автореферат диссертации по приборостроению, метрологии и информационно-измерительным приборам и системам, 05.11.13, диссертация на тему:Проточная система для цитометрирования фитопланктона в природных водных средах

ВВЕДЕНИЕ.

1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ ЦИТОМЕТРИИ ФИТОПЛАНКТОНА.

1.1. Анализ существующих методов исследования фитопланктона в природных водных средах.

1.2. Неоптические методы.

1.3. Кондуктометрические методы определения содержания планктона в воде.

1.3.1. Подсчёт импульсных возмущений кажущегося сопротивления.

1.3.2. Интегральное определение массы планктона.

1.4. Кондуктометрическое цитометрирование в клинико-лабораторной практике.

1.5. Оптические методы.

1.5.1. Флуориметрическое цитометрирование фитопланктона.

1.5.2. Инфоструктурная модель технологической процедуры проточного флуориметрического цитометрирования взвесей клеток фитопланктона.

1.6. Постановка цели и задач исследования.

2. ПРИНЦИПЫ РАЗРАБОТКИ ЦИТОМЕТРА ДЛЯ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА.

2.1. Кондуктометрическое цитометрирование взвесей клеток фитопланктона.

2.2. Характеристики флуоресценции фитопланктона.

2.3. Особенности цитометрирования клеток фитопланктона на основании флуоресценции хлорофилла.

Выводы.

3. СИСТЕМА ДЛЯ ПРОТОЧНОГО ЦИТОМЕТРИРОВАНИЯ ВЗВЕСЕЙ КЛЕТОК ФИТОПЛАНКТОНА.

3.1. Обобщённая структура двухканальной системы для проточного цитометрирования фитопланктона.

3.2. Структура кондуктометрического канала цитометра.

3.2.1. Режим истечения и поле скоростей в апертуре кондуктометрического датчика.

3.2.2. Разрешающая способность датчиков системы при определении концентрации частиц.

3.3. Оптическая схема флуориметрического канала цитометра.

3.4. Энергетический расчёт флуориметрического канала цитометра.

3.5. Программа обработки данных, получаемых с датчиков проточной системы для цитометрирования фитопланктона.

Выводы.

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ВЗВЕСЕЙ

КЛЕТОК ФИТОПЛАНКТОНА.

4.1. Исследование лабораторных культур фитопланктона с использованием кондуктометрического канала цитометра.

4.2. Цитометрирование фитопланктона с применением флуориметрического и кондуктометрического датчиков цитометра.

4.3. Цитометрирование взвеси клеток фитопланктона с использованием флуориметрического канала цитометра.

4.4. Инфоструктурная модель технологической процедуры проточного цитометрирования взвеси клеток фитопланктона на системе с кондуктометрическим и флуориметрическим датчиками.

Выводы.

Актуальность проблемы. Роль фитопланктона (ФП) имеет существенное значение при определении состояния водных экосистем. Наиболее показательные компоненты ФП, их количество и биомасса используются при биологическом анализе физиологического состояния и гидробиологической производительности водных сред. Фитопланктон непосредственно или через промежуточные звенья пищевых цепей служит источником питания многих промысловых животных: кальмаров, рыб, китов и др. ФП является индикатором состояния водоемов. Именно поэтому его изучение имеет большое значение для определения продуктивности и экологического состояния водных экосистем.

В настоящее время известны методы, при помощи которых можно оценить биомассу, а также провести таксонометрический анализ ФП, но в большинстве своём они не оперативны, а таксонометрический анализ в основном производится визуально - при помощи микроскопа.

В 70-х годах 20-го века были попытки использования кондуктометриче-ских цитометров для автоматизации цитометрирования ФП. Методы основаны на явлении изменения сопротивления при прохождении в измерительном капилляре диэлектрических частиц. Недостатком метода является невозможность выделения сигналов, относящихся к клеткам ФП из последовательности сигналов от других частиц взвеси (зоопланктон, детрит, минеральная взвесь, пузырьки воздуха). Это приводит к низкой точности цитометрирования проб природных вод, особенно это относится к загрязненным районам, где концентрация посторонней взвеси даже в фотиче-ской зоне может во много раз превышать концентрацию фитопланктона. Поэтому интенсивно велся поиск методов цитометрирования с использованием характеристик, присущих клеткам живого ФП. Развитие флуори-метрической проточной цитометрии при решении медико-биологических задач в 70-80 гг. подтолкнуло исследователей к использованию данных методов в цитометрии фитопланктона. Действительно, живые клетки фитопланктона флуоресцируют в красной области спектра. Эта флуоресценция обусловлена молекулами хлорофилла, содержащимися в клеточном хлоропласте, что, в принципе, позволяет регистрировать клетки фитопланктона по их собственной флуоресценции. В тоже время, определение размеров клеток ФП непосредственно по интенсивности флуоресценции хлорофилла, содержащегося в клетках хлорофилла с применением существующих методик до сих пор носило лишь качественный характер. Причиной тому служило отсутствие методов учета факторов, влияющих на интенсивность флуоресценции хлорофилла в составе клетки фитопланктона. В последнее время была разработана оптическая модель клетки фитопланктона, которая, как было экспериментально показано, позволяет определить концентрацию клеточного хлорофилла на основании интенсивности его флуоресценции "in situ". Это создает предпосылки для решения задачи экспрессного флуориметрического проточного цитометрирования ФП, при выполнении условия постоянства соотношения между размерами клетки и количеством содержащегося в ней флуоресцирующего хлорофилла. Однако до сих пор эта задача не была решена. На основании изложенного, актуальной является разработка проточного цитометра и методик, позволяющих проводить экспрессное определение числа и размеров клеток фитопланктона в исследуемых пробах в присутствии посторонних частиц взвеси.

В настоящее время за рубежом серийно производится значительное количество проточных флуориметрических и кондуктометрических цито-метров. Следует особо отметить, что разрабатываемые приборы предназначены для биомедицинских лабораторных исследований. Производством этих систем заняты такие фирмы, как Becton Dickinson, Coulter Electronics, PARTEC и другие.

Целью диссертационной работы является повышение точности определения характеристик морского и пресноводного фитопланктона в природных водных средах с помощью проточного цитометра за счёт совместного использования в его составе кондуктометрического и флуориметрического измерительных каналов.

Задачи, решённые при проведении исследования:

1. Разработана двухканальная система для проточного цитометрирова-ния взвесей ФП, включающей в себя кондуктометрический и флуориметрический измерительные каналы;

2. Разработан метод определения количества клеток ФП на основании данных флуориметрического канала и определением размеров клеток по изменению сопротивления в межэлектродном пространстве кюветы кондуктометрического канала;

3. Разработан метод определения количества и размеров клеток ФП на основании данных флуориметрического канала;

4. Разработана методика пробоподготовки взвесей клеток морского и пресноводного ФП, включающая рекомендации по световой адаптации ФП, концентрации солевого раствора, оптимальной концентрации клеток и др.;

5. Проведены экспериментальные исследования разработанной системы и методов, подтвердившие их работоспособность и обеспечивших повышение точности цитометрирования ФП в пробах воды, содержащих посторонние примеси.

Методы исследования. Теоретические и практические разделы диссертации разработаны с применением теории синтеза биотехнических систем, методов кондуктометрической цитометрии и флуориметрии клеток ФП, методов оптимизации параметров спектральных оптикоэлектронных приборов, методами математической обработки экспериментальных данных и математической статистики.

Экспериментальные исследования проводились в Санкт-Петербургском государственном электротехническом университете "ЛЭ-ТИ" и базировались на применении разработанной системы с флуоримети-ческим и кондуктометрическим каналами для проточного цитометрирова-ния взвесей ФП.

Теоретическая значимость исследования. В диссертационном исследовании впервые: показана возможность совместного использования кон-дуктометрического и флуориметрического измерительных преобразователей для цитометрии ФП; определены условия и средства, необходимые для проведения экспресс-исследований взвесей клеток ФП. Полученные научные данные обогащают арсенал методов определения количества клеток ФП во взвеси и повышают точность определения размеров клеток.

Научная новизна работы в целом заключается в использовании нового принципа построения системы для проточного цитометрирования взвесей ФП и методов проведения цитометрирования с использованием современных способов получения количественных данных о клетках фитопланктона на основании флуоресценции клеточного хлорофилла. Наиболее важными новыми результатами работы являются: разработка двухканальной системы для проточного цитометрирования взвесей ФП, включающей в себя кондуктометрический и флуори-метрический измерительные каналы;

- метод определения количества клеток ФП на основании данных флуориметрического канала и определением размеров клеток по изменению сопротивления в межэлектродном пространстве кюветы кондуктомет-рического канала;

- метод определения количества и размеров клеток ФП на основании данных флуориметрического канала;

- методика пробоподготовки взвесей клеток морского и пресноводного ФП, включающая рекомендации по световой адаптации ФП, концентрации солевого раствора, оптимальной концентрации клеток и др. ;

- экспериментальные результаты исследования разработанной системы и методов, подтвердившие их работоспособность и обеспечивших повышение точности цитометрирования ФП в пробах воды, содержащих посторонние примеси.

Практическая значимость исследования. Разработанная методика позволяет повысить точность определения размеров клеток ФП. Значительно повышена скорость проведения исследований взвесей клеток. Выполненное исследование способствует совершенствованию методов исследований природных водных сред. Результаты исследования могут быть использованы: в процессе обучения студентов на кафедрах, готовящих специалистов для организаций медицинского и экологического профиля, в курсе лекций по медицинской и экологической электронной техники. Практическое значение полученных результатов

Использование средств и методов проточного цитометрирования фитопланктона, изложенных в диссертации, позволяет проводить экспрессный мониторинг водоемов. Они обеспечивают более быстрое получение информации о таких важных для оценки экологического состояния водоемов и их продуктивности параметрах как величина первичной продукция и биомасса на первом трофическом уровне. Научное и практическое значение для экологии водных систем, океанологии и лимнологии имеют:

- принципы построения биотехнической системы и конкретные технические решения, использованные при создании аппаратуры для проточного цитометрирования взвесей клеток морского и пресноводного ФП;

- метод определения количества клеток ФП на основании данных флуо-риметрического канала и определением размеров клеток по изменению сопротивления в межэлектродном пространстве кюветы кондуктомет-рического канала;

- метод определения количества и размеров клеток ФП на основании данных флуориметрического канала;

- методики пробоподготовки взвесей клеток морского и пресноводного ФП, включающая рекомендации по световой адаптации ФП, концентрации солевого раствора, оптимальной концентрации клеток и др.

В этой связи, нами сформулированы условия, необходимые для проточного анализа одиночных клеток ФП в задачах экологических исследований. Предложена конструкция проточной системы для цитометрирова-ния ФП, а также конструкция проточной кюветы для флуориметрического датчика цитометра. Проведён анализ взаимодействия сигналов и помех, а также факторов, влияющих на интенсивность флуоресценции, что позволило определить оптимальные параметры трактов возбуждения и регистрации флуоресценции клеток.

В настоящее время данный прибор является единственным известным проточным цитометром с двумя датчиками (кондуктометрический и флуориметрический), предназначенным как для исследования морских проб, так и для цитометрии ФП прибрежных вод и пресных водоёмов.

Достоверность научных положений и выводов определяется методологической обоснованностью общего замысла исследования, выбором эмпирических средств, адекватных цели и объекту исследования, сочетанием качественного и количественного анализа собранных данных, адекватным использованием методов математической статистики для количественного сравнения экспериментальных данных.

Обработку информации, получаемой при проточном цитометрирова-нии ФП, принято подразделять на первичную и вторичную. При первичной обработке мы будем оценивать клетки по анализируемым параметрам (интенсивность флуоресценции, изменение сопротивления при прохождении частиц в измерительном капилляре, количеству клеток). При этом, оценка изменения сопротивления в микронном измерительном капилляре кондуктометр ического датчика и оценка интенсивности флуоресценции в оптическом датчике цитометра будут осуществляться амплитудными методами.

Основные результаты диссертации нашли отражение в 9 печатных работах (в том числе в свидетельстве на полезную модель и свидетельстве о государственной регистрации программы для ЭВМ). Основные положения представлялись и обсуждались:

- на научно-технических конференциях профессорско-преподавательского состава 1999-2001 годов;

- на международной конференции "Измерительные информационные технологии и приборы в охране здоровья" МЕТРОМЕДЛ99;

- на межвузовской научной конференции "Проблема развития в гуманитарном и социально-экономическом знаниип,99;

- на научной конференции "Четвёртой Санкт-Петербургской ассамблеи молодых учёных и специалистов""99;

- на научной конференции "Проблемы научного и технического творчества и системы культуры""2000;

- в заявке на полезную модель №2000132619/20(034567), МПК 7 001 N27/27.

- в депонированной печатной работе 2002 год;

- в статье в сборнике научных трудов «Биотехнические системы в медицине и биологии», 2002 год;

- в заявке на официальную регистрацию программы для ЭВМ №2002610282;

- на научно-практической конференции «Медицинские информационные системы»

Основной материал диссертации изложен в четырёх главах.

В первой главе приведены систематизация и анализ основных подходов к определению первичной продукции, биомассы и размеров клеток ФП, а также определён возможный путь их оптимизации. Показано, что проточная цитометрия ФП на основании флуоресценции ДНК и РНК специфичных зондов обладает практически идеальными для продукционных исследований свойствами по сравнению с другими методами - высокой чувствительностью, специфичностью, автоматизацией всех этапов исследования. Но, при этом, для данного метода характерно значительное время анализа, связанное с длительной пробоподготовкой. Поэтому актуальной является задача разработки нового варианта проведения проточного цито-метрирования ФП, который позволил бы, в первую очередь, значительно сократить время анализа, а во вторую - получать достоверные данные о размерах клеток ФП прибрежных зон и пресных водоёмов. На основании анализа путей оптимизации метода проточной цитометрии для исследования ФП сформулированы основные задачи исследования, решённые в данной диссертационной работе.

Во второй главе рассмотрены принципы разработки проточного ци-тометра для экологических продукционных исследований. Предложены подходы к кондуктометрическому и флуориметрическому цитометриро-ванию ФП. Предложены зависимости, необходимые для определения количества и размеров клеток на проточной системе с двумя измерительными каналами.

В третьей главе рассматриваются методы построения и аппаратура для проведения исследований. Определён режим истечения в измерительных капиллярах системы. Проведён энергетический расчёт флуориметри-ческого блока цитометра. Проведён анализ сигналов и помех, возможных при проведении флуориметрического цитометрирования. Оценена интенсивность собственной флуоресценции одиночных клеток ФП. Проведённые теоретические расчёты позволили сделать вывод о возможности проведения цитометрования ФП на основании собственной флуоресценции. Представлена оптическая схема флуориметрического блока цитометра, синтезированная с учётом расчётов и определены режимы работы системы для проточного цитометрирования взвеси ФП. Выявлены оптимальные параметры оптической схемы флуориметрического блока цитометра. Разработана проточная кювета флуориметрического блока. Описана разработанная программа для обработки данных, поступающих с измерительных каналов проточной системы.

В четвёртой главе приведены результаты исследований, проведённых на основе разработанной системы. Определена чувствительность кон-дуктометрического и флуориметрического каналов, предложена методика пробоподготовки, позволяющая проводить проточное цитометрирование взвеси ФП. Апробированы три возможных варианта использования двух-канальной системы для проточного цитометрирования морского и пресноводного фитопланктона, а также многокомпонентных взвесей, содержащих помимо фитопланктона зоопланктон и детрит. Проведён анализ данных, полученных с использованием разработанной системы.

Научные положения, выносимые на защиту:

1. Принципы построения двухканальной система для проточного цитометрирования взвесей ФП, включающей в себя кондуктометрический и флуориметрический измерительные каналы, позволяющей повысить точность цитометрирования ;

2. Метод проточного цитометрирования взвесей ФП на основании данных флуориметрического и кондуктометрического датчиков, с определением количества клеток ФП по данным флуориметрического канала и определением их размеров по данным кондуктометрического канала;

3. Метод проточного цитометрирования ФГ1 с определением количества клеток и их размеров по данным флуориметрического канала.

Выводы

1. Предложена и разработана система для двухканального проточного цитометрирования клеток фитопланктона;

2. Разработана методика пробоподготовки, позволяющая проводить проточное цитометрирование взвесей клеток фитопланктона в предлагаемой системе;

3. Разработаны рекомендации по повышению интенсивности флуоресценции клеток без использования химических реактивов;

4. Проведённые исследования взвесей пресноводного и морского фитопланктона подтвердили справедливость теоретических выводов, полученных в настоящей работе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В процессе исследования мы исходили из положения о том, что одностороннее использование проточной флуориметрической или кондуктометрической цитометрии для исследования ФП затруднено, ввиду влияния на точность определения диаметров флуориметрическим каналом таких факторов как освещёность, содержание химических веществ в воде и того, что подобные объекты исследования содержат зоопланктон, детрит и частицы минеральной взвеси. Введение в систему цитометрии фитопланктона двух каналов даёт возможность выделения сигналов от клеток фитопланктона из последовательности импульсов всех непроводящих частиц, находящихся во взвеси и в тоже время точного определения диаметров исследуемых частиц.

С целью проверки истинности данного предположения было проведено экспериментальное исследование, состоящее из трех этапов. На первом этапе были систематизированы основные подходы к определению первичной продукции, биомассы и размеров клеток фитопланктона, а также определён возможный путь их оптимизации. Показаны положительные и отрицательные стороны проточной цитометрии клеток фитопланктона на основании флуоресценции ДНК и РНК специфичных зондов. Опираясь на результаты анализа, сформированы основные задачи исследования.

На втором этапе получены зависимости, необходимые для проточного цитометрирования взвесей ФП, позволяющие получить информацию о распределении количества клеток по диаметрам. Кроме того, был проведён энергетический расчёт флуориметрического канала цитометра. Проведённые расчёты позволили сделать вывод о возможности проведения цитометрования клеток фитопланктона на основании собственной флуоресценции. Представлена оптическая схема флуориметрического канала цитометра, синтезированная с учётом расчётов, определены режимы работы двухканальной системы для проточного цитометрирования взвеси клеток фитопланктона. Выявлены оптимальные параметры оптической схемы флуориметрического канала цитометра. Разработана проточная кювета флуориметрического канала. Разработана программа обработки данных, получаемых на проточной системе.

На третьем этапе анализировались результаты экспериментальных исследований, проведённых на основе разработанной системы. Определены требования к измерительным каналам системы. Сформулированы требований к буферному раствору и предложена методика пробоподготовки, позволяющая проводить проточное цитометрирование взвеси ФП. Проведён анализ данных, полученных с использованием разработанной системы.

Таким образом, основная задача исследования, связанная с разработкой нового способа экспресс-анализа взвесей ФП на основе проточного цитометрирования, решена. При этом не только исследованы методические особенности использования предложенного метода, но и разработаны необходимые технические средства, отсутствовавшие ранее, а также специальные методики использования этих средств при проведении экспериментов.

Основными результатами исследований являются:

1. Разработана двухканальная система для проточного цитометрирования взвесей ФП, включающей в себя кондуктометрический и флуори-метрический измерительные каналы;

2. Разработан метод определения количества клеток ФП на основании данных флуориметрического канала и определением размеров клеток по

129 изменению сопротивления в межэлектродном пространстве кюветы кондуктометрического канала;

3. Разработан метод определения количества и размеров клеток ФП на основании дан-ных флуориметрического канала;

4. Разработана методика пробоподготовки взвесей клеток морского и пресноводного ФП, включающая рекомендации по световой адаптации ФП, концентрации солевого раствора, оптимальной концентрации клеток и др.;

5. Проведены экспериментальные исследования разработанной системы и методов, подтвердившие их работоспособность и обеспечивших повышение точности цитометрирования ФП в пробах воды, содержащих посторонние примеси.

Практические результаты работы показали, что разработанная система для экспресс-исследований проб, содержащих клетки фитопланктона позволяет сократить время анализа с 3,5 часов до 15 минут за счёт введения кондуктометрического блока.

1. Воронихин Н.Н. О содержании понятия "планктон" // Советская ботаника, 1940, N2, с. 100-102.

2. Скабичевский А.П. Об объёме понятия "планктон" и "планктонный организм" // Советская ботаника, 1939, N4, с.23-33.

3. Киселёв И.А. Планктон морей и континентальных водоёмов. Т.1. Ленинград: Наука, 1969.-658 с.

4. Barthelmes D. Zur Abgrenzung des Planktons von den Nachbarbiocoenosen // Z. Fischerei, 1957, 6, s. 441-452.

5. Богоров В.Г. Планктон мирового океана. Москва: Наука, 1974.-320 с.

6. Раймонт Дж. Э. Дж. Планктон и продуктивность океана: Т.1. Фитопланктон. Москва: Лёгкая и пищевая промышленность, 1983.-568 с.

7. Гиляров М.С. Биологический энциклопедический словарь. Москва: Советская Энциклопедия, 1986 год, с. 476.

8. Винберг Г.Г. Продуктивность и охрана морских и пресных водоёмов. Москва: Наука, 1989.-135 с.

9. Зуев Г.В., Овчаров О.П. Продуктивность экваториальной Атлантики. Киев: Наукова думка, 1990.-225 с.

10. Ю.Винберг Г.Г. Продукционнобиологические исследования экосистем пресных вод. Минск: Изд-во БГУ, 1973.-207 с.

11. П.Ковалевский А.О. Первичная и вторичная продукция морских организмов. Киев: Наукова думка, 1982.-195 с.

12. Попечителев Е.П., Старцева О.Н. Аналитические исследования в медицине, биологии и экологии. Санкт-Петербург: Изд-во СПбГЭТУ/ЛЭТИ/, 1999.- 80с.

13. Яшнов В.А. Новая модель волюмометра для быстрого и точного определения объёма планктона в экспедиционных условиях // Зоологический журнал, 1959, XXXVIII, 11, с. 1741-1743.

14. Н.Константинов A.C. Общая гидробиология. Москва: Высшая школа, 1986,- 469 с.

15. Фёдоров В.Д. О методах изучения фитопланктона и его активности. Москва: Изд-во Московского университета, 1979.- 167 с.

16. Кузнецов A.JI. Фитопланктон. Контроль Экологической ситуации в районе опытно-промышленной плантации водорослей в губе Дальнезеленецкая. Апатиты, 1988.- 50 с.

17. Бардан С.И., Дружков Н.В., Бобров Ю.А. Комплексный экологический мониторинг в губе Дальнезеленецкая (Баренцево море): Зимне-Весенний период 1987-1988 гг., Апатиты, 1989.- 41с.

18. Винберг Г.Г. Первичная продукция водоёмов. Минск: Изд-во АН СССР, 1960.-329 с.

19. Методическое пособие по определению органического вещества в водоёмах радиоуглеродным методом. Минск: Изд-во БГУ, 1960, 27 с.

20. Годнев Т.Н. Строение хлорофилла и методы его количественного определения. Минск: Изд-во АН БССР, 1952.- 164 с.

21. Беляев Б.И., Ковалёв A.A. и др. Оптические методы дистанционной • диагностики эвтрофирования озера Лукомского. Минск: Изд-во БГУ, 1994.- 57 с.

22. Галазий Г.И. Оптические методы изучения океанов и внутренних водоёмов. Новосибирск: Наука, Сибирское отделение, 1979.- 372 с.

23. Межерис P.M. Лазерное дистанционное зондирование. Москва: Мир, 1987,- 550 с.

24. Кондратьев К .Я. Комплексный дистанционный мониторинг озёр. Ленинград: Наука, 1987,- 288 с.

25. Yentsch СМ.: Environmental Health: flow cytometric methods to assess our water world. In: Darzynkiewicz Z. and HA. Crissman eds. Methods in cell biology, volume 33: Flow cytometry. Academic Press, 1990.

26. Olson, R.J., E.R. Zettler, S.W. Chisholm and J.A. Dusenberry. Advances In Oceanography Through Flow Cytometry. In S. Demers & M. Lewis (eds.) Particle Analysis in Oceanography, Springer-Verlag Heidelberg Berlin, 351399. 1991

27. Rivkin RB., DA. Phinney and CM. Yentsch: Effects of flow cytometric analysis and cell sorting on photosynthetic carbon uptake by phytoplankton in cultures and from natural populations. Applied and Environmental Microbiology 52(4):935-938,1986.

28. Haugen EM, Cucci TL, Yentsch CM and LP Shapiro: Effects of flow cytometric analysis on morphology and viability of fragile phytoplankton. Appl. Environ. Microbiol. 53(11):2677-2679,1987.

29. Peeters, J.C.H., Dubelaar, G.BJ., Ringelberg, J. and Visser, J.W.M. (1989). The optical plankton analyser (OPA): a flow cytometer for plankton analysis, I: Design considerations. Cytometry 10, 522-528.

30. Olson, R.J., S.L. Frankel, S.W. Chisholm and H.M. Shapiro. An inexpensive flow cytometer for the analysis of fluorescence signals in phytoplankton: Chlorophyll and DNA distributions. J. Exp. Mar. Biol. Ecol., 68:129-144. 1983

31. Cunningham, A.: Fluorescence pulse shape as a morphological indicator in the analysis of colonial microalgae by flow cytometry. Journal of Microbial Methods 11:27-36,1990.

32. Cunningham, A.: A low-cost portable flow cytometer specifically designed for phytoplankton analysis. J Plankton Res 12(1): 149-160,1990.

33. Frankel, S.L., B.J. Binder, H.M. Shapiro, and S.W. Chisholm. A high-sensitivity flow cytometer for studying picoplankton. Limnol. Oceanogr. 35(5):1164-1169. 1990

34. Hueller, R., S. Schmidlechner, E. Glossner, S. Schaub and V. Kachel: A macro flow planktometer for analysis of large marine plankton organisms. Cytometry Supplement 5:53, 1991.

35. Balfoort, H.W., Berman Th., Maestrini S.Y., Wenzel A., and T. Zohary (1992). Flow cytometry: instrumentation and application in phytoplankton research. Hydrobiologia 238,89-97

36. Dubelaar, G.B.J., Groenewegen, A.C., Stokdijk, W., van den Engh, G.J. and Visser, J.W.M. (1989). The optical plankton analyser (OPA): a flow cytometer for plankton analysis, II: Specifications. Cytometry 10, 529-539.

37. Dubelaar GBJ and Van der Reijden CS: Size distributions of Microcystis aeruginosa colonies: a flow cytometric approach. Water Science and Technology, 32, 4, 171-176, 1995

38. Bloem J, Bär-Gilissen M-JB and TE Cappenberg: Fixation, counting and manipulation of heterotrophic nanoflagellates. Appl. Environ. Microbiop. 52(6): 1266-1272,1986.

39. Pomponi, S.A. and T.L. Cucci. 1989. Separation and concentration of phytoplankton populations using centrifugal elutriation. Cytometry 10: 580586.

40. Dubelaar, G.B.J., Visser, J.W.M. and Donze, M. (1987). Anomalous behaviour of forward and perpendicular light scattering of a cyanobacterium owing to intracellular gasvacuoles. Cytometry 8, 405-412.

41. Morel A.: Optics of marine particles and marine optics. In: Particle analysis in oceanography (S. Demers Ed.). NATO ASI Series, G: Ecological Sciences, Vol. 27, 1991, Springer-Verlag Berlin Heidelberg.

42. Hull HM, Hoshaw RW, and Wang J-C: Cytofluorometric determination of nuclear DNA in living and preserved algae. Stain Technology 57(5):273-282,1982.

43. Edvardsen B. and Vaulot D. Ploidy analysis of the two motile forms of Chrysochromulina polylepis (Prymnesiophyceae) Journal of Phycology. 32: 94-102. 1996

44. Ward BB. and Perry MJ: Immunofluorescent assay for the marine ammonium-oxidizing bacterium Nitrosococcus oceanus. Applied and Environmental Microbiology 39(4):913-918,1980.

45. Campbell L, Carpenter EJ, and Iacono VJ: Identification and enumeration of marine chroococcoid cyanobacteria by immunofluorescence. Applied and Environmental Microbiology 46(3):553-559,1983.

46. Shapiro, L. P., L. Campbell, and E. M. Haugen, Immunochemical recognition of phytoplankton species, Mar. Ecol. Prog. Ser., 57, 219-224, 1989.

47. Yentsch CM: Flow cytometric analysis of cellular saxitoxin in the dinoflagellate Gonyaulax-tamarensis-var-excavata. Toxicon 19(5):611-622,1981.

48. Yentsch, C.M., F.C. Mague and P.K. Horan (eds.), Immunochemical approaches to coastal, estuarine and oceanographic questions. SpringerVerlag, New York, pp. 184-193, 1988

49. Vesey G.P. et al., 1994. Detection of specific microorganisms in environmental samples using flow cytometry. Meth. Cell Biol. 42, 489-522.

50. Vrieling E.G. and M. Anderson: Immunofluorescence in phytoplankton research: applications and potential. J. Phycol. 32, 1-16, 1996

51. Yentsch CM, Mague FC, Horan PK and K Muirhead: Flow cytometric DNA determinations on individual cells of the dinoflagellate Gonyaulax-tamarensis-var-excavata. J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 67(2): 175-184,1983.

52. Bonaly J, Bre MH, Lefort-Tran M and JC Mestre: A flow cytometric study of DNA staining in-situ in exponentially growing and stationary Euglena-gracilis. Cytometry 8(1 ):42-45,1987.

53. Boucher N, Vaulot D and F Partensky: Flow cytometric determination of phytoplankton DNA in cultures and oceanic populations. Mar. Ecol. Prog. Ser. 7l(l),75-84,1991.

54. Marie, D., Partensky, F, Vaulot, D. Application of the novel DNA dyes YOYO-1, YOPRO-1 and Picogreen for flow cytometric analysis of marine prokaryotes. Applied and Environmental Microbiology 62: 1649-1655, 1996

55. Li WKW: Composition of ultraphytoplankton in the central North Atlantic. MEPS 122:1-8 (1995)

56. Marie, D., Partensky, F., Jacquet S., Vaulot, D. Enumeration and cell cycle analysis of natural populations of marine picoplankton by flow cytometry using the nucleic acid stain SYBR Green I. Applied and Environmental Microbiology 63: 186-193, 1997

57. Pan, Y. and A. D. Cembella, 1996. Comparison of the three Green-Fluorescing DNA stains in flow cytometric studies of growth rates and cell cycles of dinoflagellates and diatoms. Can. Tech. Rep. Fish. Aquat. Sei. 2138:150 152.

58. Veldhuis M.J.W., Cucci T.L., Sieracki M.E. 1997. Cellular DNA content of marine phytoplankton using two new fluorochrom.es: taxonomic and ecological implications. J. Phycol. 33: 527-41.

59. Del Giorgio, P. Bird, D.F., Prairie, Y.T. and Planas, D. (1996) The flow cytometric determination of bacterial abundance in lake plankton using the nucleic acid stain SYTO 13. Limnol.Oceanog. 41, 783-789.

60. Yee MC and Bartholomew JC: Light regulation of the cell cycle in Euglena gracilis bacillaris. Cytometry 9 (4), 387-93, 1988.

61. Lefort T.M., Bre M.H., Pouphile M. and Manigault P.: DNA flow cytometry of control Euglena and cell cycle blockade of vitamin B12-starved cells. Cytometry 8 (1), 46-54, 1987.

62. Brzezinski MA, Olson RJ and SW Chisholm: Silicon availability and cell-cycle progression in marine diatoms. Mar. Ecol. Prog. Ser. 67(1),83-96,1990.

63. Amann, R.I., B.J. Binder, R.J. Olson, S.W. Chisholm, R. Devereux, and D.A. Stahl. Combination of 16S rRNA-targeted oligonucleotide probes with flowcytometry for analyzing mixed microbial populations. Appl. Env. Microbiol. 5 6(6): 1919-1925. 1990

64. Simon N., Le Bot N., Marie D., Partensky F., Vaulot D. Fluorescent in situ hybridization with rRNA-targeted probes for identifying small phytoplankton by flow cytometry. Applied Environmental Microbiology 61: 2506-2513. 1995

65. Knauber, D.C., Berry, E.S. and Fawley, M.W. (1996) Ribosomal RNA-based oligonucleotide probes to identify marine green ultraphytoplankton. J. Euk. Microbiol. 43(2):89-94.

66. Lange, M., Guillou, L., Vaulot, D., Simon, N., Amann, R., Ludwig, W., Medlin, L.K. Identification of the class Prymnesiophycae and the genus Phaeocystis with rRNA-targeted nucleic acid probes. Journal of Phycology 32: 858-868, 1996

67. Li WKW and AM Wood: Vertical distribution of northern atlantic ultraphytoplankton analysis by flow cytometry and epifluorescence microscopy. Deep-Sea Res. Part A Oceanogr. Res. Pap. 35(9): 16151638,1988.

68. Yentsch CS, and CM. Yentsch: Fluorescence spectral signatures: the characterization of phytoplankton populations by the use of excitation and emission spectra, J. Mar. Res.37:471-483,1979.

69. Yentsch C.M. and S.A. Pomponi: Automated individual cell analysis in aquatic research. Int. Rev. Cytol. 105: 183-243, 1986.

70. Olson RJ., Zettler ER. and OK. Anderson: Discrimination of eukaryotic phytoplankton cell types from light scatter and autofluorescence properties measured by flow cytometry. Cytometry 10(5):636-644,1989.

71. Hofstraat J.W., Zeijl van W.J.M., Vreeze de, M.E.J., Peeters J.C.H., Peperzak L., Colijn F. and Rademaker, T.W.M., Phytoplankton monitoring by flow cytometry, J. of Phytoplankton Res. vol 19., no.9, 1197-1224, 1994.

72. Blanchot J, Rodier M (1996). Picophytoplankton abundance and biomass in the western tropical Pacific Ocean during the 1992 El Nino year: Results from flow cytometry. Deep-Sea Research Part I, Oceanographic Research Papers 43: 877-895

73. Binder, B.J., S.W. Chisholm, R.J. Olson, S.L. Frankel, and A.Z. Worden. Dynamics of Pico-phytoplankton, Ultra-Phytoplankton, and Bacteria in the Central Equatorial Pacific. Deep-Sea Res. II 43:907-931. 1996

74. Veldhuis MJW and GW Kraay: Vertical distribution and pigment composition of a picoplanktonic prochlorophyte in the subtropical North Atlantic: a combined study of HPLC-analysis and flow cytometry. Mar. Ecol. Prog. Series 68(1-2),121-127,1990.

75. Tarran, G.A, & Burkill, P.H. (1993). Flow Cytometry at Sea. In: Flow Cytometry in Microbiology. Ed: D A Lloyd. Springer-Verlag, London, pp 143- 158.

76. Burkill, P.H.: Shipboard flow cytometry: Sea-trials and analysis and sorting of photosynthetic picoplankton in the Celtic Sea. XII int. SAC meeting. Cytometry, Supplement 1,643,1987.

77. Olson, R.J., D. Vaulot and S.W. Chisholm. Marine phytoplankton distributions measured using shipboard flow cytometry. Deep-Sea Res., 10:1273-1280. 1985

78. Li WKW.: Shipboard analytical flow cytometry of oceanic ultraphytoplankton. Cytometry 10(5):564-580, 1989.

79. Simon N., Le Bot N., Marie D., Partensky F., Vaulot D. Fluorescent in situ hybridization with rRNA-targeted probes for identifying small phytoplankton by flow cytometry. Applied Environmental Microbiology 61: 2506-2513. 1995

80. Subba Rao, D.V., F. Partensky, G. Wohlgeschaffen, and W.K.W. Li. 1991. Flow cytometry and microscopy of gametogenesis in Nitzschia pungens, a toxic, bloom-forming, marine diatom. J. Phycol. 27: 21-26.

81. Campbell, L, Hongbin, L., Nolla, H.A., Vaulot, D. Annual variability of phytoplankton and bacteria in the subtropical North Pacific at station ALOHA during the 1991-1994 ENSO event. Deep-Sea Research 44: 167192.1997

82. Olson, R.J., S.W. Chisholm, E.R. Zettler, M.A. Altabet, and J.A. Dusenberry. Spatial and temporal distributions of prochlorophyte picoplankton in the North Atlantic Ocean. Deep Sea Research 37(6): 1033-1051. 1990

83. Partensky, F., Blanchot, J., Lantoine, F., Neveux, J., Marie, D. Vertical structure of picophytoplankton at different trophic sites of the subtropical northeastern Atlantic ocean. Deep-Sea Res. 43: 1191-1213. 1996

84. Shimada, A., T. Hasegawa, I. Umeda, N. Kadoya and T. Maruyama (1993) Spatial mesoscale patternw of West Pacific picophytoplankton as analyzedby flow cytometry: their contribution to subsurface chlorophyll maxima. Mar. Biol., 115:209-215.

85. Shimada, A., M. Nishijima and T. Maruyama (1995) Seasonal appearance of Prochlorococcus in Suruga Bay, Japan in 1992-1993. J. Oceanogr., 51: 291302

86. Vaquer A., Troussellier M., Courties C., Bibent B. 1996. Standing stock and dynamics of picophytoplankton in the Thau lagoon (northwest Mediterranean coast). Limnology & Oceanography 41: 1821-1828.

87. Vaulot D, Partensky F, Neveux J, Mantoura FFC and CA Llewellyn: Winter presence of prochlorophytes in surface waters of the northwestern Mediterranean Sea. Limnology and Oceanography 35(5): 1156-1164,1990.

88. Binder, B.J. & S.W. Chisholm. Cell Cycle Regulation in Marine Synechococcus. Appl. Env. Micro. 61(2):708-717. 1995

89. Van Bleijswijk J.D.L. , E.S. Kempers, M.J. Veldhuis, P. Westbroek, Cell and growth characteristics of types A and B of Emiliania huxleyi (Prymnesiophyceae) as determined by flow cytometry and chemical analysis. Journal of Phycology 30 (1994) 230-241

90. VanBleijswijk, J. D. L., & M.J.W. Veldhuis (1995). "In situ gross growth rates of Emiliania huxleyi in enclosures with different phosphate loading revealed by diel changes in DNA content." Mar. Ecol. Prog. Ser. 121: 271 -277.

91. Dorsey, J., C.M. Yentsch, S. Mayo, and T.L. Cucci. 1989. Rapid analytical technique for the assessment of cell metabolic activity in marine microalgae. Cytometry 10: 622-628.

92. Jellett, J.F., W.K.W. Li, P.M. Dickie, A. Boraie and P.E. Kepkay. 1996. Metabolic activity of bacterioplankton communities assessed by flow cytometry and single carbon substrate utilization. Mar. Ecol. Prog. Ser. 136: 213-225.

93. Jellett, JF, Li, WKW, Dickie, PM, Boraie, A, Kepkay PE. 1996. Metabolic activity of bacterioplankton communities assessed by flow cytometry and single carbon substrate utilization. Mar. Ecol.Prog. Ser.

94. Armbrust, E.V., J.D. Bowen, R.J. Olson, and S.W. Chisholm. Effect of light on the cell cycle of a marine Synechococcus strain. Appl. Env. Microbiol. 55(2):425-432, 1989

95. Armbrust, E.V., R.J. Olson, and S.W. Chisholm. Role of light and the cell cycle on the induction of spermatogenesis in a centric diatom. J. Phycol. 26:470-478. 1990

96. Gerath MW, Chisholm SW: Change in photosynthetic capacity over the cell cycle in light-dark-synchronized Amphidinium-carteri is due solely to the photocycle. Plant Physiol. (Bethesda) 91(3):999-1005,1989.

97. Vaulot, D., R.J. Olson, S. Merkel and S.W. Chisholm. Cell cycle response to nutrient starvation in two phytoplankton species, Thalassiosira weissflogii and Hymenomonas carterae. Mar. Biol. 95:625-630. 1987

98. Gala WR and JP Giesy: Flow cytometric techniques to assess toxicity to algae. (13th Symposium aquatic tox. and risk ass. 1989) Am Soc Test Mat -Sp Techn Publ 1096, 237-246,1990.

99. Gala, W.R. and J.P. Giesy. 1994. Flow Cytometric Determination of the Photoinduced Toxicity of Anthracene to the Green Alga Selenastrum capricornutum. Environ. Tox. Chem. 13(5):831-840.

100. Olson, R.J. and S.W. Chisholm. Effects of light and nitrogen limitation on the cell cycle of the dinoflagellate Amphidinium carteri. J. Plank. Res., 8(4):785-793. 1986

101. Olson, R.J., D. Vaulot and S.W. Chisholm. Effects of environmental stresses on the cell cycle of two marine phytoplankton species. Plant Physiol., 80:918-925. 1986

102. Parpais J., Marie D., Partensky F., Morin P. and Vaulot D. Effect of phosphorus starvation on the cell cycle of the photosynthetic prokaryote Prochlorococcus. Marine Ecology Progress Series 1996 132: 265-274. 1996

103. Berglund DL and Eversman S: Flow cytometric measurement of pollutant stresses on algal cells. Cytometry 9 (2), 150-155, 1988.

104. Bonaly-Cantarel J: Cytophysiological and cytotoxicological studies in unicellular algae the effects of cadmium in Euglena-gracilis cells flow cytometry supply. Bull. Soc. Bot. Fr. Lett. Bot. 135(1):27-40,1988.

105. Rodriguez, J. and W.K.W. Li (1994). The size structure and metabolism of the pelagic ecosystem. Scientia Marine 57: (1-2). 167 pp.

106. Gin K, Chisholm S. and R.J. Olson: Temporal and spatial variation in marine microbial size spectra. II. Comparison of high and low productivity ecosystems. Limnology and Oceanography, 1998.

107. Morel A. and L. Prieur: Analysis of variations in ocean color. Limnology and Oceanography 22:709-722, 1977.

108. Lewis MR. and JJ. Cullen: From cells to the ocean: sattelite ocean color. In: Particle analysis in oceanography (S. Demers Ed.). NATO ASI Series, G: Ecological Sciences, Vol. 27, 1991, Springer-Verlag Berlin Heidelberg.

109. Holligan PM. and WM. Balch: From the ocean to cells: coccolithophore optics and biochemistry. In: Particle analysis in oceanography (S. Demers Ed.). NATO ASI Series, G: Ecological Sciences, Vol. 27, 1991, SpringerVerlag Berlin Heidelberg.

110. Balch, W.M., P.M. Holligan, and K. A. Kilpatrick. 1992. Calcification, photosynthesis and growth of the bloom-forming coccolithophore, Emiliana huxleyi. Cont. ShelfRes. 12: 1353-1374.

111. Balch, W.M., K. Kilpatrick, P.M. Holligan, and Terry L. Cucci. 1993. Coccolith production and detachment by Emiliania huxleyi(Prymnesiophyceae). J. Phycol. 29: 566-575.

112. Ackleson, S.G. and D.B. Robins. 1990. Flow cytometric determinations of North Sea phytoplankton optical properties. Neth. J. Sea Res. 25: 11-18.

113. Dubelaar GBJ, RR Jonker, JTM Meulemans and JJF van Veen: Phytoplankton analysis by (EurOPA) flow cytometry; current and future applications in environmental control. Proceedings Oceans 94 OSATES, Vol.1, pp.683-689, 1994

114. Marie D., Brussaard C., Partensky F. and Vaulot D. Flow cytometric analysis of phytoplankton, bacteria and viruses. 1999. In: Current Protocols in Cytometry. John Wiley & Sons, Inc. 11.11.1-11.11.15.

115. Marie, D., Partensky, F, Vaulot, D. 1996. Application of the novel DNA dyes YOYO-1, YOPRO-1 and Picogreen for flow cytometric analysis of marine prokaryotes. Applied and Environmental Microbiology 62: 16491655.

116. Marie D., Partensky, F., Simon N., Guillou L. and Vaulot D. 2000. Flow cytometry analysis of marine picoplankton. In: Diamond R.A., DeMaggio S. (ed.). In Living Colors: Protocols in Flow Cytometry and Cell sorting. Springer Verlag, p. 421-454.

117. Marie D., Simon N. et al. DNA/RNA Analysis of Phytoplankton by Flow Cytometry //Current Protocols In Cytometry (2000). John Wiley & Sons, Inc. 11.12.1-11.12.14.

118. Е.П. Попечителев, O.H. Старцева Методы иммунологических исследований: Учебное пособие / Г ЭТУ. С.-Пб., 1993. - 80 с.

119. Сидоренко В.М., Пакконен С. А. Изменение интенсивности флуоресценции воды при переходе органического вещества из взвеси в раствор // Изв. РАН, сер. Физика атмосферы и океана, 1995, т.31, N5, с.731-734.

120. Андреев В. С. Кондуктометрические методы и приборы в биологии и медицине. Москва: Медицина, 1973.

121. Пажаров А. В. Аппаратура клинико-лабораторного анализа. Санкт-Петербург: ЛЭТИ, 1982.

122. Паспорт гемоцитометра Metertech серии EXCEL 500 Hemathology ANALYZER.

123. В. В. Меньшиков. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник.- Москва: Медицина, 1987.

124. В. В. Бражников. Детекторы для хроматографии. Москва: Высшая школа, 1998.

125. А. Д. Бродский, В. Л. Кан. Краткий справочник по математической обработке результатов измерений. Москва: Государственное издательство стандартов, 1960.

126. В.М. Сидоренко Механизм влияния фотоадаптации на спектральные характеристики клеток фитопланктона // SMC-2000, Saint-Petersburg, 27-30 June 2000, с. 127-130.

127. Kolber Z.S., Falkowski P.G. US6121053: Multiple protocol fluorometer and method. Appl. Number: US 1997000988269. Issued/Filed Dates: Sept. 19, 2000/Dec. 10, 1997

128. Паспорт кондуктометрического проточного гемоцитометра Baker Instruments «Baker Hematology 100.

129. Бейсова М.П. Кодуктометрические методы анализа природных вод. -Гидрохимические материалы, 1960;

130. Шауб Ю.Б., Шауб С.К. Электрометрия для экологических и биофизических исследований. М., Наука, 1992,- 192 с;

131. Шауб Ю.Б. Кондуктометрические методы в морских исследованиях.-М.: Наука, 1988.- 248 с;

132. Рабинович Ф.М. Кондуктометрические счётчики частиц и их применение в медицине. М.: Медицина, 1972,- 176 с.

133. Рабинович Ф.М. Кондуктометрический метод дисперсного анализа. Ленинград: Химия, 1970. 213 е.;

134. Исаков В.А., Пинчук В.Г., Исакова Л.М. Современные методы автоматизации цитологических исследований. Киев: Наукова Думка, 1988.-216 е.;

135. William К. W. Li and A. Michelle Wood. Vertical distribution of North Atlantic ultraphytoplankton: analysis by flow cytometry and epifluorescence microscopy. // Deep-Sea Research. 1988. Vol. 35A. №9. P. 1615-1638.

136. Ригель Дж. Энергия, жизнь и организм. Москва: Мир, 1967.-168с.

137. Баренбойм Г.М., Доманский А.Н., Туроверов К.К. Люминесценция биополимеров и клеток. М. -Л. Наука, 1966. 206 с.

138. Эрхард Ж.-П., Сежен Ж. Планктон. Состав, экология, загрязнение. Пер. с фр. Л., Гидрометиоиздат, 1984 г, 256 с.

139. Кульский A.A. и др. Фитопланктон и вода. Киев, Наукова думка, 1986. 168 с.

140. В.М. Гольд и др. Опыт использования флуоресценции для дифференциальной оценки содержания хлорофилли-а у планктонных водорослей // Гидробиологический журнал, 1986, т. 22, №3, стр. 80-85

141. Карабашев Г.С. Флюоресценция в океане. Л.: Гидрометиоиздат, 1987 год, 200 с.

142. Якушенков Ю. Г., Луканцев В. Н., Колосов М. П. Методы борьбы с помехами в оптико-электронных приборах.—М.: Радио и связь, 1981.— 180 с.

143. Лебедько Е.Г., Порфирьев Л.Ф., Хайтун Ф.И. Теория и расчёт импульсных и цифровых оптико-электронных систем. Л.: Машиностроение, 1984.- 191 с.

144. Бронштейн И.Н., Семендяев К.А. Справочник по математике для инженеров и учащихся втузов. М.: Наука, 1981. - 718 с.

145. Абезгаус Г.Г., Тронь А.П. Справочник по вероятностным расчётам. Москва: Воениздат, 1970.-536 с.

146. Балыкин A.B. Исследование и разработка аппаратурных методов проточной цитофлуориметрии применительно к задачам биологии и медицицны.- Дис.канд. тех. наук. Л., 1981;

147. Айзенберг Ю.Б. Справочная книга по светотехнике. Москва: Энергоатомиздат, 1995 г. 528 с.

148. Куречик К.П. и др. Газоразрядные источники света для спектральных измерений. Минск: Университетское, 1987 г.

149. Аксёненко М.Д., Бараночников М.Л. Приёмники оптического излучения: справочник. М.: Радио и связь, 1987. - 296 с.

150. Ишанин Г.Г., Андреев А.Л., Полыщиков Г.В. Источники излучения для оптико-электронных приборов. Ленинград: Изд. ЛИТМО, 1984 г. -63 с.

151. Маршак И.С. Импульсные источники света. М.-Л.: Госэнергоиздат, 1963 г. - 336 с.

152. Ишанин Г.Г., Панков Э.Д. Источники и приёмники излучения. -Санкт-Петербург: Политехника, 1991 г. 240 с.

153. Рохлин Г.Н. Разрядные источники света. М.: Энергоатомиздат, 1991 г. -720 с.

154. Насадки фотометрические люминесцентные (ФМЭЛ-1А). Ленинград: Издательство ЛОМО, 1987 г. 17 с.

155. Попечителев Е.П., Старцева О.Н. Информационно-структурные модели в учебно-методическом описании технологических процессов // Современные технологии обучения. Вып. I/ ТЭТУ. СПб., 1996. с.24-29.

156. Barts R., Spinrad R.W. Low power high resolution in situ fluorimeter for profiling and moored applications in water // Proc. SPIE. 1988. V. 925. P. 157-170.

157. Сидоренко B.M. Влияние дискретности частиц на интенсивность обратного сигнала флуоресценции фитопланктона в воде // Известия АН. Физика атмосферы и океана, 1998, том 34, № 1, с. 59-62.

158. Василевский A.M., Корнилов Н.В. Патент на изобретение № 2161791. Устройство для мониторинга жидкой биологической среды. Москва: ФИПС, 10 января 2001 г.

159. Ахутин В.М., Немирко А.П., Першин Н.Н., Попечителев Е.П., Романов С.В. Биотехнические системы: Теория и проектирование. Ленинград: Изд-во Ленинградского ун-та, 1981 г.- 220 с.

160. Spinell Max. Pat. US5351118: Apparatus and method for analyzing particles suspended in a liquid. June 10, 1991.

161. Jeffrey Siegel, Sidney Braginsky. Pat. US005160974A: Closed sample cell for using flow cytometry. Now. 3, 1992.

162. Matsumoto Masaetsu, Yamazari Isao. Pat. US5690895: Flow cell apparatus. Now. 25, 1997.

163. Hayasuibe Yutaka, Sayama Yasumasa. Pat. US5624846: Continuous flow analyzing method and apparatus. April 29, 1997.

164. Петровский Г.Т. Цветное оптическое стекло и особые стёкла: Каталог.- Москва: Машиноствроение, 1990.