автореферат диссертации по технологии, машинам и оборудованию лесозаготовок, лесного хозяйства, деревопереработки и химической переработки биомассы дерева, 05.21.03, диссертация на тему:Комплексная переработка вегетативной части топинамбура с получением продуктов микробного синтеза

На правах рукописи

Емелина Татьяна Николаевна

КОМПЛЕКСНАЯ ПЕРЕРАБОТКА ВЕГЕТАТИВНОЙ ЧАСТИ ТОПИНАМБУРА С ПОЛУЧЕНИЕМ ПРОДУКТОВ МИКРОБНОГО

СИНТЕЗА

05.21.03-Технология и оборудование химической переработки биомассы дерева, химия древесины

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Красноярск-2003

Работа выполнена в Сибирском государственном технологическом университете на кафедре химической технологии древесины и биотехнологии и в Институте биофизики СО РАН в лаборатории хемоавтотрофного биосинтеза

Научный руководитель:

доктор технических наук,

профессор

Официальные оппоненты:

доктор технических наук,

профессор

доктор химических наук, профессор

Ведущая организация: Иркутский Институт химии им. А.Е.Фаворского СО РАН

Защита диссертации состоится « 14 » ноября 2003 г. в 13°° часов на заседании диссертационного совета Д 212.253.01 Сибирского государственного технологического университета.

Отзывы (в двух экземплярах с заверенными подписями) просим направлять ученому секретарю диссертационного совета по адресу: 660049, г. Красноярск, пр. Мира 82.

Тел./факс (3912) 66-03-90

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Сибирского государственного технологического университета.

Автореферат разослан « 13 » октября 2003 г.

Рязанова Татьяна Васильевна

Войнов Николай Александрович Базарнова Наталья Григорьевна

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат химических наук, доцент

Исаева Е.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. В связи с сокращением доступных ресурсов древесины в последние годы во всем мире уделяется большое внимание изысканию новых видов сырья для химической и биохимической переработки. Среди таковых- биомасса злаков, культурных и дикорастущих травянистых растений, багасса различных видов. Однако эти виды сырья до сих пор не получили широкого распространения в биотехнологии, в основном из-за отсутствия совершенных методов и аппаратов для переработки.

Основное требование, предъявляемое к сырью для биохимической переработки - высокое содержание полисахаридов. Этому требованию, согласно данным химического состава, в полной мере удовлетворяет вегетативная часть топинамбура, традиционно используемая в кормопроизводстве. Благодаря значительному содержанию углеводов наиболее приемлемым способом для ее переработки может быть кислотный гидролиз. Полученные сахаросодержащие субстраты потенциально приемлемы для любых биотехнологических процессов, включая биосинтез этанола, кормового белка, и других ценных продуктов микробного синтеза, например-полигидроксиалканоатов (ПГА). ПГА-термопластичные полиэфиры биологического происхождения, которые по базовым свойствам аналогичны полипропилену и полиэтилену, но обладают такими уникальными свойствами, как биоразрушаемость и биосовместимость.

Для создания новых технологий и повышения эффективности имеющихся мощностей биохимических заводов с учетом возрастающих требований к защите окружающей среды необходим комплексный подход к использованию сырьевой базы. Одним из экологически чистых способов утилизации твердого остатка после гидролиза вегетативной части топинамбура является биоконверсия, позволяющая получить препараты, применяемые для биологической защиты растений.

Работа выполнена в рамках федеральной целевой научно-технической программы «Государственной поддержки интеграции высшего образования и фундаментальной науки» 2000-2001 г. проект А0023 «Учебно-научный центр по проблемам лесных ресурсов Сибири» и при финансовой поддержке Красноярского краевого фонда науки грант Ш0160М.

Цель и задачи исследований. Цель исследований заключалась в разработке научных основ технологии комплексной переработки вегетативной части топинамбура, которая расширит сырьевую базу биохимических производств как для получения традиционных продуктов (этанол, кормовой белок), так и позволит получать новые перспективные

биопрепарат).

виды продукции (биоразрушаемые

"бив

ПегеЙГИ' Г

хн

библиотека

С.П<

оэ

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить химический состав вегетативной части топинамбура;

- исследовать химический состав водного экстракта и оценить его пригодность для синтеза биоразрушаемых полимеров;

- определить влияние основных технологических факторов на гидролиз полисахаридов вегетативной части топинамбура и найти их оптимальные значения;

- исследовать химический состав гидролизата и оценить его пригодность для получения этанола и кормовых белковых дрожжей;

- исследовать химический состав твердого остатка вегетативной части топинамбура после гидролиза и установить возможность его переработки с получением защитных биопрепаратов;

- на основе полученных результатов разработать схему комплексной биохимической переработки вегетативной части топинамбура.

Научная новизна. Теоретически обоснован и экспериментально подтвержден новый подход к организации технологического процесса комплексной переработки нетрадиционного растительного сырья -вегетативной части топинамбура, который позволил осуществить двухстадийный процесс гидролиза сырья разбавленной минеральной кислотой с использованием предгидролиза для получения субстрата для культивирования бактерий ЯаШота еШгорЪа - продуцентов полигидроксиалканоатов, гидролизата для получения этилового спирта и белковых кормовых дрожжей и твердого остатка после гидролиза для получения защитного биопрепарата типа «Триходермин».

Практическая значимость работы. Показана принципиальная возможность комплексной биохимической переработки нетрадиционного растительного сырья с высоким выходом целевых продуктов. Разработана технология гидролитической переработки вегетативной части топинамбура разбавленной серной кислотой с использованием оборудования гидролизных производств. Разработаны исходные данные на проектирование опытного производства полигидроксиалканоатов. Проведены технико-экономические расчеты применительно к Красноярскому биохимическому заводу (БХЗ), которые показали, что экономическая эффективность при использовании вегетативной части топинамбура составит по сравнению с древесиной-36,2 млн. руб. и зерном-24,8 млн. руб.

Автор выносит на защиту. Теоретическое обоснование, результаты экспериментальных исследований и технологическую схему комплексной биохимической переработки вегетативной части топинамбура с

получением биоразрушаемых полимеров, этанола, белковых кормовых продуктов и защитных биопрепаратов.

Апробация результатов работы. Основные положения диссертационной работы докладывались и обсуждались на: научно-практической конференции «Химико-лесной комплекс-проблемы и решения», г. Красноярск, 2001 г.; Южно-Сибирской международной научной конференции «Экология Южной Сибири», г. Абакан, 2001 г.; XL Международной научной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс», г. Новосибирск, 2002 г.; 2-ой Всероссийской научно-практической конференции-выставке «Проблемы экологии и развития городов»; г. Красноярск, 2001 г.; «International Symposium on Biological Polyesters», Munster, 2002 г.; 1-ой Международной научно-практической конференции «Растительные ресурсы для здоровья человека (возделывание, переработка, маркетинг)»; г. Москва, 2002 г.

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, четырех глав, выводов, списка использованных источников, включающего 189 наименований, и двух приложений. Работа изложена на 123 страницах, содержит 18 таблиц и 12 рисунков.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОЫ Введение. Во введение обоснована актуальность темы диссертационной работы и ее вклад в решение комплексного использования растительного сырья.

Аналитический обзор. В аналитическом обзоре проведен анализ отечественных и зарубежных публикаций об изученности химического состава биомассы топинамбура и основ его промышленного использования. Рассмотрены методы гидролиза и факторы, влияющие на гидролитическую переработку углеводсодержащего сырья. Для создания экологически чистых и малоотходных технологий рассмотрены вопросы биоконверсии растительного сырья с получением биопрепаратов. Проанализированы данные о перспективах применения биоразрушаемых полимеров, их свойствах, продуцентах и субстратах для их биосинтеза.

Методы проведения экспериментов. В этом разделе приведены краткие описания объектов исследования, экспериментальных установок, методов проведения исследований и математической обработки результатов. Объектами исследования служили - вегетативная часть топинамбура сорта «Интерес», штаммы микроорганизмов: дрожжи, относящиеся к видам Schizosaccharomyces Pombe, Saccharomyces vini KC-1, Candida scotti Kp-9, водородные бактерии Ralstonia eutropha Z-l , грибы рода Trichoderma. Посадки топинамбура были проведены в 1999 г. на плантациях учебно-опытного хозяйства Красноярского государственного

аграрного университета, расположенного в Сухобузимском районе Красноярского края. Образцы вегетативной части отбирали во второй декаде октября. Водородные бактерии Ralstonia eutropha были переданы из коллекции отдела литотрофных микрорганизмов Института микробиологии РАН Институту биофизики СО РАН академиком Заварзиным А.Г. В работе в качестве биодеструктирующих агентов использовались грибы рода Trichoderma: штаммы «МГ-97» T.asperellum (ВКПМ F-765) Sect. Trichoderma и «У» Т. Harzianum Rifai Sect. Pachybasium. Штамм «МГ-97» выделен из ризопланы сеянцев хвойных пород и почв лесопитомников Средней Сибири д.б.н. Громовых Т.И. Штамм «У» выделен из агроценоза Восточной Сибири д.б.н. Огарковым Б.Н. Производственные штаммы КС-1 и Кр-9 были отобраны на Красноярском биохимическом заводе.

Экспериментальная часть и обсуждение результатов.

Химический состав вегетативной части топинамбура

Химический состав вегетативной части топинамбура анализировали по методикам, принятым в химии растительного сырья, (таблица 1).

Таблица 1 - Химический состав вегетативной части топинамбура

Показатель Содержание, % а. с. в.

Минеральные вещества 2,4

Вещества, экстрагируемые горячей водой, 25,4

в том числе моносахариды 7,9

олигосахариды 8,7

Итого Сахаров в экстракте 16,6

Легкогидролизуемые полисахариды 23,5

Трудногидролизуемые полисахариды 32,5

Сумма полисахаридов 56,0

Вещества лигниновой природы 16,2

Влажность исследуемого сырья составляла 7%. Установлено, что основную долю среди компонентов надземной части топинамбура занимают углеводы, которые на 42 % состоят из легкогидролизуемых и на 58 % из трудногидролизуемых полисахаридов. Содержание веществ лигниновой природы не велико и составляет 16,2 % от а. с. в.

Исследования показали, что в вегетативной части топинамбура содержится 25,4 % веществ, экстрагируемых горячей водой. Из них на долю Сахаров приходится более 65 %. Результаты исследования состава Сахаров водного экстракта вегетативной части топинамбура показали, что водный экстракт представлен тремя сахарами, основная доля приходится

на фруктозу - 49,96 % и глюкозу-34,12 %. Содержание галактозы невелико -15,92%.

Таким образом, благоприятный химический состав вегетативной части топинамбура позволяет рекомендовать ее в качестве сырья для получения углеводсодержащих субстратов.

Культивирование бактерий Я. еШгорИа на субстрате из вегетативной части топинамбура

Исследование химического состава экстракта вегетативной части топинамбура показало, что в нем содержится значительное количество фруктозы, а также необходимые для роста микроорганизмов микро- и макроэлементы. Поэтому дальнейшие исследования были направлены на изучение возможности биосинтеза полигидроксиалканоатов бактериями Я. еи1горЪа на субстрате, полученном из вегетативной части топинамбура.

Сравнительные результаты выращивания бактерий показали, что оптимальная концентрация фруктозы для данного штамма составляет около 15 г/л. Поэтому в дальнейшем ферментацию реализовали с подпиткой фруктозы при ее текущей концентрации в культуре не выше 15 г/л. Результаты культивирования бактерий в различных условиях: периодический автотрофный режим, периодический гетеротрофный режим (фруктоза и водный экстракт топинамбура) представлены на рисунке 1.

СС^+Н* Фруктоза Водный экстракт

топинамбура

Тип субстрата ■ Биомасса Ш Полимер

Рисунок 1 -Выход биомассы и ПГА в культуре Я.еиЬгорЪа при культивировании на различных субстратах

*3а помощь в разработке данного раздела диссертации выражаем благодарность заведующей лаборатории хемоавтотрофного биосинтеза Института биофизики СО РАН доктору биологических наук, профессору Воловой Т.Г.

В автотрофных условиях (при использовании СОг и Н2 в качестве углеродного и энергетического субстрата) микроорганизмы накапливали в клетках до 65 % полимеров в течение 65-75 ч культивирования. На гетеротрофных углеродных субстратах (фруктоза с концентрацией 15 г/л) за такое же время культивирования получен максимальный выход полимера, до 70-75% а.с.в.

Лабораторные исследования показали, что при выращивании бактерий на субстрате из водного экстракта вегетативной части топинамбура в клетках накапливается до 65-70 % полимера. Показатели процесса биосинтеза полиоксибутирата (ЛОБ) при этом сопоставимы с ростом на кристаллической фруктозе и имели следующие значения: продуктивность процесса (г/л сут) по биомассе-1,75, по полиоксибутирату-1,14; экономический коэффициент (г/г) по биомассе-0,30, по полиоксибутирату-0,20; удельная скорость роста - 0,47 сут'1, это сопоставимо с ростом на кристаллической фруктозе. С использованием хромато-масс-спектрального анализа проведено исследование состава полимера, синтезированного штаммом R.. eutropha Z-1 на субстрате из вегетативной части топинамбура. В качестве доминирующего мономера идентифицирована Р-оксимасляная кислота (ее доля в полимере составляет около 98 мол%), и в качестве минорных включений - оксивалерат (1,7-1,8 мол%) и оксигексаноат (0,2-0,3 мол%), присутствие которых снижает кристалличность полимера и делает его более технологичным.

Исследование химического состава обезжиренной биомассы (шрота) после извлечения полимера показало, что она содержит в основном азотистые компоненты и может иметь самостоятельное значение для получения разнообразных ценных продуктов. В шроте содержится: белок-42,2-54,0; РНК-2,5-4,6; ДНК-3,3-3,9 % а.с.в.

По аминокислотному составу белки шрота характеризуются полноценностью, т.к содержат все незаменимые амнокислоты, а по их количеству превосходят даже казеин молока и пшеничную муку.

Оптимизация режима гидролиза вегетативной части топинамбура По результатам предварительных опытов и литературным данным было установлено, что основными факторами, влияющими на режим гидролиза полисахаридов послеэкстракционного остатка вегетативной части топинамбура разбавленной серной кислотой, являются -температура, продолжительность и концентрация кислоты. В основу решения задачи оптимизации был заложен план Бокса-3. Температуру (xj) варьировали от 150 до 170 °С, продолжительность (х2) -от 30 до 90 мин, концентрацию кислоты - от 0,6 до 1,4 %. Задача оптимизации сводилась к определению значений технологических параметров, обеспечивающих максимальных выход РВ при одностадийном гидролизе.

По результатам опытов получены уравнения регрессии, адекватно отражающие процесс гидролиза и имеющие вид:

-для содержания редуцирующих веществ У1=7,85-0,73хг0,95х2+0,99х3-1,02x^2+1,99х2хз+1Л8х22+1,21хз2 -для содержания бронируемых веществ у2 = 0,592 + 0,050x1 + 0,062х2 -0,040х3 + 0,032х1х2 - 0,022x^3 -0,063х2х3 + +0,018х12 -0,065х22-0,067х32

Оптимальные условия были найдены методом «ридж-анализа», и имели следующие значения: продолжительность процесса - 30 мин; температура-150 °С; концентрация кислоты-1,4 %. Наглядно характер зависимости между технологическими параметрами процесса гидролиза углеводов вегетативной части топинамбура и основными характеристиками полученного гидролизата помогает установить анализ одномерных сечений поверхности отклика (рисунок 2).

69

О.

I

-10,50

-1-ме-

-0,5

0,5

• температура,°С; ■ продолжительность, мин; А концентрация кислоты, %.

Рисунок 2-Влияние технологических параметров на выход РВ Установлено, что наиболее мощными факторами, определяющим процесс гидролиза, являются температура и продолжительность. С их увеличением выход РВ снижается, что связано с вторичными превращениями моносахаридов, то есть их распадом и накоплением бромируемых веществ (фурфурола, оксиметалфурфурола, метилфурфурола, формальдегида, фенолов). По иному на гидролиз влияет концентрация варочной кислоты. Если при концентрации кислоты ниже 1 % выход РВ практически не изменяется, то дальнейшее увеличение концентрации катализатора приводит к его резкому увеличению. Таким

образом, установлено, чем выше температура гидролиза, тем меньше должна быть его продолжительность для максимального выхода РВ.

Несмотря на то, что полисахаридный комплекс вегетативной части топинамбура существенно отличается от полисахаридов древесины, как большим содержанием легкогидролизуемых веществ, так и сравнительно низкой степенью полимеризации целлюлозы (~350-500), при одностадийном гидролизе не удается достичь высокого выхода РВ. В оптимальном режиме он не превышает 13%. При этом в твердом остатке после гидролиза содержание полисахаридов составляет около 30 %. Гидролиз в более жестких условиях, как показали результаты экспериментов, приводит к увеличению содержания вторичных продуктов. Следует отметить, что подобное наблюдается при стационарном гидролизе древесины, при котором выход РВ составляет 18-25 %, тогда как при перколяционном гидролизе он достигает 45 -50 %. Поэтому для предотвращения деструкции Сахаров было принято решение проведения многоступенчатого гидролиза при следующем режиме: температура 150 °С, продолжительность одной ступени - 30 мин с гидромодулем 14 на первой ступени варки, 10 на последующих. Учитывая тот факт, что в производственных условиях, наряду с топинамбуром, будут перерабатываться и другие, традиционные виды сырья, технологическая переработка которых предусматривает использование варочной кислоты с концентрацией 0.8-1%, было решено застабилизировать концентрацию серной кислоты на основном уровне -1 %. Применение многоступенчатого гидролиза позволило увеличить выход РВ до 53,2 %, что подтвердило ранее сделанные предположения о том, что низкий выход РВ при одностадийном стационарном гидролизе обусловлен преобладанием деструктивных процессов.

Гидролизат, полученный при многостадийном гидролизе, имел следующий состав (%): редуцирующие вещества - 2,48-3,00; моносахариды - 1,88-2,60; олигосахариды -0,12-0,16; взвешенные вещества - 0,17-0,28; бромируемые вещества - 0,38-0,4; фурфурол -0,045; минеральные кислоты -0,43-0,71; органические кислоты -0,22-0,50; рН 1,2-1,5. Доброкачественность гидролизата составляла около 90 %.

Качественный состав моносахаридов гидролизата был исследован с помощью методов бумажной и газожидкостной хроматографии. Установлено, что в гидролизате большая часть Сахаров приходится на глюкозу (48,65 %) и фруктозу (37,69%), остальные же (галактоза, арабиноза и ксилоза) содержатся в незначительных количествах.

Получение этанола из вегетативной части топинамбура

С целью проверки пригодности гидролизатов вегетативной части топинамбура, полученных кислотным способом, для сбраживания в лабораторных условиях проведена серия экспериментов с использованием зерновых, древесных и смешанных гидролизатов. Сусло

Красноярского биохимического завода и сусло АО «Мибиэкс» использовали в качестве контроля для оценки эффективности процесса брожения.

Для повышения биологической доброкачественности гидролизата проводили его предварительное охлаждение самоиспарением и нейтрализацию по принятому в микробиологической промышленности режиму в две ступени, включающему нейтрализацию известковым молоком до рН 3,5 и донейтрализацию аммиачной водой до рН 4,2. Процесс брожения проводили в анаэробных условиях при перемешивании. Основные параметры процесса брожения (температура, продолжительность) были застабшшзированы согласно технологического регламентов заводов. О характере брожения и его полноте судили по количеству РВ и содержанию спирта (таблица 2).

Таблица 2-Результаты спиртового брожения

Наименование сусла Содержание РВ, % в сусле в бражке Содержание спирта, %об. Выход спирта со 100 кг сбраживаемых Сахаров, л

Красноярский БХЗ: зерновой поток древесный поток смешанный поток (зерно:древесина=1:2) 8,48 ±0,35 3,50±0,10 2,36±0,08 50,410,15

3,53 ±0,11 0,75 ±0,01 1,30±0,05 50,0±0,15

3,94 ±0,10 0,79 ±0,01 2,94±0,08 59,8±0,10

Топинамбурное (водный экстракт и гидролиз ат) 4,07 ±0,15 0,78 + 0,03 1,39±0,08 61,5±0,30

АО «Мибиэкс»: зерновое поток 6,50 ±0,20 0,84 ±0,01 6,50 ±0,20 0,85 ±0,02 4,27±0,08 3,80±0,08 63,8±0,35 61,2±0,30

Смешанное: Красноярский БХЗ (смешанный поток)+ топинамбурное 5,42 ±0,20 0,80 ±0,02 3,78±0,09 67,0±0,35

АО «Мибиэкс»: зерновой поток+ топинамбурное* 6,90 ±0,20 0,95 ±0,03 4,20±0,10 64,9±0,35

* Брожение проводили с использованием штамма ЯассИаготусез гШ Хак-С-1

Результаты экспериментов показали, что в одинаковых условиях (температура, продолжительность, концентрация засевных дрожжей, количество редуцирующих веществ) выход этилового спирта со 100 кг сбраживаемых Сахаров из топинамбурного сусла (61,5 л) выше, чем из заводского (59,8 л). При смешивании заводского сусла Красноярского БХЗ с топинамбурным выход спирта со 100 кг сбраживаемых Сахаров возрос до 67,0 л.

Высокий выход спирта со 100 кг сбраживаемых Сахаров в топинамбурном сусле можно объяснить присутствием в нем витаминов, аминокислот и органических кислот, ассимиляция которых дрожжами возможна из питательной среды и несколько увеличивает выход спирта. Добавление топинамбурного сусла в сусло АО «Мибиэкс» увеличивало выход спирта с 61,2 л до 64,9 л со 100 кг сбраживаемых Сахаров. На выход ,

спирта при брожении с использованием Хакасского штамма дрожжей большое влияние оказывало начальное значение рН среды. Так при рН 3,2 выход спирта со 100 кг сбраживаемых Сахаров выше, чем при рН 3,9 и I

составляет соответственно 63,8 л и 61,2 л. Это обусловлено тем, что I

данные дрожжи адаптированы к более кислой среде.

Таким образом, результаты проведенных исследований доказали возможность использования субстратов, полученных на основе гидролизатов вегетативной части топинамбура, в производстве этанола. Установлено, что добавление топинамбурных субстратов к традиционным увеличивает сбраживаемость и выход спирта на 3,7-7,2 л со 100 кг сбраживаемых Сахаров.

Культивирование кормовых дрожжей После спиртового брожения вышеназванных субстратов и отгонки спирта остается отход - обесспиртованная барда, которая может служить в »

качестве питательной среды для выращивания белковых кормовых дрожжей. Барда содержит 0,14-0,22 % бромируемых веществ, которые являются ингибиторами биохимических процессов и 0,8-0,9 % {

редуцирующих веществ.

Для установления возможности утилизации обесспиртованной барды с целью получения кормового белка использовали промышленные штаммы дрожжей, относящиеся к роду Candida вид scotti.

После облагораживания обесспиртованной барды, наращивание биомассы дрожжей проводили по технологическому режиму, принятому на «Красноярском биохимическом заводе». Концентрация засевных дрожжей составила 30 г/л, температура 36 °С, продолжительность - 4,3 ч. Об эффективности процесса судили по приросту биомассы.

Для изучения влияния концентрации РВ на прирост биомассы дрожжей использовали смесь топинамбурного субстрата с субстратом "Красноярского биохимического завода" с разной начальной

концентрацией РВ от 0,27 до 0,84 % (рисунок 3). рН среды 3,55, так как при этих условиях ограничено развитие посторонней микрофлоры

300 1 | 250

3 200 g

& 150

5 100

6

0,27 0,4 0,65 0,84

Концентрация РВ, %

■ Общие РВ

■ Утилизируемые РВ

Рисунок 3- Влияния концентрации РВ на прирост биомассы дрожжей Candida scotti

Установлено, что при концентрации РВ 0,40 % прирост биомассы составил 151,00 % общих РВ и 274,00 % утилизируемых РВ, что больше, чем при концентрации РВ 0,27 % в 3 раза (51,80 % общих РВ и 77,8 % утилизируемых РВ). Низкий выход дрожжей при РВ0,27 % обусловлен недостатком углеводного питания. Но с повышением концентрации РВ от 0,40 до 0,84 % выход дрожжей уменьшается практически в 10 раз (16,3 % от общих и 31,5 % от утилизируемых РВ), что, возможно, связано с высоким содержанием ингибиторов в субстрате.

Полученные результаты позволяют сделать вывод, что наиболее благоприятная концентрация РВ в сусле около 0,40 % и рН 3,5-4,0, при этих условиях получен большой выход дрожжей и затруднено развитие посторонней микрофлоры

На следующем этапе исследований в качестве субстрата использовали обесспиртованную барду, полученную при спиртовом брожении топинамбурного сусла при смешивании с традиционными заводскими субстратами. Начальная концентрация РВ 0,4 %, остальные параметры культивирования остались те же. Прирост биомассы дрожжей на полученных субстратах увеличивается на 119-278 % от утилизируемых РВ или 35-129 % от общих РВ.

Анализируя полученные данные, можно считать вполне доказанной возможность высокопроизводительного использования вегетативной части топинамбура для производства ценного белкового продукта в виде белковых кормовых дрожжей.

Биодеструкция твердого остатка после гидролиза Одним из решений проблемы переработки твердых растительных отходов может стать их использование в качестве доступного субстрата для получения биопрепаратов типа «Триходермин». Для биодеструкции твердого остатка вегетативной части топинамбура после гидролиза использовали два штамма грибов рода ТпсЬоёеппа - «МГ-97» и «У». Данные штаммы были выбраны для исследований, поскольку они хорошо адаптированы к лигноцеллюлозным субстратам, и наряду с целлюлолитической, обладают и пероксидазной активностью, то есть «

способны деструкгировать не только полисахариды, но и вещества лигниновой природы. Посевной материал вносили в субстрат в виде мицелярной биомассы. Культивирование грибов рода ТпсЬоёегта I

проводили твердофазным способом. Химический состав остатка до и после ферментации в течение 10 сут представлен в таблице 3.

Таблица 3 -Химический состав твердого остатка после гидролиза вегетативной части топинамбура, ферментированного грибами рода ТгюЬоёегта___В процентах

Показатель Исходный субстрат Ферментированный остаток

Штамм «У» Штамм «МГ-97»

Вещества, экстрагируемые горячей водой 4,25 5,12 4,99

Легкогидролизуемые полисахариды 2,29 4,47 4,28

Трудногидролизуемые полисахариды 59,36 50,63 52,07

Лигноподобные вещества 34,00 31,48 30,89

Убыль массы 0,00 20,1 16,3

Как видно из таблицы, биодеструкция остатка грибами рода ТпсЬос1егта осуществляется очень активно. Через 10 суток культивирования убыль массы субстрата составила от 16,3 % (штамм «МГ-97») до 20,1 % (штамм «У»), Лабораторные исследования показали, что культивирование штаммов «У» и «МГ-97» в первую очередь приводило к

! !

значительной убыли трудногидролизуемых полисахаридов и лигноподобных веществ. Одновременно отмечено обогащение ферментируемой биомассы экстрактивными веществами. Это связано с разрушением гидролитическими ферментами грибов легкодоступных полисахаридов до моносахаридов, которые и переходят в группу водорастворимых веществ. Это подтверждено увеличением редуцирующих веществ в водном экстракте. Количество легкогидролизуемых полисахаридов в биодеструктированном остатке увеличилось в среднем на 1,7-2,0 %. Очевидно, увеличению их содержания способствует деструкция трудногидролизуемых полисахаридов. Убыль лигноподобных веществ объясняется наличием наряду с целлюлолитической, пероксидазной активности, что установлено ранее проведенными исследованиями. ^ При производстве биопрепаратов на основе грибов рода Trichoderma

необходимо получить биомассу и обеспечить наличие в ней достаточного количества спор, обладающих высокой жизнеспособностью. Уже после ( шести суток культивирования грибов рода Trichoderma штамм «МГ-97» на

предложенном субстрате титр спор составил 1,25*109 спор на 1 г субстрата, что в 1250 раз больше засевного титра спор. Результаты исследований также свидетельствуют о довольно активном росте грибов рода Trichoderma штамм «У», урожай спор через шесть суток по сравнению с первоначальным значением увеличился в 900 раз. 1 Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод о

том, что твердый остаток вегетативной части топинамбура после гидролиза пригоден в качестве субстрата для получения препарата «Триходермин», обеспечивающего защиту растений от болезней и вредителей. Полученный биодеструктированный остаток имеет высокий ^ титр спор - (0,9-1,25)*109 спор/г.

Технологическая часть

На основании выполненных исследований о комплексную v переработку вегетативной части топинамбура предполагается

осуществлять согласно блок-схеме, представленной на рисунке 4. В основу технологии положен двухступенчатый гидролиз, для осуществления которого в полной мере подходит установленное заводское оборудование. Процесс получения гидролизата включает в себя следующие стадии: измельчение топинамбура, загрузку сырья в гидролизаппарат, экстракцию горячей водой, выдачу экстракта, гидролиз разбавленной серной кислотой послеэкстракционного остатка, выдачу гидролизата. Полученный водный экстракт либо смешивается с гидролизатами и перерабатывается по существующей схеме в этанол и белковые кормовые дрожжи, либо используется для синтеза биополимеров. Остаток после гидролиза можно подвергать биоконверсии с целью получения защитного препарата «Триходермин». Согласно

Твердый остаток

7

I

Защитный биопрепарат

Вегетативная часть топинамбура

Измельчение

Экстракция*

]

Экстракт

Биосинтез ПОБ -►

Биоконверсия

Твердый остаток

. Гидролиз разбавленной серной кислотой

Гидролизат

Г~

Охлаждение Нейтрализация Отстаивание

I

Сусло

~Г

Сбраживание

Рисунок 4 -Блок-схема комплексной переработки вегетативной части топинамбура

I

I

проведенным в работе расчетам, экономическая эффективность от использования вегетативной части топинамбура с целью получения этанола должна составить: по сравнению с использованием древесины-36,2 млн. руб, зерна-24,8 млн. руб.

ВЫВОДЫ

1.Предложен новый подход к организации технологического процесса комплексной биохимической переработки вегетативной части топинамбура с высоким выходом целевых продуктов с единицы исходного сырья.

2. Исследован химический состав вегетативной части топинамбура и показано, что целесообразно осуществлять гидролитическую переработку сырья в две стадии: на первой - экстракция горячей водой, на второй-гидролиз разбавленной серной кислотой.

3.Впервые показана возможность применения фруктозосодержащего субстрата, полученного на основе водного экстракта топинамбура, для культивирования бактерий Ralstonia eutropha с выходом ПГА 65-70 %.

4. Получена математическая модель зависимости выхода редуцирующих веществ от технологических параметров при гидролизе топинамбура разбавленной серной кислотой. Предложен режим процесса гидролиза, обеспечивающий выход РВ 53,2 %. Установлено, что в гидролизате на долю глюкозы приходится 48,6 %, фруктозы 37,7 % от РВ.

5. Установлена возможность сбраживания субстратов, полученных на основе гидролизатов топинамбура, промышленными штаммами дрожжей вида Schizosaccharomyces Pombe и Saccharomyces vini. Показано, что выход этилового спирта со 100 кг сбраживаемых РВ на этих субстратах выше на 4-7 л, чем на традиционных древесных и зерновых.

6. Показана эффективность использования обесспиртованной барды в качестве субстрата для получения белковых кормовых дрожжей. Установлено, что прирост биомассы дрожжей Candida на субстратах из топинамбура 1,3-1,6 раза выше, чем на традиционных древесных и зерновых субстратах.

7. Впервые показана возможность использования остатка после гидролиза вегетативной части топинамбура в качестве субстрата для культивирования грибов рода Trichoderma с получением биопрепарата типа «Триходермин».

8. Предложена технологическая схема комплексной переработки вегетативной части топинамбура и приведены технико-экономические расчеты, которые показали эффективность биохимической переработки этого вида сырья.

Основные положения диссертации содержатся в следующих публикациях:

1.Прохорова А.Н., Немкова Т.Г., Емелина Т.Н. Гидролиз стеблей топинамбура разбавленной серной кислотой // Химико-лесной комплекс-проблемы и решения: Сб. тез. докл. науч.-практ. конф.-T.l.-Красноярск: СибГТУ, 2001,- С.276-278.

2. Емелина Т.Н., Прохорова А.Н., Немкова Т.Г. Топинамбур-перспективное сырье для биохимической промышленности // Экология Южной Сибири: Материалы Южно-Сибирской междунар. науч. конф. студентов и молодых ученых, Абакан, 21-24 нояб. 2001.-Т.Н.-Абакан,

2001.-С.25-26.

3. Емелина Т.Н., Чупрова H.A., Рязанова Т.В. Переработка стеблей топинамбура // Проблемы экологии и развития городов: Сб. ст. всерос. науч.-практ. конф., Красноярск, 4-7 дек. 2001.-Красноярск, 2001.- С. 216219.

4. Емелина Т.Н., Рязанова Т.В Чупрова H.A. Получение углеводсодержащих субстратов из вегетативной части топинамбура // Химия растительного сырья.-2002.-№ 2.-С.117-119.

5. Ryazanova T., Emelina Т. Obtaining РНВ on basis of substratum from a vegetative part of topinambour // International Symposium on Biological Polyesters: Munster, September 22-26,2002. - Munster, 2002. - P. 144.

6. Емелина Т.Н., Рязанова T.B., Волова Т.Г. Применение субстратов из вегетативной части топинамбура в биотехнологии // Растительные ресурсы для здоровья человека (возделывание, переработка, маркетинг): Материалы междунар. науч.-практ. конф., Москва, 23-27 сент. 2002.-М.,

2002,- С.351-354.

7. Емелина Т.Н., Рязанова Т.В., Чупрова H.A. Использование вегетативной части топинамбура сорта «Интерес» для производства этанола // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты: Сб. науч. тр. -№ 8. - М.: Изд-во РАЕН, 2003. - С. 100-106.

Подписано в печать 9.10.2003. Сдано в производство 10.10.2003. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Изд. № 242. Заказ № £-19. Лицензия ИД № 06543 от 16.01.02.

Редакционно-издательский отдел, типография СибГТУ 660049, г. Красноярск, пр. Мира, 82.

16 35

ВВЕДЕНИЕ.

1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

1.1 Химический состав топинамбура.

1.2 Переработка топинамбура.

1.3 Получение гидролизатов и-* растительного сырья.

1.4 Микробные полигидроксиалканоаты.

1.5 Биоконверсия растительного сырья с получением защитных биопрепаратов.

2. МЕТОДЫ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТОВ.

2.1 Объекты исследования.

2.2 Методы исследования химического состава вегетативной части топинамбура и твердого остатка.

2.3 Методы культивирован!'-! ".::сгерий Ralstonia culropha.

2.4 Методы анализа бактериальной биомассы

2.5 Методы проведения эксперимента при оптимизации режима гидролиза вегетативной части топинамбура.

2.6 Методы наработки опытной партии гидролизата.

2.7 Методы исследования гидролизата и нейтрализата.

2.8 Методы подготовки и проведения брожения гидролизатов вегетативной части топинамбура и исследования бражки.

2.9 Методы исследования обесспиртованной барды и проведения культивирования белковых кормовых дрожжей.

2.10 Методы культивирования микроорганизмов на поелеэкстракцион ном остатке.

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.1 Исследование химического состава вегетативной части топинамбура.

3.2 Культивирование бактерий на субстратах из вегетативной части топинамбура.

3.3 Оптимизация режима гидролиза вегетативной части топинамбура.

3.4 Получение этанола из вегетативной части топинамбур.

3.5 Культивирование кормовых дрожжей.

3.6 Биодеструкция твердого остатка.

4 ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ.

5 ВЫВОДЫ.

В связи с сокращением доступных ресурсов древесины в последние годы во всем мире уделяется большое внимание изысканию новых видов сырья для химической и биохимической переработки. Среди таковых-биомасса злаков, культурных и дикорастущих травянистых растений, багасса различных видов. Однако эти виды сырья до сих пор не получили широкого распространения в биотехнологии, в основном из-за отсутствия совершенных методов и аппаратов для переработки.

Основное требование, предъявляемое к сырью для биохимической переработки - высокое содержание полисахаридов. Этому требованию, согласно данным химического состава, в полной мере удовлетворяет вегетативная часть топинамбура, традиционно используемая в кормопроизводстве. Благодаря значительному содержанию углеводов наиболее приемлемым способом для ее переработки может быть кислотный гидролиз. Полученные сахаросодержащие субстраты потенциально приемлемы для любых биотехнологических процессов, включая биосинтез этанола, кормового белка, и других ценных продуктов микробного синтеза, например-полигидроксиалканоатов (ПГА). ПГА- термопластичные полиэфиры биологического происхождения, которые по базовым свойствам аналогичны полипропилену и полиэтилену, но обладают такими уникальными свойствами, как биоразрушаемость и биосовместимость. Разработка и освоение новых, экологически чистых материалов, включающихся в биосферные круговоротные циклы, соответствует концепции экологически безопасного устойчивого промышленного развития. В «Повестке дня 21 века», принятой в 1991 г. на специальной конференции ООН по окружающей среде и развитию, акцентировано внимание на необходимость разработки и внедрения новых экологически безопасных материалов.

Для создания новых технологий и повышения эффективности имеющихся мощностей биохимических заводов с учетом возрастающих требований к защите окружающей среды необходим комплексный подход к использованию сырьевой базы. Одним из экологически чистых способов утилизации твердого остатка после гидролиза вегетативной части топинамбура является биоконверсия, позволяющая получить препараты, применяемые для биологической защиты растений.

Таким образом, необходимость разработки с целью практического внедрения технологии комплексной переработки вегетативной части топинамбура с получением этанола, кормового белка, биополимеров и защитных биопрепаратов очевидна, что и явилось целью данной работы.

ВЫВОДЫ.

1.Предложен новый подход к организации технологического процесса комплексной биохимической переработки вегетативной части топинамбура с высоким выходом целевых продуктов с единицы исходного сырья.

2. Исследован химический состав вегетативной части топинамбура и показано, что целесообразно осуществлять гидролитическую переработку сырья в две стадии: на первой - экстракция горячей водой, на второй-гидролиз разбавленной серной кислотой.

3.Впервые показана возможность применения фруктозосодержащего субстрата, полученного на основе водного экстракта топинамбура, для культивирования бактерий Ralstonia eutropha с высоким выходом полимера (65-70 %).

4. Получена математическая модель зависимости выхода редуцирующих веществ от технологических параметров при гидролизе топинамбура разбавленной серной кислотой. Предложен режим процесса гидролиза, обеспечивающий выход РВ 53,2 %. Установлено, что в гидролизате на долю глюкозу приходится 48,6 %, на фруктозу 37,7 % от РВ.

5. Установлена возможность сбраживания субстратов, полученных на основе гидролизатов топинамбура промышленными штаммами дрожжей вида Schizosaccharomyces Pombe и Saccharomyces vini. Показано, что выход этилового спирта со 100 кг сбраживаемых РВ на этих субстратах выше на 4-7 л чем на традиционных древесных и зерновых

6. Показана эффективность использования обесспиртованной барды в качестве субстрата для получения белковых кормовых дрожжей. Установлено, что прирост биомассы дрожжей Candida на субстратах из топинамбура 1,3-1,6 раза выше, чем на традиционных.

7. Впервые показана возможность использования твердого остатка после гидролиза вегетативной части топинамбура в качестве субстрата для культивирования грибов рода Trichoderma с получением биопрепарата типа «Триходермин». л л

8. Предложена технологическая схема комплексной переработки вегетативной части топинамбура и приведены технико-экономические расчеты, которые показали эффективность биохимической переработки этого вида сырья. щ

1. Эйхе Э.П. Топинамбур или земляная груша. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1957.-193 с.

2. Кочнев Н.К., Калиничев М.В. Топинамбур биоэнергетическая культура XXI века. М.: Изд-во АРЕС, 2002.-76 с.

3. Давыдович С.С. Земляная груша. М.: Гос. изд-во с.-х. литературы, 1957.-180 с.

4. Вавилов П.П. Растениеводство. М.:Колос, 1979.-519 с.

5. Медведев П.Ф. Малораспространенные кормовые культуры. Л.: Колос, 1970.-160 с.

6. Утеуш Ю.А. Новые перспективные культуры. Киев: Наук. Думка, 1991.-192 с.

7. Лапшина Т.Б. Основные морфологические признаки топинамбура в условиях Коми АССР//Тр. Коми фил. АН СССР, 1987.-№ 87 -С.37-44.

8. Голубев В Н., Пасько Н.М., Волкова И В. Топинамбур пищевой, биоэнергетический и экологосберегающий ресурс // Сырье и материалы,-1996.-№ 6,- С. 41-45.

9. Пасько Н.М. Сортотипы топинамбура // Сборник научн. тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции картофеля. Л.: ВИР, 1987.-т. 115,- С. 69-75.

10. Пасько Н.М. Топинамбур на кормовые, технические, пищевые, лекарственные и экологические цели // Топинамбур и тописолнечник -проблемы возделывания и использования: Тез. докл. - Одесса: Маяк, 1991,-С. 9-15.

11. Механизация производства топинамбура / Б.А. Козаченко, М.М. Шумило, А.Ф. Завгородний и др. // Топинамбур и тописолнечник -проблемы возделывания и использования: Тез. докл. Одесса: Маяк, 1991,-С. 50-55.

12. Chancen fur Topinambur als Industrieplanze / Bramm A. Lohnunfernehmen Land-und Forstwirt. 1986, vol. 41, 8, p. 460-462.

13. Tolerance of Columbia Jerusalem artichoke to selective herbicides. Woll D.A., Kiehn F.A., Friesen G.H., Can J. Plant. Sci, 1987, vol. 67,3, p. 835837.

14. Редкие и лекарственные растения в садах Подмосковья // Сост. М.Н. Бородачев. М.: Всерос. об-во охраны природы, Моск. обл. совет, 1988.-253 с.

15. Устименко Г.В. Земляная груша М.: Гос. изд-во с.-х. литературы, I960.- 190 с. •

16. Топинамбур и его использование / Гулый И.С., Бобровник Л.Д., Ефремов Н.С., Пасько Н.М. // Пищевая промышленность: Научно-производ. сборник,- Киев: Урожай, 1987.-№ 1,-С.40-42.

17. Дорофеева Л.А. Комплексная переработка вегетативной части топинамбура: Автореф. дис. канд. техн. наук. Красноярск, 2000.-22 с.

18. Кахана Б.М., Арасимович В В. Биохимия топинамбура Кишинев: Штиинца. - 1974.-88 с.

19. Сапронов А.Р. Технология сахарного производства. М.: Агропромиздат, 1986.-431 с.

20. Топинамбур лечебно-профилактический продукт при сахарном производстве и ожирении / АС. Ефимов, Л.Т. Ваторихина, А.В. Орлова, И.М. Меявщек // Топинамбур и тописолнечник - проблемы возделывания и использования: Тез. докл. - Одесса: Маяк, 1991,- С. 128.

21. Изучение гидролиза 3-х форм инулина / Л.Д. Бобровник, Г.А. Лезенко, И.Г. Гриненко и др. // Топинамбур и тописолнечник проблемы возделывания и использования: Тез. докл. - Одесса: Маяк, 1991.- С. 78.

22. Вернер В.Д. Топинамбур а Западной Сибири // Топинамбур и тописолнечник проблемы возделывания и использования: Тез. докл. -Одесса: Маяк, 1991,-С. 26-28.

23. Einflub des Standortes der N-Dungung, der Sorte und des Erntezeilpunktes auf den Entrag an fermentierdaren Zuckernbei Topinamburkraut uiid-knollen / Leible L., Kahnt G. // Z. Acker und Pflanzenbau. - 1988,- vol. 161, 5,-p. 339-352.

24. Химия: Справ, изд. / В. Шретер, К.Х. Лаутеншлегер, X. Бибрак,- М.: Химия, 1989.-648 с.

25. Голубев В Н., Волкова И.В., Кушапаков Х.М. Топинамбур. Состав, свойства, способы переработки, области применения,- Астрахань: Волга, 1995.- 82 с.

26. Сапронов А.Р., Бобровник Л.Д. Сахар.-М.: Лесн. пром-сть, 1981.-256 с.

27. Троянова Л.Н. Химия и товароведение сырья промышленности сахаристых веществ,- Краснодар, 1976. 72 с. ,

28. Бобровник Л.Д., Ремесло Н.В. О динамике углеводного комплекса топинамбура//Сахарная свекла: производство и переработка 1991.-М» 6,-С. 51-54.

29. Петрушевский В В. Производство сахаристых веществ Киев: Урожай, 1989,- 165 с.

30. Дам Фу Йен. Органические кислоты растений инулинообразователей: Автореф. Дис. канд. техн. наук."- Л., 1967,

31. Регуляция роста и развития картофеля- М.: Наука, 1990. 174 с.

32. Куликов Я.К., Иванов М П. Структурно-функциональные особенности белков ячменя и картофеля. М.: Университетское, 1988,- 112 с.

33. Прокопенко Л.С., Юрчснко Х.Ф. Химический состав и питательный состав клубней топинамбура // Топинамбур и тописолнечникпроблемы возделывания и использования: Тез. докл. Одесса: Маяк, 1991.-С. 58-60.

34. Юрченко Х.Ф., Прокопенко Л.С. Химический состав и питательность зеленой массы топинамбура // Топинамбур и тописолнечник -проблемы возделывания и использования: Тез. докл. Одесса: Маяк, 1991,-С. 60-62.

35. Эйхе Э.П. Вопросы химии и биохимии топинамбура // Изв. АН ЛатвССР.-1976,-№3.-С. 77-89.

36. Голубев В.II., Куев В.Л., Гончаров Н.И. Биотехнологические аспекты переработки топинамбура//Пищевая пром-сть.-1991 .-№ 9.-С.52-53.

37. Advances in Biochemical engineering and Biotechnology. -1985. -Vol. 32. -P. 1-24.

38. Амерханов H., Мукумов Х.Ю., Умурзаков 3. Топинамбур -перспективная кормовая культура // Сельское хоз-во Узбекистана.-1985.-№ 12.-С. 28-29.

39. Woollen A. Functional foods a new market? // Food Rev.-1990,- Vol.17,-№ 4,- P. 63-64.

40. Багаутдинова P.И., Федосеева Г.П. Продуктивность и фракционный состав углеводного комплекса разных по скороспелости сортов топинамбура // Сельскохозяйственная биология.- 2000,- № 1.- С. 55-63.

41. Food Engineering International. 1988. - Vol.13. -№ 8. - P. 29-30.

42. Бобровник Л.Д., Гулый И.С., Ремесло И В. Продукты профилактического питания на основе топинамбура // Химия, медико-биологическая оценка и использование пищевых волокон: Тез. докл. -Одесса, 1988.-С. 73-74.

43. Industrielle Obst und Gemueseverwertung. -1987. Vol. 72. -№ 9. -P.355-358.

44. Ченченко 3.A., Абовян С.С., Мкртчян Т.А Использование топинамбура в консервной промышленности // Хранение и переработка сельхозсырья.-1998.-№ 6.-С.27-29.

45. Animal Feed Science and technology. -1986. Vol. 15. -№ 3. -P. 197-213.

46. Applied Biochemistry and Biotechnology. -1988. -№ 17. -P. 45-54.

47. Biomass. -1985. Vol. 7. -№ 2. -P. 85-97.

48. Варламова К.А., Борова A.P. Топинамбур и тописолнечник -проблемы возделывания и использования // Топинамбур и тописолнечник проблемы возделывания и использования: Тез. докл. -Одесса: Маяк, 1991.- С. 6-9.

49. Использование клубней топинамбура сорта «Патат» для производства спирта / О.М. Баев, Ф.Г. Шепель, Д.Ф. Шепель и др. // Растительные ресурсы для здоровья человека (возделывание, переработка, маркетинг).-М, 2002,-С. 316-317.

50. Dissertation Abstract International. 1988. - Vol. 49. -№ 3. -P. 609.

51. Biotechnology and Bioengineering. 1988. - Vol. 31. -№ 7. -P. 705-710.

52. Крикунова Jl.H., Александрова M M. Энерго- и ресурсосберегающая технология этанола из топинамбура.1. Сравнительная характеристика способов подготовки сырья к сбраживанию// Хранение и переработка сел ьхозсырья.-2000.-№ 6.-С.64-67.

53. Крикунова Л.Н., Александрова М.М. Энерго- и ресурсосберегающая технология этанола из топинамбура.II. Сравнительная характеристика способов активации инулиназ топинамбура. // Хранение и переработка сельхозсырья.-2000.-№ 7.-С.56-58.

54. Крикунова Л.I I., Александрова М.М. Энерго- и ресурсосберегающая технология этанола из топинамбура. III. Исследование процесса сбраживания сусла из топинамбура // Хранение и переработка сел ьхозсырья. -2000.-№ 10.-С.57-59.

55. Крикунова JI.H., Александрова М.М. Энерго- и ресурсосберегающая технология этанола из топинамбура.1У. Характеристика показателей качества бражки И Хранение и переработка сельхозсырья.-2001.-№ 4.-С.48-50.

56. Пащенко Л.П. Рациональные аспекты в переработке топинамбура // Хранение и переработка сельхозсырья.-1999.-№ 7.-С.13-17.

57. Басс Х.Ф. Материалы к изучению биосинтеза белка и витаминов из углеводов растительного сырья: Автореф. дис. канд. техн. наук.-Рига, 1953.

58. The sugar institute / Chem. Ind. News. 1989. - Vol. 34. 6. -P. 400402.

59. Yukov ВС, Burta J., Pichler-Magyar E. Technishegevinnung der Kohlenhydrate aus Topinambur // Vortrage der imgarichen Wissenschaftichenverein fur Lebensmittelindustie. -1987. -№ 42. -P.l 13116.

60. Revista Portuguesa de Farmacia. 1988. - VoL 38. -№ 2. -P. 27-32.

61. Conti F.W. Extraction of sirop from Jerusalem artichoke. Stracrice S. -1953.-310 p.

62. Бобровник Л.Д., Гулый И.С., Грушецкий Р.П. Получение чистых высокофруктозных сиропов гидролизом инулина / Топинамбур и тописолнечник — проблемы возделывания и использования: Тез. докл. Одесса: Маяк, 1991С. 86-87.

63. Архипович Н.А. Получение фруктозы из клубней топинамбура //Проблемы индустриализации общественного питания страны: Тез. докл. Харьков,1989.-С. 174.

64. Бондарь С.Н., Голубев В.Н. Экстрагирование свекловичногопектина//Пищевая пром-сть.-1992.-№ 12.-С.18-19.

65. Холькин ЮЛ Технология гидролизных производлств. М.: Лесн.пром-сть, 1989.-496 с.

66. Технология гидролизных производи ств/В.И.Шарков, С.А.Сапотницкий, О.А.Дмитриева, ИФ.Туманов. М: Лесн. пром-сть, 1973.-408 с.

67. Гидролиз гемицеллкшоз:Получение и применение продуктов гидролиза растительного сырья: Обзор, информ.- М:ВНРШСЭНТИ Минмедпрома, 1988.-Вып. 2.-32 с.

68. Горохов Г.И. Исследование закономерностей процесса механической деструкции трудногидролизуемых полисахаридов растительных материалов: Автореф. дис. . канд. техн. наук.-Л., 1966.-22 с.

69. Каменный В.И. Интенсификация процесса перколяционного гидролиза растительного сырья: Автореф. дис. . канд. техн. наук.-Л., 1980.-18 с.

70. Корольков И.И. Перколяционный гидролиз растительного сырья.

71. М.: Лесн. пром-сть, 1990.-271 с.

72. Кухаренко А.А., Винаров АЛО. Безотходная биотехнологияэтилового спиргга.- М.: Энергоатомиздат, 2001.-272 с.

73. Saxena A., Gard S.K., Verma J. Simultaneous saccharification and fermentation of waste newspaper to ethanol bioressour // TechnoL -1992 № l.-P. 13-15.

74. Bashir S., Khan A.W. Direct conversion of all the sugars produced from the hydrolysis of lignocellulosic materials to ethanol by coculture // 5 th Can. Bioenergy Symp.-Ottava, 1984.-P. 483-486.

75. Эпштейн Я.В., Краев Л.Н. Технология перколяционного гидролизадревесины .- М.: Лесн. пром-сть, 1990.-100 с.

76. Recent aspects in the biochemistry and genetics of cellulose degradation / Beguin P., Grepinet O., Millet J., Aubert J.P. // 8 th Int. Biotecchnol. Symp.- Paris, 1988: Proc. Vol 2. Paris, 1989.-P. 1015-1029.

77. Effect of pretreatment of poplar wood upon enzymatic saccharification / Katrin F. AI, Chambat G., Joselau J.P. // J. Wood Chem. and Technol-1992.-Vol. 12, № 3.-P. 355-366.

78. Гут Б.М., Мельников В.Г. Откорм крупного рогатого скота на барде.-Л.: Колос -1984.-211 с.

79. Яровенко В.Л., Ровинский Л А. Моделирование и оптимизация микробиологических процессов спиртового производства.-М.:Наука.-1978.-279 с.

80. Ammonia-recycled percolation process for pretreatment of biomass feedstock: Pap. 16 th Symp. Biotecchnol. and Chem., Catlingburg Tenn., May 9-13, 1994 / Yoon H.H., Wu Z.W., Lee Y.Y.// Appl. Biochem and Biotecchnol. A.-l995.-Vol.51-52,- P. 5-19.

81. Калунянц К.А., Бачурин А.П., Сарсенбаев A.E. Влияние электрохимической обработки на реологические свойства крахмала пшеницы: Науч. исслед. в брод, пр-ве.- Краснодар: Изв вузов. Пищ технол., -1991.- С. 166-168.

82. Stein R.S. Polymer recycling: opportunities and limitations // Proc.Natl.Acad. Sci.-1992.-№ 89,- P. 835-838.

83. Angelova N., Hunkeler D. Rationalizing the design of polymeric , biomaterials // Trens Biotechnol.- 1999.-№ 17,-P.409-421.

84. Byron D. Biomaterials: novel materials from biological sources-1991.-Stockton; New York.л л

85. Chang H.N. Biodegradable plastic.and biotechnology. In: W.K. Teo, M.G.S. Yap, and S.K.W. Oil (eds.) Better living through innovative biochemical engineering. Continental, Singapore, 1994,- P. 24-30.

86. Chum H.L. Polymers from biobased materials. Noyes Data Corporation, Park Ridge, New York ,1991.

87. Dawes E.A. Novel biodegradable microbial polymers. Kluwer, Academic, Dordrecht, the Netherlands, 1990.

88. Swift G. Derections for environmentally biodegradable polymer // Research. Acc. Chem. Res. -1993.-№26.-P. 105-110.

89. Lee E.Y., Kang S.H., Choi C.Y. Biosynthesis of poly(3-hydroxybutyric acid)ate-co-3-hydroxyvalerate) by new isolated Agrabacterium sp. SH-1 and GW-014 from structurally unrelated single carbon substrates // J. Ferment. Bioeng. 1995.- № 19- P. 328-334.

90. Lee S.Y., Lee Y.K., Chang H.N. Stimulatory effects of amino acids and oleic on poly(3-hydroxybutyric) acid synthesis by recombinant Escherichiacoli. //J. Ferment. Bioeng.-1995 .-№ 79.-P. 177-180.

91. Steinbuchel A. Thermoplastisch verfonnbare und biologich abbaubare polyester aus bakterien: geeignete neue werkstoffe aus nachwaschsenden rohstoffen// CLBChein. Labor Biotechnik.-l 993,-№ 44. P.378-384.

92. Steinbuchel A. Presentation at the International Symposium on Bacterial Polyhydroxyalkanoates-94. Montreal, Canada

93. Braunegg G., Lefebvre G., Genzer K.F. Polyhydroxyalkanoates, biopolyesters from renewable resources: Physiological and engineering aspects (Rewiew article)//J. of Biotechnol. 1998.- № 65. - P. 127-161.

94. Madison L.L., Huisman G.V. Metabolic Engineering of Poly(3-Hydroxyalkanoates): From DNA to Plastic. // Microbiol. And Molecular Biology Rev.-1999.-№ 63,-P. 1-25.

95. Anderson A.J., Dawes E.A. (1990). Occurrence, metabolism, metabolic role, and industrial uses of bacterial polyliydioxyalkanoates. // Microbiol. Rev.-Vol. 54,- P. 450-472.

96. Brandl H., Gross R., Lenz R. Plastics from bacteria and for bacteria: poly(-(3-liydrox\alkanoates) as natural, biocompatible, and biodegradable polyesters// Adv. Biochem. Eng. Bioteclinol.-1990.- Vol. 41,- P. 77-93.

97. Byron D. Production of poly-fMiydroxybutyrate: polyhyclroxyvalerate copolymers// FEMS Microbiol. Rev.-1992.-№103,- P. 247-250.

98. Byron D. Polyliydioxyalkanoates. In: D.P. Mobley (ed.), Plastics frommicrobes: microbial synthesis of polymers and polymer precursors. Hanser Munich, 1994.-P. 5-33. •

99. ЮО.Сох M.K. Steinbuchel A., Ilustede E., Liebergesell M., Pieper U., Properties and applications of polyliydioxyalkanoates. // Biodegradable plastics and polymers. -Elsevier: Amsterdam, 1994,- P. 120-135.

100. Doi Y. Microbial polyesters // VCH.- New York, 1990

101. Holms P. A. Applications oh PHB-A-microbially produced biodegradable thermoplastic// Phys. Thechnol. 1985.-№16.- P. 32-36.

102. Lee S.Y. Bacterial Polyliydioxyalkanoates (Rewiew) // Bioteclinol. and Bioengin.-1996 Vol. 49. P. 1-14.

103. Lee S.Y. Plastic bacteria. Progress and prospects for polyhydroxyalkanoate production in bacteria (Reviews) // Tibtech.-1996,- Vol. 14 P. 431-438.

104. Steinbuchel A. Biodegradable plastics // Curr. Opin. Bioteclinol.-1992,-Vol. 3.-P. 291-297.

105. Molecular basisfor biosynthesis and accumulation of polyliydroxyalkanoic acids in bscteria / Steinbuchel A., Hustede E.,1.ebergesell M„ Pieper U. // FEMS Microbiol. Rev.- 1992,- Vol. 103.-P. 217-230.

106. Steinbuchel A. Polyhydroxyalkanoic acids. In: D. Byron (ed.) Biomaterials: novel materials from biological sources.- Stockton, New York, 1990,- P. 123-213.

107. Bacterial synthesis of poly-p-hydroxyalkanoates / Lenze R.W., Fuller R.C., Scholz C., Touraimd T. // Biodegradable plastics and polymers.-Elsevier Science: Amsterdam, 1994.

108. Valentin H.E., Steinbuchel A. Cloning and characterization of the Methylobacterium extorquens polyhydroxyalkanoic-acid-synthase structural gene// Appl. Microbiol. Lett. 19.93,- Vol. 39,- P. 309-317.

109. Barham P.J., Barker P., Organ S.J. Physical properties of poly(hydroxybutyrate) and copolymers of hydroxybutyrate and hydroxyvalerate // FEMS Microbial. Rev. 1992,- Vol. 103. P. 289-298.

110. The biological and physical chemistry of polyhydroxyalkanoates as seen by NMR spectroscopy / Bonthrone K.M., Clauss J., Horowitz D.M., Hunter K.M. // FEMS Microbial. Rev. -1992,- Vol. 103.-P. 269-278.

111. Inoue Y., Yoshie N. Structure and physical properties of bacterial synthesized polyesters // Prog. Polym. Sci.-1992.- Vol. 17.- P. 571-610.

112. Luzier W.D. Materials derived from biomass/biodegradable materials // Proc. Natl. Acad. Sci. USA .-1992,- Vol. 89.-P. 839-842.

113. Nakamura, S., Kunioka M., Doi Y. Biosynthesis and characterization of bacterial poly(3-hydroxybutyrate-co-hydroxypropionate) // Macromol. Rep.- 1991,- Vol. 28.-P. 15-24.

114. Physical properties and enzymatic degradability of poly(3-hydroxybutyrate) stereoisomers with different stereoregularities / Abe II., Matsubara I., Doi Y., Hori Y., Yamaguchi A. // Macromolecules.- 1994,-Vol. 27,-P. 6018-6025.

115. Day M., Shaw К., Cooney D. Biodegradability, an assessment of commercial polymers according to the Canadian Method for Anaerobic Conditions//J. Environ. Polym. Degrad.- 1994,- Vol. 2,- P. 121-128.

116. Degradation of poly(P-hydroxyalkanoates) and polyolefin blends in a municipal wastewater treatment facility / Gilmore D.F., Antoun S., Lenz R.W., Fuller R.C. // J. Environ. Polym. Degrad.-1993.- Vol. I.- P. 269274.

117. Microbial degradation of poly(3-hydro.\ybutyrate) and poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) in compost / Mergaert J., Webb A., Anderson C., Wouters A., Swings ill J. Environ. Polym. Degrad.-1994.-Vol. 2.-P.177-183.

118. Mergaert J., Wouters A. In situ biodegradation of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hvdroxyvalerate) in natural waters // ; Can. J. Microbiol.-1994,- Vol. 41 .-P. 154-159.

119. Jendrossek D., Frisse A. Biochemical and Molecular characterization of the Pseudomonas lemoignei Polyhydrohyalkanoate Depolymerase system.//J. of Bacteriol. -1995,- Vol. 177,- P. 596-607.

120. Choi J., Lee S.Y. Process analysis and economic evaluation for poly (3-liydroxybutyrate) production bv fermentation // Bioprocess Eng. —1997 -Vol.17.-P. 335-342.

121. Choi J., Lee S.Y. Factors affecting the economics of polyhydroxyalkanoate production by bacterial fermentation // Appl Microbiol Biotechnol.- 1995,- Vol. 51 P. 13-21.

122. Ilazenberg W., Witholt B. Efficient production of medium-cliain-lenghth poly(3-hydroxyalkanoates) from octane by Pseudomonas oleovprans: economic considerations // Appl. Microbiol. Biotechnol -1997,- Vol. 48,-P. 588-596. .

123. Wallen L.L., Davis E.N. Biopolymers of activated sluge // Environ. Sci. TechnoI.-1972.- Vol. 6 P. 161-164.

124. Wallen L.L., Rolnvedder W.K. Poly-p-hydroxyalkanoate from activated sludge // Environ. Sci. Technol.-1974.- Vol. 8.-P. 576-579.

125. Wong H.H., Lee S.L. Poly(3-hydroxybutyrate) production from whey by high density cultivation of recombinant Escherichia coli. // Appl. Microbiol. Biotechnol.- 1998,- Vol. 50,- P. 30-33.

126. Williams M.D., Peoples O.P. Biodegradable plastic from plants // Chemtech. -1996,- Vol.26.- P. 38-44.

127. Production of Poly(3-hydroxybutyric acid) in Cell Density Fed-Batch Culture of Alcaligenes eutrophus with Phosfat Limitation / Ryu H.W., Halm S.K., Chang Y.K., Chang H.N. // Biotechnol. Bioeng.- 1997,- Vol. 55,- P. 28-32.

128. Production of poly(D-3-hydroxybutyrate) from C02, H2 and 02 by high cell density autotrophic cultivation of Alcaligenes eutrophus Tanaka K, Ishizaki A, Kanamaru T, Kawano T // Biotethnol Bioeng.-1995.-Vol.-45,-P. 268-275. ,

129. Production of poly(3-hydroxybutyric acid) by fed-bacth culture of Alcaligenes eutrophus with glucose concentration control / Kim B.S., Lee S.C., Lee S.Y., Chang H.N. // Biotechnol. Bioeng.- 1994.-Vol.43.-P. 892898.

130. Byosinthesis of poly(3-hydroxybutyric acid-co-3-hydroxypentoic acid) from unrelated substances by Burkholderia sp./ Rodrigues M.F.A., Silva

131. F., Gomez J.G.C., Valentin H E. // AppI Microbiol Biotechnol.-1995,-Vol. 43.-P. 880-886.

132. Borman E. J, Leibner M., Beer B. Growth-associated production of polyhydroxybutyric acid by Azotobacter beijernckii from organic nitrogen substrates//Appl. Microbiol. Biotechnol. -1998,- Vol.48.- P.84-88.

133. Lee S.Y. Poly(3-hydroxyalkanoate) production from xylose by recombinant li. coli. // Bioprocess Engin .-1998.-Vol. 18.-P. 397-399.

134. Extraction of poly-3-hydroxybutyrate using chlorinated solvents / Ramsay J.A., Berger E., Voyer R„ Chavarie C. // Biotechnol. Tech. 1994,-Vol 8.-P. 589-594.

135. Cromwick A.M, Foglia T, Lenz R.V. The microbial production of poly(hvdroxyalkanoates) from tallow//Appl Microbiol Biotechnol -1996 -Vol. 46 -P. 464-469.

136. Lee J.H., Lim M.S., Hong J. Application of nonsingular transformation to on-line optimal control of poly-(3-hydroxybutyrate fermentation // J. Biotechnol.- 1997.-Vol. 55.-P. 135-150.

137. Lee S.Y., Wang F„ Lee Y. Korean patent № 97-66842, 1997. *

138. Ashby R.D., Foglia T.A. Poly(hydroxyalkanoate) biosynthesis from triglyceride substrates // Appl Microbiol Biotechnol.-1998.-Vol. 49,- P. 431-437.

139. Solaiman D.K., Ashby R.D., Foglia T.A. Medium-Chain-Length of Poly(fi-hydroxyalkanoate) from Triacylglycerols by Pseudomonas saccharophila Current Microbiol. -1999.- Vol.38.-P. 151 -154.

140. Fuchtenbuch B, Steinbuchel A. Biosynthesis of polyhydroxyalkanoates from low-rank coal liquefaction products by Pseudomonas oleovorans and Rhodococcus rubber //Appl Microbiol Biotechnol.- 1999,- Vol. 52,- P. 91-95.

141. Collins S.H. Choice of substrate in polyhydroxybutyrate synthesis // Carbon Substrates in Biotechnology.-1987,-Vol. 21.- P. 161-169.

142. Lee S.Y. High cell density cultivation of Escherichia coli // Trends Biotechnol.- 1996,-Vol 14,- P. 90-105.

143. Yamane T. Cultivation engineering of microbial bioplastics production // FEMS Microbiol. Rev.- 1992,- Vol. 103-P. 257-264.

144. Yamane T. Yield of poly-D(-)-3-hydroxybutyrate from various carbon sources: a theoretical study // Biotechnol. Bioeng.-1993,- Vol. 4I.-P. 165170.147. llepner L. Cost analysis of fermentation processes // Chimia-1996- Vol. 50,- P. 442-443.

145. Choi J., Lee S.Y. Efficient and economical recovery of poly-(3-hydroxybutyrate) from recombinant Escherichia coli by simple digestion with chemicals//Biotechnol Bioeng.-1998.- Vol. 25.-P. 221-226.

146. Bourque D, Pomerleau Y, Groleau D. High-cell-density production of poly-P-hydioxybutyrate (PI IB) from methanol by Methylobacterium extorquens: production of high-molecular-mass PHB // Appl. Microbiol Biotechnol.- 1995,- Vol. 44,- P. 367-376.

147. Huijberts G.N.M., Eggink G. Production of poly(3-hydroxyalkanoates) by Pseudomonas putida KT2442 in continuous cutures // Appl. Microbiol. Biotechnol.-1996,- Vol 46,- P.233-239.

148. Fukui Т., Doi Y. Efficient production of polyhydroxyalkanoates from plants oils by Alcaligenes eutrophus and recombinant strain // Appl. Microbiol. Biotechnol.-1998,- Vol.49.-P 333-336.

149. Enhanced production of D-(5-. hydroxybutyric acid) through strain improvement / Kim C.H., Hong W.K., Lee I.Y., Choi E.S. // J. Biotechnol. 1999.- Vol. 69. -P. 75-79.1.19

150. Ramsay J.A, Hassan M.-C.A., Ramsay B.A. Hemicellulose as a potential substrate for production of poly(p-hydroxyalkanoates) // Can. J Microbiol.-1995,- Vol. 41.- P. 262-266.

151. Hassan M.A., Shrai Y„ Kusabuashi N., Karim M., Nakanishi K., Hashimoto K. (1997).The production of polyhydroxyalkanoate from anaerobically treated palm oil mill efficient by Rhodobacter sphaeroides J. Ferment. Bioeng. 83:485-488.

152. Шлегель Г. Общая микробиология.-M.: Мир, 1987.-567 с.

153. Воробьева Л И. Техническая микробиология. М.: Высш. шк., 1987,142 с.

154. МирчинкТ.Г. Почвенная микология.-М.: МГУ, 1988.-219 с.

155. Гидролизный сахар в рационе животных / Л.К. Эрнст, З.Н. Науменко, Н.В. Курилов, С.И. Ладинская // Сельское хозяйство России.-1979.-№1.-С. 43-46.

156. Махова Е.Г. Культивирование грибов рода Trichoderma на лигноуглеводных субстратах и получение биопрепарата: Дис. канд. техн. наук.-Красноярск/.СибГТУ, 2003

157. Weindling R. Trichoderma lignorum as a parasite of soil fungi // Phytopath. -1932. -Vol. 22, № 7.-P. 837-845.

158. Hoitink A.J. Fungal Properties of Composted bark // Compost Sci.-l980. -Vol. 21.-P. 24-27.

159. Воробьева Ю.В. Загнивание проростков сосны, полегание их всходов и разработка биологического метода борьбы с этими заболеваниями: Дис. канд. биол. наук. М.: МГУ, 1959 -132 с.

160. Гаршина Т.Д. Защита всходов от полегания в лесопитомниках // Лесное хозяйство. 1991 .-№ 9.-С. 53-54.

161. Chet 1., Inbar J. Biological control of fungal pathogens // Appl. Biotechn. Acta. -1994. Vol. 48, № 1. -P. 37-43.

162. Prochazkova Z., Nestra M., Sikorova A., Nemecova D. Introduction of integrated pest management in nurseries in the Screech Republic //

163. Diseases and Insects in Forest Nurseries. IUFRO Working Party, Gainesville, Florida, May, 19-24, 1996.-Abstract.

164. Громовых Т.Н. Фитопатогенные микромицеты сеянцев хвойных в Средней Сибири: видовой состав, экология, биологический контроль: Автореф. дис. докт. биол. наук.- М.: МГУ, 2002.-37 с.

165. Деянова О.А., Мирчинк Т.Г., Запрометова К.М. Роль отдельных компонентов комплекса почвенных грибов в разложении органических веществ //Микол. И фигопатол. -1985.-Т. 19, вып. 1.-С. 12-15.

166. Попкова К.В. Общая фитопатология. М.: Агропромиздат, 1989. -399 с.

167. Егураздова А.С., Каверзнева Г.Д. Современные направления борьбы с болезнями сельскохозяйственных культур. -М.: ВНИИТЭИСХ, 1979.-56 с.

168. Сейкетов Г.Ш. Грибы рода Trichoderma и их использование в практике. Алма-Ата: Наука, 1982.-124 с.

169. Industrielle Obst und Gemueseverwertung- 1987.-Vol. 72.-№.9.-P. 355358.

170. Славянский А. К. и др. Химическая технология древесины / А. К. Славянский, В. И. Парков, А. А. Ливеровский: Учеб. Пособие. М.: Гослесбумиздат, 1962. - 576 с.

171. Оболенская А.В., Ельницкая З.Г1., Леонович А.А. Лабораторные работы по химии древесины и целлюлозы. -М.:Экология, 1991.-320 с.

172. Korsatko W., Wagnegg В // Pharmazie.-I982.-V. 37.-Р. 525-529.

173. Головко Н Е. Спектральный анализ. М.:Наука, 1978.-48 с.

174. Ермаков А.И. Методы биохимических исследований.-Л.: Колос,1972-306 с.

175. Волова Т.Г., Луковенко С.Г., Васин А.Д. // Биортехнология.-1994.-№

176. Collins S. Carbon substratus in biotechnology // Stowell et al., end SRL PRESS, Castle, 1987.-1987,-V. 21 .-P. 161-169.

177. Спирин A C. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот// Биохимия.-1958, № 23, С. 656-658.

178. Покровский А.А, Ертанов Е.Д.// Вопросы питания -1965.-№ З.-С. 3844.

179. Покровский А.А.// Вопросы питания.-1975.-№ З.-С. 25-40.

180. Пен Р.З. Статистические методы моделирования и оптимизации процесса целлюлозно-бумажного производства- Красноярск: КГУ, 1982.-192 с.

181. Емельянова И.З. Химико-технический контроль гидролизного производства. -М.: Лесн. пром-сть, 1973.-120 с.

182. Количественный химический анализ растительного сырья / В.И.Шарков, М.И.Куйбина, Ю.П.Соловьева и др.- М.: Лесн. пром-сть, 1976.-72 с.t

183. Изменение химического состава древесины под действием лигпинразрушающих грибов / В.А.Соловьева, О.Н.Малышева, И.Л.Малева, В.И. Саплина//Химия древесины.-1985.-№ 6.-С. 94-100.

184. Воронина Т.Ю. Совершенствование технологии гидролизного производства и использованием крахмалсодержащего сырья: Автореф. канд. техн. наук. -Красноярск, 1997.

185. Технология спирта / В.А. Маринченко, В.А. Смирнов, Б.А. Устинпиков и др. М.: Легкая и пищевая пром-сть, 1981.-416 с.1. ПРИЛОЖИ 1ИЕ■i1. УТВЕРЖДАЮ СибГ'ГУ1. Жэд ''Ш&г