Разработка технологии дрожжевых обогатителей пищи на базе молочной сыворотки и растительного сырья

Лыско, Ксения Андреевна

Технология чая, табака и биологически активных веществ и субтропических культур

автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.10, диссертация на тему:Разработка технологии дрожжевых обогатителей пищи на базе молочной сыворотки и растительного сырья

кандидата технических наук: Лыско, Ксения Андреевна
город: Москва
год: 2007
специальность ВАК РФ: 05.18.10
цена: 450 рублей

Диссертация по технологии продовольственных продуктов на тему «Разработка технологии дрожжевых обогатителей пищи на базе молочной сыворотки и растительного сырья»

Автореферат диссертации по теме "Разработка технологии дрожжевых обогатителей пищи на базе молочной сыворотки и растительного сырья"

На правах рукописи

ЛЫСКО КСЕНИЯ АНДРЕЕВНА

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ДРОЖЖЕВЫХ ОБОГАТИТЕЛЕЙ ПШЦИ НА БАЗЕ МОЛОЧНОЙ СЫВОРОТКИ И РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Специальность: 05 18 10 - Технология чая, табака и биологически активных веществ и субтропических культур

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Москва-2007

003070966

Работа выполнена на кафедре «Биотехнология» Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московский Государственный Университет пищевых производств»

Научный руководитель: доктор технических наук, профессор

Борисенко Евгений Георгиевич Официальные оппоненты: доктор технических наук, профессор

Винаров Александр Юрьевич кандидат технических наук, доцент Тихомирова Ольга Ильинична

Ведущая организация: ОАО «Очаковский молочный завод»

Защита состоится: « 29 » мая_2007 г в /а 00 час в ауд.

Ш-104 на заседании диссертационного совета Д 212.148.04 при ГОУ ВПО «Московский Государственный Университет пищевых производств» по адресу. 125080, Москва, Волоколамское шоссе, д 11.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО МГУПП

Отзыв на автореферат в двух экземплярах, заверенный печатью учреждения, просим направлять по адресу. 125080, Москва, Волоколамское шоссе, д 11, МГУПП, ученому секретарю диссертационного совета Д 212.148 04.

Автореферат разослан «

» 2007 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета, д.т.н, проф. (р '^¿гьННСлАи^^ КрюковаЕ В

Общая характеристика работы

Актуальность темы. На сегодняшний день в России достаточно остро стоит проблема нарушения структуры питания населения. Нехватка в рационе полноценных белков, витаминов, пищевых волокон, макро- и микронутриентов вызывает рост социально опасных заболеваний, в том числе желудочно-кишечных. Часто причиной этих заболеваний является нарушение микробиоценозов желудочно-кишечного тракта

Ассортимент ферментированных продуктов, употребляемых в пищу населением России, относительно неширок и, в основном, ограничен кисломолочными продуктами, тогда как спектр ферментируемого сырья и микроорганизмов, осуществляющих его ферментацию, может быть значительно расширен, как это делается в странах Юго-Восточной Азии и Океании, где широко используется биотрансформация растительных субстратов композициями на основе мицелиальных грибов, дрожжей и бактерий

В связи с увеличением объемов и ассортимента производства молока и молочных продуктов в России и за рубежом весьма актуальна проблема утилизации молочной сыворотки, которая ввиду своего состава, пищевой и биологической ценности является ценнейшим сырьем, однако нередко сбрасывается в канализацию, что негативно сказывается на работе очистных сооружений Одним из способов ее утилизации, не требующим предварительной обработки и значительных материальных затрат, является выращивание на ней специальных штаммов дрожжей Дрожжи -весьма технологичные микроорганизмы- они обладают высокой скоростью роста, устойчивостью к посторонней микрофлоре и богатым химическим составом.

В условиях дефицита кормового и пищевого белка дрожжевая биомасса является весьма перспективным источником не только белка и незаменимых аминокислот, но и минеральных веществ (в частности меташгопротеинов), витаминов и других БАВ (*) Поэтому в последнее время все больше внимания уделяется дрожжам как основе БАД к пище, да и самих пищевых продуктов.

Имеется достаточно фактических данных о положительном влиянии дрожжей на нормофлору кишечника Клеточные стенки дрожжей активно сорбируют токсины и токсичные метаболиты, обладают выраженным лакто- и бифидогенным эффектом, те дрожжевые препараты могут играть роль не только нутрицевтиков, но и пара-

' Примечание список сокращений представлен в конце реферата

фармацевтиков Поэтому производство дрожжевых обогатителей пищи и продуктов на их основе представляется весьма актуальным

Цель и задачи исследования. Основная цель диссертационной работы состояла в разработке технологии дрожжевых обогатителей (ДО) пищи на базе растительного сырья и молочной сыворотки и теоретическом и экспериментальном обосновании целесообразности использования полученных обогатителей пищи в хлебопекарной промышленности.

Для достижения поставленной цели сформулированы следующие задачи

- выделение из молочнокислых и ферментированных продуктов высокопродуктивных штаммов дрожжей, способных расти на молочной сыворотке и на негид-ролизованных растительных субстратах,

- испытание различных растительных субстратов в качестве компонента питательных сред для ГФ и ТФФ дрожжей и выбор наиболее перспективных из них,

- подбор оптимального состава питательных сред для максимального накопления биомассы и белка отселекционированными дрожжами,

- подбор оптимальных режимов культивирования в условиях ферментера;

- разработка технологии ДО для различных условий культивирования и комплекта документов для производства дрожжевых обогатителей,

- оценка биологической ценности и безопасности полученных ДО,

- исследование возможности применения ДО в хлебопечении

Научная новизна работы. Впервые осуществлен скрининг дрожжей из молочнокислых и других ферментированных продуктов, активно растущих на молочной сыворотке с растительным компонентом, проведена идентификация до рода дрожжевых культур, наиболее продуктивных в отношении накопления биомассы.

Выделен и охарактеризован новый штамм дрожжей Candida mconspicua A3 (идентифицирован методом ПЦР-анализа 288-субъединицы рРНК), активно накапливающий биомассу, белок и витамины на молочной сыворотке и растительном сырье Определен и оптимизирован состав питательных сред для ТФФ и ГФ выделенных дрожжей; четко продемонстрировано более интенсивное накопление биомассы и белка дрожжами на жидкой гетерогенной питательной среде по сравнению с гомогенной

Впервые подобраны технологические режимы культивирования дрожжей С mconspicua A3 на жидкой гетерогенной питательной среде, содержащей молочную

сыворотку и растительное сырье в условиях ферментера Проведена биохимическая, санитарно-гигиеническая и токсикологическая оценка полученного ДО, доказавшая его биологическую ценность и безопасность для потребителя Показана возможность использования полученного ДО в хлебопечении

Практическая значимость и реализация результатов работы. Проведенные исследования явились основой для решения задачи по созданию технологии ДО пищи на основе молочной сыворотки и растительного сырья.

Предлагаемая технология переработки кислой молочной сыворотки существенно упрощена по сравнению с существующими за счет исключения стадий предобработки (раскислениения, деминерализации и пр ). Предложен способ повышения продуктивности дрожжевых культур и увеличения содержания белка и витаминов в дрожжевом обогатителе в несколько раз за счет введения в молочную сыворотку растительных субстратов.

Разработана и экспериментально обоснована технология получения из молочной сыворотки и растительного сырья жидких и твердых ДО Показана их биологическая ценность и доказана безвредность. Наработана опытная партия ДО в условиях ОАО "Вимм-Билль-Данн" В производственных условиях секции хлебопекарных технологий МГУПП проведена апробация способа выпечки формового и подового хлеба на основе полученных ДО, повышающих биологическую ценность изделий

Разработан проект технических условий получения дрожжевого обогатителя пищи и проект технологической инструкции по получению дрожжевого обогатителя пищи. Подана заявка на выдачу патента РФ на способ получения биологически активных полуфабрикатов (№2006142024 от 28 11 06)

Теоретические и прикладные положения диссертационной работы излагаются в учебном процессе при чтении лекций и проведении практических занятий в Московском Государственном Университете пищевых производств, а также изложены в студенческом практикуме по селекции микроорганизмов, рекомендованном для студентов высших учебных заведений по специальности 271500 (240902) «Пищевая биотехнология», как способ формирования новых направлений в биотехнологии,

Апробация работы. Основные положения работы докладывались на российских и международных конференциях и симпозиумах Международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания (Москва, 2004), Всероссийской научно-технической конференции-выставке «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации (Москва, 2004, 2005 и 2006), Третьем съезде общества биотехнологов России им Ю А Ов-

чинникова (Москва, 2005), Пятой ежегодной международной молодежной конференции ИБХФ РАН-ВУЗЫ (Москва, 2005); Седьмом Международном Форуме «Высокие технологии XXI века» (Москва, 2006), Четвертой Международной научно-практической конференции «Технологии и продукты здорового питания» (Москва, 2006)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, в т ч 2 статьи в научных журналах, подана 1 заявка на выдачу патента РФ

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, выводов, библиографического списка, включающего 260 источников, из них 60 иностранных источников, и 11 приложений Работа изложена на 193 страницах машинописного текста, включает 3 8 таблиц и 21 рисунок.

1. Обзор литературы

В литературном обзоре рассмотрены общие представления о составе нормальной микрофлоры различных отделов ЖКТ, рассмотрены ее функции и механизмы антагонистической активности. Систематизированы литературные данные по БАД, приведена их классификация и краткая характеристика Сделан обзор существующих способов применения дрожжей в изготовлении продуктов функционального назначения Уделено внимание технологическим аспектам культивирования дрожжей Рассмотрена общая характеристика молочной сыворотки Систематизированы литературные данные о способах ее применения в различных отраслях промышленности, переработки и утилизации

Анализ литературных данных выявил проблемы, существующие в данной области знаний, и позволил сформулировать цель и задачи данного исследования

2. Экспериментальная часть 2.1. Материалы и методы исследований

Объектом исследования служили штаммы дрожжей, выделенные из спонтанных микробных ценозов плодово-ягодного сырья и из ценозов ферментированных, в т ч кисломолочных, продуктов Продукты высевали на пшеничные отруби, увлажненные до 50-55% 10%-ным раствором сахарозы с добавлением 50 мкг/мл гентами-цина для подавления роста бактерий. После инкубации в аэробных условиях при температуре 26-32°С выделяли доминирующие культуры и оценивали их продуктивность на отрубях, увлажненных молочной сывороткой Критерием оценки служила концентрация дрожжевых клеток в 1 г субстрата, накопленная в процессе ТФФ. Подсчет клеток осуществляли микроскопически в камере Горяева с разведением иссле-

дуемого твердофазного субстрата водой Идентификацию дрожжей проводили по общепринятой методике [Бабьева И.П, Голубев В.И, 1979] согласно определителям дрожжей, на сайте www cbs knaw ni. а также по анализу последовательности нуклео-тидов 288-субъединицы участка рРНК [Фомичева Г.М. и др, 2006, Kurtzman С.Р., Robnett С J, 1998] на капиллярном автоматическом секвенаторе ABI PRISM 3100-Avant на базе межинститутского центра коллективного пользования «Геном» при Институте молекулярной биологии РАН.

В качестве основы питательных сред использовали 6%-ную кислую молочную сыворотку и растительное сырье, зерно и отходы его переработки, крупы, солодовые ростки, соломенную и травяную муку

ТФФ в лабораторных условиях проводили в чашках Петри при высоте слоя 2-3 см и влажности субстрата 50-55% Чашки помещали в термостат на 24-48 часов при температуре воздуха 30±2°С.

ГФ вели в качалочных колбах на круговой лабораторной качалке при 180-220 об /мин. и в ферментере фирмы Biotron (Южная Корея) емкостью 40 дм3 с лопастной многоярусной мешалкой и кольцеобразным барботером. Продолжительность ферментации - 18-24 ч, температура 30±2°С Оптимизацию состава питательной среды для культивирования дрожжевых культур проводили методом аддитивно-решетчатого математического описания объекта [Бирюков В. В , Кантере В. М., 1985].

Содержание белка определяли по ГОСТ 23327-98 методом Къельдаля, РВ и крахмала - цианидным методом, влажность - по ГОСТ 29143-91 и ГОСТ 9404-88. Величину pH измеряли потенциометрическим методом. Содержание Сахаров определяли по ГОСТ 29247-91, витаминов - методом ВЭЖХ на хроматографе Varían Dynamax по ГОСТ 30627-98. Аминокислотный состав ДО определяли на аминокислотном анализаторе Hitachi-835 по методике, предлагаемой производителем Содержание кадмия и свинца определяли по ГОСТ Р 51301-99, ртути - по ГОСТ 26927-86, мышьяка - по ГОСТ 26930-86, пестицидов - в соответствии с общепринятым методикам [Клисенко М.А., 1992] Микробиологический контроль полученных ДО проводили общепринятыми методами [СанПиН 2 3.2.1078-01, ГОСТ 9225-84]

Качество хлебобулочных изделий, приготовленных безопарным способом с использованием полученных ДО, оценивали по органолептическим и физико-химическим показателям, принятым в хлебопекарной отрасли [Пучкова JI И, 1997].

Статистическую обработку экспериментальных данных, полученных не менее, чем в 3-х повторностях, проводили по программе Excel 2003 Microsoft Office.

2.2. Результаты исследований и их обсуждение 2.2.1. Выделение и первичный отбор дрожжей из дрожжесодержащих

материалов

Из естественных микробных ценозов плодово-ягодного сырья (облепиха, малина, кизил, ежевика и др) и ферментированных (квашеная капуста, моченые яблоки и пр ), в том числе кисломолочных (кефир, айран, кумыс и др), продуктов были выделены 274 новые дрожжевые культуры В табл 1 представлена продуктивность дрожжей, проявивших наибольшую интенсивность роста при первичном посеве на сывороточно-отрубевую питательную среду

Таблица 1

Продуктивность дрожжей на сывороточно-отрубевой среде

№ п/п Дрожжи Продуктивность, млрд кл/г № п/п Дрож жи Продуктивность млрд кл/г

24 часа 48 часов 24 часа 48 часов

1 2 3 4 5 6 7 8

1 К1 0,240 0,870 41 Al 0,880 1,150

2 К2 0,190 0,150 42 А2 1,130 3,700

3 КЗ 0,360 0,360 43 A3 2,030 4,850

4 К4 0,880 2,970 44 A4 0,890 2,320

5 К5 1,250 4,680 45 А5 1,250 2,540

б Кб 0,050 0,150 46 П1 0,380 0,750

7 К7 0,140 1,290 47 П2 0,100 0,050

8 К8 0,390 1,940 48 ПЗ едкл едкл

9 К9 1,770 2,540 49 П4 0,980 3,520

10 К10 0,350 0,740 50 П5 0,350 0,490

И К11 1,640 4,530 51 П6 едкл едкл

12 К12 0,790 3,430 52 П7 0,050 0,250

13 К13 1,060 3,900 53 П8 0,200 0,250

14 К14 0,350 0,450 54 П9 0,760 3,920

15 К15 1,110 2,900 55 П10 0,380 0,640

16 К16 0,380 1,610 56 ПИ 0,770 3,560

17 К17 0,480 0,930 57 П12 0,030 0,040

18 К18 0,710 0,850 58 П13 0,490 0,550

19 К19 1,760 2,450 59 П14 0,130 0,130

20 К20 1,150 3,400 60 П15 0,470 0,750

21 К21 1,000 1,030 61 П16 0,180 0,780

22 К22 0,880 2,950 62 П17 ед кл ед кл

23 К23 0,810 2,990 63 П18 2,290 3,790

24 К24 0,730 3,930 64 П19 0,780 0,680

25 К25 1,000 1,700 65 П20 0,160 0,260

26 К26 0,360 0,880 66 П21 1,490 3,870

27 К27 0,050 0,050 67 П22 едкл едкл

28 К28 1,470 4,120 68 П23 0,380 0,480

29 К29 0,370 0,770 69 П24 0,290 0,600

30 КЗО 0,130 1,200 70 П25 едкл едкл

31 К31 0,970 0,750 71 П26 ед кл едкл

32 К32 0,280 2,800 72 П27 0,030 0,050

33 КЗЗ 1,050 3,670 73 П28 0,460 0,690

34 К34 0,250 0,780 74 П29 едкл едкл

35 КЗ 5 0,220 3,000 75 ПЗО 0,100 0,240

1 2 3 4 5 6 7 8

36 КЗб ед кл ед кл 76 П31 0,150 0,250

37 К37 1,250 1,100 77 П32 ед кл едкл

38 КЗ 8 0,060 0,060 78 ПЗЗ 2,360 3,890

39 К39 0,990 3,350 79 П34 0,180 0,800

40 Кум* 0,350 1,550 80 Cf.** 2,130 4,160

♦кумыс,

** Candida famata - эталонная культура, которая уже более 9 лет используется для производства БАД «Фервитал»

Наиболее продуктивные из выделенных культур были идентифицированы до рода Дрожжи К5 были идентифицированы как Debaryomyces, К11 - как Pichia, A3 -как Issatchenkia, кумысные дрожжи - как Torula. Наиболее технологичным из перечисленных оказался штамм A3, в связи с чем было проведено секвенирование участка рРНК 28S-субъединицы длинной 440 нуклеотидов этого штамма с использованием ПЦР с целью точной идентификации до вида Выявленная последовательность нуклеотидов оказалась полностью гомологична характерной для Candida inconsplcua.

В табл 2 представлены основные морфологические, культуральные и физиологические признаки штамма С mconspicua A3

Таблица 2

Основные морфологические, культуральные и физиологические признаки

штамма С. inconspicua A3

Признак Значение Признак Значение

Описание штриха Молочного цвета, густой консистенции Ассимиляция источников углерода Глюкоза Галактоза Сахароза Мальтоза Целлобиоза Трегапоза Лактоза Мелибиоза Раффиноза Мелецитоза Инулин Крахмал В-ксилоза Ь-арабиноза О-арабиноза О-рибоза Ь-рамноза Глюкозамин Глицерин Эритрит Да Да Да Да Нет Нет Да Нет Да Нет Нет Нет Да Нет Нет Нет Нет Да Да Нет

Форма клеток Круглые, овальные

Размер клеток от (1,5 - 3,5)х(3 - 6,5) до (3 - 5,5)х(5,5 - 7,5) мкм

Бесполые и мицели-альные структуры почкование глобалисти-ческое, многостороннее, образуют псевдомицел-лий

Рост в среде без витаминов Нет (потребность в пири-доксине, тиамине и биотине)

Галотолерантность 6-10%№С1

Рост при температуре 25°С 28°С 34°С 37°С 40°С 42°С Да Да Да Да Да Да

Гидролиз мочевины Нет Рибит Дульцит Маннит Сорбит Салицин Нитраты Молочная кислота Янтарная кислота Лимонная кислота Нет Нет Слабо Да/Слабо Нет Нет Да Да Нет

Расщепление арбутина Слабо

Образование крахмала Нет

Образование этанола Да

Поскольку в работе планировалось использовать молочную сыворотку и крах-малосодержащее сырье у выделенных штаммов определяли активность а-амилазы и Р-галактозидазы Наибольшую амилолитическую активность наблюдали у дрожжей С тсопБрюиа АЗ: 57 ед/см3. Об активности р-галактозидазы судили по скорости гидролиза лактозы в процессе развития на ней дрожжевых кулыур (рис 1) и характеризовали ее по периоду полупревращения

Время, час

Рис 1 Гидролиз лактозы дрожжевыми культурами.

Как видно, наиболее активно лактозу расщепляют дрожжи рода Torula. период полупревращения составляет 7 часов. Дрожжи С. inconspicua A3 гидролизу-ют 50% лактозы за 13 часов

2.2.2. Накопление дрожжевой биомассы в условиях ТФФ

Из литературных данных [Бабьева ИП, Чернов ИЮ., 2004] известно, что дрожжи растут в широком диапазоне рН, поэтому мы предварительно определили оптимальное значение рН молочной сыворотки- для дрожжей С. inconspicua A3, De-baryomyces sp. и Torula sp. оптимум рН составил 4,5, а для дрожжей Candida famata и Pichiasp -5,5.

Таблица 3

Накопление клеток дрожжами при ТФФ на различных субстратах, увлажненных до 50-55% молочной сывороткой

№ п/п Твердый субстрат Продуктивность дрожжей, млрд кл/г

Candida incon-spicua Debary si omyces р Pichia sp Torala sp Candida famata

24 часа 48 часов 24 часа 48 часов 24 часа 48 часов 24 часа 48 часов 24 часа 48 часов

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

1 Отруби 5,450 6,510 2,870 4,900 3,700 6,400 1,030 1,500 2,370 5,260

2 Солодовые ростки 5,200 7,860 2,900 5,350 4,000 7,020 1,000 1,850 3,250 6,340

3 Соломенная мука 1,300 4,780 1,260 3,200 2,000 4,250 0,600 0,900 1,800 3,760

4 Пшеничный шрот* 0,730 1,000 - - 0,390 0,650 - - 0,740 0,800

5 Солодовые ростки + отруби (1-1) 4,700 8,630 3,650 6,400 4,000 7,900 1,100 2,300 5,250 7,510

6 Солодовые ростки + отруби (2 1) 3,600 7,450 4,270 6,000 4,020 7,630 0,820 1,700 3,810 7,000

7 Солодовые ростки + пшеничный шрот (1:1) 5,860 9,500 4,350 7,810 5,200 9,100 1,820 2,600 4,750 8,810

8 Солодовые ростки + пшеничный шрот (1 2) 2,330 4,000 3,100 3,260 2,540 3,800 0,510 0,760 1,480 3,100

9 Солодовые ростки + соломенная мука (1 1) 2,850 6,600 2,900 4,600 4,060 6,000 0,650 1,230 2,800 5,480

10 Солодовые ростки + соломенная мука (2:1) 4,210 6,800 2,760 4,990 3,040 6,500 0,650 1,380 3,000 6,100

11 Отруби + пшеничный шрот (1:1) 5,300 9,890 4,800 8,470 5,000 9,230 1,000 2,100 7,020 9,240

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

12 Отруби + пшеничный шрот (1:2) 1,460 3,860 1,100 3,000 1,200 3,800 0,490 0,630 2,500 3,180

13 Отруби + соломенная мука (1:0 2,900 5,200 2,380 4,150 2,140 5,890 0,290 1,010 1,760 4,310

14 Отруби + соломенная мука (2-1) 3,260 6,000 2,380 4,700 3,070 5,910 0,920 1,220 2,160 4,880

15 Пшеничный шрот + соломенная мука (1.1) 4,010 5,900 2,760 4,320 3,280 5,700 0,960 1,020 3,020 4,900

16 Пшеничный шрот + соломенная мука (2:1) 1,100 2,000 1,000 1,860 1,200 2,560 0,280 0,630 1,220 1,580

17 Ячменный пенсак 2,120 4,280 2,030 3,300 1,780 3,990 0,100 0,560 2,650 3,050

18 Перловая крупа 2,300 4,710 1,690 3,890 2,900 4,700 0,300 0,700 1,780 3,830

19 Пшеничная крупа 2,560 4,560 1,030 3,700 2,610 4,390 0,190 0,600 1,560 3,300

20 Ячменный пенсак + отруби (3:1) 2,300 5,130 1,580 4,620 3,400 5,320 0,280 1,000 2,350 4,600

21 Перловая крупа + отруби (3:1) 4,260 6,000 2,870 5,030 3,020 5,910 0,800 1,320 1,660 4,880

22 Пшеничная крупа + отруби (3:1) 2,420 5,560 2,000 4,800 3,020 5,600 0,560 1,200 2,100 4,700

* получен после экстракции витамина Е из пшеничных хлопьев

Результаты опытов по наращиванию биомассы дрожжей на различных твердых растительных субстратах и их композициях, увлажненных молочной сывороткой до 50-55%-й влажности показали (см табл 3), что оптимальными для этой цели являются сочетания твердого носителя с пористым разрыхляющим компонентом (вариант 21 и 22 в табл 3), или же рыхлого формообразующего носителя с дополнительным источником легкодоступных ростовых веществ в соотношении 1 1 (варианты № 7, 11 в табл 3). Наиболее продуктивным в условиях ТФФ показал себя штамм С. т-сопярюиа АЗ

2.2.3. Накопление дрожжевой биомассы в условиях ГФ Естественной формой существования микроорганизмов в природе является иммобилизованное состояние [Соз1егйоп .ГЖ е1 а1, 1995], поэтому для повышения выхода биомассы было предложено вносить в молочную сыворотку различные твердые растительные субстраты

Жидкие гетерогенные среды, использованные нами в работе, условно можно разделить на 2 группы с пористым компонентом и с крупами. Оптимальные значения рН для каждой дрожжевой культуры при развитии на средах данного типа оказались такими же, как и в случае ТФФ Данные о влиянии содержания твердого пористого компонента на накопление клеток дрожжами суммированы в табл 4

Таблица 4

Влияние введения твердого растительного компонента в питательную среду на осно-

Субстрат СВ*, % Дрожжи

Candida in-conspicua Debaryo-myces sp Pichia sp Torula sp Candida famata

1 2 3 4 5 6 7

6(контроль) 0,440 ед клетки 0,640 0,390 ед клетки

7 0,500 ед клетки 0,700 0,500 ед клетки

8 0,800 0,350 0,740 0,500 0,200

9 1,060 0,370 0,790 0,500 0,200

VO 10 1,200 0,420 0,800 0,520 0,460

ft 11 1,470 0,500 0,800 0,680 0,750

12 1,500 0,520 0,890 0,700 1,110

13 1,530 0,580 0,940 0,740 1,350

14 1,300 0,300 0,380 0,500 ед клетки

7 0,450 ед клетки 0,650 • 0,400 ед клетки

1 8 0,570 0,050 0,680 0,400 0,130

в. 9 0,600 0,090 0,670 0,420 0,280

и 3 10 0,600 0,130 0,690 0,420 0,510

W о 11 0,620 0,200 0,700 0,450 0,700

э 12 0,700 0,230 0,720 0,480 0,730

о о 13 0,750 0,480 0,850 0,600 1,100

14 0,700 ед клетки 0,800 0,530 0,980

1 2 3 4 5 6 7

7 0,460 ед клетки 0,680 0,400 ед клетки

э 8 0,460 0,020 0,700 0,400 0,290

2 9 0,500 0,090 0,710 0,420 0,330

5 в 10 0,510 0,100 0,740 0,420 0,540

8 <и И 0,500 0,110 0,740 0,470 0,800

2 12 0,570 0,170 0,740 0,480 0,900

3 О 13 0,600 0,200 0,760 0,520 0,960

14 0,350 ед клетки 0,520 0,400 0,500

7 0,560 ед клетки 0,650 0,430 0,200

'& 8 0,620 0,120 0,700 0,480 0,250

В 9 0,740 0,200 0,720 0,500 0,750

f 10 0,760 0,290 0,800 0,500 0,750

И 0,800 0,300 0,800 0,520 0,820

В 12 0,930 0,350 0,850 0,600 0,930

£ 13 1,250 0,400 0,900 0,670 1,200

14 0,690 0,300 0,760 0,500 0,830

* сумма сухих веществ питательной среды, из которых б% - СВ сыворотки, а остальные - СВ твердого растительного компонента.

Как видно из таблицы 4, выход дрожжевой биомассы увеличивается при увеличении содержания СВ в среде и достигает максимума при содержании СВ 13% (продуктивность возрастает по сравнению с контролем в среднем в 2 - 4 раза в зависимости от штамма), притом наибольшее количество клеток дрожжи накапливают при внесении в среду отрубей и пшеничного шрота Как и в случае с ТФФ, наиболее продуктивным оказался штамм С тсопврюиа АЗ

Для обеззараживания питательных сред на основе молочной сыворотки и круп в результате проведенных исследований была выбрана пастеризация при 60°С в течение 60 мин. подобная предобработка значительно снижает степень обсемененно-сти посторонней микрофлорой и сравнительно малоэнергоемка (табл 5)

Таблица 5

Влияние режима обработки питательной среды на основе молочной сыворотки и перловой крупы (25%СВ) на накопление клеток дрожжами Candida inconspicua_

Режим обработки Степень набухания* КМАФАнМ, КОЕ/см3 РВ % Крах мал % Продуктивность, млрд кл/см3 КМАФАнМ, КОЕ/см3

По факту СанПиН 2 3 2 1078 -01 По факту СанПиН 2 3 2 1078 -01

Пастеризация 0,43 1 103 не более 103 3,0 2,7 1,200 2,3 103 не более 105

Стерилизация 0,80 - 8,9 8,1 0,100 -

Заваривание 0,67 104 5,1 4,6 0,570 1,5 105

* отношение фактически впитанной влаги к максимально возможной

Культивирование дрожжей С. шсошр^сиа АЗ на гетерогенных средах, содержащих молочную сыворотку и различные крупы, показало, что увеличение содержания СВ до 14% за счет добавления круп не стимулирует рост дрожжей. Возрастание продуктивности наблюдается при суммарном содержании СВ 15% и достигает максимума при 33%. На среде с перловой крупой дрожжи накапливают несколько больше клеток, чем с пшеничной (1,800 и 1,700 млрд кл/см1 соответственно}, и на 20% больше, чем на среде с 13% СВ при добавлении отрубей (1,530 млрд кл/см3).

Одним из важнейших показателей пищевой ценности продукта является содержание белка. Поэтому определяли влияние внесения перловой крупы в питательную среду на основе молочной сыворотки на накопление клеток дрожжами С. тсоп-эркиа АЗ и содержание белка в жидкой фазе (см. рис. 2).

90 -г—-------

СИ Содержание белка иач ■i Содержание белтса кон -»-Продуктивность

- 1,6

Г-1

12 â 1.2 3

' f о

■ 0,8 I

0,6 | о. С

0,4 ■■ 0,2

■ О

Рис. 2. Влияние внесения перловой крупы в питательную среду на основе молочной сыворотки ira накопление клеток дрожжами С. inconspicua A3 и содержание

белка в жидкой фазе.

Как видно из рис.2, содержание белка возрастает с увеличением количества дрожжевых клеток. Максимум накопления биомассы {1,860 млрд/см3) и наибольшее содержание белка (77,53 мг/см3) наблюдается при содержании в среде 33% СВ, При этом содержание белка возрастает по сравнению с начальным более чем в 3 раза.

Следует отметить общую для всех вариантов гетерогенных сред на основе молочной сыворотки тенденцию снижения продуктивности дрожжей при достижении определенного содержания СВ в среде за счет введения твердого компонента: для пористых компонентов это 14%СВ, а для круп - 38%СВ.

Полученные данные (табл 4, рис 2) полностью подтверждают высказанное выше предположение о стимулирующем влиянии твердых частиц на накопление биомассы (клеток) культурами дрожжей. Такой эффект, по-видимому, может быть в равной степени обусловлен как поступлением дополнительных питательных веществ из твердых субстратов, так и непосредственно иммобилизованным состоянием клеток Таким образом, для культивирования дрожжей в условиях ГФ на молочной сыворотке представляется целесообразным внесение пористых растительных компонентов (отруби, пшеничный шрот) в количестве 13% СВ или круп в количестве 33% СВ

2.2.3.1. Подбор и оптимизация состава питательных сред для культивирования

дрожжей в условиях ГФ

Для того, чтобы полученная на молочной сыворотке дрожжевая биомасса по своему составу приближалась к молочному белку, в сыворотку вносят минеральные соли, сернокислый аммоний, двузамещенный фосфорнокислый калий, хлористый калий и мочевину [Храмцов А Г, Нестеренко П.Г., 2004] Внесение в среду 1,4-1,8 г/дм3 (NH^SCUh 0,6 - 1,0 г/дм3 КН2РО4, в зависимости от штамма позволило увеличить содержание бежа на 8-12%, а продуктивность - на 10-13% Для штамма Candida inconspicua удалось повысить содержание белка до 86,87 мг/см3 и содержание клеток до 2,150 млрд/см3 путем внесения 1,8 г/дм3 сульфата аммония и 1,0 г/дм3 двузамещенного фосфорнокислого калия

Подбор состава питательных сред (рН, концентрация солей и %СВ) выполнялся с достаточно большим шагом в исследуемом параметре, поэтому мы провели оптимизацию состава питательных сред с помощью метода аддитивно-решетчатого описания объекта Оптимизация заключалась в выборе уровней каждого фактора, обеспечивающих наибольший эффект Полученный в результате реализации этого метода состав питательных сред представлен в табл 6

Таблица 6

Оптимальный состав питательных сред для культивирования дрожжей в условиях ГФ, полученный реализацией метода аддитивно-решетчатого описания эксперимента

Дрожжи Концентрация круп, % СВ рН молочной сыворотки Концентрация (NH4)2S04, г/дм3 Концентрация КН2Р04, г/дм3

Candida inconspicua 31 4,5 1,6 1,0

Debaryomyces sp 31 4,5 1,8 0,8

Pichia sp 31 5,5 1,2 0,8

Torula sp 33 4,5 1,6 0,8

Candida famata 33 5,5 1,2 1,0

2.2.4. Определение состава и биологической ценности ДО

Важными показателями биологической ценности пищевых продуктов и различных БАД являются содержание белка, витаминов, пищевых волокон и др БАВ Критерием биологической ценности белка является его аминокислотный состав, особенно содержание тех аминокислот, которые находятся в нем в наименьшем количестве. В табл. 7 приведен состав молочной сыворотки и полученного на оптимизированной питательной среде дрожжевого обогатителя пищи на базе молочной сыворотки и перловой крупы с использованием штамма дрожжей С. шсоюрюиа АЗ, а на рисунке 3 - аминокислотный состав исходной молочной сыворотки и ДО на ее основе

Таблица 7

Состав молочной сыворотки и ДО на основе молочной сыворотки и перловой

крупы

№ п/п Значение

Показатель Молочная ДО

сыворотка

1 Титр дрожжевых клеток, 109 кл/см3 - 2,15

2 Титруемая кислотность, "Т 60 89

3 Лактоза, г/100 см3 3,5 1,05

4 Глюкоза, мг/100 см'* 70 -

5 Галактоза, мг/100 см3 63 -

6 Сахароза, мг/100 см3 200 -

7 Белок, г/100 см3 0,88 8,7

Витамины, мкг%- В2 6,64 23,68

8 В« 2,87 36,25

РР 0,84 390,6

9 Этиловый спирт, г/100 см3 - 0,92

□ Молочная сыворотка ■ ДО

Л 3bdt.

Лма* Гист Apr Aen Трв' Сер Глу Про Г™ Ала Цис Вал1 Мет" Ит* Лей* Тир Феи'

*- незаменимые аминокислоты Аминокислоты Рис 3 Аминокислотный состав молочной сыворотки и ДО на основе молочной сыворотки и перловой крупы

Из рисунка 3 видно, что в процессе ферментации молочной сыворотки дрожжами Candida inconspicua происходит увеличение содержания эссенциальных аминокислот По метионину оно составляет 50%, по валину, лизину и фенилаланину - 40%, а по треонину, изолейцину и лейцину - немногим более 30%. Количество серусодер-жащих аминокислот (цистин, метионин) невелико в опытном образце, а цистин полностью отсутствует в контрольном. Ароматические аминокислоты представлены тирозином и фенилаланином, причем тирозин отсутствует в исходной молочной сыворотке Содержание таких аминокислот как серин, пролин, глутаминовая и аспараги-новая кислоты увеличилось в опытном образце по сравнению с контролем в среднем на 42%. Содержание аланина и аргинина возросло на 75 и 83,3 % соответственно, содержание аргинина и глицина - вдвое

Следует отметить, что по процентному соотношению аминокислот белок полученного ДО мало отличается от исходного сывороточного белка, то есть качественный состав белка ДО близок к сывороточному белку, который является наиболее ценным по скору незаменимых аминокислот

На основании полученных результатов (табл 7 и рис 3) можно сделать вывод, что полученный ДО обладает свойствами, позволяющими придавать продуктам свойства лечебно-профилактических и диетических продуктов за счет белка, сбалансированного по аминокислотному составу, и высокого содержания витаминов группы В и РР

2.2.5. Химический и микробиологический анализ ДО

Действующая нормативная документация предъявляет к молочной сыворотке и ее производным определенные требования по безопасности для потребителя [СанПиН 2.3.2.1078-01, ГОСТ 30178-96, ГОСТ 26927-86, ГОСТ Р 51301-99].

Результаты анализов (табл. 8) и проведенные исследования острой токсичности, показавшие, что ДО относится к классу нетоксичных веществ, свидетельствуют о соответствии полученных ДО требованиям нормативно-технической документации Таблица 8

Химические и микробиологические показатели полученного ДО

Наименование Фактическое значение Единица измерения Норматив

Токсичные элементы ртуть мышьяк кадмий свинец не обнаружен 0,007 не обнаружен 0,03 мг/л не более 0,005 не более 0,05 не более 0,03 не более 0,1

Пестициды ГХЦ ДДТ не обнаружен не обнаружен мг/л не более 0,05 не более 0,05

Радионуклиды- Се-137 Бг-90 0,3 0 Бк/кг не более 100 не более 25

КМАФАнМ 2,3*10' КОЕ/см3 не более 2*105

БГКП не обнаружено KOE/cmj не доп в 0,01 см'

2.2.6. Определение оптимальных параметров культивирования дрожжей в условиях ферментера

С целью масштабирования результатов, полученных в лабораторных условиях, а также для оценки влияния ряда факторов, таких как обеспеченность культуры кислородом, избыточное давление и регулирование активной кислотности среды на развитие дрожжевой культуры в условиях исследовательской лаборатории ОАО «Вимм-Билль-Данн» были проведены ферментации С. шсошрюиа АЗ в ферментере объемом 40 дм3 с коэффициентом заполнения 0,5 при различных вариантах параметров культивирования (рис 4) Полученные данные свидетельствуют, что наибольшая продуктивность в накоплении биомассы достигается при наилучшем обеспечении культуры кислородом за счет активного барботирования потоком воздуха (2 дм3/миндм3) и повышенном избыточном давлении (40 кПа), а эффективная стабилизация обсеме-ненности остаточной бактериальной микрофлорой наблюдается при условиях, аналогичных выращиванию в колбах на качалке, при этом рН-статирование не обеспечивает дополнительного увеличения продуктивности дрожжей и стабилизации бактериальной обсемененности

2.2.7. Применение полученного ДО в хлебопечении

Наиболее распространенными продуктами питания, потребляемыми населением, являются хлеб и хлебобулочные изделия Большинство хлебобулочных изделий, особенно из муки высшего сорта, содержат малые количества белка, свободных аминокислот, витаминов и некоторых других физиологически важных компонентов, недостаточное содержание которых в пище приводит к нарушению обменных процессов и возникновению различных заболеваний. Поэтому в производственных условиях секции хлебных технологий МГУПП была проведена серия выпечек образцов хлеба, изготовленного по традиционной рецептуре, и хлеба с добавлением ДО на основе молочной сыворотки и перловой крупы, определены их органолептиче-ские и физико-химические показатели

На основании проведенной оценки органолептических и физико-химических показателей образцов был сделан вывод о том, что внесение ДО в количестве 60 % в рецептуры пшеничного формового и подового хлеба не снижает качества изделий и способствует увеличению их биологической ценности за счет белка (увеличение содержания на 38%), сбалансированного по аминокислотному составу (скор незаменимых аминокислот повышается на 37%) и витаминов группы В и РР (в среднем на 41%)

А.

Время, яас

Время, час

♦ Вавриант I Вариант 2 А Вариант 3 Ш Вариант 4

Вариант 1. перемешивание - 200 об/мин, барботаж воздухом - 1 дм3/мин дм3, избыточное давление - 20 кПа, без рН-статирования,

Вариант 2: перемешивание - 200 об/мин, барботаж воздухом - 2 дм3/мин дм3, избыточное давление - 40 кПа, без рН-статирования,

Вариант 3. перемешивание - 200 об/мин, барботаж воздухом -1,5 дм3/мин дм3, избыточное давление - 20 кПа, рН-статирование на уровне 4,6,

Варнант 4: перемешивание - 200 об/мин, без барботажа, без избыточного давления, без рН-статирования

Рис 4 Изменение рН (А), численности дрожжевых клеток (по прямому счету в камере Го-ряева - Б) и бактериальной обсемененности (по результатам посева - В) в ходе ферментации дрожжами Candida inconspicua молочной сыворотки, содержащей отруби (13% СВ) при различных параметрах культивирования

2.2.8. Технологическая схема процесса получения ДО

На основании проведенных исследований были разработаны 2 типовые блок-схемы процесса получения ДО - жидких и сухих - на основе молочной сыворотки и растительного сырья. Также предложено аппаратурное оформление технологических процессов На рис. 5 представлена технологическая схема производства жидкого ДО.

2.2.9. Расчет экономической эффективности разработанной технологии ДО и применения их в хлебопекарной промышленности

Расчет экономической эффективности разработанной технологии ДО показал, что стоимость 1 кг сухого ДО составит 8,70 руб, 1 м3 жидкого ДО - 37,32 руб Учитывая, что в хлебобулочные изделия предполагается вносить 60 % ДО, заменяя им 20% пшеничной муки высшего сорта, была рассчитана приблизительная розничная цена одного хлебобулочного изделия массой 400 г, которая составила 10,68 руб (для сравнения- цена хлебобулочного изделия, выпеченного без внесения ДО - 7,77 руб, а цельнозернового хлеба — около 20 руб.). При этом биологическая ценность хлебобулочных изделий повышается за счет сбалансированного по аминокислотному составу белка и витаминов, что позволяет сделать вывод о технологической и экономической целесообразности данного способа приготовления хлебобулочных изделий при позиционировании их в качестве продуктов функционального питания.

3. Выводы

1 Кисломолочные продукты являются эффективным источником для выделения новых культур дрожжей, перспективных для целей биоконверсии молочной сыворотки и растительного сырья.

2. Дрожжи, выделенные из молочнокислых продуктов и интенсивно растущие на молочной сыворотке, обнаружены в родах Candida, Pichia, Torula, Debaryomyces.

3 Наиболее перспективная культура дрожжей для биоконверсии молочной сыворотки идентифицирована методом ПЦР- анализа как Candida mconspicua

4 В качестве питательных сред для ТФФ выделенных дрожжей рекомендуются комплексные питательные среды, содержащие молочную сыворотку и плотные и рыхлые растительные субстраты Подобран и оптимизирован состав жидких гетерогенных сред для ГФ дрожжевых культур методом аддитивно-решетчатого описания объекта (рН, %СВ, количество вносимых солей)

-1-молочная сыворотка, СВ6% -2-растворы солей -3-крупа

-4-питательная среда -5-пастеризованная и охлажденная ПС -6-посевной материал -7-воздух атмосферный -8-воздух стерильный -9-возяух отработанный -10-канализационный сток -11-вода оборотная прямая -12-вода оборотная обратная -13-дрожжевой обогатитель

-14-дрожжевой обогатитель пастеризованный и охлажденный

-15-пар Р

-16-гоговый продукт

Б-бункер дм крупы ВА-весы автоматические Ш-шнек

Сб-сборник (для молочной сыворотки и солей) Д-дозатор

См-смеситель ял» питательной среды

Ы-насос

И-инокулятор

Ф-фильтр воздушный

ПОУ-пастеризационно-охладительиая установка

Р-приемный резервуар готового продукта Уп-упаковочный агшарат

Рис. 5. Технологическая схема производства жидкого дрожжевого обогатителя путем ГФ

5 Для ГФ выделенных дрожжей рекомендуются гетерогенные среды на основе молочной сыворотки и пористых субстратов (13 СВ%) или круп (31-33 СВ%)

6. Подобраны оптимальные параметры культивирования дрожжей на жидких гетерогенных средах с рыхлым растительным компонентом в условиях ферментера для максимального накопления дрожжевых клеток перемешивание - 200 об/мин, барботаж воздухом - 2 дм3/мин дм3, избыточное давление - 40 кПа, без рН-статирования, а для стабилизации остаточной бактериальной обсемененно-сти - перемешивание - 200 об/мин, без барботажа, без избыточного давления и без рН-статирования

7. Разработаны технологические схемы производства дрожжевых обогатителей жидкого - с содержанием СВ 30-35%, сухого - с влажностью 5-10%; предложено аппаратурное оформление разработанных схем

8. Исследована биологическая ценность полученного жидкого обогатителя, проведен микробиологический, химический анализы и токсикологическое исследование, показавшие его безвредность

9 Теоретически обоснована и практически доказана возможность использования нового полученного жидкого дрожжевого обогатителя в рецептуре хлебобулочных изделий

10. Новые хлебобулочные изделия, несмотря на их более высокую себестоимость, могут быть рекомендованы для использования в качестве продуктов функционального назначения, что позволяет прогнозировать их перспективность на рынке

4. Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Борисенко ЕГ, Солдатова СЮ., Филатова Г.Л, Лыско К.А. Растительно-дрожжевые функциональные продукты1 технология и применение //В сб • Международная конференция "Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания Современное состояние и перспективы" Москва, 2-4 июня 2004, стр.171-172.

2 Борисенко Е.Г., Лыско К.А., Солдатова С Ю Разработка технологии дрожжевого нутрипарафармацевтика на базе растительного сырья // В сб.. Отчетная научно-техническая конференция "Технология живых систем", раздел 4, М МГУПП, 2004, с 77-80

3. Борисенко Е Г, Лыско К.А. Студенческий практикум по селекции микроорганизмов как способ формирования новых направлений в биотехнологии //В сб : Межвузовская научно-методическая конференция «Содержание образования и технология обучения - место и роль в системе обеспечения качества подготовки специалистов» М • МГУПП, 2005, стр 317-321.

4. Борисенко Е Г, Лыско К.А., Шамсутдинова В.Р, Солдатова С Ю Дрожжевые функциональные продукты технология и применение// В сб Научно-практическая конференция «Значение биотехнологии для здорового питания и решение медико-социальных проблем» Калининград, 22-23 июня 2005, стр. 13-14.

5. Борисенко Е Г., Лыско К.А., Шамсутдинова В Р. Микробные биотехнологии в интенсификации производства продовольствия // В сб Ш съезд общества биотехнологов России им Ю.А Овчинникова Москва, 25-27 октября 2005, стр 141-143

6 Борисенко Е Г., Лыско К.А., Шамсутдинова В Р Микробные обогатители пищи и кормов технология и применение //В сб Ш Юбилейная международная выставка-конференция «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации» М МГУПП, 2005, ч 1,стр 127-132

7 Лыско К.А., Шамсутдинова В Р., Борисенко Е Г Биоконверсия растительного сырья, пищевые продукты и корма на его основе // В сб.: Труды IV ежегодной международной молодежной конференции ИБХФ РАН - ВУЗы «Биохимическая физика» Москва, 14-16 декабря 2005, стр 308-314

8 Борисенко Е Г., Лыско К.А., Шамсутдинова В Р Инновационные биотехнологии в производстве продовольствия //В сб : Конференция VII Международный форум «Высокие технологии XXI века» Москва, 24-27 апреля 2006, стр 285-287.

9 Лыско К.А., Шамсутдинова В Р, Борисенко Е.Г. Дрожжевые обогатители пищи и кормов на базе растительного сырья и молочной сыворотки.//В сб.. IV Международная научно-практическая конференция «Технологии и продукты здорового питания».М.. МГУПП, 2006, ч 1, стр 206-212.

10. Лыско К.А., Шамсутдинова В Р., Ганькина Е.В., Борисенко Е.Г. Дрожжевые технологии в производстве продуктов питания.//Пшцевая промышленность, 11/2006, стр 54-55.

11. Шамсутдинова В.Р., Лыско К.А. Дрожжевые нутриенты на основе аэробной

ферментации органического сырья.//В сб • IV Международная конференция-выставка «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации» М • МГУПП, 2006, ч 3, стр 95-98.

12 Лыско К.А., Шамсутдинова В Р, Борисенко Е Г, Троякова С А, Терешина Е Н Дрожжевые обогатители пищи и кормов на основе молочной сыворотки и зернового сырья //Хранение и переработка сельхозсырья, 3/2007, стр 52-54

5. Список использованных сокращений

БАВ - биологически активные вещества, БАД — биологически активная добавка; ЖКТ - желудочно-кишечный тракт, ГФ - глубинная ферментация, ТФФ - твердофазная ферментация, ДО - дрожжевой (-ые) обогатитель (-ли), ПЦР - полимераз-но-цепная реакция, ГХЦ - гексахлорциклогексан; РВ - редуцирующие вещества, СВ - сухие вещества

Автор выражает глубокую признательность научному руководителю д т.н, профессору Е Г. Борисенко за помощь в выполнении работы, а также родителям, друзьям, коллегам, И Н Мозговой и В Г Блиадзе за помощь и поддержку.

Заказ № 446. Объем 1 пл. Тираж 100 экз.

Отпечатано в ООО «Петроруш». г. Москва, ул. Палиха-2а, тел. 250-92-06 \vww.postator гп

Оглавление автор диссертации — кандидата технических наук Лыско, Ксения Андреевна

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Общие представления о нормальной микрофлоре желудочно-кишечного тракта человека и ее функциях.

1.1.1 Микрофлора ЖКТ.

1.1.2 Функции нормальной микрофлоры кишечника.

1.2 Дисбактериоз желудочно-кишечного тракта и заболевания различных органов и систем человека.

1.3 Современные средства коррекции микробиоценоза.

1.3.1 БАД к пище, классификация и механизмы действия.

1.3.2 Функциональные пищевые продукты.

1.4 Дрожжи: источник пищевого и кормового белка и продуценты пробиотических продуктов.

1.5 Технологические особенности культивирования дрожжей.

1.5.1 Принципы составления питательных сред.

1.5.2 Влияние химических и физических факторов на рост дрожжей.

1.6 Молочная сыворотка.

1.6.1 Характеристика молочной сыворотки.

1.6.2 Молочная сыворотка в питании и кормах.

1.6.3 Мероприятия по охране окружающей среды от загрязнения молочной сывороткой.

1.6.4 Тенденции переработки молочной сыворотки.

1.6.4.1 Перспективные направления переработки в России.

1.6.4.2 Напитки на основе молочной сыворотки.

I.6.4.3Сбраживание молочной сыворотки дрожжами.

II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

II. 1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

II. 1.1 Материалы исследований.

II. 1.1.1 Штаммы микроорганизмов, применявшиеся в работе.

II. 1.1.2 Сырье, применявшееся в работе.

И. 1.1.3 Реактивы, использованные в работе.

И. 1.2 Методы исследования.

II. 1.2.1 Методы выделения и отбора дрожжей.

II. 1.2.2 Определение физиологических признаков штаммов и идентификации дрожжей.

II. 1.2.3 Методы приготовления питательных сред.

II. 1.2.4 Методы обработки питательных сред перед засевом.

II. 1.2.5 Метод получения посевного материала.

II. 1.2.6 Методы засева микроорганизмов.

II. 1.2.7 Методы культивирования микроорганизмов.

II. 1.2.8 Метод инактивации дрожжей и сушки готового продукта.

II. 1.2.9 Определение антагонистической активности дрожжей.

II. 1.2.10 Определение содержания белка.

II. 1.2.11 Определение содержания крахмала.

II.1.2.12 Определение рН растворов.

И. 1.2.13 Определение титруемой кислотности.

II. 1.2.14 Определение содержания сухих веществ.

И. 1.2.15 Определение влажности.

II. 1.2.16 Метод подсчета числа клеток дрожжей.

II. 1.2.17 Метод фракционирования ферментированных субстратов.

II. 1.2.18 Определение активностей ферментов.

II. 1.2.19 Определение содержания Сахаров.

II. 1.2.20 Определение содержания этилового спирта.

II. 1.2.21 Определение ХПК.

II. 1.2.22 Проведение микробиологического контроля.

II. 1.2.23 Определение содержания витаминов.

II. 1.2.24 Определение аминокислотного состава белков.

II. 1.2.25 Методика изготовления хлеба и оценка его качества с учетом весомости основных показателей.

II.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

II.2.1 Выделение и первичный отбор дрожжей из дрожжесодержащих материалов.

И.2.2 Определение антагонистической активности дрожжевых культур.

И.2.3 Идентификация дрожжевых культур.

II.2.4 Определение ферментативных активностей выделенных дрожжевых культур.

11.2.4.1 Определение амилолитической активности.

11.2.4.2 Определение Р-галактозидазной активности.

II.2.5 Конструирование питательных субстратов из растительного сырья и молочной сыворотки для дрожжевой биоконверсии в условиях ТФФ.

И.2.5.1 Определение оптимального значения активной кислотности молочной сыворотки.

И.2.5.2 Накопление дрожжевой биомассы на различных твердых субстратах.

11.2.5.3 Изучение возможности использования ферментированных субстратов в качестве посевного материала.

И.2.6 Конструирование питательных субстратов из растительного сырья и молочной сыворотки для дрожжевой биоконверсии в условиях ГФ.

11.2.6.1 Влияние степени гетерогенности питательной среды на выход биомассы дрожжей.

11.2.6.2 Влияние активной кислотности питательной среды на выход биомассы дрожжей.

11.2.6.3 Накопление дрожжевой биомассы на зерновых продуктах.

II.2.6.3.1 Влияние концентрации пророщенного солода в питательной среде при ГФ на продуктивность дрожжей.

11.2.6.4 Влияние степени гетерогенности питательной среды на содержание белка в дрожжеванной молочной сыворотке.

11.2.6.5 Изучение возможности использования твердой фракции в качестве посевного материала.

И.2.6.6 Подбор оптимальной продолжительности культивирования.

II.2.6.7 Влияние ростовых факторов на накопление биомассы дрожжей и содержания в ней белка.

11.2.6.7.1 Влияние концентрации азота в среде на накопление биомассы дрожжей и содержания в ней белка.

11.2.6.7.2 Влияние концентрации фосфора в среде на накопление биомассы дрожжей и содержания в ней белка.

IL2.6.8 Оптимизация состава питательной среды для культивирования дрожжей в условиях ГФ методом аддитивно-решетчатого математического описания объекта.

11.2.7 Накопление этилового спирта дрожжами.

11.2.8 Изучение возможности культивирования ассоциаций дрожжевых культур.

11.2.9 Фракционирование.

11.2.10 Биосинтез витаминов дрожжами.

11.2.11 Определение аминокислотного состава дрожжеванной молочной сыворотки.

11.2.12 Изучение влияния выделенных дрожжей на показатель ХПК молочной сыворотки.

11.2.13 Химический, микробиологический и токсикологический контроль полученного дрожжевого обогатителя на основе молочной сыворотки.

11.2.14 Изучение динамики накопления дрожжевой биомассы в условиях производственного ферментера при различных условиях культивирования.

11.2.15 Изучение возможности применения полученных дрожжевых обогатителей в хлебопекарной промышленности.

ВЫВОДЫ.

Введение 2007 год, диссертация по технологии продовольственных продуктов, Лыско, Ксения Андреевна

В связи с увеличением объемов и ассортимента производства молока и молочных продуктов в России и за рубежом весьма актуальна проблема утилизации молочной сыворотки, которая ввиду своего состава, пищевой и биологической ценности является ценнейшим сырьем, однако нередко сбрасывается в канализацию, что негативно сказывается на работе очистных сооружений. Одним из способов ее утилизации, не требующим предварительной обработки и значительных материальных затрат, является выращивание на ней специальных штаммов дрожжей. Дрожжи - весьма технологичные микроорганизмы: они обладают высокой скоростью роста, устойчивостью к посторонней микрофлоре и богатым химическим составом.

В условиях дефицита кормового и пищевого белка дрожжевая биомасса является весьма перспективным источником не только белка и незаменимых аминокислот, но и минеральных веществ (в частности металлопротеинов), витаминов и других БАВ Поэтому в последнее время все больше внимания уделяется дрожжам как основе БАД к пище, да и самих пищевых продуктов.

Имеется достаточно фактических данных о положительном влиянии дрожжей на нормофлору кишечника. Клеточные стенки дрожжей активно сорбируют токсины и токсичные метаболиты, обладают выраженным лакто- и бифидогенным эффектом, т.е. дрожжевые препараты могут играть роль не только нутрицевтиков, но и парафармацевтиков. Поэтому производство дрожжевых обогатителей пищи и продуктов на их основе представляется весьма актуальным.

Для достижения поставленной цели сформулированы следующие задачи:

- выделение из молочнокислых и ферментированных продуктов высокопродуктивных штаммов дрожжей, способных расти на молочной сыворотке и на негидролизованных растительных субстратах;

- испытание различных растительных субстратов в качестве компонента питательных сред для ГФ и ТФФ дрожжей и выбор наиболее перспективных из них;

- подбор оптимального состава питательных сред для максимального накопления биомассы и белка отселекционированными дрожжами;

- подбор оптимальных режимов культивирования в условиях ферментера;

- разработка технологий ДО для различных условий культивирования и комплекта документов для производства дрожжевых обогатителей;

- оценка биологической ценности и безопасности полученных ДО;

- исследование возможности применения ДО в хлебопечении.

Научная новизна работы. Впервые осуществлен скрининг дрожжей из молочнокислых и других ферментированных продуктов, активно растущих на молочной сыворотке с растительным компонентом; проведена идентификация до рода дрожжевых культур, наиболее продуктивных в отношении накопления биомассы.

Выделен и охарактеризован новый штамм дрожжей Candida inconspicua A3 (идентифицирован методом ПЦР-анализа 288-субъединицы рРНК), активно накапливающий биомассу, белок и витамины на молочной сыворотке и растительном. сырье. Определен и оптимизирован состав питательных сред для ТФФ и ГФ выделенных дрожжей; четко продемонстрировано более интенсивное накопление биомассы и белка дрожжами на жидкой гетерогенной питательной среде по сравнению с гомогенной.

Впервые подобраны технологические режимы культивирования дрожжей С. inconspicua A3 на жидкой гетерогенной питательной среде, содержащей молочную сыворотку и растительное сырье в условиях ферментера. Проведена биохимическая, санитарно-гигиеническая и токсикологическая оценка полученного ДО, доказавшая его биологическую ценность и безопасность для потребителя. Показана возможность использования полученного ДО в хлебопечении.

Предлагаемая технология переработки кислой молочной сыворотки существенно упрощена по сравнению с существующими за счет исключения стадий предобработки (раскислениения, деминерализации и пр.). Предложен способ повышения продуктивности дрожжевых культур и увеличения содержания белка и витаминов в дрожжевом обогатителе в несколько раз за счет введения в молочную сыворотку растительных субстратов.

Разработана и экспериментально обоснована технология получения из молочной сыворотки и растительного сырья жидких и твердых ДО. Показана их биологическая ценность и доказана безвредность. Наработана опытная партия ДО в условиях ОАО "Вимм-Билль-Данн". В производственных условиях секции хлебопекарных технологий МГУ 1111 проведена апробация способа выпечки формового и подового хлеба на основе полученных ДО, повышающих биологическую ценность изделий.

Апробация работы. Основные положения работы докладывались на российских и международных конференциях и симпозиумах: Международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания (Москва, 2004); Всероссийской научно-технической конференции-выставке «Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации (Москва, 2004, 2005 и 2006); Третьем съезде общества биотехнологов России им. Ю.А. Овчинникова (Москва, 2005); Пятой ежегодной международной молодежной конференции ИБХФ РАН-ВУЗЫ (Москва, 2005); Седьмом Международном Форуме «Высокие технологии XXI века» (Москва, 2006); Четвертой Международной научно-практической конференции «Технологии и продукты здорового питания» (Москва, 2006).

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертация на тему "Разработка технологии дрожжевых обогатителей пищи на базе молочной сыворотки и растительного сырья"

ВЫВОДЫ

1. Кисломолочные продукты являются эффективным источником для выделения новых культур дрожжей, перспективных для целей биоконверсии молочной сыворотки и растительного сырья.

3. Наиболее перспективная культура дрожжей для биоконверсии молочной сыворотки идентифицирована методом ПЦР- анализа как Candida inconspicua.

4. В качестве питательных сред для ТФФ выделенных дрожжей рекомендуются комплексные питательные среды, содержащие молочную сыворотку и плотные и рыхлые растительные субстраты. Подобран и оптимизирован состав жидких гетерогенных сред для ГФ дрожжевых культур методом аддитивно-решетчатого описания объекта (рН, %СВ, количество вносимых солей).

5. Для ГФ выделенных дрожжей рекомендуются гетерогенные среды на основе молочной сыворотки и пористых субстратов (13 СВ%) или круп (31-33 СВ%).

6. Подобраны оптимальные параметры культивирования дрожжей на жидких гетерогенных средах с рыхлым растительным компонентом в условиях ферментера для максимального накопления дрожжевых клеток: перемешивание - 200 об/мин, барботаж воздухом - 2 дм3/мин-дм3; избыточное давление - 40 кПа, без рН-статирования; а для стабилизации остаточной бактериальной обсемененности - перемешивание - 200 об/мин, без барботажа, без избыточного давления и без рН-статирования.

7. Разработаны технологические схемы производства дрожжевых обогатителей: жидкого - с содержанием СВ 30-35%, сухого - с влажностью 5-10%; предложено аппаратурное оформление разработанных схем.

8. Исследована биологическая ценность полученного жидкого обогатителя, проведен микробиологический, химический анализы и

1 токсикологическое исследование, показавшие его безвредность.

9. Теоретически обоснована и практически доказана возможность использования нового полученного жидкого дрожжевого обогатителя в рецептуре хлебобулочных изделий.

Библиография Лыско, Ксения Андреевна, диссертация по теме Технология чая, табака и биологически активных веществ и субтропических культур

1. ГОСТ 7169-66 Отруби пшеничные. Технические условия.

2. ГОСТ 9353-85 Пшеница. Технические условия.

3. ГОСТ 29143/4-91 Зерно и зернопродукты. Определение влажности.

4. ГОСТ 3624-92 Молоко и молочные продукты. Титриметрические методы определения кислотности.

5. ГОСТ 7047-55 Витамины А, С, Д, Bl, В2 и PP. Отбор проб, методы определения витаминов и испытания качества витаминных препаратов.

6. СанПиН 2.3.2.1078-01 Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов.

7. ГОСТ 26927-86 Сырье и продукты пищевые. Метод определения ртути.

8. ГОСТ 26930-86 Сырье и продукты пищевые. Метод определения мышьяка.

9. ГОСТ Р 51301-99 Продукты пищевые и продовольственное сырье. Инверсионно-вольтамперометрические методы определния содержания токсичных элементов (кадмия, свинца, меди и цнка).

10. ГОСТ 25179-90 Молоко и молочные продукты. Методы определения белка.

11. ГОСТ Р 51259-99 ДИН 10344-82 Молоко и молочные продукты. Метод определения лактозы и галактозы.

12. ГОСТ Р 51258-99 ДИН 10326-86 Молоко и молочные продукты. Метод определения сахарозы и глюкозы.

13. ТУ 10.02.927 91 Сыворотка сухая молочная.

14. Авакян З.А. Токсичность тяжелых металлов для микроорганизмов. В кн.: Микробиология, т.2 (Итоги науки и техники, ВИНИТИ АН СССР). М., 1973. -с.5-45.

15. Агеева Н.М., Гугучкина Т.И. Применение препаратов винных дрожжей для детоксикации соков и вин.//Тезисы докладов V Международного симпозиума «Экология человека: пищевые технологии и продукты на пороге XXI века». Москва-Пятигорск, 1997. - с.22-24.

16. Акимкин В.Г., Заболотнова В.И., Антонова Г.К. и др. Микроэкологические нарушения толстого кишечника у больных гастроэнтерологического профиля.// Журн. микробиол. 1997. - №2. - с. 8586.

17. Алтухов Н.М. Дисбактериоз кишечника при диарее у новорождённых телят.// Ветеринария. 1993. - №8. - с.45-48.

18. Амерханова A.M. Бифидобактерии история вопроса, основные итоги изучения, перспективы использования.//Сб. материалов конференции «Пробиотические микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования». - М., 2002. - с.6-8.

19. Андреева Е.А., Лирова С.А., Перевезенцев В.П. Влияние величины рН на свойства хемостатной культуры Candida utilisV/TIpHitn. биохим. и микробиол. 1975. - т. 11, №3. - с. 317-321.

20. Антипов В.А. Биологические препараты симбионтных микроорганизмов и их применение в ветеринарии.//Сел. хоз-во за рубежом. -1981. №2.-с.43-47.

21. Ануфриева Э.Н. Конверсия опилок в белково-углеводные кормовые препараты в процессе твердофазной ферментации высшими грибами.//Труды ком. НЦ УРО Российской АН. 1992. - №125. - с.51-59.

22. Бабьева И.П., Голубев В.И. Методы выделения и идентификации дрожжей. М.: Пищевая промышленность, 1979. - 120 с.

23. Бабьева И.П., Чернов И.Ю. Биология дрожжей. М.: Московский Университет, 2004. - 221 с.

24. Байрамов Р.Б. Перспективы использования микроводорослей. -Ашгабат: Из-во ТуркменНИИНТИ, 1992. 19 с.

25. Баратова JI.А. Знакомство с принципом работы аминокислотного анализатора и определение аминокислотного состава белка./В сб.: Экспериментальные методы исследования белков и нуклеиновых кислот. -М.: МГУ им. Ломоносова, химический факультет, 1999. 73 с.

26. Бекер М.Е., Лиепинын Г.К., Райпулис Е.П. Биотехнология. М.: Агропромиздат, 1990. -334 с.

27. Бирюков В.В., Кантере В.М. Оптимизация периодических процессов микробиологического синтеза.// М.: Наука, 1985. 296 с.

28. Богданов В. М. Микробиология молока и молочных продуктов. М., 1969.-156 с.

29. Богуславский В.М. и др. Микрорганизмы в кормопроизводстве.//Сб. статей АН Молдовы, Отд. микробиологии. Кишинев, 1994. - с.56-59.

30. Бондаренко В.М. Дисбиоз. Современные возможности профилактики и лечения. М., 1995. - 164 с.

31. Бондаренко В.М., Боев Б.В., Воробьев А.А. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта.//Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - №1. - с. 66-70.

32. Борановский А.Ю., Кондрашина Э.А. Дисбактериоз и дисбиоз кишечника. СПб., 2000. - 209 с.

33. Борисенко Е.Г. Разработка комплексной технологии белковых препаратов на основе нетрадиционного сырья и дрожжей. Дисс. . док.тех.наук. М., 1990. - 471с.

34. Борисенко Е.Г. Способ производства лечебно-профилактической пищевой добавки. Патент RU 2102903 С1,1998.

35. Борисенко Е.Г., Лыско К.А., Солдатова С.Ю. Разработка технологии дрожжевого нутрипарафармацевтика на базе растительного сырья.//Технологии живых систем. Материалы отчетной научно-технической конференции. М., 2004. - с. 77-80.

36. Борисенко Е.Г., Лыско К.А., Шамсутдинова В.Р. Микробные биотехнологии в интенсификации производства продовольствия.//Материалы третьего съезда общества биотехнологов России им. Ю.А. Овчинникова. М., 25-27 октября 2005. - с. 141-143.

37. Борисенко Е.Г., Лыско К.А., Шамсутдинова В.Р. Инновационные биотехнологии в производстве продовольствия.//Материалы конференции «Высокие технологии XXI века». М., 24-27 апреля 2006. - с. 285-287.

38. Борисенко Е.Г, Самойленко И.И., Василевич Л.Н. и др. Способ профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных. Патент SU 1805965 A3,1993.

39. Борисенко Н.А. Разработка технологии ферментированных продуктов на основе зерна ржи. Дисс. канд.тех.наук. М., 1996. - 200 с.

40. Бутова С.Н., Типисева И.А., Эль-Регистан Г.И. Теоретические основы биотехнологии. Биохимические основы синтеза биологически активных веществ. М.: Элевар, 2003. - 554 с.

41. Валенкевич Л.И., Яхонтова О.И. Молоко и молочные продукты в практике врача. Политехника, 2005. - 160 с.

42. Вартанян Г.Г. Факторы патогенности бактерий, выделенных при диареях новорождённых телят. Автореф. дисс.канд. вет. наук. М., 1992. -23с.

43. Вербина Н.М., Каптерева Ю.В. Микробиология пищевых производств. М.: Агропромиздат, 1988. - 256 с.

44. Вершинина В.Н., Алимов Ф.А. Продукты на основе биомассы микроорганизмов. В кн.: Микробная биотехнология. Казань: Унипресс, 2000.-368 с.

45. Винаров А.Ю., Смирнов В.Н. Влияние уровня растворенного кислорода на стереохимические коэффициенты выращивания дрожжей.//Прикл. биохим. и микробиол. 1983. - т. 19, №2. - с.244-249.

46. Винаров А.Ю., Цыганкова Н.И., Гордеева Е.И., Захарычев А.П. Процессы предобработки сырья и глубинное культивирование микроорганизмов.//Хранение и переработка сельхозсырья. 2004. - №5. - с. 20-22.

47. Витринская A.M. и др. Стимулирующий эффект дестибиотина в различных условиях культивирования дрожжей.//Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1985. - №6. - с. 41-44.

48. Владимиров В.Г., Лызлова С.И., Лянгузов А.Ю., Антипенко А.Е. и др. Ферменты и нуклеиновые кислоты. СПб, 1997. - 151 с.

49. Войно Л.И. Методические укзания к выполнению лабораторных работ по разделу «Дрожжи» курса «Микробиология». М.: МГУ1111, 1999. - 19 с.

50. Воробьев А.А., Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А. Дисбактериозы актуальная проблема медицины.//Вестн. РАМН. - 1997. -№3. - с. 4-7.

51. Воробьев М.М. Создание массового производства новых диетических продуктов питания на основе растительного белка.// Хранение и переработка сельхозсырья. 1998. - №2. - с. 50-51.

52. Вустин М.М., Белых Е.Н., Бабьева И.П., Решетова И.С., Синеокий С.П. Межпопуляционные киллер-взаимодействия у дрожжей рода Debaryomyces.// Микробиология. 1995. - т. 64, № 6. - с. 801-803.

53. Вустин М.М., Шемякина Т.М., Бабьева И.П., Решетова И.С., Тимохина Е.А. Новое антибиотическое вещество, образуемое дрожжами Williopsis pratensis.Z/Докл. Академии наук СССР. 1988. - т. 302, №3. - с. 724-727.

54. Вустин М.М., Шемякина Т.М., Ребентиш Б.А. и др. Киллерный белок, образуемый дрожжами Hansenula anomala (Hansen) Н. et P. Sydow.Z/Доклады Академии наук СССР. 1989. - т. 308, № 5. - с. 1251-1255.

55. Выродов И.П. Физико-химическая природа процессов набухания зерна. // Известник ВУЗов. Пищевая технология. 2001. - № 1. - с. 9-11.

56. Гарманова Е.Л. Влияние биологически активных веществ на качество сушеных дрожжей.// Матер. 35 отчет, науч. конф. Воронеж: ВГТА, 1996. - с. 16.

57. Генетические основы классификации и идентификации дрожжей (1986-1988)/ВНИИ генетики и селекции промышленных микроорганизмов. М., 1989.- 164 с.

58. Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов. Санитарные правила и нормы. СанПиН 2.3.2.560-96. М.: Госстандарт России, 1997. - 228 с.

59. Голуб О.В. Исследование и разработка технологии продуктов на основе молочной сыворотки с использованием фитосырья. Дисс. . канд.тех.наук. Кемерово, 2000. - 117 с.

60. Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов. СПб.: ГИОРД, 2004. - 320 с.

61. Градова Н.Б. Использование непрерывного процесса культивирования для получения микробной биомассы. В кн.: Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов. М.: Наука, 1980. - с. 91-98.

62. Грачева И.М., Иванова Л.А., Кантере В.М. Технология микробных белковых препаратов, аминокислот и биоэнергия. М.: Колос, 1992. - 383с.

63. Грачева И.М., Кривова А.Ю. Технология ферментных препаратов. -М.: Элевар, 2000.-510 с.

64. Грачева Н.М. Дисбактериозы и суперинфекции, причины их возникновения, диагностика, лечение.//Лечащий врач. 1998. - №1. - с. 18-21.

65. Гусев М.В., Минаева Л.А. Микробиология. М.: МГК, 1985. - 376 с.

66. Давидов Р.Б., Гулько Л.Е., Круглова Л.А., Файнгар Б.И. Молоко и молочные продукты как источник витаминов. М.: 1972.

67. Дарбре А. Практическая химия белка. М.: Мир, 1989. - 623 с.

68. Даценко С.Д., Чернов А.Ю. Модифицированные крахмалы.//Мясной бизнес. 2003. - № 10. - с. 9-14.

69. Дж. Вудворд Иммобилизованные клетки и ферменты. М.: Мир, 1988. -215 с.

70. Донченко Л.В., Надыкта В.Д. Безопасность пищевого сырья и продуктов питания. М.: Пищевая промышленность, 1999. - 352 с.

71. Доценко О.Н., Садовой В.В. Функционально-технологические характеристики белкового продукта дрожжевой биомассы.// Пищевая технология. 2002. - № 2-3. - с. 25-26.

72. Евдокимов И.А. Современное состояние и перспективы переработки молочной сыворотки.// Молочная промышленность. 2006. - №2. - с. 15-19.

73. Евдокимов И.А., Володин Д.Н., Дыкало Н.Я. Электродиализ -перспективный метод переработки молочной сыворотки.// Переработка молока. 2001. - №2. - с. 2-5.

74. Евдокимов И.А., Рябцева С.А., Никульникова И.К. и др. Экологичность и экономичность переработки лактозосодержащего сырья. Материалы научно-теоретической конференции. Углич, 1995.

75. Блинов Н.П. Основы биотехнологии. С-Пб.: Наука, 1995. - 660 с.

76. Емцев В.Т., Мишустин Е.Н Микробиология. М.: Агропромиздат, 1993.-475 с.

77. Ерофеев П.Ю. Разработка технологии дрожжевых лечебно-профилактических продуктов на базе растительного сырья. Дисс. канд.тех.наук. Москва, 2000. - 24с.

78. Жаманов М.Б., Сорокин В.П. Продуктивность свиней при включении в рацион корма из «клеточных оболочек» дрожжей.//Бюлл. ВНИИ Животноводства 1995. - №11. - с.28-30.

79. Залашко М.В. Биотехнология переработки молочной сыворотки. М.: Агропромиздат, 1990.

80. Зарочинцев Ф.Н., Хахов А.А. и др. Профилактико-лечебная эффективность дрожжевых препаратов при диарее у поросят.//Функциональная морфология болезней плодов и новорождённых животных. М., 1993. - с.78-80.

81. Земсков М.В., Игнатьева С.А. и др. Стимуляция дрожжами продукции антител, резистентности и плазмобластической реакции у животных.//ЖМЭИ. 1995. - №3. - с.130-133.

82. Зунг Н.К. Разработка технологии получения дрожжевых лечебно-профилактических препаратов на твёрдых растительных субстратах. Дисс. канд.тех.наук. - М., 1996. - 200 с.

83. Исламмагомедова Э.А. Влияние состава питательной среды на содержание фосфора в биомассе дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-503.//Хранение и переработка сельхозсырья. 1998. - №10. - с. 19-20.

84. Казаков Е.Д., Карпиленко Г.П. Биохимия зерна и зернопродуктов. -СПб.: ГИОРД, 2005. 512 с.

85. Калмыкова А.И. Пробиотики: терапия и профилактика заболеваний. Укрепление здоровья. Новосибирск, СибНИПТИП СО РАСХН. 2001. - 208 с.

86. Капуспаева К.М. Смешанные культуры микроорганизмов для кормопроизводства. Автореф. дисс. . канд. биол. наук. - Алматы, 1993. -25с.

87. Карпова Г.В. Твёрдофазная бактериальная ферментация шелухи зерновых и лузги подсолнечника с получением кормовых продуктов. -Автореф. дисс. канд. биол. наук. Алматы, 1994. - 25с.

88. Карл Хосни Р. Зерно и зернопродукты. Профессия, 2006. - 336 с.

89. Картел А.Н. Спиртовое брожение молочной сыворотки дрожжами рода Kluyveromyces: дисс.канд.биол.наук. Нац. акад. наук Белоруссии, Минск, 2002.-201 с.

90. Квасников Е.И., Нагорная С.С. и др. Дрожжевая флора кишечного тракта долгожителей Абхазии.//Микробиол. журн. 1985. - т.47,вып.4. -с.22-26.

91. Квасников Е.И., Щелокова И.Ф. Дрожжи. Биология. Пути использования. Киев: Наукова думка, 1991.-322 с.

92. Кислухина О., Кюдулас И. Биотехнологические основы переработки растительного сырья. Каунас: Технология, 1997. - 183 с.

93. Клисенко М.А. Методы определния микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Колос, 1992. - 78 с.

94. Князева И.А. Разработка биоконверсии отходов переработки зерна в белковые кормовые препараты путем твердофазной и глубинной ферментации их с помощью дрожжевых микроорганизмов.: Дисс.канд. техн. наук. -МГАПП: М., 1996.-200 с.

95. Ковальская Л.П. Общая технология пищевых производств. М.: Колос, 1993.-384 с.

96. Козлова Л.И., Казанцев Ю.Е., Алентьева Е.С. Состав липидов микроорганизмов в зависимости от источников сырья и режимовкультивирования. М.: ВНИИСЭНТИ Минмедпрома СССР, 1990.-вып.2. -30 с.

97. Концепция государственной политики в области здорового питания населения Российской Федерации на период до 2005 года. Постановление Правительства РФ №917 от 10.08.98.

98. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов. СПб.: СпецЛит, 2000. -591 с.

99. Коршунов В.М. Проблема регуляции микрофлоры кишечника.//Журнал микробиологии. 1995. - №3. - с. 48-55.

100. Коршунов В.М. и др. Микроэкология желудочно-кишечного тракта. Коррекция микрофлоры при дисбактериозе кишечника. Учебное пособие. -М., 1999.- 80 с.

101. Косюра В.Т. Основы виноделия. Учебное пособие для ВУЗов. М.: ДеЛи, 2004. - 440 с.

102. Кравченко Э.Ф. Состояние и перспективы использования молочной сыворотки.//Сыроделие и маслоделие. 2000. - №2. - с. 9-10.

103. Кравченко Э.Ф., Волкова Т.А. Использование молочной сыворотки в России и за рубежом.//Молочная промышленность. 2005. - №4. - с. 17-19.

104. Красноштанова А.А., Крылов И.А., Бабусенко Е.Г. Основы биотехнологии. М., 2001. - 84 с.

105. Крусь Г.Н., Храмцов А.Г., Волокитина З.В. и др. Технология молока и молочных продуктов. М.: КолосС. - 2006. - 455 с.

106. Крылов И.А., Красноштанова А.А., Гусева И.И. Комплексная переработка биомассы промышленных микроорганизмов. М.: РХТУ, 2001. -83 с.

107. Куваева И.Б., Кузнецова Г.Г. Антагонистическая активность микробных популяций защитной флоры и её связи с характеристикой микробиоценоза и факторами питания.//Вопросы питания. 1993. - №3. - с. 46-50.

108. Кугенев П. В. Молоко и молочные продукты. М.,1985. 320 с.

109. Кузнецов В.Д., Горшков А.И., Суханов Б.П. Применение дополнительных источников белоксодержащего сырья при производстве пищевых продуктов (обзор).// Гигиена и санитария. 1996. - №5. - с. 10-15.

110. Кузнецова Г.Г., Шаховская А.К., Григорьева А.Н. Влияние нового вида ПВ из пшеничных отрубей на микробиоценоз толстой кишки у больных с синдромом запора. В кн.: «Пищевые волокна в рациональном питании человека». М., 1987. - с. 74-75.

111. Курилович С.А. Методические рекомендации для врачей. Микробиоценоз кишечника. Современные представления о норме и патологии. Принципы коррекции нарушений. Новосибирск, 1998. - 120 с.

112. Лирова С.А., Ховрычев М.П., Работнова И.Л. Влияние нейтральных и слабощелочных значений рН на кинетику роста и физиологические особенности хемостатной культуры дрожжей Candida и1:Ш8.//Микробиология. 1978. - т.47, №2. - с. 253-258.

113. Лобзин Ю.В. Введение. Классификация инфекционных болезней.// Руководство по инфекционным болезням / Под ред. Ю.В. Лобзина, А.П. Казанцева. СПб., 1996. - с. 4-10.

114. Лобзин Ю.В., Позняк А.Л., Добрынин В.М. и др. Дисбактериозы при острых кишечных инфекциях. СПб., 1997. - 79 с.

115. Лобзин Ю.В., Волжанин В.М., Захаренко С.М., Клиника, диагностика и лечение актуальных кишечных инфекций. СПб.: Фолиант, 1999. - 187 с.

116. Лодыгин Д.Н., Кисилев С.А. Актуальность использования белков молочной сыворотки при производстве концентратов с промежуточной влажностью.// Сборник научных трудов СевКавГТУ. Серия «Продовольствие». 2005. - №1. - с. 16-18.

117. Лыкова Е.А., Мурашова А.О., Бондаренко В.М. и др. Нарушения микрофлоры кишечника и иммунитета у детей с аллергическими дерматитами и их коррекция.// Рос. педиатр, журн. 2000. - №2. - с. 20-24.

118. Мазо В.К., Гмошинский И.В., Скальный А.В. и др. Цинк в питании человека: физиологические потребности и биодоступность./ТВопросы питания. 2002. - т. 71, № 3. - с. 46-51.

119. Мазо В.К., Чистяков А.В., Данилина Л.Л. и др. Биологическая добавка к пище на основе пищевых дрожжей. 2000. - Патент РФ №2146874.

120. Мальцев П.М. Технология бродильных производств. М.: Пищевая пром-сть, 1980. - 560 с.

121. Мудрецова-Висс К.А. Микробиология. М.: Экономика, 1985. -256с.

122. Нагорная С.С., Гавриленко М.Н. и др. Сахаромицеты-антагонисты патогенной микрофлоры.//Микроорганизмы в сельском хозяйстве. Тез. докл. 4ой Всесоюзн. научн. конф. Пущино, 1992. - с. 16-21.

123. Нечаев А.П., Колпакова В.В. Белки из побочных продуктов переработки зерна пшеницы: технологические аспекты, функциональная роль, применение.// Хранение и переработка сельхозсырья. 1998. - №4. - с. 39.

124. Нечаев А.П., Траубенберг С.Е., Кочеткова А.А. и др. Пищевая химия. СПб.: ГИОРД, 2001. - 592 с.

125. Николаев П.И., Соколов Д.П. Вопросы аппаратурно-технологического оформления непрерывных микробиологических процессов. В кн.: Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов. -М.: Наука, 1980.-е. 189-215.

126. Николаева Т.Н., Зорина З.В., Бондаренко В.М. Иммуномодулирующая активность бактерий рода Lactobacillus.//C6. материалов конференции «Пробиотические микроорганизмы современное состояние вопроса и перспективы использования». - М., 2002. - с. 18.

127. Онищенко Г.Г. Эпидемиологическая обстановка в Российской Федерации в период 1991-1996 гг.//Антибиотики и химиотерапия. 1997. - т. 42,№8.-с. 3-12.

128. Оспоумов J1.JI., Гаврилов Г.Б. О составе и свойствах молочной сыворотки.//Хранение и переработка сельхозсырья. 2006. - №8. - с. 47-48.

129. Павлова И.В. Разработка биотехнологии утилизации молочной сыворотки с целью получения спирта и последующей комплексной очистки образующихся стоков совместно со сточными водами молокозавода. Автореф. Дисс.канд. техн. нуаук. -М., 2003. 22 с.

130. Палагина И.А., Шаманова Т.С. Характеристика качества продукции по токсичным элементам.//Известия вузов. Пищевая технология. 2002. - № 1. -с. 71-72.

131. Панин А.Н., Малик Н.И., Малик Е.В. Иммунология и кишечная микрофлора. М., 1998. - с. 47.

132. Панин А.Н., Малик Н.И., Чупахина Н.А. Влияние пребиотической добавки на микробиоценоз кишечника цыплят.//Сб. материалов конференции «Пробиотические микроорганизмы современное состояние вопроса и перспективы использования». - М., 2002. - с.62.

133. Перовская В.Г., Марко О.П. Микрофлора человека в норме и патологии. М., 1976. - 94 с.

134. Перт С. Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. -М.: Мир, 1978.-331с.

135. Плевако Е.А. Технология дрожжей. М.: Пищевая промышленность, 1970.-299с.

136. Погожева А.В. Пищевые волокна в лечебно-профилактическом питании.//Вопр. питания. 1998. - №11.-е. 39-42.

137. Поздняковский В.М. Гигиенические основы питания, качество и безопасность пищевых продуктов. Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та, 2005.-448 с.

138. Позмогова И.Н. Влияние сверхоптимальных температур на бактерии и дрожжи.//Изв. АН СССР, сер. Биол. 1978. - №4. - с. 588-597.

139. Позмогова И.Н. Изучение хемостатных культур при ингибировании повышенной температурой. В кн.: Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов. М.: Наука, 1980. - с. 36-46.

140. Политика здорового питания: Федеральный и региональный уровни. -Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2002. -344 с.

141. Поткин В.Е., Разумов А.Н., Дараган А.Г. Натуральные экологически чистые отечественные белковые комплексы основа создания биологически активных пищевых добавок целенаправленного действия.//Хранение и переработка сельхозсырья. - 1998. - №1. - с.ЗЗ.

142. Приданникова И., Елизарова В. Культуры прямого внесения для производства кефирного продукта.//Молочная промышленность. 2004. - №6. - с. 44-45.

143. Работнова И.Л. Некоторые данные о закономерностях роста микроорганизмов.//Ж. общей биологии. 1972. - т.ЗЗ. - 539-544.

144. Работнова И.Л., Лирова С.А., Ризенберг Д.А., Шульговская Е.М. и др. Переходное сосотояние хемостатной культуры Candida utilis после шока низким значением рН среды в течение одной генерации.// Микробиология. -1976. т.45, №6. - с. 1005-1011.

145. Работнова И.Л., Позмогова И.Н. Хемостатное культивирование и ингибирование роста микроорганизмов. М.: Наука, 1979. - 208 с.

146. Рашидов М.Т. Разработка метода электрохимического воздействия на молочную сыворотку для интенсификации процесса брожения в технологии спирта. Автореф. Дисс. .канд. техн. наук. - М., 2003. - 25 с.

147. Римарева Л.В. Биотехнологические аспекты получения продуктов повышенной биологической ценности.//Материалы II Московского конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». М., 2003. - с. 89-90.

148. Рогов И.А. Пищевая биотехнология. Учебник для ВУЗов. М.: Колосс, 2004. - 440 с.

149. Румянцев В.Г. Днсбактериоз кишечника: клиническое значение и принципы лечения.//Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - №3. - с. 61-63.

150. Садагашвили Т.Г., Зарнадзе Т.И., Менабде М.В., Шатиришвили А.Ф. Киллерные системы винных дрожжей//Изв. АН Грузии. Сер. Биол. 2001. -№1-3.-с. 225-229.

151. Саенко Н.Ф. Дикие дрожжи и дрожжеподобные грибки в винодельческом производстве. Обмен передовым техническим опытом. М.: Пищепромиздат, 1956. - 56 с.

152. Саенко Н.Ф., Мальцева М.А. Технологические требования к микроорганизмам, применяемым в виноделии. М.: Пищевая промышленность, 1975. - 34 с.

153. Садыкин Ю.О., Орехов С.Н., Чакалева И.И. Биотехнология. М.: Издательский центр «Академия», 2006. - 254 с.

154. Саловарова В.П., Козлов Ю.П. Эколого-биотехнологические основы конверсии растительных субстратов. М.: Изд-во РУДН, 2001. - 381 с.

155. Сассон А. Биотехнология: свершения и надежды. М.: Мир, 1987. -411с.

156. Свеженцов А.Т. Використания автсиизату др1ждж!в у год1вл{ птищ та свиней.// BicH. аграр. науки. 1998. - № 12. - с. 21-23.

157. Сенкевич Т., Ридель К.-Л. Молочная сыворотка: переработка и использование в агропромышленном комплексе. М.: Агропромиздат, 1989. -270 с.

158. Скородумова А. М. Диетические и лечебные кисломолочные продукты. Л., 1961. 210 с.

159. Смирнов В.В. Антибиотики и/или пробиотики: размышления и факты. Киев: «Л1кування та Диагностика», 1998. - с.8.

160. Солдатова С.Ю. Разработка технологии биологически активного полуфабриката пищи и корма на основе растительного сырья и дрожжей. Дис.к.т.н.-M., 2004.- 170 с.

161. Солдатова С.Ю., Борисенко Е.Г. Дрожжевые нутрипарафармацевтики на базе растительного сырья: продуценты и некоторые аспекты технологии.//Хранение и переработка сельхозсырья. 2004, №5. - с. 43-47.

162. Соловьева И.В. Использование биологических препаратов, нормализующих микрофлору в комплексной терапии гинекологических больных. В кн.: Антибиотики и микроэкология человека и животных. М., 1988.-с. 158-160.

163. Степанова Е.В., Королева О.В., Васильченко Л.Г. Разложение овсяной соломы грибами при жидкофазном и твердофазном культивировании.//Прикл. биохим. и микробиол. 2003. - т. 39, №1. - с. 74-84.

164. Трачук Т.Ю., Шраер О.Т. Этапы микробной колонизации организма новорожденных.//Рос. педиатр, журн. 1999. - №3. - с. 37-39.

165. Тужилкин В.И., Доронин А.Ф., Кочеткова А.А., Шендеров Б.А. и др. Функциональные пищевые продукты стратегия современного питания.//Сб. докладов Международной конференции «Технологии и продукты здорового питания». - М.,2003. - с. 3-10.

166. Тутельян В.А. Стратегия разработки, применения и оценки эффективности БАД.//Вопросы питания. 1996. - №6. - с.3-11.

167. Тырсин Ю.А., Иванова Л.А., Кривова А.Ю. Методические указания к выполнению лабораторных работ по курсу «Специальная биохимия». М.: Изд. Центр МГАПП, 1993. - 66 с.

168. Федеральный закон «О качестве и безопасности пищевых продуктов» №29-ФЗ. М., 2000.

169. Филиппович Ю.Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. -496 с.

170. Ха Н.Т.Т. Разработка технологии дрожжевых ферментированных продуктов на основе рисовой мучки. Дисс. канд.тех.наук. - М., 1996. -121с.

171. Храмов В.А. Протеины, ферменты. Волгоград, 1995. - 43 с.

172. Храмцов А.Г. Молочная сыворотка. М.: Агропромиздат, 1990. - 240с.

173. Храмцов А.Г. Промышленная переработка вторичного молочного сырья. М.: ДеЛи, 2003. - 100 с.

174. Храмцов А.Г., Василисин С.В. Справочник технолога молочного производства. Т.5: Продукты из обезжиренного молока, пахты и молочной сыворотки. СПб.: ГИОРД, 2004.

175. Храмцов А.Г., Евдокимов И.А, Варданян Г.С., Терновой А.И. Деминерализация лактозосодержащего сырья методом электродиализа. Обзорная информация. М.: АгроНИИТЭИММП, 1992.

176. Храмцов А.Г., Нестеренко П.Г. Технология продуктов из молочной сыворотки. М.: ДеЛи принт, 2004. - 588 с.

177. Храмцов А.Г., Павлов В.А., Евдокимов И.Л. и др. Переработка и использование молочной сыворотки: технологическая тетрадь. М.: Росагропромиздат, 1989.

178. Хрычева А.И., Исследование влияния микроэлементов на биосинтетическую активность и хлебопекарные свойства дрожжей. -Автореф. дисс. канд.тех.наук. М.: ВНИИПБ, 1977. - 24 с.

179. Цугкиева В.Б. Качество кормовых дрожжей в зависимости от технологии производства и вида исходного сырья. Дисс.канд. с-х. наук. -Горе. гос. аграр. ун-т., Владикавказ, 1999. 170 с.

180. Чернов Ю.И. Биология дрожжей. М.: Типография МТИПП, 1988. -54 с.

181. Шалыпина A.M., Калинина Л.В. Общая технология молока и молочных продуктов. М.: КолосС, 2004. - 200 с.

182. Шамаев А.Г. Кумыс и его применение в лечебной практике. -www.vatandasch.ufanet.ru, 2005.

183. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса.//Вопросы питания. 1999. - т.68,№2. -с.32-40.

184. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том I: Микрофлора человека и животных и ее функции. М.: Грантъ, 1998.-288с.

185. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Т.З. Пробиотики и функциональное питание. М.: «Грантъ», 2001. -287с.

186. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека.//Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - №1. - с. 61-65.

187. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора человека и некоторые вопросы микроэкологической токсикологии.//Антибиотики и мед. биотехнология. 1987. - т.32, №3. - с.164-170.

188. Шептулин А.А. Синдром избыточного роста бактерий и «дисбактериоз кишечника»: их место в современной гастроэнтерологии.//Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - №3. - с. 1418.

189. Шлегель Г. Общая микробиология. Пер. с нем. М.: Мир, 1987. - 567с.

190. Шувалова Е.П., Осипова Г.И., Короткова М.Р. Шептулин А.А. Синдром избыточного роста бактерий и «дисбактериоз кишечника»: их место в современной гастроэнтерологии.//Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - №3. - с. 51-54.

191. Щелкунов Л.Ф., Дудкин М.С., Корзун В.Н. Пища и экология. -Одесса: Оптимум, 2000. 517 с.

192. Щерба В.В., Бабицкая В.Г., Кустина A.M. Биоконверсия лигнинцеллюлозного комплекса соломы в условиях глубинного культивирования. В кн.: Передовой производственный опыт в мед. промышленности, рекомендованный для внедрения. М.,1992 - вып.З. —с. 1114.

193. Adorns M.R. and Hill C.I. Growth inhibition of food-borne pathogens by lactic and acetic acids and their mixtures.//lnt. J. Food Sci. Technol. 1998. - Vol. 23.-P. 287-292.

194. Asp N.-G. Dietary fibre analysis an overview.//Eur. J. Clin. Nutr. - 1995. - Vol. 49, N 3(Suppl.) - P. S42-S47.

195. Barnett J.A., Payne R.W., Yarrow D. Yeasts. Characteristics and Identification. -Cambridge Univ. Press, 1990. 1002 P.

196. Berends A. Untersuchungen tiber Ausmass, Mechanismus und Anwendung der Schwermetall Biosorption mit freien und immobilisierten Hefezellen.: Diss.Hohenheim, 1993. - 115 S.

197. Beny D.R. Biology of yeast. Edward Arnold, 1982. -96 P.

198. Broek A. Van den. Functional foods the Japanese approach.//Intern. Food Ingredients. - 1992. - N1/2. - P. 4-9.

199. Bulletin of the IDF 113.// Oligosaccharides and probiotic bacteria. 1996.

200. Chaitov L., Trenev N. Probiotics. Thorsons Publishing Group, Northamptonshire, 1990. - 320 P.

201. Costerton J.W., Marrie T.J., Cheng K.J. Phenomena of Bacterial Adhesion. -In: Bacterial Adhesion. Plenum Publ. Corp. 1985. - P. 40-41.

202. Duboc P., Cascao-Pereira L.G., Stockar U. Identification and control of oxidative metabolism in Saccharomyces cerevisiae during transient growth using colorometric measurements.// Biotechnol. Bioeng. 1998. - Vol. 57, №5. - P. 610619.

203. Eroshin V.K., Utkin I.S. Influence of pH and temperature on substrate yield coefficient of yeast growth in a chemostat.//Biotechnol. Boeng. 1976. - Vol. 13, -P. 289-299.

204. Eskin M., Snait T. Dictionary of Nutraceutical and Functional Foods, N. A. CRC Press, Woodhead Publishing Limited, Cambrige, England, 2003.

205. Filipova-Kovacevic Z., Miksaj M., Bercuk N., Juki M. Amperometric biosensor for monitoring respiration activity of Saccharomyces cerevisiae in the presens of cobalt and zinc.//Food Technol. Biotechnol. 2002. - Vol. 40, N2. - P. 111-117.

206. Fleet G.H. Yeasts in dairy products.//! of Appl. Bacteriol. 1990. - Vol. 68. -P. 199-21 l.e

207. Fuller R. Probiotics in man and animals. //J. of Appl. Bacteriol. 1989. -Vol. 66. - P. 365-378.

208. Gadd J. MOS a gut feeling on dredging out the nasties.//Pig farming. -1994.-Nil.-P. 21-23.

209. Galvez A.F., Revilleza J.R, de Lumen B.O. A novel sulfur-rich protein from soybean.// J. Agric. Food Chem. 1997. - Vol.39. - P. 224-227.

210. Gibson G.R. Oligosaccharides and prebiotics. In: Perfood forum'96. -Chicago, USA, 1996; 15-18 April. P. 42-49.

211. Gissen A.S. Off Probiotics, Prebiotics & Synbiotics.//VRP's Inc. Vit. Res. Prod. Newsletters, Sept. 1995. P.56-66.

212. Gardes M, Bruns TD. ITS primers with enhanced specificity for basidiomycetes-application to the identification of mycorrhizae and rusts.// Mol Ecol., 1993; 2(2)- P.113-118.

213. Gradova N.B., Rodionova G.S., Zaikina A.I. et al. Use of Yeast for Single-Cell Protein Production.//Proc. 5-th Intern. Spec. Symp. On Yeasts. Keszthely, Hungary, 1977. - Part 2. - P. 65.

214. Isobe Kenji. Microbial Adhesion to Solid Surface///J. Surface Ski. Soc. Jap. 2001. - Vol. 22, N10. - P.652-662.

215. Hublot В., Gayral P. Use of Saccharomyces yeasts for preventing or treating pseudo-membranous colitis and amebiase. // EPA#0149579: Int. CI4 A61 КЗ5/72. -Publ. 25.07.85, Bui. 85/70.

216. Hugo W.B. Ingibition and destruction of the microbial cells. Acad. Press, London - NewYork, 1971.

217. Phillips R.D. Nutritional quality of cereal and legueme storage proteins.// Food Technol. 1997. - Vol. 51, №5. - P. 62-66.

218. Speijers G.J.A., Younes M., Van Der Heijden C.A. Novel Foods.// International Food Safety Handbook. N.Y.: Marcel Dekker, 1999.

219. Jelinek J. Syrovatka ma mnohostranne vyuziti.//Nas chov. 1998. - №8. -P. 31-32.

220. Kurtzman C.P., Robnett C.J. Identification and phylogeny of ascomycetous yeasts from analysis of nuclear large subunit (26S) ribosomal DNA partial sequences. Antonie Van Leeuwenhoek. 1998; 73(4):331-371.

221. Lim B.O., Yamada K., Nonaka M., et al. Dietary fibers modulate induced of intestinal immune function in rats.//J. Nutr. 1998. - Vol. 127, N5. - P.663-667.

222. MacAlister R.V. Advances in Enzyme Regulation. 1964. Vol. 3. P. 1546.

223. Mechanisms of sacharide polymerization and depolymerization, N. Y a.o. 1980, p. 73-100,209-14.

224. Macioniene I., Salomskiene J., Paskevicius A. Yeats distribution in milk products.//Bot. Lith, 2003. Vol. 9, №2. - P. 179-184.

225. Miller G.H., Sabatelli F.J., Hare R.S. et al. The most frequent aminoglycoside resistance mechanisms Changes with time and geographic area: A reflection of aminoglycoside usage patterns?// Clin.I nfect. Dis. - 1997. - Vol. 24, Suppl. I. - P.46-62.

226. Mitsuoka Т., Hidaka H., Eida T. Effect of FOS on intestinal microflora.//Die Nahrung. 1987. - Vol. 31. - P. 427-436.

227. Moon N. Inhibition of the growth of acid tolerant yeast by acetate, lactate and propionate and their sinergistic mixtures.//J. Appl. Bacteriol. 1983. - Vol. 55. -P. 455-460.

228. Nabrotzky K. Was sind «neuartige» Lebensmittel?// Deutsche Lebensmittel-Rundschau. №7. - 2002. - S. 257-261.

229. Nagel Frank-Jan J.I., Tramper Johannens, Bakker Marjolein S.N., Rinzema Arjen. Temperature control in a continuously mixed bioreactor for solid-state fermentation.// Biotechnol. And Bioeng. 2001. - Vol.72, N2. - P. 219-230.

230. O'Donnell K., Fusarium and its near relatives. //The fungal holomorph: mititic? Meiotic and pleomrphic speciation in fungal systematics // Eds Reynolds D.R., Taylor J.W. Wallingford, UK: CAB International, 1993, p.225-233.

231. Phillips R.D. Nutritional quality of cereal and lequeme storage proteins.// Food Technol. 1997. - Vol. 51, №5. - P. 62-66.

232. Roberts A.K., Harzer G., Drazer B.S., Hill M.J. The effect of diet on the bacterial flora of the infant gut.//Microecological Therapy. 1984. -Vol.14. -P. 1219.

233. Romen-Moreno A., Mac A. Effect of cooper exposure in tissue cultured vitis Vinifera.//J.Agr. and Food Chem. 1999. - Vol. 47, № 7. - pp. 2519-2522.

234. Shah Nadendra P. Functional foods from probiotics and prebiotics.//Food Technol. 2001. -Vol.55, N11.- P.46-53.

235. Speijers G.J.A., Younes M., Van Der Heijden C.A. Novel Foods.// International Food Safety Handbook. -N.Y.: Marcel Dekker, 1999.

236. Spencer J.F.T., Spencer D.M., Smith A.R.W. Yeast Genetics. N.-Y.: Springer-Verlag, 1983. - 533 P.

237. Strahm W., Eberhard P.Sauermilch mit Bifidusbakterien (Herstellung im Kleinbetrieb). Liebefeld, 1992. - 10 S.

238. Tannock G.W. The normal microflora: a new concepts in health promotion.//Microbial sci. 1988. - Vol.5, N1. - P.4-9.

239. Tannock G.W. Probiotics: A critical review. Horison. Scientif. Press. -N.-Y., 1999. -370 P.

240. The Importance of Whey Components in Food and Nutrition. Munich. -2001.

241. The proceed of the Symp VLAG/WIAS "Non-Digestible Oligosaccharides: Healthy Food for the Colon". Wageningen, Netherlands, 1997.

242. The yeasts. A Taxonomic Study. Ed. Kreger-van-Rij N.J.W. Amsterdam: Elsevier Ski.Publ.B.V., 1984. - 1082 P.

243. Tuszynski Т., Pasternakiewicz A. Bioaccumulation of metal ions by yeast cells.// Pol. J. Food Nutr. Sci. 2000. - Vol. 9/50, № 4. - P. 31-39.

244. Wollen A. Functional foods a new market?//Food rev. - 1990. - Vol.17,

Похожие работы

Технология продовольственных продуктов
05.18.00