автореферат диссертации по химической технологии, 05.17.07, диссертация на тему:Химический состав и биологическая активность сапропеля Белгородской области

На правах рукописи

ДМИТРИЕВА ЕЛЕНА ДМИТРИЕВНА

ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ САПРОПЕЛЯ БЕЛГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

Специальность 05.17.07 - Химия и технология топлив и специальных продуктов

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Санкт-Петербург 2003 г.

\

Работа выполнена в Тульском государственном педагогическом университете им. Л. Н. Толстого.

Научный руководитель: доктор химических наук, профессор

Платонов Владимир Владимирович

Научный консультант: член-корреспондент РАО, доктор

технических наук, профессор Проскуряков Владимир Александрович

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Зачиняев Ярослав Васильевич

доктор химических наук, доцент Сыроежко Александр Михайлович

Ведущее предприятие - Новомосковский институт Российского химико-гсхнолш'ического университета им. Д.И. Менделеева.

Защита состоится 2003 г. в час. на

заседании Диссер! анионного Совета Д 212.230.01 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Санкт-Пе1ербургском государственном технологическом институте (техническом университете) по адресу: 190013, С.-Петербург, Московский пр., 26.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования С.-Псгсрбургского государственного технологического института (технического университета).

Отзывы и замечания в одном экземпляре, заверенные печатью, просим направлять по адресу: 190013 С.-Петербург, Московский пр., 26, Ученый Совет.

Автореферат разослан /ТУ 2003 г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета

кандидат химических наук, доцент Громова В. В.

ТШо~

Общая характеристика работы

Актуальность исследования. Сапропель - своеобразное геологическое образование, формирующееся на дне водоемов на протяжении многих тысячелетий. Сложные микробиологические, биохимические и механические процессы, протекающие при генезисе, обуславливают большое разнообразие его вещественного состава.

В составе органической массы сапропелей (ОМС) присутствуют водорастворимые, легко- и трудногидролизуемые вещества, гуминовые (ГК), гиматомелановые (ГМК) и фульвокислоты (ФК), широкий спектр аминокислот, Сахаров, пептиды, целлюлоза, лигнин, липиды, каротиноиды, ксантофилы, спирты, кетоны, карбоновые кислоты, производные хлорофилла, алкалоидов, металлопорфирины, фосфолипиды, витамины, ферменты, антибиотики, стероидные соединения. Значительная доля микроэлементов, таких как №, V, Си, "Л, 2г, А1, Ре, Со, Мо, W связана в форме металлоорганических комплексов.

Перечисленный набор соединений определяет широкое применение сапропелей в сельском хозяйстве, животноводстве, птицеводстве, рыбоводстве, ветеринарии, медицине и технике.

Имеющиеся сведения о вещественном составе и областях применения сапропелей позволяют констатировать актуальность и своевременность проведения комплексных научных исследований, особенно, по единой методологии, когда предоставляется возможность получения сравнительной характеристики сапропелей различных месторождений.

Исследования являлись составной частью НИР, проводимых в Тулгоспедуниверситете им. Л.Н. Толстого в соответствии с программами правительства РФ "Оздоровление экологической обстановки и охраны здоровья населения России" и Российского фонда фундаментальных исследований "Университеты России".

Объектом настоящего исследования является ранее не изучавшийся сапропель р. Тихая Сосна Белгородской области Красногвардейского района.

Цели и задачи исследования: выполнить подробное комплексное исследование вещественного состава сапропеля с привлечением широкого набора современных физико-химических методов анализа, установить особенности состава ОМС, а также качественный и количественный состав минеральной части, провести биологическое тестирование исходного сапропеля и препаратов на его основе, получить сравнительную характеристику сапропелей различных месторождений, наметить рациональные пути применения сапропеля и сапропелевых препаратов.

Для решения указанных выше задач необходимо: обобщить и критически проанализировать имеющиеся литературные сведения о вещественном составе сапропелей, генезисе, классификации, генетической связи соединений сапропелей с исходным биологическим материалом, методах изучения и областях применения сапропелей; разработать эффективную схему разделения сапропеля на большое число продуктов, различающихся значением молекулярной массы, элементным, структурно-групповым и функциональным составом, содержанием и природой металлов; выполнить экстракцию водой и органическими растворителями различной полярности, кислотный и щелочной гидролиз, химический групповой, адсорбционную жидкостную (АЖХ), препаративную тонкослойную (ГТТСХ) и капиллярную газожидкостную хроматографию (КГЖХ), хромато-масс-спектрометрию (ХМС), Фурье- ИК-, УФ/ВИС- и 'НЯМР-спектроскопию сапропелевых продуктов; провели биологическое тестирование исходного сапропеля и продуктов, полученных из него, с привлечением большого набора микроорганизмов, отдельных животных, получить сравнительную характеристику сапропелей различных месторождений, изученных по единой методике; предложить области эффективного применения сапропеля, а также продуктов на его основе.

Научная новизна. Впервые современными методами анализа, указанными выше, выполнено подробное комплексное исследование вещественного состава сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области. Установлено, что в образовании данного сапропеля велика роль водорослей, характеризующихся высоким

содержанием липидов, белков, углеводов, полисахаридов, жиров, восков, нуклеиновых кислот. Роль высшей растительности незначительна, что подтверждается отсутствием в ОМС существенных количеств ароматических соединений, терпенов, абиетиновой, сиреневой, ванилиновой кислот, фенолов, хинонов, алкалоидов. Впервые получена сравнительная характеристика состава ОМС различных месторождений, изученных по единой методике. Показано, что состав ОМС коррелируется с составом исходного растительного и животного материала, участвовавшего в сапропелеобразовании. Полученные данные могут быть положены в основу создания современной классификации сапропелей. Выполнено биологическое тестирование исходного сапропеля на морских свинках и белых мышах, а также различных сапропелевых препаратов с привлечением большого набора микроорганизмов. Полученные данные позволили наметить области эффективного применения сапропеля и продуктов на его основе.

Основные положения, выносящиеся на защиту:

ранее не известные сведения о вещественном составе сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области; разработанная схема исследования сапропеля, включающая экстракцию водой, органическими растворителями различной полярности, кислотный и щелочной гидролиз, химический групповой анализ, АЖХ; результаты сравнительного анализа сапропелей различных месторождений, изученных по единой методике; клинические испытания биологической активности сапропеля и препаратов на его основе.

Научные и практические рекомендации 1. Сведения о вещественном составе сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области, его биологической активности, а также сравнительная характеристика сапропелей различных месторождений дополнили наши знания о химическом составе сапропелей, их классификации, генезисе, взаимосвязи с составом исходного растительного и животного материла, путях биогеохимической трансформации последнего. Они могут быть введены в курс Высшей школы, по

геологи. 1еоор1анической. ор1анической химии, биохимии, палеоботанике и палеозоологии, химии и технологии ископаемых топлив.

2. Разработанная схема разделения сапропеля с получением большого числа продукте, раишчающихся значением молекулярной массы, элементным, сгруктурно-фупповым и химическим групповым, функциональным составом, содержанием и природой металлов, степенью и типом конденсации, ароматичности может быть рекомендована научно-исследовательским и учебным лабораториям, занимающимся изучением особенностей химического состава торфов, восков, битумов, горючих сланцев, углей и других материалов растительного и животного происхождения.

3. Рсзульташ сравнительного анализа сапропелей различных месторождений, установление генетической связи химического состава сапропелей с исходным биологическим материалом мо1ут быть положены в основу методики классификации сапропелей.

4. Данные по биологическому тстированию сапропеля и препаратов на его основе позволят наметить пути их эффективного использования.

Апробация работы Результаты работы докладывались на ежеюдных научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов ТГПУ им. Л.Н Толстого (1999-2003 г.). Международ, конф. Луга: Изд-во Крестьянского 1 осударствснного университета им. Кирилла и Мефодия, 2001 г.; V Научно-тхничсская конференция молодых ученых, аспирантов и студентов, Новомосковск 2003 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 3 статьи. Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, тяти глав, положенных на

233_страницах, включая 63 рисунка, _8_ фотографий и _таблиц, а

:акже перечня использованной литературы из 285 наименований на _25_ страницах.

Основное содержание работы

В первой главе диссертации приведен обстоятельный обзор литературных источников, позволяющий подробно рассмотреть и критически проанализировать различные точки зрения по вопросам генезиса и классификации сапропелей, современных взглядов на процесс сапропелеобразования, вещественного состава сапропелей различных месторождений, методологии исследования сапропелей и продуктов, полученных из них. Особое внимание уделено исходному биологическому материалу, послужившему образованию сапропелей, его генетической связи с различными соединениями, определяющими состав органической массы последних, а также структурным особенностям компонентов формирующим биологическую активность сапропелей. Подробно описаны наиболее перспективные направления применения сапропелей.

Сделано заключение, что, несмотря на длительное время изучения и большое количесшо публикаций, до сих пор отсутствуют работы, посвященные детальному исследованию вещественного состава сапропелей по единой методологии; уделено мало внимания установлению структурных особенностей соединений отвечающих за их высокую биологическую активность, генетической связи компонентов органической массы сапропелей с растительным и животным материалом, участвовавшим в сапропелеобразовании; крайне ограничены работы по биологическому тестированию сапропелей и различных продуктов, выделенных из них, что убедительно доказывает актуальность и своевременность настоящей работы.

Во второй главе приведены методики исследования и экспериментальное оборудование.

Третья глава посвящена детальному комплексному исследованию особенностей вещественного состава сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области Красногвардейского района.

3.1. Характеристика исходного сапропеля Исходный сапропель плотный, серого цвета, однородный; относится по происхождению к автохтонному, а по химическому составу к кремнеземистому

типу. Степень разложения органического материала 98%; остатки растений и животных не превышают 2%. В непромывном материале преобладают диатомовые водоросли класс пенатые (55%), а также нитчатые желто-зеленые (7%), возможно занесенные из верхних слоев водоема. Промывной материал: остатки животных, беспозвоночные в т.ч.: дафнии (15%), древесина лиственных (береза - Betalo, ива - Salix) - (7%); осока Сагех (плоды, корни, реже эпидермис) -(5%); корни злаков, в т.ч.: тростника Phragmites - 5%, камыша Scerpuc (эпидермис) - 3%; листья зеленых мхов (Calliergonelle cuspidate) - 2%; споры и пыльца - 1 %; горец земноводный (Polygonum amphibium), рдест (Potamogeton sp).

Влажность (Wd) - 3.92, зольность (AL) - 82.84, органическое вещество - 13.24 (мае. % на воздушно-сухой сапропель); элементный состав (мае. % daf): С 34.5, Н 4.6, N 3.0, 0+S 57.9; состав минеральной части (мае. %): MgO (1.88) А1203 (11.09), Si02 (50.68), СаО (20.15), МпО (0.13), ТЮ2 (1.46), Fe(o6ui) (3.48) (рентгено-флуоресцентный); Си (0.25), Zn (10.22), Pb (2.08), Со (0.11), Cd (0.06), Mn (290), мг/кг сапропеля (эмиссионной спектральный анализ).

Содержание протеина (14.99), Са (4.77), Р (1.14), клетчатка (4.13), жир (2.65), мг/кг сапропеля.

Фурье- ИК- спектроскопия позволила обнаружить в исходном сапропеле ароматические углеводороды, алканы изо- и циклоалканы, сопряженные пиррольные циклы порфиринов, хлорофилла; амины, амиды, тиофеновые и фурановые гетероциклы; сульфиды и дисульфиды, фенольные и спиртовые гидроксилы, карбоксильные, карбонильные и сложноэфирные группы, а также глинистые вещества, каолинит, галлуазит, кварц, аморфный Si02, и другие.

3.1.5. Химический состав органической массы сапропеля (ОМС)

Изучение химического состава ОМС осуществлялось согласно разработанной схеме рис. 1.

Выход отдельных сапропелевых продуктов составил (мае % от ОМС) водорастворимые вещества (ВРВ) - 11.3, легкогидролизуемые (ЛГВ) - 21.5 и трудногидролизуемые вещества (ТГВ) - 17.7, негидролизуемый остаток (НТО) -9.1, целлюлозы (Ц) -6.3, гуминовые (ГК) - 11.2 и фульвокислоты (ФК) - 19.6,

битумы (Б) - 3.3. Экстракцией водой, органическими растворителями и последовательным кислотно-щелочным гидролизом извлекается до 98.0 (мае. % ОМС).

3.1.5.1. Химический состав водного экстракта, кислотных и щелочного

гидролизатов

В составе водорастворимых (ВРВ), легкогидролизуемых (ЛГВ), уроновых (УК) и фульвокислот (ФК), изученных ПТСХ, с привлечением большого числа стандартных соединений, установлено присутствие аминокислот, Сахаров и водорастворимых карбоновых кислот (мае. % 10 2 от ОМС) (табл. 1). Аминокислоты представлены (Ь-а-аланин, лейцин, фенилаланин, валин, глицин, аспарагин, аргинин, лизин, гистидин, тирозин, цистеин, триптофан, глутамин, серин, изолеицин, феонин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты); сахара (арабиноза, О-галактоза, Б-глюкоза, Ь-рамноза, лактоза, мальтоза, раффиноза); водорастворимые карбоновые кислоты (щавелевая, янтарная, адипиновая, пимелиновая, винная, яблочная, салициловая, о-фталевая, галловая, феруловая, винилиновая, сиреневая, терефталевая, бензойная, малоновая, метилянтарная). Основное количество аминокислот, Сахаров и водорастворимых карбоновых кислот в форме полипептидов, полисахаридов, сложных эфиров, извлекается только после кислотно-щелочного гидролиза, что позволило сделать вывод о их нахождении в ОМС.

Рис. 1 Схема изучения сапропеля

Выход компонентов водного экстракта, кислотных и щелочного

гидролизатов

_______ __Таблица 1

№п Компонент Выход, мае. % • 101 от ОМС

/п ВРВ ЛГВ УК ФК

1 2 3 4 5 6

Аминокислоты

1 Ь- а -аланин 2.87 1.46 0.39 3.57

2 Лейцин 612.22 395.66 0.13 171.42

3 Фенилаланин 41.54 138.33 0.11 55.35

4 Валин 1.44 131.03 39.03 3.57

5 Глицин 1.54 0.20 0.26 17.86

6 Аспарагин 50.67 335.03 0.33 17.86

7 Аргинин 0.82 3.91 7.17 5.36

8 Лизин 0.76 10.61 0.44 21.43

9 Гистидин 2.21 588.66 55.47 35.71

,0 Аспарагиновая кислота 153.84 78.15 1.85 55.35

И Тирозин 32.75 4.90 1.15 42.86

12 Цистеин 0.92 0.40 1.00 35.71

13 Триптофан 0.79 0.44 0.64 1.78

14 Глутамин 0.72 0.63 152.33 2.50

15 Серин 0.30 50.58 0.69 3.57

16 Изолейцин 0.51 36.33 0.45 35.71

17 Глутаминовая кислота 105.75 98.47 7.35 226.77

18 Треонин 75.72 28.20 2.79 169.63

19 Сумма аминокислот 1085.37 1902.99 271.58 906.01

Сахара

1 Арабиноза 1.56 6.97 18.13 35.71

2 О - галактоза 7.54 79.17 153.01 358.91

3 О - глюкоза 3.76 39.53 81.19 205.35

4 Ь - рамноза 2.08 16.87 32.41 78.56

5 Лактоза 1.04 2.28 4.08 12.54

6 Мальтоза 0.91 11.99 7.89 53.57

7 Раффиноза 0.13 0.08 0.22 0.36

8 Сумма Сахаров 17.02 156.89 299.93 745.00

Водо растворимые карбоновые кислоты

1 Щавелевая 1.27 16.90 93.31 151.78

2 Янтарная 0.78 40.60 71.87 107.14

3 Адипиновая 0.10 0.72 2.21 3.57

4 Пимелиновая 0.20 1.71 2.79 8.93

5 Винная 0.10 0.05 0.25 0.36

6 Яблочная 0.20 0.63 2.39 5.36

Продолжение таблицы 1

1 2 3 4 5 6

7 Салициловая 0.93 10.26 14.68 37.49

8 О - Фталевая 0.10 0.05 0.40 0.36

9 Галловая 0.20 0.20 0.08 1.78

10 Феруловая 0.17 11.22 0.91 1.67

И Ванилиновая 0.10 0.05 0.04 0.36

12 Сиреневая 0.11 0.20 0.02 0.33

13 Терефталевая 0.12 0.22 0.04 0.33

14 Бензойная 0.59 0.20 0.40 0.36

15 Малоновая 0.50 0.33 0.54 14.28

16 Метилянтарная 0.20 6.47 11.75 31.43

17 Сумма водорастворимых кислот 6.67 89.81 201.68 365.53

3.1.5.2. Химический состав экстрактов сапропеля

Характеристика экстрактов приведена в табл. 2.

Сравнительный анализ данных (табл. 2) позволяет сделать вывод, что последовательная экстракция растворителями с возрастающей полярностью позволила выделить из исходного сапропеля фракции значительно различающиеся величиной молекулярной массы, элементным и функциональным составом, степенью ароматичности, нафтеновости. Согласно данным Фурье- ИК-, УФ/ВИС и 'НЯМР- спектроскопии, КГЖХ в составе экстрактов уменьшается содержание длинпоцспкых н- и изоалканоБ, изопреноидоБ, каротиноидов, кетонов, карбоновых кислот, и возрастает - алициклических, гидроароматических, ароматических и гетероциклических соединений.

Максимальное содержание ХГ характерно для ацетонового, ФГ и КрГ -этанольного экстрактов, что количественно подтверждает данные Фурье-ИК-, УФ/ВИС- и 1 НЯМР-спектроскопии.

Характеристика экстрактов сапропеля

Таблица 2.

№ п/п Экстракт Выход, мас.% ОМС Параметры

1. Гексановый 0.60 Мг 535; С 83.5. Н 12.6, N 0.6, О+Б 3.3; Н/С(аТ) 1.811; С3724 Нб74| N023 0+5) |о; ХГ 2.97, ФГ 0.79, КрГ 0.32, ИЧ 1.80

2. Толуольный 0.66 Мг 746; С 80.0, Н 11.0, N 1.5, О. Б 7.5; Н/С(ат) 1.650; С4975 Н82 04 N080 О+Бззо; ХГ 6.53, ФГ 2.47, КрГ 0.62, ИЧ 2.13;

-> ■Э. Хлороформный 0.91 М 954; С 78.3, Н 10.5, N 2.1,0+Б 9.7; Н/С,„, 1.609; С619754^ 42 О+Бзтз; ФГ 5.95, ХГ 6.90; КрГ 2.15, ИЧ 2.43

4. Ацетоновый 0.54 Мг 870; С 73.4, Н 9.2, N3.0, О+Б 14.4; Н/С(ат) 1.504; С5820 Н7У% N. 86 О+Б, ,2; ХГ 7.93, ФГ 9.35, КрГ 2.43, ИЧ 2.57;

5. Этанольный 0.56 Мг 1252; С 58.1, Н 5.7, N3.7, О+Б 32.5; Н/С(ат) 1.177; Сбобо Н7|.з8^з 31 0+82544", ХГ 7.20, ФГ 14.40, КрГ 4.45, ИЧ 2.75

Примечание: Мг - молекулярная масса, а.е.м; С, Н, N. О+Б -содержание углерода, водорода, азота, кислорода; серы (мае. % (За^); Н/С -атомное отношение;ХГ - хиноидные,'ФГ - фенольные, КрГ - карбоксильные группы, ИЧ - йодное число (мг-экв /г).

3.1.5.3 Групповой состав экстрактов Принимая во внимание достаточно сложный состав экстрактов, выделенных из сапропеля, с целью детализации сведений о молекулярной структуре их соединений был выполнен химический групповой анализ, согласно рис.1. Выход отдельных групп соединений приведен в табл. 3.

Групповой состав экстрактов

Таблица 3

№ п/п Экстракт Выход групп соединений, мае. % от экстракта |

1. Толуольный 00 0.05; КК 0.10; Ф 0.60; АФ 14.9; НМ 84.35 |

2_ Хлороформный 00 0.10; КК 0.62; Ф 1.65; АФ22.4; НМ 75.23 |

3. Ацетоновый 00 0.56; КК 1.45; Ф3.93; АФ39.3; НМ 54.76 1

4. Этанольный 00 2.65; КК 3.80; Ф6.15; АФ45.1; НМ 42.30 |

Примечание: 00 - органические основания: КК - карбоновые кислоты;

Ф - фенолы; АФ - асфальтены; НМ - нейтральное масло Основу экстрактов составляет нейтральное масло, содержание которого изменяется от 84.35 (толуольный) до 42.30 (этанольный экстракт), мае. % от экстракта, а также асфальтены (14.9-45.1). Этанольный экстракт характеризуется максимальным содержанием органических оснований, карбоновых кислот и фенолов (табл..З.).

КГЖХ и ХМС позволили установить в составе нейтральных масел присутствие следующих индивидуальных соединений: нонан, декан, додекан, 2.6 - диметилундекан, циклододекан, 1.1.3 - триметил - 2 - бутилциклогексан, 3.5 -диметилундекан, 2.10 - диметилундекан, 3 - метилнонан, 4 - метилтридекан, тридекан, 4.6 - диметилундекан, 2.6.10.14 - тетраметилгептадекан, 3.7 -диметилнонан, 2 - метилундекан, 1 - тетрадецен, 2 - метилнафталин, 1 - гексил -3 -метилциклопентан, 2 - метилтридекан, 2 - метилдодекан, 2.6.10 триметилдодекан, 2.6.11 -триметилдодекан, тетрадекан, 3- циклогексилдекан, 3 -метил - 4 ундецен, 1.3 -диметил -5 - (-1-метилен) бензол, 2.6.10.14 -тетраметилпентадекан, пентадекан, 1 - изопентил - 2.4.5 - триметилбензол, 1-гексадецен, 10 - метилэйкозан, 2.3. -диметил - 1.Г - бифенил, 2.2' диметилбифенил, трицикло [4.4.1.0.2.5] ундека - 1(10)3, 1-метил - 2 (фенилметил) бензол, 1- метил - 4- (фенилмегил) бензол, 2.4- диметилбензальдегид, 4.9 -дипропилдодекан, гексадекан, циклогексадекан, 2.6 - диметилгептадекан, 2.6.10.15 - тетраметилгептадекан, 1- октадецен, 9 - октилэйкозан, гептадекан,

2.6.10.14 - тетраметилгексадекан, 3 - этилтетраэйкозан, 1- гептадецен, 8 -метилгептадекан, 2.6.10.15 - тетраметилгептадекан, 2.7.10 - триметилдодекан, 6.10.14 - триметил - 2 -пентадеканон, 9 - эйкозен, нонадекан, 1 - гексадецен, изофитол, эйкозан, генэйкозан, трикозан, тетракозан, пентакозан, октакозан, нонакозан, холестан, сквален.

3.1.5.2. Химический состав гуминовых кислот (ГК) ГК выделялись 0.1 н раствором NaOH при 20°С (ГК 1) и при 90°С (ГК 2). Общий выход 11.2 (мае. % ОМС). Молекулярная масса 1272 а.е.м., элементный (мас.% daf): С 64.7, Н 5.1, N 4.0, O+S 26.2 и функциональный состав (мг-экв / г): ХГ 9.05, ФГ 13.45, КрГ 5.10, КГ 0.98, ИЧ 2.10; Н/С(а1) 0.946; молекулярная формула С68 S9H64 88N3 640+S2a si-

В составе ГК методами Фурье- ИК-, УФ/ВИС-, 'НЯМР- спектроскопии, функционального анализа, а также ПТСХ со свидетелями обнаружены ароматические, преимущественно неконденсированные, а также нафтеновые циклы, замещенные алкильными цепями различной длины, фенольные и спиртовые гидроксилы, карбоксильные, хинОидные, кетонные, алкоксильные и сложноэфирные фуппы, циклические ангидриды, пиридиновые, хинолиновые, изохинолиновые, пиперидиновые, пиррольные и нафтеновые циклы, первичные и вторичные амиды, порфирины, хлорофиллы "а", "Ь", "с", бактериохлорофилл "а", дикетоны, каротиноиды, производные витамина "А".

Отношение интегральных интенсивностей полос поглощения протонов -СН; и -СН2- фупп позволяет приписать среднестатистическому алкильному радикалу структуру СНз(СН2)б-. Отношение числа ароматических и алифатических протонов - 13:16. Присутствие в ГК паромагнитных центров обусловлено ионами Fe (И) и Со (III), что подтверждено эмиссионным спектральным и рентгено-флуоресцентным анализами.

В четвертой главе приведены данные биологического тестирования исходного сапропеля, а также ГК, гиматомелановых (ГМК) и фульвокислот (ФК), извлеченных из него, с использованием стандартных бактерий Esherihia coli (Е. coli), Staphylococcus aureus (St. aureus), дрожжеподобных грибов рода Candida,

высокотребовательных микроорганизмов, например, C.diphtherie, для роста которых требуется среда с высоким содержанием аминного азота, глюкозы, нативного белка, что достигается введением в состав среды крови, сыворотки животных, а также анаэробной токсигенной культуры Clostridium perfringens.

Исходный сапропель использовался в качестве пищевой добавки для скармливания морским свинкам и белым мышам.

Установлено, что большое содержание в сапропеле протеина, жира, клетчатки и микроэлементов сбалансировало рацион питания последних, и тем самым оказало положшельное влияние на рост и иммунитет животных, улучшило гематологические показатели крови. У опытных животных относительное развитие сердца, печени, желудка, тонкого и толстого кишечника уступало контролю, что, по-видимому, связано с более эффективным функционированием данных органов.

Показана высокая антибактериальная активность сапропелевых продуктов по отношению к использованным микроорганизмам. Отмечается избирательность воздействия исследуемых сапропелевых препаратов. Бактерицидным эффектом по отношению к микроорганизмам обладают ГК в больших концентрациях, в минимальных концентрациях отмечается обильный рост нетребовательных Е. coli и St. aureus и умеренный рост высокотребовательных С. diphtherie и Candida, тогда как в отсутствии ГК рост микроорганизмов на агаре отсутствует. ФК вызывают угнетение роста микроорганизмов; причем чем больше их концентрация, тем заметнее эффект угнетения, вплоть до отсутствия роста микроорганизмов. ГМК кислоты вызывают высокий эффект размножения клеток микроорганизмов.

В пятой главе приведены результаты сравнительной характеристики сапропелей различных месторождений, изученных по единой методике (табл. 4).

Групповой состав органической массы сапропелей различных месторождений

Таблица 4

Выход групп соединений, мае. % ОМС

№ п/п Группы Соединений Месторождение

1 2 3 4

1 Битумы 2.3 3.3 9.8 14.9

2 ЛГВ 32.0 21.5 17.9 14.9

3 УК 27.2 17.7 22.0 7.9

4 ГК 9.8 11.2 40.1 41.3

5 ФК 3.2 19.6 1.1 1.3

6 Целлюлоза 6.4 6.3 4.2 5.7

7 Лигнин 0.3 0.2 1.3 1.5

8 Аминокислоты 4683.49 3418.84 2973.03 1659.99

9 Сахара 960.83 1542.47 816.23 459.05

10 Водорастворимые

карбоновые 662.24 884.33 307.58 384.04

кислоты (мае. %

•102 ОМС)

11 С/Ы 19.3 18.2 29.3 25.6

12 ГК/ФК 3.06 0.57 12.94 31.77

Примечание: 1. Оренбургская область (п. Соль-Илецк); 2. Белгородская область (Красногвардейский район, р. Тихая Сосна); 3. Астраханская область (Ахтубинский район, п. Сасыколи); 4. Республика Татарстан (озеро Глубокое)

Согласно данным табл. 4 рассматриваемые сапропели существенно различаются групповым составом ОМ, что позволило сделать вывод о значительном вкладе в образование сапропелей (1, 2) водорослей, характеризующихся высоким содержанием углеводно-белкового комплекса. Доминирование водорослевой составляющей в составе исходного биоматериала для сапропелей (1, 2) подтверждается значением отношения С/М Сапропели (3, 4) по сравнению с (1, 2) отличаются большим содержанием битумов (9.8-14.9), ГК (40.1-41.3), лигнина (1.3-1.5); в 1,5 раза большим значением отношения СЛМ. Это указывает на то, что в образовании сапропелей (3, 4), наряду с водорослями был

велик вклад высшей растительности. Показателем уровня деградации исходного биоматериала является отношение ГК/ФК, которое минимально для сапропеля (2) - 0.57, и максимально для (4) - 31.77.

Подтверждением различия в природе исходного биоматериала и условий его преобразований в ОМС являются данные о выходе аминокислот, углеводов, водорастворимых карбоновых кислот, определяющих состав ЛГВ, УК и ФК (табл. 4).

Для сравнительной характеристики сапропелей важны показатели (табл. 5). Характеристика сапропелевых гуминовых кислот

_Таблица 5

№ Месторождение

п/п Показатели 1 2 3 4

1 2 Молекулярная масса, а.е.м. Элементный состав (мае. % с1аП: 1011 1272 1050 1034

С 59.1 64.7 49.0 47.4

Н 4.1 5.1 3.1 4.5

N 5.2 4.0 4.6 3.4

О+Б 31.2 26.2 43.3 44.7

3 Функциональный состав (мг-экв/г) ФГ 3.30 13.45 4.96 12.96

ХГ 0.71 9.05 4.20 4.07

КГ 0.77 0.98 2.16 1.51

КрГ А ->Л 5.10 6.98 О л 1

Из табл. 5 видно, что ГК различаются значением молекулярной массы, элементным и функциональным составом. ГК сапропелей водорослевого происхождения (1, 2) характеризуются более высоким содержанием С, Н, М, меньшим О. В их составе больше ХГ, меньше - КГ и КрГ. На этом основании была объяснена более высокая биологическая активность сапропелей (3, 4). Данные по выходу и химическому составу различных групп соединений ОМС, отношения С/Ы, ГК/ФК могут быть положены в основу научной классификации сапропелей.

ВЫВОДЫ

1. Выполнено подробное комплексное исследование сапропеля Белгородской области.

2. Разработана схема разделения сапропеля на большое число различных продуктов, включающая последовательную экстракцию водой и органическими растворителями с возрастающей полярностью, кислотный и щелочной гидролиз, химический групповой анализ, АЖ и ПТСХ. Это позволило получить продукты существенно различающиеся вещественным составом, структурой соединений, природой и количественным содержанием функциональных групп, металлов.

3. Основу ОМС составляют ВРВ, ЛГВ, ГК и ФК, содержащие большой набор аминокислот, Сахаров, водорастворимых карбоновых кислот, алканов, при доминировании длинноцепных с нормальной цепью, спиртов, фенолов, кетонов, каротиноидов, металлопорфиринов, гетероциклических соединений азота, кислорода и серы. Значение отношения C/N; ГК/ФК указывает на большую роль водорослевого углеводно-белкового комплекса в образовании сапропеля. Преобладание ФК над ГК, а также высокое содержание стероидных спиртов, кетонов указывает на низкую степень биогеохимической трансформации исходного биологического материала участвовавшего в сапропелеобразовании.

4. ГК характеризуются сложным полифункциональным составом, в котором преобладают алифатические и алициклические структуры при незначительном вкладе ароматических неконденсированных; среди функциональных групп -кетонные, фенольные, карбоксильные.

5. Выполнено био'логическое тестирование исходного сапропеля и различных препаратов на его основе с привлечением большого набора микроорганизмов, а также морских свинок и белых мышей. Скармливание сапропеля животным сбалансировало рацион их питания и как следствие этого, увеличился вес, улучшились отдельные гематологические показатели крови, укрепилась иммунная система. Все это повысило устойчивость животных при их заражении анаэробной токсигенной культурой Clostridium perfringens. ГК, ГМК и ФК проявляют антибиотическую активность по отношению к Е. coli, St. aureus, С.

20

ТЖТо

albicans, С. diphtherie, причем специфичность биологического действия коррелируется с их химическим состаг""

пшательных сред для диагностики инфекционных заболеваний, а исходный сапропель в качестве биологической кормовой добавки.

7. Получена сравнительная характеристика сапропелей различных месторождений. Состав ОМС определяется, прежде всего, исходным био.юшческим материалом, а также условиями его биогеохимической трансформации. Данные по выходу и химическому составу битумов, ВРВ, ЛГВ и УК, ГК и ФК, отношения C/N и ГК/ФК могут быть положены в основу научной классификации сапропелей.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

1. Платонов В.В.. Дмитриева Е.Д, Проскуряков В.А., Швыкин А.Ю, Чилачава К.Б. Химический состав сапропеля Белгородской области./ ТГПУ,- СПб., 2003.-Деп. В ВИНИТИ 16.04.03. -№ 718. 37 с.

2. Платонов В.В., Дмитриева Е.Д., Проскуряков В.А., Швыкин А.Ю. Химический соаав Iуминовых кислот сапропеля Белгородской области (р. Тихая Сосна, Красногвардейский район)/ ТГПУ,- СПб., 2003,- Деп. В ВИНИТИ 03.07.2003 -№ 1260. 38 с.

3. Платонов В.В.. Дмитриева Е.Д.. Проскуряков В. А., Сыпченко А.Я., Хадарцев A.A. Биологическая активность сапропеля и препаратов на его основе./ ТГПУ,-СПб., 2003., Ден. В ВИНИТИ 03.07.2003 -№ 1262 20 с.

6. Сапропелевые препараты могут

09.10.03 I. Зак. 140-65 РТП ИК «Синтез» Московский пр , 26

Введение.

1. Литературный обзор. ^' 1 • 1 • Генезис сапропеля.

1.2. Биологическая стратиграфия озерных отложений.

1.3. Органическое вещество сапропелей.

1.4. Минеральная часть сапропелей.

1.5. Классификация сапропелей.

1.6. Применение сапропелей.

2. Объект и методы исследования, аппаратура.

2.1. Объект исследования.

V 2.2. Методы исследования, аппаратура.

2.2.1. Технический анализ сапропеля.

2.2.2. Зоотехнический анализ сапропеля.

2.2.3. Ботанический анализ сапропеля.

2.2.4. Элементный анализ.

2.2.5. Дифференциально-термический и дифференциально-гравиметрический анализ.

2.2.6. Определение молекулярной массы.

2.2.7. Эмиссионный спектральный анализ.

2.2.8. Рентгено-флуоресцентный анализ.

2.2.9. Атомно-абсорбционный анализ.

2.2.10. Фурье-ИК-спектроскопия.

2.2.11. 1 Н-ЯМР-спектроскопия.

2.2.12. Электронная спектроскопия.

2.2.13. Хромато-масс-спектроскопия.

2.2.14. Капиллярная газожидкостная хроматография.

2.2.15. Адсорбционная газожидкостная хроматография.

1 2.2.16. Препаративная тонкослойная хроматография.

2.2.16.1. Аминокислоты.

2.2.16.2. Сахара.

2.2.16.3. Водорастворимые карбоновые кислоты.

2.2.17. Экстракция сапропеля.

2.2.18. Химический групповой анализ экстрактов сапропеля.

2.2.19. Выделение гуминовых кислот.

2.2.20. Экстракция гуминовых кислот.

2.2.21. Выделение гиматомелановых кислот.

2.2.22. Определение органических пигментов и витаминов.

2.2.23. Определение порфиринов.

2.2.24. Определение суммы флавонолов.

2.2.25. Функциональный анализ.

2.2.25.1. Определение фенольных гидроксилов.

2.2.25.2. Определение хиноидных групп.

2.2.25.3. Определение кетонных групп.

2.2.25.4. Определение карбоксильных групп.

2.2.25.5. Определение йодного числа.

2.2.26. Кислотный и щелочной гидролиз сапропеля.

2.2.27. Определение биологической активности сапропеля и препаратов на его основе.

2.2.27.1. Определение биологической активности сапропеля.,

2.2.27.2. Определение биологической активности сапропелевых препаратов.

3. Экспериментальная часть. Химический состав сапропеля Белгородской области.

3.1. Характеристика сапропеля.

3.1.1. Ботанический состав сапропеля.

3.1.2. Технический анализ сапропеля.

3.1.3. Зоотехнический анализ сапропеля.

3.1.4. Фурье-ИК-спектроскопия сапропеля.

3.1.5. Химический состав органической массы сапропеля (ОМС).

3.1.5.1. Химический состав водного экстракта, кислотных и щелочного гидролизатов.

3.1.5.2. Химический состав экстрактов сапропеля.

3.1.5.2.1. Гексановый экстракт.

3.1.5.2.2. Толуольный экстракт.

3.1.5.2.3. Хлороформный экстракт.

3.1.5.2.4. Ацетоновый экстракт.

3.1.5.2.5. Этанольный экстракт.

3.1.5.3. Групповой состав экстрактов.

3.1.5.3.1. Органические основания.

3.1.5.3.2. Карбоновые кислоты.

3.1.5.3.3. Фенолы.

3.1.5.3.4. Асфальтены.

3.1.5.3.5. Нейтральное масло.

3.1.5.4. Химический состав гуминовых кислот.

3.1.5.4.1. Общая характеристика ГК.

3.1.5.4.2. Ступенчатая экстракция ГК.

3.1.5.4.3. Адсорбционная жидкостная хроматография ГК

1. Ацетоновый элюат. ч "I 2. Этанольный элюат.

3. Уксуснокислотный элюат.

4. Остаток ГК.

Выводы к главе 3.

4. Биологическая активность сапропеля и препаратов на его основе.

4.1. Биологическая активность сапропеля.

4.1.1. Характеристика животных.

4.1.1.1. Морская свинка (Cavia арегеа porcellus).

4.1.1.2. Белая мышь (Mus musculus).

4.1.2. Биологическая активность сапропеля.

4.2. Биологическая активность сапропелевых препаратов.

Выводы к главе 4.

5. Сравнительная характеристика сапропелей различных месторождений. Выводы к главе 5.

Выводы.

Сложные микробиологические, биохимические и механические процессы, протекающие при генезисе сапропеля, обуславливают большое разнообразие его вещественного состава.

В составе органической массы сапропелей присутствуют водорастворимые, легко- и трудногидролизуемые вещества, гуминовые, гиматомелановые и фульвокислоты, широкий спектр аминокислот, Сахаров, пептиды, целлюлоза, лигнин, липиды, каротиноиды, ксантофилы, спирты, кетоны, карбоновые кислоты, производные хлорофилла, алкалоидов, металлопорфирины, фосфолипиды, витамины, ферменты, антибиотики, стероидные соединения. Значительна доля микроэлементов: Ni, V, Си, Ti, Zr, Al, Fe, Co, Mo, W, Ge, Ga, La, большинство из которых связаны в форме металлоорганических комплексов.

Данный спектр соединений определяет широкое применение сапропелей в сельском хозяйстве, животноводстве, птицеводстве, рыбоводстве, ветеринарии, медицине и технике.

Сапропель и препараты на его основе положительно влияют на нервную, эндокринную, сердечно-сосудистую системы, улучшают состояние опорно-двигательного аппарата, стимулируют процессы метаболизма в печени. Присутствие в сапропеле антибиотиков и отсутствие патогенных микроорганизмов обеспечивает быстрое прекращение воспалительных процессов и хорошее излечение экзем, дерматитов, ожогов за счет усиления фагоцитарной активности лейкоцитов в крови, регенерации ткани; успешно лечатся различные флегмоны, маститы, фурункулезы хронические гастриты, язвенные болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Применение сапропелевых препаратов, в сочетании с электрофорезом, улучшает состояние больных придатками матки; выявлена высокая эффективность при лечении хронической воспалительной патологии суставов, шейного остеохондроза позвоночника с неврологическими проявлениями.

Получены интересные данные при использовании сапропелевых препаратов в ветеринарии: при лечении гнойного дерматита у поросят, трещин копытиевого рога у свиней, гнойно-некротического поражения пальцев у овец. При скармливании сапропеля вследствие повышения обмена веществ улучшается общее состояние животных, увеличивается содержание гемоглобина, эритроцитов, общего белка, неорганического фосфора, витаминов А и С, кислотной емкости, стимулируется усвоение органами и тканями макро- и микроэлементов, повышается прочность рогового чехла копытец. Установлено восстановление паренхимы печени пораженной токсическим гепатитом.

Перспективно применение сапропелей в виде минерально-витаминных добавок в комбикорма и получение гранулированных комбикормов на основе травяной муки, когда сапропель выполняет связующую роль и выступает как антиокислитель биологически ценных компонентов кормов. Огромна физиологическая и биологическая роль сапропелевых удобрений, которые снижают поражаемость болезнями сельскохозяйственных культур, накопление нитратов; увеличивают содержание крахмала, белка, сырого протеина, сахара; существенно повышается урожайность.

Сапропели повышают плодородие почвы, снижают избыточную кислотность, увеличивают содержание в почве подвижных форм фосфора и калия. Это особенно важно для многих регионов России, имеющих отрицательных баланс гумуса, как основного показателя плодородия почвы. Согласно обобщенным отечественным и зарубежным данным, уменьшение содержания гумуса на 10% снижает урожайность зерновых культур в среднем на 5-6 ц/га. В то же время на территории России около 3 млн. озер, запасы сапропеля в которых оцениваются в 250 млрд. т.

Сапропели применяются также в строительстве, нефтяной, газовой и химической промышленности.

Приведенные выше сведения о вещественном составе и областях применения сапропелей позволяют констатировать актуальность и своевременность проведения комплексных исследований последних с привлечением современных методов анализа, включая Фурье- ИК-, УФ/ВИС, и ,3С ЯМР- спектроскопию, хромато-масс-спектрометрию, капиллярную газожидкостную, адсорбционную жидкостную и препаративную тонкослойную хроматографию, элементный, эмиссионный спектральный, рентгено-флуоресцентный, атомно-абсорбционный, количественный функциональный, рентгенофазовый, структурно-групповой и химический групповой, экстракцию растворителями различной полярности, кислотный и щелочной гидролиз, озонолиз, гидрогенолиз и другие.

Особое внимание следует уделить разработке методологии биологического тестирования исходного сапропеля и различных продуктов, полученных из него.

Объектом настоящего исследования является ранее не изучавшийся сапропель р. Тихая Сосна Белгородской области Красногвардейского района.

В работе ставились следующие задачи: выполнить подробное комплексное исследование вещественного состава сапропеля, установить особенности структурной организации соединений органической, а также качественный и количественный состав минеральной части сапропеля, провести биологическое тестирование исходного сапропеля и различных препаратов на его основе, наметить рациональные пути применения последних; сравнительным анализом химического состава сапропелей различных месторождений выявлены особенности природы исходного биологического материала и условий его биогеохимической деградации для сапропеля Белгородской области.

Для решения указанных выше задач необходимо: обобщить и критически проанализировать литературные сведения о качественном и количественном составе сапропелей, генезисе, классификации, генетической связи соединений сапропелей с исходным биологическим материалом, методах изучения и областях применения сапропелей; разработать схему разделения сапропеля с получением большого числа продуктов, различающихся значением молекулярной массы, элементным, структурно-С&^у групповым и функциональным составом; выполнить экстракцию, кислотный и щелочной гидролиз, химический групповой, адсорбционную жидкостную, препаративную тонкослойную и капиллярную газожидкостную хроматографию, хромато-масс-спектрометрию, Фурье- ИК-, УФ/ВИС- и 'НЯМР- спектроскопию различных сапропелевых продуктов; провести биологическое тестирование исходного сапропеля и различных сапропелевых продуктов с использованием большого набора микроорганизмов, отдельных животных; предложить области эффективного применения сапропеля, а также продуктов, полученных из него; получить сравнительную характеристику вещественного состава сапропелей ^ различных месторождений.

В первой главе диссертации приведен обстоятельный обзор литературных источников, позволяющий подробно рассмотреть и критически проанализировать различные точки зрения по вопросам генезиса и классификации сапропелей, современных взглядов на процесс сапропелеобразования, химического состава минеральной и органической частей сапропелей различных месторождений, методологии исследования сапропелей и продуктов, полученных из них. Особое внимание уделено исходному биологическому материалу, послужившему образованию сапропелей, его генетической связи с различными соединениями, определяющими состав органической массы последних, а также структурным особенностям компонентов формирующим биологическую активность сапропелей. Подробно описаны наиболее перспективные направления применения сапропелей.

Сделано заключение, что, несмотря на длительное время изучения и большое количество публикаций, до сих пор отсутствуют работы, посвященные детальному исследованию вещественного состава сапропелей по единой методологии; уделено мало внимания установлению структурных особенностей соединений, отвечающих за их высокую биологическую активность, генетической связи компонентов органической массы сапропелей с растительным и животным материалом, участвовавшим в сапропелеобразовании; крайне ограничены работы по биологическому тестированию сапропелей и различных продуктов, выделенных из них, а также включающие получение сравнительной характеристики для сапропелей различных месторождений, что необходимо для создания основ научной классификации сапропелей. Все это доказывает актуальность и своевременность настоящей работы.

Во второй главе приведены методики исследования и экспериментальное оборудование.

Третья глава посвящена детальному комплексному исследованию особенностей вещественного состава сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области Красногвардейского района; приведены данные ботанического состава, технического, элементного, эмиссионного спектрального, рентгено-флуоресцентного и зоотехнического анализов, а также Фурье- ИК-спектроскопии исходного сапропеля; разработанная схема исследования, включающая экстракцию водой, органическими растворителями различной полярности, кислотный и щелочной гидролиз, химический групповой анализ, последовательную экстракцию и адсорбционную жидкостную хроматографию гуминовых кислот; дана подробная характеристика гидролизатов, экстрактов, элюатов, групп соединений отдельных сапропелевых экстрактов и минеральной части сапропеля.

Показано, что основу органической массы сапропеля составляют водорастворимые (11.3), легко- и трудногидролизуемые вещества (21.5 и 17.7, соответственно), гуминовые (11.2) и фульвокислоты (19.6), мас.% от

ОМС. В составе водорастворимых веществ, уроновых и фульвокислот идентифицированы аминокислоты (L-a-аланин, лейцин, фенилаланин, валин, глицин, аспарагин, аргинин, лизин, гистидин, тирозин, цистеин, триптофан, глутамин, серин, изолеицин, треонин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты); сахара (арабиноза, D-галактоза, D-глюкоза, L-рамноза, лактоза, мальтоза, раффиноза); водорастворимые карбоновые кислоты (щавелевая, янтарная, адипиновая, пимелиновая, винная, яблочная, салициловая, о-фталевая, галловая, феруловая, винилиновая, сиреневая, терефталевая, бензойная, малоновая, метилянтарная).

Сделан вывод, что основное количество аминокислот, Сахаров и водорастворимых карбоновых кислот сапропеля связано в форме полипептидов, полисахаридов, сложных эфиров, поэтому они извлекаются только после кислотно-щелочного гидролиза ОМС.

Обобщением данных Фурье- ИК-, УФ/ВИС-, 'НЯМР- спектроскопии, криоскопии, элементного, количественного функционального, химического группового, капиллярной газожидкостной хроматографии и хромато-масс-спектрометрии подробно охарактеризована битумная часть ОМС. Установлено, что в образовании сапропеля велика доля водорослевого углеводно-белкового комплекса, продуцирующего липиды, белки, углеводы, полисахариды, жиры, воски, нуклеиновые кислоты. Незначительное содержание ароматических соединенений, терпенов, абиетиновой, сиреневой, ванилиновой кислот является доказательством малой роли высшей растительности в сапропелеобразовании.

В составе гуминовых кислот методами Фурье- ИК-, УФ/ВИС-, !НЯМР-спектроскопии, функционального анализа, а также препаративной тонкослойной хроматографии со свидетелями обнаружены ароматические, преимущественно неконденсированные, а также нафтеновые циклы, замещенные алкильными цепями различной длины, фенольные и спиртовые гидроксилы, карбоксильные, хиноидные, кетонные, алкоксильные и сложноэфирные группы, циклические ангидриды, пиридиновые, хинолиновые, изохинолиновые, пиперидиновые, пиррольные и нафтеновые циклы, первичные и вторичные амиды, порфирины, хлорофиллы "а", "Ь", "с", бактериохлорофилл "а", дикетоны, каротиноиды, производные витамина "А".

Отношение интегральных интенсивностей полос поглощения протонов -СН3 и -СН2- групп позволяет приписать среднестатистическому алкильному радикалу структуру СНз(СНг)б-. Отношение числа ароматических и алифатических протонов - 13:16. Присутствие в гуминовых кислотах паромагнитных центров обусловлено ионами Fe (И) и Со (III), что подтверждено эмиссионным спектральным и рентгено-флуоресцентным анализами.

В четвертой главе приведены данные биологического тестирования исходного сапропеля, а также гуминовых, гиматомелановых и фульвокислот, извлеченных из него, с использованием стандартных бактерий Esherihia coli (Е. coli), Staphylococcus aureus (St. aureus), дрожжеподобных грибов рода Candida, высокотребовательных микроорганизмов, например, C.diphtherie, для роста которых требуется среда с высоким содержанием амминного азота, глюкозы, нативного белка, что достигается введением в состав среды крови, сыворотки животных, а также анаэробной токсигенной культуры Clostridium perfringens. Исходный сапропель использовался в качестве пищевой добавки для скармливания морским свинкам и белым мышам.

Установлено, что большое содержание в сапропеле протеина, жира, клетчатки и микроэлементов сбалансировало рацион питания животных, и тем самым оказало положительное влияние на их рост и иммунитет, улучшило гематологические показатели крови. У опытных животных относительное развитие сердца, печени, желудка, тонкого и толстого кишечника уступало контролю, что, по-видимому, связано с более эффективным функционированием данных органов.

Показана высокая антибактериальная активность сапропелевых продуктов по отношению к использованным микроорганизмам. Отмечается избирательность воздействия исследуемых сапропелевых препаратов.

Бактерицидным эффектом по отношению к микроорганизмам обладают гуминовые кислоты в больших концентрациях, в минимальных концентрациях отмечается обильный рост нетребовательных Е. coli и St. aureus и умеренный рост высокотребовательных С. diphtherie и Candida, тогда как в отсутствии гуминовых кислот рост микроорганизмов на агаре отсутствует. Фульвокислоты вызывают угнетение роста микроорганизмов; причем, чем больше их концентрация, тем заметнее эффект угнетения, вплоть до отсутствия роста микроорганизмов. Гиматомелановые кислоты вызывают значительное размножение клеток микроорганизмов. Сделан вывод, что гуминовые, гиматомелановые и фульвокислоты, выделенные из сапропеля, могут быть успешно использованы в конструировании питательных сред для диагностики инфекционных заболеваний. Биологическая активность сапропелевых продуктов имеет положительную корреляцию с особенностями структуры соединений, определяющих их химический состав, предложены альтернативные пути рационального применения сапропеля и препаратов на его основе.

В пятой главе дана сравнительная характеристика сапропелей различных месторождений, изученных по единой схеме. Показано, что использование данных по выходу, качественному и количественному составу водорастворимых и легкогидролизуемых веществ, уроновых, гуминовых и фульвокислот, отношений C/N; ГК/ФК, элементного и функционального анализов позволяет получить информацию о природе биологического материала, участвовавшего в сапропелеобразовании, направлении и степени его деградации; оценить уровень биологической активности сапропеля и препаратов на его основе.

ВЫВОДЫ

1. Выполнено подробное комплексное исследование сапропеля Белгородской области.

2. Разработана схема разделения сапропеля на большое число различных продуктов, включающая последовательную экстракцию водой и органическими растворителями с возрастающей полярностью, кислотный и щелочной гидролиз, химический групповой анализ, адсорбционную жидкостную и препаративную тонкослойную хроматографию. Это позволило получить продукты существенно различающиеся вещественным составом, структурой соединений, природой и количественным содержанием функциональных групп, металлов.

3. Основу органической массы сапропеля составляют водорастворимые, легкогидролизуемые вещества, гуминовые и фульвокислоты, содержащие большой набор аминокислот, Сахаров, водорастворимых карбоновых кислот, алканов, при доминировании длинноцепных с нормальной цепью, спиртов, фенолов, кетонов, каротиноидов, металлопорфиринов, гетероциклических соединений азота, кислорода и серы. Значение отношения C/N; ГК/ФК указывает на большую роль водорослевого углеводно-белкового комплекса в образование сапропеля. Преобладание фульвокислот над гуминовыми, а также высокое содержание стероидных спиртов, кетонов указывает на низкую степень биогеохимической трансформации исходного биологического материала участвовавшего в сапропелеобразовании.

4. Гуминовые кислоты характеризуются сложным полифункциональным составом, в котором преобладают алифатические и алициклические структуры при незначительном вкладе ароматических неконденсированных; среди функциональных групп - кетонные, фенольные, карбоксильные.

5. Выполнено биологическое тестирование исходного сапропеля и различных препаратов на его основе с привлечением большого набора микроорганизмов, а также морских свинок и белых мышей. Скармливание сапропеля животным сбалансировало рацион их питания и как следствие этого, увеличился вес, улучшились отдельные гематологические показатели крови, укрепилась иммунная система. Все это повысило устойчивость животных при их заражении анаэробной токсигенной культурой Clostridium perfringens. Гуминовые, гиматомелановые и фульвокислоты проявляют антибиотическую активность по отношению к Е. coli, St. aureus, С. albicans, С. diphtherie, причем специфичность биологического действия коррелируется с их химическим составом.

6. Сапропелевые препараты могут быть использованы при конструировании питательных сред для диагностики инфекционных заболеваний, а исходный сапропель в качестве биологической кормовой добавки.

7. Получена сравнительная характеристика сапропелей различных месторождений. Состав органической массы сапропелей определяется, прежде всего, исходным биологическим материалом, а также условиями его биогеохимической трансформации. Данные по выходу и химическому составу битумов, водорастворимых, легко- и трудногидролизуемых веществ, гуминовых и фульвокислот, отношения C/N и ГК/ФК могут быть положены в основу научной классификации сапропелей.

208

1.Аарна А. Я., Липпмаа X. В., Палуоя В. Т. Сравнение химических методов определения кислородсодержащих функциональных групп // Тр. ТПИ.-Сер. А.- 1964.- №215.- С. 97-119.

2. Александрова JI. Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации. JL: Наука. - 1980.- С. 122-151.

3. Алиев С. А. Парамагнетизм и физиологическая активность гумусовых веществ // Тр. 8-го Всесоюзного общества почвоведов. Новосибирск. -1989.- С. 54-63.

4. Алиев С. А. Парамагнитные свойства и физиологическая активность гумусовых веществ // Теория действия физиологически активных веществ: Тр. ДСХИ.- Днепропетровск. 1983.- Т. 8.- С. 78-80.

5. Антонов В.Я. Справочник ветеринарного лаборанта. -М. -Колос. -1981. -248 с.

6. Артюшин А.И., Флоринский М.А., Лунев М.И., Ефремов Е.Н., Сычев В.Г., Колокольцева И.В. Методические указания по определению тяжелых металлов в почвах сельхозугодий и продукции растениеводства. -М. -1992. -С. 12-34.

7. Базарова О.В., Кучер Р.В., Лукьянченко Л.В. О структуре сапропелитовых углей различной степени углефикации // ХТТ. 1984. №1. С.3-6.

8. Бакшеев В. Н. Использование сапропеля для повышения продуктивности животных // Совершенствование сельскохозяйственных животных и их кормление в Северном Зауралье. Новосибирск. - 1989.- С. 52-57.

9. Бакшеев В. Н. Сапропель вчера, сегодня и завтра.- Тюмень.- 1998.-80с.

10. Ю.Бакшеев В. Н. Эффективность применения сапропеля в животноводстве:

11. Информационный листок №131 / Тюменский ЦНТИ.- Тюмень. 1982.-Зс.

12. П.Бамбалов Н. Н., Пунтус Ф. А. Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве: Тез. докл. 4-й Респ. научн. конф. Минск. - 29-30 сентября 1982 г. - С. 88-89.

13. Барабой В. А. Биологическое действие растительных фенольных соединений. Киев. - 1976.- 162с.

14. Барабой В. А. Растительные фенолы и здоровье человека. М.: Наука. -1984.- 160с.

15. Баранов В. И., Косаргин С. И., Слепецкий Р. В. и др. Изучение биохимического состава и биологической активности сапропелей озер Шацкой группы // Вестник Львов, ун-та. 1986.- С. 4-11.

16. Белобороденко А. Сапропелетерапия // Уральские нивы. 1984.- №11.- С. 42-43.

17. Беляев Е.Н. Перечень предельно-допустимых концентраций (ПДК) и ориентировочно-допустимых количеств (ОДК) химических веществ в почве. -М. -1993. -С. 27-30.

18. Бергхоф Петер К. Мелкие домашние животные. Болезни и лечение. -М. -Аквариум. -1999. -223с.

19. Бивейтис Ю. М. Микроэлементы в сапропелях озер Литовской ССР // Тр. АН Литовской ССР.- 1967.- Т. 1.- С.43-49.

20. Богородская Л. И. Методы определения кислородсодержащих функциональных групп в дебитуминизированном органическом веществе // Тр. СНИИГТИМСа. Современные методы анализа в органической геохимии.- Вып. 2 (166).- Новосибирск. - 1973.- С. 14-36.

21. Бодоев Н.В. Сапропелитовые угли. Новосибирск: Наука, сиб. отд-ние. -1991.-120 с.

22. Бодоев Н.В., Чин Куанзон. Состав сапропелитовых углей по данным1спектроскопии ЯМР С в твердом теле //ХТТ. 1992. 3%. С. 5-9.

23. Бракш Н. А. Ресурсы сапропелей Латвийской ССР и их изучение // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. -1976.- С. 35-39.

24. Бракш Н. А. Сапропелевые отложения и пути их использования. Рига: Зинатне. - 1971.- 282с.

25. Бракш Н., Дубава JL, Бракш И., Логина К. Сапропелевые отложения водоемов Латвийской ССР.- Рига. 1967.- 230с.

26. Бракш Н., Смелтере Т., Шкеле В. Об озерных сапропелях Латвийской ССР // Сапропели и их использование: По материалам конф. по сапропелям 1956 г. Минск: Изд-во АН БССР.- 1958.- С. 100-110.

27. Бузмаков В. В. Сапропелевые удобрения // Химизация сельского хозяйства. 1989.- №5.- С. 34-37.

28. Буторин НВ. Донные отложения верхневолжских водохранилищ. Л.6 Наука. Ленинградское отд. -1975. -С.67-76.

29. Вайбель С. Идентификация органических соединений. М.- 1957.- С. 178, 183.

30. Вески Р., Фомина А. Сланцевые ростовые вещества. Таллин: Валгус. -1984.- 24с.

31. Вимба Б. Я., Краулерс Я. К., Лапса Э. Я., Шкеле В. А. Химический состав и агрохимические свойства сапропелей // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. 1976.- С. 9197.

32. Вимба Б. Я., Лапса Э. Я., Матвея Д. О. О содержании минеральных веществ, азота и микроэлементов в сапропелях Латвийской ССР // Изв. АН Латв ССР. Сер. хим. - Рига.-1961.-Вып. 2.- С.57-63.

33. Вимба Б., JIanca Э., Краулер Я. Химический состав сапропелей Латвийской СССР и их классификация. Тр. Латв. с.-х. академии. -Елгава. - 1970.- Вып. 24.- С. 157-162.

34. Воробьев Г. Г., Нестерова Г. И. Сапропель озера Неро и проблемы его использования // Гидротехника и мелиорация. 1986.- №12.- С. 48-54.

35. Вязова Н.Г., Крюкова В.Н., Латышев В.П. Сорбционные свойства гуминовых кислот // ХТТ. 1999. №6. С. 47-50.

36. Галенчик И. 3. Сапропель — ценное удобрение // Сельское хозяйство Белоруссии. 1988.- №5.- С. 12-13.

37. Галкина И.С. Сапропель Оренбургской области: биологическая активность и пути применения: Автореф. канд. хим. наук. -СПб.- 2000. -20 С.

38. Гамаюнов Н.И., Маслянников Б.И., Шульман Ю.А. Ионный обмен в гуминовых кислотах //ХТТ. 1991. №3. С. 32-37.

39. Геохимия озерно-болотного литогенеза /Под ред. К. И. Лукашева. -Минск: Наука и техника. 1971.- 284с.

40. Геращенко А. Н. Применение сапропелевых удобрений в Белоруссии // Химизация сельского хозяйства. 1988.- №10.- С. 60-63.

41. Гладун Т.Г., Гюльмалиев A.M., Гагарин С.Г. Алканы как алифатические элементы мультимерной структуры органической массы углей //ХТТ. 1999. №3. С. 100-112.

42. Глебко Л. И. Определение функциональных групп в гуминовых кислотах: Автореф. . канд. хим. наук. М.- 1971.- 19с.

43. Глебко Л. И., Кошелева Л. П., Максимов О. Б. Функциональный анализ гуминовых кислот. Владивосток.-1974.- 104с.

44. Глебко Л. И., Максимов О. Б. Новые методы исследования гуминовых кислот. Владивосток. - 1972.- 214с.

45. Глебовская Е. А. Применение ИК-спектроскопии в нефтяной геохимии. -Л.- 1971.- 286с.

46. Голубева B.C., Рудакова У.А, Чистякова Е.И., Пармой С.В. Выделение спиртовых экстрактов торфа и их химический состав //ХТТ. 2001. №5. С 17-21.

47. Гонцов А. А. Минеральное сырье. Сапропели // Справочник. М.: ЗАО «Геоинформмарк». - 1997.- 20с.

48. Гонцов А. А., Ложеницына В. И. Свойства различных сапропелей // ХТТ.-1984.- №5.- С. 67- 74.

49. Горблкж А. В., Вашкевич А. Ф. Влияние высоких доз сапропелевых удобрений на плодородие почвы легкого механического состава // Торф, пром-ть. 1986.- №7.- С. 26-29.

50. Горбуновская О.М., Курзо Б.В., Будай Т.К. Новые методические подходы к анализу вещественного состава сапропелей //ХТТ. 2001. №2. С. 73-81.

51. Горький Ю. И., Жуков В. К., Макеева Г. П., Лукьянова 3. К., Евдокимова Г. А. Термическое превращение органогенных систем сапропелевого типа // Горючие сланцы. 1986.- №3/4.- С. 404-411.

52. Горький Ю. И., Макеева Г. П., Лукьянова 3. К., Жуков В. К., Дудка А. Л. Исследование минеральной части сапропелей методом рентгенофазового анализа // Горючие сланцы. 1986.- №3/1.- С. 46-51.

53. Дроздов С.Г., Гарин Н.С., Джиндоян Л.С., Тарасенко В.М. Основы техники безопасности в микробиологических и вирусологических лабораториях М. Медицина. 1987. С. 254.

54. Дроздова Т. В. Геохимия аминокислот. М.: Наука.- 1974.- 210с.

55. Дроздова Т. В., Богачева М. П., Писарева т. А. и др. Определение хлорина, феофитина в осадках Черного моря // Химико-океанографические исследования морей и океанов. М.- 1975.- С. 138-145.

56. Дроздова Т. В., Гурский Ю. Н. Условия сохранности хлорофилла, феофитина и гуминовых веществ в отложениях Черного моря // Геохимия. 1972.-№3.- С. 323-334.

57. Дубинина Л. Ф., Тележникова К. Н., Дацун Л. Б. К вопросу об источниках накопления микроэлементов в сапропелях // Проблемы использованиясапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 104-108.

58. Дударчик В.М., Смычник Т.П., Терентьев А.А. Структура и свойства водорастворимых веществ торфа // ХТТ. 1997. №2. С. 13-18.

59. Евдокимова Г. А, Прузан В. В., Сенькевич JI. П. и др. К характеристике органического вещества сапропелей: Тез. докл. 3 респ. научн. конф. -Минск. -1981.- С. 37-38.

60. Евдокимова Г. А., Букач О. М., Яночкина JI. П., Дудка A. JI. Химический состав и биологическая активность сапропелей // ХТТ.- 1988.- №1.- С. 1621.

61. Евдокимова Г. А., Лопотко М. 3., Дубинин С. К. и др. Сапропелевые кормовые добавки — источник повышения продуктивности животноводства//Торф, пром-ть. 1984.- №3.- С. 21-23.

62. Евдокимова Г. А., Пунтус Ф. А., Лопотко М. 3. Применение сапропелей в бальнеологии // Курортные ресурсы и санаторно-курортное лечение в Сибири. Томск.-1982.- С. 45-49.

63. Евдокимова Г. А., Успенская О. Н., Кухарчик В. В., Букач О. М. Биологический и химический состав органического вещества малозольных сапропелей БССР // ХТТ.- 1986.- №2.- С. 14 -21.

64. Евдокимова Г. А., Яночкина Л. П., Колоскова Я. В. и др. Характеристика битумов сапропелевых отложений Белоруссии // ХТТ.- 1984.- №1.

65. Евдокимова Г. А., Яночкина Л. П., Успенская О. Н. Углеводный и аминокислотный состав сапропелей БССР // ХТТ.- 1983.- №5.- С. 9-15.

66. Евстафьев С.Н., Тутурина В.В. Карбоновые кислоты и продукты их превращений в органической массе сапропелитовых углей // ХТТ. 1996. №5. С. 14-18.

67. Екатеринина Л. Н., Аляутдинова P. X., Мотовилова Л. В. и др. Химический состав гуминовых кислот торфов и сапропелей Белоруссии // ХТТ.- 1986.- №5.- С. 94 99.

68. Жизнь растений / Под ред. А.А. Федотов М. Просвещение.Т.З. -1977. -489 с.

69. Жоробекова Ш. Ж. Макролигандные свойства гуминовых кислот. -Фрунзе: Илим. -1987.- 196с.

70. Жоробекова Ш. Ж., Мальцева Г. М. О конформационной изменчивости гуминовых кислот // ХТТ.- 1987.- №3.- С. 34-37.

71. Исследования в области торфа и сапропеля / Под ред. А. Тейтельбаум. -Рига: Изд-во АН Латв. ССР.- 1958.- 224с.

72. Казицына Л. А., Куплетская Н. Б. Применение УФ-, ИК- и ЯМР -мпектроскопии в органической химии. М.- 1968.- С. 227.

73. Калабин Г.А., Чеченина Т.Е., Парамонова Т.Г., Кушнарев Д.Ф. Анализ гуминовых кислот Хандинского месторождения методом спектроскопии ЯМР // ХТТ. 1997. №2. С. 19-24.

74. Камнева А. И. Химия горючих ископаемых. М.: Химия.-1974.-С. 272.

75. КамневаА.И., Королева Ю.Г. Лабораторный практикум по химии топлива, М.-МХТИ. -1976. -125С.

76. Канопкайте С. И., Пакарските К. Ю., Гедиминас А. А. Об устойчивости витамина Вп в сапропеле // Тр. Свердл. с.-х. ин-та. 1962.- Вып. 10.- С. 201-208.

77. Карабанов А. М. Влияние сапропелей на физиологическое состояние поросят// Зоотехния. 1989.- №7.- С. 34-36.

78. Караваев Н. М., Будяк Н. Ф. Исследование органической массы пресноводных сапропелей // ХТТ.- 1980.- №4.- С. 74-80.

79. Касьянова 3. А. Химическая характеристика и биологическая эффективность гумусовых кислот некоторых лечебных грязей: Автореф. . канд. биол. наук. М.- 1985.- 21с.

80. Клюева В.А. Осадконакопление в водохранилищах бассейна Нижнего Дона. -Ростов. Из-во Ростовского ун-та.-1983. -С.61-125.

81. Козлов А.П., Рокосова Н.Н., Кучереноко В.А., Бодоев Н.В. Получение углеродных адсорбентов из сапропелитовых углей //ХТТ. 1999. №1. С.40-44.

82. Колманец В. А., Бутузова JI. Ф. Ускоренный метод определения кислородсодержащих функциональных групп в каменном угле // Вопросы химии и химической технологии. 1974.- Вып. 47.- С. 96-100.

83. Конойко М. А. Об условиях образования озер и болот Белоруссии. История озер // Тр. Всесоюз. симпозиума по основным проблемам пресноводных озер. Т. 2.- Вильнюс. -1970.-С. 56-67.

84. Конойко М. А. Особенности формирования сапропелей в некоторых озерах Белоруссии в зависимости от географических условий // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 26-35.

85. Кордэ Н. В. Биостратификация и типология русских сапропелей. М.: Изд-во АН СССР.-1960.- 220с.

86. Кордэ Н. В. О номенклатуре и типологии сапропелевых отложений // Тр. лаб. сапропелевых отложений АН СССР.- М.: Изд-во АН СССР.-1956.-Вып. VI.-С. 5-33.

87. Кордэ Н. В. Сине-зеленые водоросли как образователи сапропелевых отложений // Тр. лаб. сапропелевых отложений. 1950,- Вып. 4.- С. 68-90.

88. Кормщиков П. А., Зверева М. И. Содержание протеина и кальция в некоторых сапропелях Урала. Тр. Свердл. с.-х. ин-та. - 1962.- Т. X.- С. 143-145.

89. Корнилова М. Г. Биологически активные компоненты сапропелей Тюменской области: Автореф. .канд. биол. наук. Свердловск. - 1972.-25с.

90. Короткий A.M. Литология и геохимия современных озерных отложений гумидной зоны:/на примере озера Ханка/. М.: Наука. — 1979. -С. 73-81.

91. Косаревич И. В., Битюков Н. Н., Шмавонянц В. Ш. Сапропелевые буровые растворы. М.: Наука.- 1987.- 191с.

92. Косаревич И.В. Структурообразование в дисперсиях сапропелей. -Минск: Наука и техника. -1990. -248 с.

93. Кудеярова А.Ю. Об информативности электронных спектров гумусовых веществ // Почвоведение. 2001. №11. С. 1323-1331.

94. Куклинский А. Я., Филиппова Н. А., Зимина К. И. Количественное определение углеродных атомов в нафтеновых кольцах по ИК-спектрам поглощения // Химия и технология топлив и масел. 1968.- №8.- С. 52-54.

95. Куликов М. Ф. Сапропель как витаминно-минеральный корм: Тез. 2-ой межвуз. научн. конф. по использованию сапропеля в сельском хозяйстве. Свердловск. 1966.- С. 68-69.

96. Кураколова Е. А., Буркова В. Н., Михель М. В. Химическая природа липидов из осадков гипергалинного озера Карачи // Горючие сланцы. -1989.- Т. 6.- №3.- С. 228-237.

97. Курзо Б. В. // Каустобиолиты и экология. Деп. в ЦБНТИ Минтоппрома РСФСР.- Торф, пром-ть: Экспресс-информ. - 1989.- №2.- С. 120-126.

98. Курзо Б. В. Геология и свойства торфяных и сапропелевых месторождений. Калинин: КГУ.- 1986.- С. 61-72.

99. Курзо Б.В. Генезис и ресурсы сапропелей Белоруссии. Минск.: Наука и техника. 1989. С. 166-175.

100. Кухаренко Т. А. Еще раз о гуминовых кислотах // ХТТ.- 1993,- №3. С. 3-7.

101. Кухаренко Т. А. Современное состояние наших знаний в области гуминовых кислот. М.: Недра - 1984.- 210 с.

102. Кухаренко Т.А. Окисленные в пластах бурые и каменные угли. М.: Недра. - 1972.- 215с.

103. Куцева JI. С. Букин В. Н. Морские водоросли и сапропели как источник витамина В12: Докл. АН СССР.- 1957.- Т. 115.- №4.- С. 20-24.

104. Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции. Методические указания МУ 4.2.698-98. -М. -Минздрав России. -1998. -С. 5-20.

105. Ларгин И. Ф., Шадрина Н. И. Геология сапропелевых отложений (Основы сапропелеведения): Учебн. пособие. Калинин: Изд-во КПИ.-1989.- 72с.

106. Ларгин И.Ф. Геология и свойства торфяных и сапропелевых месторождений. Сб. научн. трудов. Калинин. -1985. -С. 50-63.

107. Ларгин И.Ф. Методы исследования торфяных и сапропелевых отложений. Меж.вуз. сб. научн. трудов Тверской политехнический институт-1991.-123 с.

108. Ларгин И.Ф. Свойства и методы исследования торфяных и сапропелевых месторождений. Сб. статей. Калининский гос. университет. -1983.-С. 27-53.

109. Ларгин И.Ф. Торфяные и сапропелевые месторождения. Межвузовский тематический сборник. Калининский политехнический институт. -1982. -С. 17-31.

110. Ларина Н. К., Миессерова О. К., Скрипченко Г. Б. Применение ИК -спектроскопии для расчета структурных параметров бурых углей и продуктов их термообработки // ХТТ.- 1978.- №2.- С. 42-50.

111. Лиштван И. И., Аношко Я. И., Евдокимова Г. А., Дудка А. Л. Химический состав белорусских сапропелей // Изв. АН БССР.- Сер. хим. наук. 1986.- №1.- С. 94-98.

112. Лиштван И. И., Дудка А. Л., Евдокимова Г. А. Об органоминеральных веществах сапропелей // ХТТ.- 1986.- №4.- С. 28-32.

113. Лиштван И. И., Евдокимова Г. А., Юркевич Е. А. и др. ИК -спектроскопическое исследование сапропелей // ХТТ.- 1985.- №1.- С. 3-8.

114. Лиштван И. И., Косаревич И. В., Битюков Н. Н. и др. Особенности некоторых сапропелевых месторождений // Торф, пром-ть. 1981.- №10.-С. 27-30.

115. Лиштван И. И., Косаревич И. В., Литяева 3. А., Рябченко В. И. Сапропели и торфа для получения буровых растворов // Бурение. 1982.-№8.- С. 18-19.

116. Лиштван И. И., Лопотко М. 3. Использование сапропелей в народном хозяйстве // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. -Минск: Наука и техника. 1976.- С. 5-13.

117. Лиштван И. И., Стригуцкий В. П., Евдокимова Г. А и др. ИК -спектроскопическое исследование сапропелей // ХТТ.- 1985.- №3.- С. 9-15.

118. Лиштван И.И., Долидович Е.Ф., Шеремет Л.С. О влиянии экстрагента на количественное содержание тритерпеноидов в экстрактах торфа //ХТТ. 1994. №4-5. С. 5-8.

119. Лиштван И.И., Король Н.Т. Основные свойства торфа и методы их определения -Минск: Наука и техника -1975. -319 с.

120. Лозовский Л. И., Федотов В. Л. К вопросу о содержании йода в илах озер Белорусского Поозерья // Природа и хозяйство Белоруссии. Минск: Наука и техника. - 1969.- С. 18-20.

121. Лопатин Н. В. Образование горючих ископаемых. М.: Наука.- 1983.-С. 78-89.

122. Лопотко М. 3. Сапропели БССР, их добыча и использование.- Минск: Наука и техника.-1974.-197с.

123. Лопотко М. 3., Евдокимова А. В., Тишкович А. В. Перспективы использования сапропеля // Вести Академии навук Беларускай ССР.-1979.-№5.-С. 91-93.

124. Лопотко М. 3., Евдокимова Г. А., Кузьмицкий П. Л., Букач О. М. Сапропелевые удобрения. Минск: Наука и техника. - 1983.- 119с.

125. Лопотко М. 3., Кислов Н. В. Использование сапропелей в народном хозяйстве СССР и за рубежом. М.: Наука. 1990.- 85с.

126. Лопотко М. 3., Пунтус Ф. А. Химический состав поровых вод сапропелей // Проблемы поровых растворов в геологии.- Минск.: Наука и техника. 1973.- С. 139-142.

127. Лопотко М.З. Озера и сапропель (ред. Лиштван И.И.) Минск: Наука и техника.- 1978. -С. 13-28.

128. Лопотко М.З., Евдокимова Г.А. Сапропели и продукты на их основе. Минск: Наука и техника.-1986. -191 с.

129. Лукошко Е. С., Бамбалов Н. Н., Хоружик А. В. и др. Состав и свойства гуминовых кислот начального периода торфообразования // ХТТ.- 1988.-№5.- С. 3-10.

130. Лукошко Е. С., Раковский В. Е. Механизм образования гуминовых веществ в процессе торфообразования // Химия и генезис торфа и сапропелей. Минск: Изд-во АН БССР.- 1962.- С. 23-29.

131. Макитра Р.Г., Пириг Я.Н. Зависимость выхода экстракта торфа от свойств растворителей // ХТТ. 1991. №1. С. 67-70.

132. Макитра Р.Г., Пириг Я.Н. Количественное обобщение данных по экстракции сапропелитов // ХТТ 1993. № 3. С. 14-17.

133. Манская С. М., Кодина Л. А. Геохимия лигнина. М.: Наука. - 1975.- С. 106-116.

134. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. Т. 2.- М.: Мир. - 415с.

135. Марченко Л. О. Изучение антибактериальных свойств сапропелей Белоруссии и выделенных из них микроорганизмов // Проблемыиспользования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 109-115.

136. Марченко JI. О., Гуринович Е. С. Микробиологические исследования сапропелей Белорусских озер // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 74-81.

137. Марыганова В.В., Смычкин Т.П., Бамбалов Н.Н. Особенности химического состава и молекулярной структуры продуктов окислительной деструкции гуминовых кислот торфа // ХТТ. 1998. №5. С. 21-28.

138. Масленникова Е. Н. Витамины сапропеля и их действие на организм // Действие сапропеля на физиологические процессы в животном организме. Л.: Наука. - 1976.- 130.С.

139. Матис Е. Я., Кураколова Е. А., Буркова В. Н. Сравнительная оценка способов выделения липидов (битумоида А) из слаболитифицированных осадков // Геохимия. 1986.- №9.- С. 1366-1369.

140. Методические рекомендации к контролю питательных сред по биологическим показателям. -М. Мин. Здрав. -1980. -27 с.

141. Методы биохимического исследования растений. /Под ред. Покровского В.И. Л. - 1987. - 430с.

142. Мешкова Г. Н. Физико-химическое исследование органической массы торфа и сапропеля: Автореф. .канд. хим. наук. М.- 1969.- 25с.

143. Мизандронцев И.Б. Химические процессы в донных отложениях водоемов. Новосибирск: Наука. Сиб отд. -1990. С. 21-37.

144. Мун А. И. О сорбции кобальта, никеля, меди и цинка гуминовыми кислотами озерных осадков // Изв. АН Казахской ССР.- 1966.- Сер. хим. -Вып. 1.- С.33-38.

145. Наумова Г. В. Торф в биотехнологии. Минск: Наука и техника.-1987.-154с.

146. Наумова Г.В., Стригуцкий В.П., Жмакова Н.А., Овчинникова Т.Ф. Связь молекулярной структуры гуминовых кислот и их биологической активности //ХТТ. 2001. №2. С. 3-13.

147. Нейштадт М. И. Сапропелевые месторождения СССР: Межд. конгресс по торфу. JL- 1963.- 14с.

148. Никишина М.Б. Химический состав гуминовых кислот бурых углей Подмосковного бассейна реакционная способность, области применения: Автореф. . кнд. хим. наук. -СПб. -1997.-18 с.

149. Окулов М., Гневашев А., Королев А., Реймер В. Использование сапропеля в утководстве // Птицеводство. 1984.- №3.- С. 26-27.

150. Орлов Д. С. Гумусовые кислоты почв. М.: Изд-во МГУ.- 1974.- С. 272-273.

151. Орлов Д. С., Демин В. В., Завгородная Ю. А. Влияние молекулярных параметров гуминовых кислот на их физиологическую активность // Докл. РАН.- 1997.- Т. 354.- №6.- С. 843-845.

152. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв и общая теория гумификации. -М.: Изд-во Моск. ун-та. -1990. -330 с.

153. Орлов Д.С. Окислительно-восстановительные процессы и их роль в генезисе и плодородии почв. -М.- 1982. -С. 125-137.

154. Орлов Д.С. Органическое вещество почв Российской федерации. -М. Наука, 1996. -С. 15-18.

155. Орлов Д.С. Термодинамические методы химической характеристики почв. -М. -1986. -С. 31-40.

156. Орлов Д.С., Горовая А.И., Ярчук И.И. Гуминовые кислоты в биосфере // Рос. АН. Науч. Совет по пробл. почвоведения. Ин-т почвоведения и фотосинтеза и др. М. Наука, 1993. — 237 с.

157. Осипов А. М. Исследование молекулярной структуры углей методами РЖ- и ЯМР-спектроскопии // Тр. ин-та физ.-орг. химии и углехимии. -Киев. 1986.- 144с.

158. Охочинская О.Д. Химический состав и биологическая активность сапропеля Астраханской области. Автореф. дис. канд. хим. наук. -СПб.-2000. -20 С.

159. Пащенко Л.В., Саранчук В.И., Шендрик Т.Г., Галушко Л .Я. Исследование структуры и свойств гидролизного лигнина // ХТТ. 1998. №1. С. 29-32.

160. Пелоидотерапия распространенных заболеваний. Пятигорск. - 1985.-192с.

161. Перельсон М. Е., Шейнкер Ю. Н., Савина А. А. Спектры и строение кумаринов, хромонов и ксантонов. М. Медицина. — 1975. — 225с.

162. Перфильев Б.В. Микрозональное строение иловых озерных отложений и методы его исследования. -Л. Наука. — 1972. -С.6-16.

163. Пидопличко А. П. Озерные отложения Белорусской ССР.- Минск: Наука и техника.-1975.- 120с.

164. Пидопличко А. П., Барсукова Р. И. Некоторые особенности генезиса малозольных сапропелевых отложений // Тр. Свердл. с.-х. ин-та. -Свердловск. 1968.- Вып. 17.- С. 101-110.

165. Пидопличко А. П., Грищук Р. И. Некоторые итоги изучения сапропелевых отложений Белорусской ССР // Химия и генезис торфа и сапропелей. Минск: Изд-во АН БССР.-1962.- С. 258-274.

166. Пидопличко А. П., Грищук Р. И. Основные стратиграфические схемы развития озер Белорусской ССР // Тр. ин-та торфа АН БССР.- Минск. -I960.- Т. IX.- С.75-81.

167. Платонов В. В., Камнева А. И. Теоретические основы химической технологии горючих ископаемых. М.: Химия. -1990. - 286с.

168. Платонов В. В., Проскуряков В. А., Никишина М. Б., Новикова И. JL Химический состав гуминовых кислот бурого угля Подмосковного бассейна // ЖПХ.- 1996.- Т. 60.- Вып. 12.- С. 2059-2061.

169. Платонов В.В., Дмитриева Е.Д., Проскуряков В.А., Швыкин А.Ю., Чилачава К.Б. Химический состав сапропеля Белгородской области.37 с. — Деп. В ВИНИТИ 16.04.03. -№ 718 -В 2003.

170. Платонов В.В., Дмитриева Е.Д., Проскуряков В.А., Швыкин А.Ю. Химический состав гуминовых кислот сапропеля Белгородской области (р. Тихая Сосна, Красногвардейский район). 38 е.- Деп. В ВИНИТИ 03.07.2003 -№ 1260 -В 2003.

171. Платонов В.В., Дмитриева Е.Д., Проскуряков В. А., Сыпченко А.Я., Хадарцев А.А. Биологическая активность сапропеля и препаратов на его основе. 20 с. Деп. В ВИНИТИ 03.07.2003 -№ 1262 В 2003.

172. Подъяблонский С. М., Подлетская Н. Н., Колюжнов В. Г. и др. Использование сапропеля в животноводстве: Методические рекомендации /ВАСХНИЛ Сиб. отд. Новосибирск. - 1983.- 18с.

173. Позняк В. Химическое исследование некоторых сапропелей Белорусской ССР и сопоставление их с торфом: Автореф. дис. . канд. хим. наук. Минск. - 1952.- 13с.

174. Пономарева М.А. Химический состав и пути использования сапропелей Татарстана: Автореф. канд. хим. наук. -СП6.-2002.-20 С.

175. Потонье Г. Сапропелиты.- М.: Изд-во журн. нефт. и сланц. хоз.- 1920.-45с.

176. Прыткова М.Я. Географические закономерности осадконакопленич в млых водохранилищах. JI: Наука. 1986. -С. 12-23.

177. Пунтус Ф. А. Исследование углеводного и аминокислотного состава гидролизатов гуминовых кислот сапропелей // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 122-128.

178. Пунтус Ф. А., Бамбалов Н. Н., Смычкин Т. П. Исследование периферической части гуминовых кислот торфа и сапропелей // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 115-122.

179. Пушкина Р. А., Куклинский А. Я. Определение метиленовых групп в цепях насыщенных углеводородов по инфракрасным спектрам поглощения // Химия и технология топлив и масел. 1975.- №5.- С. 55-56.

180. Романкевич Е. А. Биогеохимический состав осадков Тихого океана // Литология и полезные ископаемые. 1974.- №1.- С. 20-25.

181. Русчев Д. Д. Химия твердого топлива. Л.: Химия. - 1976.- С. 25-28. С. 79-85.

182. Сапропелевые отложения водоемов Латвийской ССР/ Под ред. Б.Я. Вимба Рига: Зинатне. - 1967.- 80с.

183. Сапропель: ресурсы, области применения, технология добычи и переработки: Научн.-техн. обзор / Гос. ин-т проектирования на речн. трансп. М.: БИ.- 1991.- 42с.

184. Сасина В. Н., Румянцева Н. А., Гарцман В. В. Определение химического состава гуминовых кислот бурых углей методом окислодеструкции // ХТТ.- 1991.- №6.- С. 45-52.

185. Свойства и методы исследования торфяных и сапропелевых месторождений: Межвуз. сб. научн. тр. Калинин. - 1983.- 143с.

186. Сенькевич JI. П., Курзо Б. В., Кухарчик В. В., Фролова 3. М. Особенности образования и структуры гуминовых кислот сапропелей различного генезиса // ХТТ.- 1996.- №5.- С. 19-25.

187. Сенькевич JI. П., Курзо Б. В., Пармон С. В. и др. Особенности структуры гуминовых кислот // ХТТ.- 1995.- №1.- С. 3-14.

188. Сенькевич Л.П., Курзо Б.В., Пармон С.В., Прохоров С.Г. Характеристика гуминовых кислот разновозрастных озерных сапропелей //ХТТ. 1995. №1. С. 3-13.

189. Серебренникова О. В. Эволюция тетрапиррольных пигментов в осадочных отложениях. М.- 1988.- 140 с.

190. Сильверстрейн Р., Басслер Г., Моррил Т. Спектрометрическая идентификация органических соединений. М.: Наука- 1977.- 308с.

191. Сирюк Л. Г. Спектральные методы исследования ароматических углеводородов в нефтях и нефтепродуктах. М.: Наука- 1968.- 93с.

192. Скрябин Г.К., Головлева Л.А. Использование микроорганизмов в органическом синтезе. М.: Наука. - 1976. - 333с.

193. Смит Е. Л. Витамин В12.- М.: Мир. 1962.- 170с.

194. Соколов В. А., Бестужев М. А., Тихомолова Т. В. Химический состав нефтей и природных газов в связи с их происхождением. М.: Недра.-1972.-С. 110-115.

195. Соколов Д. Ф. Определение неорганических компонентов в сапропелях // Методика изучения сапропелевых отложений. М.: Изд-во АН СССР.-1953.-С. 87-121.

196. Соколова В. Е. О гипоазотемическом действии флавоноидов // Фармакология и токсикология. Киев. - 1975.- Вып. 10.- С. 62-66.

197. Солдатенков П. Ф. Действие сапропеля на физиологические процессы в животном организме. JI: Наука.-1976.- 170с.

198. Соловьев М. М., Белоголовая JI. А. Основные типы озерных и болотных отложений озера Селигер // Тр. сапропелевого ин-та.- М.- 1934.Т. 1.- С. 27-29.

199. Справочник биохимика: Пер. с англ. / Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К.- М.: Мир. 1991.- 544с.

200. Стадников Г. JI. Происхождение углей и нефти. М.: Изд-во АН СССР.- 1937.-С. 31-35.

201. Стеклов Н. А. О разведке и оценке сапропеля: Вторая межвуз. конф. по использованию сапропеля в сельском хозяйстве.- Свердловск.- 1966.- С. 124-126.

202. Стеклов Н. А., Ильина Е. Д. О генетической классификации отложений сапропеля // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве.-Минск: Наука и техника.- 1976.- С. 63-73.

203. Страхов Н.М. Осадкообразование в современных водоемах. -М.-Наука.-1993. -С. 26-63.

204. Сукачев В. Н., Поплавская Г. И. Очерк историии озер и растительности Среднего Урала в течение голоцена по данным изучения сапропелевых отложений // Бюлл. Комис. по изучению четвертичного периода / АН СССР.- 1946.- №8.- С. 5-98.

205. Сурасинха Саман Химический состав и биологическая активность гуминовых кислот. Автореф. канд. хим.наук. -СПб. -2000. -19 с.

206. Сухая Т. В., Снопков В. Б., Лопотко М. 3. Применение сапропеля в производстве древесно-волокнистых плит // Проблемы переработки тверд, горюч, ископаемых. Минск. - 1980.- С. 98-99.

207. Тарантов А. С. Значение минералов и минералогических исследований при изучении сапропелевых отложений: Межвуз. сб. научн. тр. // Методы исследования торфяных и сапропелевых отложений. Тверь. - 1991.- С. 61-71.

208. Тарантов А. С. Минералогический состав сапропелей как отражение гидрохимической эволюции озер // Методы исслед. торф, и сапр. отлож. -Калинин: КГУ.- 1989.- С. 4-16.

209. Тарантов А. С. Морфология и особенности генезиса фосфатов и карбонатов железа сапропелевых отложений // Свойства и методы исследования торфяных и сапропелевых месторождений. Калинин. -1983.- С. 102-109.

210. Тарантов А. С., Курзо Б. В. Минералого-геохимические особенности формирования сапропелевых отложений с активным проявлением сульфатредукции (на примере оз. Беленц БССР) // Изв. ВУЗов. Геология и разведка.- 1989.- №3.- С. 40-45.

211. Тарантов А. С., Ларгин И. Ф., Антонов С. В. Задачи и методика исследования минералогического состава сапропелей // Биохимич. карбонаты антропог. озер и источн. Пермь: ППИ.- 1989.- С. 29-37.

212. Тарантов А. С., Логинов А. Н., Антонов С. В. Агрохимическое значение и методика определения окислительно-восстановительного потенциала сапропелевых отложений // Торф, пром-ть. 1986.- №1.- С. 1518.

213. Тарновский А.А. Геохимия донных отложений современных озер. -JI. изд-во ЛГУ. -1980. -С. 15-31.

214. Титов Е. М. О классификации пресноводных сапропелей // Сапропели и их использование. Минск. - 1958.- С. 29-40.

215. Топливо твердое минеральное. Метод определения зольности. М.-ГОСТ 11022-90 (ИСО 1171-81, СТ СЭВ 493-89, СТ СЭВ 1461-78).

216. Торф и продукты его переработки для сельского хозяйства. Методы определения обменной и активной кислотности. ГОСТ 11623-89.- М.: Изд-во стандартов. 1990. -10с.

217. Торф. Методы определения влаги. ГОСТ 11305-83.- М.: Изд-во стандартов. - 1983. - 8 с.

218. Торф. Методы определения зольности. ГОСТ 11306-83.- М.: Изд-во стандартов. - 1984. -10 с.

219. Трубецкой О.А., Кудрявцева Л.Ю., Ширшова Л.Т. Фракционирование гумусовых веществ почв электрофорезом в полиакриламидном геле в присутствии денатурирующих агентов // Почвоведение. 1993. №8. С. 122125.

220. Тюремный С.Н. Атлас растительных остатков, встречаемых в торфе М.Ленинград. 1959. С. 82-84.

221. Успенский В. А., Радченко О. А., Шишкова А. П. Методы битумологических исследований. Задачи исследований и пути их разработки. Л.- 1975.- С.38-49.

222. Федотов В. Л. Микроэлементный состав сапропелей // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 97-104.

223. Федотов И. Ф. Микрофлора молтаевского сапропеля при хранении его в условиях грязехранилищ лечебных учреждений Свердловской области // Тр. Свердл. с.-х. ин-та. Свердловск.- 1968.- Вып. 17.- С. 139-144.

224. Хохлов Б. Н. Об использовании сапропелей на удобрение в Ярославской и Псковской областях // Проблемы использованиясапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. - 1976.- С. 156-161.

225. Царфис П. Г., Киселев Б. В. Лечебные грязи и другие теплоносители.-М.:Высшая школа.- 1990.- 127с.

226. Цыпленков В. П., Чуков С. Н. Парамагнитная активность органического вещества некоторых почв // Почвоведение. 1984.- №1.- С. 123-129.

227. Черонис Н. Д., Ма Т. С. Микро- и полумикрометоды органического функционального анализа. М.: Наука - 1973.- 375с.

228. Чуков С. Н., Талашкина В. Д., Надпорожская М. А. Физиологическая активность ростовых стимуляторов и гуминовых кислот почв // Почвоведение. 1995.- №2.- С. 169-174.

229. Шабарова Н. Т. Азотистые вещества сапропелей.- Тр лабор. сапр. отложений. М.-Л.- 1950.- Вып. IV.- С. 40-47.

230. Шестакова Т.В. Вещественный состав и размещение сапропеля озер Калининградской области // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. 1976. С. 39-45.

231. Шинфлер С., Бурыан П., Мацак И. Анализ функциональных групп в угле и продуктах его пиролиза // Процессы обогащения и использования угля: Конф. ЧС НТО и ИГГ.- Прага. 8. 11.1979.- С. 38-41.

232. Шишков В. Ф., Рандин О. П., Петухов Л. П. и др. Природа сигналов ЭПР в гуминовых кислотах // ХТТ.- 1985.- №4.- С. 38-40.

233. Шишков В.Ф., Тутурина В.В. Окисление сапропелитов. Иркутск: изд-во Иркутского ун-та. -1985. -С. 15-18.

234. Шляпников Д. С., Демчук И. Г., Окунер П. В. Минеральные компоненты донных отложений озер Урала. Свердловск. - 1990.- 100с.

235. Юдина Н. В., Писарева С. И., Саратиков А. С. Параметры оценки биологической активности органического вещества сапропелей // Химия растительного сырья. 1998.- №4.- С. 29-32.

236. Юдина Н.В., Писарева С.И., Пынченков В.И., Лоскутова Ю.В. Параметры оценки биологической активности органического вещества сапропелей // Химия растительного сырья 1998. №4. С. 33-38.

237. Юдина Н.В., Писарева С.И., Саратиков А.С. Оценка биологической активности гуминовых кислот торфов //ХТТ. 1996. №5. С. 31-34.

238. Albaiges J. et al. Extractable and bound neutral lipids in some lacustrine sediments // Org. Geochem.- 1984.- V. 6.- P. 233-236.

239. Analytical methods for coal and coal products / Ed. Karr C.- N.-Y.- 19781979.- V. 1-3. P. 379-403.

240. Baker E. W., Palmer S. E., Huang W. Y. Chlorin and porphyrin geochemistry of DSDP Leg 40 sediments // Bolli H. M., Ryan В. E. Init. Repts. DSDP.- Washington.- 1978.- V. 38-41.- P. 639-647.

241. Baker E. W., Palmer S. E., Huang W. Y. Intermediate and late diagenetic tetrapirrole pigments. Leg 41: Cape verde rise and losin // Init. Rep. Deep Sea Drilling Project.- 1972.- V. 41.- P. 825-837.

242. Baker E. W., Smith G. D. Chlorophyll derivatives in sediments, Site 147 // Heezen В. C., MacGregor I. D. Init. Repts. DSDP.- Washington.- 1973.- V. 20.-P. 943-946.

243. Boyd M. L., Montgomery D. S. Structural group analysis of the Athabasca bitumes asphaltene and tar components // Fuel.- 1962.- V. 62.- №3.- P. 335350.

244. Carter P. Adsorption of aminoacid-containing organic matter by calcite and quarts // Geochim. Cosmochim. Acta.- 1978.- V. 40.- P. 1939-1942.

245. Carter P., Mitterer R. Amino acid composition of organic matter, associated with carbonate and non-carbonate sediments // Geochim. Cosmochim. Acta.-1978.-V. 40.- P. 1928-1938.

246. Chave K., Suess E. Calcium carbonate saturation in sea water; effects of dissolved organic matter// Limnol. Oceanogr.- 1970.- V. 15.- P. 633-637.

247. Chemistry and Biochemistry of plant pigments / Ed. T. W. Goodvin.— London: Academic Press.- 1976.- 340 p.

248. Clark F. E., Tan К. H. Identification of polysaccharide ester linkage in humic acids // Soil. Biol. Biochem.- 1969.- V. 1.- P. 75-81.

249. Craver C. D. Dask-book of Infrared Spektra. Coblentz Socicty.- РОВ 9952.-Kirkwood.- 1974.- 183s.

250. Devon Т. K., Scott A. J. Handlook of naturally occuring compounds. — N. -Y. -1972. — 386p.

251. Farmer V. C. The Inerared spectra of minerals.-London.-1974.-320 p.

252. Flaig W. Chemical composition and physical properties of humus substances: Symposium "Humus et Planta".- Prague.- 1967.- P. 81-112.

253. Flaig W. Effekt of humik substances on plant metabolism // Proc. 2 nd Int. Peat Congress.- Leningrad.- 1970.- P. 579-606.

254. Hajibrahim S. K., Tibbetts P. J. C., Watts C. D., Maxwell J. R., Eglinton G. Analysis of carotenoid and porphyrin pigments of geochemical interest by high-performance liquid chromatography //Analytical chemistry.- 1978.- V. 50.-№4.- P. 549-553.

255. Horawski H. Studia and osadami dennymi torfowisk // Zeszyty problemave posteraw nauk rolniczych.- 1971.-№107.- S. 167-178.

256. Kershaw J. R. Ultraviolet and luminiscence spectroscopy // Spectrosc. Anal. Coal Liguids.- Amsterdam.- 1989.- P. 155-194.

257. Kershaw J. R. Spectroscopic Analysis of coal liguids // Coal Sci. And Technol.- Amsterdam.- 1989.- V. 12.- 395p.

258. Lounda J. W., Palmer S. E., Baker E. W. Early products of chlorophyll diagenesis in Japan Trench sediments of Deep Sea Drilling Project sites 434, 435 and 436 // Init. Repts. DSDP.- Washington.- 1980.- V. 56-57.- Pt 2.- P. 1391-1369.

259. Merkt J., Luttig G., Schneekloth H. Vorschlag zur Gliederung und Definition der limnischen Sedimente. Geol. Jb. 89.- Hannower.- 197l.-S. 17-21.

260. Meyer W. Die Bestimmung functioneller Gruppen an Huminsubstanzen aus Boden.- Zurich.- 1962.- S. 82-83.

261. Nischimura M. The geochemical significance in early sedimentation of geolipids obtained by saponification of lacustrine sediments // Geochim. Cosmochim. Acta.- 1977.- V. 41.- P. 1817-1823.

262. Ogner G. Fractionation of humus hydrolysates by ion exchange resins // Soil, sci.- 1970b.- V. 110.- №2.- P. 8 6-92.

263. Piccolo A., Campanella L., Petrolino В. M. Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectra of soil humis substances extracted by different mechanizms // Soil Science Society of America Journal.- 1990.- №54.- P. 750-756.

264. Piccolo A., Nardi S., Concgeri G. Structural characteristics of humic substances as related to nitrate uptake and growth regulation in plant systems // Soil Biol. Biochem.- 1992.- V. 24.- №4.- P. 373-380.

265. Pretsch E. Tables para la elucidation estructural de compuestos organicos par methods opticos / Alhambra.- Madrid.- 1980.- 120v.

266. Robinson N., Granwell P. A., Eglinton G. Sources of the lipids in the bottom sediments of a English oligo-mesotrophic lake // Freshwater Biol.- 1987.- V. 17.-P. 15-33.

267. Scheffer F., Ulrich B. Humus und Humusdungung Enke Verlag.- Stuttgart.-1960.- S. 27-33.

268. Schnitzer M., Kerndorf H. Reactions of fulvic acid with metal ion // Water, air and soil pollutions.- 1981.- №5.- P. 97-108.

269. Smith G. D., Baker E. W. Chlorophyll derivatives in DSDP Leg 22 sediments // Borch С. C., Sclater J. G. Init. Repts. DSDP.- Washington.- 1974.-V. 22.- P. 677-679.

270. Sowden F. J. Extraction of nitrogen containing organic matter fractions from brown forest soil //Canad. J. Soil. Sci.- 1970a.- V.50.- P. 227-232.

271. Tan К. H., Clark F. E. Polysaccharide constituents in fulvic and humic acids extracted soil // Geoderma.- 1970.- №2.- P. 72-78.

272. Tarantov A. S. Microbiological and geochemical stratification of guttja deposits // Processings VIII int. peat congress.- Leningrad.- 1988.- P. 22-28.

273. Vibrational spectra of organominerallic compaunds / Ed. Maslowsky E. -N.-Y.- 1976. -528 p.

274. Von Rudlof E. Infrared spectra of natural products // Flavour and Fragrance Journal.- 1985.-V. 1.-P. 33-35.

275. Wang C. Determination of aromaticity indices of coal liguids by infrared spectroscopy//Fuel.- 1987.- V. 66.- №6.- P. 840-843.

276. Yamaguchi K. Spectral Data of natural products. V. 1. - N.-Y. - 1970. -435p.