автореферат диссертации по химической технологии, 05.17.06, диссертация на тему:Энзимная полимеризация фенолов

1. В ведение.

2. Литературный обзор.

2.1 Характеристика фермента пероксидазы.

2.2 Типы реакций, катализируемых пероксидазой.

2.3 Механизм пероксидазного катализа.

2.4 Факторы, влияющие на скорость реакций пероксидазы.

2.5 Полимеризация в водной среде.

2.6 Реакции в водно-органической среде.

2.7 Реакции в микрогетерогенных системах.

2.8 Строение и свойства продуктов.

2.9 Возможные области применения.

3. Обсуждение результатов.

3.1 Ферментативный синтез полимеров.

3.1.1 Влияние природы растворителя.

3.1.2 Влияние буферного раствора.

3.1.3 Влияние строения фенола.

3.1.4 Влияние окислителя.

3.1.5 Влияние концентрации мономера и катализатора.

3.1.6 Влияние температуры.

3.2 Строение и свойства продуктов.

3.3 Исследование механизма процесса.

3.4 Модификация.

3.5 Сополимеризация.

4. Экспериментальная часть.

4.1 Объекты исследования.

4.2 Методика проведения эксперимента.

4.3 Методы исследования.

5. Выводы.

В настоящее время уровень развития науки позволяет широко использовать в промышленности биологические процессы: получение аминокислот, витаминов, антибиотиков, ацетона, спиртов и органических кислот, а также пептидов и белков. Неоспоримыми преимуществом биотехнологий являются использование возобновляемого сырья, возможность отказа от применения токсичных и агрессивных реагентов, мягкие условия синтеза, низкая энергоемкость, высокая селективность процессов, в том числе стерео- и энантиоселективность.

Большинство продуктов получают с использованием микроорганизмов. Однако, несмотря на то, что процессы синтеза проходят в живых клетках, они, в конечном счете, проходят с участием биологических катализаторов -ферментов, которые могут использоваться в свободном виде. При этом высокая эффективность последних компенсирует их высокую стоимость.

Дальнейшее развитие химических технологий, использующих ферменты, идет преимущественно в двух направлениях: физическая и химическая модификация последних, например иммобилизация, и клеточная и генетическая инженерия, позволяющие получать принципиально новые каталитические системы.

Актуальность. К числу тех проблем, которые являются чрезвычайно актуальными, следует отнести выяснение возможности синтеза полимеров в мягких условиях из таких исходных веществ, которые трудно назвать мономерами в классическом представлении об исходных веществах для синтеза полимеров. В этом направлении кажутся весьма перспективными процессы, протекающие в условиях ферментативного катализа, что ярко иллюстрируют данные, относящиеся к окислительной полимеризации ряда соединений в присутствии лакказы и пероксидазы. Из полученных ранее результатов следует, что объектами исследования могут быть вещества, имеющие в структуре группы с неподеленными парами электронов. Вместе с 4 тем уже хорошо известны приемы, позволяющие получать полимеры, в том числе и из фенолов в условиях окислительного процесса с применением в качестве катализаторов ферментов. Однако, к моменту начала настоящей работы практически имелась лишь информация относительно принципиальной возможности такого синтеза, без выяснения факторов, его определяющих. Полностью отсутствовали сведения о механизме процесса.

Цель работы. Задачей настоящего исследования является всестороннее изучение факторов, влияющих на процесс ферментной полимеризации на примере фенолов с целью получения продуктов с регулируемой величиной молекулярной массы.

Научная новизна. В работе впервые дана оценка влияния комплекса факторов на процесс полимеризации (структура исходного мономера, типа и количества окислителя, температуры). Высказано суждение о механизме процесса.

Практическая значимость. На основе изученных зависимостей установлены оптимальные условия синтеза полимеров фенилен-феноксидного строения, отличающиеся высокой термостойкостью. Показана высокая реакционная способность этих продуктов и установлена возможность получения на их основе полимеров с хлор- и аминогруппами в цепи.

2 Литературный обзор.

5 Выводы.

1. В растворе и в водной эмульсии получен поли-п-фенилфенол в условиях окисления с использованием в качестве катализатора фермента пероксидазы из хрена. Определены факторы, влияющие на процесс синтеза и отмечено, что обязательным условием является использование растворов фермента в воде, а мономера и образующегося полимера в растворителе.

2. Зависимость молекулярной массы образующегося продукта от рН буферного раствора представляет собой кривую с максимумом, соответствующим рН=6, при котором пероксидаза имеет максимальную активность. Последняя резко снижается приуменьшении содержания воды в среде реакции ниже 30%, в то время как оптимум молекулярных масс приходится на значение 15 - 20%.

3. Отмечено, что окислитель инактивирует фермент, что является одним из решающих факторов, влияющих на выход продукта. Лучшие выхода полимера достигаются при ступенчатой загрузки окислителя. Вместе с тем молекулярная масса полимера прежде всего зависит от его растворимости в реакционной среде.

4. Поли-п-фенилфенол, полученный в среде водного диоксана, включает в свою структуру фениленоксидные и фенольные звенья. В качестве промежуточных соединений обнаружены димеры, тримеры, тетрамеры свидетельствующие о том, что синтез является ступенчатым процессом, протекающим по сложному механизму, включающему полирекомбинацию и каталитическое дегидрирование.

5. Полученный полимер обладает высокой реакционной способностью. Он отверждается при нагревании, превращаясь в высокотермостойкий продукт, легко ацилируется и нитруется. Нитро-поли-п-фенилфенол восстанавливается до свободного амина. Таким образом, можно предполагать практическую полезность поли п-фенилфенола, как в виде отвержденного высокотермостойкого полимера, так и в виде продукта полимераналогичных превращений.

1. Газарян И.Г. Урманцева В .В., Решетникова И.А.,Кунаева И. Г. P.M.,Ким Б.Б. Биотехнология пероксидаз растений и грибов.//Итоги науки и техники. ВИНИТИ РАН, М, 1992 г., №.36. 172 с.

2. Dunford Н.В. On the function and mechanism of action of peroxidases. //Coordination Chemistry Reviews. -1976r. -V.19, № 3.-P. 187-251.

3. Aibara S. Yamashita H., Mori E., Kato M., Morita Y. isolation and Caracterization of Five Neutral Isoenzymes of Horseradish Peroxidase. //Journal of Biochemistry. -1982 r. -V.92, №2.-P. 531-539.

4. Березин И.В., Угарова Н.Н.Дершенгольц Б.И., Боровко Л.Ю. Влияние простетической группы пероксидазы из хрена на стабильность фермента. //Биохимия.-1975 г. -Т.40, №2 .-С. 297-301.

5. Березин И.В., Угарова Н.Н., Кершенгольц Б.И. Определение константы равновесия между нативным ферментом и апоферментом для пероксидазы хрена. //Доклады АН СССР.-1974 г. -Т.214, №3 .-С. 701-704.

6. Edwards А.М, Silva Е. Effect of visible light on selected enzymes, vitamins and amino acids. //Journal of photochemistry and photobiology B: Biology. 2001 r.-V.63,№3.-P. 126-131.

7. Galati G., Chan Т., Wu В., O'Brien P.J. Glutathione-dependent generation of reactive oxygen species by the peroxidase-catalyzed redox cycling of flavonoids. //Chemical Research in Toxicology. -1999r.--V.12, №3.-P. 521525.

8. Iwahara K., Hirata M., Honda Y., Watanabe Т., Kuwahara M. Free-radical polymerization of acrylamide by manganese peroxidase produced by the white-rot basidiomycete Bjerkandera adusta. //Biotechnology Letters. 2000 r. -V.22, №17.-P. 1355-1361.

9. Munir I.Z., Dordick J.S. Soybean peroxidase as an effective bromination catalyst. //Enzyme and Microbial Technology. 2000 r. -V.26, №5.-P. 337-341.

10. Budde C.L., Beyer A., Munir I.Z., Dordick J.S., Khmelnitsky Y.L. Enzymatic nitration of phenols. //Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. 2001 r. -V.15, №2.-P. 55-64.

11. Kersten P.J., Kalyanaraman В., Hammel K.E., Reinhammar В., Kirk Т.К. Comparation of ligninperoxidase, horseradish peroxidase and laccase in the oxidation of mehtoxybenzenee. //Biochemical Journal.-1990 r. -Y.268, №5.-P. 475-480.

12. Russ R., Zelinski Т., Anke T. Benzylic biooxidation of various toluenes to aldehydes by peroxidase. //Tetrahedron Letters. -2002 r: -V.43, №5.-P. 791793.

13. Казлаускайте Ю.Д. Физико-химические свойства и механизм действия иероксидаз и их полипептидных моделей. //Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук.-1991 г. Вильнюс 22с.

14. Dunford Н.В. Horseradish peroxidase: structure and kinetic properties. // Everse J., Everse K.E., Grisham M.B. Peroxidases in chemistry and biology. -V.2. CRC Press, Boca Raton, FL, 1991 г., -P. 1-24.

15. Chance B. Peroxidase kinetics in coupled oxidation; an experimental and theoretical study. //Archives of Biochemistry and Biophysics.-1952 r. -V. 41, №4.-P. 432-441.

16. Ebermann R., Pichorner H. Detection of peroxidase catalysed phenol polymeryzation indused by enzimatically reduced paraquat. //Phytochemistry.-1989 r. -V.28, № 3.-P. 711-714.

17. Chance B. The spectra of the enzyme-substrate complexes of catalase and peroxidase. //Archives of Biochemistry and Biophysics.-1952 r. -V.41, №4.-P. 404-415.

18. Chance B. The kinetics of the complexes of peroxidase formed in the presence of chlorite or hypochlorite. //Archives of Biochemistry and Biophysics.-1952 r. -V. 41, №4.-P. 425-431.

19. Apanco E(. IIepoKcim;a3a. //TaMnaicycHiiy KaxycaH K0C0.-1987r. -T.32, №6.-C. 764-770.

20. Marklund S., Ohlsson P.I., Opara A., Paul K.G. Substrate profiles of acidic and slightly basic horseradish peroxidase. // Biochimica et biophysica acta. 1974. -V.350, №2. - c. 304-313.

21. Job D., Dunford H.B. Substituent effect on the oxidation of phenols and aromatic amines by horseradish peroxidase compound II. //European Journal of Biochemistry.-1976 r. -V.66, №4 .p. 607-614.

22. Dunford H.B., Adeniran A.J. Hammet Correlation for Reaction of Hoseradish Peroxidase Compaund II with Phenols. //Archives of Biochemistry and Biophysics.-1986 r. -V.251, № 2.-P. 536-542.

23. Диксон M., Уэбб Э. Ферменты. //Пер.с англ. Гинодмана JI.M., Левянт М.К.; под ред. Антонова В.И., Браунштейна А.Е. М. Мир, 1982, -Т.2, -С. 398-806.

24. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. //Пер.с англ. Гребенщикова Ю.Б.; под ред. Курганова Б.И. М. Мир, - 1980, 432 с.

25. Угарова Н.Н., Лебедева О.В., Савицкий А.П. Пероксидазный катализ и его применение. М. МГУ. 1981 г. 92 с.

26. Лапина Г.П. Элементы кинетики ферментативных реакций. -Тверь, 1998, -66 с.

27. Hosino N. The effect of polymerization of HRP on the peroxidase activity in the presense of excess H202. //Journal of biochemistry.-1987 r. -V.102, №4.-P. 785.

28. Young L.M., Soo K.S. Inactivation and clevage of horseradish peroxidase by various reducing agents. //Phytochemistry.-1998 r. -V.49, №1.-P. 23-27.

29. Teunissen P.J.M., Field J.A. 2-Chloro-l,4-dimethoxybenzene as a mediator of lignin peroxidase catalyzed oxidations. //FEBS Letters-1998 r. -V.439, №2.-P. 219-223.

30. Каницкая Л.В., Медведева C.A., Турчанинов. Дегидрационная полимеризация о-метоксифенола: теоретическое исследование. //Высокомолекулярные соединения. Серия А-1999 г. -Т. 41, №5.-С. 757.

31. Yu J., Taylor К.Е., Zou H., Biswas N., Bewtra J.K. Phenol conversion and dimeric intermediates in horseradish peroxidase-catalyzed phenol removal from water. //Environmental Science Technology-1994 r. -V.28, №5 -P. 2154-2160.

32. Klibanov A.M. Enzymatic removal of toxic phenols and anilines from wast waters. //Journal of Applied Biochemistry.-1980r. -V.2, №5.-P. 414-421.

33. Klibanov A.M. Peroxidase-catalyzed removal of phenols from coal-conversion wastewaters. //Science.-1983 r. -V.221, №4607.-P. 259-261.

34. Tong Z., Qingxiang Z., Hui H., Qin L., Yi Z. Kinetic study on the removal of toxic phenol and clorphenol from waste water by horseradish peroxidase. //Chemosphere.-1998 r. -V.37, №8.-P. 1571-1577.

35. Miland E, Smyth M.R., Fagain C.O. Phenol removal by modified peroxidases. //Journal of chemico-technological biotechnology-1996 r. -V.67.-P. 227-236.

36. Caza N., Bewtra J. K., Bistwas N., Taylor К. E. Removal of phenolic copounds from synthetic wastewater using soybean peroxidase. //Water Research.-1999 r. -V.33, № 13.-P. 3012-3018.

37. Masuda M., Sakurai A., Sakakibara M. Effect of reaction conditions on phenol removal by polymerization and precipitation using Coprinus cinereus peroxidase. //Enzyme and Microbial Technology. 2001 r. -V.28, №4.-P. 295300.

38. Wu Y., Taylor K.E., Biswas N., Bewtra J.K. A model for the protective effect of additives on the activity of horseradish peroxidase in the removal of phenol. //Enzyme and Microbial Technology.-1998 r. -Y.22, №5.-P. 315-322.

39. Batra R., Gupta M.N. Enhancement of enzyme activity in aqueous-organic solvent mixtures.//Biotechnology Letters.-1994 г.-V. 16, № 10.-P. 1059-1064.

40. Kazandjian R.F., Dordick J.S., Klibanov A.M. Enzymatic analyses in organic solvents. Biotechnology end Bioengineering.-1986 r. -V.28, №3.-P. 417.

41. Пучкаев A.B. Реакции пероксидаза, глюкозо-6-фосфатазы и уреазы в неводных средах. //Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук.-1993. Минск. -197с.

42. Ayyagari M.S.R., Kaplan D.L., Chatterjee S., Walker J.E., Akkara J.A. Solvent effects in horseradish peroxidase-catalyzed polyphenol syntesis. //Enzyme and Microbial Technology. 2002 r. -V.30, №1, -P.3-9.

43. Xu Y.-P., Huang G.-L., Yu Y.-T. Kinetics of phenolic polymerization catalyzed by peroxidase in organic media. //Biotechnology and bioengineering.-1995 r. -V.47, №1,-P.117-119.

44. Suatoni J.S., Snyder R.E., Clark R.O. Votammetric studies of phenol and aniline ring substitution. //Analytical chemistry.-1961 r. -V. 33, №13,-P. 18941897.

45. Ryu. K. Free energy relationship of substrate and solvent hydrophobocities with enzymatic catalysis in organic media. //Journal of The American Chemical Society.-1989 r. -V.l 11, №20,-P. 8026-8027.

46. Torres E., Siminovich B., Barzana E., Vazquez-Duhalt R. Thermodynamic hydrophobicity of aqueous mixtures of water-miscible organic solv ents predicts peroxidase activity. //Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. -1998 r. -V.4, №3,-P. 155-159.

47. Kim J.R, Choi Y.S., Yoo Y.J. Reactivation of Horseradish peroxidase in organic solvent using extraction. //Biotechnology Letters. 2000 r. -V. 22, №5, -P. 485-489.

48. Miland E., Smyth M.R., Fagain C. Increased thermal and solvent tolerance of acetylated horseradish peroxidase. //Enzyme and Microbial Technology.-1996 r.-V.19,№l,-P. 63-67.

49. Miland E., Smyth M.R., Fagain C. Modification of horseradish peroxidase with bifunctional N-hydroxysuccinimide esters: Effects on molecular stability. //Enzyme and Microbial Technology.-1996 r. -V.l9, №4, -P. 242-249.

50. Azevedo A.M., Prazeres D.M.F., Cabral J.M.S., Fonseca L.P. Stability of free and immobilised peroxidase in aqueous-organic solvents mixtures. //Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. 2001 r. -V.15, №4, -P. 147-153.

51. Rodakiewicz-Nowak J. Phenols oxidizing enzymes in water-restricted media. //Topics in Catalysis. 2000 r. -V.ll, №2.-P. 419-434.

52. Ryu. K., Dordik J.S. How do Organic Solvents Affect Peroxidase Structure and Function. Biochemistry.-1992 r. -V.31, -P. 2588-2598.

53. Schmitt M.M., Schuler E., Braun M., Haring D., Schreier P. Horseradish peroxidase: An effective but unselective biocatalyst for biaryl synthesis. Tetrahedron Letters. -1998 r. -V.39, №19, -P. 2945-2946. "

54. Alva K.S., Samuelson L., Kumar J., Tripathy S., Cholli A.L. Enzyme-catalyzed polymerization of 8-hidroxyquinoline-5-sulfonate by in situ nuclear magnetic resonance spectroscopy. //Journal of Applied Polymer Science.-1998 r. -V.70, №7, -P.1257-1264

55. Dordik J.S., Marietta M.A., Klibanov A.M. Polymerization of Phenols Catalysed by Peroxidase in Nonaqueous Media. //Biotechnology end Bioengineering.-1987 r. -V.30, №1, -P. 31-36.

56. Akkara J.A., Senecal K.J., Kaplan D.L. Synthesis and characterization of polymers produceed by horseradish peroxidase in dioxan. //Journal of Polymer Science Part A: Polymer Chemistry.-1991 r. -V.29, №6, -P. 1561-1574.

57. Uyama H., Kurioka H., Sugihara J., Kobayashi S. Enzymatic Synthesis and Thermal Properties of a New Class of Polyphenol. //Bulletin of Chemical Society of Japen.-1996 r. -V.69, №1, -P. 189-194.

58. Uyama H., Kurioka H., Kaneko I, Kobayashi S. Synthesis of a New Family of Phenol Resin by Enzymatic Oxidative Polymerization. //Chemistry Letters.-1994 r. №.3,-P. 423-426.

59. Kurioka H., Komatsu I., Uyama H., Kobayashi S. Enzymatic oxidative polymerization of alkylphenols. //Macromolar Rapid Communication.-1994 r. -V.15, №6, -P.507-510.

60. Ayyagari M.S., Marx K.A., Tripathy S.K., Akkara J.A., Kaplan D.L. Controlled Free-Radical Polymerization of Phenol Derivatives by Enzyme-Catalyzed Reactions in Organic Solvents. //Macromolecules.-1995 r. -V.28, №15, -P.5192-5197.

61. Kobayashi S., Kurioka H., Uyama H. Enzymatic Synthesis of soluble polyphenol derivative from 4,4'biphenyldiol. //Macromolar Rapid Communication.-1996 r. -V.17, №8, -P. 503-508.

62. Ayyagari M.S., Akkara J.A., Kaplan D.L. Enzyme-Mediated polymerizatin reactions: peroxidase-catalyzed polyphenol synthesis. //Acta Polymer.-1996 r. -V.47, №5, -P. 193-203.

63. Uyama H. Preparation of polyphenol particles by peroxidase-catalysed dispersion polymerization. //Colloids and Surfaces. A.-1999 г. -V. 153, №2, -P. 189-194.

64. Uyama H., Kurioka H., Sugihara J., Komatsu I., Kobayashi S. Oxidative Polymerization of p-Alkylphenols Catalyzed by Horseradish Peroxidase. //Journal of Polymer Science. Part A: Polym. Chem.-1997 r. -V.35, №6, -P. 1453-1459.

65. Keiser B.A., Varie D., Barden R.E., Holt S.L. Detergentless water/oil microemulsion composed of hexane, water and 2-propanol. 2.Nuklear magnetic resonance studies, effect of NaCl. //Journal of Physical Chemistry.-1979 r. -V.83,№10,-P. 1276-1280.

66. KhmelnitskyY.L., Van Hoek A., Veeger C., Visser A.J.V.G. Detergentless microemulsion as media for enzymatic reactions. Spectroscopic and ultracentritugation studies. //Journal of Physical Chemistry.-1989 r. -V.93, №2, -P 872-878.

67. Khmelnitsky Y.L., Hilhorst R., Veeger C. Detergentless microemulsion as media for enzymatic reactions. Cholesterol oxidation catalised by cholesterol oxidase. //European Journal of Biochemistry.-1988 r. -V.176, №2, -P. 265-271.

68. Давлетшин А.И., Сильвестрова И.Г. Зубов В.П., Егоров В.В. Влияние ПАВ различной природы на активность пероксидазы и трипсина //Вестник московского университета. СЕР. 2. ХИМИЯ,-1998 г. -Т.39, №4, -С. 272275.

69. Аникеева Т.А, Егоров В.В. Влияние липидов и солей жирных кислот на активность пероксидазы в растворе. //Вестник московского университета. СЕР. 2. ХИМИЯ. 2001 г. -Т. 42, №2, -С. 138-141.

70. Berzina T.S., Piras L., Troitsky V.I. Study of horseradish peroxidase activity in alternate-layer Langmuir-Blodgett films. //Thin Solid Films.-1998 r. -V.327, -C. 621-626.

71. Bruno F.F., Akkara J.S., Samuelson L.A., Kaplan D.L., Mandal B.K., Marx K.A., Kumar J., Tripathy S.K. Enzymatic mediated synthesis of conjugated polymers at the langmuir trough air-water interfase. //Langmuir.-1995 r. -V.l 1, №3, -P. 889-892.

72. Мартинек К. Катализ водорастворимыми ферментами в органических растворителях. //Доклады АН СССР,-1977 г. -Т.236, №4, -С. 920-923.

73. Martinek К. Colloidal solution of water in organic solvents: a microheterogeneous medium for enzymatic reactions. //Science.-1982 r. -V.218, №4575, -P. 889.

74. Клячко H.JI Кинетические закономерности действия ферментов, солюбилизированных обращенными мицеллами ПАВ в органических растворителях. //Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук.-1983 г. М -198с.

75. Клячко H.JI. Катализ ферментами, включенными в обращенные мицеллы поверхностно-активных веществ в органических растворителях. Пероксидаза в системе аэрозоль ОТ вода - октан. //Молекулярная биология,-1984 г. -Т.18, №4, -С.1019-1031.

76. Левашов А.В. Катализ ферментами в агрегатах ПАВ. //Итоги науки и техники. Серия Биотехнология. Химические и ферментативные реакции в растворах ПАВ.-1987 г. вып. 4, -С. 112-158.

77. Дулькис Ю.К. Рекомбинантная и природная пероксидаза хрена в водной среде и в среде обращенных мицелл. //Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук. -1997 г. М.-169с.

78. Еремин А.Н., Метелица Д.И. Регуляция каталитической активности пероксидазы в смешанных обращенных мицеллах ПАВ. Биохимия,-1985 г. -Т.50, №1, -С. 102-108.

79. Еремин А.Н., Метелица Д.И. Стабильность глюкозо-6-фосфатдегидрагеназы и пероксидазы хрена в системах фермент ПАВ -вода - гексан, моделирующих мембранные липид-белковые ансамбли. //Биохимия.-1986 г. -Т.51, №10, -С.1612-1621.

80. Rao A.M., John V.T., Gonzalez R.D. Catalytic and Interfacial Aspects of enzymatic polymer synthesis in reversed micellar systems. //Biotechnology end Bioengineering.-1993 г. -V.41, -P. 531-540

81. Premachandran R.S., Banerjee S., Wu X.-K., John V.T., McPherson G.L. Enzymatic Synthesis of Fluorescent Naphthol-Based Polymers. //Macromolecules. -1996 r. -Y.29, №20, -P. 6452-6460.

82. Wang P., Martin B.D., Parida S., Rethwisch D.G., Dordick J.S. Multienzymatic synthesis of poly(hydroquinone) for use as a redox polymer. //Journal of The American chemical society.-1995 r. -V.l 17, №10.-P. 12885-12886 *

83. Kobayashi S. Патент №5824414 по заявке 1996000633378. Приоритет от 28.04.95: Preparation of spherical polyphenol particles. 17.04.1996.

84. Akkara J.А. Патент №5143828 по заявке 1991000815213. Приоритет от 31.12.91: Method for synthesizing an enzyme-catalyzed polymerized monolayer. 1.09.1992.

85. Farrel R. Biodégradation of polyaromatics synthesized by peroxidase-catalyzed free-radical polymerization. Journal of Environmental polymer. -1998 r. -V.6, №3, -P. 115-120.

86. Nguyen T.T. Патент №6146497 по заявке 19998000008079. Приоритет от 16.01.1998: Adgesives and resins and process for their production. 14.11.2000.

87. Nguyen T.T. Патент №9936465 по заявке 19998000008079. Приоритет от 16.16.1998: Enzyme-activated creping adhesive compositions for using in manufactore of paper products with improved strength. 22.06.1999.

88. Popp J.L., Kirk Т.К., Dordick J.S. Incorporation of p-cresol into lignins via peroxidase-catalysed copolymerization in nonaqueous media. Enzyme and Microbial Technology.-1991 r. -V.13, -P. 964-968.

89. Huttermann А. Патент №5608040 по заявке 1995000436367. Приоритет от 6.06.1995: Process for the production of lignin-containing polymers. 4.03.1997.

90. Akkara J. Патент №6150491 по заявке 1998000187209. Приоритет от 6.11.1998: Polyaromatic compounds and method for their production. 21.11.2000.

91. Premachandran R., Banerjee S., John V.T.,McPherson G.L. The Enzymatic Synthesis of Thiol-Containing Polymers to Prepare Polymer-CdS Nanocomposites. Chemistry of Materials.-1997 r. -V.9, №6, -P. 1342-1347.

92. Akkara J.A., Ayyagari M.S.R., Bruno F.F. Enzymatic synthesis and modification of polymers in nonaqueous solvents. Trends in Biotechnology. -1999 г.-V. 17,-P. 67-73.

93. Samuelson L.A. Патент №6018018 по заявке 1997000999542. Приоритет от 21.11.1997: Enzymatic template polymerization. 25.01.2000.

94. Fischer G.C. Патент №950669 по заявке 19998000081491. Приоритет от 13.04.1998: Method of catalytic crosslinking of oxidative polymers and two-pack composition used therein. 20.10.1999.

95. Fischer G.C Патент №6149977 по заявке 1999000286872. Приоритет от 6.04.1999: Method of catalytic crosslinking of polymer and two-pack composition used therein. 21.11.2000.

96. Read R.R., Miller E. Some substituted phenols and germicidal activity.// Journal of The American Chemical Society. 1932 г., -V.54, №3, -P. 1195-1199.130

97. Chattaway F.D. Acetilation in aqueous alkaline solutions. //Journal of Chemical Society. 1931 r. №10, c.2495-2496.

98. LeRosen A.L., Smith E.D. The migration of acetyl and benzoyl groups in o-aminophenol.//Journal of The American Chemical Society. 1948r. -V.70, №8 P.2705-2709.109. ТУ 6-09-10-1408-79.

99. Крешков А.П. Основы аналитической химии. -М. Химия, 1976 г. -Т.2 -480 с.