автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Биотехнология этилового спирта из концентрированного осветленного зернового сусла с применением термотолерантных дрожжей Saccharomyces Cerevisiae расы У-1986

Введение

Глава 1. Аналитический обзор

1.1 .Способы получения концентрированного сусла.

1.1.1. Выпаривание.

1.1.2. Мембранное разделение.

1.2. Влияние способов деструкции на качественный состав зернового сусла и выход спирта.

1.2.1. Механохимическая деструкция зерна.

1.2.2. Термическая деструкция.

1.2.3. Химическая деструкция.

1.2.4. Ферментативная деструкция.

1.2.5. Прогрессивные схемы и способы получения сусла при переработке крахмалосодержащего сырья на спирт, применяемые за рубежом.

1.3. Ферменты, применяемые в спиртовой промышленности (амилолитические, протеолитические, цитолитические). Механизм действия, оптимальные режимы.

1.3.1. Характеристика амилаз.

1.3.1.1. а-Амилаза

1.3.1.2. р-Амилаза

1.3.1.3. Глюкоамилаза

1.3.1.4. Декстриназа

1.3.1.5. Пуллуланаза.

1.3.1.6. Изоамилаза.

1.3.1.7. а-Глюкозидаза.

1.3.1.8. Ферментные препараты, применяемые за рубежом

1.3.2.Протеолитические ферменты

1.3.2.1. Характеристика отдельных типов протеаз

1.3.2.2. Факторы, влияющие на процесс протеолитического действия

1.3.2.3. Ферментные препараты протеолитического действия

1.3.3. Ферменты, разрушающие клеточные структуры

1.3.3.1. Механизм действия целлюлолитических ферментов

1.3.3.2. Влияние концентрации водородных ионов на активность ферментов

1.3.3.3. Влияние температуры на активность ферментов

1.3.3.4. Ферментные препараты цитолитического действия

1.3.4. Применение ферментных препаратов в спиртовой промышленности.

1.4. Дрожжи, применяемые в спиртовом производстве. Дрожжи, толерантные к стрессовым воздействиям среды.

1.4.1 Расы дрожжей, используемые в спиртовом производстве

1.4.2 Дрожжи, толерантные к стрессовым воздействиям среды. 63 1.4.3. Сбраживание дрожжами различных Сахаров.

1.5. Вторичные и побочные продукты спиртового брожения.

1.5.1 Образование кислот и ацетоина.

1.5.2. Образование высших спиртов.

1.5.3. Образование эфиров.

1.5.4. Влияние различных факторов на накопление вторичных и побочных продуктов брожения.

Глава 2. Экспериментальная часть

2.1. Материалы и методы исследования. 81 2.1.1. Определение активности используемых ферментных препаратов

2.1.1.1. Определение глюкоамилазной активности ферментного препарата фирмы «Кормей»

2.1.1.2. Определение активности а-амилазы ферментного препарата фирмы «Кормей»

2.1.1.3. Определение протеолитической активности ферментного препарата Протосубтилин Г1 Ох

2.2. Определение растворимых сбраживаемых углеводов в полупродуктах из крахмального сырья.

2.3. Определение массовой концентрации декстринов и Сахаров.

2.4. Определение суммарного содержания сбраживаемых углеводов и нерастворенного крахмала

2.5. Определение содержания общих углеводов в дробине спиртовой

2.6. Методика хроматографического анализа на содержание этилового спирта и примесей в зрелой бражке

2.7. Определение вязкости на лабораторной установке

2.7.1. Описание и принцип действия установки

2.7.2. Техника проведения эксперимента

Глава 3. Разработка способов получения концентрированного зернового сусла

3.1. Изучение влияния энергии, затрачиваемой на измельчение зернового сырья на фракционный состав получаемых помолов и выход спирта.

3.2. Исследование влияния некоторых факторов на реологические свойства зерновых замесов.

3.2.1. Исследование динамики клейстеризации крахмала зерна с повышением температуры при различных гидромодулях

3.2.2. Исследование динамики клейстеризации крахмала зерна с повышением температуры при различной степени измельчения зерна и различных режимах внесения амилолитических ферментных препаратов разжижающего действия.

3.3. Влияние режимов термической деструкции крахмала в зерновых замесах на эффективность накопления в сусле растворимых углеводов. Оптимизация процесса получения концентрированного осветленного зернового сусла.

Глава 4. Изучение возможности применения протеолитических и целлюлолитических ферментов для интенсификации процессов осахаривания концентрированного осветленного зернового сусла с целью повышения технико-экономических показателей процесса брожения.

4.1. Протеолитические ферменты на стадии разваривания, осахаривания зерновых заторов.

4.2. Оптимизация процесса получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла с применением Протосубтилина Г10х на стадии приготовления замеса.

4.3. Целлюлолитические ферменты на стадии осахаривания зернового сусла и стадии промывки дробины.

4.4. Оптимизация процесса получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла с применением Целлобранина ГЗх на стадии промывки спиртовой дробины.

4.5. Исследование совместного влияния протеолитических и целлюлолитических ферментов

Глава 5. Исследование процесса сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла дрожжами Saccharomyces cerevisiae расы XII и У-1986.

5.1. Влияние времени осахаривания на скорость сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла.

5.2. Влияние дозировки амилолитических ферментов на скорость сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла.

5.3. Влияние температуры брожения на процесс накопления этанола, примесей и показатели зрелой бражки.

5.4. Влияние рН сусла на процесс накопления этанола, примесей и показатели зрелой бражки.

5.5. Влияние количества засевных дрожжей на процесс накопления этанола, примесей и показатели зрелой бражки.

5.6. Влияние различных режимов брожения на процесс накопления этанола, примесей и показатели зрелой бражки при сбраживании осветленного зернового сусла высокой концентрации.

Глава 6. Технологическая схема получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла с применением термотолерантных дрожжей Saccharomyces cerevisiae расы У-1986. 180 Выводы

Актуальность работы. Диссертационная работа посвящена разработке технологии получения этилового спирта из концентрированного осветленного зернового сусла с применением термотолерантных дрожжей Saccharomyces cerevisiae расы У-1986.

Производство спирта в мире продолжает оставаться актуальной проблемой как в аспекте использования его для приготовления спиртных напитков и в других отраслях пищевой промышленности, так и с точки зрения применения его в качестве источника энергии. В связи с возрастающей потребностью в спирте ведущие страны - производители продолжают разработки, обеспечивающие оптимизацию процесса этанольной ферментации. Прежде всего, это создание энерго- и ресурсосберегающих технологий производства этанола с максимально полной утилизацией углеводов сырья. Целью исследований является разработка технологий и оборудования, обеспечивающих увеличение выходов спирта и улучшение его качества, создание безотходных производств, ведущих к сокращению количества стоков, утилизации побочных продуктов и отходов процесса производства этанола.

Работа является составной частью научных исследований кафедры технологии бродильных производств и виноделия, входящей в координационный план РАН.

Цель и задачи исследований. Цель настоящей работы заключается в разработке технологии получения этилового спирта из концентрированного осветленного зернового сусла с применением термотолерантных дрожжей Saccharomyces cerevisiae расы У-1986 на основе изучения факторов определяющих эффективность процессов получения и сбраживания концентрированного осветленного сусла, а также влияющих на образование этанола и примесей в процессе брожения.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

• изучить влияние энергии, затрачиваемой на измельчение зернового сырья, на фракционный состав получаемых помолов и выход спирта;

• исследовать влияние гидромодуля приготовления замеса, различной степени измельчения сырья и режимов внесения амилолитических ферментных препаратов разжижающего действия на реологические свойства зерновых замесов;

• исследовать влияние режимов термической деструкции крахмала в зерновых замесах на эффективность накопления в сусле растворимых углеводов;

• изучить возможности применения протеолитических и целлюлолитических ферментов для интенсификации процессов осахаривания концентрированного осветленного зернового сусла с целью повышения технико - экономических показателей процесса брожения;

• исследовать влияние дозировки амилолитических ферментов и времени осахаривания на скорость сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла;

• изучить влияние температуры брожения, начального рН сусла, количества засевных дрожжей на процесс накопления этанола, примесей и показатели зрелой бражки при сбраживании осветленного зернового сусла дрожжами Saccharomyces cerevisiae рас XII и У-1986;

• исследовать влияние различных режимов брожения на процесс накопления этанола, примесей и показатели зрелой бражки при сбраживании концентрированного осветленного зернового сусла;

• разработать технологическую схему получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла с применением дрожжей Saccharomyces cerevisiae расы У-1986.

Научная новизна диссертационной работы заключается в следующем:

• получена зависимость выхода спирта от энергии, затрачиваемой на измельчение зернового сырья.

• разработаны инженерные номограммы для оценки и прогнозирования качественных и количественных показателей получаемого концентрированного зернового сусла в зависимости от энергии, расходуемой на измельчение сырья, температуры и продолжительности процесса разваривания замеса. Оптимизирован процесс его получения.

• на основе регрессионного анализа экспериментальных данных получены уравнения, описывающие процессы получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла с применением протеолитических ферментов на стадии приготовления замеса и целлюлолитических ферментов на стадии промывки спиртовой дробины. Оптимизированы условия проведения этих процессов.

• осуществлен сравнительный анализ эффективности сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла расами дрожжей XII и У-1986.

Практическая ценность и реализация результатов работы.

Использование предлагаемой технологии получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла, позволит спиртовым заводам:

• увеличить производительность;

• повысить выход спирта;

• сократить потребление воды на 1 дал спирта;

• сократить энергозатраты за счет использования концентрированных замесов, мягких режимов разваривания и снижения расхода тепла на перегонку бражки;

ВЫВОДЫ

1. Оценку затрат энергии на измельчение зернового сырья необходимо осуществлять на основе гранулометрического состава помола. Оптимальными следует считать энергозатраты, обеспечивающие максимальную равномерность помола, которые могут быть рассчитаны из уравнения, выражающего зависимость выхода спирта от количества энергии, затрачиваемой на измельчение зернового сырья.

2. На основе изучения вязкости концентрированных зерновых замесов определены оптимальные режимы и количество вносимых амилолитических ферментных препаратов разжижающего действия для их получения. Определены оптимальные параметры (температура и время) процессов разваривания замесов.

3. Применение протеолитических ферментов на стадии приготовления замеса, целлюлолитических на стадии промывки спиртовой дробины повышает эффективность процессов разделения на жидкую (осветленное сусло) и твердую (спиртовая дробина) фазы зернового сусла. На основе полученных уравнений регрессии осуществлена оптимизация процессов получения, сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла с применением протеолитических и целлюлолитических ферментных препаратов. Установлено увеличение выхода спирта из пшеницы на 3,5% относительно классической технологии переработки концентрированного сусла.

4. Оптимизированы параметры процесса брожения концентрированного осветленного зернового сусла (температура брожения, начальный рН сусла, количество засевных дрожжей). Применение термотолерантных дрожжей Saccaromyces cerevisiae расы У-1986 при сбраживании концентрированного осветленного зернового сусла позволяет увеличить концентрацию этанола в зрелой бражке в 1,2-1,3 раза по сравнению с XII расой, уменьшить содержание примесей в 1,5-1,6 раза, сократить количество несброженных углеводов в 1,4-1,6 раза, при этом наиболее эффективным способом

184 сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла следует считать способ с дробной подачей сусла в бродильный аппарат.

5. Разработана технология получения и сбраживания концентрированного осветленного зернового сусла, которая позволит улучшить технико-экономические показатели спиртового производства. Производственные испытания на ОАО «Туласпирт» спиртоводочном заводе «Лужковский» производительностью 3000 дал а.а. в сутки подтвердили преимущества разработанной технологии относительно традиционной, при этом ориентировочный экономический эффект от внедрения технологии составит 1062,78 тыс. руб. в год.

1. Антонов В.К. Химия протеолиза. М: Наука, 1991. -504с.

2. Артюхов В.Г., Натурная Н.А. Влияние летучих примесей на качество пищевого спирта. М.: ЦНИИТЭИПищепром, 1983. Вып.7,28 с.

3. Бекер М.Е., Швинка Ю.Э., Лука В.Т. и др. Трансформация продуктов фотосинтеза. Под ред. М.Е.Бекера. Рига: Зинатне, 1984. -252 с.

4. Бендетский К.М., Яровенко В.Л., Лукьянова Л.И. Механизм действия а-амилазы на амилозу // Биохимия, 1972. Т 37. вып.1. С. 117-123.

5. Беренцвейг И.А. Исследование образования побочных продуктов брожения с целью разработки технологии непрерывного брожения и дображивания пива. Автореф. канд. дисс. М.: МТИППЮ, 1975. - 33 с.

6. Беренцвейг И.А., Крицкова Г.М. Изучение образования и превращения диацетила для разработки технологии непрерывного получения пива. М.: ЦНИИТЭИПищепром, 1974. - 24 с.

7. Боднарь М.В. Разработка технологии получения и сбраживания осветленного сусла при переработке зернового сырья на этанол. Автореф. канд. дисс. Воронеж: ВГТА, 1999.-20с.

8. Бородин В.М., Мейсель М.Н. Опыт применения антибиотика оливомицина для выявления хромосом у дрожжей. Микробиология, 1976, 45, №2, с. 370 - 372.

9. Вальдшмидт-Лейтц. Ферменты: их действие и свойства. / Пер. под ред. С.С.Салазкина. Л.: Химтехиздат, 1929. -208с.

10. Великая Е.И., Суходол В.Ф. Лабораторный практикум по курсу общей технологии бродильных производств (общие методы контроля). М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. - 312 с.

11. П.Воробьева JI.И. Промышленная микробиология. М.:изд-во МГУ,-1989.-С.293.

12. Востриков С.В. Боднарь М.В. Изучение динамики клейстеризации крахмала из зерновых замесов с помощью определения вводимой мощности на перемешивание // Материалы XXXVI отчетной научной конференции за 1997 год. ВГТА. С. 138.

13. Гаврилова Н.Н. Роль биомассы дрожжей Saccharomyces carlsbergensis шт. 11 в процессе образования высших спиртов при брожении. Автореф. Канд. дисс. М., 1970. - 26 с.

14. Галкина Г.В., Ладур Т.А., Сидорова Е.К. Современные методы гидролиза крахмала, фильтрации и очистки гидролизатов. М.: ЦИНТИ пищепром, 1966.

15. Гербер М.И. Производство и применение ферментных препаратов. Киев. 1968.- 103 С.

16. Глаголев Н.А. Курс номографии. М.: Высшая школа, изд. 2-е, 1961.

17. Грачев Ю.П. Математические методы планирования экспериментов М.: Химия, 1972. - 200 с.

18. Грачева И.М. Биосинтез высших спиртов дрожжами. В кн.: Микробиология, т. 1. - М.: ВИНИТИ, 1972. - с. 97-120.

19. Грачева И.М. Исследование процесса образования высших спиртов дрожжами. Автореф. докт. дисс. М.: МТИПП, 1972. - 72 с.

20. Грачева И.М. Технология ферментных препаратов. М.: Агропромиздат, 1987. - 335с.

21. Грачева И.М. Технология ферментных препаратов. М.: Пищевая промышленность, 1975. - 392 с.

22. Грачева И.М., Гаврилова Н.Н., Ковалевич JI.C., Нисман Л.И. Взаимосвязь концентрации сухих веществ среды и прироста биомассы с накоплением высших спиртов культурой Saccharomyces carlsbergensis штамм XI. Микробиология, 1971, т. 40, вып. 4, с. 615621.

23. Губрий Г.Г. Конверсия различных видов целлюлозосодержащего сырья препаратами целлюлаз, и ее роль в биотехнологии // Хранение и переработка сельхозсырья, № 4, 1994.

24. Дерканосов Н.И., Образцова А.З., Куршева Н.Г. Влияние условий сбраживания мелассы на образование побочных продуктов. Ферментная и спиртовая промышленность. 1987, № 4, с. 22-25

25. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты,- Т.1.-М.: Мир, 1982.-392 с.

26. Жвирблянская А.Ю., Исаева B.C. Дрожжи в пивоварении. М.: Пищевая промышленность, 1979, 248 с.

27. Жеребцов Н.А. Амилолитические ферменты в пищевой промышленности. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984. -160 с.

28. Жеребцов Н.А., Краюшкина Э.А. Роль амилазы, амилазы и глюкоамилазы при сбраживании крахмалсодержащих заторов // Ферментная и спиртовая промышленность,- 1971.-№2.-с. 21-24.

29. Заявка 0577915 ЕПВ, МКИ С 12№15/81,С12№1/18. Расы дрожжей с повышенной устойчивостью к воздействию нагрузок и/или бродильной способностью.

30. Заявка 2616445 Франция, МКИ С 12 Р 7/06 16.12.88. Способ получения этанола с использованием штаммов микроорганизмов с высокой сопротивляемостью.

31. Иванова В.Ю., Белуков СВ. Повышение криорезистентности пекарских дрожжей как результат изменения условий их культивирования. Биотенология, 1996, № 8, с. 50 52.

32. Ильинич В.В. Устинников Б.А. Технология спирта и спиртопродуктов. М.: В.О. «Агропромиздат». - 1987. - 383 с.

33. Инструкция по технохимическому и микробиологическому контролю спиртового производства. М.: Агропромиздат. 1986. - 398 с.

34. Калунянц К.А., Голгер Л.И., Балашов В.Е. Оборудование микробиологических производств. -М.: Агропромиздат, 1987.-398 с.

35. Калуняц К.А., Голгер Л.И. Микробные ферментные препараты. -М.: Пищевая промышленность, 1979. 304с.

36. Кислая Л.В., Маринченко В.А., Мудрак Т.Е., Климчук Г.К. Влияние кислотности на накопление термотолерантных дрожжей и сбраживанме сусла. Ферментная и спиртовая промышленность.-1986 -№2.

37. Кислухина О., Кюдулас И. Биотехнологические основы переработки растительного сырья. Каунас: Технология, 1997.

38. Климовский Д.Н., Смирнов В.А., Стабников В.Н. Технология спирта. М.: Пищ. пр - сть, 1967.

39. Ковалевич Л.С. Образование диацетила и других побочных продуктов дрожжами при интенсифицированных режимах брожения. Автореф.канд.дисс. М.: МТИПП, 1974. - 33 с.

40. Козлова Т.М. Структурная и ультраструктурная организация дрожжевых организмов и ее перестройка в зависимости от физиологического состояния, Автореф. канд. дисс. М.: Ин-т микробиолгии АН СССР, 1969. - 28 с.

41. Коновалов С.А. Биохимия дрожжей. М.: Пищевая пром-сть, 1980. -271 с.

42. Котов В.Б., Гошев В.Е. Производство и применение ферментных препаратов за рубежом. М.: ОНТИЭИмикробиопром, 1973. - 45 с.

43. Кретович В.Н., Яровенко В.Л. и др. Ферментные препараты в пищевой промышленности. М.: Пищевая промышленность, 1975. -536 с.

44. Куприянова- Ашина Ф.Г., Колпаков А.И., Луцкая А.Ю., Кепечева P.M., Лещинская П.Б. Влияние РНКазы Bacillus intermedins на рост культуры дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Прикладная биохимия и микробиология, 1996, том 32, № 2, с. 254 259

45. Куприянова Ф.Г. -Ашина, Колпаков А.И., Луцкая А.Ю., Эль-Регистан Г.П., Козлова А.Н., Дужа М.В. Действие мембранотропных физиологически активных веществ на рост культуры Saccharomyces cerevisiae. Микробиология., 1995, том 64, № 5, с. 596 600.

46. Куршева Н.Г. Прогрессивные методы интенсификации технологических процессов спиртового и ликеро-водочногопроизводств: Тексты лекций; Воронеж, гос. технол. акад. Воронеж, 1996, 56 с.

47. Мальцев П. М. Технология бродильных производств.-2-е изд., перераб. и доп. М.: Пищевая промышленность, 1980. - 560 с.

48. Маринченко В.А., Кислая А.В., Чупов В.В., Горбач В.П., Мудрак Т.Б., Петрова И.Ю., Маринченко JI.B. Иммобилизованные термотолерантные дрожжи в производстве спирта //Известия вузов. Пищевая технология.-1988.-№3.-С.40 -43.

49. Маринченко В.А., Кислая Л.В., Мудрак Т.Е., Серова Ю.З., Добролинская Г.М., Чернова В.И. Применение термотолерантных дрожжей расы К-81 в производстве спирта. // Ферментная и спиртовая промышленность.-1987.-№3.-с.24-26.

50. Мачихин Ю.А., Мачихин С.А. Инженерная реология пищевых материалов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981. - 216с.

51. Методы биохимического исследования растений. Под ред. А. И. Ермакова. - 3 изд. перераб и доп. - Л.: Агропромиздат, 1987.

52. Москвитин Н.Н., Чупраков И.А., Петранек Г., Славичек И. Применение газо-жидкостной хроматографии в криминалистических исследованиях. Москва: типография НИИМАШ, 1971. 160 с.

53. Невский Б.А. Справочная книга по номографии. М.-Л.: Гостехиздат, 1951.

54. Нудель Л.Ш. Основы микробиологии бродильных производств, Москва, Пищевая промышленность, 1973

55. Панкратов А.Я. Техническая микробиология пищевых продуктов. Учебное пособие для вузов. М.: Мир, 1968.

56. Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. Под. ред. проф. И.Л. Работновой. М.: Мир, 1978.

57. Плановский А.Н, Рамм В.М., Каган С.З. Процессы и аппараты химической технологии. -М.: Химия, 1967.

58. Полуянова М.Т., Устинников Б.А. Потери углеводов при сбраживании высококонцентриованного сусла. Ферментная и спиртовая промышленность, М. 1975, № 5, с. 11-14

59. Полуянова С.Т., Устинников Б.А. Интенсификация спиртового производства путем повышения концентрации сусла. Ферментная и спиртовая промышленность М. №1, 1975 г., с. 8-11

60. Промышленная микробиология. Под ред. Н.С. Егорова. М.: Высшая школа,- 1989.

61. Работнова И.Л., Позмогова И.Н. Хемостатное культивирование и ингибирование роста микрорганизмов. М.: Наука, 1979

62. Родзевич В.И., Тютюнин И.М. Целлюлолитические ферменты для спиртовой промышленности. // Тезисы докладов Всесоюзного совещания по ферментам микроорганизмов //.Минск. 1978

63. Родопуло А.К., Кавадзе А.В., Писарницкий А.Ф. Биосинтез и метаболизм ацетоина и диацетила (обзор). Прикл. биохим. и микробиол., 1976, ХШ, № 3, с. 309-316.

64. Рухлядева А.П. Технохимический контроль спиртового производства. М.: Пищевая промышленность. -1974.

65. Рухлядева А.П., Полыгалина Г.В. Методы определения активности гидролитических ферментов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981.-287 с.

66. Рухлядева А.П., Филатова Т.Г., Чередниченко B.C. Справочник для работников лабораторий спиртовых заводов. М.: Пищевая промышленность. 1979. - 173 с.

67. Салманова Л.С. Цитолитические ферменты и их применение в пивоварении М.: ЦИНТИпищепром, 1966 - 56с.

68. Серова.Ю.З. Адаптация дрожжей к высоким температурам //Пищевая промышленность.-1994.-№1.

69. Силин П.М., Сапегина Е.А. Труды Воронежского химико-технологического института пищевой промышленности, т. 3-4, 1939. -с. 49.

70. Смирнов В.А. Труды Ленинградского технологического института пищевой промышленности. т. 13., 1956, с. 116, 133, 142.

71. Столяров Б.В., Савинов И.М., Витенберг А.Г. Руководство к практическим работам по газовой хроматографии. Л.: Химия, 1988. - 335 с.

72. Тиунова Н.А. Применение целлюлаз. В. кн.: Целлюлазы микроорганизмов. -М.: Наука, 1981. с. 40-73.

73. Фертман Г.И. Химия спиртового производства. Пищепромиздат, Москва 1936 - Ленинград.

74. Фукс А.А. Технология спиртового производства. / Посмертное издание, подготовлено к печати и дополнено А.Л. Малченко и Г.И. Фертманом / М.: Пищепромиздат, 1951.

75. Хованский Г.С. Методы номографирования. М.: ВЦ АН СССР, 1964.

76. Хованский Г.С. Основы номографии. Главная редакция физико-математической литературы издательства «Наука», М., 1976

77. Хованский Г.С. Что такое номография. М.: ВЦ АН СССР, 1969.

78. D'Amore Т., Cmmplen R., Stewart G.G. Значение трегалозы для стрессовой толерантности дрожжей // J. Ind. Microbiol.-1991 .-7, №3,191-195.

79. Duong Van Ног, Ho Thi Tuyet Suong, Nguyen Lan Dung. Nong nghup cong nghiep thie pham //Arg.and Food Ing.-1992.-№3.-P.115-116.

80. Engan S., Higher Alcohols in Beer. The Brewers Digest, 1974, 49, № 8, 52 - 59.

81. Hankeli A.D., Lie S. Production of Diacetyl, 2-Acctolactate and Acetoin by Yeasts during Fermentation. I.Inst. Brewing., 1972, 78, № ЗЮ, 229 -232 c.

82. Hashimoto N., Kuroiwa Y. Maturation of the Beer Flafvor During Lagering. The Brewers Digest, 1972, 47, № 8, 64 - 71 c.

83. Jager P. Einsatzmoglichkeiten fur hochvergarende Spezialhefem lm Brennereibereich. Mitt. Vtrsuchsstat. Carungsgenwerbe Wien.-1986, V.40, №7-8, P. 80-81

84. Mandtel I.L., Chambon P. Purification of RNA Polymerase В activity from rat liver. FEBSLetters, 1971, 15, № 3, 175 - 180 c.

85. Pieper H.J., Thomas L. Vergleichende Untersuchungen zur amylolytischen Wirkung von Handelsenzympraparaten in der Alkoholproduktion unter besonderer Beriicksichtigung simulierter druckloser Maischverfahren. Die Branntweinwirtschaft, 1989, S. 70 - 77.

86. Rolfe G., Defren G. // J. Am. Chem. Soc. 1896. - Vol. 18 - P. 809.

87. Rosa M.F., Sa Correia I., Novais I.M. Повышение устойчивости к этанолу у Kluyveromyces fragilis в соке земляной груши // Biotechnol and Bioeng.-1988.-31, №7.-705 -710.

88. Wesenberg J. Der drucklose enzymatische Starkeaufschlu3 von Roggen in der Getreidebrennerei. Die Branntweinwirtschaft, 1990, S. 31 - 39.

89. Zeng Yunzhong, Wu Xuechang, Tin Shan, Zhu Xioaping, Chen Shivi. Hangzhou daxue xuebao. Ziran kexue ban // T. Hangzhou Univ. Natur. Sei. Ed.-l 992.-19.-№3.-c.327-335.195