автореферат диссертации по технологии, машинам и оборудованию лесозаготовок, лесного хозяйства, деревопереработки и химической переработки биомассы дерева, 05.21.03, диссертация на тему:Фенольные соединения кроны дерева сосны обыкновенной (Pinus silvestris L.)

На правах рукописи

У ЮЙ

* ФЕНОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ КРОНЫ ДЕРЕВА СОСНЫ

ОБЫКНОВЕННОЙ {Р1ЫШ ЖУЕБТШБI.)

05.21.03 - Технология и оборудование химической переработки биомассы дерева; химия древесины.

АВТОРЕФЕРАТ диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук

Яоо£ А-Ъ&кЪ

На правах рукописи

У ЮЙ

ФЕНОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ КРОНЫ ДЕРЕВА СОСНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (Ртиз ЯИГЕЯТШ /,.)

05.21.03 - Технология и оборудование химической переработки биомассы дерева; химия древесины.

АВТОРЕФЕРАТ диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук

Работа выполнена на кафедре Химии древесины, физической и коллоидной химии Санкт-Петербургской государственной

лесотехнической академии имени С. М. Кирова.

Научный руководитель:

доктор химических наук, профессор

Рощин В.И.

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Дейнеко И.П.

кандидат технических наук, старший научный сотрудник Некрасова В.Б.

диссертационного совета Д212.220.01 в Санкт-Петербургской государственной лесотехнической академии имени С.М. Кирова по адресу: 194021, Санкт-Петербург, Институтский пер., д. 5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургской государственной лесотехнической академии.

Отзывы на автореферат в двух экземплярах с заверенными подписями просим направлять ученому секретарю диссертационного совета по адресу: 194021, Санкт-Петербург, Институтский пер., д.5.

Автореферат разослан «_»_2006 г.

Ведущая организация:

Санкт-Петербургский государственный технологический университет растительных полимеров

Защита состоится « 18 » апреля 2006 г. в 11ш часов на заседании

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Развитие химической переработки биомассы дерева идет по пути комплексного и рационального использования сырьевых ресурсов. Проблема рационального использования древесной зелени (ДЗ) — отхода лесозаготовительной промышленности является одной из актуальных задач лесной отрасли.

Среди древесных пород, значимых для промышленной переработки, сосна обыкновенная (СО) занимает одно из первых мест при заготовке древесины. В настоящее время при переработке ДЗ сосны используют только вещества, извлекаемые углеводородным экстрагентом. Более полярные биологически активные вещества, остающиеся при существующей технологии в сырье, не используется. Недостаточная изученность состава "полярных" экстрактов оказывает влияние на разработку технологии более полного использования растительного сырья и получение новых биологически активных продуктов. Фенольные компоненты, входящие в состав "полярных" экстрактов, обладают многими полезными свойствами и лежат в основе лекарственных средств. Изучение состава фенольных соединений (ФС) ДЗ сосны обыкновенной, как с точки зрения фундаментальной науки, так и для решения практических задач переработки ДЗ, является актуальным.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы является изучение химического состава экстрактивных веществ, извлекаемых диэтиловым эфиром (ДЭ) из хвои и побегов СО (Pinus silvestris L.), после _ предварительной экстракции углеводородным экстрагентом. Основные задачи работы: -разработать схемы анализа ЭВ, растворимых в ДЭ из разных частей ДЗ; -выделить и установить строение индивидуальных соединений ЭВ; -определить качественный и количественный состав ЭВ;

Научная новизна. Установлено, что ЭВ из разных частей кроны СО, растворимые в ДЭ, после экстракции петролейным эфиром (ПЭ), состоят т терпеноидов, ароматических соединений (ФС и др.), высших жирных кислот и спиртов, триацилглицеринов, пигментов. Найдено, что в хвое среди терпеноидов основными компонентами являются монометилпинифолат и ß-ситостерин, а в побегах ß-ситостерин-З-О-Р-П-глюкопиранозид. Среди ФС только в хвое идентифицированы коричная кислота и продукты её а- и ß-окисления, п-кумаровая кислота, п-гидроксифенилэтанол и гваяцилэтанол, а только в побегах — стильбены, конифериловый альдегид и фенилпропеновые соединения (хавикол, эвгенол и изоэвгенол).

Впервые выделены из частей кроны СО З-О-Э-О-глюкопиранозид-р-ситостерина, диметоксирезвератрол, дигидрокумаровый и дигидроконифериловый спирты, два фенилбутапоида и 3-гидрокси-1-(4'-гидрокси-3 '-метоксифенил)пропан-1 -он.

Практическая ценность. Полученные результаты являются теоретической основой для разработки более глубоких, чем существующие, технологий с увеличением степени использования растительного сырья и получения биологически активных веществ.

Аиробация работы. Основные результаты работы доложены на трех конференциях: III Всероссийская конференция "Химия и технология растительных веществ" (Саратов, 2004), II Международная конференция "Лесные биологически активные ресурсы (березовый сок, живица, эфирные масла, пищевые, технические и лекарственные растения)" (Хабаровск, 2004), IV Международный симпозиум "Строение, свойства и качество древесиньГ (Санкт-Петербург, 2004). Результаты также докладывались на ежегодных научно-технических конференциях JITA, 2002-2005г.

Публикации. По теме диссертации имеется 3 публикации.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на __

страницах машинописного текста и состоит из введения, литературного обзора, методической и экспериментальной частей, выводов, списка использованной литературы (164 наименования). Диссертация содержит 31 рисунок и 24 таблицы.

Положения, выносимые на защиту: 1 .Схема разделения ЭВ, растворимых в ДЭ, из ДЗ сосны обыкновенной. 2.Состав экстрактивных веществ эфирного экстракта из разных частей СО.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ 1 .Методы проведения эксперимента.

Объект исследования. В качестве объекта исследования использовали свежую ДЗ (ветви диаметром до 0,8 см с хвоей) сосны обыкновенной (Ртш йПуевПчв Ь., возраст — 62 года), заготовленную в июле 2002 года в районе поселка Лисино-корпус Ленинградской области. Среднюю пробу ДЗ отбирали по методу квартования, хвою от побегов отделяли вручную.

Схема исследования состава ЭВ хвои и обесх военных побегов. Хвою и побеги экстрагировали последовательно ПЭ, ДЭ и этилацетатом в аппаратах Сокслета. В дальнейшем исследовали только вещества, растворимые в ДЭ. ДЭ экстракт хвои и побегов разделили на фракции, условно названные "сильные" и "слабые" кислоты, нейтральные вещества и воска по схеме (рис.1). Данное разделение не позволило полностью от делить "слабые" кислоты от "сильных" кислот, но позволило сконцентрировать эти компоненты в той или другой фракции. Последнее оказалось полезным при выделении индивидуальных соединений.

В дальнейшем исследовали фракции "слабых" и "сильных" кислот. "Сильные" и "слабые" кислоты разделяли на фракции методом колоночной хроматографии (КХ) на силикагеле. В качестве элюентов использовали ПЭ, ДЭ, хлороформ, этанол и их смеси. Подбор элюентов осуществляли

Хвоя или обесхвоениые побеги

Вещества, растворимые в ПЭ •

I

Экстракция ПЭ

Остаток

^ Экстракция ДЭ

I

Вещества, растворимые в растворе МаНСОз

I

Подкисление Ю%Н2804

до рН=1-3, экстракция ДЭ / 4

Вещества, растворимые в ДЭ •

Остаток

с А

Экстракция ЭА

обработка 1% раствором ИаНСОз ^

¡/

Вещества, не реаги-рущие с №НС03 в ДЭ

Вещества, растворимые в ЭА

Остаток

¡Воска 1

Вещества, растворимые в ДЭ

1

обработка 3% раствором ЫаОН'

Вещества, растворимые в растворе МаОН

/

Сушка №2804 (безв.), отгонка ДЭ

Вещества, не реагирущие с ЫаНСОз и ИаОН в ДЭ

Подкисление 10% Н2Б04 до рН=1-3, экстракция ДЭ

/_ "

Вещества, растворимые в ДЭ

I I

Сушка №2804(безв.), отгонка ДЭ Сушка №2804 (безв.), отгонка ДЭ

J__|

Воска

Нейтральные вещества

"Слабые" кислоты

Рисунок 1 - Схема определения группового состава экстрактивных веществ из хвои и обесхвоенных побегов

методом ТСХ. Все используемые растворители предварительно очищали по известным методикам или перегоняли.

Полученные фракции далее разделяли на индивидуальные соединения КХ или препаративной ТСХ на силикагеле (рис.2 и 3). Для некоторых полярных фракций проводили ацетилирование. Контроль за ходом разделения осуществляли аналитической ТСХ. Обнаружение ФС проводили путем просмотра ТСХ-пластинки в УФ-свете. Для дальнейшей идентификации использовали специфические проявляющие реактивы: 12, 10%-спиртовый раствор H2S04, диазотированная сульфаниловая кислота.

Методы анализа. Строение индивидуальных соединений устанавливали с помощью методов - РЖ (CHCIj, UV-72), ЯМР *Н и 13С спектроскопии (CDCI3, CD3OD и С2Г)6СО, 8-шкала, прибор Bruker-AM 500 с рабочей частотой 500 МГц и 125,76 МГц, соответственно) и масс-спектрометрии (ХМС, прибор Agilent Technologies, хромато-масс-спектрометрическая система AGILENT 6850/5973). Количественный анализ проводили методом ГЖХ (прибор Цвет 800) и гравиметрически. 2. Состав экстрактов хвои и обесхвоенных побегов.

Вещества, извлекаемые из хвои и побегов ГО, составили 9,9 и 10,3 (%, от массы сухого сырья соответственно), ДЭ — 3,5 и 3,1, этилацетатом — 6,8 и 4,5. Вещества, растворимые в ДЭ из хвои и побегов, разделили на условно названные труппы соединений (табл.1).

Таблица 1 - Групповой состав экстрактивных веществ, растворимых в ДЭ

Вид сырья Содержание, % от массы веществ, растворимых в Д Э

"Сильные" кислоты "Слабые" кислоты Нейтральные вещества Воска

Хвоя 29,7 26,3 32,3 4,3

Побеги 37,7 25,3 26,5 0.6

* Средний результат семи параллельных определений

Из результатов разделения следует, что ЭВ хвои содержат больше нейтральных веществ и восков, а побегов — "сильных" кислот. Содержание "слабых" кислот примерно одинаково в ЭВ из хвои и побегов. При

Вещества, растворимые в диэтиловом эфире Обработка ЫаНС03 и ЫаОН

"Слабые" ^кислоты Нейтральные1 вещества

Колоночная х^роматография

Фракция 1 (25,48 %)

Фракция 2

(9,27 %)

Фракция 3

триацилглицерины, борнеол, терпинеол-4 монометилпинифолат, дегидроабиетиналь дегидроабиетинол, метилдегидроабиетат эвгенол, изоэвгенол, хавикол -высшие жирные спирты—ГЖХ-МС высшие жирные кислоты—мети.1шр.(СН30Н+Н2Б04) ГЖХ-МС монометиловый эфир пиносильвина—ЯМР 'Н, МС

(8,88 %) Фракция 6 Фракция 7 (27,80 %)

Фракция 8

(15,96%)

(КОН,С2Н5ОН) Фракция 1 кислоты-метилир. (8,66 %) ГЖХ-МС

неомыляемые Фракция 2 ГЖХ-МС (4,20 %)

ВоЬка "Сильные"'кислоты

Колоночная хроматография высшие жирные кислоты метилир.(СН30Н+Н2804) ГЖХ-р-ситостерин МС

—ванилин п-метоксибензойная кислота 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он п-гидроксибензойная кислота

)3-ситостерин, ванилин, п-гидроксибензальдегид-ГЖХ-МС Фракция 3 -«онифериловый альдегид~МС

диметоксирезвератрол— ЯМР !Н, МС (4,37 %)

12-гидроксидегидроабиетиновая кислота- ЯМР 'Н,13С,МС Фракция 4

п(5,53 %) 4-(4*-гидроксифенил)бутан-2-он Фракция 4 ~(3,73 %) 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол Фракция 5 -дигидрокумаровый спирт

дигидроконифериловый спирт 1-ЯМР 'Н,МС "(1,42 %) пинорезинол—ЯМР 'Н

-ЯМР'Ни' БЕРТ, МС

"феруловая кислота—ЯМР Н, МС матаирезинол — ЯМР 'Н и 13С

'С (27,29 %)

Фракция 5 (5,52 %) Фракция 6 Фракция 7 Фракция 8

(З-ситостерин-З-О-Р-О-глюкопиранозид-ЯМР 'Н и 13С, БЕРТ (0,91 %)

-секоизоларицирезинол- ЯМР 'Н и ПС

пигменты

Фракция 9 (14,01 %)

ЯМР

'н

МС

ванилиновая кислота ЯМР

-дигидроконифериловый спирт *Н 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол МС феруловая кислота

3-гидрокси-1 -(4'-гидрокси-3'-метоксифе-нил)пропан-1 -он-ЯМР 'Н.ОЕРТ,МСДЖ Д28.44 %) пигменты -(0,49 %) матаирезинол -ЯМР 'Н -р-ситостерин-3-0-р-1>глюкопиранозид -ЯМР 'н

секоизоларицирезинол— ЯМР 'Н пигменты

Рисунок 2 - Схема разделения экстрактивных веществ, растворимых в

диэтиловом эфире из побегов

Вещества, растворимые в диэтиловом эфире

Обработка КГаНСОз и ЫаОН

"Слабые"|кислоты Колоночная хроматография

Нейтральные' вещества

(2,94 %) Фракция4 (9,96 %) Фракция5 (3,70 %)

Фракция6 (0,89 %) Фракция7 Фракция8 (3,45 %) Фракция9

Фракция 1 Гтриацилглицерины, метилдегидроабиетат (6,00 %) дегидроабиетиналь, дегидроабиетинол

маноилоксид-19-овая кислота Фракция 2-высшие жирные спирты

(21,07 %) высшие жирные кислоты—метилир.(СНз0Н+Н2$04) р-ситостерин, монометилпинифолат фенилуксусная и коричная кислоты бензиновый спирт, п-метоксибензойная кислота п-падроксибензойная кислота Фракция 3 _4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он ~ ЯМР *Н и МС

(КОН+С2Н5ОН), Фракция 1

к-ты-метилир неомыляемые

гжх

-МС

(15,38%)

ГЖХ -МС

Фракция 2 (9,36 %)

Фракция 3

п-гидроксибензальдегид, а-, 6-, т-кадинолы, т-муролол I (10,31 %)

—ванилин

4-(4'-шдроксифенил)буган-2-ол ,ЯМР 'Н -дигидрокумаровый спирт -МС

дигидрокониферило вый спирт п-гидроксифенилэтанол -гваяцилэтанол ГЖХ-МС

пинорезинол — ЯМР 'Н -(10,22 %) хлорофилл и его производные -п-кумаровая и феруловая кислоты - ЯМР !Н-М< матаирезинол

-(1,28 %) р-ситостерин-З-О-Р-Б-глюкопиранозид

ГЖХ-МС

Фракция 4 (7,22 %) Фракция 5 Фракция 6 (2,06 %)

Воска "Сильные"|кислоты

Колоночная хроматография высшие жирные кислоты- метилир. (СН30Н-гН2804) монометилпинифолат фенилуксусная кислота маноилоксид-19-овая кислота л-гидроксибензальдешд, ванилш 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он п-гидроксибензойная кислота ванилиновая кислота _4-(4'-шдроксифевил)буган-2-ол дигидрокумаровый спирт дигидроконифериловый спирт п-гидроксифенилэтанол гваяцилэтанол ГЖХ-МС

-феруловая кислота пинорезинол

ЙМР'Н

Фракция 10-(32,44 %) секоизоларицирезинол- ЯМР ]Н, пигменты

Фракция 7 (0,64 %) Фракция 8

(34,41%)

ГЖХ -МС

ЯМР

'н

МС

ЯМР'Н

£17,78 %)хлорофилл и его производные 3-гидрокси-1-(4'-гидрокси-3'-метокси-фенил)пропанон-1 - ЯМР 'Н-МС матаирезинол — ЯМР *Н _Р-ситостерин-3-0-р-Е)-глюкогофанозид - ЯМР !Н -секоизоларицирезинол — ЯМР'Н пигменты

Рисунок 3 - Схема разделения экстрактивных веществ, растворимых в диэтиловом эфире из хвои

обработке раствора ЭВ в ДЭ щелочными реагентами (№НС03, КаОН) в водно-щелочной раствор, вероятно, за счет образования эмульсии перешло и некоторое количество нейтральных соединений.

Триаиилглицерины. Побеги содержат больше триацилглицеринов, которые являются резервными питательными веществами, чем хвоя. Среди кислотных составляющих (анализ ХМС) триацилглицеринов из побегов основные: линолевая (23,21, % от массы кислот), олеиновая (22,00), бегеновая (20,83) и пальмитиновая (14,06), а из хвои — линоленовая (37,31), линолевая (30,72) и пальмитиновая (15,73) кислоты.

Высшие жирные спирты состоят из спиртов (ХМС) нормального строения С[2~С24- Из побегов главные: гексадеканол (12,27, % от массы спиртов), эйкозанол (11,93), октадеканол (9,42) и тетрадеканол (8,16), а из хвои -гексадеканол (39,12), тетрадеканол (29,30) и октадеканол (28,1). Высшие жирные кислоты. Хвоя содержит больше "свободных" высших жирных кислот (ХМС), чем побеги. Среди жирных кислот из хвои основные- пальмитиновая (39,86, % от массы кислот), линоленовая (25,85) и линолевая (16,03), а из побегов — линолевая (45,66), олеиновая (28,26), линоленовая (10,82) и пальмитиновая (6,74) кислоты. Терпеноиды

Моно- и сесквитерпеноиды представлены в экстрактах спиртами, находящимися в ЭВ в "следовых" количествах. Их наличие установлено методом ХМС. Идентифицированы: борнеол и терпинеол-4 в побегах, а-кадинол, 5 -кадинол, Т-кадинол и Т-муролол в хвое.

Дитерпеноиды. В ЭВ из хвои и побегов идентифицированы дитерпеноиды двух типов: трициклические дитерпеноиды дегидроабиетинового ряда и бициклические соединения. Маноилоксид-19-овая кислота (1) присутствует только в хвое. Дегидроабиетиналь (2), дегидроабиетинол (3), метилдегидроабиетат (4) в хвое и побегах присутствуют в следовых количествах. Монометилпинифолат (5) присутствует в хвое и побегах, но в

побегах в следовых количествах. 12-гидроксидегидроабиетиновая кислота (6) выделена только из побегов.

ПМР-спектр соединения (6): 1,22 и 1,26 м.д. (синглеты на ЗН каждый, СНз-20 и СНз-19); 1,20 и 1,24 м.д. (дублеты на ЗН каждый, J=7,0 Гц, СН3-17 и СНз-16); 3,09 м.д. (мультиплет на 1Н, СН-15); 2,83 м.д. (триплег на 2Н, СНг-7); 2,19 м.д. (мультиплет на 2Н, СНг-6); 1,51-1,80 м.д. (мультиплет на 7Н, протоны у С5, Сз, С-2, Ci); 6,61 и 6,82 м.д. (синглеты на 1Н каждый, СН-14 и СН-11). Масс-спектр ш/е (%): 316 (99,8, М4), 301(66, М'-СН3), 255(100), 241(5), 227(5), 213(62), 199(12), 185(9), 171(11), 157(20), 149(26), 133(13), 115 (11), 91(9), 77(5). В литературе не найдены данные о выделении 12-гидроксидегидроабиетиновой кислоты из СО в нативном состоянии

2 R=CHO

3 R=CH2OH

HOOG' * 4 R-COOCH3

соон

С Химсдвиги С Химсдвиги С Химсдвиги С Химсдвиги

1 24.97 6 29.67 11 131.70 16 21.86

2 22.71 7 36.81 12 150.72 17 16.21

3 26.78 8 126.73 13 147.75 18 184.12

4 47.35 9 127.04 14 110.78 19 22.49

5 36.64 10 44.52 15 37.88 20 18.49

Стерины. Хвоя содержит больше Р-ситостерина (7), чем побеги. Побеги содержат больше его З-О-р-О-

глюкопиранозида (8), чем хвоя. до" йн

Р-Ситостерин-3-0-(3-0-глюкопиранозид выделен после ацетилирова-ния фракции. Отнесение сигналов на спектре ПМР к протонам у атомов углерода углеводной части молекулы проведено на основании данных двойного резонанса. Сигналы протонов метальных групп боковой цепи агликона совпали с данными ПМР-спектра эталопного Р-ситостерина. Протон у аномерного атома углерода углеводной части гликозидов в ЯМР

'Н-спектре (рис.4) проявляется в виде дублета на 1Н с центром 4,57 м.д., 1=7,55 Гц. Величина константы спин-спинового взаимодействия 7,55 Гц позволяет утверждать, что углевод связан с агликоном р-связью. Спектр ЯМР 13С соответствует структуре глюкозида ситостерина (табл.3).

В литературе мы не встречали сообщений о выделении гликозидов тритерпеноидов или стеринов, и в частности, глюкозида ситостерина из каких-либо частей биомассы СО. Таблица 3 - Данные ЯМР 13С-спектра

С Химсдаиги С Химсдаиги С Химсдаиги С Химсдаиги

1 37.16 12 38.89 23 26.06 5' 71.48

2 29.41 13 42.30 24 45.81 6' 62.09

3 68.54 14 56.74 25 29.14 СО 169.27

4 39.72 15 24.26 26 19.00 СО 169.37

5 140.35 16 28.20 27 19.32 со 170.33

6 122.13 17 56.04 28 23.04 со 170.66

7 31.91 18 11.95 29 11.82 СНз 20.56

8 31.84 19 19.78 1' 71.67 СНз 20.59

9 50.14 20 36.09 2' 72.90 СН3 20.67

10 36.69 21 18.75 3' 99.62 СНз 20.72

11 21.02 22 33.92 4' 80.05

ГУГг I

33

я>

*л

т *!!

сцсь

Рисунок 4 - ПМР-спектры с двойным резонансом

тетраацетага ситостерин-З-О-Р-О-глюкопиранозида

Известно, что ситостерин является компонентом плазматической мембраны растительной клетки. Наличие и относительно высокое содержание, определенное нами, глюкозида ситостерина дает возможность, в качестве гипотезы, предположить, что в СО ситостсрин синтезируется клетками хвои и в виде глюкозида направляется по флоэме ветвей и ствола в нижнюю часть дерева, соприкасаясь с камбиальной зоной вторичного прироста. Возможно, что далее гликозид ситостерина под действием ферментов освобождается от молекулы глюкозы, превращаясь в ситостерин. Об этом говорит, тот факт, что при многочисленных исследованиях древесной (ксилемной) части СО гликозид ситостерина не находили, но имеются многочисленные сообщения о наличии ситостерина.

Можно предположить также, что глюкозид ситостерина образуется в определенное время вегетации хвойного древесного растения. Например, в весенне-летнее время, когда происходит наиболее интенсивный рост количества клеток побегов и ксилемной части ствола. В более поздние сроки вегетации, возможно, интенсивность биосинтеза гликозида ситостерина снижается. Поэтому, вероятно, такое соединение и не было выявлено в многочисленных исследованиях, проводимых ранее, из-за более позднего отбора образцов. Фенольные соединения

Алкилированные фенолы. Хавикол (9), эвгенол (10) и изоэвгенол (11) идентифицированы (ХМС) в ЭВ побегов в следовых количествах. Известно, что ¿н ¿н

эвгенол в условиях щелочной среды изомеризуется в юя-осн3 изоэвгенол. Найденный нами изоэвгенол, вероятно, получился из <?оон эвгенола при обработках ЭВ.

Фенолокислоты. Этот класс соединений был представлен как в хвое, так и в побегах п-гидроксибензойной (12), ванилиновой (13) 11 з^ =осн3 и транс-феруловой (14) кислотами. П-кумаровая кислота выделена только

из хвои. Их строение установлено по данным

соон

¿н ЯМР Н и масс-спектров. По данным ПМР-

сн 14 спектрОВ) феруловая кислота имеет только транс-

I 15 (З-НСЕ) 16

I 1 Н(2) конфигурацию двойной связи; п-кумаровая

он кислота идентифицирована с транс- (15) и цис-

(16) конфигурациями двойной связи в соотношении 10:1.

Спирты. 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол (17), дигидрокумаровый

(18) и дигидроконифериловый (19) спирты выделены из хвои и

побегов. П-гидроксифенилэтанол (20) и гваяцилэтанол

(21) найдены только в хвое.

Строение соединения (17) установили на он

20 р-н

основании ЯМР 'Н и ,3С-спектров и масс- 21 я=оснг

он спектрометрии, а также спектров с использованием программы

18 д-н

19 рюсн, БЕРТ и двойного резонанса. Масс-спектр т/е (%): 166 (35, М), 147(8), 148(27), 134(11), 133(98), 121[5, М+-(СН3-СНОН)], 108(19), 107[100, М+-(СН3-СНОН-СН2)], 105(9), 94(13), 91(10), 77(23), 45(9).

Данных о выделении соединений (18 и 19) из частей кроны СО в литературе не найдено. Соединение (19) найдено в ели европейской. Оно чаще присутствует в растениях в виде о-гликозида. Имеется сообщение о выделении [МЭ-глюкопиранозида соединения (19) из луба СО. Альдегиды. По масс-спектрам (сравнение с банком масс-

спектров) п-гндроксибензальдегид (22) и ванилин (23)

сно

найдены в хвое и побегах. Конифериловый альдегид

(24) определен в побегах.

ои_ Кетоны. 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он (25) и 322 И — Н

гз я=оснз гидрокси-1-(4'-гидрокси-3'-метоксифенил)пропан-1-он (26) выделены из хвои и побегов.

Соединение (25) также как и соединение (17) впервые выделено из хвои и побегов СО, строение установили на основании ЯМР 'Н и |3С-спектров, масс-спектрометрии и спектров с использованием программы ОЕРТ. Имеется сообщение о выделении 4-0-(М)-глюкопиранозида соединения (25) из хвои Ртш соМоШ.

В ЯМР 'Н-спектре соединения (26) наблюдались сигналы трех протонов у атомов углерода ароматического ядра: 7,58 м.д. (дд, 1(6.2)-1.5 Гц, 1(6-5-8,2 Гц, Н-6), 7,55 м.д. (д, 1(2_6)=1,5 Гц, Н-2), 6,90 м.д. (д, 1(5.6)=8,2Гц, Н-5); сигналы протонов метоксильной группы при 3,87 м.д. (с, ЗН); сигналы в виде двух двухпротонных триплетов при 3,13 и 3,97 м.д. соответствуют протонам у атомов углерода метиленовой и первичной спиртовой групп соответственно. В ПМР-спекгре с двойным резонансом при подавлении сигнала 3,97 м.д. изменяется форма сигналов при 3,13 м.д. (триплет —* синглет); при подавлении сигнала 3,13 м.д. изменяется форма сигналов при 3,97 м.д. (триплет-»синглет); В ИК-спектре соединения имеется полоса валентных колебаний >С=0 (1685сш"') сопряженного с ароматическим кольцом. Масс-спектр т/е (%): 196 (22, М+), 178 (6), 166 (3), 152(10), 151(100), 123(16), 108(6), 77(4), 65(4), 52(4).

В литературе не найдено сведений о Е С выделении такого соединения из каких-либо

частей дерева семейства Pinus. Имеется 27 r-r,= h r2-ch3

28 R-OH R,=R2=CH3

сообщение о его выделении в виде З-O-ß-D- зд r'och^r^r^chj

„„ 31 R-OH R1-CH3 R2=H

глюкопиранозида из хвои CO. 32r=och3 r,=ch3 r^ н

Стильбены. Вещества, растворимые в ДЭ, из побегов отличаются от таковых из хвои наличием стильбенов: идентифицированы монометиловый эфир пиносильвина (27) и диметоксирезвератрол (28).

В ПМР-спектре (CDCl3) соединения (28) имеются два дублета с центрами 7,39 м.д. (Н-2" и Н-6') и 6,82 м.д. (II-3' и Н-5 ) и константой спин-спинового взаимодействия 8,11 Гц, а также сигналы протонов у атомов

углерода двойной связи, сопряженной с ароматическим ядром: 8 7,02 (д, На, 1=16,28 Гц) и 6,89 (д, Н-0,1=16,28 Гц). В слабом поле имеются сигналы в виде синглета при 6,64 м.д.(Н-2 и Н-6) на 2Н, и дублет дублетов с центром 6,37 м.д. 1=1,43 Гц (Н-4) на 1Н. В спектре видны сигаалы протонов метоксильной группы (3,82 м.д. синглет на 6Н); сигнал протона фенольного гидроксила (4,97 м.д. уширенный синглет на 1Н). Масс-спектр т/е (%): 256 (100), 240 (7), 225 (8), 210 (7), 197 (5), 181 (14), 165 (6), 152 (7), 141 (4), 128 (6), 115(6), 107 (2), 91 (2), 77(2).

В литературе не найдены данные о выделении диметоксирезвератрола из растительных материалов. Имеется сообщение о выделении резвератрола (29), его триметилового эфира (30) и метилрезвератрола (31, пиностильбен) из коры СО. Вероятно, в растениях осуществляются все возможные способы метоксилирования резвератрола. Соединения (30, 31) выделены ранее, соединение (28) выделено нами и еще не

_ о

найдено в СО соединение (32). на_/ сн "сн,

У—/ ¿н_Хн _ ЛЭСНз

Лигнаны. Из хвои и побегов извлекли сн3о | УП / \

' СН? СН—С V-он

шшорезинол (33), секоизоларицирезинол зз \ /

(34) и матаирезинол (35). Идентификация соединения (34) в виде ацетата, остальных в свободном виде методами ЯМР *Н и |3С.

опзип

Пинорезинол ранее был выделен из коры и стволовой

части многих хвойных древесных растений, в том

числе, из хвои СО и из побегов ели европейской.

Матаирезинол и секоизоларицирезинол в виде "чГ'чосн7У^чоснз

ОН он

гликозидов ранее выделены из хвои СО, но впервые обнаружены в побегах СО.

Кроме указанных соединений в хвое найдены фенилуксусная (36) и коричная (37) кислоты, бензиновый спирт (38). В побегах и хвое найдена п-метоксибензойная кислота (39). В литературе не найдено сведений о выделении коричной кислоты или продуктов её а- или (3-окисления. Однако

наличие коричной кислоты в СО можно ожидать исходя из присутствия в СО пиносильвинов. Биосинтез кольца Б пиносилъвинов, исходя из общих представлений о биосинтезе стильбенов, основывается на предшественнике — коричной кислоте.

Из результатов исследования состава ФС элементов ДЗ сосны обыкновенной (табл.4.) следует, что состав ФС хвои и побегов включает алкилированные фенолы, фенолокислоты, спирты, альдегиды, кетоны, стильбены и лигнаны. Состав ФС из разных частей ДЗ несколько различается. Хвоя, в отличие от побегов содержит коричную кислоту и продукты её а- и р-окисления, п-кумаровую кислоту, п-гидроксифенилэтанол и гваяцилэтанол. В составе экстрактивных веществ побегов идентифицированы хавикол, эвгенол, изоэвгенол, конифериловый альдегид, монометиловый эфир пиносильвина и диметоксирезвератрол.

Эфирный экстракт из побегов содержит больше ФС, чем хвоя. В составе ФС из побегов доминирующими компонентами являются дигидроконифериловый спирт, матаирезинол и секоизоларицирезинол. В составе ФС из хвои доминирующие компоненты, как в случае побегов, отсутствуют, и здесь наблюдается более равномерное их распределение. В хвое в сравнительно больших количествах присутствуют 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол, 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он и п-гидроксибензойная кислота.

Хвоя содержит больше п-щдроксибензойной кислоты, дигидрокумарового спирта и 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ола, чем побеги, а побеги содержат больше ванилиновой и феруловой кислот,

39

дигидрокониферилового спирта, 3-гидрокси-1-(4'-гидрокси-3'-метоксифе-нил)пропан-1-она, матаирезинола и секоизоларицирезинола, чем хвоя. Таблица 4 - Состав соединений, растворимых в ДЭ, из хвои и обесхвоенных побегов СО,

% от массы эфирных экстрактов

Соединения Хвоя Побеги Соединения Хвоя Побеги

Триацилглицерины 1.11 5,81 Фенольные соединения

Алкилироваппые фенолы:

Высшие жирные спирты 0,10 0,36

Высшие жирные кислоты 4,46 2,35 Хавикол Эвгенол Изоэвгенол — следы следы следы

Терпенпипм —

Монотерпеноиды: Борнеол Терпинеол-4 Сесквитерпеновды: а-кадинол б -кадинол Т-кадинол Т-муролол Дитерпеноиды: Маноилоксид-19-овая к-та Дегидроабиетиналь Дегидроабиетинол Метилдегядроабиетат Монометилпинифолат 12-гидроксидегидроаби- етиновая кислота Тритерпеноиды: следы следы следы следы 0,39 следы следы следы 2,73 следы следы следы следы следы следы 0,10 Фенолоки слоты: п-гидроксибензойная Ванилиновая Феруловая п-кумаровая Спирты: 4-(4'-гидроксифенил)- бутан-2-ол Ди гидрокумаровый Дигидроконифериловый п-гидроксифенилэтанол Гваяцилэтанол Альдегиды: п-гидроксибензалъдегид Ванилин Конифериловый альдегид Кетоны: 4-(4'-гидроксифенил)-бутан-2-он 1,68 0,10 1,45 0,72 3,54 1,28 1,25 0,10 0,15 следы 0.46 1,83 0,53 1.49 2,37 1.50 0,75 9,15 следы 0,37 0,15 1,73

(3-ситостерин р-ситостерин-3-О-0-О- 0,85 0,53 0,32 2,50 3 -гидрокси-1 -(4'-гидрокси -3 '-метоксифенил)- 0,51 2,09

1 дкжопиранозид пропанон-1

П-мегоксибензойная кислота Следы 0,26 Стнльбены: Монометиловый эфир — 0,51

Фенилуксусная кислота 0,20 — пиносильвина Диметоксирезверагрол Лигнаны: 0,22

Коричная кислота 0,10 — 0,91 0,19 0,73

Бенз иловый спирт 0,10 — Пинорезшол Матаирезинол Секоизоларидирезинол 1,07 4,49 3,38

Пигменты 26,01 16,27

Основные выводы:

1 .Разработана схема анализа эфирного экстракта частей ДЗ сосны обыкновенной (Ртш яИ^Ыв Ь.). Хвоя и побеги отличаются по

содержанию экстрактивных веществ, извлекаемых различающимися по полярности экстрагентами. Содержание более полярных соединений, чем извлекаемых углеводородным экстрагентом, в хвое и побегах составляет 10,3% и 7,6%.

2.Изучен состав соединений, растворимых в ДЭ после предварительной экстракции углеводородным экстрагентом, хвои и побегов сосны. Определено, что состав эфирного экстракта хвои и побегов включает пигменты, триацилглицерины, высшие жирные спирты и кислоты, терпеноиды (монотерпеноиды, сесквитерпеноиды, дитерпеноиды и стерины) и ароматические соединения (фенольные соединения и др.).

3.Изучен состав основных ФС. Определено, что состав ФС хвои и побегов включает алкилированные фенолы, фенолокислоты, спирты, альдегиды, кетоны, стильбены и лигнаны.

4. Хвоя, в отличие от побегов содержит коричную кислоту и продукты её а-и р-окисления, п-кумаровую кислоту, п-гидроксифенилэтанол и гваяцилэтанол. В побегах, в отличие от хвои, определены хавикол, эвгенол, изоэвгенол, конифериловый альдегид, монометиловый эфир пиносильвина и диметоксирезвератрол. Доминирующими компонентами экстракта хвои и побегов являются 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он, 4-(4'-гидроксифенил)-бутан-2-ол, феруловая кислота, дигидроконифериловый спирт и секоизоларицирезинол.

5.Установлено строение диметоксирезвератрола и впервые идентифицированы в СО — 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он и 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол, спиртокетон гваяцильного типа, коричная кислота, бензиновый спирт, фенилуксусная кислота, дигидрокумаровый и дигидроконифериловый спирты. Впервые из экстрактов хвои и побегов СО выделен Р-ситостерин-З-О-Р-В-глюкопиранозид.

6.На основании выявленного состава ароматических соединений из хвои и побегов СО, можно предположить, что в хвое основным направлением их

образования является шикиматный путь, а в побегах найдены соединения, образование которых протекает по шикиматному и комбинированному-шикиматно-ацетатному пути.

Основное содержание диссертации изложено в следующих работах:

1.У Юй, Рощин В.И. Фенольные соединения древесной зелени сосны обыкновенной // III Всероссийская конференция "Химия и технология растительных веществ" -Саратов, 2004.-С.335

2.У Юй, Рощин В. И. Фенольные соединения ветвей сосны обыкновенной (Ртия .чИуеяМх Ь.) // IV Международный симпозиум "Строение, свойства и качества древесины" -Санкт-Петербург, 2004.-С.392.

3.У Юй, Рощин В.И. Состав соединений полярных экстрактов хвои и ветвей сосны обыкновенной (Ртт яНуезМя Т..) // П Международная конференция "Лесные биологически активные ресурсы (березовый сок, живица, эфирные масла, пищевые, технические и лекарственные растения)" -Хабаровск, 2004.-С.214-216

У юй

АВТОРЕФЕРАТ

Подписано в печать с оригинал-макета 17.03.06. Формат 60x84/16. Бумага офсетная. Печать трафаретная. Уч.-изд. л. 1,0. Печ. л. 1,25. Тираж 100 экз. Заказ Ks 88. С 9а.

Санкт-Петербургская государственная лесотехническая академия Издательско-полиграфический отдел СПбГЛТА 194021, Санкт-Петербург, Институтский пер., 3

Д.0Р6А

8SA9

8849

ВВЕДЕНИЕ.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Методы анализа экстрактивных веществ (фенольных соединений).

1.1.1.Экстрагирование фенольных соединений.

1.1.2. Выделение и идентификация фенольных соединений.

1.1.3. Установление строения фенольных соединений.

1.2. Состав соединений хвои и ветвей сосны обыкновенной {Pinus silvestris L.).

1.2.1. Фенольные соединения.

1.2.2. Терпеноиды.

1.3. Биосинтез фенольных соединений.

1.3.1.Шикиматный путь.

1.3.2. Ацетат-малонатный путь.

1.4.Функции и биологическая активность фенольных природных соединений.

1.5.3аключение.

2. МЕТОДИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Подготовка образцов для исследования.

2.2. Характеристика исходных образцов древесной зелень и разных ее частей, наработка экстрактивных веществ и их групповой состав.

2.3. Выделение индивидуальных соединений.

2.4. Установление строения индивидуальных соединений.

2.5. Химические методы анализа выделенных соединений.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ЭКСПЕРИМЕНТА.

3.1.Групповой состав экстрактивных веществ из хвои и обесхвоенных побегов сосны обыкновенной {Pinus silvestris L.).

3.2. Состав фракции "слабых" кислот из обесхвоенных побегов.

3.3 Состав фракции "слабых" кислот из хвои.

3.4. Состав фракции "сильных" кислот из обесхвоенных побегов.

3.5. Состав фракции "сильных" кислот из хвои.

З.б.О химическом составе экстрактивных веществ из хвои и обесхвоенных побегов, растворимых в диэтиловом эфире, после экстракции петролейным

Лесные ресурсы являются перспективным источником сырья для химической переработки в связи с их естественной возобновляемостью. В настоящее время развитие химической переработки биомассы дерева идет по пути комплексного и рационального использования сырьевых ресурсов. Проблема рационального использования древесной зелени — отхода лесозаготовительной промышленности, является одной из актуальных задач лесной отрасли.

Лесной фонд России занимает первое место в мире по площади (около 675 млн га), в котором находится более 25% мировых запасов леса [21]. Среди древесных пород, значимых для промышленной переработки, сосна обыкновенная занимает одно из первых мест при заготовке древесины.

В настоящее время при переработке древесной зелени сосны используют только вещества, извлекаемые углеводородным экстрагентом. Это составляет 10-15% от массы экстрактивных веществ древесной зелени сосны. Более полярные биологически активные вещества, остающиеся при существующей технологии в сырье, не используются. Только частичное использование сырья при существующих высоких расходах на заготовку, транспортировку и подготовку древесной зелени к экстракционной переработке, увеличивает себестоимость и влияет на конкурентоспособность получаемой продукции.

Экстрактивные вещества, извлекаемые из древесной зелени сосны углеводородными экстрагентами, и получаемые продукты изучены подробно. Существующие данные по составу "полярных" соединений разрознены и недостаточны. Это обстоятельство оказывает влияние на разработку технологии более полного использования экстрактивных веществ. Ранние исследования показали, что более полярный экстракт, в том числе и фенольные компоненты, является ценнейшей кладовой уникальных природных соединений, которые обладают бактерицидным, фунгицидным или вирулицидным эффектом и антирадикальными и антиоксидантными свойствами [56, 151], и лежат в основе лекарственных средств.

Фенольные соединения относятся к наименее изученным классам экстрактивных веществ хвойных растений, не находили широкого промышленного применения и изучались фрагментарно для решения конкретных исследовательских задач. Поэтому представляется актуальным получение не только качественной, но и количественной характеристики состава фенольных соединений сосны.

Для более полного использования биологически активных веществ древесной зелени необходимо знать их химический состав. Исследование химического состава древесной зелени сосны обыкновенной позволяет не только установить хемотаксономическое разнообразие сосны обыкновенной, а также строение и пути биосинтеза отдельных соединений, но и создать научные основы для разработки технологий высокорентабельного использования растительного сырья и получения новых биологических активных продуктов.

Целью работы является изучение химического состава экстрактивных веществ, извлекаемых диэтиловым эфиром из хвои и обесхвоенных побегов сосны обыкновенной (Pinus silvestris L.), после предварительной экстракции углеводородным экстрагентом. Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

• разработать схемы выделения соединений экстрактивных веществ из разных частей древесной зелени сосны обыкновенной;

• выделить и установить строение индивидуальных соединений экстракта;

• определить качественный и количественный составы соединений экстракта из разных частей древесной зелени;

В первой части диссертации представлены литературные данные по методам экстрагирования, выделения и идентификации фенольных соединений, методам установления строения фенольных соединений, химического состава и распространению фенольных соединений и терпеноидов в различных частях сосны обыкновенной {Pinus silvestris L.). Приведены некоторые данные о биосинтезе фенольных соединений в растениях, а также некоторые данные по выполняемым ими функциям в растении и биологической активности фенольных и других природных соединений.

Во второй части диссертации приведены методы анализа, которые применяли в экспериментальной работе. Путем предварительного анализа экстракта методом ТСХ и на основании литературных данных была разработана схема разделения эфирного экстракта на индивидуальные компоненты. Приведены основные характеристики приборов, используемых для извлечения и идентификации, как индивидуальных соединений, так и отдельных фракций, и условия проведения анализов. Также описаны хроматографические методы выделения соединений и химические методы получения их производных.

В главе "Обсуждение результатов экспериментальной работы" приведены результаты исследования качественного состава и количественного содержания соединений, извлекаемых диэтиловым эфиром из хвои и обесхвоенных побегов сосны обыкновенной. Определено различие в составах экстрактов из хвои и побегов. На этом основании предложены возможные направления биосинтеза фенольных соединений в хвое и обесхвоенных побегах сосны обыкновенной.

В результате проведенных исследований определено, что состав экстракта хвои и побегов включает триацилгаицерины, высшие жирные спирты и кислоты, терпеноиды (монотерпеноиды, сесквитерпеноиды, дитерпеноиды и стерины), пигменты и ароматические соединения (фенольные соединения и другие). Состав фенольных соединений хвои и побегов включает алкилированные фенолы, фенолокислоты, спирты, альдегиды, кетоны, стильбены и лигнаны.

При исследовании фенольных соединений установлены качественный и количественный составы основных фенольных компонентов, растворимых в диэтиловом эфире. Состав фенольных соединений хвои и побегов несколько различается. Хвоя, в отличие от побегов, содержит коричную кислоту и продукты ее а- и Р- окисления, п-кумаровую кислоту, п-гидроксифенилэтанол и гваяцилэтанол. В составе экстрактивных веществ побегов идентифицированы хавикол, эвгенол, изоэвгенол, конифериловый альдегид, монометиловый эфир пиносильвина и диметоксирезвератрол, которые не определены в хвое. П-кумаровая кислота характерна для хвои сосны обыкновенной, а монометиловый эфир пиносильвина и диметоксирезвератрол характерны для побегов. Однако есть и сходство в составе соединений, изучаемых частей древесной зелени. Обращает внимание, что доминирующими компонентами экстракта как хвои, так и побегов являются 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он, 4-(4'-гидроксифенил)-бутан-2-ол, феруловая кислота, дигидроконифериловый спирт и пинорезинол.

Установлено строение соединения, неизвестного ранее в природе — диметоксирезвератрола и впервые выделены из сосны обыкновенной С6-С4 фенольные соединения~4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он и 4-(4'-гидроксифенил) бутан-2-ол, 3-гидрокси-1-(4'-гидрокси-3'-метоксифенил)пропан-1 -он, коричная кислота, бензиновый спирт, фенилуксусная кислота, дигидроконифериловый и дигидрокумаровый спирты. Впервые из экстрактов хвои и побегов сосны обыкновенной выделен (З-ситостерин-З-О-Р-О-глюкопиранозид.

На основании состава фенольных соединений, растворимых в диэтиловом эфире из хвои и побегов сосны обыкновенной, можно предположить, что в хвое сосны обыкновенной основным направлением в образовании фенольных соединений, вероятно, является шикиматный путь. В побегах найдены соединения, образование которых протекает по шикиматному и комбинированному-шикиматно-ацетатному пути.

1.ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Сосна (Pinus) является ценнейшим образователем хвойных лесов России и других стран северного полушария. По распространенности в России сосна занимает второе место, уступая только лиственнице [1]. Сосна является основным сырьем для деревообрабатывающей, целлюлозно-бумажной, лесохимической, а некоторые компоненты экстрактивных веществ для пищевой, медицинской и других отраслей промышленности [2]. Род сосны включает около 100 видов. В России произрастает 13 видов сосны, однако самым распространенным видом является сосна обыкновенная {Pinus silvestris L.) [3].

В хвое и ветвях сосны обыкновенной {Pinus silvestris L.) более велика, чем в стволе, доля паренхимных клеток, что и приводит к высокому содержанию биологически активных веществ, которые полезны человеку и животным. Одни регулируют жизненные процессы в организмах (витамины, ферменты, микроэлементы), другие защищают их от патогенного микромира (вещества обладающие бактерицидной, фунгицидной и вирулицидной активностью). К последним относят фенольные соединения и терпеноиды. Они принадлежат к так называемым "веществам вторичного метаболизма", которые обладают широким спектром биологической активности как в организме животных и человека, так и в самих растениях.

По изучению состава соединений в экстрактивных веществах древесных растений и, в частности, кроны сосны обыкновенной, имеется огромное количество литературных источников. Перечислить их всех не представляется возможным. Но среди приведенных в литературе исследований по химии экстрактивных веществ можно выделить несколько наиболее важных аспектов, которые и определяют достоверность полученных результатов, их важность для понимания жизни изучаемого вида растений и практической значимости. К этим важным аспектам исследований можно отнести следующие: методологию в отборе образцов, процессов выделения экстрактивных веществ и разделения их на группы и классы соединений, выделения индивидуальных соединений и определения их строения; изучение биологической активности соединений и их

ВЫВОДЫ

На основании результатов проведенных исследований можно сделать следующие выводы:

1 .Разработана схема анализа эфирного экстракта частей древесной зелени сосны обыкновенной {Pinus silvestris L.). Хвоя и побеги отличаются по содержанию экстрактивных веществ, извлекаемых различающимися по полярности экстрагентами. Содержание более полярных соединений, чем извлекаемых бензином, в хвое и побегах составляет 10,3% и 7,6%.

2.Изучен состав соединений, растворимых в диэтиловом эфире после предварительной экстракции углеводородным экстрагентом хвои и побегов сосны. Определено, что состав эфирного экстракта хвои и побегов включает пигменты, триацилглицерины, высшие жирные спирты и кислоты, терпеноиды (монотерпеноиды, сесквитерпеноиды, дитерпеноиды и стерины) и ароматические соединения (фенольные соединения и др.).

3.Изучен состав основных фенольных соединений. Определено, что состав экстрактивных веществ хвои и побегов включает алкилированные фенолы, фенолокислоты, спирты, альдегиды, кетоны, стильбены и лигнаны.

4. Хвоя, в отличие от побегов содержит коричную кислоту и продукты ее а- и Р" окисления, п-кумаровую кислоту, п-гидроксифенилэтанол и гваяцилэтанол. В побегах, в отличие от хвои преимущественно входят хавикол, эвгенол, изоэвгенол, конифериловый альдегид, монометиловый эфир пиносильвина и диметоксирезвератрол. Доминирующими компонентами экстракта хвои и побегов являются 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он, 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол, феруловая кислота, дигидроконифериловый спирт и секоизоларицирезинол.

5.Установлено строение диметоксирезвератрола и впервые идентифицированы в частях кроны сосны обыкновенной — 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-он и 4-(4'-гидроксифенил)бутан-2-ол, спиртокетон гваяцильного типа, коричная кислота, бензиловый спирт, фенилуксусная кислота, дигидроконифериловый и дигидрокумаровый спирты. Впервые из экстрактов хвои и побегов сосны обыкновенной выделен Р-ситостерин-З-О-Р-О-глюкопиранозид. б.На основании выявленного состава ароматических соединений из хвои и побегов сосны обыкновенной, можно предположить, что в хвое основным направлением их образования является шикиматный путь, а в побегах найдены соединения, образование которых протекает по шикиматному и комбинированному-шикиматно-ацетатному пути.

1. Лесное хозяйство России. -М.: Лесная промышленность, -1983.-184с.

2. Побединский А.В. Сосна. -М.: Лесная промышленность, -1979.-125с.

3. Булыгин Н.Е. Дендрология. -М.: Высшая школа, -1991.-352с.

4. Блажей А., Шутый Л. Фенольные соединения растительного происхождения. -М: Мир, -1977. -260с.

5. Theander О. and Lundgren L.N. Monoaryl natural products. In Natural Products of Woody Plants I // ed. by J.W. Rowe 1989.-chap. 7.1.-Springer- Verlag.-Berlin.-Germany — P. 335.

6. Павлуцкая И.С., Рощин В.И., Соловьев B.A. Групповой состав хлорофи- лло-каротиновой пасты и провитаминного концентрата из хвойной древесной зелени // Химия древесины. -1984. №3. - С. 102-107.

7. Тюкавкина Н.А., Луцкий В.И., Бородина Н.М., Воронов В.К. Новый фенол из Pinus silvestris. II Химия природных соединений. 1970. -N2. -С.204-207

8. Громова А.С., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А. Фенолокислоты луба Abies nephrolepis, Pinus sibirica и P. silvestris. II Химия природных соединений. — 1977. -N2. -С.277

9. Леонтъева В.Г., Громова А.С., Луцкий В.И., Модонова Л.Д., Тюкавкина Н.А. Алкилферуляты из коры древесины растений семейства Pinaceae. // Химия природных соединений. 1974. -N2. -С.240-241

10. Ю.Медведева С.А., Иванова С.З., Тюкавкина Н.А., Запесочная Г.Г. Сильпин— новый с-метилированный флавоноид из Pinus silvestris. II Химия природных соединений. 1977. -N5. -С.650-653

11. Рощин В.И., Баранова Р.А., Соловьев В.А. Терпеноиды хвои Picea abies II Химия природ, соединений. -1986. -№ 2. -С. 168-176.

12. Н.Иванова С.З., Запесочная Г.Г., Тюкавкина Н.А., Медведева С.А., О-ацилированные флавоноидные гликозиды хвои Pinus silvestris. II Химия природных соединений.- 1978. -N3. -С.399-400

13. Westfelt L. High-boiling Neutral Constituents from the Wood of Pinus silvestris L. // Acta Chem. Scand.-1966.-V.20, N10.-P. 2829-2840.

14. Westfelt L. // Ibid.-P. 2841-2851

15. Рощин В.И., Колодынская JI.А., Ралдугин В.А., Пентегова В.А. Производные абиетиновой и дегидроабиетиновой кислот из обесхвоенных побегов Pinus silvestris II Химия природ. Соединений.— 1985.— № 3.— С.345—351

16. Морозков В.К., Шмидт Э.Н., Пентегова В.А. Нейтральная часть живицы Pinus silvestris L. Сообщение III нордитерпеновые соединения // Изв. СО АН СССР.—1972.—№2: Сер. хим. наук.—Вып. 1.—С. 128—133.

17. Roschin V, Pavlutskaja I, Vasiljiev S. Der isoabienolgehalt in kiefernadeln und verfahren fur verwertung von isoabienolkonzentrats // Ylll International symposium, Fundamental research of wood. -8-12 October, Warszawa, -1990. P. 124-126.

18. Bergamini E., Bizzari R. Ageinig and oxidative stress : A role for dolichol in the antioxiclaut machinery of cell membranes // J. of Alzheimers Disease . -2004. -№ 6. -P.129-135.

19. Азаров В.И., Буров A.B., Оболенская A.B. Химия древесины и синтетических полимеров, -учебник для вузов. СПБЛТА, -1999. -628с.

20. Бардышев И.И., Дегтяренко А.С. Состав терпенов живицы сосны обыкновенной // Изв. АН БССР. Сер. хим. наук. —1978.— № 3.— С. 54—57.

21. Верещагин А.Г. Биохимия триглицеридов. -М.: изд-во "Наука", -1972. -306с.

22. Иванова С.З. Фенольные соединения некоторых видов семейства Pinaceae: Автореф.дисс.—канд.хим.наук.—1978-24с.-Иркутск

23. Луцкий В.И., Громова А.С., Тюкавкина Н.А., Фенольные компоненты коры

24. Pinus sibirica и Pinus silvestris. II Химия природ, соединений. -1970. -№ З.-С. 367

25. Тюкавкина Н.А., Громова А.С., Луцкий В.И., Чубарова И.С., Фенолокислоты коры Pinus silvestris, Pinus sibirica и Pinus abies nephrolepis II Химия природ, соединений.— 1974.—№ 1.—С. 78-79

26. Шостаковский С.Ф., Тюкавкина Н.А., Луцкий В.И., Бородина Н.М. Оксистильбены Pinus sibirica и Pinus silvestris // Химия природ, соединений.— 1969.—№ 1.—С. 48-49

27. Манская С.М. и Кодина Л.А. Хинная и шикимовая кислоты в растениях // Докл. Акад. Наук СССР.— 1958 —№ 4.— С. 733-735.

28. Корбукова И.В. Особенности химического состава корки и луба Pinus silvestris L. : Дис.конд. хим. наук.-Л.—1995.-142с.

29. Громова А.С. Фенольные соединения коры некоторых видов ели, пихты и сосны: Автореферат дисс . канд. хим. наук. -Новосибирск,—1975.-27с.

30. Громова А.С., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А. Фенолокислоты и их производные из коры некоторых видов пихты, ели и сосны // Химия древесины. —1978. -№4. -С. 99-102.

31. K.Hannus, G.Pensar Silvichemicals in Technical Foliage. 1.Water steam gistilled oil from Pine material. // Paperi ja Puu.-N7.Vol.55, -1973, P.509-517.

32. Norin T, Winell B. Extractives from the bark of common spruce // Acta Chem. Scand. —1972. -Vol. 26. -P.2289-2296

33. Lungren L.N., Popolf Thomas, Olof Theander. Dilignol glucosides from needles of Picea abies II Phytochemistry. —1981.Vol.20. -P. 1967-1969.

34. Фрагина А.И. Содержание рутина в хвое сосны и ели // В кн. Использование биологически активных веществ дерева. Рига «Знание» — 1973. —С.28-31.

35. СССР серия биологические науки. -1986. -№1. -С.83-87

36. Фуксман И.Л. Биохимические реакции Pinus silvestris L. на действие стрессовых факторов. // Растительные ресурсы. -2002. -№2. -С. 126-133

37. Harborne J.B. Introduction to ecological biochemistry. London. -1989. -356p.

38. Громова A.C., Луцкий В.И., Ганенко T.B., Тюкавкина Н.А. Флавоноиды из коры некоторых видов пихты, ели и сосны // Химия древесины. -1978. -№4. -С. 103-105.43 .Н. Erdtman. Bot. Mag., Tokio, —1966. Vol. 79. -P.499

39. Громова A.C., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А. Стильбены из коры некоторых видов семейства Pinaceae. II Химия древесины. — 1979. -№3. -С. 103-109.

40. Кретович В.Л. Биохимия растений. -М.: «Высшая школа», 1986.—503с.

41. Иванова С.З., Занесенная Г.Г., Шейченко В.И., Тюкавкина Н.А., Медведева С.А. О строении ди-п-кумароил-изокверцитрина из хвои Pinus silvestris II Химия природ, соединений.— 1980.— № 2.— С.254-255

42. Лебедева О.И., Тихомирова Г.В., Репях С.М. Состав смолистых веществ хвои И. Кислоты из смолистых веществ хвои Pinus silvestris II Химия природ, соединений— 1981.—№ 6.—С.791—792

43. Бардышев И.И., Дегтяренко А.С., Пехк Т.И. 8,13-Эпоксилабд-14-ен-19-овая кислота — компонент хвои Pinus silvestris II Химия природ, соединений— 1982.—№ 4.— С.480—482

44. Рощин В.И., Колодынская JI.A., Ралдугин В.А., Пентегова В.А. Зр-Окси-транс-биформен, его ацетат и другие дитерпеновые спирты из побегов Pinus silvestris II Химия природ, соединений.— 1985.— № 1.— С. 122—123

45. Рощин В. И., Колодынская Л.А., Ралдугин В.А., Пентегова В.А. Новые лабдановые кислоты из хвои Pinus silvestris И Химия природ, соединений.— 1984.—№ 1.— С. 114—115

46. Пенсар Г., Липонкоски Л., Ханнус К. Химический состав экстрактивных веществ древесной зелени ели и сосны // Комплексное использование отходов лесозаготовок. Хельсинки. -1972.-С.69-85.

47. Сотникова О.М., Литвиненко В.И. Фенольные соединения коры сосны // Химия природ, соединений. -1968.- № 1.-С.50

48. Артемкина Н.А. Низкомолекулярные фенольные соединения древесной зелени ели европейской Picea abies (L.) Karst. Дисс.канд. хим. наук. СПб, -2001.-177с.

49. Рощин В.И., Нагибина Н.Ю., Кури Л. Содержание основных соединений в хвое Pinus sylvestris из разных мест произрастания. // Химия природ, соединений. -1990. -N2 -С.276-277

50. Колодынская Л.А., Разина Н.Ю., Рощин В.И., Соловьев В.А. О различии в групповом составе экстрактивных веществ хвои и побегов сосны обыкновенной // Химия древесины. -1984. -№ 5. -С.74-78.

51. Иванов М.А., Коссович Н.Л., Малевская С.С. и др. Смолистые вещества древесных растений. -М.: Лесная промышленность, -1968, 349с.

52. Haslam E. The shikimate pathway. New York—London, John Wiley and Sons, 1974.316 р.

53. Кизель A.P. О нахождении хинной кислоты в молодых побегах ели.—Ж. экспер. биол. и мед., -1928, -т. 10, -№ 27, -С. 605.

54. Манская С.М., Кодина J1.A. Хинная и шикимовая кислоты в растениях. — Докл. АН СССР, -1958, -т. 123, -№ 4. -С. 733.

55. Осипов В.И. Гидроароматические кислоты в жизнедеятельности хвойных. -Новосибирск: Наука, -1979. -111с.64.0сипов В.И. Биосинтез фенольных соединений у хвойных // Экстрактивные вещества древесных растений. Новосибирск, -1986. -С.133-134.

56. Тюкавкина Н.А., Луцкий В.И., Бородина Н.М., Громова А.С. Фенольные экстрактивные вещества рода Pinus II Химия древесины. -1973. -№ 1.-С.103-109

57. Васильев С.Н., Рощин В.И., Ягодин В.И. Экстрактивные вещества древесной зелени Pinus sylvestris L. II Растительные ресурсы. -1995. -№2. -С.79-119

58. Иванова С.З., Медведева С.А., Тюкавкина Н.А., Громова А.С. Ацетофеноны хвои некоторых видов семейства Pinaceae // Химия древесины. -1978. -№ 1. -С. 103—108.

59. Иванова С.З., Запесочная Г.Г., Шейченко В.И., Тюкавкина Н.А., Медведева С.А. О строении ди-п-кумароил-изокверцетина из хвои Pinus sylvestris L. // Химия природ, соединений. -1980. -№ 2. -С.252.

60. Norin В., Theander О. Dehidrophinifolic acid, a diterpene acid from the needles of Pinus sylvestris //Acta Chem. Scand. -1972. -Bd 26, -№ 26. -P.2297-2304.

61. Norin В., Winnel B. Extractives from the bark of common spruse Picea abies, Pinus sylvestris II Acta Chem. Scand. -1972. Bd 25, -№ 2. -P.607-610.

62. Norin В., Winnel B. Extractives from the scots pine, Pinus sylvestris // Acta Chem. Scand. -1972. Bd 26, -N6. -P.1452-1460

63. Lundgren L.N., Theander O. Zis-and transdehidroquercetin glucosides in flavonoids from needles of Pinus sylvestris (studies on low-molecular phenolic constituents in conifer needles): Uppsala,-1987.

64. Шулина JI.С., Полтавченко Ю.А. Химическое исследование рода Pinus // Растительные ресурсы. -1973. -Т.9, вып. 1. -С. 132-145.

65. Тюкавкина Н.А., Медведева С. А., Иванова С.З., Луцкий В.Т. Лигнановые соединения некоторых видов семейства Pinaceae // Химия древесины. -1977. № 6. -С. 44-46.

66. Theander О. The constituens of conifer needles III. Isolation of P-D-glucosides of guaiacyl glycerol from Pinus sylvestris L. //Acta Chem. Scand. -1965. -Bd 19. -P. 1792-1793.

67. Popoff Т., Theander O. The constituens of conifer needles VI. Phenolic glucosides from Pinus sylvestris// Acta Chem. Scand. -1977. -Bd 31. -P.329-337.

68. F.W. Wehrly, T. Nishiga. The use of Calon 13 nuclear magnetie resonance spectroscopy. - Pergamon press, 1985, 345p.

69. Рощин В.И., Колодынская Л.А., Разина Н.Ю., Соловьев B.A. Трициклические дитерпеновые кислоты из обесхвоенных побегов сосны обыкновенной // Химия древесины. -1984. -№ 2. -С. 106-108.

70. Моднова Л.Д. Лигнановые соединения древесины ели сибирской (Picea olovata ledf.). Дис.канд. хим. наук. - Новосибирск -1972, - 187с.

71. L. Landgren. Studies on low-molecular phenolic constituents in conifer needles. -Sveriges lantfruksuniversitet. Uppsala, 1987, 68s.

72. Lennart N. Lundgren, Thomas Popoff and Olof Theander Arylglycerol Glucosides from Pinus sylvestris L. //Acta Chemica Scandinavica. -1982. -Bd 36. -P.695-699.

73. Hefeng Pan and Lennart N. Lundgren Phenolics from inner bark of Pinus sylvestris L. //Phytochemistry. -1996. -Bd 42. -No.4 -P.l 185-1189.

74. Andersson R., Lundgren L.N. Monoaryl and cyclohexenone glycosides from needles of Pinus sylvestris// Phytochemistry. -1987. -Vol. 27, -№ 5. -P.806-815.

75. Ягодин В.И. Основы химии и технологии переработки древесной зелени. -Л.: Ленингр. Ун-та, -1981, 224с.85.3апрометов М.Н. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях. М.: Наука, -1993, -272с.

76. Н. Smith In Phytochrome. // eds. К. Mitrakos and W. Shropshire Academic Press. New York.-1972.-P. 433.

77. Ягодин В.И., Выродов B.A. Технология древесной зелени. Учеб. Пособие для студ.-СПБ, 1996.- 92 с.

78. Harborne J.B. The Flavonoids. London -1975. -1200p.

79. Бандюкова B.A. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозидов // химия природных соединений. -1983. -№ 3. -С.263-273.

80. Луцкий В.И. и Тюкавкина Н.А. Использование методов ГЖХ при анализе экстрактивных фенольных соединений хвойных растений. // Химия древесины. -1979. -№4. -С.3-11.

81. Fonseca S.F., Neilsen L. and Ruveda E.A. Lignans of Araucaria angustifolia and13 • • •

82. С NMR analysis of some of phenyl tetralin lignans. // Phytochemistry. -1979. -Vol. 18. -P.1703-1708.

83. Aiba C.J., Filho Braz R. and Gottilieb O.R. Porosin: a neolignan from Ocotea poros. // Phytochemistry. -1973. -Vol.12 -P.413

84. Gessman T.A. The chemistry of flavonoid compounds. -N.Y -1962, -666p.

85. Marbry T.J., Markham K.R., Thomas M.B. The Systematic Identification of Flavonoids. New York. 1970. - 345p.

86. Ю2.Геккелер К., Экштайн X. Аналитические и препаратные лабораторные методы. -М.: Химия, 1994. - 409с.

87. Черноусое Ю.И., Иванов Н.А., Пиялкин В.Н. Органические вещества сточных вод сульфатно-целлюлозного производства. III. Фенолы. // Химия древесины. -1975, -№ 2, -С. 105—111.

88. Леонтьева В.Г., Модонова Л-G., Тюкавкина Н.А., Пунтусова Е.Г. Фенолокислоты и фенолоальдегиды древесины некоторых видов Abies и Picea. //Химия древесины. -1978, -№ 1, -С.100—102.

89. Левина Л.М., Левин Э.Д. Состав кислот, извлекаемых из коры лиственницы сибирской. // Химия древесины. -1975. -№ 1, -С.88—92.

90. Медведева С.А., Иванова С.З., Тюкавкина Н.А. Фенолокислоты и их гликозиды хвои некоторых видов Pinaceae. II Химия древесины. -1977. -№ 3, -С. 93—95.

91. Громова А.С., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А. Стильбены ритидома Pinus sibirica R. Мауг и Picea koraiensis Nakai. // Химия природ, соединений. -1977. -№ 2, -С.275—276.

92. Луцкий В.И., Леонтьева В.Г., Моденова Л.Д., Тюкавкина Н.А. Применение

93. ГЖХ в области гваялигнанов. // Химия древесины. -1978. -№ 2. -С.87—90. Ш.Лаптева К.И., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А. Некоторые флаваноны и флаванонолы ядровой древесины Larix dahurica. И Химия природ, соединений. -1974. -№ 1.-С.97—98.

94. Иванова С.З., Медведева С.А., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А., Зеленикина Н. Д. Флавоноиды хвои Picea ajanensis. II Химия природ, соединений. -1975. -№ 6. -С.802—804.

95. ПЗ.Тюкавкина Н.А., Горохова В.Г., Погодаева Н.Н., Бабкин В.А. Жидкостная хроматография растительных фенольных соединений. 1. Обращенно-фазовая хроматография моно- и дизамещенных флавонов // Химия древесины. 1979. — №2.-С. 100-104.

96. М.Горохова В.Г., Тюкавкина Н.А., Бабкин В.А., Колесник Ю.А. Жидкостная хроматография растительных фенольных соединений. 3. Обращенно-фазовая хроматография фенолокислот // Химия древесины. 1979. - №4. - С.76-80.

97. Современное состояние жидкостной хроматографии. Под ред. Дж. Киркленда. Пер. с англ. М., -1974. -325с.

98. Engelhardt Н. Hochdruck-Flussigkeits-Chromatographie. Berlin- Heidelberg -New York,-1975.-213S.

99. Wulf L.W., Nagel C.W. Analysis of phenolic acids and flavonoids by high-pressure liquid chromatography. — J. Chromatogr.-1976, vol.l 16, -№2. -P.271-279.

100. Court W.A. High-performance reversed-phase liquid chromatography of naturally occuring phenolic compounds. -J. Chromatogr. -1977, vol. 130, -№1.-P. 287-291.

101. Хмельницкий P.A., Бродский E.C. Хромато-масс-спектрометрия. -M.: Химия,-1984. -216с.

102. Дерендяев Б.Г., Контюг В.А., Лебедев К.С., Шарапова О.Н. Машинная информационно-поисковая система на базе каталога полных масс-спектров // Автометрия. 1979. - № 4, -С.3-13.

103. Markham K.R., Marbry T.J. In: The Flavonoids. Ultraviolet-visible and

104. Magnetic Resonance spectroscopi of Flavonoids // eds. Harborne J.B. et.al. New York London. - 1975.- P.45

105. Клышев JI.K., Бандюкова В.А., Алюкина Л.С. Флавоноиды растений. Алма-Ата.: Наука, -1978. 220с.

106. Markham K.R. Techniques of flavonoid identification. London. Acad. Press. -1982.-P. 113.

107. Казицина Л. А., Куплетская H.A. Применение УФ-, ИК-, ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии. -М.: Химия, — 1980 238с.

108. Вайсбергер А. Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами. -М.: Химия, -1967—Том. 1.-514с. 126.Эмсли Дж., Финей Дж., Сатклиф Л. Спектроскопия ЯМР высокого разрешения. -М.: Мир, -1969. -Том.2. 452с.

109. Batterham Т.J., Highet R.J. Nuclear magnetic resonance spektra of flavonoids // Aust. J. Chem. 1964. - Vol.17. -P.428-439.

110. Sato A., Rudloff E. The heartwood extractives of Pinus resinosa Ait. — Canad. J. Chem., -1964, vol. 42, -№3. P.635—640.

111. Hemingway R.W., Hillis W.E., Bruerton K.A gas-liquid chromatographic examination of stilbene derivatives. — J. Chromatogr.-1970, vol. 50, -№3. P.391-399

112. Grisebach Н. In: The Biochemistry of Plant Phenolics (ed. G.F. Van Sumere., P.J. Lea). Oxford Clarendon Press. 1985. - C.185-198.

113. Васильев C.H., Рощин В.И., Фелеке С. Экстрактивные вещества древесной зелени Picea abies (L.) Karst // Растительные ресурсы. -1996. Т.32, вып. 1-2. -С. 75-80.

114. Фуксман И.JI. Роль веществ вторичного метаболизма в индикации состояния древесных растений в условиях стресса // Растительные ресурсы. -2003. Т. 39, вып. 3. -С.153-161.

115. IV Всесоюзный симпозиум по фенольным соединениям // Химия природ, соединений. -1982. -№ 4. -С.540—541.

116. Гуськов А.В. Метаболизм ауксинов в растениях и его регуляция // Итоги науки и техники. Сер. Физиология растений. Т. 8. М.: ВИНИТИ, -1991. -151с.

117. Rhodes M.J.C. II The Biochemistry of Plant Phenolics. Oxford: Clarendon Press. -1985.-P. 99.

118. Siqueira J.O.,Muraleedharan G.N., Hammerschmidt R.et al. // Critical Rev. Plant Sci. -1991. Vol.10. -P.63.143 .Черняева Г.Н., Долгодворова С.Я., Бондаренко C.M. Экстрактивные вещества березы. Красноярск. - 1986. - 123с.

119. Yuch-Hbiung Kuo, Zond-Show Chen and Yun-Lian Lin Chemical components of the leaves of Duranta repens Linn // Chem.Pharm.Bull. -1996. -Vol.44 -P.429-436

120. Калабин Г.А., Кушнарев Н.А., Тюкавкина А.С., Луцкий В. И. Спектры ПМР природных стильбеновых соединений // Химия природ, соединений. -1976. -№ 1.-С.З-10.

121. Ryuichi Higuchi and Derrilla M. X. Donnelly Glycosides from Pinus contorta needles // Phytochemistiy. -1977. -Vol.16 -P.l587-1590

122. Браун Д. Спектроскопия в органических веществ. -М.: Мир -1992.

123. Фелеке Асфау Сисай Фенольные соединения древесной зелени ели европейской Picea abies (L.) Karst. Дисс.канд. хим. наук. СПб, -1997. -135с.

124. Akihiro hosokawa, Megumi Sumino, Tomonori Nakamura. A New Lignan from Balanophora abbreviata and Inhibition of Lipopolysaccharide (LPS)-induced Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) Expression // Chem. Pharm. Bull. -2004.-B52(10). -P.1265-1267.

125. Дьяченко Л.Г., Рощин В.И., Ковалев В.Е. Смолистые вещества древесины лиственницы (Larix Gmelini R.) и продуктов ее сульфатной варки // Химия древесины. -1983. -№ 3.-С.47-51.

126. Дьяченко Л.Г., Рощин В.И., Ковалев В.Е. Жалина В.А. Смолистые вещества древесины лиственницы (Larix Gmelini R.) и продуктов ее сульфатной варки // Химия древесины. -1983а. -№ 3. -С.52-55

127. Ibrahim R. and Barron D. In Methods in Plant Biochemistry. Plant Phenolic. Phenylpropanoids Vol. 1. / ed. J.B. Harborne Academic Press, -1989. P.75-112.

128. Гелес И.С., Коржицкая З.А. Биомасса дерева и ее использование. -Петрозаводск, -1992. -230с.

129. Шарков В.И., Куйбина Н.И., Соловьева Ю.П. Количественный химический анализ растительного сырья. -М.: Лесная промышленность, -1968. -60с.

130. Семенов А.А. Очерк химии природных соединений. -Новосибирск: Издательство "Наука", -2000, 665с.

131. Рощин В.И., Колодынская Л.А., Павлуцкая И.С., Разина Н.Ю., Лабдановые кислоты из обесхвоенных побегов сосны обыкновенной // Химия древесины. -1984. -№ 2. -С.112-114.

132. Рощин В.И. Изучение состава смолистых веществ сульфатных щелоков от варки некоторых сибирских пород древесины. Дис.канд. хим. наук. Л., -1981.

133. Пентегова В.А., Дубовенков Ж.В., Ралдугин В.А., Шмидт Э.Н. Терпеноиды хвойных растений. —Новосибирск: Наука, -1987, 96с.

134. Лукнер М. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных. -М.: Мир, -1980.-415с.

135. Беллами Л. Инфракрасные спектры сложных молекул. -М.: «иностранный литературы» -1963. -592с.