автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Разработка технологии получения из молочной сыворотки регуляторов роста растений с использованием электроактивированной воды, процессов сорбции и ферментации

На правахрукописи

Плющ Елена Валентиновна

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ИЗ МОЛОЧНОЙ СЫВОРОТКИ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА РАСТЕНИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭЛЕКТРОАКТИВИРОВАННОЙ ВОДЫ, ПРОЦЕССОВ СОРБЦИИ И ФЕРМЕНТАЦИИ

Специальность 05.18.07 — Биотехнология пищевых продуктов

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Ставрополь — 2005

Работа выполнена в ФГОУ ВПО Ставропольском государственном аграрном университете

Научный руководитель: доктор химических наук, профессор

Брыкалов Анатолий Валерьевич

Официальные оппоненты: доктор технических наук, профессор

Жидков Владимир Евдокимович

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Николаева Наталья Федоровна

Ведущая организация: ФГУП Научно-исследовательский

институт комплексного использования молочного сырья

Защита состоится «22» марта 2005 г. в 1300 часов на заседании диссертационного совета Д 212.245.05 при Северо-Кавказском государственном техническом университете по адресу: 355029, г. Ставрополь, пр. Кулакова 2, ауд. К308.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке СевКавГТУ.

Автореферат разослан ¿^¿^рй-ЖР-

2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат технических наук, доцент

В.И. Шипулин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время во многих странах мира, в том числе и в России, вопросы здорового питания населения возведены в ранг государственной политики. В связи с этим ставится задача получения экологически безопасной сельскохозяйственной продукции и создания эффективных технологий ее переработки. В области растениеводства актуально направление по разработке современных технологий возделывания зерновых культур с использованием регуляторов роста нового поколения.

При создании технологий регуляторов роста растений важен поиск рациональных по экономическим показателям сырьевых ресурсов, содержащих комплекс биологически активных веществ.

Молочная сыворотка является побочным продуктом при получении сыра и творога. В ней присутствуют все основные классы органических соединений: жиры, белки, углеводы, витамины, и кроме того, в молочной сыворотке достаточно разнообразен состав макро-и микроэлементов.

Перспективным направлением в области получения регуляторов роста растений из молочной сыворотки является разработка технологии на основе применения современных методов электрохимии, сорбции и ферментативного катализа.

Анализ патентной информации и литературных источников за последние 15 лет указывает на ограниченное число публикаций по применению молочной сыворотки в растениеводстве; отсутствуют данные по ее использованию в качестве сырья для получения регуляторов роста растений.

Таким образом, проведение исследований по разработке технологий регуляторов роста растений на основе молочной сыворотки весьма актуально: возникает необходимость комплекса исследований данных регуляторов в лаборатории, полевых и производственных условиях с оценкой экономической эффективности их применения.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось комплексное решение проблемы по разработке технологии получения из молочной сыворотки регуляторов роста растений с использованием электроактивированной воды, процессов сорбции и ферментации, изучение их биологической активности и проведение исследований по применению регуляторов роста в растениеводстве.

При выполнении работы предстояло решить следующие задачи:

- на основании теоретического анализа обосновать применение молочной сыворотки в растениеводстве;

- исследовать биологическую активность щелочной фракции ЭХА воды во взаимосвязи с ее физико-химическими свойствами;

- изучить влияние значений ОВП и рН щелочной фракции ЭХА воды на изменение абсолютной скорости ростовых процессов в семенах озимой пшеницы;

- изучить влияние щелочной фракции ЭХА вод на кинетические параметры ферментативной активности каталазы (максимальная скорость и кажущаяся константа Михаэлиса);

- разработать технологию получения регуляторов роста растений на основе щелочной фракции ЭХА воды и молочной сыворотки сорбционно-очищенной хитозаном;

- синтезировать композиционные амино- и фенилкремнеземные сорбенты, исследовать их состав, структурные характеристики, провести анализ ИК-спектров, микроструктуры поверхности;

- провести исследования по очистке молочной сыворотки от бел-

ков кремнеземными сорбентами для получения регуляторов роста растений и исследовать их биологическую активность;

- разработать технологию получения комплексного регулятора роста растений методом ферментации экстрактов лекарственных растений молочной сывороткой, изучить их состав, провести стандартизацию;

- оценить экономическую эффективность, экологическую безопасность разработанных технологий получения регуляторов роста растений и их применения в растениеводстве.

Научная новизна работы. Проведены исследования закономерностей электрохимического активирования воды с установлением зависимости изменения значений рН и окислительно-восстановительного потенциала католита от времени электрохимического активирования, напряжения на электродах и расстояния между ними во взаимосвязи с оценкой биологической активности.

Впервые установлено, что оптимизированные показатели электрохимического активирования воды с получением католита при напряжении 50 В в течение 30 минут и расстоянием между электродами 80 мм обеспечивают при значении ОВП = -540 мВ и рН = 10,2

максимальную величину биологической активности при действии на семена агрокультуры, что в конечном итоге оказывает положительное влияние на энергию прорастания и всхожесть семян озимой пшеницы.

С использованием уравнения Михаэлиса-Ментен определены кинетические параметры ферментативной реакции энзима каталазы при действии католита на проростки семян озимой пшеницы, и установлен механизм бесконкурентной активации реакции расщепления пе-роксида водорода каталазой.

Синтезированы композиционные амино- и фенилкремнеземные сорбенты, исследованы их физико-химические характеристики, определена эффективность их применения для технологии получения из молочной сыворотки регуляторов роста растений.

Впервые разработана технология получения регуляторов роста растений методом ферментации экстрактов лекарственных растений энзимами молочной сыворотки с оптимизацией факторов процесса, исследован их состав, биологическая активность и эффективность при возделывании озимой пшеницы.

Практическая значимость. Технология получения композиционных амино- и фенилкремнеземных сорбентов прошла промышленную наработку в ЗАО НПФ «Люминофор», что подтверждено соответствующим актом. Разработанные регуляторы роста растений из молочной сыворотки прошли производственные испытания с положительным заключением СХП ст. Новомарьевской Шпаковского района Ставропольского края, стандартизированы и рекомендованы к использованию для предпосевной обработки семян агрокультур. Разработан и утвержден технологический регламент производства из молочной сыворотки регулятора роста растений.

Апробация работы. Результаты работы были представлены на Всероссийской научно-технической конференции «Современные достижения биотехнологии» (Ставрополь, 2002); Международной научной конференции «Повестка дня на XXI век: Программа действия — экологическая безопасность и устойчивость развития» (Ставрополь, 2002); Всероссийской научной конференции «Биотехнология 2003» (Сочи, 2003); научно-методической конференции «Университетская наука — региону» (Ставрополь, 2004); 68-й научно-практической конференции «Проблемы экологии и защиты растений в сельском хозяйстве» (Ставрополь, 2004); Международной научно-практической конференции «Проблемы экологической без-

опасности и сохранения природно-ресурсного потенциала» (Ставрополь, 2004); IV Международной научной конференции «Химия твердого тела и современные микро- и нанотехнологии» (Кисловодск, 2004); Международной научной конференции «Междисциплинарный уровень интеграции современных научных исследований» (Турция, 2004); Международном конгрессе «Высокие технологии» (Франция, 2004).

Публикации. Результаты исследований опубликованы в 15-ти работах.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов, библиографического списка, приложений. Работа изложена на 150 страницах, содержит 29 рисунков, 32 таблицы. Библиографический список состоит из 150 наименований.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность выбранной темы диссертации, определены цели, задачи исследования.

В первой главе рассмотрены состав, свойства и биологическая ценность молочной сыворотки как сырья для получения регулятора роста растений, проведен анализ направлений ее использования в биотехнологии, растениеводстве для повышения продуктивности сельскохозяйственных пастбищных угодий и совместного использования с гербицидами или фунгицидами, проведен обзор материалов по использованию ЭХА вод в пищевой промышленности при производстве продуктов питания и в сельском хозяйстве для улучшения посевных качеств семян агрокультур, повышения их урожайности; рассмотрены строение и состав кремнесодержащих и хи-тозановых сорбционных материалов и их применение в сорбцион-ных процессах при извлечении белковых и липидных компонентов из молочной сыворотки, а также использования хитозановых композиций в защите растений от болезней и вредителей; проведено обоснование экспериментальных исследований выбранного направления работы.

Во второй главе представлены данные об организации работы, изложена характеристика исходных материалов, методология биохимических, биотехнологических, физико-химических исследований и статистической обработки результатов исследований. Схема проведения экспериментальных исследований представлена на рисунке 1.

Рисунок 1 — Схема проведения исследований

Для исследования процесса электроактивации и получения ЭХА воды была сконструирована лабораторная установка циклического действия. Измерение рН и ОВП воды производили на иономере ЭВ-74 по методике РД 52. 24.495-95.

В качестве основного сырья для получения регуляторов роста растений использовали подсырную и творожную сыворотку, соответствующую ГОСТам, лекарственные растения: солодка голая и зверобой продырявленный.

Активную кислотность молочной сыворотки определяли потен-циометрическим методом по ГОСТ 3624-674; титруемую кислотность по ГОСТ 26781-85; содержание сывороточных белков методом Къельдаля; массовую долю сухих веществ рефрактометрически по ГОСТ 24908; содержание хитозана методом ядерно-магнитного резонанса ЯМР; содержание лактозы хроматографическом методом; аминокислотный анализ проводили методом ионообменной колоночной хроматографии на автоматическом аминокислотном анализаторе ААА-339М (Чехия) по ГОСТ 13496.21-87; микроэлементный анализ проводили методом атомно-абсорбционной спектрометрии на приборе «Квант-АФА» с подготовкой проб автоклавным разложением в соответствии с методикой. Химический состав экстрактов исследован методом газожидкостной хроматографии. Идентификацию и количественное определение органических веществ проводили по базовой компьютерной программе MS: TOP TBC HP 480, по времени и объему удержания веществ. Определение активности каталазы — газометрическим методом. Посевные качества семян определяли в соответствии с ГОСТом 12038-84.

Для получения композиционных органокремнеземных сорбентов использовался высокодисперсный кремнезем аэросил А-380. В качестве модификаторов сорбентов применяли фенилтрихлорси-лан, у-аминопропилтриэтоксисилан. В качестве сорбента также использовали хитозан. Удельную поверхность сорбентов исследовали методом, основанном на низкотемпературной адсорбции азота по Клячко—Гурвичу, объем пор и их распределение по размерам — методом ртутной порометрии; микроструктуру композиционных сорбентов — на электронном микроскопе IMZ-T 3000; ИК-спектры сорбентов — на спектрофотометре Specord-75 IR в диапазоне волновых чисел 4000-500 см-1; термический анализ сорбентов — на приборе дериватографе в диапазоне температур 100-500 °С при скорости нагрева 6°/ мин.

В третьей главе представлено теоретическое обоснование использования молочной сыворотки в качестве сырьевого ресурса для получения регуляторов роста растений (рис. 2).

Рисунок 2 - Блок-схема теоретического обоснования использования молочной сыворотки в качестве сырьевого ресурса для получения регуляторов роста растений

Экспериментально установленный состав молочной сыворотки, содержащей важнейший комплекс биологически активных веществ, макро- и микроэлементов, указывает на возможность использования ее в качестве сырья в технологии получения регуляторов роста растений.

Разработка технологии получения регуляторов роста растений на основе молочной сыворотки для предпосевной обработки семян направлено на решение важнейшей проблемы поиска дешевого сырья, что способствует снижению в конечном итоге себестоимости продовольственной сельскохозяйственной продукции, а также создает условия экологической безопасности в связи с рациональной утилизацией данного вторичного сырья молочной промышленности.

Четвертая глава посвящена получению ЭХА воды, исследованию ее физико-химических свойств и определению оптимальных параметров обработки и физико-химических показателей, обеспечивающих максимальную величину ее биологической активности.

В качестве изучаемых параметров исследованы напряжение на электродах (30, 50, 70 В), расстояние между электродами (40, 80, 160 мм), продолжительность процесса (10, 20, 30, 40, 50 мин). В качестве основных показателей ЭХА воды, в значительной степени определяющих уровень ее активации, исследованы рН и ОВП щелочной фракции ЭХА воды.

При проведении эксперимента и построении графических зависимостей (рис. 3, 4) обнаружены следующие закономерности:

- при увеличении времени электрохимической активации воды значения рН католита увеличивается от 7,8 до 10,9, а ОВП уменьшается от +200 до -610 мВ, в наибольшей степени это происходит в первые 20-30 мин процесса, затем изменение значений показателей идет заметно медленнее;

- при изменении расстояния между электродами при постоянном напряжении увеличение рН католита и уменьшение ОВП происходит в большей степени при расстоянии между электродами I = 80 мм и в наименьшей степени при I = 40 и 160 мм.

7 -----

0 10 20 30 40 50

I. мин

Рисунок 3 - Динамика изменения рН католига во времени при напряжении 50 В и расстоянии между электродами 160 мм (1), 80 мм (2); 40 мм (3)

300

0 10 20 30 40 50

I, мин

Рисунок 4-Динамика изменения ОВП католита по времени при напряжении 50 В и расстоянии между электродами 160 мм (1); 80 мм (2); 40 мм (3)

Для оптимизации режимов получения ЭХА воды с определенными физико-химическими характеристиками, обладающей максимальной ростостимулирующей активностью, был осуществлен многофакторный эксперимент.

В качестве выходного параметра использовали величину абсолютной скорости роста корешков озимой пшеницы. В качестве изучаемых факторов оптимизации были исследованы: X, — напряжение (30, 50, 70 В); х2 — расстояние между электродами (40, 80, 160 мм); х3 — продолжительность процесса (10, 20, 30, 40, 50 мин); х4 — значение рН; Х5 — значение ОВП в мВ. В результате обработки экспериментальных данных при помощи программы пакета «Statistica 5» было получено уравнение регрессии, адекватно описывающее происходящие процессы:

Анализ уравнения показывает, что доминирующее влияние на ростостимулирующую активность ЭХА воды имеет время электроактивации и значения рН и ОВП. Наибольшие значения абсолютная скорость роста достигает при следующем режиме получения ЭХА воды: = 30 мин, и показателей рН =

10,2, ОВП = -540мВ. В данном варианте абсолютная скорость роста проростков равна 0,514 мм/ч, корешков — 0,61 мм/ч. Полученные результаты указывают на то, что при действии на семена щелочной фракцией ЭХА воды скорость роста корешков выше, чем скорость роста проростков. Таким образом, установлено, что щелочная фракция ЭХА воды в большей степени влияет на рост корневой системы растений.

Исследована кинетика и определены кинетические параметры ферментативной реакции для каталазы в семенах и проростках пшеницы под влиянием ЭХА воды. Зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата и фермента иллюстрирует уравнение Михаэлиса—Ментен:

у = 0,4369 - 0,00346х, + 0,00684х4 - 0,00037х,

(1)

У =

где — скорость ферментативной реакции; - каталитическая константа;

кат

|[Е0] - концентрация фермента, [50] - концентрация субстрата, КМ(каж, - кажущаяся константа Михаэлиса Для определения кинетических параметров активности фермента использован традиционный способ линеаризации зависимости начальной скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата (И В Березин, А А Клесов, 1976) Экспериментальные данные были представлены в координатах Лайнуивера—Берка (1 /V, 1/[8(|]) или в координатах «двойных обратных величин» Как следует из

выражения

+

К

М(каж)

1

-1 = 1 V ~ V V

т Т га

вид прямой линии, пересекающей ось абсцисс и ординат в точках 1/КМ(ыж)И 1/Ут соответственно (рис 5)

х г-п, график зависимости имеет 1^0 ]

1'исупок 1 — Определение максимальном скорости V и кажущейся константы Михаэлиса КМ(кЖ| для ферментативном реакции каылазы в семенах озимои пшеницы

Значение кинетических параметров ферментативной реакции представлены в таблице 1

Таблица 1 - Кинетические параметры активности каталазы в семенах и проростках пшеницы

Варианты ^М(кяж)' Е сек Е/сек-М

Семена (контроль) вода без ЭХ обработки 1,16 3,70 1,23

Семена (опыт) щелочная фракция ЭХА воды 1,28 4,54 1,67

3-дневные проростки (контроль) вода без ЭХ обработки 1,25 7,14 2,38

3-дневные проростки (опыт) щелочная фракция ЭХА воды 1,44 8,00 2,67

7-дневные проростки (контроль) вода без ЭХ обработки 1,61 14,28 4,76

7-дневные проростки (опыт) щелочная фракция ЭХА воды 1,72 17,24 5,75

Результаты исследований указывают на то, что действие ЭХА воды на семена и проростки пшеницы увеличивает в одинаковой степени значения что по механизму ферментативной

реакции соответствует бесконкурентной активации.

Предложен алгоритм механизма действия ЭХА воды на ростовые процессы в растениях, основанный на том, что при электрохимической активации вода переходит в метастабильное состояние, характеризующееся изменением физико-химических свойств и упорядочением структуры. Действие такой воды на семена растений сопровождается интенсификацией физического набухания и активацией ферментативных систем, что приводит в конечном итоге к повышению энергии прорастания, улучшению посевных качеств семян.

Проведенные исследования по физико-химическим свойствам и связанной с ними биологической активности указывают на целесообразность применения ЭХА воды как составляющего компонента в технологии получения регуляторов роста растений.

Пятая глава посвящена исследованию технологических этапов получения комплексных регуляторов роста растений на основе молочной сыворотки и ЭХА воды с применением методов сорбции и ферментации.

Первоначально для получения регулятора использовали простой технологический прием разведения молочной сыворотки ЭХА водой при различных соотношениях. Наилучшие результаты достигнуты при соотношении компонентов молочная сыворотка: ЭХА вода — 1:10. По результатам действия регулятора роста на семена озимой пшеницы в сравнении с контролем, прирост в энергии прорастания составил 5-6%, длины корешков 26—28%, длины проростков 30-32%, биомассы корешков 21-22%, биомассы проростков 24-25%. Указанное явление усиления ростостимулирующей активности объясняется за счет эффекта синергизма — взаимовлияния компонентов молочной сыворотки и ЭХА воды при смешивании, а также изменением значения рН препарата до 7,2, что приближено к норме физиологических процессов в растительной клетке.

Дальнейшие исследования были посвящены совершенствованию технологии получения регулятора роста с использованием фракционирования молочной сыворотки на компоненты сорбционными методами. В качестве сорбента был использован коллоидный раствор хитозана, который вносили в количестве 5% в подсырную молочную сыворотку. Раствор хитозана был приготовлен согласно методике, предложенной сотрудниками СевКавГТУ (И.А. Евдокимов, Л.Р.Алиева, 2002). Полное разделение системы наблюдали через 60 мин при температуре 20 °С. В результате фракционирования образовались два целевых компонента: осветленная молочная сыворотка с низким остаточным содержанием белковых веществ и белковый концентрат. Степень удаления белковых веществ составляет 70%.

В последующем технологическая схема получения регулятора роста (Р1) включала смешивание осветленной молочной сыворотки с ЭХА водой в разных соотношениях. Наилучшие результаты по биологической активности в ходе исследований были получены после сорбционной очистки молочной сыворотки хитозаном, а затем разведении ее ЭХА водой в соотношениях 1:10. По результатам действия регулятора роста на семена озимой пшеницы в сравнении с контролем, прирост в энергии прорастания составил 7%, длины корешков — 34%, длины проростков — 39%, биомассы корешков — 29%, биомассы проростков — 31%.

Проведен синтез гидрофобных сорбентов методом молекулярного наслаивания, модифицированием аэросилогеля фенилтрихлорсила-ном в соответствии с методикой (А.В. Брыкалов, 1993). Доказатель-

ством гидрофобных свойств поверхности фенилсодержащих сорбентов являются результаты термоанализа. Фенилсодержащий сорбент не содержит координационно-связанной воды, удаляемой с поверхности по сравнению с немодифицированным силохромом при 100-227 °С, а термодеструкция наблюдается в интервале температур 320-500 °С.

Синтез аминокремнеземных сорбентов методом формирования пористой структуры носителя в присутствии аминосилана включал пять стадий: на стадии 1 образуется гидрогель из аэросила за счет протекающих процессов конденсации с участием силанольных групп кремнезема. На стадии 2 созревания и синерезиса гидрогеля протекают дегидратационные процессы, сопровождающиеся уменьшением объема гидрогеля, его уплотнения. На стадии 3 при термообработке гидрогель превращается в ксерогель, при этом объем его уменьшается более чем в 8-16 раз благодаря действию капиллярных сил. Стадии 4-5 отражают завершающий процесс синтеза композиционных сорбентов, обеспечивающий выделение высокодисперсной фракции.

Исследованы структурные характеристики сорбентов. Так, ами-нокремнеземный сорбент имеет удельную поверхность 88 м2/г, объем пор 1,45 см3/г и радиус пор 38 нм, а гидрофобный фенилсодержащий сорбент удельную поверхность 81 м2/г, объем пор 1,54 см3/г и радиус пор 35 нм.

Проведен анализ ИК-спектров полученных композиционных сорбентов на приборе Specord-75 Ш. Обнаруженная в спектре полоса поглощения в области 3430 см-1 соответствует валентным колебаниям аминогрупп.

Проведены исследования микроструктуры композиционных сорбентов на сканирующем электронном микроскопе IMZ-T3000 в сравнении с известными кремнеземными материалами, такими как макропористое стекло, силохром С-120. Установлено, что микроструктура сорбентов представлена сочетанием поверхностных участков аморфных образований с губчатой структурой.

Синтезированные сорбционные материалы были использованы для отделения белков из молочной сыворотки и получении регулятора роста растений (Р2). Лиофилизированную сыворотку разводили като-литом в соотношении 1:10, затем добавляли фенил- или аминокрем-неземные сорбенты, соблюдая соотношение адсорбент: сыворотка 1:20. Процесс сорбции проводили при перемешивании в течение 40 мин

с последующим отделением осадка методом фильтрации. Разработанный метод на основе сорбционной очистки молочной сыворотки с применением фенил- и аминокремнеземных сорбентов обеспечивает удаление белковых веществ, соответственно, на 61% и 68%.

Результаты действия на семена озимой пшеницы регуляторов роста растений, полученных с применением фенилкремнезема и в большей степени аминокремнеземного сорбента, свидетельствуют о положительном эффекте, значительно улучшающем посевные качества семян. Разработанные сорбционные материалы имеют преимущество перед органическим сорбентом хитозаном в связи с возможностью их регенерации и многократного использования для отделения белков из молочной сыворотки.

Разработана технология получения комплексных регуляторов роста (Р3) из молочной сыворотки и экстрактов лекарственных растений, включающая 9 стадий. Стадии 1-3 представляют подготовку растительного сырья, заключающуюся в оценке по количеству и качеству, консервацию, мойку и высушивание; стадия 4 — измельчение сырья; стадия 5 получение экстракта; стадия 6-7 — термоденатурация и очистка от балластных веществ; стадия 8 — ферментация экстрактов молочной сывороткой; стадия 9 — стерильность полученного регулятора.

Методом газожидкостной хроматографии в экстракте солодки голой идентифицировано 10 органических соединений, относящихся к этиленовым углеводородам, кислород- и азотсодержащим веществам, гетероциклическим соединениям, а также обнаружена глицирризи-новая кислота. Определены биоантиоксидантные свойства экстрактов в реакции торможения гидроксилирования анилина.

Для оптимизации параметров стадии ферментации растительных экстрактов молочной сывороткой был реализован двухфакторный эксперимент. В качестве факторов оптимизации были выбраны температурный режим и соотношение экстракт лекарственных растений зверобоя и солодки голой : молочная сыворотка. В качестве выходного параметра использовали биологическую активность препарата, устанавливаемую по энергии прорастания семян в соответствии с ГОСТом 12038-84. В качестве изучаемых факторов были исследованы соотношение экстракт : сыворотка

и температурный режим активации Время

ферментации было выбрано 30 мин с учетом ранее проведенных

исследований. В результате обработки экспериментальных данных были получены адекватные уравнения регрессии:

у, = 0,41-0,015 х,+0,0017 х2 (2)

у2 = 0,47 - 0,01 • х, + 0,0003 • х2, (3)

где - экстракт зверобоя : молочная сыворотка;

у2 — экстракт солодки голой : молочная сыворотка.

Анализ уравнений показывает, что факторы соотношения экстракт сыворотка и температурный режим оказывают в равной степени влияние в конечном итоге на ростостимулирующую активность препаратов. Таким образом, учитывая полученные данные, определены оптимальные режимы ферментации растительных экстрактов молочной сывороткой. Для экстракта зверобоя продырявленного это соотношение экстракт : сыворотка 1:1, температура 50 °С и время ферментации 30 мин. Для экстракта корня солодки : соотношение экстракт : сыворотка 1:3, температура 35 °С, время 30 мин.

Анализ полученных экспериментальных данных (рис. 6) указывает на то, что регуляторы роста обладают ростостимулирующей активностью при действии на семена озимой пшеницы. Это проявляется в усилении ростовых процессов корешков и проростков, значительном улучшении, по сравнению с контролем, посевных качеств семян.

I II

В Энергия прорастания 0 Длина корешка ПДлина проростка Ш Масса корешка 0 Масса проростка

Рисунок 6 - Ростостимулирующая активность регуляторов роста растении, полученных на основе экстрактов зверобоя продырявленного и молочной сыворотки (I) и экстракта солодки голой и молочной сыворотки (II)

По результатам выполненных исследований подана заявка на патент РФ «Способ получения стимулятора роста растений №2004129179», получены положительные данные предварительной экспертизы.

В шестой главе на основании анализа результатов экспериментальных исследований разработан технологический процесс производства регуляторов роста растений на основе молочной сыворотки и ЭХА воды с использованием методов сорбции и ферментации в соответствии с блок-схемой алгоритма последовательности выполнения технологических операций (рис. 7).

Для стандартизации регуляторов роста разработан метод на основе определения их оптической плотности в диапазоне волн 400-600 нм, характеризующий суммарное содержание биологически активных веществ. Для регулятора роста (Р,) данный показатель имеет значение °40о/°44о - °>85> для регулятора роста (Р2) Ц^/Б^ > 0,82, а для регулятора роста Ростостимулирующая актив-

ность регуляторов роста растений соответствует значениям 95-99%. Регуляторы роста представляют собой прозрачные стерильные жидкости со значением рН 6,2-7,2.

Расчет экономической эффективности технологии получения регуляторов роста растений показывает: уровень рентабельности составляет 56-80%, что направлено на обеспечение увеличения объемов производства и окупаемости затрат на внедрение технологий.

Результаты внедрения регуляторов роста в технологии возделывания озимой пшеницы сорта Донская Юбилейная в СХП ст. Новома-рьевской Шпаковского района Ставропольского края указывают на высокий уровень экономической эффективности, обеспечивающий, по сравнению с контролем, повышение урожайности агрокультур на 5,3 ц/га, улучшение качественных показателей продовольственного экологически чистого зерна, а также снижение в 1,83 раза затрат на предпосевную обработку семян (табл. 2).

Таблица 2 - Влияние регуляторов роста на качественные показатели и урожайность зерна озимой пшеницы сорта Донская Юбилейная

Варианты Стекло- Натура Количество Количество Урожай-

видность, зерна, клейковины, клейковины, ность

% г/л идк % ц/га

Контроль (без обработки) 40,1 743 50,3 27,2 30,1

Эталон - Премис 49,3 782 57,9 28,1 34,8

Регулятор из молочной

сыворотки 50,1 785 64,5 28,6 35,4

Рисунок 7 — Блок-схема алгоритма производства регуляторов роста растений из молочной сыворотки

выводы

1. На основании теоретического анализа обосновано применение молочной сыворотки в качестве ценного сырья для получения регуляторов роста растений, эффективных для предпосевной обработки семян озимой пшеницы.

2. Многофакторным экспериментом достигнут результат оптимизации режима электроактивирования воды, что обеспечивает усиление биологической активности при действии католита на семена озимой пшеницы. При показателях у католита значений рН = 10,2, ОВП = - 540мВ, получаемого в режимах электроактивации и = 50 В, /=80 мм, I = 30 мин, абсолютная скорость роста проростков зерна равна 0,514 мм/час, корешков — 0,61 мм/час.

3. Впервые исследовано влияние электроактивированной воды на кинетические параметры ферментативной активности каталазы. Определены величины максимальной скорости ферментативной реакции и значения константы Михаэлиса. Установлено, что действие ЭХА воды на семена и проростки пшеницы приводит к возрастанию значения и процесс по механизму ферментативной реакции соответствует бесконкурентной активации.

4. Разработаны комплексные регуляторы роста растений на основе молочной сыворотки и электроактивированной воды с применением методов сорбции для отделения балластных белков и липидов коллоидной формой хитозана. Технология получения регуляторов обеспечивает высокий уровень их ростостимулирующей активности при действии на семена пшеницы.

5. Проведены исследования по синтезу амино- и фенилкремне-земных сорбентов методом формирования пористой структуры кремнезема в присутствии силанов, имеющих стандартные структурные характеристики, — удельную поверхность в пределах 81-88 м2/г, объем пор 1,45-1,54 см3/г.

6. Исследован химический состав органокремнеземных сорбентов, микроструктура поверхности в сопоставлении с данными ИК-спект-роскопии и термографического анализа. По результатам термоанализа установлено, что поверхность фенилкремнеземного сорбента значительно гидрофобизирована, не содержит координационно-связанной воды, и потеря массы сорбента протекает с малой скоростью при 320-500 °С, что характеризует процесс термодеструкции модификатора.

7. По результатам использования в технологии получения регуляторов роста растений органокремнеземных сорбентов установлен высокий уровень эффективности на стадии очистки молочной сыворотки от белков.

8. Впервые разработана технология получения регуляторов роста растений на основе оптимизации режимов ферментации экстрактов лекарственных растений молочной сывороткой.

9. Дана оценка экономической эффективности разработанной технологии регуляторов роста растений, получаемых из молочной сыворотки с использованием электроактивированной воды, процессов сорбции и ферментации, характеризующихся ростостимулирующей активностью и представляющих новое поколение регуляторов роста растений из вторичного молочного сырья.

ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ ОПУБЛИКОВАНЫ СЛЕДУЮЩИЕ РАБОТЫ:

1. Брыкалов А.В., Плющ Е.В., Храмцов А.Г. Получение регуляторов роста растений на основе компонентов молочной сыворотки // Современные наукоемкие технологии: Матер. Общерос. конф. — Сочи, 2002. - С. 7.

2. Храмцов А.Г., Брыкалов А.В., Плющ Е.В., Алиева Л.Р. Биотехнология препаратов из молочной сыворотки с ростостимулирующей ак-тивностью//Современные достижения биотехнологии: Матер. II Все-рос. научно-технич. конф. — Т. 1. — Ставрополь, 2002. — С. 53-55.

3. Храмцов А.Г., Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Исследование действия молочной сыворотки на семена зерновых культур / Современные достижения биотехнологии: Матер. II Всерос. научно-технич. конф. -Т. 1. - Ставрополь, 2002. - С. 55-56.

4. Брыкалов А.В., Плющ Е.В., Храмцов А.Г. Разработка и исследование экологически безопасных препаратов из молочной сыворотки // Повестка дня на XXI век: Программа действия — экологическая безопасность и устойчивость развития: Матер. Междунар науч. конф. — Ставрополь, 2002. — С. 205-206.

5. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Физико-химические и биологические свойства молочной сыворотки // Химизация растениеводства и вопросы экологии / СГАУ: Сб. науч. тр. — Ставрополь, 2002. — С. 53-56.

6. Брыкалов А.В., Плющ Е.В., Каталевская Е.М. Технология получения препаратов из молочной сыворотки // Биотехнология 2003: Матер. Междунар. науч. конф. — Сочи, 2003. — С. 52-53.

7. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Некоторые аспекты механизма биологического действия электроактивированной воды на прорастание семян озимой пшеницы // Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Матер, науч. конф. «Университетская наука — региону». — Ставрополь, 2004. — С. 48-49.

8. Брыкалов А.В., Плющ Е.В., Храмцов А.Г. Получение и исследование биопрепаратов из молочной сыворотки // Современные достижения в химии, биологии и экономике / СГАУ: Сб. науч. тр. — Ставрополь, 2004. - С. 49-50.

9. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Получение и исследование влияния электрохимически активированной воды на прорастание семян озимой пшеницы // Проблемы экологии и защиты растений в сельском хозяйстве: Матер. 68-й научно-практ. конф. — Ставрополь, 2004. — С. 98-102.

10. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Получение препаратов с ростости-мулирующей активностью на основе ферментации растительного сырья энзимами молочной сыворотки // Проблемы экологии и защиты растений в сельском хозяйстве: Матер. 68-й научно-практ. конф. — Ставрополь, 2004. - С. 102-906.

11. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Разработка способов активации растительных экстрактов на основе молочной сыворотки, обладающих росторегулирующей активностью // Проблемы экологической безопасности и сохранения природно-ресурсного потенциала: Матер. Междунар. научно-практ. конф. — Ставрополь, 2004. — С. 200—202.

12. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Синтез и исследование сорбентов для гидрофобной хроматографии // Химия твердого тела и современные микро- и нанотехнологии: Матер. IV Междунар. науч. конф. — Кисловодск, 2004. - С. 78-79.

13. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Синтез сорбентов с ионообменными свойствами для сорбции белков молочной сыворотки // Химия твердого тела и современные микро- и нанотехнологии: Матер. IV Междунар. науч. конф. — Кисловодск, 2004. — С. 79-81.

14. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Синтез и исследование сорбентов с ионообменными и гидрофобными свойствами // Успехи современного естествознания. — 2004. — №7. — С. 42-43.

15. Брыкалов А.В., Плющ Е.В. Оценка влияния электрохимически активированной воды на ферментативную активность семян // Современные наукоемкие технологии. — 2004. — №4. — С. 83-84.

Подписано в печать 18.02.2005. Формат 60х841/16. Бумага офсетная. Гарнитура «Times». Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,4. Тираж 100 экз. Заказ №105.

Отпечатано с готового оригинал-макета в типографии издательско-полиграфического комплекса СтГАУ «АГРУС», г. Ставрополь, ул. Мира, 302.

0ó:í7-os, 2{

716

22 "-Щ

Введение

Глава 1. Анализ состояния вопроса

1.1. Характеристика молочной сыворотки как сырья для получения регуляторов роста растений

1.2. Электрохимическая активация воды и жидких сред, свойства и применение в пищевой и сельскохозяйственной биотехнологии

1.3. Строение, свойства кремнесодержащих, хитазановых сорбционных материалов и их применение в пищевой и сельскохозяйственной биотехнологии

Глава 2. Организация работы и методы исследований

2.1. Объекты и методы исследований

2.2. Статистическая обработка результатов исследований

Глава 3. Теоретическое обоснование использования молочной сыворотки в качестве сырьевого ресурса для получения регуляторов роста растений

Глава 4. Исследование биологической активности щелочной фракции ЭХА воды во взаимосвязи с физико-химическими свойствами

4.1. Получение и физико-химические свойства щелочной и кислотной фракции ЭХА воды

4.2. Изучение влияния параметров электрохимического активирования и физико-химических показателей ЭХА воды на ростостимулирующую активность

4.3. Исследование влияния ЭХА воды на водопоглощаю-щие способности семян

4.4. Исследование влияния ЭХА воды на кинетические параметры ферментативной активности каталазы

Глава 5. Получение и исследование комплексных регуляторов роста растений из молочной сыворотки с применени-^ ем ЭХА воды, методов сорбции и ферментации

5.1. Исследование биологической активности регуляторов роста растений из молочной сыворотки с применением ЭХА воды и метода сорбции с использованием хи-тозана

5.2. Синтез гидрофобных и аминокремнеземных сорбентов и их применение для получения регуляторов роста растений из молочной сыворотки

5.3. Технология комплексных регуляторов роста растений из молочной сыворотки и экстрактов лекарственных растений Ю

41 Глава 6. Разработка технологий регуляторов роста растений из молочной сыворотки и оценка их эффективности

6.1. Разработка технологической схемы производства регуляторов роста растений из молочной сыворотки

6.2. Расчет экономической эффективности производства регуляторов роста растений из молочной сыворотки и

Sh их применение в растениеводстве

Выводы

Актуальность темы. В настоящее время во многих странах мира, в том числе и в России, вопросы здорового питания населения возведены в ранг государственной политики. В связи с этим ставится задача получения экологически безопасной сельскохозяйственной продукции и создания эффективных технологий ее переработки. В области растениеводства актуально направление по разработке современных технологий возделывания зерновых культур с использованием регуляторов роста нового поколения.

При создании технологий регуляторов роста растений важен поиск рациональных по экономическим показателям сырьевых ресурсов, содержащих комплекс биологически активных веществ.

Молочная сыворотка является побочным продуктом при получении сыра и творога. В ней присутствуют все основные классы органических соединений: жиры, белки, углеводы, витамины, и кроме того, в молочной сыворотке достаточно разнообразен состав макро- и микроэлементов.

Перспективным направлением в области получения регуляторов роста растений из молочной сыворотки является разработка технологии на основе применения современных методов электрохимии, сорбции и ферментативного катализа.

Анализ патентной информации и литературных источников за последние 15 лет указывает на ограниченное число публикаций по применению молочной сыворотки в растениеводстве, отсутствуют данные по ее использованию в качестве сырья для получения регуляторов роста растений.

Таким образом, проведение исследований по разработке технологий регуляторов роста растений на основе молочной сыворотки весьма актуально, возникает необходимость комплекса исследований данных регуляторов в лаборатории, полевых и производственных условиях с оценкой экономической эффективности их применения.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось комплексное решение проблемы по разработке технологии получения из молочной сыворотки регуляторов роста растений с использованием электроактивированной воды, процессов сорбции и ферментации, изучение их биологической активности и проведение исследований по применению регуляторов роста в растениеводстве.

При выполнении работы предстояло решить следующие задачи: на основании теоретического анализа обосновать применение молочной сыворотки в растениеводстве; исследовать биологическую активность щелочной фракции ЭХА воды во взаимосвязи с ее физико-химическими свойствами; изучить влияние значений ОВП и рН щелочной фракции ЭХА воды на изменение абсолютной скорости ростовых процессов в семенах озимой пшеницы; изучить влияние щелочной фракции ЭХА вод на кинетические параметры ферментативной активности каталазы (максимальная скорость и кажущаяся константа Михаэлиса); разработать технологию получения регуляторов роста растений на основе щелочной фракции ЭХА воды и молочной сыворотки сорбционно-очищенной хитозаном; синтезировать композиционные амино- и фенилкремнеземные сорбенты, исследовать их состав, структурные характеристики, провести анализ РЖ- спектров, микроструктуры поверхности; провести исследования по очистке молочной сыворотки от белков кремнеземными сорбентами для получения регуляторов роста растений и исследовать их биологическую активность; разработать технологию получения комплексного регулятора роста растений методом ферментации экстрактов лекарственных растений молочной сывороткой, изучить их состав, провести стандартизацию; оценить экономическую эффективность, экологическую безопасность разработанных технологий получения регуляторов роста растений и их применения в растениеводстве;

Научная новизна работы. Проведены исследования закономерностей электрохимического активирования воды с установлением зависимости изменения значений рН и окислительно-восстановительного потенциала като-лита от времени электрохимического активирования, напряжения на электродах и расстояния между ними во взаимосвязи с оценкой биологической активности.

Впервые установлено, что оптимизированные показатели электрохимического активирования воды с получением католита при напряжении 50 В, в течение 30 минут и расстоянием между электродами 80 мм обеспечивают при значении ОВП = - 540 мВ и рН = 10,2 максимальную величину биологической активности при действии на семена агрокультуры, что в конечном итоге оказывает положительное влияние на энергию прорастания и всхожесть семян озимой пшеницы.

С использованием уравнения Михаэлиса-Ментен определены кинетические параметры ферментативной реакции энзима каталазы при действии католита на проростки семян озимой пшеницы и установлен механизм бесконкурентной активации реакции расщепления пероксида водорода катала-зой.

Синтезированы композиционные амино- и фенилкремнеземные сорбенты, исследованы их физико-химические характеристики, определена эффективность их применения для технологии получения из молочной сыворотки регуляторов роста растений.

Впервые разработана технология получения регуляторов роста растений методом ферментации экстрактов лекарственных растений энзимами молочной сыворотки с оптимизацией факторов процесса, исследован их состав, биологическая активность и эффективность при возделывании озимой пшеницы.

Практическая значимость. Технология получения композиционных амино- и фенил кремнеземных сорбентов прошла промышленную наработку в ЗАО НПФ «Люминофор», что подтверждено соответствующим актом. Разработанные регуляторы роста растений из молочной сыворотки прошли производственные испытания с положительным заключением СХП ст. Ново-марьевской Шпаковского района Ставропольского края, стандартизированы и рекомендованы к использованию для предпосевной обработки семян агрокультур. Разработан и утвержден технологический регламент производства из молочной сыворотки регулятора роста растений.

На защиту выносят следующие положения:

1. Теоретическое обоснование применения молочной сыворотки в растениеводстве.

2. Исследования по электрохимическому активированию воды с оптимизацией условий получения щелочной фракции, обладающей высоким уровнем биологической активности.

3. Результаты экспериментальных исследований действия ЭХА воды на кинетические параметры ферментативной активности каталазы.

4. Синтез и исследование физико-химических характеристик композиционных амино- и фенилкремнеземных сорбентов, применяемых для очистки от белков молочной сыворотки.

5. Технологии комплексных регуляторов роста растений из молочной сыворотки, получаемых на основе применения ЭХА воды, сорбционных материалов и ферментации экстрактов лекарственных растений, оценка их биологической активности.

Апробация работы. Результаты работы были представлены на Всероссийской научно-технической конференции «Современные достижения биотехнологии» (Ставрополь, 2002); на Международной научной конференции «Повестка дня на XXI век: Программа действия - экологическая безопасность и устойчивость развития» (Ставрополь, 2002); на Всероссийской научной конференции «Биотехнология 2003» (Сочи, 2003); на научнометодической конференции «Университетская наука - региону» (Ставрополь, 2004); на 68 научно-практической конференции «Проблемы экологии и защиты растений в сельском хозяйстве» (Ставрополь, 2004); на Международной научно-практической конференции «Проблемы экологической безопасности и сохранения природно-ресурсного потенциала» (Ставрополь, 2004); на IV Международной научной конференции «Химия твердого тела и современные микро - и нанотехнологии» (Кисловодск, 2004); на Международной научной конференции «Междисциплинарный уровень интеграции современных научных исследований» (Турция, 2004); Международном конгрессе «Высокие технологии» (Франция, 2004).

Публикации. Результаты исследований опубликованы в 15-ти работах.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов, библиографического списка, приложений. Работа изложена на 150 страницах, содержит 29 рисунков, 32 таблицы. Библиографический список состоит из 150 наименований.

134 ВЫВОДЫ

1. На основании теоретического анализа обосновано применение молочной сыворотки в качестве ценного сырья для получения регуляторов роста растений, эффективных для предпосевной обработки семян озимой пшеницы.

2. Многофакторным экспериментом достигнут результат оптимизации режима электроактивирования воды, что обеспечивает усиление биологической активности при действии католита на семена озимой пшеницы. При показателях у католита значений рН = 10,2, ОВП = -540 мВ, получаемого в режимах электроактивации U - 50 В, / = 80 мм, t = 30 мин, абсолютная скорость роста проростков зерна равна 0,514 мм/час, корешков - 0,61 мм/час.

3. Впервые исследовано влияние электроактивированной воды на кинетические параметры ферментативной активности каталазы. Определены величины максимальной скорости ферментативной реакции и значения константы Михаэлиса. Установлено, что действие ЭХА воды на семена и проростки пшеницы приводит к возрастанию значенияУт и Кт(каж) и процесс по механизму ферментативной реакции соответствует бесконкурентной активации.

4. Разработаны комплексные регуляторы роста растений на основе молочной сыворотки и электроактивированной воды с применением методов сорбции для отделения балластных белков и липидов коллоидной формой хитозана. Технология получения регуляторов обеспечивает высокий уровень их ростостимулирующей активности при действии на семена пшеницы.

5. Проведены исследования по синтезу амино - и фенилкремнезем-ных сорбентов методом формирования пористой структуры кремнезема в присутствии силанов, имеющих стандартные структурные характеристики -удельную поверхность в пределах 81 - 88 м /г, объем пор 1,45 - 1,54 см /г.

6. Исследован химический состав органокремнеземных сорбентов, микроструктура поверхности в сопоставлении с данными ИК - спектроскопии и термографического анализа. По результатам термоанализа установлено, что поверхность фенилкремнеземного сорбента значительно гидрофоби-зирована, не содержит координационно-связанной воды и потеря массы сорбента протекает с малой скоростью при 320 - 500° С, что характеризует процесс термодеструкции модификатора.

7. По результатам использования в технологии получения регуляторов роста растений органокремнеземных сорбентов установлен высокий уровень эффективности на стадии очистки молочной сыворотки от белков.

8. Впервые разработана технология получения регуляторов роста растений на основе оптимизации режимов ферментации экстрактов лекарственных растений молочной сывороткой.

9. Дана оценка экономической эффективности разработанной технологии регуляторов роста растений, получаемых из молочной сыворотки с использованием электроактивированной воды, процессов сорбции и ферментации, характеризующихся ростостимулирующей активностью и представляющих новое поколение регуляторов роста растений из вторичного молочного сырья.

136

1. А.с. № 1476806 СССР, МКИ С 02 F1/46. Устройство для униполярной электрообработки жидкости / JI.E Спектр, В.М Бахир. и др.- Опубл. Бюл.- №4.-Зс.

2. Агафонов, Ю.В. Применение хитозана в сельскохозяйственном и декоративном растениеводстве /Ю.В. Агафонов, В.М. Быкова, Л.И. Криво-шеина // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана: Матер. Пятой конференции М.: Изд-во ВНИРОД999. - С. 79-80.

3. Айлер, Р. Химия кремнезема /Р. Айлер. М.: Мир, 1982. - 127 с.

4. Аксенов, С.И Особенности поступления и распределения воды в семянах пшеницы при их набухании / С.И. Аксенов, Е.А. Головина // Физиология растений. 1986. - Т. 33. - С. 150-158.

5. Аксенов, С.И. Вода и ее роль в регуляции биологических процессов / С.И. Аксенов. М.: Наука, 1990. - 99с.

6. Активированные вещества. Некоторые вопросы теории и практики/ В.М.Бахир, А.Р.Атаджанов, С.А. Алёхин и др. // Изв. АН Уз.ССР, сер.техн.наук. 1981. - № 5. - С.68.

7. Активированные водные растворы и возможности применения их в мясной промышленности: Обзорная информация / Горбатов В.М., Пироговский Н.А., Хакимджанов А.Б., Князева В.Л.- М.: ЦНИИТЭИмясомолпром, 1986.-47с.

8. Алесковский, В.Б. Стехиометрия и синтез твердых соединений /В.Б. Алесковский. М.: Высшая школа, 1976. — 218 с.

9. Алиева, Л.Р. Осветление молочной сыворотки хитозаном / Л.Р. Алиева, И.А. Евдокимов, С.В. Василисин // Современные достижения биотехнологии / Матер.2-ой Всерос. научно-технич. конф. Ставрополь,2002. Том 2.- CM - -70.

10. Алиева, JI.P. Разработка технологии напитков из молочной сыворотки с применением хитозана: автореф. дисс. .к.т.н. / Алиева Людмила Руслановна. Ставрополь, 2002. - 24 с.

11. Антимикробные свойства анолита нейтрального, полученного на установке СТЭЛ / Р.Х. Халметов, М.Т. Тахиров, А.Х. Касымов и др. // Электрохимическая активация в медицине, сельском хозяйстве, промышленности. 1999. № 14. - misrt. newmail.ru.

12. Ахназарова, С.Л. Оптимизация эксперимента в химии и химической технологии / С.Л. Ахназарова, В.В. Кафаров. М.: Высшая школа, 1978.-319с.

13. Бабьева, И.П. Биология почв: учебник /И.П. Бабьева, Г.М. Зенова; под ред. Д.Г. Звягинцева. М.: Изд-во МГУ, 1989. - 336 с.

14. Бахир, В.М Активация в биологии,/ В.М. Бахир //Техника и нау-ка.-1982. №12.-С.10.

15. Бахир, В.М Электрохимические реакторы РПЭ / В.М. Бахир, Ю.Г. Задорожный. М: Гинерокс, 1991. - 35с.

16. Бахир, В.М. Медико-технические системы и технологии для синтеза электрохимически активированных растворов / В.М. Бахир.- М.: ВНИИ-ИМТ, 1998.-67 с.

17. Бахир, В.М. Электрохимактивация-новая техника, новые технологии. Об электрохимической активации и воде «живой» и «мёртвой» / В. М. Бахир. М.: ВНИИИМТ, 1990. - Вып.1. - 67с.

18. Бахир, В.М. Электрохимическая активация / В.М. Бахир. -М.: ВНИИИМТ, 1992. С. 189-195.

19. Белоусов, B.C. Реабилитация почв, теряющих плодородие; Теория и практика / B.C. Белоусов // Актуальные вопросы биологизации защиты растений: Сб. науч. тр. Пущино, 2000. С. 156 - 168.

20. Березкин, В.Г. Твердые носители в газовой хроматографии /

21. B.Г. Березкин, В.П. Пахомов, К.И. Сакодинский. -М.: Химия, 1975. 210 с.

22. Благовещенский, А.В. Теоретические основы действия янтарной кислоты на растения / А.В. Благовещенский. М.: Наука, 1968.

23. Блонская, А.П. Влияние электроактивированного поля на биопотенциалы в проростках и растениях пшеницы в начальный период фотосинтеза / А.П. Блонская, В.А. Окулова // Труды 4НМЭСХ, Челябинск, 1976. -Вып. 109. - С.84-87.

24. Большаков, А.С. Технологические свойства активированной воды / А.С. Большаков, JI.A. Сарычева, А.А. Борисенко // Пищевая технология. -1992. -№2.-С.З-5.

25. Борисенко, А.А. Классификация установок для электрохимического активирования жидкостей / А.А. Борисенко, Е.А. Шаманаева // Вестник Сев. Кав. ГТУ. Сер. «продовольствие». - Ставрополь, 2003. - Вып 6. -С. 119-123.

26. Борисенко, Т.Н. Молочная сыворотка как активатор ферментативных процессов / Т.Н. Борисенко, И.Ю. Сергеева // Сб. науч. работ « Пищевые продукты и экология». Кемерово, 1998.-С. 51-52.

27. Брей, В.В. Исследование строения поверхности пирогенного29 •кремнезема, модифицированного метилхлорсиланами методом ЯМР Si /В.В. Брей, Ю.И. Горлов, А.А. Чуйко //Теорет. и эксперим. химия. 1986. -№3. — С. 378-383.

28. Брык, М.Т. Полимеризация на твердой поверхности неорганических веществ / М.Т. Брык. Киев: Наукова Думка, 1981.-271 с.

29. Брыкалов, А.В Антигрибная активность биопрепаратов из лекарственных растений / А.В. Брыкалов, Ю.А. Безгина // Матер, междунар. науч-но-практич. конф. Орел, 1998. - С. 97-98.

30. Брыкалов, А.В. Метод получения магноиммуносорбентов для диагностических тест-систем /А.В. Брыкалов, И.В. Жарникова, И.С. Тюменцева //Сб. тр. 58 науч.-метод. конф. /Ставроп. ГМИ. Ставрополь, 1995. -С. 19-20.

31. Брыкалов, А.В. Получение биопрепаратов на основе методов аффинной сорбции и иммобилизации: Дисс. . д-ра хим. наук / А.В. Брыкалов. -СПб., 1993.-330с.

32. Брыкалов, А.В. Синтез и исследование сорбентов для гидрофобной хромотографии / А.В.Брыкалов, Е.В. Плющ // Химия твердого тела и современные микро- и нанотехнологии: Матер. Всерос. научно-практич. конф. Кисловодск, 2004. - С. 78-79.

33. Брыкалов, А.В. Сорбенты на основе кремнеземов и активированных углей в биотехнологии и медицине /А.В. Брыкалов //Матер, конф. химиков Сев. Кавказа. Нальчик, 1991. - С. 185-186.

34. Василисин, С.В. Получение молочно-белковых концентратов с использованием гель-хитозана /С.В. Василисин, И.А. Евдокимов, J1.P. Алиева // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана: Матер. Пятой конференции М.: Изд-во ВНИРО, 1999. - С. 21.

35. Гамерман, А.Ф. Лекарственные растения / А.Ф. Гамерман. — М.: Высшая школа, 1983. 36 с.

36. Генкель, К.М. Влияние предпосевной обработки семян пшеницы витамином РР и фтористым натрием на изменение белка в семенах / К.М. Генкель //Физиология растений. 1970. - Т. 17. - Вып. 3. - С. 605 - 609.

37. Голубева, А.А. Изменение содержания растворенного кислорода в электроактивированной воде во времени / А.А. Голубева, В.И. Филоненко, О.В. Богатова // Тез.докл. науч-произ. конф. // Совещание по электрохимич. активации сред. Казань, 1987. - С. 8-9.

38. Горбатова, К.К. Биохимия молока и молочных продуктов./ К.К. Горбатова. -М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984. 344 с.

39. ГОСТ 10968-88. Зерно. Метод определения энергии и способности прорастания. Введ. 01.07.88. // Государственный комитет СССР по стандартам. /Сост. К.А. Чурусов. Н.М. Яскина. - М.: 1988. - 5с.

40. ГОСТ 12038-84 Семена сельскохозяйственных культур. Методыопределения всхожести. -М.: изд-во стандартов, 1985. 58 с.

41. Джурабаев, М. Применения электроактивированной воды в сельском хозяйстве./ М. Джурабаев // Механицация и электрификация сельского хозяйства. -1986. №11. - С. 51-53.

42. Дмитриев, A.M. Стимуляция роста растений / A.M. Дмитриев, JT.K. Страцкевич. Минск: Ураджай, 1986. - 116 с.

43. Егоров, Ю. Академик Вахиров: активированная вода перспективна / Ю.Егоров // Изобретатель и рационализатор.-1981. №9. - С. 30-31.

44. Зайцев, Г.Н. Математический анализ биологических данных / Г.Н. Зайцев. М.: Наука, 1991. - 184 с.

45. Зайцев, И.Д. Применение и познание временно активированной воды / И.Д. Зайцев, Э.И. Креч // Химическая промышленность. 1989. - № 4. - С. 44-47.

46. Залашко, М.В. Биотехнология переработки молочной сыворотки / М.В. Залашко. М.: Агропромиздат, 1990. - 192 с.

47. Заявка 55-7317 Япония МПК С 02 . 1/46. Электролитическое устройство для обработки воды; заяв. 14.09.76; опубл. 04.08.77г.

48. Заявка на патент № 97107927 Композиция, включающая хитозан для повышения устойчивости растений к болезням. Новожилов К.В. Тюте-рев С.Л., Якубчик М.С. и др. 15.05.97. - 83 с.

49. Значение показателя «активность воды» в оценке сельскохозяйственного сырья / И.А. Рогов, У.Ч. Чоманов, A.M. Бражников и др. // Обзорная информация. М.: АгроНИИТЭИмясомолпром, 1987. 40 с.

50. Иванкова, Е.А. Физико-химические свойства воды —основного природного растворителя: учеб. пособие / Е.А. Иванкова. М.: Мир, 1992. - -48 с.

51. Исагунян, Э.А. Влияние активированных растворов на сохранение огурцов / Э.А. Исагусян, Т.В. Мгебришвили, Е.И. Донченко // Изв. вузов. Пищевая технология. 1993. - № 3-4. - С. 47-49.

52. Исследование связанной воды на поверхности аэросила методомколичественной спектроскопии /В.А. Соболев, А.А. Чуйко, В.А. Тертых и др. //Связанная вода в дисперсных системах. 1974. - Вып. 3. - С. 62-73.

53. Исследование структуры высокодисперсного кремнезема методами ЯМР 29Si и !Н высокого разрешения в твердой фазе /Э.Т. Липпмаа, А.В. Самосон, А.В. Брей и др. //Докл. Ан СССР. 1981. - 259. - №2. - С. 403-408.

54. Карнаухов, А.П. Глобулярная модель пористых тел корпускулярного строения /А.П. Карнаухов //Кинетика и катализ. 1971. - Т. 12. - №4. -С. 1025-1033.

55. Келети, Т. Основы ферментативной кинетики / Т. Келети. -М.: Мир, 1990.-С. 350.

56. Киселев, А.В. Влияние температуры гидротермальной обработки на изменение пор и скелета промышленного силикагеля /А.В. Киселев,

57. B.М. Лукьянович, Ю.С. Никитин //Коллоид, журн. 1969. - Т.31. - №3.1. C. 388-393.

58. Кольцов, С.И. Изучение влияния носителя на свойства катализатора / С.И. Кольцов, В.М. Смирнов, В.Б. Алесковский // Кинетика и катализ. 1973. - Т. 14. - №5. - С. 1300-1303.

59. Кольцов, С.И. Реакции молекулярного наслаивания /С.И. Кольцов. СПб.: СПб ТИ им. Ленсовета, 1992. - 62 с.

60. Кольцов, С.И. Силикагель, его строение и физико-химические свойства /С.И. Кольцов, В.Б. Алесковский. Л.: Госхимиздат, 1953. - 270 с.

61. Крусь, Г.Н. Методы исследования молока и молочных продуктов / Г.Н. Крусь, A.M. Шалыгина, З.В. Волокитина. М.: Колос, 2000. - 368 с.

62. Ксенз, Н.В. Иетенсификация технологических процессов электроактивации взаимодействующих сред / Н.В.Ксенз // Механизация и электрификация сел. х -ва. -1996. №5. - С. 8 - 9.

63. Ксенз, Н.В. Электростатическое поле и урожайность зерновых культур / Н.В. Ксенз, С. В. Качеишвили // Механизация и электрификация сел. х -ва. -2000. №6. - С. 18 -1 9.

64. Кузнецов, В.В. Физическая и коллоидная химия / В.В. Кудрявцев.- М: Высшая школа, 1998.- 320 с.

65. Кузнецова, М.А. Лекарственное растительное сырье и препараты / М.А. Кузнецова. -М.: Высшая школа, 1987. 190 с.

66. Лагутин, В.В. Экспериментально-теоретическое исследование рабочих процессов при электрохимической активации воды /В.В. Лагутин // Материалы 6-й Региональной конф. молодых исследователей Волгогр. обл. / ВГСХА. Волгоград. - 2002.

67. Ланкин, В.З. Метаболизм липоперексей в тканях млекопитающих / В.З. Ланкин // Биохимия липидов и роль в обмене веществ. М.: Наука, 1981.-С. 75-78.

68. Латышев, В. Куда течешь, неожиданная вода./ В. Латышев // Изобретатель и рационализатор.-1985. №5.-С.14-16.

69. Лисичкин, Г.Д. Достижения и перспективы химического модифицирования поверхности минеральных веществ /Т.Д. Лисичкин // Журн. Всес. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. 1989. - Т. 34. - №3. - С. 291-297.

70. Лопатин, С.А Новый колориметрический метод определения хитозана /С. А. Лопатин, С.В. Немцев, В.П. Варламов // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана: Матер. Шестой Междунар. конф. — М.: Изд-во ВНИРО, 2001. С. 298-299.

71. Мартынов, Ю.Ф. Технология производства растительного сырья / Ю.Ф. Мартынов. -М.: Медецина, 1979. 72 с.

72. Методы исследования растений / под общ. ред. А. И. Ермакова. -М.: Колос, 1972.79. Методы определения удельной поверхности /А.А. Клячко

73. Гурвич. М.: Высшая школа, 1961.-1885 - 1887 с.

74. Молодкина, Л.М. Модифицирование макропористых кремнеземов поливинилпирролидоном /Л.М. Молодкина, Б.В. Мчедлишвили // Сб. тр./Ленингр. ин-т Пастера. 1976. - Т 52. - С. 92-95.

75. Муравьев, И.А. Метод определения чистой глицирризиновой кислоты в солодковом корне / И.А. Муравьев, В.А. Маняк, И.Д. Пономарев //

76. Журнал растит, ресурсы. -1967. №2. - С.262-267.

77. Никелл, JI. Дж. Регуляторы роста растений /Л. Дж. Никелл. М.: Колос, 1984.-116 с.

78. Нудьга, Л.А. Получение хитозана и изучение его фракционного состава /Л.А. Нудьга, Е.А. Плеско, С.Н. Данилов //Журнал общей химии. -1971. Т.41. - С. 2555 - 2558.

79. О вязкостных свойствах растворов хитозана / А.И. Гамзазаде, A.M. Скляр, С.А. Павлова, С.В. Рогожин // ВМС.1981. Т (А) 23. № 3. Р. 594-597.

80. О механизме электрохимической активации веществ /В.М. Бахир, Л.А Кирпичников, Н.Г. Лиакумович и др. // Издательство А.Н. Из СССР//Серия технические науки .-1981.-№5.-С. 70-74.

81. Овчаров, К.Е. Физиология формирования и прорастания семян /К.Е. Овчаров. М.: Колос, 1976. - 256 с.

82. Оккерс, К. Пористый кремнезем: строение и свойства адсорбентов и катализаторов / К. Оккерс. М.: Мир, 1973. - 395 с.

83. Олещенко, И. Н. Декоксикация загрязненных гербицидами почв / И.Н. Олещенко, А.Т. Подварко, Е.П. Угрюмов и др. // Производство экологически безопасной продукции растениеводства: Регион, рекоменд. Пущино, 1997. -Вып. 3.-С.186-187.

84. Основы аналитической химии. В 2 кн. Учеб. для вузов / Ю.А. Золотов, Е.Н. Дорохова, В.И. Фадеева и др. Под ред Ю.А. Золотова. -2-е изд.,перераб и доп. -М.: Высшая школа, 2000. С.358.

85. Пат. РФ №2091320 Установка для электрохимической обработки и очистки воды или водных растворов / В.М. Бахир, Ю.Г. Задорожный; заявл. 9.02.1996; опубл. 27.09.1997.

86. Пелыцикова, Н.В. Водный обмен у сельскохозяйственных растений / Н.В. Пелыцикова. М.: Из-во ТСХА, 1990. - 40 с.

87. Плаченов, Т.Г. Разработка конструкции поромеров для изучения структуры пористых тел методом вдавливания ртути /Г.Т. Плаченов // Журн.прикл. химии. 1965. - Т. 28. - №3. - С. 245-253.

88. Плиско, Е.А. Хитин и его химические превращения / Е.А. Плеско, JI.A. Нудьга, С.Н. Данилов // Журнал общей химии. 1954. Т. 23. -С. 1761 - 1769.

89. Подколзин, А.И. Микроэлементы в земледелии юга Росии / А.И. Подколзин, В.И. Демкин, А.В. Бурлай. Ставрополь, 2002. - 352 с.

90. Практический курс химической и ферментативной кинетики: Учеб. пособие для химических специальностей ун-тов /И.В. Березин,

91. A.А. Клесов. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1976. - 320 с.

92. Прилуцкий, В.И. Электрохимически активированная вода: аномальные свойства, механизм биологического действия / В.И. Прилуцкий,

93. B.М. Бахир. М.: ВНИИИМТ, 1997. - С. 228.

94. Прилуцкий, В.И. Электрохимические установки СТЭЛ: эксплуатационные характеристики, применение в медицине / В.И. Прилуцкий, Ю.Г. Задорожный // Электрохимическая активация в медицине, сельском хозяйстве, промышленности. 1999. - № 14. - misrt. newmail.ru.

95. Применение электроактивированных растворов для получения лактулозы / А.Г. Храмцов, С.А. Рябцева, И.А. Евдокимов и др. // Изв.вузов: Пищевая технология. 1997. - № 6. - С. 25-27.

96. Пындак, В.И. Лабораторная установка для электрохимической обработки воды / В.И. Пындак, В.В. Лагутин, А.З. Митрофанов // Информ. Листок №51-245-00.

97. Пындак, В.И. Перспективы применения экологически чистых водных растворов в растениеводстве / В.И. Пындак, В.В. Лагутин, А.В. Юш-кин // Поволжский экологич. вест. Волгоград.: Изд-во ВолгГУ. - 2001.-Вып. 8.-С. 119-122.

98. Рогов, В.М. Электрохимическая технология изменения свойств воды / В.М. Рогов, В.Л. Филипчук. Львов.: Выща школа, 1989. - 128 с.

99. Рогожин, С.В. Получение модифицированных кремнеземов для присоединения биологически активных соединений / С.В. Рогожин,

100. B.Ю. Варламов, Д.Г. Вальковский // Изв. АН СССР /сер. хим. 1975. - №8.1. C. 1718-1721.

101. Русанова, J1.A. Бактерицидные свойства электроактивированных водных растворов / J1.A. Русанова, Г.И. Касьянов // Тез. докл. Между-нар.симпозиума «Экология человека: пищевые технологии и продукты». Москва, 1995.-Ч. 2. - С. 295.

102. Самойлов, В.А. Молочная сыворотка ценное сырье / В.А. Самойлов, П.Г. Нестеренко, Н.И. Михайлова // Переработка молока. - 2002. -№10.-С. 16-18.

103. Саргаев, П.М. Вода как химическое соединение и основа биологических жидкостей / П.М. Саргаев, И.Н. Кочнев, J1.M. Кукуй и др // Вода: экология и технология: Матер, междунар. конгресса Москва, 1994. - Т.4. -С. 1148- 1159.

104. Сенкевич, T.-JI. Молочная сыворотка: переработка и использование в агропромышленном комплексе / Т. Сенкевич, K.JI. Ридель; пер. с нем. Н.А. Эпштейна; под ред. Н.Н. Липатова. М.: Агропромиздат, 1989. - 270 с.

105. Слинякова, И.Б. Получение и исследование свойств смешанных адсорбентов силикополивинил силоксанов / И.Б. Слинякова, Л.И. Куренная //Адсорбция и адсорбенты. 1972. - №1. - С. 83-86.

106. Тертых, В.А. Проблемы реакционной способности молекул, атакующих фиксированный центр / В.А. Тертых, В.В. Павлов // Адсорбция и адсорбенты. 1978. -Вып.6. - С. 67-75.

107. Тертых, В.А. Химические реакции с участием поверхности кремнеземов /В.А. Тертых, В.В. Янишпольский // Укр. хим. журнал. 1972. -Т. 38. - №8.-С. 774-779.

108. Технологические свойства активированной воды / JI.A. Сарычева, А.С. Большаков, А.А. Борисенко, Т.П. Шаганова // Известия ВУЗов: Пищевая технология. 1992. - № 3. - С. 56-57.

109. Технологический регламент регулирования кислотности молока и жидких молочных продуктов методом униполярной электроактивации. -Ташкент: Фирма «Эсперо», 1991. 92с.

110. Тютерев, C.JI. Хитозан биологически активное вещество, экологически безопасное средство, повышающее устойчивость растений к болезням / C.JI. Тютерев, М.С. Якубчик, С.А Тарлаковский, В.А. Выцкий. -ВИЗН РАСХН, Санкт - Петербург, 1994. - С. 44.

111. Физиология и биохимия покоя и прорастания семян; под ред. А. Кан. М.: Наука, 1982. - 318 с.

112. Филатов. В.П. Инструкция по изготовлению и применению тканевых препаратов для лечения биогенными стимуляторами по методу академика В.П. Филатова /В.П. Филатов. Одесса, 1955. - 25с.

113. Филоненко, В.И. Физико-химические свойства электроактивированной воды / В.И. Филоненко, О.В. Богатова, Н.А. Голубева // Экспресс — информ ВНИИТЭИ / Передовой научно-производственный опыт в птицеводстве. 1987.-№ 8.-С. 10-11.

114. Фрайфельдер, Я. Физическая химия /Я. Фрайфельдер. М.: Мир, 1980.-418 с.

115. Хайдекер У. Стресс и прорастание семян: агрономическая точка зрения. Физиология и биохимия покоя и прорастания семян / У. Хайдекс. -М.: Колос, 1982.-512 с.

116. Хасанова, 3. М. Предпосевная обработка семян / З.Н. Хасанова, Л.Г. Наумов. Уфа.: Башкнигиздат, 1981. - 111 с.

117. Хасанова, З.М. О механизме биологического действия электрического поля на растения / З.М. Хасанова. Уфа.: Башкнигиздат, 1955.

118. Ходж, Ф. Органические реакции с использованием реагентов илисубстратов, ковалентно закрепленных на функционализированных неорганических носителях /Ф. Ходж // Журн. Всес. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. -1989. Т.34. - №3. - С. 331-339.

119. Храмцов, А.Г. Молочная сыворотка / А.Г. Храмцов. М.: Агро-помиздат, 1990. - 240 с.

120. Храмцов, А.Г. Применение бифидогенных факторов при производстве пищевых и кормовых добавок /А.Г. Храмцов, С.А. Рябцева, JI.H. Журба //Известия Вузов. Пищевая биотехнология, 1998. №4. - С. 56 - 57.

121. Храмцов, А.Г. Современные способы сушки творожной сыворотки: Обзорная информация / А.Г. Храмцов, J1.E. Давыдянц, П.Г. Нестеренко. -М.: Агро НИИТЭИММП, 1990. 45 с.

122. Храмцов, А.Г. Технология продуктов из молочной сыворотки: Учебное пособие/ А.Г. Храмцов, П.Г. Нестеренко. М.: ДеЛи принт, 2004. -587 с.т

123. Чихайлейчик, А.Г. Хитозан как компонент комбинированных препаратов / А.Г. Чихайлейчик, Н.П. Кузьмин // Химия в с/х. 1991. - № 1. -С. 15.

124. Чуйко, А.А. Аминокремнеземы как химически активные сорбенты и наполнители полимерных материалов / А.А. Чуйко, В.А. Тертых,

125. Г.Е.Павлик //Коллоид, журн. 1965. -Т.27. - №6. - С. 903-907.

126. Чуйко, А.А. Строение поверхности пирогенного кремнезема,Щприрода его активных центров и механизмы сорбционных процессов /

127. A.А. Чуйко, Ю.И. Горлов //Кремнеземы в медицине и биологии: Сб. науч. тр. /ИХП Академии наук Украины, Ставроп. ГМИ. Киев-Ставрополь, 1993. -С. 4-37.

128. Шевелуха, B.C. Регуляторы роста растений в сельском хозяйстве / B.C. Шевелуха, В.М. Ковалев, И.К. Блиновский и др. // Вестник с.-х. науки, 1985.-№9.-С. 88-95.

129. Школьник, М.Я. Микроэлементы в жизни растений / М.Я. Школьник. Л.: Наука, 1974. - 323 с.

130. Шоль, В.И. Релаксация электроактивированной воды /

131. B.Г. Шоль, В.А.Филоненко, О.В. Офицеров, О.В. Богатова // Методы и сред-^ ства стерилизации и дезинфекции в медицине. Тез. док. Всерос.конф.1. Москва, 1992.-С. 200 202.

132. Шустов, М.А. Ионный активатор воды / М.А. Шустов // Механизация и электрификация сел. х-ва. 1999. - №1. - С. 21-22.

133. Экологически чистый способ обеззараживания посевных семян / А. Мухаммадиев, Э.Н. Фахрутдинов // Аграрная наука. 1996. -№4. - С.30.

134. Hfc 137. Яшкичев, В.И. Вода, движение молекул, структура, межфазныепроцессы и отклик на внешние воздействия / В.И. Яшкичев. М. : Агар, 1998.-87 с.

135. Bade, M.L. Protecting crops and wild life chitin and chitosan /

136. M.L. Bade, R.L. Wisk // ACS Symp. Ser Plenium. Press 1998. - P.450. - 380.

137. Bascom, W.D. Hudrolisis of triethulethocsilans at the silicacarbon tetФrachloride interface /W. D. Bascom, R.Y. Timons // Phus. chem. 1972. - V. 76. -P. 3292-3300.

138. Billinge, A.J. Effect of temperature and pH history on the colour stability of beff muscles / A.J. Billinge, D.A Ledward //- I.I.R. Commission C2. Bristol (UK). 1986.-P. 25-29.

139. Dolby, R. M.: Int. Milchwirschaftskongreb Sydney, 1970. Band 1 E. -S. 10.

140. Heat dependable myofibril shrinkage and associated water losses/ K.H. Terpsidis // 33 International Congrese of Meat Science and Technology, Finland, Helsinki, 1987. P. 433-434.

141. Herburn, M.R. Tensile mechanical properties and transformational changes of chitin. // First International Conference chitin/chitosan. Abstr. Boston, 1977.- P. 12.

142. Kumar, G. Enzymatic Grafting of a Natural Product onto Chitosan to Confer Water Solubility Under Basic Conditions / G Kumar, P Smith, G.F Payne // Biotechnology and Bioengineering. 1999. - №2. - P. 154-164.

143. Lim, L-Y. Khor E., Ling C-E. Effects of dry heat and saturated steam on the physical properties of chitosan / L-Y.Lim, E Khor, C-E. Ling // Journal of Biomedical Materials Research. 1999. - v. 48. - №2 - P. 111-116.

144. Mathavan, P., Nair K.G. Metal binding properties of chitosan prepared from prawn waste. / P.Mathavan, K.G Nair // First International Conference chitin/chitosan. Abstr. Boston, 1977. P.35.

145. No, H.K. Chitosan as a Profloc in the wastewater treatment. / H.K No., S.P. Mayer// Agriculture, Food, Chemistry. -1989. №5.

146. Ogawa, K. X-Ray diffraction study of sulfuric, nitric and halogen acid salts of chitosan /К. Ogawa, S. Inukai //Carbohydr. Res. 1987. - V. 160. -P. 425-433.

147. Zaber, S.: 18. Int. Milchwirschaftskongreb Sydney, 1970. Band 1 F. -S. 12.

148. Watson, K. S.: Proceed. Whey products conference. Minneapolis/ Minnesota 9. /10. 10. 1978. bis. 52. - S. 30.