автореферат диссертации по химической технологии, 05.17.06, диссертация на тему:Формирование полифункциональных композиционных покрытий медицинского назначения на основе поливинилового спирта

СОДЕРЖАНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

ГЛАВА 1. СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ

1.1. Основные требования к материалам медицинского назначения.

1.2. Состояние поверхности и ее биосовместимость.

1.2.1. Микрорельеф поверхности.

1.2.2. Влияние поверхностной энергии материалов на их гемосовместимость.

1.3. Строение и свойства основных веществ, применение в медицине.

1.3.1. Основные свойства поливинилового спирта.

1.3.2. Основные свойства поливинилпирролидона.

1.3.3. Молочная кислота.

1.4. Разработка полимерных структур с регулируемыми биоактивными свойствами.

1.4.1. Формирование полимерных покрытий.

1.4.2. Иммобилизация БАВ на полимерных носителях.

1.4.3. Электрохимическая иммобилизация и электроудерживание.

1.5. Лекарственные вещества.

1.5.1 Трипсин.

1.5.2 Гепарин.

1.5.3 Антибиотики.

Одним из наиболее перспективных и интенсивно развивающихся направлений современной химии является разработка новых материалов, предназначенных для использования в медицине и биотехнологии. Необходимость их создания и исследования продиктована потребностями медицины в высокоэффективных имплантационных материалах для замещения пораженных или утраченных органов и тканей живого организма. Такие материалы помимо общемеханических свойств должны обладать высоким уровнем биологической и физиологической активности.

Одним из путей решения этой проблемы является использование полимолекулярных структур, сочетающих высокие эксплуатационные характеристики полимерных материалов и специфические медико-биологические свойства иммобилизованных биологически и физиологически активных веществ. Введенные в состав полимеров-носителей ферменты, антикоагулянты и фармакологические вещества стабилизируются и, постепенно диффундируя, обеспечивают длительное лечебное действие.

Особую важность представляет обеспечение тромборезистентной и антимикробной активности поверхностных слоев эндопротезов. В то же время применяемые в медицинской практике полимерные материалы не обеспечивают таких свойств и, следовательно, требуют дополнительной модификации. В ряде случаев необходимый комплекс физико-химических и медико-биологических свойств может быть сообщен материалу за счет направленного формирования на его поверхности полифункциональных гидрогелевых пленочных структур. В качестве таких покрытий целесообразно использовать полимерные материалы, которые прошли длительную апробацию в клинических испытаниях и показали высокий уровень биосовместимости. К таким материалам, можно отнести поливиниловый спирт и поливииилпирролидон, которые нашли широкое применение в медицинской практике и обладают свойствами кровезаменителя.

Большое теоретическое и практическое значение имеют такие проблемы, как нахождение связи между структурой, составом и биологической активностью полимерных систем.

Таким образом, формирование и исследование свойств полифункциональных пленочных комплексных структур, обладающих регулируемым градиентом тромборезистентных и антимикробных свойств, с целью модифицирования медицинских изделий является актуальным и перспективным направлением.

Целью настоящей работы является создание полифункциональных композиционных структур с регулируемым комплексом физико-механических и медико-биологических свойств. Для этого необходимо решить следующие задачи:

•Исследовать процессы формирования полимерных гидрогелевых покрытий на основе ПВС и ПВП.

•Установить основные закономерности формирования полимерных композиционных структур сложного состава в электрическом поле.

•Определить характер взаимодействий между компонентами полимолекулярных структур.

•Изучить особенности электроформирования покрытий, содержащих биологически активные и лекарственные вещества.

•Провести медико-биологические испытания антимикробных и тромборезистентных свойств полученных полифункциональных пленочных покрытий.

Оценка механических характеристик модифицированных материалов (предел прочности, относительное удлинение, твердость, шероховатость) проводилась в соответствии с ГОСТ. При исследовании физико-химических свойств полимерных пленочных структур и их компонентов применялись 8 следующие методы: химико-аналитические, спектрофотометрические, вискозиметрические, ИК- и РФЭ- спектроскопий. Исследование тромборезистентной и антимикробной активностей полученных материалов проводилось биологическими методами, тестированием в опытах "in vitro, in vivo" (Санкт-Петербургский Государственный Медицинский Университет им. акад. И.П. Павлова; Гос. НИИ особо чистых биопрепаратов), а также в клинических условиях (НИИ травматологии и ортопедии им. P.P. Вредена).

Диссертационная работа выполнялась в соответствии с планами госбюджетной НИР Санкт-Петербургского государственного технологического института (технического университета) по научному направлению на 1999-2003гг., заказ-наряд .№ 1.17.99, раздел №4 «Исследование влияния физико-химии поверхности на характер поведения молекул БАВ для прогнозирования и регулирования (управления) гемосовместимости материалов», а также при частичной поддержке гранта МО РФ и РАН (№МОО-2.5К-489).

Работа выполнена на кафедре химической технологии материалов и изделий электронной техники Санкт-Петербургского Государственного Технологического Института (технического университета).

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР ГЛАВА 1. СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ

ВЫВОДЫ

1. Показано, что на скорость образования композиционных покрытий на основе ПВС значительное влияние оказывает напряженность электрического поля и состав полимерной композиции. При напряженности электрического поля Е=25-30 В-см"1 в течение 0,5-4 минут формируются пластичные покрытия регулируемой толщины (от 5 до 60 мкм) с высокой степенью адгезии к материалу-носителю и величиной микронеровностей не более 0,5 мкм.

2. Установлены механизмы формирования полимерных пленочных покрытий под действием электрического поля: электрокоагуляционный - для ПВП и фиксация гидроксильных групп ПВС тетрагидроксоборат-анионами - для ПВС.

3. По данным ИК-спектроскопии, вискозиметрии и других физико-химических методов изучена природа взаимодействия компонентов полимолекулярных композиций ПВС и ПВП в процессе электроформирования пленок, которая обусловлена механическим включением молекул ПВП в гидрогелевую сетку поливинилспиртово-боратного комплекса, без образования химических связей.

4. Установлено, что молочная кислота уменьшает степень сшивки ПВС тетрагидроксоборат-анионами, за счет образования собственных межмолекулярных связей с гидроксильными группами ПВС. Предложено использование молочной кислоты для контролируемой биодеградации полифункциональных покрытий.

5. Получены новые полимерные пленочные функциональные покрытия с градиентом физико-механических свойств на основе полимерных композиций сложного состава: ПВС и ПВП, ПВС и молочная кислота, обладающие комплексом медико-биологических свойств, содержащие антикоагулянт -гепарин (0,10-0,23 мг/см ), протеолитический фермент - трипсин (0,18-0,49 мг/см2), различные антибиотики (0,2-1,4 мг/см2). Пролонгированное анти

129 микробное действие сформированных покрытий подтверждено актом испытаний в Гос. НИИ особо чистых биопрепаратов.

6. Показано, что проведение процесса формирования многокомпонентных пленочных структур на основе исследованных полимеров в электрическом поле позволяет эффективно регулировать их антимикробное действие, и обеспечивает сохранение высокой (до 92% от нативного) протеолитической активности иммобилизованного фермента. На основании экспериментальных данных предложена математическая модель процессов деградации композиционных гидрогелевых покрытий и десорбции из них функциональных веществ.

7. Сформированы полифункциональные пленочные покрытия на изделиях для хирургии (шовный материал, временные шунты различных диаметров и прокладки для протезирования фаланг верхних конечностей). Медико-биологические испытания образцов таких материалов на свертываемость нормальной плазмы крови "in vitro" и эксперименты в опытах "in vivo" на собаках по временному шунтированию брюшной аорты, осуществленные на базе С-ПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, а также клинические испытания эндопротезов, проведенные на базе НИИ Травматологии и ортопедии им. P.P. Вредена показали, что представленные материалы биосовместимы и не вызывают воспалительных реакций окружающих тканей. Получены акты об использовании.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, в этой главе рассмотрены методы иммобилизации биологически активных и лекарственных веществ при формировании полифункциональных покрытий. При этом установлено, что проведение процесса формирования многокомпонентных пленочных структур на основе исследованных гидрогелей в электрическом поле позволяет эффективно регулировать их ферментативную и антимикробную активности. За 1-4 мин. при напряженности электрического поля 25-30 В/см на поверхности модифицируемого материала образуется пленка, содержащая 0,10-0,23 мг/см2 гепарина, 0,18-0,49 мг/см2 трипсина и 0,4-1,4 мг/см канамицина, что обеспечивает повышенную тромборезистент-ную, протеолитическую и антимикробную активности на заданный лечебный период (не менее 10 суток). Пролонгированное действие и высокий уровень антимикробной активности подтверждено актом испытаний в Гос. НИИ особо чистых биопрепаратов (приложение 3) Исследования пленок ИК и РФЭ-спектроскопиями подтвердило предположения о физическом характере иммобилизации молекул трипсина в гидрогелевые покрытия на основе ПВС с сохранением структурного и энергетического состояний близкими к нативному. Введение таких ингредиентов как поливинилпирролидон или молочная кислота, а также изменение условий режима электроформирования пленочных покрытий позволяют направленно регулировать их биодеградацию.

Высокий уровень биологической активности, термо- и радиационная стабильность, а также технологичность демонстрируют преимущество метода электроиммобилизации по сравнению с методом адсорбции или импрегнации в полимерный слой.

ГЛАВА 6. МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ МАТЕРИАЛОВ 6.1. Исследование тромборезистентных свойств полифункциональных гидрогелевых покрытий

Предварительную оценку степени тромбогенности исследуемых полимеров проводили по изучению инактивирующего воздействия их на фермент -трипсин. Использование трипсина в качестве тест-молекулы белковой природы при оценке биосовместимости сформированных покрытий основано на чувствительности большинства ферментов к инактивирующим воздействиям окружающей среды [166,167]. Так, например, некоторые факторы свертывания крови (XI и XII) вызваны изменениями третичной структуры белковых глобул, которые приводят к необратимым превращениям фибриногенов в нерастворимые фибриновые сгустки. Степень и характер влияния многокомпонентной полимерной матрицы на молекулу трипсина оценивались по изменению его ферментативной активности. Как показали экспериментальные данные среди исследованных материалов (СКТВ-мед и КМ) композиционные гидрогели на основе ПВС и ПВП оказывают наименьшее инактивирующее воздействие на иммобилизованный трипсин (табл. 10,11.). Это свидетельствует о благоприятном влиянии полимерных покрытий ПВС и ПВП на биосовместимость модифицируемых материалов. Однако для более детального исследования тромбогенных свойств полученные материалы с полимерными покрытиями испытывались в условиях "in vitro ".

Результаты исследований суммарной активности ведущих факторов свертывания плазмы крови (XII, XI, IX, VIII, X, V, И, I) в присутствии тромбопла-стина по активированному парциальному тромбопластиновому времени (АПТВ) после инкубирования "in vitro" с материалами, модифицированными полифункциональными покрытиями на основе ПВС, показали (приложение 1), что поверхность ряда представленных образцов оказывает отчетливое ингиби-рующее действие на коагуляцию плазмы (рис.41.). Область между пунктирными линиями соответствует значениям АПТВ нормальной плазмы крови.

При тестировании, в преобладающем случае получены нормальные показатели АПТВ для следующих материалов: СКТВ-мед, композиционный материал, содержащий графит. Ингибирующее влияние на коагуляцию плазмы оказывает композиционный материал с гидрогелевым покрытием, а тромборези-стентная активность покрытий, содержащих биологически активные вещества (гепарин и трипсин), была настолько выражена, что образование сгустка не прослеживалось бесконечно долгое время.

Как известно, значения свободной поверхностной энергии F материала существенно влияют на характер его взаимодействия с биологическими системами (кровь, живая ткань и др.). Данные, представленные на рис.41 показывают, что чем выше значение свободной поверхностной энергии материала, тем короче период тромбообразования на его поверхности.

Рис.41.

Следовательно, можно предположить, что на поверхности твердого тела с более высокой гидрофильностью тромбообразование протекает медленно и параметр F имеет глубокую связь с кровосвертывающей способностью материала. Тем не менее, данная закономерность наблюдается в определенном интервале значений F =28-42 мДж/м и не может рассматриваться как единственно достоверное свидетельство полной антитромбогенности материала. Необходимо учитывать изменение других физико-химических свойств поверхности материала [168].

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что формирование на поверхности модифицируемого материала в электрическом поле полифункциональных гидрогелевых покрытий, содержащих БАВ, позволяет обеспечить комплекс физико-химических и биоактивных свойств необходимых для достижения высокой тромборезистентной активности.

6.2. Тестирование изделий с полифункциональным покрытием в опытах "ш vivo" и в клинических условиях

Полученный материал в виде изделий (хирургических шунтов длинной 200-400 мм и диаметром 3,6 и 8 мм) был апробирован в опытах in vivo для временного шунтирования брюшной аорты собаки. Тромбообразования не наблюдалось в течение 3-х и более часов. Хирургические нити, модифицированные полимерными антимикробными покрытиями, в опытах "in vitro" показали высокий уровень антимикробной активности в течение 9 суток (приложение 3).

Разработанный материал в виде прокладок был успешно использован для протезирования суставов фаланг верхних конечностей людей на базе Российского НИИ травматологии и ортопедии им. Р.Р.Вредена (Акт об использовании-приложение 4).

1. Полимеры медицинского назначения. Под ред. проф. С. Манабу. М.: Медицина, 1981, 248 с.

2. Hartwig Hocker. Polymer for medical uses // Mat. 5th Eropean Polymer Federation Symposium on polymeric Materials. Basel, Switzerland. October 912, 1994, p. 149-152.

3. Платэ H.A., Валуев Л.И. Полимеры в контакте с живым организмом. М.: Знание. Новое в жизни, науке и технике. Серия "Химия", 1987, № 8, 48с.

4. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1983, 368 с.

5. Рыжаков Д.И., Носов П.А. Реакция тканей на имплантацию некоторых полимеров и металлов // Вестник хирургии, №7, 1969, с. 71-74.

6. Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры. СПб: Гиппократ, 1993, 264 с.

7. Химия фармакологически активных полимеров. Сборник статей под ред. Платэ Н.А.//ВМС. 1999, т. 41, №12, с. 1852-1893.

8. Доброва Н.Б., Навроцкая В.В., Смурова Е.В., Новикова С.П. О взаимодействии полимерных материалов с кровью. Сб.: Применение новых биополимерных материалов в медицине. Л.: ЛМИ -1979, с. 67-72.

9. Фролов Ю. Г. Курс коллоидной химии. 2-е изд. -М.: Химия, 1988, 450 с.

10. Цеттлемейер А., Нарайан К. Межфазная граница газ твердое тело. М.: Мир, 1970, 149 с.

11. Lyman D.J., William Н. Muir, Irene J. Lee et al. The effect of chemical structure and surface properties of the coagulation of blood // Trans. Am. Soc. Artif. Int. Organs. 1965, v. 11, p. 301-305.

12. Zisman W.A. Relation of the equilibrium contact angel to liquid and solid constitution// Advance in Chemistry, Series 43, American Chemical Society, Wachington, D.C., 1964, p. 222.

13. Розенберг М.Е. Гидрофобные полимеры медицинского назначения. Л.: Пластполимер, 1989, 64 с.

14. Бокерия Л.А., Веретенин Л.А., Городков Ю.А. Новые отечественные сосудистые протезы из политетрафторэтилена. // Грудная хирургия, 1996, №1, с. 4-9.

15. Andrade J.D. Influence of the chemical constraction of surface polyurethans on the combination by blood // Surface and Interface Aspects of biomat. Polym., New York, London, 1985, v.l, p. 105-109.

16. Доброва Н.Б, Дроганцева Л.Д., Смурова Е.В. Использование пиролитического изотропного графита, как перспективного материала для элементов искусственных клапанов сердца // Экспериментальная хирургия, 1974, № 6.С.41.

17. Лопатто Ю.С. Углерод материал будущего. Москва, Наука, 1989, 28 с.

18. Воронков М.Ж., Зелчан Ж.И., Лукевиц Е.Я. Силикон и жизнь. Биохимия, фармакология и токсикология силиконов. Рига: Зинатне, 1978, 587 с.

19. Николаев О.О., Бритов В.П., Богданов В.В. Технология приготовления и модифицирования композиций медицинского назначения на основе смесей сверхвысокомолекулярного полиэтилена и полисилоксана // Журн. прикл. химии, 2001, т. 74, №6, с. 982-988.

20. Бритов В.П., Юрханов В.Б., Николаев О.О., Богданов В.В. Изделия из полисилоксанов с градиентом свойств//Каучук и резина,1999, №6, с. 8-11.

21. Айвазян А.Й., Петрищев Н.Н., Михайлов В.Н., Зытнер Я.Д. Исследование адгезивных свойств тромбоцитов на различных поверхностях. Сб.:Применение новых биополимерных материалов в медицине. Л.: ЛМИ-1979, с. 90-96.

22. Andrade J.D., Lee Н.В., Jhon M.S. Hydrogels for medical and related application// Transaction of American Society for Artificial Interna Organs, 1973, v. 19, p. 1.

23. Платэ H.A., Васильев A.E. Физиологически активные полимеры.-M.:1. Химия, 1986, 296 с.

24. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическа химия. М.: -Медицина, -1982, 752 с.

25. Kazuhiko Ishihara. Polymeric materials for obtaining blood-compatible surface. Trends in polymer science, 1997, v.5, №12. P. 401-406.

26. Sawyer P. N. Biophysical mechanisms in vascular homeostasis and intravascular thrombosis//Appleton-Century Crafts, New York, 1965, pp.25-29.

27. Ушаков С.Н. Поливиниловый спирт и его производные. М. АН 1960. Т.1,2. 812 с.

28. Собко Т.Е. Касьянова А.А. Структурирование поливинилового и карбоксиметилированного спирта. М.: МТИЛП, 1976, вып. 40, с. 113-118.

29. Монева Л.И., Младенов И.Т. Исследование студнеобразования растворов ПВС, содержащего борную кислоту. Коллоидный журнал. 1990 г. Т. 52, №1, с. 154-158.th

30. Kwitkowcki G. Радиационное сшивание ПВС // 34 ш IUPAC Int. Symp. Makromol., Prague, 13-18 July, 1992,- Book Abstr. p. 402.

31. Энциклопедия полимеров. Гл. ред. В.А. Кабанов. М.: "Сов. энциклопедия", 1974. Т.2. С.927.

32. Князева Т.В., Колина К.Ш., Еженкова Л.Л. Серия "Полимеризационные пластмассы", М., НИИТЭХИМ, 1979, 30 с.

33. Розенберг М.Э. Полимеры на основе винилацетата.-Л.:Химия, 1983, 216с.

34. Киселев А.Е., Розенберг Г.Я., Васильев П.С. Справочник по кровезаменителям и препаратам крови. М.: Медицина, 1969, 30 с.

35. Кузьмина Н.Л., Бибер Б.Л., Абакумова Г.Л. Проблемы получения и применения хирургических шовных нитей. М.: НИИТЭХИМ, 1989, 37 с.

36. Богомольский В. Я., Даурова Т.Т., Афиногенов Г.Е. Антимикробные пленки на основе ПВС. Синтетические полимеры медицинского назначения. Алма-Ата 1983, с. 111-112.

37. Сорокин А.Я., Пак A.B. и др. О физиологической активности и медико-биологических свойствах сшитого ПВС. Синтетические полимеры медицинского назначения. Алма-Ата 1983, с. 146-147.

38. Алюшин М.Т., Артемьев А.И., Тракман Ю.Н. Синтетические полимеры в отечественной фармацевтической практике. М.: Медицина, 1974, с. 14-18.

39. Алюшин М.Т., Тенцова А.И. Полимеры в фармации. М.: Медицина, 1985.-256 с.

40. Сидельковская Ф.П. Химия N-винилпирролидона и его полимеров. М.: Наука, 1970, 148 с.

41. Панарин Е.Ф., Ушакова В.Н. Сополимеры N-винилпирролидона как носители биологически активных свойств. В сборнике: Полимеры медицинского назначения. М.: ИНХС АН, 1988, с. 66-95.

42. Панарин Е.Ф., Афиногенов Г.Е. Макромолекулярные антимикробные вещества и лекарственные препараты // ЖВХО им. Д.И. Менделеева. -1985-т. 30-№4. С.378-386.

43. Robinson В.У., Sullivan F.M., Borzelleca J.F., Schwartz S.L. PVP: A critical review of the kinetics and toxicology of polyvinylpyrrolidone (povidone). Chicago: Lewis publ., 1990. P. 209.

44. Кирш Ю.Э. Поли-К-винилпирролидон и другие поли-И-виниламиды: Синтез и физико-химические свойства.-М.:Наука, 1998. -252 с.

45. Синтетические полимеры медицинского назначения. Сборник лекций под ред. Н.А, Платэ, С.Ш. Рашидова. Ташкент, 1984, с. 154.

46. Шефтель В.О. Токсические свойства полимерных материалов. Л.: Химия, 1982,20 с.

47. Васильев П.С., Суздалева Л.В., Федорова H.A., Гроздов Д.М. Проблемы гематологии и трансфузиологии. М., 1976, т.1, с. 141.

48. БрыкМ.Т. Деструкция наполненных полимеров. М.: Химия, 1989. 192 с.

49. Евелева В.В., Саенко А.Н. Пищевая молочная кислота // Пищевая промышленность. -1994. -№11. -29 с.

50. Lipinsky E.S., Sinclair R.G. / Is Lactic Acid a Commodity Chemical // Chemical Engineering Progress.-1986, -v. 8, pp. 26-32.

51. Досон P., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика: Пер. с англ. -М.: Мир, 1991.-544 с.

52. Bokros I.C, La Grande L.D., Schoen F. The graphite structure control for the use in biotechnic // Chemistry and physics of carbon. 1973, V.9., P. 104-171.

53. Aisenberg S., Stein M.L. Factors important in applications of biocompatible materials // Carbon.-1980.- V. 18, N 1 .-P.63-64.

54. Jenkins G.M. Le corps et Ie carbon//L'actualite chimique.-1983. №6.-P. 19-24.

55. Южелевский Ю.А., Соколов C.B. Силоксановые полимеры в медицине: проблемы и перспективы//ЖВХО им. Д.И. Менделеева -1985-т. 30-№4. С.445-460.

56. Соболевский М.В., Музовская О.А. Свойства и области применения кремнийорганических продуктов. М.: Химия, 1975, 273с.

57. Бережнева Л.И. Влияние силиконового каучука на биологическую активность изделий. // Каучук и резина, 1986, № 6, с. 40-41.

58. Асонова Т.А., Зезин А.Б., Разводовский Е.Ф. Физиологически активные макромолекулярные синтетические полимеры. Материалы 3-го симпозиума «Синтетические полимеры медицинского назначения».-Рига, Институт механики полимеров, 1971.С.76.

59. Островидова Г.У. Физико-химические основы создания функциональных композиционных углеродсодержащих материалов. Диссертация насоискание ученой степени доктора химических наук. СПб, 1992. 425 с.

60. Симонов-Емельянов И.Д., Кулезнев В.М. Принципы создания композиционных материалов. М.: МИХМ, 1986, 85 с.

61. Дейнега Ю.Ф., Ульберг З.Р. Электрофоретические композиционные покрытия. -М.: Химия, 1989, 240 с.

62. Колзунова Л.Г., Коварский Н.Я. Полимерные покрытия на металлах. -М.: Наука, 1976, 86 с.

63. Макаров К.А., Зытнер Я.Д., Мышленникова В.А. Электрохимические полимерные покрытия. -Л.: Химия, 1982, 128 с.

64. Сайфулин P.C., Зенцова Е.П. Комбинированные электрохимические покрытия и материалы. -М.: Химия, 1972, 120 с.

65. Кольцов С.И., Островидова Г.У., Егорова И.В. Электрофоретическое осаждение углеродных покрытий. Л. ЛТИ, 1984, 31 с.

66. Моисеев И.В. Окраска изделий в электрическом поле. М.: Химия, 1966, 121с.

67. Журавлев Г.И. Августинник А.И. Нанесение покрытий электрофорезом. Сб. «Защитные покрытия на металлах». -Киев.: «Наукова Думка», 1967, вып. 1, 98 с.

68. Полякова В.М, Дайнек Ю.Ф. Получение полимерных покрытий методом электроосаждения // Химическая промышленность Украины,-1970, №3, с. 51-58.

69. Островидова Г.У., Чечот М.И., Алесковский В.Б. Влияние химической природы поверхностных слоев графита на активность иммобилизованных ферментов. Изв. ВУЗов. Сер. Химия и хим. технология. 1987, т. 30, №2, с.48.52.

70. Островидова Г.У. Научные основы конструирования искусственных органов // Направленный синтез твердых веществ: Межвуз. Сб. Науч. Тр./ Под ред. В .Б. Алесковского.-JI. : ЛГУ, 1987.-Вып.2.С.142-150.

71. Электрохимия органических соединений. Пер. с англ./ Под ред. А.П. Томилова и Л.Г. Феоктистова. М.: -Мир, 1976, 730 с.

72. Введение в прикладную энзимологию./ под ред. И.В. Березина и К. Мартинека.-М. Изд. Моск. ун-та.- 1982, 384 с.

73. Fourt L., Schwartz A.M., Quasius A., Bowman R.L. Сб. «Полимеры в медицине». Пер. с англ. под ред. H.A. Платэ. М. Мир, 1969, 109 с.

74. Иммобилизованные ферменты. Под ред. И.В. Березина. М.: Изд. Моск. ун-та.- 1976.-Т. 1,2.-258с., 358 с.

75. Немец Е.А. Влияние способа иммобилизации гепарина на взаимодействие биоматериалов с кровью и ее компонентами. А.р. диссертации к.б.н. М.: НИИ трансплонталогии и искусственных органов. 1991,20 с.

76. Кильдеева Н.Р., Трусова С.П., Арионова Н.И. и др. Многокомпонентные системы, содержащие биологические белки и антимикробные вещества // Прикл. Биохим. и Микробиол. 1997, т. 33. №5, с.488-491.

77. Вирник А.Д., Скокова И.Ф., Юданова Т.Н. Получение пленок с комбинированным биологическим действием и исследование их свойств // Прикл. Биохим. и Микробиол. 1997, т. 33. №4, с.428-432.

78. Maeda H., Suzuki H. Preparation of immobilized enzymes by radiatio // Process, biochem. -1977. V. 12, № 9.-Pp. 16-32.

79. Тривен M. Иммобилизованные ферменты./ Пер. с англ. -М.: Мир.- 1983. -213с.

80. Платэ H.A., Валуев Л.И. Проблемы создания биоспецифических синтетических полимеров для контакта с биологическими средами // ЖВХО им. Д.И. Менделеева. -1985. Т. 30. Вып. 4. С. 402-410.

81. Торчилин В.П. Иммобилизованные ферменты в медицине. М.: Знание. Сер. "Химия", 1986. 32с.

82. Canal T., Peppas N.A. Hydrogels in Medicine and Pharmacy // J. Biomed. Mat. Res. 1989.-V.23, p.l 183.

83. Лозинский В.И., Пилева Ф.М. Зубов А.Л. Применение криогелей ПВС в биотехнологии. Сверхмакропористые носители для иммобилизации молекул//Биотехнология. 1995, №1, с.32-38.

84. Николаев А.Л., Чичерин Д.С., Синани В.А, Hoa О.В., Меликов И.В. Платэ H.A. Управление каталитической активностью трипсина // ВМС, 2001, т. 43,с. №1, с.27-32.

85. Maneske G., Vogt H.G. Enzymes immobilized on poly(vynyl)alcohol carriers //Macromol. Chem. 1976.- У. 177. №3. P. 725-739.

86. A.c. 686383 СССР, В 05Д1/4. Способ иммобилизации биологически активных веществ на поверхности конструкционных материалов. /Макаров К.А., Зытнер Я.Д. (СССР).// Открытия. Изобретения. -1977, №9.

87. Зытнер Я.Д., Тихонова Л.С., Макаров К.А. Использование электрохимических методов для иммобилизации биологически активных веществ // Итоги Науки и техн. ВИНИТИ. Сер. Электрохимия. -1992. -Т.39. С. 94-135.

88. Макаров К.А. Зытнер Я.Д. Синтез и исследования антитромбогенных покрытий, контактирующих с кровью. -Л.: ЛТИ, 1978, с. 120-131.

89. Зытнер Я.Д., Макаров К.А. Островидова Г.У. Синтез биомедицинских композитов методами электрохимической сополимеризации и соиммобилизации / Сб. «Направленный синтез твердых веществ». Л.: ЛГУ, 1987, №2, с. 150-160.

90. Гвоздяк П.И., Могилевич И.Ф., Никоненко В.У. Иммобилизация ферментов электроудерживанием//Докл. АН УССР. 1977. Т.39.С. 436-440.

91. Кноре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия. М.: Высш. шк.,2000,479 с.

92. Гвоздяк П.И., Могилевич И.Ф. Электроудерживание амилазы./ЛГезисы 2-го

93. Всесоюзн. Симп. по иммобилизованным ферментам. Абовян,1977, с. 65.

94. Могилевич М.Ф., Безбородко A.M., Тихомирова A.C., Гвоздяк П.И. Иммобилизация В-галоктоидазы электроудерживанием. .// Тезисы 2-го Всесоюзн. Симп. по иммобилизованным ферментам. Абовян, 1977. -С. 40.

95. Pat. USA 3839175 . Method of dinamic sorbtion/Keyes M.N. (USA)/ 1974. Keyes M.N. Dynamic absorbtion of enzymes.// Enzyme Eng. -1978.-№3. -P. 51-56.

96. Vieth W.R.,Venrasubramanian K. Collagen-Immobilized Enzyme System.// Methods Enzymol. -1976. -V.44. -Pp. 243-263.

97. Кретович B.JI. Введение в энзимологию.-М.: Наука, 1986.-330c.

98. Платэ H.A., Валуев Л.И., Чупов B.B. Влияние способов иммобилизации протеолитических ферментов в полимерный гидрогель на гемосовместимость // Высокомолекулярные соединения, 1980. А. Т.22. №9. С.1963-1972.

99. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Медицина 1987. С.546.

100. ЮЗ.Навашин С.М., Фомина И.П., Рациональная антибиотикотерапия. М.: Медицина, 1982, 178 с.

101. Поляк М.С., Бухвалова Л.А., Павлова Л.М. Экспериментальное изучение лечебных свойств иммобилизованного террилитина. Л.: Медицинская промышленность. -1982. 154 с.

102. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды). М.: Химия-1978, 256 с.

103. Занин В.А., Чернов H.H. Биохимия белков, нуклеиновых кислот и полисахаридов. -М.: Ун-т дружбы народов. -1984, 82 с.

104. Тагдиси Д.Г., Мамедов Я.Д. Тромбозы и эмболия.-М.: Знание, 1982. -64с.

105. Немец Е.А. Влияние способа иммобилизации гепарина на взаимодействие биоматериалов с кровью и ее компонентами. А. р. дисс. НИИ Транспантологии и искусственных органов. -М. -1991, -20 с.

106. Жозефович М., Жозефонвич Ж. Гепаринсодержащие и гепаринподобные полимеры//ЖВХО им. Д.И. Менделеева. 1985.Т.ЗО. Вып. 4.С.410-419.

107. Jongro Byein, Harvey A. Jacobs and Wankim Sung. Mechanism of thrombin inactivation by immobilizated heparin // Journal of Biomed. Mater. Res. 1996, vol. 30, N4, pp.423-427.

108. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. M.: Высш. шк., 1993. 432 с.

109. Навашин С.М., Фомина И.П. Справочник по антибиотикам. М.Медицина. 1974.-77с.

110. Стругацкий В.М. Физические методы лечения. J1.:-Медицина, 1978, 184 с.

111. Замыслов Э.В., Клочков В.И., Островидова Г.У. Свойства композиционного материала на основе по лисил оксанового каучука // ЖПХ, 1997.Т.70.Вып.7. С.1212-1214.

112. Zamyslov E.V., Klochkov V.l., Ostrovidova G.U. Composite material for medical application // Macromolecular Symposia. 1998, №127. Pp.205-209.

113. Буева O.A., Замыслов Э.В., Островидова Г.У. Тромборезистентные свойства нового углеродсо держащего композиционного материала //В кн. Патофизиология микроциркуляции и гемостаза. Под. ред. H.H. Петрищева. Изд-во: СПб.МА, 1998.-С.447-453.

114. Кацнельсон М.Ю, Банаев Г.А. Полимерные материалы: Справочник Л.: Химия, 1982.-317с.

115. Временная Фармакопейная статья №42-3395-99, 14 июля 1999 г.

116. ОСТ 6-08-431-75. Коллоидно-графитовый препарат С-1. М.: Изд-во стандартов, 1975.

117. Тихонова A.JL, Кириллова Е.Г. Исследование поверхностных свойств водных суспензий графита//Коллоид. Журнал. 1982.Т.44.Вып.1.С. 163-166.

118. Лежнев H.H., Терентьев А.П., Новикова И.С. О химической природеповерхности сажи // Каучук и резина. 1961.-Вып. 11 .-С.21-27.

119. Смирнов Е.П., Краснобрыжий А.В. Синтез протогенных функциональных групп окислением поверхности технического углерода// Изв. Вузов. Серия химия и хим. технология. 1981.-Т.24.-№8-С.1029.

120. Корякина М.И. Лабораторный практикум по испытанию лакокрасочных материалов и покрытий. М.: Химия, 1974.С. 240.

121. Новоженец А.А. Регулирование энергетических характеристик элементооксидных слоев, синтезированных методом молекулярного наслаивания на кремнии: Дисс. канд. хим. наук: 02.00.04. Л., ЛТИ им. Ленсовета.-1989, 372 с.

122. Хохлов В.Ю., Селемешев В.Ф., Хохлова В.Н. Определение гепарина спектрофотометрическим и фотоколлориметрическим методами // Химико-фармац. ж-л. 1999, т. 33. №8, с. 47-48.

123. Иванова Г.П., Зайцева Л.А., Миргородская О.А. Иммобилизация трипсина на минеральной матрице.// Прикл. Биохим. и Микробиол.-1978.-Т.14.-В.4-С.543-545.

124. Веремеенко К. Н. Ферменты протеолиза и их ингибиторы в медицинской практике. Киев: Здоровье, 1971. 216 с.

125. Алейникова Т.Л., Рубцова Г.В., Руководство к практическим занятиям по биологической химии. М.: Высш. шк. 1988. 240 с.

126. Петрищев Н.Н. Буева О.А. Унификация условий и методов проведения коагулогических исследований // Метод. Рекоменд. Л. ЛМИ, 1986. 25с.

127. Е. Genni, G. Giapetti. Activation of the plasma coagulation system induced by some biomaterials// Journal of Biomed. Mater. Res.l996,v.31,№l, pp.144-148.

128. Полюдек-Фабини P., Бейрих T. Органический анализ: Пер. с нем.-Л.: Химия, 1981, 624 с.

129. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. М.: Высш. шк., 1993. 432 с.

130. Иванов А.И. Радиационная стерилизация медицинской продукции. Материалы симозиума МАГАТЭ, Вена, -1975, 504 с.

131. Немошкаленко Г.И. Рентгенофотоэлектронная спектроскопия.- Киев: Наукова думка, 1977.-С. 183.

132. Смит А. Прикладная ИК -спектроскопия. М.: Мир, 1982. С.327.

133. Малкин А.Я., Чалых А.Е. Диффузия и вязкость полимеров. Методы измерения. -М.: Химия, 1979, 304 с.

134. Клочков В.И., Михайлов А.М. Физико-механические испытания резин. Лабораторный практикум. Л. ЛТИ, 1987. 31 с.

135. ГОСТ 270-76. Резина. Метод определения упругопрочных свойств при растяжении. М. Изд-во стандартов, 1976, 40 с.

136. Гоулдстейн Дж., Ньютерн Д., Энглин П., Джой Д. Растровая электронная микроскопия и рентгеновский микроанализ. М.: Мир, 1984, кн.1. С.303.

137. Вундерлих Б. Физика макромолекул. Пер. с англ. М.: Мир, 1976. С.506.

138. Власюк Н.В., Дейнега Ю.Ф., Натансон М.З. Катодное осаждение ПВС // Укр. Хим. Журн., 1976. Т. 42, №8. С. 852.

139. Фрайфелдер Д. Физическая биохимия. Применение физико-химических методов в биохимии и молекулярной биологии. М.: -Мир, 1980, 582 с.

140. Воюцкий С.С. Курс коллоидной химии. М.: Химия, 1975, 512 с.

141. Бектуров Е. А., Легкунец P.E. Ассоциация полимеров с малыми молекулами.-Алма-Ата:Наука, 1983 .-208 с.

142. Ташмухамедов С.А., Азизов Ш.А., Карабаев А.Ш., Цыгараев Ц.Т., Тилаев P.C., Усманов Х.У. Исследование свойств растворов привитых сополимеров поливинилового спирта с поливинилпиридином // Высокомолекулярные соединения, -1976, А 18, №10, с. 2171-2176.

143. Инфракрасная спектроскопия полимеров. Под ред. Дехант И., Данц. Р., Киммер В., Шмольке Р. М.: Химия. -1976. - С. 471.

144. Химическая энциклопедия. Гл. ред. И.Л. Кнунянц. М.: "Большая Российская энциклопедия", 1999. Т.1. С. 704 с.

145. Пахомов П.М., Хижняк С.Д., Ларионова И.В., Глазковский Ю.В. Изучение строения гидрогелей ПВС методом ИК-спектроскопии // ВМС.1999, т. 41, №5, с. 891-894.

146. Литманович O.E. Гидролиз поли-М-виниллактамов // ВМС. 2000. Т. 42. №9. С. 1602-1603.

147. Панов В.П., Овсепян A.M., Кобяков В.В., Жбанков Р.Г. ИК спектры водных растворов некоторых полимеров // Ж-л Прикл. Спектроскопии. -1978, т. 29, № 1, с. 62-68.

148. Браун Д., Флойд А., Сейнзбери М. Спектроскопия органических веществ. -М.: Мир, 1992, 300 с.

149. Кожевина Л.И., Скрябина Л.Г., Целинский Ю.Ф. Интерпретация инфракрасного спектра винной кислоты // Ж-л. Прикл. Спектроскопии. -1980,-т. 33, №6, с. 1090-1095.

150. Гачко Г.А., Кивач Л.Н., Маскевич С.А. и др. Спектроскопические исследования специфических взаимодействий пировиноградной кислоты в модельных системах. // Ж-л. Прикл. Спектроскопии. -1990, -т. 52, №5, с. 818-824.

151. Островидова Г.У., Макеев A.B., Замыслов Э.В. Электроформирование тромборезистентных покрытий на основе поливинилового спирта// ЖПХ,2000, т. 73. №5, с. 830-833.

152. Островидова Г.У., Макеев A.B. Направленное регулирование биоактивных свойств полимерных многокомпонентных структур//ЖПХ, 2002, т. 75, №9, с. 1509-1512.

153. Воейков В.Л., Решетов П.Д., Набиев И.Р. и др. Физико-химические методы исследования биополимеров и низкомолекулярных биорегуляторов. -М.: Наука, 1992 406.с.

154. Туманян М.А., Каушанский Д.А. Радиационная стерилизация.1. М. Медицина, 1974.-77с.

155. Вольф Ф.А., Шамолина И.И. Хохлова В.А. Получение, свойства и применение волокон с ферментативной активностью//Хим. Вол. -1979, №4, с.3-8.

156. Пикаев А.К. Современная радиационная химия. Радиолиз жидкостей и газов .-М.:Наука. 1986.-270с.

157. Рыльцева В.В., Власова А.Г., Самойлова Т.И., Влияние 7-облучения на иммобилизованный трипсин // Прикл. Биохим. И микробиолог. -1984. -Т.20.№5.С.694-698.

158. Косенко Р.Ю, Иорданский A.JL, Булатникова Л.И., Беляцкая О.Н., Быкова Л.В. Структура мембран поливинилового спирта, содержащих иммобилизованный при отрицательной температуре пепсин.// Химико-фармацевтический ж-л. -1995. -№5, с. 51-54.

159. Структура и стабильность биологических макромолекул. Под ред. М.В Волькенштейна. -М.: Мир. -1973, с. 584.

160. Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений. Пер. с англ. -М.: Мир. -1965. С. 209.

161. Тоиров А., Саидов Д., Марупов Р., Хабибуллаев X. Исследование колебательных спектров поливинилового спирта в условиях одновременного действия температуры и УФ радиации. Ж-л Прикл. Спектроскопии, -1981, т.34, №2, с. 277-280.

162. Березин И.В., Клячко Н.Л., Левашов A.B., Мартинек K.M. и др. Иммобилизованные ферменты. -М.: Высш. шк, 1987, 159 с.

163. Ландау М.А. Молекулярные механизмы действия физиологически активных соединений. М.: Наука, 1981. 262с.

164. Петровский Б.В., Шумаков В.И. Полимеры в сердечно-сосудистой хирургии. В кн: Отдаленные результаты применения полимерных материалов в эндопротезировании. М.: -1969, с. 3-14.

165. Утверждаю Проректор ло науке1. АКТ ПРОВЕРКИ

166. Экспериментальная оценка тромборезистентинх свойств указанных материалов проводилась определением влияния гюсло,дуемых материалов на показателя свергни шшя нормально:, плазмы человека Со

167. Всего исследовано 48 образцов, каждый образец тестировался дваж ды,результаты выражались в средней арифметической. Время свёртывания контрольной нормальной плазмы / без контакта с исследуемым материалом/ составляло 45+5 секунд.

168. Результаты испытаний отражены в таблице.1. Состав компонентов

169. Показатели АПТВ нормальной плазмы человека /сек/.

170. До инкубации с После инкуба материалом ции1, ЩЭДС, ненаполненный45ии

171. Композит на основе Пдг.Ю к гр фита,с содержанием графита 40 м.ч.1.х- / *Ух44 / 5542 / свыше^ ^ 10 мин175более 10 мин.более 10 мин.

172. В опытах инкубирования плазмы на пластинах с гидрогелевым покрытием, состоящим из ИБС, Н^ В0^ и гепарина и имеющих частичное покрытие пластин/композитов/ выявлено уменьшение контактной активации плазмы, .участки без покрытия такого влияния не оказывали.