автореферат диссертации по технологии, машинам и оборудованию лесозаготовок, лесного хозяйства, деревопереработки и химической переработки биомассы дерева, 05.21.03, диссертация на тему:Сезонная динамика белков меристематических тканей почек хвойных

Введение.

1. Аналитический обзор.

2. Методы проведения экспериментов.

2.1 Методика отбора проб и подготовки образцов.

2.2 Определение содержания растворимых и нерастворимых компонентов клетки.

2.3 Методика оценки представительности проб.

2.4 Определение содержания белка.

2.5 Экстракция интегральных и периферических белков клеточных мембран.

2.6 Гель-хроматография белков.

2.7 Электрофоретическое исследование белков.

2.8 Методика выделения липидов из растительной ткани.

2.9 Дифференциальная сканирующая микрокалориметрия.

2.10 Эмульсионная методика изучения переохлаждения воды и водных растворов.

2.11 Определение содержания углеводов.

2.12 Определение содержания свободных аминокислот.

3. Результаты и их обсуждение.

3.1 Белки меристематических тканей почек.

3.2 Электрофоретическое исследование белков.

3.3 Физико-химические свойства белков.

Выводы.

Северным лесам принадлежит важная роль в сохранении и оздоровлении окружающей среды, а также в поддержании стабильного состояния биосферы, которое имеет большое значение и в связи с развитием промышленности, освоением природных ресурсов и новых территорий. Для сохранения лесов, увеличения их продуктивности, а также для распространения в регионы с более холодным климатом необходимы дальнейшие исследования процессов жизнедеятельности древесных растений, их зависимости от различных факторов внешней среды.

Низкие температуры являются одним из главных факторов, ограничивающих продуктивность и географическое распространение растений на планете. Известно, что на 64 % территории суши растения испытывают губительное воздействие отрицательных температур. В связи с этим, изучение биохимических, физиологических и физико-химических механизмов низкотемпературной адаптации живых тканей и органов хвойных древесных растений, как наиболее морозостойких является актуальным и необходимым для понимания механизмов сохранения жизнеспособности при низких температурах также и других видов древесных растений.

Вместе с тем, палеонтологические данные свидетельствуют о том, что современные виды древесных и кустарниковых растений, произрастающие в умеренных и холодных климатических зонах Европы, Азии и Америки, являются потомками тропических растений. В результате изменения климата, растения в процессе эволюции приобрели наследственно закрепленные мор-фофизиологические особенности и разную степень адаптации к новым условиям, позволяющим не только расти и развиваться в условиях значительного дефицита тепла, но и адаптироваться к низким отрицательным температурам и к образующемуся в их тканях льду.

Хвойные древесные растения, к которым относятся лиственница, ель, пихта, сосна обыкновенная и сосна сибирская (кедр), являются основными лесообразующими породами Сибири. В достаточно суровых климатических условиях их меристемы, аккумулируя органические вещества, способны создавать значительную биомассу. Однако в Сибири меристематические ткани большую часть года в условиях действия пониженных и низких зимних температур остаются неактивными. Уже к концу августа ростовые процессы завершаются: заканчивается дифференциация последних ксилемных производных, формирование меристематических тканей почек. Основным направлением метаболизма меристем в этот период становится обеспечение жизнеспособности при низких температурах и создание потенциала для вегетации в следующем году. Постепенно растения входят в состояние глубокого, а затем и вынужденного покоя. В зимний период меристемы почек хвойных, произрастающих в северных районах, выживают при снижении температуры вплоть до минус 70 °С. С точки зрения теории состояния организмов, живые клетки и ткани зимующих растений в осенне-зимний период находятся в состоянии гипобиоза - временного обратимого снижения интенсивности процессов жизнедеятельности. Состояние гипобиоза живых тканей зимующих древесных растений достигается в результате сложной биохимической адаптации, включающей блокирование процессов жизнедеятельности, формирование устойчивой структуры клеточных мембран, накопление в клетках веществ, обладающих криопротекторными свойствами, снижение в клетках содержания воды или перераспределение в сторону ее связанных форм и другие процессы. Таким образом, целью адаптации к низким температурам, в первую очередь, является такое изменение состояния воды в клетках, при котором обеспечивается минимизация опасных для клетки последствий ее внутри- и внеклеточной кристаллизации, в том числе, и связанного с этими процессами обезвоживания клеток и клеточных структур. При этом, клетки и ткани наиболее морозостойких растений в определенных условиях при достаточно низких температурах (- 196 °С и ниже) могут перейти в состояние анабиоза, т.е. в состояние с полной остановкой процессов жизнедеятельности. В состоянии анабиоза при сверхнизких температурах клетки и ткани становятся очень устойчивыми к экстремальным воздействиям и способны длительное время сохранять свои свойства. Этот аспект состояния низкотемпературной устойчивости имеет особое значение в связи с необходимостью длительного хранения зародышевой плазмы и культур тканей растений с целью консервации их генетических ресурсов.

Почки можно рассматривать как органы, специально формируемые растениями для выживания в зимних условиях их меристематических тканей, предназначенных обеспечить потенциал вегетации в следующем году. Важность изучения адаптации этих тканей к низким температурам, особенностей их криорезистентного состояния определяется тем, что меристемы почек, обладая большей чувствительностью к условиям перезимовки, в конечном итоге определяют выживание дерева в целом. В этом смысле механизмы сохранения жизнеспособности меристематических тканей являются ключевой проблемой в понимании низкотемпературной устойчивости и адаптации хвойных древесных растений северных лесов. Кроме того, меристематиче-ские ткани, при выделении которых из почек удается получать однородные по содержанию однотипных живых клеток образцы, являются перспективным и удобным объектом для изучения состояния и поведения воды в устойчивых и неустойчивых клетках при отрицательных температурах, роли белков, липидов и других соединений при формировании криорезистентного состояния. Однако, до настоящего времени метаболизм меристем в процессе формирования почек, их низкотемпературной адаптации, особенности криорезистентного состояния и выхода из него в весенний период остаются практически неизученными. Известно, что почки разных пород хвойных имеют различное строение в зависимости от того, какой механизм низкотемпературной устойчивости в них реализуется. Важной особенностью устойчивости почек лиственницы, пихты и ели является способность к глубокому переохлаждению внутриклеточной воды. В частности, установлено, что в переохлаждении меристем почек лиственницы большую роль играют водорастворимые цитоплазматические белки, накапливающиеся в клетках осенью и об6 ладающие криопротекторными свойствами. Аналогичными свойствами обладают и периферические белки мембран. Однако белки меристем почек других хвойных изучены лишь фрагментарно. Это не позволяет провести сравнительный анализ состава и свойств белков разных пород, выявить закономерности и особенности адаптации к зимним условиям, а также изменения, происходящие в тканях при потере криорезистентного состояния и переходе к вегетации.

В связи с этим на первом этапе исследования метаболизма меристем почек весьма интересным представляется изучение и сравнительный анализ сезонной динамики содержания и фракционного состава белков в почках разных пород хвойных, а также изучение некоторых физико-химических свойств белков, обеспечивающих защитные функции при низких температурах. Решение этих вопросов является основной целью данной работы.

1. Впервые проведены систематические исследования динамики содержания и некоторых свойств белков меристематических тканей почек ели, пихты, сосны и кедра в период подготовки к вынужденному покою, в состоянии вынужденного покоя и при переходе к вегетации.2. Установлены особенности сезонной динамики белка в меристематических тканях хвойных, имеющих различную морфологию почек. Установлено, что в период низкотемпературной адаптации в меристемах почек всех ис следуемых пород происходит увеличение содержания белка; в меристемах почек ели и пихты - в 3.5 раза, а в меристемах почек сосны и кедра - в 1.5 раза. При этом в меристемах почек ели и пихты в зимний период содер жание общего белка увеличивается за счет водорастворимого белка цито плазмы и белка комплекса клеточных мембран; в меристемах почек сосны и кедра - только за счет белка комплекса клеточных мембран.3. Показано, что в меристемах почек ели и пихты при низкотемпературной адаптации происходит значительное увеличение содержания водораство римых белков цитоплазмы, что связано с реализацией механизма глубоко го переохлаждения цитоплазмы при низких температурах. В отличие от ели и пихты содержание водорастворимых белков цитоплазмы в меристе мах почек сосны и кедра не возрастает, что обусловлено иным механиз мом их обезвоживания, не требующим существенного переохлаждения внутриклеточной воды.4. Установлены общие закономерности сезонной динамики фракционного состава интегральных и периферических белков ели, пихты, сосны и кед ра. Показано, что при низкотемпературной адаптации происходит значи тельное увеличение содержания интегрального белка в комплексе клеточ ных мембран всех исследуемых пород. В мембранах меристем почек ели и пихты его содержание зимой достигает 50 %, в меристемах почек сосны и кедра - 40 % от массы мембран.5. Характерной особенностью фракционного состава водорастворимых бел ков цитоплазмы меристем почек ели и пихты зимой является наличие фракций с молекулярными массами выше 100 кД, практически полностью исчезаюгцих весной с потерей низкотемпературной устойчивости. В мери стемах почек сосны и кедра в зимний период водорастворимые белки представлены, в основном фракциями с молекулярными массами ниже 100 кД. Изучены антифризные свойства водорастворимых белков цито плазмы меристем почек ели и пихты. Показано, что высокомолекулярные белки характеризуются более высокой антинуклеационной активностью, чем суммарный водорастворимый белок цитоплазмы и его низкомолеку лярные фракции, а также другие растворимые вещества цитоплазмы.6. Исследованы гидрофильные свойства периферического белка мембран на примере меристематических тканей почек ели. Установлено, что при обезвоживании клеток в условиях снижения температуры и льдообразова ния мембранные периферические белки связывают значительное количе ство незамерзающей воды и обеспечивают тем самым защиту мембран от дегидратации.7. Показано, что механизм стабилизации клеточных мембран меристемати ческих тканей почек хвойных, состоящий в формировании твердоупруго го белкового каркаса, стабилизирующего структуру мембран в условиях обезвоживания клеток и льдообразования является универсальным для основных хвойных лесообразующих пород Сибирского региона.

1. Прянишников Д.Н. Избранные сочинения. - М.: Изд-во АН СССР, 1951. - Т.1.-С. 196-261.

2. Крамер П.Д., Козловский Т.Т. Физиология древесных растений. М., 1983. -464 с.

3. Полевой В.В. Физиология растений: Учеб. для биол. спец. вузов. М.: Высш. школа, 1989. - 464 с.

4. Roy В. Stress proteins in plant // Bot. J. Scote. 1993. - V. 46, № 3. - C. 463 -475.

5. Косаковская И.В. Белки растений при стрессах II Физиология и биохимия культурных растений. 1988. - Т. 20, №2. - С. 107 - 117.

6. Косаковская И.В. Роль белково-ферментативной системы высших растений в процессе адаптации // Интродукция и акклиматизация растений 19891..-С. 69-73.

7. Стрессовые белки растений / Под ред. Р.К. Соболева. Новосибирск: Наука, 1989.- 143 с.

8. Beck Е., Luttge U. Streb bei Pflazen // Biol. Unserer Zeit. 1990. - V. 20, № 5. -P. 237-244.

9. Эколого-физиологические аспекты устойчивости, роста и развития растений /Под ред. С.Н. Дроздова, А.Ф. Титова. Петрозаводск, 1990 - 143 с.lO.Sakai A., Larcher W. Frost survival of plants: Responses and adaptation to freezing stress. Springer, 1987.-321p.

10. Курчий Б.А. Стрессовые белки как возможные антиоксиданты // Ред. ж. Физиология и биохимия культ, растений. - 1993. - № 214. - 6 с.

11. Edreva A. Stress in plant: Molecular aspects // Генетика и селекция. 1992. - Т. 25, №3,-Р. 261 -267.

12. Tuan-Hua D., Sachs М. Stress-induced proteins: Characterization and regulation of their synthesis // Biochem. plants. San Diego, 1989. - V. 15. - P. 347 - 348.

13. Родченко О.П. Рост и адаптации растений к низким температурам // Рост и устойчивость растений. Новосибирск, 1988. - С. 144 - 154.

14. Титов А.Ф., Шерудило Е.Г., Боева Н.П. Формирование устойчивости растений в условиях нарастающего температурного стресса II Адаптация, рост и развитие растений. Петрозаводск, 1994. - С. 46 - 55.

15. Войников В.К. Температурный стресс и митохондрии растений. Новосибирск: Наука, 1987. - 135 с.

16. Алехина Н.Д., Клюйкова А.И. Температура среды и адаптационные свойства ферментов ассимиляции азота у растений // Вестник МГУ. 1988. - Т. 16. -С. 3 - 15.

17. Трунова Т.И. Физиолого-биохимические основы адаптации растений к низкой температуре и поиск антистрессовых препаратов // Регуляция покоя и устойчивости растений к неблагоприятным факторам: Тез. докл. 1989. - С. 10.

18. Long S.P., Woodward F. Plants and temperature. Cambridge, 1988. - 415 p.

19. Браун Т.Н. Механизм белкового синтеза в связи с морозостойкостью растений // Холодостойкость растений. Пер с англ. под ред. Г.А. Самыгина. М.: Колос, 1983. - С. 124 - 129.

20. Siminovitch D. , Rheaume В., Pomeroy К., Lepage М. Phospholipid, protein and nucleic acid increases in protoplasm and membrane structures associated with development of extreme freezing resistance in black locust // Cryobiology. V. 5. -P. 202-225.

21. Ekramodoulah A., Taulor D., Hawkins B. Characterization of a fall protein of sugar pine and detection of its homologue associated with frost hardiness of western while pine needles // Can J. Forest res. 1995. - V. 25, № 7. - P. 1137 -1147.

22. Чикина П.Ф. Динамика различных форм азота в органах и тканях сосны //Физиолого-биохимические основы роста и адаптации сосны на Севере. -Л.: Наука, 1985.-С. 57 63.

23. Новицкая Ю.Е., Чикина П.Ф. Азотный обмен сосны на Севере. Д.: Наука, 1980.- 166 с.

24. Шуляковская Т. А., Ильино в а М.К., Кищенко И.Т. Динамика содержания азотистых веществ и липидов в хвое некоторых представителей рода Picea, интродуцированных в Карелию //Раст. ресурсы. 2000. - Вып.1 - С. 33 - 42.

25. Сергеев Л.И., Сергеева К.А. Структурно-метаболические механизмы адаптации древесных растений к неблагоприятным факторам внешней среды // Сезонные структурно-метаболические ритмы и адаптация древесных растений. Уфа: изд. БаФ АН СССР, 1977. - С. 11 - 36.

26. Tyttio S., Eria-Maija S. Seasonal fluctuations in free polyamines in Scots pine needles // Plant Physiol. 1994. - У. 144, № 6. - P. 720 - 725.

27. Dane R., Toivonen P., Mclinnis S. Discrete proteins associated with overwintering of interior spruce and Douglass-fir seedlings // Can J. Bot. 1991. - V. 69, № 3. -P. 437 -441.

28. Карасев Г.С., Красавцев О.А., Трунова Т.И. Роль белков в адаптации растений: Тез. докл. СПб, 1993. - С. 601.

29. Kang Seong-Mo, Titus J.S. Specific proteins may determine maximum cold resistance in apple shoots // Hort. Sci. 1987. - V. 62, № 3. - P. 281 - 285.

30. Levitt J. Responses of plants to stresses. Vol. 1. Chilling, freezing and high temperature stresses. New York: Acad. Press., 1980. - 497 p.

31. Климов С.В., Астахова Н.В., Трунова Т.И. Связь холодоустойчивости растений с фотосинтезом и ультраструктурой хлоропластов и клеток // Физиология растений. 1997. - Т. 44, № 6. - С. 879 - 886.

32. Войников А.В., Побежимова Т.П., Войников В.К. Характеристика белков низкотемпературного стресса растений // Физиология растений. 2000. - Т. 47, №4.-С. 624-630.

33. Петрова О.В. Адаптация к низкотемпературному стрессу и белковый комплекс озимой пшеницы // 2 Съезд Всесоюзного общества физиологов растений, Минск, 24-29 сент., 1990: Тез. докл., Ч. 2. М., 1992. - С. 161.

34. Карасев Г.С., Нарлева Г.И., Яценко И.А., Трунова Т.П. Биосинтез белка при адаптации озимых злаков в связи с их морозостойкостью // Влияние внешних факторов на устойчивость, рост и развитие растений. Петрозаводск, 1992-С. 32-51.

35. Перепадя Ю.Г., Калмыков В.П., Лопанцев С.В. Устойчивость сортов вишни к низким температурам // Научно-технич. бюллетень ВНИИ растениев. -1988.-№86.-С. 43 -46.

36. Сергеева К.А. Физиологические и биохимические основы зимостойкости древесных растений. М.: Наука, 1971. - 174 с.

37. Браун Г.Н. Механизм белкового синтеза в связи с морозостойкостью растений // Холодостойкость растений М., 1983. - С. 124 - 143.

38. Судачкова Н.Е., Семенова Г.П. Белки клеточных стенок ксилемы древесных растений и их функции в регуляции роста клеток // Лесоведение. 1988. -№1,- С. 26 - 32.

39. Галимова И.В. О белковом метаболизме в период покоя у различных по зимостойкости древесных растений // Симпозиум по физиологии глубокого покоя древесных растений. Уфа: Изд-во Башк. Фил. АН СССР, 1969. - С. 55 -59.

40. Хебер У. Биохимические и физиологические аспекты морозостойкости растений. М.: Наука, 1969. - С. 18 - 27.

41. Heber U., Volger Н., Overbeck V., Santarius К. Membrane damage and protection during freezing // Proteins at Low Temperatures. Washington, 1979. - P. 159 -189.

42. Красавцев О.А. Свойства плазмалеммы морозоустойчивых растительных клеток // Успехи современной биологии. 1988. - Т. 106, № 1. - С. 143 - 157.

43. Миронов П. В., Лоскутов С. Р. Образование льда в древесине лиственницы: влияние водорастворимых веществ // Химия древесины. 1987. - № 6. - С. 83 -88.

44. Миронов П.В., Лоскутов С.Р. Переохлаждение и обезвоживание хвойных зачатков в зимующих почках лиственницы сибирской // Физиология растений. 1985: - Т.32, вып. 4 - С. 695 - 701.

45. Beuker Е., Valtonen Е., Repo Т. Seasonal variation in the frost hardiness of Scots pine and Norway spruce old provenance experiments in Finland // Forest Ecology and Management. 1998. - Y. 107. - P. 87 - 98.

46. Relationships among cold hardiness, root, growth potential and bud dormancy in three conifers / E. Burr, W. Tinus, J. Wallner, M. King // Physiology. 1989. - V. 5.-P. 291 -306.

47. Меняйло Л. H. Гормональная регуляция ксилогенеза хвойных / Отв. ред. Н. Е. Судачкова; АН СССР, Сиб. отд-ние, Ин-т леса и древесины им. В. Н. Сукачева. Новосибирск, 1987. - 185 с.

48. Судачкова Н.Е., Семенова Г.П. Белки вегетативных органов сибирских видов хвойных как потенциальный кормовой ресурс // Растительные ресурсы. 1995.-Т. 31. - Вып. 4. - С. 20-25.

49. Parker J. Changes in sugars and nitrogenous compounds of tree barks // Natur-wiss. 1958. - № 6. - P. 139 -150.

50. Биохимическая характеристика хвойных пород Сибири в связи с ростом и морфогенезом: Сборник трудов. 1974. - 144 с.

51. Галимова В.И. Динамика белков в тканях сосны обыкновенной, лиственницы Сукачева и тополя бальзамического // Сезонные структурнометаболические ритмы и адаптация древесных растений. Уфа: изд. БаФ АН СССР, 1977. -С. 64 -75.

52. Галимова И.В. Содержание белков в годичном цикле различных по морозостойкости древесных растений // Тезисы докладов научной конференции, посвященной 50-летию Октября. Уфа, 1967. - С. 15-17.

53. Судачкова Н.Е. Метаболизм хвойных и формирование древесины. Новосибирск: Наука, 1977. - 230 с.

54. Perras Michel, Sarhan Fathey. Synthesis of freezing tolerance proteins in leaves, crown, and roots during cold acclimation of wheat // Plant Physiol. 1989 - У. 89, №2-P. 577 - 585.

55. Колесниченко A.B., Боровский Г.Б., Войников В.К. Изменения в содержании белка 310 кД при холодовом закаливании проростков озимой пшеницы // Физиология и биохимия культ, раст. 1997. - Т. 29, № 5. - С. 383 - 387.

56. Cold-induced alterations in plasma membrane proteins specifically related to the development of freezing tolerance in wheat plants // 15th Int. Bot. Congress Yo-kogama, 1993. - P. 481.

57. Shyam S., Peole R., Dhindsa R. Changes in protein patterns and translatable messenger RNA populations during cold acclimation on of alfalfa // Plant Physiol. -1987. V. 84, № 4. p. 1172 - 1176.

58. Майер П.С., Половинкин И.Г., Кравець B.C. Синтез загальных та митохондриальних билкив озимои пшеници при дии низьких температур та за умов гипоксии // Доп. Нац. АН Украини 1999. - № 8. - С. 152 - 156.

59. Guy С., Maskell D. Induction of freezing tolerance in spinach is associated with the synthesis of cold acclimation induced proteins // Plant Physiol. 1987. - V. 84, №3. - P. 872-878.

60. Antikainen M. Cold acclimation in winter rye: Identification and characterization of proteins involved in freezing tolerance // Turun yliopiston julk. 1996. - V. 87. -C. 1-53.

61. Antifreeze protein produced endogenously in winter rye leaves / G. Makilyn, A. Paul, Y. Daniel, H. Wai Ching, B. Moffatt // Plant Physiol. - 1992. - V. 100, № 2.-C. 593 -596.

62. Накопление белков иммунохимически родственных дегидринам в митохондриях растений при действии низкой температуры / Г.Б. Боровский, И.В. Ступникова, А.И. Антипина, В.К. Войников // Доклады РАН. 2000. - Т. 371, №2. -С. 251 -254.

63. Кравець B.C. Характеристика та функции билкив рослин, индукованих диею низьких температур // Физиология и биохимия культурных растений. 1999. -Т. 31,№5.-С. 323 -332.

64. Физиология сосны обыкновенной / Н.Е. Судачкова, Г.И. Гире, Г.С. Прокуш-кин и др. // Новосибирск: Наука, 1990. 248 с.

65. Репях С.М., Ххлызова Т.П., Тихомирова Г.В. О протеине хвои лиственницы сибирской // Лиственница: Межвузовский сборник. Красноярск: СТИ, 1977.-Т. 13.-С. 161-166.

66. Каргапольцев А.П., Репях С.М., Юшипицина Г.Г. Динамика фракционного и аминокислотного состава белков хвои лиственницы сибирской в зависимости от возраста // Химия древесины. 1985. - № 5. С. 93 - 95.

67. Алексеев В.Г., Беленкова Т.Д., Щербакова Т.М. Криобелки и адаптация растений Севера к низким температурам // Физиология растений, 1987. 34, № 6.-С. 1140-1148.

68. Dorothea R., Santarius К. Cold acclimation of ilex aquifolium under natural condition with special regard to the photosynthetic apparatus // Physiol. Plant. 1988. - V. 72.

69. Родионов B.C., ТиховаМ.А., Фуксман И.Л. Изменение ультраструктуры и концентрации фосфолипидов клеток летней хвои сосны при ее промораживании // Известия АН СССР. Сер. биол. 1989. - № 2. - С. 238 - 244.

70. Zoran R., Ash worth Е. Response of xylem ray parenchyma cells of red osier dogwood (Cornus sericea L.) to field freezing stress, and to freeze thaw cycle II Plant. Physiol. - 1996. - V. 149, № 6. - P. 735 - 745.

71. Characterization of WAP 27: The proteins which accumulated in the ER during winter of mulberry (Moras bombycis Koidz) cortical cells / U. Norifumi, T. Dai-suke, A. Kuita, F. Seizo // Plant and Cell Physiol. 1999. - V. 40. - P. 104.

72. Crossati C., Rizza F., Cattivelli J. Accumulation and characterization of the 75 kDa protein induced by low temperature in barley // Plant Sci. 1994. - V. 97, № l.-P. 39-46.

73. Sarhan Fathey, Perras Michel. Accumulation of wheat high molecular weight protein during cold hardening of wheat (Triticum aestivum L.) // Plant and Cell Physiol. 1987. - V. 28, №7. - P.l 173-1179.

74. Колесниченко A.B., Боровский Г.Б., Войников В.К. Изменения в содержании белка 310 кД при холодовом закаливании проростков озимой пшеницы // 1997. Т. 29, № 5. - С. 383 - 387.

75. Characterization of an 80 kD dehydrin-like protein in barley responsive to cold acclimation / L. Bravo, T. Close, L. Corsuera, C. Guy // Physiol. Plant. 1999. -V. 106, № 2.-C. 177 - 183.

76. Lasztity D., Racz I., Pardi E. Effect of long periods of low temperature exposure on protein synthesis activity in wheat seedlings // Plant Sci. 1999. - V. 149, № 1. - P. 59-62

77. Негру П.В., Медведева Т.Н. Электрофорешческие спектры легкорастворимых белков, пероксидазы и о-дифенолоксидазы в связи с зимостойкостьювинограда // Физиология и биохимия культурных растений. 1990. - Т. 22, №5.-С. 469-476.

78. Harms U., Sauter J. Storage proteins in the wood of Taxodiaceae and of Taxus // Plant Physiol. 1991. - Y. 138, № 4. - P. 497 - 499.

79. Эколого-фитоценотические особенности лесов Сибири: сборник трудов. -Красноярск, 1982. 110 с.

80. Белки осевых органов покоящихся и прорастающих семян конского каштана. Общая характеристика белков / Н.А. Гумилевская, М.И. Азарович, М.Е. Комарова, Н.В. Обручева // Физиология растений. 2001. - Т. 48, № 1. - С. 5 -18.

81. Jens R., Cravalfo Е., Toner М. Intracellular ice formation: Causes and consequences // Cryo-lett. 1993. - Y. 14, № 16.

82. Красавцев О.А., Разнополов O.H., Хвалин H.H. Отток воды из переохлажденных зачаточных бутонов // Физиология растений. 1983.-Т. 30, вып. 5 -С. 1025-1031.

83. Френке Ф. Вода, лед и растворы простых молекул Под ред. Р. Б. Дануорта. -М.: Наука, 1980. С. 14-32.

84. Замораживание и криопротекция: Учеб. пособие для биол. и мед. спец. 63 вузов / A.M. Белоус, Е.М. Гордиенко, А.Ф. Розанов М.: Высшая школа, 1987.- 80 с.

85. Климов С.В. Пути адаптации растений к низким температурам // Успехи современной биологии. 2001. - Т. 121, № 1. - С. 3 -22.

86. Hesler R. Physiologishe Wirkungen des Froster auf Planzen // Ber. Eidgenoss Anst. Forstl. Versuchsk. 1988. - № 307. - C. 45 - 48.

87. Pearce R. Extracellular ice and cell shape in frost-stressed cereal leaves: A low-temperature scanning-electron- microscopy study // Planta. 1988. - V. 175, № 3. C. 313-324.

88. Ristic Z., Ashworth E. Response of xylem ray parenchyma cells of red osier dogwood (Cornus sericea L.) to freezing stress. Microscopic evidence of protoplasm contraction // Plant Physiol. 1994. - V. 104, № 2. - P. 737 - 746.

89. Marja-Liisa S. Physiological changes in freezing stress resistance // Acta univ. oulien. 1992. - № 240. - P. 1 - 39.

90. Трунова Т. И. Физиолого-биохимические основы адаптации и морозостойкости растений // Второй съезд Всесоюзного общества физиологов растений: Тез. докл. -М., 1990.-С. 91.

91. Алексеев В. Г. Динамические аспекты адаптации растений к условиям Севера // 2 Съезд Всесоюзного общества физиологов растений, Минск, 1992. -1992 С. 10.

92. Хлебникова Н.А., Гире Г.И., Коловский Р.А. Физиологическая характеристика хвойных растений Сибири в зимний период // Труды института леса и древесины. Т. LX. - 1963. - С. 5 - 16.

93. Влияние экологических стрессов на состав метаболитов в сеянцах сосны обыкновенной / Н.Е. Судачкова, И.Л. Милютина, Г.П. Семенова, Н.Н. Кожевникова // Лесоведение. 1990. - № 4. - С. 49 -57.

94. Алексеев В.Г., Беленкова Т.Д., Щербакова Т.М. Криобелки и адаптация растений севера к низким температурам // Физиология растений. Т. 34, вып. 6.-С. 1140- 1148.

95. Edward A. The formation and distribution of ice within Forsythia flower // Plant Physiol. 1990. - V. 92, № 3. - P. 718 - 725.

96. Freezing tolerance and avoidance in high-elevation Hawaiian plants / C. Lipp, G. Goldstein, F. Meinzer, W. Niemczura // Plant, Cell and Environment. 1994. -V. 17, №9.-P. 1035- 1044.

97. Миронов П.В., Алаудинова E.B., Репях C.M. Низкотемпературная устойчивость живых тканей хвойных // Красноярск, 2001 221 с.

98. Weiai S., Liangwen P. Mechanism of supercooling in flower bud of Camellia oleifa // Sci. in China. 1995. - V. 38, №> 6. - P. 688 - 696.

99. Tyler N., Stushnoft C., Gusta L. Freezing of water in dormant vegetative apple buds in relation to cryopreservation // Plant Physiol. 1988. - V. 87, № 1. - P. 201 -205.

100. Prestren A., Proebsting E. Effects of temperature on the deep supercooling characteristics of dormant and deacclimaing sweet cherry flower buds // Arner. Soc. Hort. Sci. 1987. - V. 112, № 2. - P. 334 - 340.

101. Visualization of freezing behaviors in leaf and flower buds of full-moon maple by nuclear magnetic resonance microscopy /1. Masaya, W. Price, I. Hiroyuki, A. Yoji//Plant Physiol. 1997. - V. 115, №4.-P. 1515- 1524.

102. Vertucci C. The state of water in acclimating vegetative buds from Malus and Amelanchier and its relationship to winter hardiness // Physiol. Plant. 1992. - V. 86, №4. - P. 503 -511.

103. Miren A., Corcuera L. Cold acclimation in plants // Phytochemistry 1991. -V. 30, № 10. - C. 3177 - 3184.

104. Chapsky L., Rubinsky B. Kinetics of antifreeze protein induced ice growth inhibition // FEBS Lett. - 1997. - V. 412, № 1. - P. 241 - 244.

105. Боровский Г.Б., Войников В.К. Морозостойкость растения, дегидратация и стрессовые белки // 4 Съезд общества физиологов растений России, Москва, 4 9 октября, 1999: Тез. докл.-М., 1999. - Т. 1. - С. 325.

106. Кравец B.C. Развитие представлений об адаптации растений к низким температурам // Физиология и биохимия культурных растений. 1996. - Т. 28, №3,-С. 167 - 182.

107. Purification and characterization of a cryoprotective protein (cryoprotectin) from the leaves of cold acclimated cabbage / F.Sied, S. Werner, J. Schmit, H. Dirk //Plant. Physiol. - 1996. - V. 111, № 1. - P. 215 - 221.

108. Antifreeze proteins in winter rye are similar to pathogenesis related proteins /H. Wai Ching, M. Griffith, A. Mlynarz, K. Yan, D. Yang // Plant Physiol. - V. 109, №3,-P. 879-889.

109. Shaik М.М., Basha, Sunil К. Pancholy. Isolation and characterization of two cryoprotection from Florunner Peanut (Arachis hypogaea L.) Seed // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 1982. - P. 36-41.

110. Antifreeze protein produced endogenously in winter rye leaves/ Griffith Mak-ilyn, Ala Paul, S.C. Yang Daniel, Hon Wai Ching, A. Moffatt Barbara // Plant Physiol. - 1992. - V. 100, № 2 - C. 593-596.

111. Zamecnik J., Bieblova J. Antifreeze proteins detected in triticale genotypesiLwith different forms tolerance./Abstr. 9 Congr. Fed. Eur. Soc. Plant Physiol., Brno, 3-8 July,1994 // Biol. Plant.- 1994. 36, Suppl-P.325.

112. Белки четырех злаков, иммунохимически родственные стрессовому белку 310 кД / А.В. Колесниченко, Е.А. Остроумова, В.В. Зыкова, В.К. Войников // Физиология растений. 2000. - Т. 47, № 2. - С. 199 - 202.

113. Белок холодового шока 310 кД разобщает окислительное фосфорилиро-вание в растительных митохондриях / В.К. Войников, О.И. Грабельных, А.В. Колесниченко, Т.П. Побежимова // Физиология растений. 2001. - Т. 48, №1. С. 106-112.

114. Стрессовый разобщающий растительный белок БХШ 310 кД индуцирует термогенез в митохондриях пшеницы при гипотермии in vitro I В.К. Войников, О.И. Грабельных, Т.П. Побежимова, JI.M. Корзун и др. // Доклады АН -2001. Т. 377, № 4. - С. 565 - 567.

115. Guy С. Cold acclimation and freezing stress tolerance: role of protein metabolism // Annu. Rev. Plant Physiol, and Plant Mol. Biol. 1990. - V. 41. - P. 187 -223.

116. Edward J., Bryan D. Free radical and freezing injury to cell membranes of winter wheat // Physiolog. Plant. 1989. - V. 76, № 1. - P. 86 - 94.

117. Singh J., Laroche A. Freezing tolerance in plants: a biochemical overview // Biochem. and Cell Biol. 1988. - V. 66, №6. - P. 650 - 657.

118. Pukacki Pawel. Membrane properties of Norway spruce cells during long-term freezing stress // Arbor. Kor. 1995. - V. 40 - P. 125 - 133.

119. Quinn P. Effects of temperature on cell membranes // Plants and temperature: Symp. Cambridge, 1988. - P. 237 - 258.

120. Мануильский В.Д., Сидоренко T.B., Закордонец O.A. Модификация плазматических мембран при формировании устойчивости растений к низким температурам // Физиология и биохимия культурных растений. Т. 19, № 6,- 1987.-С. 574-580.

121. Климов С.В. Биоэнергетическая концепция устойчивости растений к низким температурам // Успехи современной биологии. Т. 117, вып. 2. - 1997. -С. 133 - 154.

122. Williams W.P. Cold-induced lipid phase transitions // Trans. Roy. Soc. London. D. 1990. - V. 326, № 1237. - P. 555 - 570.

123. Авхадиева Г.И., Хохлова Л.П., Карасев Г.С. Состав полипептидов озимой пшеницы при адаптации к низким температурам // Физиология растений. -1995.-Т. 42, №1,- С. 100-106.

124. Запасные липиды клеток меристемы почек в период выхода древесных растений из покоя // Цитология и генетика. 1991. - Т. 25, № 2. - С. 3 - 6.

125. Pukacki P. Effect of freezing stress on properties of membranes of Norway spruce primordia // Physiol. Plant. 1990. - V. 79, № 2. - P. 105.

126. Jaenicke R. Protein structure and function at low temperature // Phil. Trans. Roy. Soc. 1990. - V. 326, № 1237. - P. 535 - 553.

127. Metabolic responses of plant cells to stress / J. Tompson, K. Einspahr, S. Cho, T. Peeler // Biol, role plant lipids. 1989. - P. 497 - 504. .

128. Стаценко А.П. О криозащитной роли аминокислот в растениях // Физиология и биохимия культ, раст. 1992. -24, № 6. - С. 560 - 564.

129. Influencing of accumulation of under temperatures on physiological and biochemical properties of fleeing and kidneys of an apricot during rest / C. Deng-Wen, E. Wang, A. Gao, I. Li // Acta Bot. Boreal. 2000. - V. 20, № 2. - P. 212 -247.

130. Капанадзе E.E. Содержание свободных аминокислот в побегах криптомерии японской в связи с перезимовкой // Сообщения АН ГССР. 1989. - Т. 134, № 1.-С. 169- 172.

131. Kim Y., Glerum С. Seasonal free amino acid fluctuation in red pine and white spruce needles // Can. J. Forest res. 1995. - V. 25, № 5. - P. 697 - 703.

132. Рост и обеспеченность метаболитами лиственницы Гмелина на мерзлотных почвах центральной Сибири / И.Л. Милютина, Г.П. Семенова, В.В. Стасова, Н.Е. Судачкова, Н.Н. Кожевникова // Лесоведение. 1998. - № 5. - С. 18-25.

133. Khanizaden S., Buszard D., Zarakadas С. Seasonal variation of hydrophilic, hydrophobic, and chared amino acids in developing apple flower buds // Plant. Nutr. 1994. - V. 17, № 11.-P. 2025 -2030.

134. Агафонов H.C., Кутовой A.A., Шевченко B.E. Содержание свободных аминокислот у озимой пшеницы под влиянием условий закаливания и перезимовки // Методы и приемы повышения зимостойкости озимых зерновых культур. М.: Колос, 1975. - С. 335 - 338.

135. Агафонов Н.С., Кутовой А.А., Шумейко А.Ф. Влияние пролина на метаболические процессы, связанне с морозостойкостью озимой пшеницы.// Сб. науч. тр. НИИ сел. хоз-ва ЦЧП. 1975,- Т. 9, вып. 1. - С. 11-18.

136. Перетятко А.И., Седова Т.Н. Изменения в качественном составе и количественном содержании свободных аминокислот у сосны в онтогенезе // Лес. хоз-во и агролесомелиор. в Ниж. Поволжье. Саратов, 1986. - С. 55 - 64.

137. Пузакова А.И., Ковшова Н.И. Корреляционные зависимости физиолого-биохимических процессов в период закалки и зимовки озимой пшеницы // Физиология и биохимия культ, растений. 1980. - Т. 12, № 5. — С. 458 - 462.

138. Павлюк Н.Т. Зимостойкость, углеводный обмен и динамика свободных аминокислот у сортов и гибридов озимой пшеницы в период зимовки.// Науч. тр. Воронеж, с.-х. ин-та. 1978. - Т. 100. -С.15 - 24.

139. Стаценко А.П. О роли свободного пролина в криоадаптации озимых растений // Физиология и биохимия культурных растений. 1994. - Т. 26, № 5. -С. 509- 512.

140. Колупаев Ю.Е., Трунова Т.И. Особенности метаболизма и защитные функции углеводов растений в условиях стрессов // Физиология и биохимия культурных растений. 1992. - Т. 24, № 6. - С. 523 - 533.

141. Сосна обыкновенная в Южной Сибири / Отв. ред. Л. И. Милютин;АН СССР. Сиб. отд-ние, Институт леса и древесины им. В. Н. Сукачева,-Красноярск:ИЛиД СО АН СССРД988.-149с.

142. Guy С., Huber J., Huber S. Sucrose phosphate syntheses and sucrose accumulation an low temperature // Plant physiol. 1992. - V. 100, № 1. - P. 502 - 508.

143. Канделаки А.А., Капанадзе У.У. К изучению углеводов и холодостойкости древесных растений Таймыра // Сообщения АН ГССР. 1988. - Т. 129, № 1.-С. 145 - 148.

144. Sauter J. Seasonal changes in the efflux of sugar from parenchyma cells into the apoplast in poplar stems (Populus canadensis "robustra") // Trees. V. 2. - № 4. - P. 242 - 249.

145. Kubaska-Zebalska M., Kasperska A. Low temperature-induced modification of cell wall content and polysaccharide composition in Leaves of winter oilseed rape (Brassica napus L. var. deifera L.) // Plant Sci. 1999. - V. 148, № 1. - P. 59 -67.

146. Апакидзе A.B., Буадзе O.A. Ультраструктура клеток и углеводный обмен некоторых видов виноградного растения в связи с их морозостойкостью // Физиология и биохимия культурных растений. 2000. - Т. 32, № 2. - С. 114 - 120

147. Кищенко И.Т., Шуляковская Т.А. Динамика углеводов у представителей рода Picea (Pinoceae) в условиях интродукции И Ботанический журнал. -1997.-Т. 82, №6.-С. 103 108.

148. Palta J., Maede L. Fatty acid composition changes after cold accumulation: comparison of leaf, callus and purified membranes II Plant. Physiol. 1987. - У. 83, №4.-P. 71.

149. Рябчун P.Т., Арестова H.O. Накопление и гидролиз крахмала у различных по морозоустойчивости сортов винограда // Повышение эффективности производства винограда и продуктов его переработки. Новочеркасск, 1987. -С. 59-66.

150. Алаудинова Е.В. Сезонные изменения состава и свойств белков и фосфо-липидов меристематических тканей почек лиственницы сибирской: Авто-реф. дис. канд. хим. наук. Красноярск, 2000 - 23 с.

151. Бернстейн А. Справочник статистических решений. М., 1968. -162 с.

152. Пижурин А.А., Розенблит М.С. Исследование процессов деревообработки.-М, 1984.-232 с.

153. Бузун Г.Н., Джемухадзе К.М., Милешко Л.Ф. Определение белка в растениях с помощью амидо-черного // Физиология растений. 1982. - Т. 29, вып. 1.-С. 198-204.

154. Методы биохимического исследования растений / А.И. Ермаков, В.В. Арасимович, Н.П. Ярош и др. Л., 1987. - 430 с.

155. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М., 1980. -210 с.

156. Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков / Под ред. Ю.А. Овчинникова. М., 1974. - 462 с.

157. Практикум по физико-химическим методам в биологии. М.: Московский университет, 1976. - 300 с.

158. Калинин Ф.Л., Лобов В.П., Жидков В.А. Справочник по биохимии. Киев, 1971. - 1015 с.

159. Биологические мембраны. Методы. / Под ред. Д. Финлея. М., 1982. -440 с.

160. Уэндландт У. Термические методы анализа. М., 1978. - 526 с.

161. Rasmussen D.N., Loper С.К. DSC: A rapid method for isothermal rate nuclea-tion measurement // Acta Metalling. 1976. - V. 24. - P. 117 - 123.

162. Оболенская A.B., Ельницкая З.П., Леонович А.А. Лабораторные работы по химии древесины и целлюлозы: Учебное пособие для вузов. М., 1991. -320 с.

163. Филиппович Ю.Б., Егорова Т.А., Севастьянова Г.А. Практикум по общей биохимии. М., 1982. - 311 с.