автореферат диссертации по технологии продовольственных продуктов, 05.18.07, диссертация на тему:Научное обоснование применения бактерий-антагонистов при длительном холодильном хранении корнеплодов моркови

Введение.

1. Состояние проблемы по применению биологических средств защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов.

1.1 Антагонистическая активность микроорганизмов.

1.2 Антимикробные свойства бактерий рода Bacillus.

1.3 Взаимодействие растения и патогенных микроорганизмов.

1.4 Применение биопрепаратов для защиты растительной продукции от фитопатогенов.

2. Объекты и методы исследования. Постановка эксперимента.

2.1. Объекты исследования.

2.1.1. Объекты микробиологического исследования.

2.1.2. Объекты физиолого-биохимического исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Методы микробиологических исследований.,.

2.2.2. Методы фи шо лого-биохимических исследований.

2.3. Постановка эксперимента. .,.

3. Исследование антагонистической активности бактерий.

3.1. Антагонистическая активности культур in vitro.

3.2 Антагонистическая активность культур in vivo.

3.3 Влияние совместного выращивания культур антагонистов и фитопатогенов на рост гриба Fusarium solani.

3.4. Изменение количества микроорганизмов на поверхности корнеплодов моркови при холодильном хранении.

3.5. Влияние КЖ бактерий-антагонистов на прорастание семян моркови.

4. Исследование влияния биологических средств на защитные механизмы и физиологическое состояние моркови.

4.1 Фитоалексины. . ■ ■

4.2. Фспольные соединения.

4.3 Углеводы.

4.3.1 Моно- и дисахариды.

4.3.2 Пектиновые вещества.

4.4 ^-каротин.

4.5 Активность терминальных оксидаз.

4.6 Интенсивность дыхания.

4.7 Товароведные и фитопатологические показатели качества.

4.8 Экономическая эффективность.

Выводы.

Актуальность темы.

Морковь по содержанию биологически активных веществ и пищевых волокон относится к числу наиболее ценных овощных культур. Однако, ее сохранение в свежем виде от урожая до урожая представляет определенные трудности, связанные с поражением корнеплодов фитопатогенными микроорганизмами, вызывающимим значительные поражения моркови даже при холодильном хранении.

В настоящее время, ведущее место в защите плодов и овощей от фитопа-тогенов при выращивании и хранении занимает химический метод. Однако, глобальное использование химических средств защиты приводит к ряду отрицательных последствий - нарушениям структуры биоценозов, снижению их способности к саморегуляции, накоплению пестицидов в почве, воде, и продуктах питания. Кроме того, возрастает устойчивость к ним в популяциях вредителей и возбудителей болезней, снижающих эффективность их применения.

Анализ отечественной и зарубежной научно-технической литературы показал, что биологический контроль может успешно конкурировать с химическими средствами защиты, не обладая в то же время их недостатками. Биометод также обладает значительным преимуществом в плане экономии материалов, энергии и использования возобновляемых ресурсов. Сравнительно новым направлением в развитии биоконтроля является применение биопрепаратов на основе активных штаммов антагонистов при хранении растительной продукции.

В нашей стране проводились исследования по применению биологических средств защиты от инфекционных заболеваний при выращивании и хранении картофеля, белокочанной капусты, яблок, земляники, косточковых плодов, а также зерновых культур. 5

Однако сведения о составе и свойствах антагонистов патогенных заболеваний моркови и их влиянии на качество, сохраняемость и защитные механизмы корнеплодов при длительном холодильном хранении ограничены. Как показывает опыт, огромное количество выращиваемой моркови в настоящее время уже изначально инфицировано и требует дополнительных мер защиты при хранении. Таким образом, проблема снижения потерь моркови от микробиальной порчи, повышения защитных механизмов, а также максимального сохранения качества и пищевой ценности корнеплодов с помощью применения искусственного холода и биологических средств защиты является актуальной и имеет важное научное и практическое значение.

Цель работы - научно обосновать применение бактерий-антагонистов при длительном холодильном хранении корнеплодов моркови.

В основу рабочей гипотезы положено предположение о возможности применения бактерий-антагонистов родов Bacillus и Pseudomonas различных видов и штаммов для повышения защитных механизмов корнеплодов при длительном холодильном хранении. Для проверки рабочей гипотезы и достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- исследовать микоцидные и микостатическис свойства бактерий-антагонистов по отношению к основным возбудителям инфекционных заболеваний моркови - грибам родов Botrytis, Alternaria, Sclerotinia и других in vitro и in vivo;

- изучить влияние продуктов метаболизма бактерий-антагонистов на физиологическое состояние корнеплодов при холодильном хранении;

- исследовать динамику накопления фитоалексинов в моркови под действием пониженных температур, бактерий-антагонистов и фитопато-генных грибов;

- изучить влияние биологических средств на содержание фенольных соединений при холодильном хранении корнеплодов;

- исследовать активность терминальных оксидаз; б

- изучить изменение содержания каротиноидов моркови;

- исследовать динамику моно-. дисахаридов и пектиновых веществ;

- по комплексу фитопатологических, физико-химических и биохимических показателей выбрать высокоэффективные штаммы бактерий-антагонистов;

- разработать технологическую инструкцию по производству и длительному хранению моркови с применением биологических средств защиты.

Научная новизна.

Установлена ашифунгалышя активность культур бактерий-антагонистов в отношении основных возбудителей инфекционных заболеваний моркови при длительном холодильном хранении.

Показано, что бактерии-антагонисты Bacillus subtilis штамм 413 не являются индуктором фитоалексинов моркови, однако способны ускорять синтез 6-метоксимеллеина при инфицировании корнеплодов грибом Alter-naria alternata.

Экспериментально получены математические модели, характеризующие зависимость изменения содержания фенольных соединений и активности ферментов-оксидаз в корнеплодах, обработанных кулыуральной жидкостью (ОС), от продолжительности хранения.

Установлена зависимость изменения количества моно-, дисахаридов и пектиновых веществ моркови при холодильном хранении от концентрации IOK бак I ерий-ан тагонистов.

Выявлена способность бактерий-антагонистов активизировать защитные механизмы корнеплодов при холодильном хранении.

По комплексу микробиологических и физиолого-биохимических показателей качества научно обосновано применение бактерий-антагонистов 7

Bacillus subtilis штамм 413 для снижения потерь моркови от инфекционных заболеваний при длительном холодильном хранении.

Практическая ценность.

Выявлены эффективные штаммы бактерий-антагонистов, рекомендованные для приготовления биопрепаратов для защиты моркови от поражения микробиологическими заболеваниями при длительном холодильном хранении.

Разработана технологическая инструкция по производству и длительному хранению моркови на основе применения биологических средств защиты ТИ 9732-007-11158098-01.

Экономический эффект от применения биологических средств защиты при хранении моркови составил 200 - 785 руб. т, в зависимости от вида обработки и сорта моркови.

Апробация работы

Основные результаты исследований доложены на научно-технической конференции профессорско-преподавательского состава СПГУНПТ (СПб 1999г.); Всероссийской 1гаучно-техн ической конференции "Прогрессивные технологии и оборудование пищевых производств" (СПб МАХ 1999г.); научной сессии "Проблемы развития и научное обеспечение АПК северных регионов России" (Архангельск, 1999г.); международной научно-практической конференции "Техническое переоснащение пищевой и перерабатывающей промышленности Северо-Западного региона РФ. Межрегиональные связи" (СПГУНПТ, 2000г.); международной научно-технической конференции, посвященной 70-летию СПГУНПТ (СПГУНПТ, 2001г.).

Публикации. Основной материал диссертационной работы опубликован в 7 работах.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы и приложений.

112 Выводы

1. Выявлены антагонистические свойства исследуемых бактериальных культур и их метаболитов в отношении основных возбудителей заболеваний моркови. Выбраны высокоэффективные бактерии-антагонисты Bacillus subtilis штамм 413.

2. Установлено влияние обработки биопрепаратами на биосинтез фитоалексинов, фенольных соединений, пектиновых веществ, на активность фер-ментов-оксидаз корнеплодов моркови при холодильном хранении. Показано, что бактерии-антагонисты и их метаболиты повышают защитные механизмы корнеплодов, снижая тем самым потери от инфекционных заболеваний при хранении.

3. Выявлено, что бактерии-антагонисты Bacillus subtilis штамм 413 не являются индукторами фитоалексинов моркови, однако способны ускорять синтез 6-метоксимеллеина при инфицировании. Определены константы скорости синтеза фитоалексинов в инфицированных тканях моркови. Получены эмпирические зависимости изменения фитоалексинной активности корнеплодов от продолжительности хранения.

4. Получены уравнения регрессии, характеризующие корреляцию между содержанием фенольных соединений и активностью ферментов фенолоксидазы и пероксидазы моркови, обработанной КЖ бактерий-антагонистов в различных концентрациях. Максимальное количество фенольных соединений образуется в корнеплодах, обработанных КЖ в концентрации 0,5* 108 кл/мл.

5. Выявлено снижение фенолоксидазной, пероксидазной и увеличение ката-лазной активности корнеплодов при обработке КЖ бактерий-антагонистов при холодильном хранении.

6. Показано, что применение биологических средств защиты способствует накоплению и лучшей сохраняемости [3-каротина в тканях моркови. Опре

113 делены константы скорости изменения содержания р-каротина в корнеплодах.

7. Установлена эмпирическая зависимость изменения содержания пектиновых веществ, моно- и дисахаридов моркови от продолжительности хранения. Показано, что при применении КЖ в концентрации 0,5*108 кл/мл ускоряется синтез пектиновых веществ в корнеплодах, являющихся барьером для патогенных микроорганизмов, а также сохраняется наибольшее количество моно- и дисахаридов при холодильном хранении.

8. Показано, что обработка моркови КЖ бактерий-антагонистов не вызывает нарушений в цепи биологического окисления незначительно снижая интенсивность дыхания в весенний период хранения, что позволяет максимально сохранить пищевые и биологически активные вещества корнеплодов.

9. Установлено, что обработка корнеплодов перед закладкой на хранение снижает микробиальную порчу в 1,6-4,0 раза в зависимости от концентрации КЖ и сорта моркови.

10.Разработана технологическая инструкция по производству и длительному хранению моркови на основе применения биологических средств защиты (ТИ 9732-007-11158098-01).

11.Экономическая эффективность применения биологических средств защиты составила 200 - 785 руб./т в зависимости от сорта моркови и вида обработки.

114

1. Амбулос Н., Арчибальд Р. и др. Бациллы. Генетика и биотехнология: Пер. с англ.Под ред. Харвуда К. М.: Мир.1992. - 531 е., ил.

2. Айзенман Б.Е. Антибиотические свойства бактерий.-Киев: Наукова думка, 1973-183 с.

3. Арасимович В.В. Изучение закономерностей изменчивости углеводов плодов и овощей и пути их использования. Кишинев, 1968,

4. Арасимович В.В., Балтага С.В., Понамарева П.П. Методы анализа пектиновых веществ, гемицеллюлоз и пектолитических ферментов в плодах. Кишинев. 1970.-84с.

5. Астанов Т., Наплекова Н.Н. Ауксины и ауксиноподобные вещества, синтезируемые целлюлозоразрушающими грибами. Образование физиологически активных веществ микроорганизмами. Новосибирск, "Наука", 1975.-С.70-73.

6. Африкян Э.К. Бактерии-антагонисты и их применение. Ереван: Изд-во АН Армянской ССР, 1959.-121 с.

7. Бейли Д.А., Консон Д.Т., Деверол Б.Д. и др. Фитоалексины /Под общ. Ред. Бейли Д.А., Мансфилда Д.В., Пер. с англ. Под ред. Гродзинского Д.М.— Киев: Наук. Думка, 1982.-320с.

8. Белимов А.А., Иванчиков А.Ю., Юднин Л.В. и др. Характеристика и интродукция новых штаммов ассоциативных ростстимулирующих бактерий, доминирующих в ризоплане проростков ячменя//Микробиология. 1999. Т.68. №3,- С.392-397.

9. Бельтюкова К.И., Матышевская М.С., Куликовская М.Д. Методы исследования возбудителей бактериальных болезней растений.-Киев: Урожай, 1968.-316 с.

10. Биохимия фенольных соединений. Под ред. Дж. Харборна, пер. с англ под ред. Н.М.Эмануэля.—М: Мир, 1968,-452с.

11. J 1 Т-' ^ j-1 Ч 1-Г 1Г Д шг 4 Л Q ^1 l.DpHiTOH i. оиохимия природных пигментов: пер. с англ. iv±.: ±viHp, 1УоЬ. -422 с.

12. Букин В.И. Биохимия витаминов. Избранные труды. -М.: Наука, 1982.-320с.

13. J З.ВасюковаН.И. Чаленко Г.И., Герасимова Н.Г. и др. Производные хитина и хитозана как элиситоры фитофтороустойчивости картофеля/УПрикл. Биохим. и микробиол., 2000, т.36, №4,- С.433-438

14. Веселов С. Ю., Иванова Т.Н., Симонян М.В., Мелентьев А.И. Исследование цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами// Прикл. биохимия и микробиология. 1998. Т.34. №2.-С. 175 179

15. Влахов С.С. Действие антибиотиков на возбудителей бактериозов// Растениеводство. 1974 г., т.11, № 9. -С. 123-129.

16. Воронкевич И.В. Антагонизм микроорганизмов в почве и перспективы его использования в борьбе с почвообитающими возбудителями болезней растений//Успехи современной биологии. 1958, т.46, вып. 2.- С.145-155.115

17. Г7.Гарагуля А.Д., Киприанова С.А., Бойка О.И. Антибиотичность бактерий рода Pseudomonas на фитопатогенные грибы// Микробиол. журнал.- 1974.т. 36,№2,-с. 197-202.

18. Гаузе Г.Ф. Пути изучения новых антибиотиков. М.: АН СССР, 1958.-172 с.

19. Гойман Э. Инфекционные болезни растений. М., изд-во Иностранной литературы, 1954,- 135с.

20. Головкин Н.А. Холодильная технология пищевых продуктов. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984.-240 с.

21. Голышин Н.М. Новые средства защиты растений от болезней// Защита растений 1992, вып.8,- С.50-54.

22. Горохов Г.А. Грибным препаратам промышленное производство: М.: Колос, 1993. Т.2.- С.16.

23. Гудима Л.Р. Защитные механизмы картофеля, обработанного культураль-ной жидкостью бактерий-антагонистов родов Pseudomonas и Mycobacterium, в лечебный период и при холодильном хранении: Автореф. Дис. канд. техн. наук. Спб, 1999. - 16с.

24. Гусев С.А., Меглицкий Л.В. Хранение картофеля. М.: Колос, 1982.-223 с.

25. Дорожкин Н.А., Новикова Л.М., Вельская С.И., Викторгин И.В. Антагонистические бактерии, перспективы для защиты картофеля от болезней// ДАН Беларусии. 1991, т.35, вып. 11,-С.1037-1038.

26. Егоров Н.Е. Микробы-антагонисты и биологические методы определения антибиотической активности. М.: Высшая школа, 1965, 211 с.

27. Ильинская Л.И., Чаленко Г.И., Переход Е.А. Влияние метилжасмоната на индуцирование фитофтороустойчивости с помощью арахидоновой кисло-ты//Прикл. Биохим. и микробиол., 2000, т.36, №2.- С.214-220.

28. Казачко И.А., Вьюницкая В.А., Бережницкая Т.Г. и др. Эндофитные бактерии рода Bacillus — перспективные культуры для создания биологиче116ских средств защиты растений от болезней// Микробиол. жури. 1975,- 57, №5,-С. 69-78

29. Керимов С.Ш. Кумарины Daucus carota// Химия природных соединений, 1983, №6, С.783.

30. Климнюк С.И., Смирнов В.В. Действие бактерий-антагонистов на аэробную микрофлору кожи человека'/ Микробиол. журн. 1997. - 59, №1. - С. 53-60.

31. Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия: Учеб. для хим., биол. и мед. спец. Вузов.-3-изд., испр. М,: Высш. шк., 1994. -479с.

32. Козловский А.Г., Соловьева Т.Ф. и др. Вторичные метаболиты новых почвенных штаммов микроскопических грибов родов Aspergyillius и Penicillium//Микробиология. 1990, т.59, вып.4.- С.601-608.

33. Колесова Д.А., Чмырь П.Г. Перспективные биопрепараты в садах/УЗащита и карантин растений. №6,- С.26-28.

34. Коломиец Э.И., Здор Н.А., Лобанок А.Г. и др. Некоторые аспекты фотозащитного действия Streptomyces flavescens антагониста фитопатогенных грибов/УПрикл. Биохимия и микробиология. 19997, т.ЗЗ, №5,- С.508-511.

35. Косинова Л.Ю. Влияние условий культивирования на синтез гетероаукси-на симбиотическими бактериями Carex enervis С.A.M. Образование физиологически активных веществ микроорганизмами. Новосибирск, "Наука", 1975.- С.78-81.

36. Кочетков В.В., Воронин A.M. Микробиологические средства защиты растений на основе PGPR Pseudomonas// Семин.-совещ. "Экологизация сельскохозяйственного производства Северо-Кавказского региона" 26-29 июля, 1991: Тез. докл.-М. 1995,- С.63-69.

37. Креслинь Д.Я. Изучение эффективности бактерий стимуляторов в зависимости от вида препарата. В.кн.: Микроорганизмы и растения, 5. Рига, 1972,- С.25-29

38. Культурная флора СССР, том XIX. Корнеплодные растения.//Под ред. П.М. Жуковского. Л.: "Колос", 1971.- 227с.117

39. Леонтьева Г.В., Чаленко Г.И. Медведева Т.Е., Валкжова II.И. Озерецков-ская О.Л. Подавление устойчивости картофеля иммуносупрессорами взбудителем фитофтороза// Прикладная биохимия и микробиология. 1989, т.25, вып.4. С,- 532-540.

40. Львов С.Д., Капустина Е.В. Физиология растений. Ученые записки ЛГУ. 1955,- 186 с.

41. Любимова Н.В. Процессы межклеточного узнавания и индуцирования устойчивости клубней картофеля к болезням Биохимия хранения картофеля, овощей и плодов М. Наука: 1990,- С.61-67

42. Любимова II.В., Салькова Е.Г. Лектин-углеводное взаимодействие во взаимоотношениях растение-патоген// Прикл. биохимия и микробиология. 1988, т.24, вып.5,- С.595-606.

43. Максимова И.П., Лысак В.В., Блажевич О.В., Фомичев Ю.К. Штаммы Pseudomonas putida М продуцент// Актуальные пробл.-соц.-гуманит. и ес-теств. наук. Минск, 1991,- С. 153-154.

44. Метлицкий Л.В. Основы биохимии плодов и овощей. М.: Экономика, 1976,-349 с.

45. Метлицкий Л.В., Кораблева Э.П. Биохимическая связь между функциями покоя и иммунитетом растений, в.кн.:Биохимия иммунитета и покоя растений. М.: Наука. 1969,- С. 3-21.

46. Методика определения экономической эффективности применения биологических средств защиты растений. М.: ВАСХИ, 1979,- 30с.

47. Методы биохимических исследований растений. Под. ред. Ермакова.-Л.:Колос, 1972.-371с.

48. Микостоп биологический препарат против корневых гнилей с.-х. куль-тур//Информационный бюл. ВНИИЭИ Агропрома. 1989. №55.- С.9

49. Мишустин Е.И., Емцев В.Т. Микробиология,- М.: Колос. 1978. 320 с.

50. Мотовилин А.А., Ибрагимов Т.З., Дымченко A.M. Эффективность Агата-25К на зерновых культурахУЗащита и карантин растений. 1999. №1. -С. 18

51. Муромцев Г.С., Черняева И.И. Использование микробиологических факторов для защиты растений от корневых инфекции//Вест. с./х. науки. 1988. №7. -С.29-35

52. Новикова И.И., Иващенко В.Г., Калько А.В. Испытание новых биопрепаратов в борьбе с фузариозом колоса/УМикология и фитопатология 1994. т.28, вып.1.- С.70-75

53. Огарков Б.Н. Комплексное применение микробиологических препаратов/Защита и карантин растений. 1999. №7,- С. 15-16.бЗ.Озерецковская О.Л., Васюкова Н.И. Новообразование фенолов в поврежденных тканях картофеля/ДАН СССР. 1965, т. 161, №4,- С. 968-970.118

54. Палилов Л.А., Палилова И.Г. В сб. Химико-технологическая характеристика плодов и овощей. М., Пищевая промышленность, 1960.-134с.

55. Папета Н.Ф. и др. Очистка и характеристика бактериального токсина, ин-гибирующего рост фитопатогенных грибов/7 Прикл. биохимия и микроби-логия. 1994, т.ЗО, вып. 4-5,- С. 593-596.

56. Пашкарь Н.С. Динамика полифенолов в процессе залечивания ран у картофеля// ДАН СССР. 1959, т. 124, N3,- С.-715.

57. Придагина Н.Н., Новогрудская Е.Д., Кругляк Е.Б., Чекасина Е.В., Корчак Т.С., Батраков С.Г. Azotobacter chzoococcum- продуцент нового противогрибкового антибиотика// Антибиотики. 1982, № 1,- С. 3-6.

58. Проценко М.А. Антагонистические свойства фитопатогенных грибов и их роль во взаимодействии с растениями-хозяевами// Усп. совр. биологии. 1984, г.98, вып.2,- С. 283-291.

59. Проценко М.А., Ладыженская Э.П. Выявление антигена, общего для возбудителя фитотфороза картофеля и растения-хозяина методом двойной иммунодиффузии в гене// Прикл. биохимия и микробиология. 1988, т.24, вып.5,- С. 692-698.

60. Рагожник Ф.А. автореферат на соиск. уч. ст. канд. техн. наук Исследование качества моркови при хранении в модифицированной газовой среде. Л-д, 1982,-24с.

61. Рекомендации по выращиванию и хранению моркови. Краснодар. 1987,-27с.

62. Родюнюк И.С. Выявление гиббереллина и гиббереллиноподобных веществ в продуктах метаболизма симбиотических бактерий вейника. Образование физиологически активных веществ микроорганизмами. Новосибирск, "Наука", 1975.-С. 103-109.

63. Родюнюк И.С., Косинова Л.Ю. Взаимное влияние симбиотических бактерий осоки безжилковой на синтез ауксинов. Образование физиологически активных веществ микроорганизмами. Новосибирск,"Наука", 1975, с. 7378.

64. Рубин Б.А, Ладыгина М.Е. Энзимология и биология дыхания растений. М. Высшая школа. 1966,- 288с.

65. Рубин Б.А., Арциховская Е.В. Физиология и биохимия иммунитета растений. М. Высшая школа. 1975,- 320с.

66. Рубин Б.А., Арциховская Е.В., Аксенова В.А. Биохимия и физиология иммунитета растений. Изд. 3-е, перераб. И доп. Учеб. Пособие для студентов биолог. Специальностей ун-тов. М,, "Высш. школа", 1975,- 320 с.

67. Самородова-Бианки Г.Б.? Стрельцина С.А. Исследование биологически активных веществ плодовых культур.- Л.: ВИР. 1989,- 82 с.119

68. Сапожникова Е.В. Пектиновые вещества и пектолитические ферменты. М. 1971, Биохимия т.5,- 140с.

69. Сейков Г.М. Грибы рода Trichoderma и их использование в практике. Алма-Ата.: Наука. Каз. ССР. 1982,-247 с.

70. Серебряная М.З., Бабенко Ю.С. Бактерии рода Achromobacter стимуляторы роста сельскохозяйственных растений/УВсесоюзн. конф. "Микроорганизмы- стимуляторы и ингибиторы роста растений и животных". Тез. докл. 4.2. Ташкент, 1989.-е. 178.

71. Система семенозаводства моркови для Северо-Запада РСФСР (Метод, указ.), под ред. Т.Я. Кочегурова, Ред.-изд. отд. ВИР, 1986.- 58 с.

72. Смирнов В.В. Эколого-таксонометрические и биотехнологические аспекты исследования бактерий и высших растений продуцентов биологически активных веществ//Микробиол. журн. 1998.-60. №5.-С. 3-18.

73. Смирнов В.В., Киприанова Е.А. Бактерии рода Pseudomonas.- Киев.: Нау-кова думка, 1990.-263 с.

74. Смирнов В.В., Киприанова Е.А., Буйко О.Н. Влияние ионов железа на ан-тифунгальную активность бактерий рода Pseudomonas/'/ Микробиол. журнал,- 1991. т.53., № З.-С. 80-86.

75. Смирнов В.В., Киприанова Е.А., Гарагуля А.Д. и др. Антибиотическая активность и седерофоры Pseudomonas cepacia/'/ Прикл. биохимия и микробиология. 1990. т.26. № 1.- С. 75-80.

76. Соколов М.С., Литвишко Е.Б. Биологическая защита растений в США// Защита растений,- 1993,- №11,- С. 18-20.

77. Соколова В.Е. О роли хлорогеновой кислоты и ее компонентов кофейной и хинной кислот в защитных реакциях клубней ппотив Phvtonhthora1. X V J. Xinfestans// Биохимия плодов и овощей,- М.: Наука. 1964,- С.36-55.

78. Соколова В.Е. Превращение хлорогеновой кислоты и устойчивость клубней картофеля к фитофторозу/У "Биохимия плодов и овощей" сб. 7. М. 1962.- С.96-114.

79. Сорокулова И.Б, Сравнительное изучение биологических свойств биоспо-рина и других коммерчески препаратов на основе бацилл^/ Микробиол. журн. 1997. - 59, №6. - С.43-49

80. Суховицкая Л.А. Выживаемость и ростстимулирующая активность внесенных в почву штаммов Bacillus megatherium и Agrobacterium radiobacter llpHKJi. Биохимимя и микробиология. 1998. Т.34. №1.- С.87-90120

81. Тодираш В. А., Паскарь Р.П., Буйминстру Л.М. Перспективные антагонисты для борьбы с послеуборочными гнилями// Науч.-прозв. совещ. 24-26 авг. 1994.: Тез. докл. 4.2,- Пущино, 1994,- с. 97.- Рус. ( РЖ Биология, 1995. № 1).

82. Тренина Г.А. Распространение споровых бактерий-антагонистов в различных почвах. Бюлл. МОИП, отд. биол., 1958.- 63с.

83. Третьяков А.П., Щербаков Г.Я., Стирманова Н.И. "Штамм микромицета Trichoderma lignorum для производства препаратов против фитопатоген-ных граибов" МКИ6 А01 63/04, №1/ 14. Патент РФ 2034468 10.05.95. Б.И. №13. -С. 12.

84. Тулемисова А.П., Чормонова Н.Т. Поиск актиномицетов-антагонистов возбудителей корневой гнили сахарной свеклы// Антибиотики и химоте-рапия. 1989. т.34. №11. -С.816-819.

85. Тулемисова К.А. Микробиологические методы защиты растений// Вестн. АН. Каз. ССР. 1990. №6. -С.29-36.

86. Федорова Л.В., Чумаковский Н.Н. Об ауксиновой активности метаболитов микроорганизмов из ризосферы и почв под крупнотравьем. Образование физиологически активных веществ микроорганизмами. Новосибирск, "Наука", 1975,-С. 81-88.

87. Филиппов М.П., Шконенко Г.А. Исследование экстракции пектиновых веществ из плодов растений// Прикл. бтхимия и микробиология. 1976. т.ХН. вып.2. С.203-205.

88. Хлопцева Р.И. Биологическая борьба с серой гнилью земляники// Защита растений. 1995. №4,- С.40.

89. Худяков Я.П. Литическое действие почвенных бактерий на паразитные грибы// Микробиология. 1935. т.4. №2.- С. 193-198.

90. Худяков Я.П.ДИкляр М.С., Савадеров Е.П. Антибиотик антифунгин, образуемый бактериями рода Pseudomonas//' Прикл. биохимия и микробиология. 1965. т.1. №12,- С. 186-190.

91. Цилосани Г.А., Пантелеев А.А. Действие микробов-антагонистов на фитопатогенные грибы// Защита растений от болезней. Тбилиси. 1987. -С.247-259.121

92. Чалова JI.И., Авдюшко С.А. Караваева К.А., Юрганова Л.А., Озерец-ковская О.Л. Активное начало индуктора защитных реакций картофеля// Прикл. биохимия и микробиология. 1988.т. 24, вып.6. -С.789-794.

93. Чигалейчик А.Г., Петрикевич С.Б., Горбунов О.П. Перспективные биопрепараты на овощных культурах Защи га и карантин растений. 1999. №7.- С.14-15

94. Чигалейчик А.Г., Пириева Д.А. Внеклеточная хитиназа Aeromanas liquefaciens// Прикл. биохимия и микробилогия. 1976. т. 12. вы п.2,- С. 231 -242.

95. Шапиро М.С., Трайнина Г.Г. Лабораторный контроль на предприятиях общественного питания.-М.: Пищевая промышленность. 1962.- 399 с.

96. Шарга Б.М. Микроорганизмы-антагонисты возбудителя бактериального ожога плодовых// Защита растений. 1991. вып. 10,- С. 15.

97. Шемякина Т.М., Вустин М.М. и др. Новые киллерные токсины, продуцируемые дрожжами Williopsis subsufficiens и Williopsis Beijerincki// Микробиология. 1981. т.60. вып.З,- С.501-506.

98. Шенин Ю.Д., Белахов В.В., Рожкова Н.Г. Фунгицидная активность им-брицила и его солей// Антибиотики и химиотерапия. 1996. т.41. №6.- С.21-24.

99. Шишкина Н.С. Хранение плодов и овощей в зонах производства. М.: Агропромиздат. 1991,- 126с.

100. Эффективность биологического метода защиты растений/ Под ред.

101. B.А. Черкасовой./ Кишинев: ВНИИ БМЗР, 1981. -127с.

102. Юрганова Л.А., Ногайделе Д.Е., Чаленко Г.И, Чалова Л.И., Озерецков-ская О.Л. Индуцирующая активность Fusarium culmorum Saee// Прикл. биохимия и микробилогия. т.25. вып.6. 1989,- С.805-810.

103. Юрина Т.П., Ушков A.M., Караваев В.А., Солнцев М.А. Влияние три-хотецина на процесс патогенеза у растений пшеницы, пораженных возбудителем стеблевой ржавчины// Физиология растений. 1989. т.36. вып.З.1. C.581-587.

104. Якимова М.Ф., Присахарь С.И. Апостолов С.Д. Бактерии- стимуляторы роста и развития растений Всесоюзная конф. "Микроорганизмы- стимуляторы и ингибиторы роста растений и животных". Тез. Докл. 4.2., ташкент- 1989.-С,-234.

105. Alba А.Р.С., De Vay Y.C. Detections of crossreactive antigens between Phytophthora infestans ( Mont) De Bary and Solanum species by indirect Enzyme-linked immunosorbent assay// Phytopathology Z. 1985. B112. H2. p.97-104.

106. Andrews J.M., Berbee F.M. et. al. Microbial antagonism to the infected122stage of the apple scaf pathogen Venturia indequalis/У Phytopathology, 1993.-73.-P.228-234.

107. Baker R., Elad I., Shen 13.-In: Iron Siderophores and Plant Diseases. Plenum Publ. Corp., 1986,- P.77-84.

108. Bhatt D.D., Vaughan E.K. Preliminary investigations on biological control of grey mould of strawberries// Plant Decease Rep. 962. 46. P.342-345.

109. Britton G., Goodwin T.W. (1981). Biosynthesis of carotenoids, Methods Enzymol., 180, 654.

110. Brown Y.E., McCornack M.A. Decease caused by Alternaria citri in Florida citrus fruit. Plant Dis. Rep., 1972.-57.-P.909-912.

111. Campbell R. Biological control of soil-borne diseases// Brighten crop prot. eon 17 Pests and Discuses. 1990. P.607-615.

112. Christensen D. Microorganisms used to fight fruit rot// Science News. 1994. Vol. 145.23. P.359.

113. Condon P., Kuc J. Isolation of a fungitoxic compound from carrot tissue inoculated with Ceratocystic fimbriata. Phytopathology, 1960, 50, p.267-270.

114. Cook J. Biological control of plant pathogens. Theory to application// Phytopathology. 1985.-75, l.-P.25-29.

115. De Vay J.E., Adler H.E. Antigens common to hosts and parasites// Ann. rev. microbial. 1976. V.30. P. 147-168.

116. Doneche В., Marcantoni G. Mise en evidence de Botrytis cinerea par des bacteries telluriques. Possibilite de controle biologique de la pourriture grise/7 Gr. Acad. sei. Sep.3.-1992.-314, №6.-C.297-283.

117. Dubos В., Jaillour F. et al. Employing antagonistis properties of Tricho-derma against B. cinerea in the protection of vineyards against grey mold/'/ Phytopathology. 1982.-10,- P. 134-137.

118. Ed J.A., Baily G. Biology and molecular biology of plant- pathology interactions./ Wit P.I.G.M.// Berlin: Springer.- Verlay. 1986. P. 149-170.

119. Falconi C., Menden K. Control of postharvest diseases of apple caused by Bacillus subtilis and Pseudomonas fluorescens with microorganisms// Mitt. Biol. Bundesanst. Land-und Forstwirt.-1992.-№283.-C.383.

120. Gaumann E., Kern Н/ Uber chemische Abwehrreaktionen bei Orchideen. -Phytopath, Z. 1959b, 36, p. 1-26.

121. Ghisalberty E.H., Chet I., Sivasithamparam K. Antifungal antibiotics pro123duced by Trichoderma Spp./7 Soil Biol Biochem. 1991. 11. P.l011-1020.

122. Glick В., Karaturovic D., Newell P.A. Novel procedure for rapid isolations of plant growth promotion Pseudomonas// Can. J. Microbiol. 1995. Vol.41. 6. P.533-536.

123. Gutterson N. Microbial fungicides: resent approaches to elucidating mechanisms//CRC Crit. Rev. Biotechnol. 1990, Vol.10. 1. P.69-91.

124. Havashida S. Choi., Nanri N., Jokojama M., Uematsu T. Control of common seal with an antibiotic biofertilizez produced for swine faeces containing Streptomyces albidoflavces/7 Arg. Biol. Chem. 1989. Vol.53. 2. P.349-354.

125. Hiura M. Studies in storage and rot of sweet potato. Sci. Rep. Gifu Agric. Coll. Jpn., 1943, 50, p.1-5.

126. Hofstein R., Fridlender B. Development of production, formulation and delivery systems// Crop. Prot. Conf. "Pests and Discuses" Nov. 21-24, 1994. Vol.3- Farnham, 1994,- P. 1273-1280.

127. Howell C., StipanovicR. Control of Rhizoctonia Solani on cotton seedlings with an antibiotic produced by the bacterium// Phytopathology. 1979. Vol.69. 5. P.480-482.

128. Janisiewich W.L. Biocontrol of postharvest diseases of apples with antagonist mixtures. Phytopathology. 1988. 78, 2: 194 198

129. Janisiewiez W.J. Postharvest Biological Control of Blue Mold on apples Phytopatology. 1987-77. 3. P.481-485.

130. Janisiewiez W.J., Roitman J. Biological Control of Blue Mold and Grey Mold in apple and pear with Pseudomonas cepacia. Phytopatology. 1988.-78. 16. P.1697-1700.

131. Janisiewiez W.J., Wilson C.L. Natural agents fight fruit spoilage. Agricalti-ral Research. 1990,-4. P.l5-17.

132. Kashyap U. Biological control of some fungal disease of tomatoes by phyl-losphere microorganism.// Ind. Mycol. Plant Pathol. 1978. Vol.8. 1.P.37.

133. Katz E., Demain A.L., The peptide antibiotics of Bacillus: Chemistry, biogenesis and possible function, Bacteriol. Rev.41: 1972, 449 474.

134. Klopper J.W., Schorth M.N. Effects of rhizoshere colonisation by plant growth- promotinyzhizobacteria on potato plant development and yield. Phytopathology. 1980.-70. P. 1078-1082.

135. Kobinata K., Kusakabe H. A new antibiotic, RK-699A./7 Antibiotics. 1989. Vol.42. 8. P.1312-1324.

136. Layaswal R.K., Fermandez M.A., Sehroeder R.G. Isolation and characterization of a Pseudomonas Strain that restricts growth of various phytopatholo-genic fungi.//Appl. Environ. Microbiol. 1990. Vol.56. P. 1053-1058.

137. Lim Т., Robrback K. Rote of Penicillium Funiculosum strains in the development of pineapple fruit diseases.//' Phytophatology. 1980. 70. P.663-665.

138. Lorito M., Hayes L,, Di P., Woo S,, Harman G. Purification, characterisation and synergistic activity of a glucan 1,3-B-glucosidase and an N-acetyl-B-glucosaminidase from Tricoderma harrianum.// Phytopathology. 1994. Vol.84. 4. P.398-405.

139. Lukin S.M., Simakov G.V., Morosov A.M. The effectiveness of preparations of associative nitrogen- fixing bacteria on potato./'/ 10th Inter. Cong, on Nitrogen Fixation. May 28-jime 3. 1995.- Dordrescht, Boston, London. 1995.-P.768.

140. Manibhushan K., Srenivasap-rusad S., Baby U., Joe I. Susuptibility of rice sheath bleght pathogen to my coparaites./ Curr. Sci. (India) 1984. Vol.58.9. P.575-578.

141. Matteson M., Burr Т., Smith C., Corrad-greia M. Isolation, selection and screening of bacteria as potential biological control agents for Venturia in-aegualis.// Ibit. 1994. Vol8. 5. P.545.

142. McGuire K., Hagenmaler K. Storage waxes that support growth of Candida oleophila for biocontrol Penicillium digitatum on citrus. Abstr. APS Annu. Meet. Aug.-12-16. 1995.//Ibit. 1995. Vol.85. 10. P. 1166.

143. Misaghi I., Stowell L., Gogan R. Spearman L. Fungistatic activity of water-soluble fluorescent pigments of fluorescent Pseudomonas.// Phytopathology. 1982. Vol.72. l.P.33-36.

144. Muller K.O., Borger H. Experimentelle Untersuchundgen uber die Phy-tophthora Resistenz der Kartoffel. - Arb. Biol. Anst. Reichsanst. (Berl.), 1940,23, p. 189-231.

145. Nair M., Chandra A., Thorogood I)., Ammermann E., Walker N. Kiehs K. Gopalamicin, an antifungal macrodiolide produced by soil aetinomycetes.// Agricultural and food Chemistry. 994. Vol.42. 10. P.2308-2310.

146. Neilands J.B., Peterson Т., Leong J. High- affinity iron transport in microorganisms.//' Iron III coordination compounds of the siderophores agrobactin and parabactin. Symp. Ser. 1980,- 140,- P.263-278.

147. Neilands S., Valenta J. Iron-containing antibiotics.// Met. Jons. Biol. Svst-1985.19. P.313-333.125

148. Osman A.R., Fahim N.N. Add.-El- Kader M.M. Biological control of Lupine wilt.// Egypt. J. Phytopathol. 1986. Vol.18. 1. P. 11-25.

149. Palmerley R.A., Callow J.A. Common antigens in extracts of P. Inf. and potatoes.// Physiol plant pathol. 1978. Vol.12. 2. P.241-248.

150. Patil I.S., Srikant K., Hegde K.K. Antagonistic action of species of Tricho-derma, Bacillus and Streptomyces on Drechslera sorociniana (Sacc) Subram Pesticides. 1987. Vol.21. 21. P.22.

151. Priest F.G. Extracellular enzyme synthesis in the genus Bacillus, Bacteriol. Rev.,41, 1977, 711 -753.

152. Priest F.G. Product and applications.//' Bacillus N.Y.L. 1989. P.293-320.

153. Pusey P.L., Wilson C.L. Control of brown rot with a bacillus bacterium Phytopathology. 1983.-83. P.823.

154. Pusey P.L., Wilson C.L. Effect of bacterial antagonists fungal rots of de-siduons fruit. Phytopathology. 1982.-72,- P.710.

155. Pusey P.L., Wilson C.L., et al. Compatibility of B. Subtilis for Postharvest control of peach brown rot with Commercial Fruit Waxes. Dicloranand Cold-storage conditions. Plant Decease, 1986,- 70. 6. P.587-592.

156. Pusztai A.// Acta Biochem Bophys Humg. 1987. Vol.22. Ч. P.355-375.

157. Ren wick A., Powell K., De Bruyen E., Irearbe V. Biological control of soil-born plant pathogens.// Brighton crop. prot. cont./ Pests, and Diseases. 1990. P.227-231.

158. Ristow H. The peptide antibiotic gramicidin D. A specific reactivation of ty-rocidine inhibited transcription. Biochim. Biophys. 1977. Acta 477: 177-184.

159. Saito H. et al. Smegmatocin (mycobacteriocin) from Mycobacterium smeg-matis (ATCC 14468).//Bacteriology. 1983. Vol.153. P.1294-1300.

160. Schnurer S., Bjonberg A., Prothon F. The yeast Hansenula anomala inhibits the growth of grain storage moulds.// 5th Int. Symp. Microb. Ecol. (ISME) Sept. 6-11. 1992: Abstr.- Barseloma. 1992. P. 127.

161. Shoji, J., Resent chemical studies on peptide antibiotics from the genus Bacillus, Adv. Appl. Microbiol.24, 1978, 187-214.

162. Suslow T.V., Schroth M.N. Rhizobacteria of sugar buts: effect of seed application and root colonization on yield. Phytopathology, 1982-72,2-P, 199-206.

163. Svmons D.C., Hodgson B.J. Isolation and properties of Bacillus brevis mutants unable to produce tyrocidine, J. Bacteriol. 1983. 151: 580-590.

164. Tapio E., Pohto-lahdenpcra A. Interaction mellan antagonister och patho-gensa svampar.// Vaxtskuddsnotiser. 1989. Vol.53. 1-2. P.12-18.

165. Tasca G.H., Bogoescu M. Lucr sti. Inst, ceresi protect valorific si und le-gum. si. fruct, 1990-20,- P.53-64.

166. Tchebotar V.K., Popova T.A., Vassiuk L.F., Kozhemyakov A.P., Puchaev R.V., Okazova A.G, Nitrogen-fixing rhisobacteria. Fungistatic mode of action.// 10th Inter. Cong, on Ntrogen Fixation May 28-june 3., 1995,- Dordrescht. Boston. London. 1995. P.778.

167. Thomashow L., Weller D. Role of a phenozine antibiotic from Pseudomonas126fluorescens in biological control of Gacumannoniyces graminis var. tritici. S. Bacteriol. 1998. Vol.170. 8. P.3499-3508.

168. Tronsmo A., Dennis C. Effect of temperatine on antagonists properties of Tricoderma species. Trans. 6r. Mycol. Sac., 1978-3,- P.469-479.

169. Tronsmo A, Ystaas J. Biological control of Botrytis cinerea an apple. Plant. Dis. 1980. 6U. 1009.

170. Vanderberg P., Gonzales C., Wright A., Kunku B. Iron -Chelating compounds prodused by soil Pseudomonas: Correlation with fungal growth inhibition.//Appl. and Environ. Microbiol. 1983. Vol.46. 1. P. 128-132.

171. Wilkeman G. Iron complex product Siderophores. Biotechnology. 1897. -8,- P. 216-242.

172. Wilson C. Managing the microflora of harvested fruits and vegetables to enhance resestacs.// Ibit. 1984. Vol.79. 12. P. 1387-1393.

173. Wilson C.L., Franklin J.D., et al. Biological control of Rhizopus rot of peach with Enterobacter cloacue. Phytopathology. 1987-77., 2.- P.303-308.

174. Wit P.I.G.M.// Biology and molecular biology of plant- pathology interactions./ Ed,j.A. Baily. Berlin: Springer.-Verlay. 1986. P.149-170.1291. Утверждаю Главный агрономУссандров В.В.1. V " U/c-Ad 2000 г.1. ЗАО "МНПГГ^ФЛРХ".

175. ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии

176. Санкт-Петербургский государственный университет низкотемпературных и

177. Закладки на хранение моркови сорта Нандрин1. Санкт-Петербург21 сентября 1999г.1. Члены комиссии

178. Науч. сотр. ЗАО"МНПП"ФАРТ"

179. Гл. товаровед АСХО им. Тельмана

180. Вед. науч. сотр. ВНИИ с/х микробиологии

181. Мл. научн. сотр. ВНИИ с/х микробиологии

182. Вед. инженер-микробиолог ВНИИ с/х микробиологии

183. Ст. инженер-микробиолог ВНИИ с/х микробиологии

184. Д.т.н., профессор СПбГУНПТ1. Аспирант СПбГУНПТикМ —у А. В. Хотянович1. Н.В. Быкова1. О.В. Темнова1. Утверждаю

185. Главный аяроном АСХО ту. Тельманааю

186. Александров В.В. ccscy&i 2000 г.1. ЗАО"р по научно-практическойш1. ЫШев А. А.ot^y&p 2000 г.

187. АСХО им. Тельмана ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии Санкт-Петербургский государственный университет низкотемпературных ипищевых технологий АКТснятия с хранения моркови сорта Нандрин

188. Санкт-Петербург апрель 2000 г.

189. Науч. сотр. ЗАО"МНПП"ФАРТ" Гл. товаровед АСХО им. Тельмана

190. Вед. науч. сотр. ВНИИ с/х микробиологии

191. Мл. научн. сотр. ВНИИ с/х микробиологии

192. Вед. инженер-микробиолог ВНИИ с/х микробиологии

193. Ст. инженер-микробиолог ВНИИ с/х микробиологии

194. Д.т.н., профессор СПбГУНПТ1. Аспирант СПбГУНПТГ

195. В.А. Квитко Т А. Капустина

196. A.В. Хотяновйч Н.В. Быкова1. О.В. Темнова Н.А. Орлова

197. B.C. Колодязная Н.В.Самусенко1331. Согласовано Утверждаю

198. ЗАО "МНПП" ФАРТ" ЗАО "НАРТ"

199. Санкт-Петербургский государственный университет низкотемпературных ипищевых технологий1. АКТснятия с хранения моркови сорта Лосиноостровская-13 Санкт-Петербург апрель 2001 г

200. В. А. Квитко Г.Н. Викторова В.В. Рыбкина B.C. Колодязная Д.А. Щипицина Н.В. Самусенко

201. Науч. сотр. ЗАО "МНПП" ФАРТ" Гл. технолог ЗАО "НАРТ" Товаровед ЗАО "НАРТ" Д.т.н., профессор СПбГУНПТ Аспирант СПбГУНПТ ■ Аспирант СПбГУНПТ1. Члены комиссииа134