. -Biol. Wastes, 1990, vol. 32, № 1, p.p. 9 -15.

85. Ogbonna A. C., Obi S. K. Use of Raphia Palmwine yeast strains in sorghum beer brewing. J. Inst. Brew., 1992, vol. 98, №4, pp. 339 - 343.

86. Ogundiwin J. O., Ilori M. O. Development of stout from sorghum malt. -Lebensmettel Wissenschaft und Technologie, 1991, vol. 24, pp. 182 -185.

87. Ohiokpehai O. Evaluation of malting characteristics of sorghum cultivais for beverages production. Institute of Brewing, Proc. of the Central and Southern Africa Section Convention, 1991, vol. 3, pp. 47 - 50.

88. Okada S., Imanaka T., Kuriki T., Yoshikawa K., Kidaka H. Manufacture of panose-containing starch with Bacillus enzyme. Jpn. Kokai Tokkyo Koho JP 01,171,493 89,171,493., (Cl. C 12 P 19/14) 06 Jul 1989, Appl. 87/330,626, 25 Dec 1987. - 4 p.p.

89. Okolo B. N., Ezeogu L. I. Promoting sorghum reserve ptorein mobilization by steeping in alkaline liquor. J. Ins. Brew., 1996, vol. 102, №4, pp. 277 - 284.

90. Okolo B. N., Ezeogu L. I. Enhancement of amylolytic potential of sorghum malts by alkaline steep treatment J. Ins. Brew., 1996, vol. 102, №2, pp. 79 - 85.

91. Okolo B. N., Ezeogu L. I. Duration of final warm steep as a crucial factor in protein modofication in sorghum malts J. Ins. Brew., 1996, vol. 102, №3, pp. 167- 177.

92. Okolo B. N., Ezeogu L. I. Effects of final warm water steep and air rest cycles on malt properties of three improved nigérian sorghum cultivars J. Ins. Brew., 1994, vol. 100, №5, pp. 335 - 338.

93. Okolo B. N., Ezeogu L. I. Effects of air rest periods on malting sorghum response to final warm water steep J. Ins. Brew., 1995, vol. 101, №1, pp. 39 - 45.

94. Olatunji O., Jibogun A. C., Anibaba T. S., Oliyide V. O., Ozumba A.U. Oniwinde A. B., Koleoso O. Effect of diffrent mashing procedures on the quality of sorghum beer. Journal of the American Society of Brewing Chemists, 1993, vol. 51, №2, pp. 67-70.

95. Palmer G. H. Science and technology of sorghum as brewing materials. The Institute of Brewing, Proc. of the Central and Southern Africa Section Convention, 1991, vol. 3, pp. 7-17.

96. Palmer G.H. Sorghum food, beverage and brewing potentials. -Process Biochemistry, 1992, vol. 27, p.p. 145 - 153.

97. Piendl A. Enzyme activinies in germinating barley. Process Biochem., 1971, №4, p.p. 19-21,26.

98. Ramamurthi Jambunathan, Kherdekar M. S., Stenhouse J. W. Sorghum grain hardness and its relationship to mold susceptibility and mold resistance. -Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1992, vol. 40, pp. 1403 1408.

99. Ratnavathi C. V., Bala Ravi S. The effect of different durations of steeping and malting on the production of alpha-amylase in sorghum. Journal of Cereal Science, 1991, vol. 14, pp. 287-296

100. Robbins D. J. The determination of sorghum malt amylases. Institute of Brewing, Proc. of the Central and Southern Africa Section Convention, 1991, vol. 3, pp. 63 - 65.

101. Robbins D. J., Egan B. Failure of mercuric chloride to selectively inhibit P-amylase in sorghum malt. J. Inst. Brew., 1992, vol. 98, №5, pp. 383 -385.

102. Sada H., Maruyama Y., Taniguchi H., Umeda M. Manufacture of pullulanase activity-containing amylase by Bacillus circulans F-2. Tokkyo Koho JP 01 60,376 89 60,376., (CI. C 12 N 9/26) 07 Mar 1989, Appl. 87/215,507, 31 Aug 1987. - 6 p.p.

103. Sahashi H., Ishizuka H., Hibino T. Glucose production from starch and its enhancement using immobilized enzymes. Jpn. Kokai Tokkyo Koho JP 0269,190 90 69,190., (Cl. C 12 P 19/14) 08 Mar 1990, Appl. 88/219,583, 01 Sept 1988. 4 p.p.

104. Satish Kumar L., Daodu M. A., Shetty H. S., Malleshi N. G. Seed Mycoflora and malting characteristics of some sorghum cultivars. Journal of Cereal Science, 1992, vol. 15, pp. 203 - 209.

105. Seide P. African sorghum an alternative raw material for the malting and brewing industries. - Brauwelt, 1992, vol. 132 №16/17/ pp. 688,691, 694, 696, 698, 700.

106. Sjoholm K., Macri L. J., MacGregor A. W. Is there a role for limit dextrinase in mashing? European Brewery Convention, Proc. of the 25 Congress, 1995, p.p. 277 - 284.

107. Shen G. J., Srivastava K. C., Saha B. C., Zeikus J. G. Physiological and enzymic characterization of a novel pullulan-degrading thermophilic Bacillus strain 3183. Appl. Microbiol. Biotechnol., 1990, vol. 33, № 3, p.p. 340 - 344.

108. Shiraishi F. Maltose production from soluble starch by P-amylase and debranching enzyme immobilized on ceramic monolith. Kagaku Kogaku, 1990, vol. 54, № 6, p.p. 398 - 400.

109. Sissons M. J., Lance R. C. M., Sparrow D. H. B. Studies on limit dextrinase in barley. 3. Limit dextrinase in developing kernels. J. Cereal Sci., 1993, vol. 17, p.p. 19 - 24.

110. Sissons M. J. Studies on the activation and release of bound limit dextrinase in malted barley. J. Am. Soc. Brew. Chem., 1996, vol. 54, p.p. 19-25.

111. Somogyi M. Notes in sugar determination. J. Biol. Chem., 1952, V. 195, p. 19-23.

112. Stenholm K., Home S., Lauro M., Perttula M., Suortti T. Hydrolysis of barley starch by malt limit dextrinase/ European Brewery Convention, Proc. of the 26 Congress, 1997, p.p. 283 - 290.

113. Subramanian V., SeetharamaN., Jambunathan R., Rao P. V. Evaluation of protein quality of sorghum Sorghum bicolor (L.) Moench. -Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1990, vol. 38, pp.1344 -1347.

114. Swanston J. C., Root N. S., Subramanian V., Taylor K. The influence of some aspects of grain quality on malting potential in sorghum. Journal of Cereal Science, 1994, vol. 19, pp. 91 - 97.

115. Swanston J.S., Taylor K. The use of rapid screening tests to compare changes during malting in sorghum. J. Inst. Brew., 1993, vol. 99, №6, pp. 483 -486.

116. Swanston J.S, Taylor K. Grain and malt milling energies in sorghum and their relationships with extract and diastatic power. J. Ins. Brew., 1992, vol. 98, №2, pp. 129 -131.

117. Takasaki Y. Method for stabilization of enzymes. Tokkyo Koho JP 01,104,172 89,104,172., (CI. C 12 N 9/96) 21 Apr 1989, Appl. 87/262,3003, 16 Oct 1987. - 6 p.p.

118. Takasaki Y. Stable a-l,6-glucosidase compositions containing aluminum salts. Tokkyo Koho JP 01,104,170 89,104,170., (CI. C 12 N 9/96) 21 Apr 1989, Appl. 87/269,301,16 Oct 1987. - 4 p.p.

119. Takasaki Y. Stabilization of a-l,6-glucosidase with aluminum salts. -Tokkyo Koho JP 01,104,171 89,104,171., (CI. C 12 N 9/96) 21 Apr 1989, Appl. 87/269,302,16 Oct 1987. 4 p.p.

120. Taylor J. R. N. Mashing with malted grain sorghum. Journal of the American Society of Brewing Chemists, 1992, vol. 50, pp. 13 -18.

121. Taylor J. R. N., Dewar J. Role of ALRHA-glucosidase in the fermentable sugar composition of sorghum malt mashes. J. Inst. Brew., 1994, vol. 100, №6, pp. 417-419.

122. Taylor J. R. N. Proteolysis in sorghum malting. Institute of Brewing, Proc. of the Central and Southern Africa Section Convention, 1991, vol. 3, pp. 18 -29.

123. Taylor J. R. N., Robbins D. J. Factors influencing beta-amylase activity in sorghum malt. J. Inst. Brew., 1993, vol. 99, №5, pp. 413 - 416.

124. Ugdoaja F. C., Bednarski W., Babuchowski A. The technology and properties of beer produced from unmalted sorghum or maize grains. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 1991, vol. 7, pp. 225 - 230.

125. Verbruggen M.A., Beldman G., Voragen A. G. J., Hollemans M. Water-unextractable cell wall Material from sorghum: isolation and characterization. Journal of Cereal Science, 1993, vol. 17, pp. 71 - 82.

126. Yang P., Sieb P. A. Low input wet-milling of grain sorghum for readily accessible starch and animal feed. Cereal Chemistry, 1995, vol. 72, pp. 498 - 503.

127. Yoshida M., Oishi H., Kimura T., Ogata M., Nakakuki T. Continuous production of maltose using a dual immobilized enzyme system. Agrie. Biol. Chem., 1989, vol. 53, № 12, p.p. 3139 - 3142.

128. Young R., Gomez M. H., McDonough C.M., Waniska R. D., Rooney L. W. Changes in sorghum starch during parboiling. Cereal Chemistry, 1993, vol. 70, pp. 179 - 183.

129. Zeikus J. G., SahaB. C. Preparing high conversion syrups and other sweetener by tyhermostable (3-amylase and other thermostable enzymes. U.S. US 4,814,267 (CI. 435-95; C12P19/22), 21 Mar 1989, US Appl. 652,585, 18 Sep 1984; 6 p.p.