автореферат диссертации по химической технологии, 05.17.08, диссертация на тему:Разработка и исследование ультрафильтрации липаз на стадии их выделения и концентрации

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Мембранные процессы разделения жидких смесей

1.2. Характеристика ультрафильтрационных мембран. II

1.3. Влияние основных технологических факторов на параметры процесса ультрафильтрации

1.4. Массоперенос при разделении смесей ультрафильтрацией

1.5. Место ультрафильтрации в типовой ХТС получения ферментов микробного синтеза

1.6. Выводы из литературного обзора и постановка задачи исследования

ГЛАВА П. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Характеристика исследованных мембран

2.1.1. Выбор мембран, определение их удельной водопроницаемости и регенерация

2.2. Характеристика объектов исследования.

2.3. Методы анализа

2.4. Методика проведения экспериментов

2.4.1. Установка периодического действия

2.4.2. Установка непрерывного действия

2.4.3. Проведение опытов

2.5. Оценка ошибки опыта

2.6. Планирование экспериментов

ГЛАВА Ш. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ЭКСПЕРИМЕНТОВ

3.1. Факторы, влияющие на процесс ультрафильтрации

3.1.1. Средний диаметр пор

3.1.2. Перепад давления по толщине мембраны

3.1.3. Частота вращения мешалки и скорость по

3.1.4. Высота канала . ^

3.1.5. Начальная концентрация растворенных веществ . 0±

3.2. Выбор параметров оптимизации и значимых факто

3.3. Оптимизация процесса ультрафильтрации

ГЛАВА 1У. РАЗРАБОТКА УЛЬТРАФИЛЬТРАЦИИ В ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ

СХЕМЕ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТА ЛИПАЗЫ

4.1. Анализ существующей и предлагаемой схемы очистки и выделения .-^О-1

4.2. Расчет ультрафильтрационного аппарата непрерывного действия

4.3. Определение экономического эффекта

ВЫВОДЫ

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

В различных отраслях народного хозяйства развивается новое направление - мембранная технология, основу которого составляют мембранные процессы разделения жидких смесей, включающие обратный осмос, ультрафильтрацию, диализ и электродиализ.

Процессы мембранного разделения жидких систем наряду с выделением и концентрированием целевого продукта способствуют решению проблемы охраны окружающей среды, вторичного использования сырья, созданию замкнутых систем водоснабжения.

Актуальность этих вопросов отмечена и в Постановлении ГКНТ при СМ СССР Я 430 от 26.11.76, в котором поставлена задача¡"Разработать и освоить в опытно-промышленных условиях процессы очистки сточных вод на предприятиях химической и микробиологической промышленности, а также процессы концентрирования ферментов мембранными методами".

Ферменты представляют значительный интерес в связи с возможностью использования их в различных отраслях народного хозяйства. Особенно важную роль играют ферменты липазы, значение которых в пищевой промышленности, клинической медицине, сельском и коммунально-бытовом хозяйстве трудно переоценить.

Выделение и концентрирование продуктов микробного синтеза, в том числе ферментов липазы - важнейшая проблема технологии их получения. Использование для этих целей традиционных методов биотехнологии: экстракции, осаждения, центрифугирования, хроматографии, электрофореза и др., как правило, приводит к многоста-дийности технологических схем и высоким потерям целевого продукта.

В то же время разделение растворов, содержащих биопрепараты, методом ультрафильтрации позволяет осуществить их выделение и концентрирование при комнатной температуре, без изменения рН среды, практически без потерь с сохранением высокой активности препарата.

Однако исследований по массопереносу при использовании метода ультрафильтрации в биотехнологии крайне недостаточно, что сдерживает дальнейшее применение мембранных методов, их оптимизацию и конструирование аппаратов.

В свете этого особо актуальным является: проведение комплекса систематических исследований процесса массопередачи при выделении ферментов методом ультрафильтрации, определение степени влияния различных факторов на процесс и нахождение оптимального режима разделения с учетом лабильности ферментов, метод технологического расчета процесса и ряд других вопросов.

В решении поставленных задач и заключается актуальность представленной работы.

Цель работы. Исследование возможности применения серийно выпускаемых мембран "Владипор" типа УАМ-М для выделения фермента липазы из ферментативного раствора. Определение основных независимых факторов и разработка рекомендаций по определению их диапазона для ведения ультрафильтрации в оптимальном режиме.Определение места ультрафильтрации в ХТС получения ферментов липазы и внедрение метода в производство.

Научная новизна. Впервые установлена взаимосвязь между основными факторами ультрафильтрации: перепадом давления, скоростью потока, высотой канала ячейки и параметрами процесса: проницаемостью, безразмерной проницаемостью и селективностью с использованием мембран типа УАМ-М. На основании описания процесса ультрафильтрации системой регрессионных уравнений решена задача оптимизации многопараметрового процесса.

Предложена методика расчета ультрафильтрационного аппарата непрерывного действия, работающего в режиме прямотока или противотока.

Практическая ценность. На основании проведенного комплекса систематических исследований предложен и внедрен метод ультрафильтрации в ХТС получения ферментов липазы на стадии их выделения.

Применение разработанного метода оптимизации многопарамет-ровой системы дает возможность высокой оперативности решения подобных задач в производственных условиях.

Разработана методика технологического расчета ультрафильтрационного аппарата непрерывного действия исходя из данных,полученных при испытании аппарата лабораторного масштаба.

Структура диссертации

В первой главе приведен анализ литературных данных,характеризующих ультрафильтрационные мембраны. Рассмотрены основные технологические факторы и показана степень их влияния на процесс ультрафильтрации, применительно к выделению различных ферментов. Приведены методы расчета коэффициента массопередачи с использованием критериальных уравнений.

Во второй главе описаны свойства исследованных мембран и растворов. Представлена методика проводимых исследований, определены погрешности опытов. Описан используемый метод оптимизации процесса ультрафильтрации.

1 третьей главе рассмотрены факторы, влияющие на параметры процесса ультрафильтрации. Определены независимые факторы и показано комплексное их влияние на исследуемые параметры. Проведена оптимизация ультрафильтрационного концентрирования грибной и дрожжевой липазы.

В четвертой главе предложена ХТС получения ферментов липазы с использованием ультрафильтрации на стадии их выделения.Разработана методика расчета ультрафильтрационного аппарата непрерывного действия, работающего в режиме прямотока или противотока.

Результаты работы доложены:

1. Щербак В.Э., Корольков Н.М., Аре Р.Ю. Исследование процесса очистки ферментов от низкомолекулярных примесей методом ультрафильтрации. - Научно-техническая конференция преподавателей и сотрудников Новополоцкого политехнического института. Новополоцк, 24-26 мая 1979 г.

2. Щербак В.Э., Корольков Н.М. Концентрирование ферментов липазы и р -галактозидазы методом ультрафильтрации. - Первая Всесоюзная школа по обратному осмосу и ультрафильтрации. Улан-Удэ, 15-23 сентября 1980 г.

3. Исследование ультрафильтрационного метода концентрирования и очистки водорастворимой эмали В-ПЭ-П79 в промывных водах. -Научно-техническая конференция: "Применение прогрессивных антикоррозийных лакокрасочных и гальванических покрытий, техпроцессов и оборудования в производстве. Кишинев, 27-28 октября 1981 г.

4. Оптимизация пилотной мембранной ячейки проточного типа /В.Э. Щербак, Н.М.Корольков, И.О.Дрейер, Э.М.Гуревич. - Всесоюзный семинар-совещание молодых ученых. Иваново, 4-II марта 1982 г.

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ активность фермента в исходном растворе, фильтрате и концентрате, соответственно; К- константа, характеризующая проницаемость мембраны; КА,Кг- капзатраты по существующей и предполагаемой схемам,соответственно; П- потеря активности ферментов; В- годовая экономическая эффективность; "А - экономическая эффективность на единицу продукта;

Ч}"»- коэффициенты;

Аг- годовая производительность; коэффициенты регрессии в канонической форме; ) ^>1. ~ коэффициенты регрессионных уравнений; ширина канала; заданные числовые значения параметров; с*- текущая концентрация растворенного вещества; С - содержание сухих веществ; со,сч>»с\< ~ концентрация целевого продукта в исходном растворе, фильтрате и концентрате, соответственно;

С.Х- эксплуатационные расходы по существующей и предполагал 7 ^ емой схемам, соответственно; ^ннеГ -концентрация низкомолекулярных белков; Сп- концентрация низкомолекулярных примесей; средняя движущая сила процесса массопередачи; м - коэффициент диффузии в растворе, в гелевом слое и в порах, соответственно; 3)у- условный диаметр;

6- ориентировочный диаметр макромолекул белка; средний диаметр пор; эффективный диаметр пор; F - рабочая поверхность мембраны;

FT)F? - табличное и расчетное значение критерия Фишера; G - проницаемость;

G^ - оптимальное значение проницаемости; Ghxo - водопроницаемость; k/G^o- безразмерная проницаемость; ^улго ~ УДельная водопроницаемость; высота канала; К - число факторов; £ - текущая длина канала;

91 ь - геометрическим параметр; заданная длина канала; длина канала; шаг турбулизатора;

М- масса переносного вещества;

W - пористость мембраны;

- масса навески до и после сушки, соответственно;

Г\ - частота вращения мешалки; v - число каналов; к

AV - диффузионный критерий Нуссельта; дО - перепад давлений по толщине мембраны; Рл - избыточное давление над мембраной; Рг- избыточное давление под мембраной;

А?цго АРцго ~ давлеши, определяющие область критического значения ; Рс- противодавление, оказываемое стоку растворителя; - диффузионный критерий Прандтля; с^ - кратность циркуляции раствора; Й - степень ультрафильтрационной проницаемости; у ~ суммарное и составляющие сопротивления массопереносу при ультрафильтрации; - средний радиус пор;

- критерий Рейнольдса;

•>- абсолютная погрешность для проницаемости и селективности, соответственно; "к - температура; °бъем исходного раствора, фильтрата и концентрата, соответственно; объемный расход исходного раствора; фильтрата и концентрата, соответственно; •\х>д ,^¡рТ^^Г СК0Р0СТЬ потока раствора над мембраной, в гелевом слое, под мембраной и в порах, соответственно; V;. - канонические переменные; - параметры оптимизации;

- коэффициент маесопередачи; рл - коэффициент массоотдачи; р^ - доверительный интервал;

- погрешность измерения;

§ - длина поры, приравненная к толщине мембраны; £ - нормативный коэффициент эффективности капвложений;

- относительная погрешность для проницаемости и селективности, соответственно; ул - вязкость раствора; д^ПГ- разность осмотического давления в растворе над и под мембраной;

Ъ- коэффициент поверхностного натяжения; ^- время; селективность;

- оптимальное значение селективности; ВСМ - высоко-селективная мембрана; ММ - молекулярная масса; НСМ - низко-селективная мембрана; ФЗП - фонд заработной платы; ХТС - химико-технологическая система.

1. Дытнерский Ю.И. Мембранные процессы разделения жидких смесей.-М.: Химия, 1975. - 232 с.

2. Дытнерский Ю.И. Обратный осмос и ультрафильтрация. М.: Химия, 1978. - 352 с.

3. Saier H.-D. Membrantechnik Moglichlceiten und Anwendungen.asser und Boden, 1980, N 9, S. 418-424.

4. Хванг С.-T., Каммермейер К. Мембранные процессы разделения.1. М.: Химия, 1981. 464 с.

5. Vos K.D., Hatcher А.P., Merten U. Lifetime of Cellulose Acetate Reverse Osmosis Membranes. Ind.Eng.Ch.em.Prod.Res. Develop., 1966, v.5, N 3, p.211-218.6.'Технологические процессы с применением мембран / Под ред. 10.А. Мазитова. М.: Мир, 1976. - 372 с.

6. Карелин Ф.Н. Граница между ультра- и гиперфильтрацией. В кн.: Мембранная технология - новое направление в науке и технике: Тез.докл. II Всесоюзн.конф. по мембранным методам разделения смесей. Владимир, 1977, с.42-44.

7. Мембраны с повышенной гидравлической проницаемостью для целей гемодиализа и гемофильтрации / Н.А.Венгерова, Б.С.Эльцефон, Т.М.Селина и др. Тез.докл.третьей Всесоюзн.конф. по мембранным методам разделения смесей. Черкассы, 1981, ч.1, с.137-140.

8. Исследование некоторых свойств липазы Gandida paralipolitica 739 / Р.Ю.Аре, Б.Я.Лусиня, М.Х.Плота и др. В кн.:Техноло-гия микробного синтеза. Рига: Зинатне, 1978, с.85-90.

9. Giddings J.G., lang J.J., Myers M.N. The Plow Field Flow Fractionation Channel as a Versatile Pressure Dialysis and Ultrafiltration Cell. - Separation Science, 1977, 12 (5), p. 499-510.

10. Гребенюк В.Д. Электродиализ. Киев: Техщка, 1976. - 160 с.

11. Исследование процесса электродиализа растворов тринатриевой соли лимонной кислоты / Я.К.Лемба, А.Г.Полманис, H.М.Корольков и др. В кн.: Процессы и аппараты химической технологии. Рига: Рижск.политехн.ин-т, 1981, с.48-53.

12. Schauermann Е.А. Stofftrennung mit Membranen. Chem.Production, 1980, Bd. 9, H.51 S.24-27, 32-3315. Horvath G. Membraneljarasok. - Magy.Kem.lapja, 1980, v.35,1. N 9, p. 476-480.

13. Николаев H.И. Физико-химические основы разделения смесей спомощью мембран. Хим.пром-сть, 1979, I 12, с.25-28.

14. Владимир, 1977, с.104-105.

15. Ультрафильтрация биопрепаратов с использованием полупроницаемых мембран Л/ -винилпирролидона с метилметакрилатом / Т.Н. Рожанская, Н.А.Марголина, А.А.Селезнева и др. Коллоидн.ж., 1974, т.36, Jf 6, с.1206-1208.

16. Полупроницаемые мембраны "Владипор" для концентрирования и очистки биопрепаратов: Методические рекомендации. Черкассы, 1979. - 30 с.

17. Богданов А.П., Гумен Р.Г., Солдадзе К.М. Получение мембран из растворов поликарбоната в N -метилпирролидоне. Пласт, массы, 1979, В 3, с.56-58.

18. Целлюлозоацетатные мембраны для ультрафильтрации биополимеров / Л.В.Воробьев, Л.А.Сырцова, Р.И.Гвоздев и др. Прикл. биохим. и микробиол., 1974, т.Х, вып.4, с.631-632.

19. Проницаемость ацетилцеллюлозных ультрафильтрационных мембран по отношению к биологически активным веществам / Т.И.Рожанская, Н.А.Марголина, Г.М.Подсухина и др. Прикл.биохим. и микробиол., 1976, т.XII, вып.2, с.287-290.

20. Мембраны на основе ароматических полиамидов. Пласт.массы, 1980, Л II, с.60.

21. Мембраны из поли- j* -фениленизофталамида для фильтрации жидких сред / И.Г.Рубан, О.И.Начинкин, В.Г.Заморянекая и др. -Пласт.массы, 1979, П 4, с.50-51.

22. Анизотропные мембраны на основе Ф-2М / О.И.Начинкин, Т.Г.Шубина, И.Г.Рубан и др. Пласт.массы, 1979, Ji 4, с.51-52.

23. Начинкин О.И. Механизм образования капиллярно-пористой структуры полимерных мембран. Пласт.массы, 1979, № 10, с.25-27.

24. Получение пористых полимерных мембран на различных подложках / О.И.Начинкин, И.Г.Рубан, А.Г.Дудорова и др. Пласт, массы, 1981, П 6, с.36-37.

25. Начинкин О.И. О механизме образования капиллярно-пористойструктуры мембран. Тез.докл.третьей Всесоюзн.конф. по мембранным методам разделения смесей. Черкассы, 1981, ч.1, с. 99-100.

26. Волгин В.Д. О причине зависимости скорости фильтрации жидкостей через полимерные мембраны от направления потока. -Теор. основы хим.технол., 1975, т.IX, Л 5, с.790-793.

27. Amicon Ultrafiltration. Catalog. Publication N 426.

28. Millipore Catalog and Purchasing Guide. Cat .No MC 179/U. -Badford, Millipore Corporation, 1978. 127 p.

29. Filtration.Nuclepore Filtration Products for the Laboratory: Catalog Lab.50 / ITuclepore Corporation.- 1980. 87 p.

30. Лабораторное фильтрование. Микробиология. Электрофорез. Sartorius Catalog, I981. 129 с.

31. Аксенова A.P., Шишова И.И. Ацетатцеллюлозные полупроницаемые мембраны. Пласт.массы, 1980, Л II, с.45-46.

32. Использование ультрафильтрации в процессе получения высоко-очищенной нейтральной протеиназы Bac.subtilis 103 / Э.А. Шишкова, Т.Я.Рафаловская, Н.Б.Попова и др. Микробиол.пром-сть, 1978, Л 4, с.7-9.

33. Дубяга В.П., Перепечкин Л.П., Каталевский Е.Е. Полимерные мембраны. М.: Химия, 1981. - 232 с.

34. Ермолаев Е.Д. Исследование и разработка ультрафильтрации в технологии биохимических препаратов: Автореф.дис. на соискание уч.ст.канд.техн.наук. Рига, 1979. - 24 с.

35. Концентрирование ферментных растворов методом ультрафильтрации / Л.И.Орещенко, Э.А.Шишкова, С.С.Фокина и др. Тез.докл. симпозиума "Биотехнология и биоинженерия", Рига: Зинатне, 1978, т.2, с.12-13.

36. Полое волокно для ультрафильтрации / А.П.Борщев, Г.А.Будницкий, Л.П.Перепечкин и др. Тез.докл.третьей Всесоюзн.конф. по мембранным методам разделения смесей. Черкассы, 1981, ч.1, с.155-156.

37. Ультрафильтрационное полое волокно из полифениленфталамида / Л.П.Перепечкин, А.П.Борщев, Г.А.Будницкий и др. Тез.докл. третьей Всесоюзн.конф. по мембранным методам разделения смесей. Черкассы, 1981, ч.1, с.156-159.

38. Конструкция разделительных аппаратов с полыми волокнами /

39. A.M.Голубев, Ф.Я.Шмидель, Н.И.Жегалова и др. Хим.волокна, 1981, В I, с.46.

40. Michaels A.S. New Separation Technique for the GPI. Chem. Eng.Progr., 1968, v. 64, H 12, p.^1-43.

41. Перепечкин Л.П., Дубяга В.П., Шабалтий Г.М. Ультрафильтры из ацетатов целлюлозы. Пласт.массы, 1972, Л 9, с.36-37.

42. Richter В., Voigt R. Methoden zur Standardisierung poröser künstlicher Membranen. Pharmacie, 1974, 29, H.l, S.3-H.

43. Versuche zur Ultrafiltration mit Celluloseacetatmembranen / H.-H.Schwarz, H.-G.Hicke, D.Paul u.a. Chem.Iechn., 1977» 29.Jg., H.10, S.^48-552.

44. Очистка и концентрирование белковых растворов с помощью полупроницаемых мембран из ацетатов целлюлозы / JI.П.Перепечкин, В.П.Дубяга, А.А.Эльберт и др. Прикл.биохим. и микро-биол., 1972, т.УШ, вып.6, с.973-977.

45. Shen J.J.S., Probstein R.F. Turbulence Promotion and Hydrody-namic Optimization in an Ultrafiltration Process. Ind.Eng. Chem.,Process Des.Develop, 1979, v.18, К 3, p.547~554.

46. Friedrich E.,Tietze R. Beeinflussung und Vorausbestimmung der Ultrafiltration.- Chem.Techn.,1974, 26.Jg.,H.11, S.688-691.

47. Алексеева В.В., Калунянц К.А. Применение ультрафильтрации для концентрирования ферментативного комплекса Bac.subtilis 103.- Ферментн. и спирт, пром-сть, 1977, J8 4, с.28-30.

48. Концентрирование культуральной жидкости методом ультрафильтрации / В.Л.Яровенко, Т.С.Хаханова, Н.И.Белов и др.- Ферментн. и спирт, пром-сть, 1972, JS 6, с. 14-16.

49. Концентрирование биологически активных веществ ультрафильтрационным методом / Г.В.Самсонов, Т.И.Рожанская, Б.В.Моск-вичев и др. Микробиол. пром-сть, 1973, 2(98), с.15-17.

50. Концентрирование трипсина ультрафильтрационным методом /Н.А. Марголина, Т.И.Рожанская, Б.В.Москичев и др. Прикл.биохим. и микробиол., 1975, т.XI, вып.4, с.601-603.

51. Красильников В.Н., Шрагин JI.M., Константинова О.В. Изучение процесса ультрафильтрации растворов белков из семян подсолнечника на поливинилпирролидоновых мембранах. Труды ВНИИжи-ров, 1977, вып. XXXIII, с.56-60.

52. Balfanz .?., Hirsch. S. Ultrafiltration von ос -Amylase im kleintechnischen Ma stab. Chem.Teclm., 1981, 33.Jg.,N 11, S.569-572.

53. Ape Р.Ю., Репелис И.А. Возможности применения процесса ультрафильтрации при выделении микробной липазы: Тез.докл.симпозиума "Биотехнология и биойнженерия". Рига: Зинатне:1978, т.2, с.12-13.

54. Концентрирование и очистка растворов "родэксмана" методом ультрафильтрации / А.В.Бильдюкевич, Ф.Н.Калуцкий, Д.Д.Грин-шпан и др. Тез.докл.третьей Всесоюзн.конф. по мембранным методам разделения смесей. Владимир, 1981, ч.П, с.210-212.

55. Николаев Н.И. Диффузия в мембранах. М.: Химия, 1980. -232 с.

56. Яскович Г.А., Кацхова И.Е., Воробьева В.Я. Исследование влияния некоторых факторов на процесс ультрафильтрации белковых растворов. Прикл.биохим. и микробиол., 1976, т. XII, вып. 2, с.283-286.

57. Optimierung der Реinfiltration mit Hilfe von Membranfiltern/ N.S.Snegirjova, A.I.Wontschuk, L.A.Steinberg u.a. Chem. Techn., 1977, 29.Jg., H.ll, S.631-632.

58. Spina N., Naggi Р., Apresella W. Trattamento per ultrafil-trazione di emulsioni contenenti oli di ensimaggio. -Inquinamento, 1978, N 1, p.39-44-.

59. Рубан E.JI. Микробные липазы и липиды. М.: Наука, 1977.218 с.

60. Брокерхоф X., Дженсен Р. Липолитические ферменты.- М.: Мир, 1978. 399 с.

61. Davies А. Боше Factors Affecting Lactase Formation and Activity in 3. fragilis. J. Gen. Microbiol., 1965, N 14, p. 425-429.

62. Макаров Г.П. Исследование ультрафильтрационного метода очистки лакокрасочных материалов: Автореф. дис. на соискание ученой степени канд.техн.наук. Рига, 1978. - 24 с.

63. Очистка поверхностных природных вод на ультрафильтрационной установке / А.А.Заборский, Г.М.Колосова, Я.Д.Рапопорт и др. Химия и технология воды, 1980, т.2, If 3, с.257-259.

64. К вопросу повышения концентрации красящих веществ в пищевом красителе из бузины / З.К.Чхеидзе, Н.И.Белов, В.В.Яровенко и др.- Ферменты, и спирт, пром-сть, 1974, I 3, с.35-37.

65. Хаханова Т.С., Белов Н.И. Исследование инактивации ферментов при ультрафильтрации. В кн.: Мембранная технология - новое направление в науке и технике: Тез.докл. II Всесоюзн. конф. по мембранным методам разделения смесей. Владимир, 1977, с. 424-426.

66. Применение ультрафильтрации для выделения препаратов микробной каталазы и ее характеристика / Е.Д.Ермолаев,А.М.Ирген, Л.Л.Яворковская и др. В кн.: Микробиологические препараты. Рига: Зинатне, 1976, с.157-160.

67. Fone A.G. Recent Advances in Ultrafiltration. Process and

68. Chemical Eng., 1980, v.33, N 4, p.13, 15, 17, 19.

69. Алексеева B.B., Калунянц K.A. Способ промышленного получения высокоочищенного препарата нейтральной протеазы: Тез.докл. симпозиума "Биотехнология и биоинженерия". Рига: Зинатне, 1978, т.2, с.10.

70. Ежов В.Е., Приходько А.Г. Применение ультрафильтрации для концентрирования и очистки кислой рибонуклеазы. Микробиол. пром-сть, 1977, Л 2, с.16-19.

71. Helling J., Westmacott D. The Influence of pH Value and Ionic Strength on the Ultrafiltration Characteristics of a Penicillinase Produced by Escherichia coli Strains W 3310.-J.Appl.Chem.Biot., 1972, N 22, p.951-958.

72. Фишман Г.И., Певзнер И.Д., Кузьмицкая Н.Е. Очистка сточных вод в промышленности пластических масс. Пласт.массы,1980, I 4, с.57-60.

73. Инактивация ферментов аминолитического комплекса в процессе ультрафильтрации / И.М.Грачева, В.В.Яровенко, В.А.Ларин и др. Микробиол. пром-сть, 1976, J£ 4, с.20-22.

74. Murkes J, Umgekehrte Osmose und Ultrafiltration ein Uberblick Uber die auf diesem Gebiet verfUgbaren apparativen HiltsmittelChem.Techn.,1973, 25.Jg., N 10, S.601-604.

75. Dejmek P. Eine Versuchsanlage für Membranprozesse. Chem. Trchn., 1974, 26.Jg., H.6, S.352-354.

76. Старов B.M., Чураев H.B. Влияние структурной неоднородности обратноосмотической мембраны на ее селективные свойства. -Коллоидн.ж., 1981, т. XLIII , № 4, с.698-703.

77. Мартынов Г.А., Старов Б.М., Чураев Н.Е. К теории мембранного разделения растворов. Коллоидн.ж., 1980, т. XIII, Ji 3, с.489-499.

78. Sonin A.A, Isaacson M.S. Optimization of Plow Design in Forced Flow Electrochemical Systems, with Special Application to Electrodialysis. Ind.Eng.Chem.Process Des.Develop., 1974-, v.13, N 3, p.24-1-248.

79. Kozinski A.A., Lightfoot E.N. Ultrafiltration of Proteins in Stagnation Flow.-AIChE J., 1971,v.17, N 1,p.81-85.

80. Ape Р.Ю., Виестурс У.Э. Получение микробных метаболитов: Обзор. М.: ОНТИТЭИмикробиопром, 1979. - 72 с.

81. Зимнухова Е.С. Ферменты медицинского назначения. М.: Медицина, 1975, с.63-68.

82. Платонов А.В., Дорохов В.В. Технология получения неочищенного ферментного препарата гемицеллюлазы. Микробиол.пром-сть, 1976, Л. 2(133), с.22-24.

83. Веселов И.Я., Воронов В.И., Ильина О.П. Получение ферментного комплекса гриба Aspergillus Oryzae SF-j^ . Микробиол. пом-сть, 1973, ji 7(103), с.22-25.

84. Грачева И.М. Технология ферментных препаратов. М.: Пищевая пром-сть, 1975. - 392 с.

85. Лосякова Л.С., Мушникова Л.Н., Мишина З.Н. Применение фракционного высаливания сернокислым аммонием для разделения ферментного комплекса, образуемого грибом Aspergillus Awa-mori 16. Микробиол. пром-сть, 1973, № 8(104), с.28-31.

86. Самсонов Г.В. Ионный обмен. Сорбция органических веществ. -Л.: Наука, 1969. 335 с.

87. Лурье А.А. Сорбенты и хроматографические носители. М.: Химия, 1972. - 320 с.

88. Тенфорд Ч. Физическая химия полимеров. М.: Химия, 1965.772 с.

89. Dabrivoje V., Marinkovic J.N., Tang J. Fragments of Jl-ga.-lactosidase from Esmerichia coli Fragmentation, Purification, Characterization and in vitro Complementation. Preparative Bioch., 1975, v.5, N 3, p.257-280.

90. Poznanski S., Eawalewska I., Bednarski V/. -galaktozida-za, otrrymywanic, wlasciwosti i zastosowanie w tehnologii sywnaski• Post.Biochem., 1975, N 21, S.437-443.

91. Szabo G., Davies R. Studies on the J3-Galactosidase Acti-ving of Saccharomyces fragilis. J.Gen.Microbiol., 1964,1. N 37, p.99-112.

92. Тихомирова А.С., Куликова А.К., Фениксова P.E. 0 лабильности растворов Jb -галактозидазы Saccharomyces fragilis. -Прикл.биохим. и микробиол., 1971, т.УП, вып.2, с.155-158.

93. Абраме И.А. Математическая обработка результатов измерений. Рига: Рижск.политехи.ин-т, 1980. - 48 с.

94. Хартман К., Лецкий Э., Шефер В. Планирование экспериментав исследовании технологических процессов. М.: Мир, 1977.552 с.

95. Бондарь А.Г., Статюка Г.А. Планирование эксперимента в химической технологии. Киев: Вища школа, 1976. - 184 с.

96. Спиридонов A.A. Планирование эксперимента при исследовании технологических процессов,- М.¡Машиностроение,1981. 184 с.

97. Джонсон Н., Лион Ф. Статистика и планирование эксперимента в технике и науке. М.: Мир, 1981. - 520 с.

98. Бояринов А.И., Кафаров Б.Б. Методы оптимизации в химической технологии. М.: Химия, 1975. 576 с.

99. Исследование некоторых закономерностей процесса ультрафильтрации растворов белков / Т.И.Рожанская, Н.А.Марголина,Э.Е. Возная и др. Хим.фарм.журнал, 1981,т.ХУ, 12, с.75-79.

100. Орлов Н.С. Исследование и оптимизация массообмена в ультрафильтрации.- В кн.: Мембранные процессы разделения жидкихи газовых смесей (Межвузовский сборник): Труды Московского хим.-техн.инст. им.Д.И.Менделеева, вып. 122. М., МХТИ, 1982, с.47-63.

101. Ахназарова С.Л., Кафаров В.В. Оптимизация эксперимента в химии и химической технологии.- М.: Высшая школа, 1978.-318 с.

102. Изучение проницаемости ультрафильтрационных мембран по отношению к биологически активным веществам на установках различного типа / Б.В.Москвичев, Т.И.Рожанская, Л.В.Дмитренкои др.- Микробиол.пром-сть, 1973, 9(105),с. 24-26.

103. Лабораторный технологический регламент на производство липо-литического препарата Липолитин ГЗх— Рига: Институт микробиологии им.А.Кирхенштейна АН Латв.ССР, 1982.

104. Глазунова Л.М., Гончаров Ю.И., Минина B.C. Липазы микроорганизмов. Обзорная информация. Серия У. Получение и применение ферментов, витаминов, аминокислот, премиксов.- М.: ОНТИТЭИ микробиопром, 1984. 36 с.